CN111518720B - 一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845及其应用 - Google Patents

一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN111518720B
CN111518720B CN202010361948.5A CN202010361948A CN111518720B CN 111518720 B CN111518720 B CN 111518720B CN 202010361948 A CN202010361948 A CN 202010361948A CN 111518720 B CN111518720 B CN 111518720B
Authority
CN
China
Prior art keywords
metabolic syndrome
product
bacillus coagulans
bacillus
patients
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202010361948.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111518720A (zh
Inventor
赵子健
李盛钰
王超
杨舸
高磊
赵玉娟
段翠翠
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jilin Academy of Agricultural Sciences
Original Assignee
Jilin Academy of Agricultural Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jilin Academy of Agricultural Sciences filed Critical Jilin Academy of Agricultural Sciences
Priority to CN202010361948.5A priority Critical patent/CN111518720B/zh
Publication of CN111518720A publication Critical patent/CN111518720A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111518720B publication Critical patent/CN111518720B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/07—Bacillus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/742—Spore-forming bacteria, e.g. Bacillus coagulans, Bacillus subtilis, clostridium or Lactobacillus sporogenes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A61P5/50—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones for increasing or potentiating the activity of insulin

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845及其应用，涉及食品微生物领域，该菌株已于2020年4月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.19576。该菌株能够应用在制备预防和/或治疗代谢综合征产品中。该凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845对代谢综合征大鼠的体质量有一定的调控作用；具有良好的降脂作用；降低代谢综合症患者血浆中的血脂含量；缓解代谢综合症患者肝损伤；改善机体的胰岛素抵抗；提高代谢综合症患者肠道菌群多样性；降低脂质代谢蛋白SREBP、FAS的含量；从而对代谢综合征具有良好的预防和治疗作用。

Description

一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845及其应用
技术领域
本发明涉及食品微生物技术领域，具体涉及一株凝结芽孢杆菌(Bacilluscoagulans)JA845及其应用。
背景技术
代谢综合征是造成冠心病、糖尿病、痛风和心血管疾病等一系列代谢异常疾病的主要因素。代谢综合征的表现为甘油三酯升高、高密度脂蛋白胆固醇降低、血压异常或血糖异常。高血脂症、高血糖、胰岛素抵抗及肠道菌群紊乱是代谢综合征发展的主要因素。随着超重与肥胖人群的不断增加，代谢综合征的患病率也在不断上升，并呈现年轻化。代谢综合征已经成为一个新的慢性疾病和严重的公共卫生问题。因此开发安全、有效的缓解代谢综合征的新产品具有十分重要的现实意义。
益生菌是一类对宿主机体有益的活的微生物，摄入一定剂量后可改善及预防疾病。研究发现益生菌和合生元可改善成年人糖尿病前期的代谢综合征。摄入益生菌及益生菌产品能够预防或治疗代谢综合征。益生菌具有潜在的调控与代谢综合征相关的关键危险因素的功能。益生菌作为具有前瞻性的天然生物治疗剂，在防治代谢综合征方面将具有广阔的开发前景。
发明内容
本发明的目的是提供一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845及其应用。
本发明为解决技术问题所采用的的技术方案如下：
本发明的一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845，该菌株已于2020年4月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNo.19576。
本发明的一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845在制备预防和/或治疗代谢综合征产品中的应用。
作为优选的实施方式，所述产品的功能包括(a1)至(a5)中的至少一项：
(a1)降低代谢综合症患者血浆中的血脂含量；
(a2)缓解代谢综合症患者肝损伤；
(a3)改善机体的胰岛素抵抗；
(a4)提高代谢综合症患者肠道菌群多样性；
(a5)降低脂质代谢蛋白SREBP、FAS的含量。
作为优选的实施方式，所述产品为食品、保健品或药品。
作为更优选的实施方式，所述食品为功能性食品、发酵果蔬、发酵乳制品、发酵豆制品、乳酪、含乳饮料或乳粉。
作为更优选的实施方式，所述药品为胶囊、粉剂、片剂、赋形剂或稀释剂。
作为更优选的实施方式，所述粉剂采用冷冻干燥工艺制备。
本发明还提供一种以一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845作为活性成份的产品。
作为优选的实施方式，该产品为预防和/或治疗代谢综合征产品。
作为优选的实施方式，该产品的功能包括(a1)至(a5)中的至少一项：
(a1)降低代谢综合症患者血浆中的血脂含量；
(a2)缓解代谢综合症患者肝损伤；
(a3)改善机体的胰岛素抵抗；
(a4)提高代谢综合症患者肠道菌群多样性；
(a5)降低脂质代谢蛋白SREBP、FAS的含量。
本发明的有益效果是：
本发明的一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845，该菌株已于2020年4月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNo.19576。本发明的一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845对代谢综合征大鼠的体质量有一定的调控作用；具有良好的降脂作用；降低代谢综合症患者血浆中的血脂含量；缓解代谢综合症患者肝损伤；改善机体的胰岛素抵抗；
提高代谢综合症患者肠道菌群多样性；降低脂质代谢蛋白SREBP、FAS的含量；从而对代谢综合征具有良好的预防和治疗作用。因此，本发明的一株凝结芽孢杆菌(Bacilluscoagulans)JA845具有广阔的应用价值。
附图说明
图1为实施例2中凝结芽孢杆菌JA845对大鼠胰岛素和胰岛素抵抗的影响。图1A为血清中胰岛素的含量；图2B为胰岛素抵抗指数。
图2为实施例2中凝结芽孢杆菌JA845对肝功能的影响。图2A为血清中ALT的含量；图2B为血清中AST的含量。
图3为实施例2中各试验组肝脏切片(油红O染色，×100)。
图4为实施例2中凝结芽孢杆菌JA845对代谢综合征大鼠脂质通路的影响。图4A为AMPK、SREBP、FAS和β-actin蛋白条带；图4B为AMPK相对表达含量；图4C为SREBP相对表达含量；图4D为FAS相对表达含量。
具体实施方式
本发明的一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845，已于2020年4月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号(中国科学院微生物研究所)，保藏编号为：CGMCC No.19576。
本发明的一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845在制备预防代谢综合征产品中的应用。
本发明的一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845在制备预防和治疗代谢综合征产品中的应用。
本发明的一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845在制备治疗代谢综合征产品中的应用。
优选的，所说的产品的功能包括(a1)至(a5)中的至少一项：
(a1)降低代谢综合症患者血浆中的血脂含量；
(a2)缓解代谢综合症患者肝损伤；
(a3)改善机体的胰岛素抵抗；
(a4)提高代谢综合症患者肠道菌群多样性；
(a5)降低脂质代谢蛋白SREBP、FAS的含量。
优选的，所说的产品为食品、保健品或药品等，但不限于此。
更优选的，所说的食品为发酵果蔬、发酵乳制品、发酵豆制品、乳酪、含乳饮料或乳粉等，但不限于此。
更优选的，所说的食品为功能性食品，例如功能性酸奶、功能性菌剂等。
更优选的，所说的药品为胶囊、粉剂、片剂、赋形剂或稀释剂等，但不限于此。
更优选的，所说的粉剂采用冷冻干燥工艺制备。
本发明提供一种以一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845作为活性成份的预防代谢综合征产品。
本发明提供一种以一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845作为活性成份的预防和治疗代谢综合征产品。
本发明提供一种以一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845作为活性成份的治疗代谢综合征产品。
优选的，所说的产品的功能包括(a1)至(a5)中的至少一项：
(a1)降低代谢综合症患者血浆中的血脂含量；
(a2)缓解代谢综合症患者肝损伤；
(a3)改善机体的胰岛素抵抗；
(a4)提高代谢综合症患者肠道菌群多样性；
(a5)降低脂质代谢蛋白SREBP、FAS的含量。
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。
固体LB培养基：溶剂为水，胰蛋白胨10g/L、酵母浸粉5g/L、氯化钠10g/L、琼脂15g/L；如无特殊说明，pH＝7.0。液体LB培养基与固体LB培养基的区别仅在于液体LB培养基中不加入琼脂。
SPF级健康雄性SD大鼠，购于长春市亿斯实验动物技术有限公司，生产许可证号：SCXK(吉)-2011-0004。进行为期一周的适应性喂养，动物房温度为21±2℃，相对湿度为(40±10)％，采食和饮水自由进行。
基础饲料：长春市亿斯实验动物技术有限责任公司。
高脂饲料(％代表g/100g)：基础饲料75％，猪油10％，蛋黄粉10％，胆固醇(食品级，郑州苍宇化工产品有限公司)5％。
大鼠总胆固醇(TC)试剂盒：南京建成生物工程研究所。
大鼠甘油三酯(TG)试剂盒：南京建成生物工程研究所。
大鼠高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)酶联免疫试剂盒：上海江莱生物科技有限公司。
大鼠低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)酶联免疫试剂盒：上海江莱生物科技有限公司。
大鼠胰岛素(INS)酶联免疫试剂盒：上海江莱生物科技有限公司。
大鼠游离脂肪酸(FFA)酶联免疫试剂盒：上海江莱生物科技有限公司。
大鼠天冬氨酸转氨酶(AST)酶联免疫试剂盒：上海江莱生物科技有限公司
大鼠丙氨酸氨基转移酶(ALT)酶联免疫试剂盒：上海江莱生物科技有限公司。
单克隆抗体(AMPK、SREBP、FAS、β-actin)，英国AJAam公司。
RIPA蛋白提取试剂盒：北京鼎国昌盛生物技术有限公司。
BCA蛋白定量试剂盒：北京鼎国昌盛生物技术有限公司。
山羊抗兔二抗：北京中杉金桥生物技术有限公司。
实施例1、凝结芽孢杆菌菌株的分离、鉴定和保藏
一、凝结芽孢杆菌菌株的分离
样本取材：传统发酵食品酸菜。
2018年10月，从吉林省通化市收集新鲜腌制的酸菜样品放入运输培养基中，迅速置于冰盒内送至实验室进行菌株分离。将酸菜样品80℃水浴处理10分钟，然后进行研磨、梯度稀释后均匀涂于LB固体培养基平板上，50℃培养48h，挑取单菌落接种于LB培养基平板上继续培养，经LB培养基平板反复划线培养纯化，得到多株纯菌落。纯培养的菌种接种到液体LB培养基培养，然后加入60％甘油，-80冰箱保存。将其中1株菌株命名为JA845。
二、菌株的鉴定
JA845的生理生化鉴定结果：革兰氏染色阳性，过氧化氢酶试验阴性，联苯胺试验阴性，吲哚试验阴性，乙酰甲基甲醇试验阳性；不水解淀粉，不液化明胶，不产生硫化氢，发酵葡萄糖产酸不产气；不运动的杆菌；在15℃和65℃能够生长，最适生长温度45～50℃；适宜pH为5.0～7.0；耐受6.5％NaCl；JA845在LB液体培养基中呈均匀浑浊生长，久置菌体呈白色沉淀。
JA845的API 50CH(法国梅里埃公司)鉴定结果：能利用核糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、木糖、甘露糖、甘露醇、山梨醇、苦杏仁苷、熊果苷、N-乙酰-葡萄糖胺、七叶醇、柳醇、纤维二糖、菊糖、乳糖、蜜二糖、蔗糖、海藻糖、山梨糖、松三糖、棉籽糖、牻牛儿糖、葡萄糖酸盐；不能利用阿东醇、阿拉伯糖、糖原、卫矛醇、麦芽糖、肌醇、α-甲基-D-葡萄糖苷、α-甲基-D-甘露糖苷、淀粉、鼠李糖、木糖醇、D-松二糖、D-塔格糖、D-米苏糖、葡萄糖酸盐、D-阿拉伯糖醇、岩糖、L-阿拉伯糖醇、2-酮基-葡萄糖酸盐、5-酮基-葡萄糖酸盐。
16S rDNA序列同源性分析：提取基因组DNA，采用16sF和16sR组成的引物对(16sF：5＇-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3＇；16sR：5＇-AGAAAGGAGGTGATCCAGC-3＇)进行PCR扩增，然后将扩增产物进行测序，16s rDNA序列如序列表的序列1所示。将16s rDNA序列通过BLAST程序在GenBank库中进行同源性比对分析，与Bacillus coagulans strain IGM6-3(GenBank:MT197273.1)同源性达到99％。
根据以上鉴定结果，菌株JA845被鉴定为凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)。
三、菌株的保藏
本发明的一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845，已于2020年4月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号(中国科学院微生物研究所)，保藏编号为：CGMCC No.19576。
实施例2、凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845对肝脏中脂质代谢以及肝损伤的影响
一、菌悬液的制备
将凝结芽孢杆菌JA845接种于液体LB培养基，50℃摇床180rpm培养10h，3000r/min，4℃离心10min，弃上清，得到菌体沉淀，菌泥用无菌生理盐水配置成菌悬液，根据其OD600吸光度及平板计数结果，调整菌数为2×1010CFU/mL的菌悬液。
二、分组处理
实验动物为SPF级健康雄性SD大鼠30只，进行为期一周的适应性喂养，采食和饮水由小鼠自由进行。然后进行随机分组，分为3组，每组10只，处理如下：
空白组：第2-14周给予基础饲料，自由摄食饮水。第9-14周每天灌胃一次生理盐水(单次单只的给予量为0.2mL)，末次实验结束后测定空腹血糖值(FBG)，随后处死实验动物。
模型组：第2-14周给予高脂饲料，10％果糖自由饮水，体重增加量超过正常空白组均值20％，血清TC、TG、LDL-C显著升高而HDL-C显著下降为造模成功。第9-14周每天灌胃一次生理盐水(单次单只的给予量为0.2mL)，末次实验结束后测定空腹血糖值，随后处死实验动物。
JA845组：第2-14周给予高脂饲料，10％果糖自由饮水，体重增加量超过正常空白组均值20％，血清TC、TG、LDL-C显著升高而HDL-C显著下降为造模成功。第9-14周每天灌胃一次步骤一所得的凝结芽孢杆菌JA845菌悬液，末次干预治疗结束后测定空腹血糖值(FBG)，随后处死实验动物。
三、代谢综合征判断标准
造模结束后，禁食12h，检测体质量和尾静脉取血测空腹血糖、血脂水平(TC、TG、LDL-C、HDL-C)和胰岛素。大鼠体质量高于空白组大鼠的20％；或血清中血脂水平改变，即TC、TG、LDL-C水平显著升高而HDL-C水平显著降低；或胰岛素敏感指数升高；这3项指标中满足任意2项即为代谢综合征模型造模成功的大鼠。
四、代谢综合征大鼠相关生理生化指标检测
1、大鼠体质量检测
大鼠起始体重约为220～240g之间，并无显著性差异。在给大鼠进行高脂高糖饲喂6周后，大鼠体重出现了显著变化，其中模型组体重增加约332～437g，差异极显著(P<0.01)，见表1。而空白组增加约225～294g，JA845组增加约248～272g，并且这两组体重改变没有显著性差异，与模型组相比有极显著性差异(P<0.01)。JA845组大鼠体质量平均正增重范围介于模型组和空白组之间，这说明凝结芽孢杆菌JA845对代谢综合征大鼠的体质量有一定的调控作用。
表1各组大鼠体重和体重变化
空白组 模型组 JA845组
起始体重(g) 228.33±7.54 232.71±4.88 230.16±5.71
最终体重(g) 466.81±5.69** 610.9±6.42## 489.85±4.38**
体重增加量(g) 238.48±10.93** 378.19±14.21## 259.69±11.97**
组间比较：##与空白组比较，差异极显著(P<0.01)；**与模型组比较，差异极显著(P<0.01)。
2、血清指标检测
经凝结芽孢杆菌JA845干预6周后，大鼠注射麻醉戊巴比妥钠，心脏取血后37℃温育60min，3000r/min离心15min，收集上清分装于EP管置-80℃冰箱保存。参照试剂盒说明书测定血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C、FFA、ALT、AST、INS含量。
干预6周后，评估大鼠的脂质代谢值(TC、TG、LDL-C、HDL-C和FFA)，见表2。模型组的TC、TG、LDL-C和FFA显著高于空白组(P<0.05)，而HDL显著降低(P<0.05)。经凝结芽孢杆菌JA845干预后，FFA显著降低(P<0.05)，TC、TG和LDL-C极显著降低(P<0.01)，HDL-C显著增加(P<0.05)。这证实了凝结芽孢杆菌JA845具有良好的降脂作用。
表2各组大鼠脂质代谢值比较
Figure BDA0002475394960000081
Figure BDA0002475394960000091
组间比较：##与空白组比较，差异极显著(P<0.01)；*与模型组比较，差异显著(P<0.05)，**与模型组比较，差异极显著(P<0.01)。
3、大鼠胰岛素抵抗评估
如图1所示，从胰岛素抵抗指数计算结果可以看出，与空白组相比，模型组大鼠INS水平极显著增加(P<0.01)(##与空白组比较，差异极显著(P<0.01)；**与模型组比较，差异极显著(P<0.01))，高糖和高脂饮食会导致大鼠INS稳态失衡；与模型组相比，使用凝结芽孢杆菌JA845干预后大鼠胰岛素抵抗指数下降，差异极显著(P<0.01)。
4、对肝损伤的保护作用
如图2所示，肝功能指标(AST和ALT)研究结果表明，模型组血清AST和ALT含量与空白组相比较均有升高，差异极显著(P<0.01)；而凝结芽孢杆菌JA845干预后，血清AST和ALT含量皆有显著下降(P<0.05)；说明在肝功能方面，凝结芽孢杆菌JA845有一定改善效果。
油红O染色可特异性的将组织内甘油三酯等中性脂肪着色成红色。如图3所示，通过对各组大鼠肝脏组织的油红O染色病理观察发现，空白组大鼠肝细胞、肝小叶结构清晰、完整、无脂质浸润；而模型组大鼠肝脏脂质浸润现象严重，中性脂肪分布密集；凝结芽孢杆菌JA845组相对于模型组，一定程度上减少了脂质和浸润的现象，并且中性脂肪分布密度明显降低。
5、对代谢综合征大鼠脂质代谢通路的影响
AMPK通过激活多个下游底物来调节脂肪酸氧化和抑制游离脂肪酸生成。FAS的表达可以增加肝细胞中的脂肪酸合成进而造成肝脏中脂肪酸积累。代谢综合征模型大鼠AMPK信号通路相关蛋白的表达如图4所示(##与空白组比较，差异极显著(P<0.0)；**与模型组比较，差异极显著(P<0.01))。由此证明，在代谢综合征模型组中，高脂高糖极显著降低AMPK表达(P<0.01)；经凝结芽孢杆菌JA845干预治疗6周后增强了AMPK表达，差异极显著(P<0.01)；凝结芽孢杆菌JA845能增加AMPK表达，抑制游离脂肪酸的生成，从而改善高脂高糖诱导的代谢综合征。
SREBP-1能上调ACC、FAS等脂生成基因的表达。AMPK可以抑制SREBP-1的表达，降低脂质形成。
结果表明：JA845组的TC和FFA的减少可能是由于SREBP-1和FAS表达水平降低所致，差异极显著(P<0.01)。因此，本发明的研究结果表明，凝结芽孢杆菌JA845可以通过调控AMPK信号通路抑制SREBP-1/FAS信号传导来达到减少肝脏中脂肪酸的合成。
6、对代谢综合征大鼠肠道菌群的调节作用
Observed species指数和Chao 1指数反映样品中群落的丰富度，指数越大，物种越丰富；Simpson指数和Shannon指数反映群落的多样性，Shannon指数越大，Simpson指数越小，群落多样性越大。由表3可以看出，模型组大鼠Chao 1指数和Observed species指数均低于空白组，差异极显著(P<0.01)；而JA845组Chao 1指数、Simpson指数、Shannon指数、Observed species指数均高于模型组，且差异显著(P<0.05)，说明通过灌胃凝结芽孢杆菌JA845后大鼠肠道菌群的丰富度明显增加。对比Simpson指数和Shannon指数，JA845组Simpson指数和Shannon指数高于模型组，差异显著(P<0.05)，说明JA845组大鼠肠道群落多样性增大。
表3各组大鼠肠道菌群的丰度和多样性比较
组别 Chao1 Simpson Shannon Observespecies
空白组 4303.34±573.30 0.92±0.07 7.26±1.09 3635.90±584.24
模型组 2313.31±1823.75## 0.90±0.05# 6.03±1.26# 1999.80±1561.85##
JA845组 3699.30±1751.47* 0.93±0.08* 7.26±2.28* 3326.24±1595.65*
组间比较：#与空白组比较，差异显著(P<0.05)，##与空白组比较，差异极显著(P<0.01)；*与模型组比较，差异显著(P<0.05)。
对各组大鼠肠道菌群属水平进行了分析，分析结果见表4。给予凝结芽孢菌JA845干预后，试验大鼠肠道菌群中的微生物丰度发生变化。模型组中，脱硫弧菌属(Desulfovibrio)、阿利斯泰菌属(Alistipes)、奥氏杆菌属(Oscillibacter)等有害微生物丰度增加；与模型组相比，JA845组中，乳杆菌属(Lactobacillus)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)等有益微生物丰度增加，表明通过灌胃凝结芽孢杆菌JA845，促进了肠道有益菌的生长，抑制了有害菌的生长，起到了调节肠道菌群平衡的功效。
表4各组大鼠肠道菌群属水平的物种相对丰度
组别 空白组(％) 模型组(％) JA845组(％)
异杆菌属(Allobaculum) 25.14 0.844 19.486
乳杆菌属(Lactobacillus) 4.242 2.476 3.898
双歧杆菌属(Bifidobacterium) 1.222 0.016 4.454
脱硫弧菌属(Desulfovibrio) 2.01 7.28 2.406
螺杆菌属(Helicobacter) 2.3 0.698 1.286
阿利斯泰菌属(Alistipes) 0.466 2.644 0.71
副杆菌属(Parasutterella) 0.806 0.4 1.002
奥氏杆菌属(Oscillibacter) 0.648 0.758 0.244
普雷沃氏菌属(Prevotella) 0.546 0.6 0.084
本发明公开了一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845及其应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的产品已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的产品进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
序列表
<110> 吉林省农业科学院
<120> 一株凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）JA845及其应用
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1017
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificaial Sequence)
<400> 1
ggacctaata catgcagtcg tgcggacctt ttaaagcttg cttttaaaag gttagcggcg 60
gacgggtgag taacacgtgg gcaacctgcc tgtaagatcg ggataacgcc gggaaaccgg 120
ggctaatacc ggatagtttt ttcctccgca tggaggaaaa aggaaagacg gcttttgctg 180
tcacttacag atgggcccgc ggcgcattag ctagttggtg gggtaacggc tcaccaaggc 240
aacgatgcgt agccgacctg agagggtgat cggccacatt gggactgaga cacggcccaa 300
actcctacgg gaggcagcag tagggaatct tccgcaatgg acgaaagtct gacggagcaa 360
cgccgcgtga gtgaagaagg ccttcgggtc gtaaaactct gttgccgggg aagaacaagt 420
gccgttcgaa cagggcggcg ccttgacggt acccggccag aaagccacgg ctaactacgt 480
gccagcagcc gcggtaatac gtaggtggca agcgttgtcc ggaattattg ggcgtaaagc 540
gcgcgcaggc ggcttcttaa gtctgatgtg aaatcttgcg gctcaaccgc aagcggtcat 600
tggaaactgg gaggcttgag tgcagaagag gagagtggaa ttccacgtgt agcggtgaaa 660
tgcgtagaga tgtggaggaa caccagtggc gaaggcggct ctctggtctg taactgacgc 720
tgaggcgcga aagcgtgggg agcaaacagg attagatacc ctggtagtcc acgccgtaaa 780
cgatgagtgc taagtgttag agggtttccg ccctttagtg ctgcagctaa cgcattaagc 840
actccgcctg gggagtacgg ccgcaaggct gaaactcaag gaattgacgg gggcccgcac 900
aagcggtgga agcatgtgtt ttaattcgaa gcaacgcgaa gaaccttacc aggtcttgac 960
atcctctgac ctccctggag acagggcctt ccccttcggg ggaaagaggt ggacaag 1017

Claims (9)

1.一株凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）JA845，其特征在于，该菌株已于2020年4月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNo.19576。
2.如权利要求1所述的一株凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）JA845在制备预防和/或治疗代谢综合症产品中的应用；所述产品的功能为（a1）至（a5）中的至少一项：
（a1）降低代谢综合症患者血浆中的血脂含量；
（a2）缓解代谢综合症患者肝损伤；
（a3）改善机体的胰岛素抵抗；
（a4）提高代谢综合症患者肠道菌群多样性；
（a5）降低脂质代谢蛋白SREBP、FAS的含量。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述产品为食品、保健品或药品。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述食品为发酵果蔬、发酵乳制品或发酵豆制品。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述发酵乳制品为乳酪、含乳饮料或乳粉。
6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述药品的剂型为胶囊、粉剂或片剂。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述粉剂采用冷冻干燥工艺制备。
8.以权利要求1所述的一株凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）JA845作为活性成份的产品。
9.根据权利要求8所述的产品，其特征在于，该产品为预防和/或治疗代谢综合症产品；该产品的功能为（a1）至（a5）中的至少一项：
（a1）降低代谢综合症患者血浆中的血脂含量；
（a2）缓解代谢综合症患者肝损伤；
（a3）改善机体的胰岛素抵抗；
（a4）提高代谢综合症患者肠道菌群多样性；
（a5）降低脂质代谢蛋白SREBP、FAS的含量。
CN202010361948.5A 2020-04-30 2020-04-30 一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845及其应用 Active CN111518720B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010361948.5A CN111518720B (zh) 2020-04-30 2020-04-30 一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010361948.5A CN111518720B (zh) 2020-04-30 2020-04-30 一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111518720A CN111518720A (zh) 2020-08-11
CN111518720B true CN111518720B (zh) 2021-01-05

Family

ID=71908420

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010361948.5A Active CN111518720B (zh) 2020-04-30 2020-04-30 一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111518720B (zh)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114196562B (zh) * 2020-09-29 2023-02-03 青岛蔚蓝生物股份有限公司 一株具有降低血糖功效的凝结芽孢杆菌及其应用
CN112915108B (zh) * 2021-01-21 2022-08-02 吉林省农业科学院 凝结芽孢杆菌ja845在制备预防和/或治疗阿尔茨海默病药物中的应用
CN113444668B (zh) * 2021-07-26 2023-05-09 吉林省命之元生物科技有限公司 一株降血糖作用的凝结芽孢杆菌及其应用
CN113425747A (zh) * 2021-07-26 2021-09-24 吉林省农业科学院 凝结芽孢杆菌ja845在制备具有降血糖功能的酶活性抑制剂中的应用
CN114107121B (zh) * 2021-12-06 2023-03-21 华中农业大学 一种凝结芽孢杆菌及其在酒精性肝病的治疗中的应用
CN114480193B (zh) * 2022-01-28 2023-01-17 善恩康生物科技（苏州）有限公司 凝结芽孢杆菌在制备改善高血糖高血脂引起的机体功能下降的药物方面的应用
CN115299611B (zh) * 2022-06-29 2023-03-28 洽洽食品股份有限公司 一种凝结芽孢杆菌联合鞣花酸的组合物及其应用
CN117838736B (zh) * 2024-01-29 2024-06-14 吉林省农业科学院(中国农业科技东北创新中心) 凝结芽孢杆菌ja845在制备预防和/或治疗抗动脉粥样硬化药物中的应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101926831A (zh) * 2006-06-26 2010-12-29 青岛东海药业有限公司 凝结芽胞杆菌在制备防治便臭和便臭中毒综合征组合物制剂中的应用
CN107616985A (zh) * 2017-10-01 2018-01-23 青岛东海药业有限公司 凝结芽孢杆菌制剂及其应用
CN108669438A (zh) * 2018-05-23 2018-10-19 吉林大学 一种调节人体肠道的低糖代餐粉及其制备方法
WO2019090181A1 (en) * 2017-11-03 2019-05-09 Kaleido Biosciences, Inc. Methods of producing glycan polymers

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10765718B2 (en) * 2017-02-02 2020-09-08 Golo Llc Formulations for weight loss and methods of use
CN107686826B (zh) * 2017-11-08 2022-07-12 武汉轻工大学 一种凝结芽孢杆菌及其发酵方法、凝结芽孢杆菌制剂的制备方法以及猪饲料

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101926831A (zh) * 2006-06-26 2010-12-29 青岛东海药业有限公司 凝结芽胞杆菌在制备防治便臭和便臭中毒综合征组合物制剂中的应用
CN107616985A (zh) * 2017-10-01 2018-01-23 青岛东海药业有限公司 凝结芽孢杆菌制剂及其应用
WO2019090181A1 (en) * 2017-11-03 2019-05-09 Kaleido Biosciences, Inc. Methods of producing glycan polymers
CN108669438A (zh) * 2018-05-23 2018-10-19 吉林大学 一种调节人体肠道的低糖代餐粉及其制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN111518720A (zh) 2020-08-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111518720B (zh) 一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)JA845及其应用
CN110066753B (zh) 植物乳杆菌dp189及其应用
US9649347B2 (en) Protective effects and application of a Lactobacillus rhamnosus on the alleviation of chronic alcoholic liver injury
CN109628358B (zh) 一种复合益生菌及其应用
US20140363501A1 (en) The protective effects and application of a Lactobacillus rhamnosus on the alleviation of chronic alcoholic liver injury
CN111254090B (zh) 一株具有减肥功能的罗伊氏乳杆菌及其应用
CN114507621B (zh) 一株植物乳杆菌及在降尿酸、减重、抗炎症方面的应用
CN114317353B (zh) 一种植物乳杆菌zjufyj7及其应用
EP4053262A1 (en) Lactobacillus casei producing short-chain fatty acids, cultivation method therefor and application thereof
CN112218646B (zh) 一种组合物及其应用
Qian et al. Effects of lactobacillus casei YBJ02 on lipid metabolism in hyperlipidemic mice
CN109593678B (zh) 长双歧杆菌yh295及其在制备降低腹型肥胖风险产品中的应用
CN114107121B (zh) 一种凝结芽孢杆菌及其在酒精性肝病的治疗中的应用
CN115927045B (zh) 具有降胆固醇、缓解由高脂血症引起肝损伤功能的唾液乳杆菌069及其应用
CN114703105A (zh) 一种复合益生菌在降血脂或缓解肥胖中的应用
CN113943682A (zh) 缓解便秘的长双歧杆菌长亚种及其制备的发酵食品与益生菌制剂
CN113337427A (zh) 一种植物乳杆菌hnu082、组合物及其应用
CN117701469A (zh) 一株高效降胆固醇的副干酪乳杆菌imaujbc1及其应用
Ahmed et al. Hypocholesterolaemic effect of probiotic yogurt enriched with barley β-glucan in rats fed on a high-cholesterol diet
CN115992059B (zh) 一株产阿魏酸酯酶的约氏乳杆菌及其缓解溃疡性结肠炎的用途
CN116445360A (zh) 一株具有缓解慢性酒精性肝损伤功效的鼠李糖乳酪杆菌及其应用
CN115418332A (zh) 一种具有预防和改善化学性肝损伤的植物乳杆菌
CN115466689A (zh) 用于预防和/或治疗代谢类疾病的益生菌组合物及其应用
CN114533768A (zh) 乳酸杆菌益生菌CGMCC No.1.13855在制备糖尿病治疗药物中的应用
CN117838736B (zh) 凝结芽孢杆菌ja845在制备预防和/或治疗抗动脉粥样硬化药物中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant