CN111529719A - 一种制备拉莫三嗪/羟丙基-β-环糊精包合物的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种制备拉莫三嗪/羟丙基‑β‑环糊精包合物的方法，包括：(1)配制拉莫三嗪‑载体混合溶液：称取拉莫三嗪原料药及水溶性载体溶于有机溶剂中，得到拉莫三嗪‑载体混合溶液；其中，有机溶剂为乙醇，水溶性载体为羟丙基‑β‑环糊精，原料药与载体摩尔比为1:1；(2)将CO2以一定流速通入结晶釜，调节结晶釜内温度和压力；(3)继续通入CO2，维持结晶釜内的温度和压力不变，同时将拉莫三嗪‑载体混合溶液从结晶釜顶部通过喷嘴喷入结晶釜内部；(4)进样完毕后，继续通入一定时间，卸压，打开结晶釜，收集产物。本发明用SAS法制备得到了絮状拉莫三嗪/羟丙基‑β‑环糊精包合物，拉莫三嗪溶出度显著提高。
Description
技术领域
本发明属于制药工程领域，具体涉及一种制备拉莫三嗪/羟丙基-β-环糊精包合物的方法。
背景技术
拉莫三嗪(Lamotrigine)一种新型抗惊厥药剂，可以抑制5-羟色胺(5-HT)吸收。拉莫三嗪具有独特的药理活性，主要用于部分性癫痫，特别对用其他单药或联合用药不能控制的难治性部分性癫痫，其作用安全有效。对失神发作，或非典型失神发作，肌阵挛性发作约有50％的病人得到控制。也适合作为辅助药物治疗顽固性癫痫中Lennox-Gastant综合征，以及继发性和特发性全身强直一阵挛性发作。由于拉莫三嗪属于BCS二类药，极不溶于水，导致其溶出速率慢，生物利用度降低，所具有的生物活性不能充分的发挥。因此改善溶出性能提高药物的溶出度，从而提高生物利用度具有一定意义。
羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)是目前一种常见的环糊精的醚化衍生物，其成无定形，极易溶于水，它的分子内有一个疏水腔，可对活性物质进行包埋，对难溶性物质具有很好的增溶效果，并且提高其稳定性，促进活性物质在体内释放，增加吸收，提高生物利用度。同时其安全性高、注射刺激性小、降低毒副作用、无溶血性或刺激性等诸多优点，成为了研究最多、应用范围最广泛的β-环糊精衍生物。目前通过羟丙基-β-环糊精制备药物包合物是提高难溶性药物的溶解度，从而提高生物利用度的有效方法之一。
超临界抗溶剂(Supercritical Anti-solvent，SAS)技术是指把溶质溶于有机溶液中形成溶液，选择一种超临界流体可以与溶剂很好的互溶，但不溶于溶质，超临界流体作为抗溶剂，当超临界流体与溶液相互接触时，流体扩散到溶液中，导致溶剂体积迅速膨胀，溶质在溶剂中的溶解度迅速下降，在较短时间内形成较高的过饱和度，促使溶质结晶析出粒径较小的超细微粒一种新型的微粒制备方法。近年来在制备超细颗粒及复合微粒方面已显示出巨大的应用潜力。相比传统工艺，它具有操作条件易于控制，制备所得的微粒粒径小且分布窄，复合微粒具有高度均匀性，生物活性不易失活，有机溶剂残留少，绿色环保等优点。
但是，拉莫三嗪(Lamotrigine)一种新型抗惊厥药剂，可以抑制5-羟色胺(5-HT)吸收。拉莫三嗪具有独特的药理活性，主要用于部分性癫痫，特别对用其他单药或联合用药不能控制的难治性部分性癫痫，其作用安全有效。对失神发作，或非典型失神发作，肌阵挛性发作约有50％的病人得到控制。也适合作为辅助药物治疗顽固性癫痫中Lennox-Gastant综合征，以及继发性和特发性全身强直一阵挛性发作。由于拉莫三嗪属于BCS二类药，极不溶于水，导致其溶出速率慢，生物利用度降低，所具有的生物活性不能充分的发挥。因此改善溶出性能提高药物的溶出度，从而提高生物利用度具有一定意义。
羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)是目前一种常见的环糊精的醚化衍生物，其成无定形，极易溶于水，它的分子内有一个疏水腔，可对活性物质进行包埋，对难溶性物质具有很好的增溶效果，并且提高其稳定性，促进活性物质在体内释放，增加吸收，提高生物利用度。同时其安全性高、注射刺激性小、降低毒副作用、无溶血性或刺激性等诸多优点，成为了研究最多、应用范围最广泛的β-环糊精衍生物。目前通过羟丙基-β-环糊精制备药物包合物是提高难溶性药物的溶解度，从而提高生物利用度的有效方法之一。
超临界抗溶剂(Supercritical Anti-solvent，SAS)技术是指把溶质溶于有机溶液中形成溶液，选择一种超临界流体可以与溶剂很好的互溶，但不溶于溶质，超临界流体作为抗溶剂，当超临界流体与溶液相互接触时，流体扩散到溶液中，导致溶剂体积迅速膨胀，溶质在溶剂中的溶解度迅速下降，在较短时间内形成较高的过饱和度，促使溶质结晶析出粒径较小的超细微粒一种新型的微粒制备方法。近年来在制备超细颗粒及复合微粒方面已显示出巨大的应用潜力。相比传统工艺，它具有操作条件易于控制，制备所得的微粒粒径小且分布窄，复合微粒具有高度均匀性，生物活性不易失活，有机溶剂残留少，绿色环保等优点。目前尚未见超临界抗溶剂法制备拉莫三嗪包合物的报道。
但是，超临界抗溶剂技术具有很大的局限性，只能将很少一部分化合物制成成型的粉末，并且哪些化合物适用于超临界法无规律可循。很多化合物，无论如何改变溶剂组成和/或反应参数，都只能得到黏糊糊状的固体或块状固体，无法得到溶解度更好的粉末或絮状物。
目前，尚未见超临界抗溶剂法制备拉莫三嗪包合物的报道。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种制备拉莫三嗪/羟丙基-β-环糊精包合物的方法，该方法基于超临界抗溶剂技术。
本发明上述目的通过如下技术方案实现：
一种超临界CO2抗溶剂法制备拉莫三嗪/羟丙基-β-环糊精包合物的方法，包括如下步骤：
(1)配制拉莫三嗪-载体混合溶液：称取拉莫三嗪原料药及固定配比的水溶性载体溶于有机溶剂中，得到拉莫三嗪-载体混合溶液；其中，所述有机溶剂为乙醇，所述水溶性载体为羟丙基-β-环糊精，所述原料药与载体的摩尔比为1:1；
(2)将CO2以一定流速通入结晶釜，调节结晶釜内温度和压力；
(3)继续通入CO2，维持结晶釜内的温度和压力不变，同时将步骤(1)制备的拉莫三嗪-载体混合溶液通过高压输液泵从结晶釜顶部通过喷嘴喷入结晶釜内部；
(4)进样完毕后，继续通入一定时间，卸压，打开结晶釜，收集产物。
优选地，步骤(1)中混合溶液浓度为3～7mg/mL。
优选地，步骤(2)中CO2流速为2.0-4.0L/min。
优选地，步骤(2)中结晶釜内温度为39～51℃。
优选地，步骤(2)中结晶釜内压力为9～17Mpa。
优选地，步骤(3)中溶液流速0.6～1.4mL/min。
优选地，步骤(4)中继续通入CO2120min。
有益效果：
本领域技术人员知道，超临界CO2抗溶剂技术具有很大的局限性，只能将很少一部分化合物制成成型的粉末，并且哪些化合物适用于超临界法无规律可循。很多化合物，无论如何改变溶剂组成和/或反应参数，都只能得到黏糊糊状的固体或块状固体，无法得到溶解度更好的粉末或絮状物。本发明通过超临界CO2抗溶剂法制备得到了拉莫三嗪包合物为肉眼可见的蓬松絮状固体，经FTIR、DSC及XRD检测，证明了拉莫三嗪被完全包合于羟丙基-β-环糊精中；体外溶出度检测表明，在前60min内，相较于拉莫三嗪原料药，工艺制得的拉莫三嗪/HP-β-CD包合物的溶出性能显著提高，在120min左右时，溶出度能够达到70％左右，而拉莫三嗪原料药不足20％，因此可以判断出拉莫三嗪原料药经过SAS技术而制得的包合物能够使其溶出度显著提高。另外，通过制备拉莫三嗪/HP-β-CD包合物也可以提高拉莫三嗪的稳定性。本发明可以克服传统技术普遍存在的有机溶剂残留问题，操作条件易于控制，生物成分不易失活，且过程绿色高效，具有较高的安全性。
附图说明
图1为实验设备结构示意图，其中：1-CO2储罐；2-低温恒温槽；3-CO2泵；4-CO2预热器；5-结晶釜；6-高压输液泵；7-溶液储罐；8-溶剂回收罐；9-流量计；
图2为CO2流速对拉莫三嗪/HP-β-CD包合物载药量和回收率的影响关系图；
图3为结晶温度对拉莫三嗪//HP-β-CD包合物载药量和回收率的影响关系图；
图4为结晶压力对拉莫三嗪//HP-β-CD包合物载药量和回收率的影响关系图；
图5为溶液体积流量对拉莫三嗪//HP-β-CD包合物载药量和回收率的影响关系图；
图6为溶液质量溶度对拉莫三嗪//HP-β-CD包合物载药量和回收率的影响关系图；
图7为拉莫三嗪原料药、HP-β-CD、固体混合物及本发明实例中最优组拉莫三嗪包合物的FTIR图谱。
图8为拉莫三嗪原料药、HP-β-CD、固体混合物及本发明实例中最优组拉莫三嗪包合物的DSC图谱。
图9为拉莫三嗪原料药、HP-β-CD、固体混合物及本发明实例中最优组拉莫三嗪包合物的XRD图谱。
图10为拉莫三嗪原料药、固体混合物及本发明实例中最优组拉莫三嗪包合物在磷酸缓冲液PBS(pH＝7.4)中的溶出度特性曲线。
具体实施方式
下面结合附图和实施例具体介绍本发明实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。
实施例1：单因素法考察各因素对拉莫三嗪/HP-β-CD包合物载药量和回收率的影响
一、实验材料与设备
拉莫三嗪(纯度>98％，萨恩化学技术(上海)有限公司)；HP-β-CD(纯度≥98％，上海源叶智源生物科技有限公司)；CO2(纯度>99％，南京上元工业气体厂)；乙醇(分析纯，上海泰坦科技股份有限公司)；蒸馏水(中国药科大学自制)；磷酸缓冲液PBS(pH＝7.4)(实验室配制)。
Helix超临界微粒制备系统(美国Applied Separations公司)；Helix Series1500型高压输液泵(美国Applied Separations公司)；TYW-2型空气压缩泵(苏州市同一机电有限公司)；SDC-6型低温恒温槽(南京新辰生物科技有限公司)；UV-1800型紫外可见分光光度计(日本岛津公司)；Thermo U-3000型液相色谱仪(美国赛默飞世尔科技公司)；DSC204F1型差示扫描量热仪(德国耐驰公司)；D8 Advance型X-射线粉末衍射仪(德国Bruker公司)；FT/IR-4100型傅里叶变换红外光谱仪(日本JASCO公司)；ZRS-8L型智能溶出实验仪(天津天大天发科技有限公司)。
二、实验方法和结果
超临界CO2抗溶剂技术制备拉莫三嗪包合物流程图参见图1，操作流程如下：
(1)首先对整个系统进行气密性检查，确保没有泄漏。打开低温恒温槽和结晶釜的加热装置，待温度达到设定值，打开CO2的进口阀，打开空气压缩泵对整个体系进行升压操作直至达到设定值。
(2)待结晶釜的压力和温度都稳定后，打开结晶釜底部的CO2出口阀门，同时通过微调阀门控制CO2的流速，使CO2的流量稳定流速排气。
(3)待系统稳定后将配置好的样品溶液通过高效液相泵从结晶釜顶部喷嘴以一定的流速喷入结晶釜内部，同时超临界CO2将有机溶剂带走并最终在溶剂回收釜回收。
(4)进样完毕后，继续通入CO2120min，除尽残留溶剂。最后关闭CO2进口阀及空气压缩泵，卸压，待结晶釜内的气体排空和压力降至一个大气压后，打开结晶釜，收集产物；
单因素实验：CO2流速对拉莫三嗪包合物回收率及形貌的影响
在结晶压力13MPa，结晶温度42℃，溶液质量浓度5mg/mL，拉莫三嗪原料药与HP-β-CD摩尔比为1:1，溶液体积流量为1.0mL/min的条件下，考察CO2流速分别为2.0、2.5、3.0、3.5、4.0L/min时，对拉莫三嗪包合物形貌及回收率的影响。当流速为2.0L/min时，产物呈蓬松絮状，但仍有部分粘性固体附于结晶釜底，回收率为86.20％；当流速为2.5、3.0和3.5L/min时，无粘性物质产生，蓬松絮状产物附着于釜壁与釜底，回收率分别为86.14％、93.91％、88.27％。当流速＞3.9L/mim时，产物少，收率较低，回收率为82.74％，最终综合比较并确定较优组CO2流速范围为2.5-3.5L/min，并选择2.5、3.0、3.5L/min,三个水平进行正交优化。
单因素实验：结晶温度对拉莫三嗪包合物载药量及回收率的影响
在结晶压力13MPa，溶液质量浓度5mg/mL，溶液体积流量为1.0mL/min，拉莫三嗪原料药与HP-β-CD摩尔比为1:1，CO2流速为3.0L/min的条件下，考察结晶温度分别为39、42、45、48、51℃时，对拉莫三嗪包合物载药量及回收率的影响。结果如图2所示，载药量分别为7.99％、9.74％、8.46％、8.77％、10.61％，回收率分别为85.17％、93.91％、91.81％、90.17％、83.36％。综合比较考虑，最终确定结晶温度优选范围为39-45℃，并选择39、42、45℃三个水平进行正交优化。
单因素实验：结晶压力对拉莫三嗪包合物载药量及回收率的影响
在结晶温度42℃，溶液质量浓度5mg/mL，溶液体积流量为1.0mL/min，拉莫三嗪原料药与HP-β-CD摩尔比为1:1，CO2流速为3.0L/min的条件下，考察结晶压力分别为9、11、13、15、17MPa时，对拉莫三嗪包合物载药量及回收率的影响。结果如图3所示，载药量分别为9.18％、11.88％、9.13％、10.69％、9.33％，回收率分别为64.65％、76.56％、82.59％、76.30％、74.86％。综合比较考虑，最终确定结晶压力优选范围为11-15MPa，并选择11、13、15MPa三个水平进行正交优化。
单因素实验：溶液体积流量对拉莫三嗪包合物载药量及回收率的影响
在结晶温度42℃，结晶压力为13MPa，溶液质量浓度5mg/mL，拉莫三嗪原料药与HP-β-CD摩尔比为1:1，CO2流速为3.0L/min的条件下，当溶液体积流量≤0.6mL/min时，由于进样流速过缓，导致进样管道和排气管道发生堵塞；考察结晶压力分别为0.6、0.8、1.0、1.2、1.4mL/min时，对拉莫三嗪包合物载药量及回收率的影响。结果如图4所示，载药量分别为12.66％、8.83％、9.74％、7.77％、9.33％，回收率分别为88.72％、81.16％、93.91％、88.39％、87.24％。综合比较考虑，最终确定溶液体积流量优选范围为0.6-1.2mL/min，并选择0.6、0.8、1.0mL/min三个水平进行正交优化。
单因素实验：溶液质量溶度对拉莫三嗪包合物载药量及回收率的影响
在结晶温度42℃，结晶压力为13MPa，溶液体积流量为1.0mL/min，拉莫三嗪原料药与HP-β-CD摩尔比为1:1，CO2流速为3.0L/min的条件下，考察溶液质量溶度分别为3、4、5、6、7mg/mL时，对拉莫三嗪包合物载药量及回收率的影响。结果如图5所示，载药量分别为6.41％、10.45％、9.74％、9.48％、7.73％，回收率分别91.20％、90.90％、93.91％、91.14％、91.21％。综合比较考虑，最终确定溶液质量溶度优选范围为5mg/mL。
实施例2：正交优化最佳试验因素参数
正交实验设计和结果
以回收率为指标，设计正交实验考察结晶压力(A)、结晶温度(B)、溶液体积流量(C)、CO2流速(D)，表1为因素水平设计表，表2为正交实验设计与结果。
表1因素水平表
表2正交设计与结果
正交实验结果分析
由表2分析可知，各因素对拉莫三嗪//HP-β-CD包合物回收率影响从大到小依次为C＞B＞D＞A，即溶液体积流量＞结晶温度＞CO2流速＞结晶压力。因此最优工艺组合为A2B3C1D3,即结晶温度45℃、结晶压力为13MPa、溶液体积流量0.6mL·min-1、CO2流速3.5L/min。
实施例3：应用超临界抗溶剂法制备最优因素拉莫三嗪/HP-β-CD包合物
应用超临界抗溶剂法制备拉莫三嗪包合物的方法，包括如下步骤：
步骤S1，将拉莫三嗪原料药和水溶性载体溶解于有机溶剂中，得到拉莫三嗪-载体混合溶液；
步骤S2，将CO2通入结晶釜中，调节结晶釜内的温度和压力；
步骤S3，继续通入CO2，维持结晶釜内的温度和压力不变，同时将步骤S1制备的拉莫三嗪-载体混合溶液通入结晶釜中；
步骤S4，待混合溶液通入完毕后，持续通入CO2120min，待排尽残留溶剂后卸压；当结晶釜内压力降至一个大气压后，打开结晶釜收集拉莫三嗪包合物；
其中，水溶性载体为HP-β-CD，有机溶剂为无水乙醇。混合溶液质量浓度为5mg/mL，拉莫三嗪与HP-β-CD的摩尔比为1:1；结晶釜内温度为45℃，压力为13MPa；溶液的体积流量为0.6mL/min；CO2流速为3.5L/min。
所得拉莫三嗪/HP-β-CD包合物的表征分析：
IR分析
拉莫三嗪/HP-β-CD包合物的IR分析如图7所示，相比拉莫三嗪原料药的红外吸收谱图，拉莫三嗪/HP-β-CD包合物的红外吸收峰中拉莫三嗪的特征吸收峰呈现了减弱或是消失，证明了拉莫三嗪被包合于HP-β-CD中。
DSC分析
拉莫三嗪/HP-β-CD包合物的DSC分析如图7所示，拉莫三嗪/HP-β-CD包合物的DSC峰与HP-β-CD基本类似，而拉莫三嗪的特征吸热峰完全消失了，这说明了拉莫三嗪/HP-β-CD包合物是以无定形态存在的，也验证了拉莫三嗪被成功包合于HP-β-CD中。
XRD分析
拉莫三嗪/HP-β-CD包合物的XRD分析如图8所示，相比拉莫三嗪原料药，拉莫三嗪/HP-β-CD包合物几乎没有特征峰的存在，说明了拉莫三嗪/HP-β-CD包合物是以无定形态存在的，也说明拉莫三嗪被包合于HP-β-CD中。
体外溶出度实验
分别量取适量素拉莫三嗪原料药、拉莫三嗪/HP-β-CD固体混合物和最优工艺下的拉莫三嗪/HP-β-CD包合物，应用转篮法于温度(37±0.5℃)、转速50r/min下测定其在900mL磷酸缓冲液PBS(pH＝7.4)中，测定120min内溶出度，比较其溶出性能，结果如图9所示，分析可知拉莫三嗪在30min时为8.63％，120min后也不足15％；但拉莫三嗪/HP-β-CD包合物的溶出度30min时就可达59.15％，120min后达到70％，通过对比综合证明通过工艺制得后的药物溶出性能得到了明显的改善。
结果讨论：
(1)实验证明通过超临界抗溶剂技术能够成功制备拉莫三嗪/HP-β-CD包合物，并通过分析IR、DSC、XRD图谱，证明拉莫三嗪被成功包合在HP-β-CD中；
(2)体外溶出结果表明，相对于拉莫三嗪原料药和固体混合物，拉莫三嗪/HP-β-CD包合物的溶出性能有了明显的提高。具体来说，拉莫三嗪/HP-β-CD包合物在60min时累积溶出度达到60％以上，而拉莫三嗪原料药不足30％。120min后溶出性能虽都有略微提升，但相比拉莫三嗪原料药和拉莫三嗪/HP-β-CD包合物累积溶出度来看，基本维持一定差距。因此综合比较得知，拉莫三嗪/HP-β-CD包合物溶出性能得到了很大的提高。
上述实施例的作用在于具体介绍本发明的实质性内容，但本领域技术人员应当知道，不应将本发明的保护范围局限于该具体实施例。
Claims (7)
1.一种超临界CO2抗溶剂法制备拉莫三嗪/羟丙基-β-环糊精包合物的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)配制拉莫三嗪-载体混合溶液：称取拉莫三嗪原料药及固定配比的水溶性载体溶于有机溶剂中，得到拉莫三嗪-载体混合溶液；其中，所述有机溶剂为乙醇，所述水溶性载体为羟丙基-β-环糊精，所述原料药与载体的摩尔比为1:1；
(2)将CO2以一定流速通入结晶釜，调节结晶釜内温度和压力；
(3)继续通入CO2，维持结晶釜内的温度和压力不变，同时将步骤(1)制备的拉莫三嗪-载体混合溶液通过高压输液泵从结晶釜顶部通过喷嘴喷入结晶釜内部；
(4)进样完毕后，继续通入一定时间，卸压，打开结晶釜，收集产物。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)中混合溶液浓度为3～7mg/mL。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中CO2流速为2.0-4.0L/min。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中结晶釜内温度为39～51℃。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中结晶釜内压力为9～17Mpa。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(3)中溶液流速0.6～1.4mL/min。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(4)中继续通入CO2120min。
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Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2009018326A2 (en) * | 2007-07-31 | 2009-02-05 | Limerick Biopharma, Inc. | Soluble pyrone analogs methods and compositions |
| CN104873461A (zh) * | 2015-06-24 | 2015-09-02 | 万特制药(海南)有限公司 | 一种拉莫三嗪口服溶液的制备方法 |
| CN105343893A (zh) * | 2015-12-11 | 2016-02-24 | 中国药科大学 | 对乙酰氨基酚-2-羟丙基-β-环糊精包合物制备方法 |
| CN106265596A (zh) * | 2016-10-12 | 2017-01-04 | 中国药科大学 | 超临界抗溶剂法制备柚皮素/羟丙基‑β‑环糊精微胶囊的方法 |
| CN109701032A (zh) * | 2019-03-11 | 2019-05-03 | 中国药科大学 | 一种超临界CO2抗溶剂技术制备杨梅素/HP-β-CD包合物超细颗粒的方法 |
| CN109821027A (zh) * | 2019-04-17 | 2019-05-31 | 中国药科大学 | 一种制备橙皮素/HP-β-CD包合物的方法 |
-
2020
- 2020-06-26 CN CN202010593259.7A patent/CN111529719A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2009018326A2 (en) * | 2007-07-31 | 2009-02-05 | Limerick Biopharma, Inc. | Soluble pyrone analogs methods and compositions |
| CN104873461A (zh) * | 2015-06-24 | 2015-09-02 | 万特制药(海南)有限公司 | 一种拉莫三嗪口服溶液的制备方法 |
| CN105343893A (zh) * | 2015-12-11 | 2016-02-24 | 中国药科大学 | 对乙酰氨基酚-2-羟丙基-β-环糊精包合物制备方法 |
| CN106265596A (zh) * | 2016-10-12 | 2017-01-04 | 中国药科大学 | 超临界抗溶剂法制备柚皮素/羟丙基‑β‑环糊精微胶囊的方法 |
| CN109701032A (zh) * | 2019-03-11 | 2019-05-03 | 中国药科大学 | 一种超临界CO2抗溶剂技术制备杨梅素/HP-β-CD包合物超细颗粒的方法 |
| CN109821027A (zh) * | 2019-04-17 | 2019-05-31 | 中国药科大学 | 一种制备橙皮素/HP-β-CD包合物的方法 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| KOMAL R. PARMAR ET AL: "Inclusion complexes of lamotrigine and hydroxy propyl-β-cyclodextrin: solid state characterization and dissolution studies", 《J INCL PHENOM MACROCYCL CHEM》 * |
| RAED GHANEM ET AL: "Effect of pH and β -cyclodextrin on the photophysical properties of lamotrigine", 《TURKISH JOURNAL OF CHEMISTRY》 * |
| 乐龙，等: "超临界抗溶剂法制备吲哚美辛/羟丙基-β-环糊精微球", 《化工时刊》 * |
| 孙剑飞，等: "超临界CO2沉淀技术制备甲苯磺酸妥舒沙星/羟丙基-β-环糊精包合物及其溶出性能研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技Ⅰ辑》 * |
| 蔡锦源，等: "超临界抗溶剂技术在药物微粒制备领域中的应用", 《今日药学》 * |
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