CN111514072A

CN111514072A - 一种牛大力-诺丽复合酵素及其制备方法与在制备面膜中的应用

Info

Publication number: CN111514072A
Application number: CN202010416772.9A
Authority: CN
Inventors: 纪明慧; 郭飞燕; 陈光英; 曾越; 熊英; 王文迪; 郭雅娟
Original assignee: Hainan Normal University
Current assignee: Hainan Normal University
Priority date: 2020-05-17
Filing date: 2020-05-17
Publication date: 2020-08-11
Anticipated expiration: 2040-05-17
Also published as: CN111514072B

Abstract

本发明涉及一种牛大力‑诺丽复合酵素及其制备方法与在制备面膜中的应用，所述牛大力‑诺丽复合酵素的制备方法包括如下步骤：(1)诺丽酵素的制备：将新鲜诺丽果实切碎，置于密封无菌罐中，室温下，自然发酵一年，即得诺丽酵素；(2)牛大力‑诺丽复合酵素的制备：将新鲜牛大力根切碎与步骤(1)制备的诺丽酵素混匀置于密封无菌罐中，室温下，自然发酵一个月，即得牛大力‑诺丽复合酵素。

Description

一种牛大力-诺丽复合酵素及其制备方法与在制备面膜中的应用

技术领域

本发明属于天然植物酵素化妆品领域，具体涉及一种牛大力-诺丽复合酵素及其制备方法与在制备面膜中的应用。

背景技术

在化妆品行业里，面膜因具有清洁、保养和营养面部肌肤的作用，而受到人们的青睐。但是随着越来越多的人意识到长期使用含有化学药品的面膜，会存在安全隐患。因此，越来越多的人就会选择中药面膜。与化学药品面膜相比较，中药面膜具有自然无毒、副作用小、安全性能高等特点。不同的中药材，具有不同的功效，例如美白、保湿、祛斑等，可以有效地促进细胞的新成代谢，延缓皮肤的衰老。

牛大力(Radix Millettiae Speciosae)，别名猪脚笠、山莲藕、金钟根、大力薯、倒挂金钟等。属植物界、种子植物、双子叶植物，为豆科崖豆藤属植物美丽崖豆藤MillettiaSpecisoa Champ.，以根入药。牛大力喜生于山坡、荒野、疏林或灌木丛中，在海拔1500m以下也有种植，我国种植产地主要分布在福建、湖南、广东、海南、广西、贵州、云南等地。国外主要产地在越南。

国内外学者对牛大力的化学成分的研究较少，《中药大辞典》中有记载牛大力根含有生物碱，在现有的研究资料中表明，其还含有异黄酮、查尔酮类、苯丙素类、三萜化合物、植物甾醇以及多糖类等多种化学成分。此外，牛大力还含有多糖、刺桐碱、亚油酸，以及丰富的维生素E和Al、Ba、Ca、Cu、Fe、K、Mg、Na、Sr、Ti、Zn等微量元素。许多对牛大力药理作用的研究结果表明，其含有的成分具有明显的免疫调节功能、祛痰镇咳、平喘保肝、抗肿瘤、抗炎、抗氧化、抗疲劳以及抗应激的功效。

诺丽(Morinda citrifolia)，别名四季果、海巴戟天、热带海巴戟等。属茜草科巴戟天属植物。诺丽喜生于海滩的灌丛、多石的海滩、路旁、溪流旁及湿地中。诺丽产于南太平洋的热带岛屿，而我国的种植产地主要分布在海南、西沙和台湾。在许多研究中表明，诺丽果含有大量人体必需的氨基酸，还含有K、Na、P、Zn、Ca、Fe、Mg、Cu、Se等丰富的矿物质和维生素B族、叶酸等营养成分，含量一般都比其他水果多，其中维生素B12更是其他水果没有的。此外，诺丽果还含有包括类黄酮、东莨菪素、芸香素等在内较为丰富的多酚类化合物；以及环烯醚萜类化合物和糖苷类化合物等。

基于以上，本发明对牛大力-诺丽果实复合酵素进行研究，并将其开发成一种兼具保湿活性、抗氧化性的面膜。

发明内容

本发明提供一种牛大力-诺丽复合酵素，其特征在于所述牛大力-诺丽复合酵素的制备方法包括如下步骤：

(1)诺丽酵素的制备：将新鲜诺丽果实切碎，置于密封无菌罐中，室温下，自然发酵一年，即得诺丽酵素；

(2)牛大力-诺丽复合酵素的制备：将新鲜牛大力根切碎与步骤(1)制备的诺丽酵素混匀置于密封无菌罐中，室温下，自然发酵一个月，即得牛大力-诺丽复合酵素。

步骤(2)中新鲜牛大力根与诺丽酵素的质量比为1:1.5-2.5，优选为1:2。

本发明的另一实施方案提供上述牛大力-诺丽复合酵素的制备方法包括如下步骤：

本发明的另一实施方案提供上述牛大力-诺丽复合酵素在制备护肤品中的应用。所述护肤品选自保湿霜、面霜、洗面乳、面膜等。

本发明的另一实施方案提供上述牛大力-诺丽复合酵素在制备保湿剂中的应用。

本发明的另一实施方案提供上述牛大力-诺丽复合酵素在制备抗氧剂中的应用。

本发明的另一实施方案提供一种护肤品，其特征在于包含上述牛大力-诺丽复合酵素。

本发明的另一实施方案提供一种牛大力-诺丽复合酵素面膜基质液的配方，其特征在于所述配方如下：

本发明的另一实施方案提供一种牛大力-诺丽复合酵素基质面膜，其特征在于所述牛大力-诺丽复合酵素基质面膜的制备方法包括如下步骤：

(1)A相的制备：按配方量将原料SF1202、DC1403、水、EDTA-2Na、尿囊素、海藻糖、1,3-丙二醇、1,2-己二醇混合均匀后，备用；

(2)B1相的制备：按配方量将卡波姆和水配成溶液，备用；

(3)C1相的制备：按配方量将牛大力-诺丽复合酵素和水配成溶液，备用；

(4)B相的制备：按配方量将甘油、双丙甘醇、甘油聚醚26、吐温20、甜菜碱、烟酰胺、透明质酸钠、Aristoflex AVC混合均匀后，加入步骤(2)制备的B1相混匀即得B相；

(5)将步骤(4)制备得到的B相升温至80-85摄氏度，保温至溶解完全后自然降温至60摄氏度，加入步骤(1)制备的A相，搅拌均匀后，按配方量加入C相，搅拌均匀后，加入步骤(3)制备的C1相，搅拌至均匀，待降温至40摄氏度，按配方量加入D相，搅拌混合均匀，待降温至35-38摄氏度，停止搅拌，出料，即得所述牛大力-诺丽复合酵素基质面膜。

本发明的另一实施方案提供上述牛大力-诺丽复合酵素基质面膜的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(2)B1相的制备：按配方量将卡波姆和水配成溶液，备用；

本发明制备基质面膜时所用水选自蒸馏水、重蒸水、去离子水或无菌水。

本发明牛大力-诺丽复合酵素制备方法步骤(1)、(2)中涉及的材料及仪器均需经灭菌处理，所述灭菌处理包括121℃高温灭菌锅中灭菌或紫外灯照射灭菌。

本发明所述Aristoflex AVC是指丙烯酰胺二甲基牛磺酸铵/VP共聚物；PE9010是指苯氧乙醇和乙基己基甘油复配的防腐剂；TEA是指三乙醇胺。

与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明是在传统面膜配方工艺上，添加牛大力-诺丽复合酵素，通过测试保湿性能、抗氧化性以及稳定性能这三个方面，开发一款新的多功能面膜。通过保湿实验、吸湿实验以及体外保湿实验，结果表明牛大力-诺丽复合酵素具有良好的保湿功效，在化妆品中可以作为保湿剂使用。通过体外抗氧化性实验，当牛大力-诺丽复合酵素的质量浓度为70μg/mL时，对DPPH自由基的清除率可达到64.29％，结果表明牛大力-诺丽复合酵素具有良好的抗氧化和抗衰老的功效。本发明所制得的牛大力-诺丽复合酵素面膜呈淡黄色凝胶状态，有淡淡的香味，质地均匀易涂抹，无刺激性，其pH＝6.98，具有良好的耐寒性、耐热性，符合中华人民共和国轻工业标准QB/T 2872—2007面膜标准。

附图说明

图1是相对湿度RH＝84％牛大力-诺丽复合酵素、甘油、山梨醇、1,3-丙二醇、1,2-己二醇的吸湿率图；

图2是相对湿度RH＝45％牛大力-诺丽复合酵素、甘油、山梨醇、1,3-丙二醇、1,2-己二醇的吸湿率图；

图3是室内森田、依诗贝、牛大力-诺丽复合酵素面膜体外的保湿率图；

图4是相对湿度RH＝84％森田、依诗贝、牛大力-诺丽复合酵素面膜的体外保湿率图；

图5是相对湿度RH＝45％森田、依诗贝、牛大力-诺丽复合酵素面膜的体外保湿率图；

图6是牛大力-诺丽复合酵素和维生素C清除DPPH自由基能力图。

具体实施方式

实施例1

(1)诺丽酵素的制备：将新鲜诺丽果实(1.0kg)切碎，置于密封无菌罐中，室温下，自然发酵一年，即得诺丽酵素；

(2)牛大力-诺丽复合酵素的制备：将新鲜牛大力根(100g)切碎与步骤(1)制备的诺丽酵素混匀(新鲜牛大力根与诺丽酵素的质量比为1:2)置于密封无菌罐中，室温下，自然发酵一个月，即得牛大力-诺丽复合酵素。

实施例2

取实施例1步骤(1)制备的诺丽酵素150g与切碎的新鲜牛大力根(100g)混匀置于密封无菌罐中，室温下，自然发酵一个月，即得牛大力-诺丽复合酵素。

实施例3

取实施例1步骤(1)制备的诺丽酵素250g与切碎的新鲜牛大力根(100g)混匀置于密封无菌罐中，室温下，自然发酵一个月，即得牛大力-诺丽复合酵素。

实施例4

各原料成分的配比见下表，配置100g的基质面膜样品

(2)B1相的制备：按配方量将卡波姆和水配成溶液，备用；

实施例5

吸湿保湿活性测定

保湿实验性能测定

室温条件下，精确称取0.5g牛大力-诺丽复合酵素(实施例1)、甘油、山梨醇、1,3-丙二醇、1,2-己二醇五种物质各两份，分别加入洗净后直径为3cm的干燥称量瓶中，将称量瓶分别放置在两个干燥器中，一个干燥器的相对湿度RH＝84％(饱和硫酸铵溶液)，另一个干燥器的相对湿度RH＝45％(氯化钙固体)。精密测量各样品在放置前的初始质量(m₀/g)，以及放置48h后的质量(m_n/g)。按照式(1)计算保湿率。

保湿率＝m_n/m₀×100％ (1)

吸湿实验性能测定

室温条件下，精确称取0.5g牛大力-诺丽复合酵素、甘油、山梨醇、1,3-丙二醇、1,2-己二醇各两份，分别加入洗净后直径为3cm的干燥称量瓶中，将称量瓶分别放置在两个干燥器中，一个干燥器的相对湿度RH＝84％(饱和硫酸铵溶液)，另一个干燥器的相对湿度RH＝45％(氯化钙固体)。在2h、4h、6h、8h、24h、48h时，精准测量放置前各样品的质量(m₀/g)和放置后各样品的质量(m_n/g)。按照式(2)计算吸湿率。

吸湿率＝[(m_n-m₀)/m₀]×100％ (2)

体外保湿实验性能测定

室温(24摄氏度)条件下，称取0.5g牛大力-诺丽复合酵素基质面膜、森田补水面膜、伊贝诗睡眠面膜各三份，将干燥洁净的玻璃板贴上医用透气胶带，模拟皮肤组织，将面膜液均匀涂抹在处理好的玻璃板上，分别放置在两个干燥器中，一个干燥器的相对湿度RH＝84％(饱和硫酸铵溶液)，另一个干燥器的相对湿度RH＝45％(氯化钙固体)。另一组放置在室温为24摄氏度的室内，每隔10min的时间测量3h内各样品放置前的质量(m₀/g)和放置后的质量(m_n/g)。按照式(1)

计算保湿率。

抗氧化性测定

DPPH溶试剂的制备：将适量DPPH自由基溶于无水乙醇溶液中，制备浓度为2×10^- ⁵mmol/L的DPPH溶液。

DPPH自由基清除率的测定：移液管分别取0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.5mL的面膜样液和适量的维生素C加入试管中，制备浓度分别为10、20、30、40、50、70μg/mL的溶液，用移液管移取DPPH溶液1mL加入上述各试管中，剧烈震荡，置于暗处静置半小时(30min)。分别测定上述不同待测样品在517nm下的吸光度值，按照式(4)计算各待测样品对DPPH自由基的清除率。

DPPH自由基清除率＝[A₀-(A₁-A₂)/A₀]×100％ (4)

式中，A₀为不加样品液时DPPH溶液与蒸馏水混合溶液的吸光度值，因A₀的值相同，只需测量一次，其值为0.042；A₁为样品液与DPPH试剂混合溶液的吸光度值；A₂为样品液与蒸馏水混合溶液的吸光度值。

本发明牛大力-诺丽复合酵素基质(以下简称面膜)感官指标和理化标准检测感官指标检测

称取面膜2.0g，置于洁净干燥的表面皿上，观察其外观，有无香味。再称取面膜0.5g，均匀涂抹在手背上，感受其细腻度。

pH的测定：用稀释法测定，称取面膜1.0g，去离子水10.0g，置于小烧杯中，放入40摄氏度的恒温水浴锅中加热，并不断搅拌溶液至均匀，取出烧杯后需自然冷却至室温，用pH计测量溶液的pH值，测三次，取平均值。在中华人民共和国GB/T 13531.1—2000《化妆品通用试验方法pH值得测定》标准中明确规定，pH的精确度为0.1，每两次测量之间的差值因小于或等于0.1。

理化性质检测

耐寒实验：称取面膜2.0g置于干燥的称量瓶中，放进-12±2摄氏度的条件中，静置保持24h后取出，恢复至室温，观察此期间样品是否与实验前有明显差异。

耐热实验：称取面膜2.0g置于干燥的称量瓶中，放进42±2摄氏度的条件中，静置保持24h后取出，恢复至室温，观察此期间样品是否与实验前有明显差异。

离心稳定性：称取一定量的样品三份，在3500r/min、4000r/min、4500r/min的条件下离心20min，取出后观察样品是否有分层现象以及有无水分析出。

实验结果与讨论

吸湿保湿活性性能

保湿活性

牛大力-诺丽复合酵素、甘油、山梨醇、1,3-丙二醇、1,2-己二醇五种物质在第48h时的保湿率见表3。

各样品的保湿率

由上表可以看出，在相对湿度较低(RH＝45％)的条件下，牛大力-诺丽复合酵素的保湿率为100.36％，比对照组的略高；在相对湿度较高(RH＝84％)的条件下，牛大力-诺丽复合酵素的保湿率为128.38％，同样比对照组高，因此可以推测出牛大力-诺丽复合酵素具有良好的保湿效果。在化妆品中，甘油、山梨醇、1,3-丙二醇、1,2-己二醇等是常用的保湿剂，从表中的数据可以看出，无论是在低湿度还是高湿度的条件下，牛大力-诺丽复合酵素的保湿效果要比对照组好，综合分析，牛大力-诺丽复合酵素可以作为保湿剂应用在化妆品中。

吸湿活性

图1、图2分别为牛大力-诺丽复合酵素、甘油、山梨醇、1,3-丙二醇、1,2-己二醇五种物质随时间的增加从而导致吸湿率的变化情况。在相对湿度较高(RH＝84％)的条件下，各样品的吸湿性大小顺序为：1,2-己二醇〉甘油〉1,3-丙二醇〉牛大力诺丽酵素〉山梨醇，牛大力诺丽酵素在第48h时，吸湿率达32.7％，从图1中可以看出，牛大力-诺丽复合酵素的吸湿率处于1,3-丙二醇和山梨醇之间。在相对湿度较低(RH＝45％)的条件下，各样品的吸湿性大小顺序为：甘油〉牛大力诺丽酵素〉1,2-己二醇〉1,3-丙二醇〉山梨醇，牛大力-诺丽复合酵素在第24h时，吸湿率高达17.83％，从图2中可以看出此时的吸湿率在48h内最大，之后呈下降趋势，在第48h时的吸湿率处于1,3-丙二醇和1,2-己二醇之间。综合分析，可以说明牛大力-诺丽复合酵素具有良好的吸湿效果。

体外保湿活性

图3、图4、图5分别为牛大力诺丽酵素面膜、市售的森田补水面膜和依诗贝睡眠面膜在室温条件下的室内、相对湿度RH＝84％、相对湿度RH＝45％时随时间的增加从而导致体外保湿率的变化情况。在室温条件下的室内，各样品体外保湿率大小顺序为：牛大力-诺丽复合酵素面膜〉森田〉伊贝诗，从图3中可以看出，牛大力-诺丽复合酵素面膜的体外保湿率与市售的两种面膜相当，大致可以概括为在110min前体外保湿率下降的速度略快，之后逐渐趋于稳定。在相对湿度较高(RH＝84％)的条件下，各样品的吸湿性大小顺序为：森田〉牛大力-诺丽复合酵素面膜〉伊贝诗，从图4中可以看出，牛大力-诺丽复合酵素面膜的体外吸湿率处于森田补水面膜和伊贝诗睡眠面膜之间，在180min内，体外保湿率的下降速度相对较平稳。在相对湿度较低(RH＝45％)的条件下，各样品的吸湿性大小顺序为：森田〉牛大力-诺丽复合酵素面膜〉伊贝诗，从图5中可以看出，牛大力-诺丽复合酵素面膜的体外吸湿率处于森田补水面膜和伊贝诗睡眠面膜之间，在180min内，体外保湿率的下降速度相对较平稳。综合分析，牛大力-诺丽复合酵素面膜表现出较好的体外保湿性能，与市售的面膜相当，可以说明牛大力-诺丽复合酵素面膜具有良好的保湿性能。

抗氧化性能

造成皮肤衰老的主要原因为自由基的氧化，减缓自由基的氧化速度，可以有效地延缓皮肤衰老。图6为不同质量浓度的牛大力-诺丽复合酵素和维生素C清除DPPH自由基的清除率。从图中可以看出牛大力-诺丽复合酵素和维生素C对DPPH自由基都具有清除能力，且DPPH自由基的清除率随着牛大力-诺丽复合酵素和维生素C质量浓度的增加而呈现上升趋势。此外，明显可以看出维生素C的清除能力比牛大力-诺丽复合酵素的清除能力强，但当牛大力-诺丽复合酵素的质量浓度为70μg/mL时，对DPPH自由基的清除率可高达到64.29％。综合分析，牛大力-诺丽复合酵素表现出较好的清除效果，表明牛大力-诺丽复合酵素具有良好的抗氧化和抗衰老的功效。

稳定性能评价

对牛大力-诺丽复合酵素面膜的感官指标和理化标准的检测结果。

牛大力-诺丽复合酵素面膜稳定性评价

表中结果表明牛大力-诺丽复合酵素面膜具有良好的耐寒性能、耐热性能。此外，面膜经过离心实验后，牛大力-诺丽复合酵素面膜未曾出明显的分层现象，且无水分析出，综合分析，可以说明面膜具有良好的稳定性能。

Claims

1.一种牛大力-诺丽复合酵素，其特征在于所述牛大力-诺丽复合酵素的制备方法包括如下步骤：

2.权利要求1所述的牛大力-诺丽复合酵素，其特征在于步骤(2)中新鲜牛大力根与诺丽酵素的质量比为1:1.5-2.5，优选为1:2。

3.一种牛大力-诺丽复合酵素的制备方法，其特征在于包括权利要求1-2任一项所述的步骤。

4.权利要求1-2任一项所述的牛大力-诺丽复合酵素在制备护肤品中的应用。

5.权利要求4所述的应用，其特征在于所述护肤品选自保湿霜、面霜、洗面乳、面膜等。

6.权利要求1-2任一项所述的牛大力-诺丽复合酵素在制备保湿剂中的应用。

7.权利要求1-2任一项所述的牛大力-诺丽复合酵素在制备抗氧剂中的应用。

8.一种护肤品，其特征在于包含权利要求1-2任一项所述的牛大力-诺丽复合酵素。

9.一种牛大力-诺丽复合酵素面膜基质液的配方，其特征在于所述配方如下：

10.一种牛大力-诺丽复合酵素基质面膜，其特征在于所述牛大力-诺丽复合酵素基质面膜的制备方法包括如下步骤：

(2)B1相的制备：按配方量将卡波姆和水配成溶液，备用；

(5)将步骤(4)制备得到的B相升温至80-85摄氏度，保温至溶解完全后自然降温至60摄氏度，加入步骤(1)制备的A相，搅拌均匀后，按配方量加入C相，搅拌均匀后，加入步骤(3)制备的C1相，搅拌至均匀，待降温至40摄氏度，按配方量加入D相，搅拌混合均匀，待降温至35-38摄氏度，停止搅拌，出料，即得所述牛大力-诺丽复合酵素基质面膜。一种牛大力-诺丽复合酵素基质面膜的制备方法，其特征在于包括权利要求10所述的步骤。