CN111491519A - 包含胞壁质酶的动物饲料组合物及其用途 - Google Patents

包含胞壁质酶的动物饲料组合物及其用途 Download PDF

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Abstract

本发明涉及包含具有胞壁质酶活性的多肽的动物饲料组合物及其用途。用包含胞壁质酶的饲料饲喂肉鸡导致血液类胡萝卜素剂量依赖性提高。施用补充的饲料同样能够提高玉米黄质、叶黄素、维生素A、维生素E和唾液酸的血液水平。

Description

包含胞壁质酶的动物饲料组合物及其用途
对序列表的引用
本申请含有计算机可读形式的序列表,该序列表通过引用并入本文。
发明背景
技术领域
本发明涉及包含具有胞壁质酶活性的多肽的动物饲料组合物用于改善动物中营养物吸收的用途。
相关领域描述
胞壁质酶也称为溶菌酶,是由许多生物作为抗菌防御机制而产生的O-糖基水解酶。酶通过切割肽聚糖(细菌中的重要结构分子)的糖苷键来引起细菌细胞壁的水解。在通过胞壁质酶作用使细菌细胞壁变弱之后,由于渗透压不平衡,细菌细胞裂解。
胞壁质酶天然存在于例如病毒、植物、昆虫、禽鸟、爬行动物和哺乳动物的许多生物中。在哺乳动物中,已经从鼻分泌物、唾液、眼泪、肠内含物、尿液和乳中分离出胞壁质酶。酶切割N-乙酰胞壁酸的碳数1与N-乙酰基-D-葡糖胺的碳数4之间的糖苷键。在体内,这两种碳水化合物聚合以形成许多微生物的细胞壁多糖。
胞壁质酶已经被分类为五种不同的糖苷水解酶(GH)家族(CAZy,www.cazy.org):母鸡卵清胞壁质酶(GH22)、鹅卵清胞壁质酶(GH23)、噬菌体T4胞壁质酶(GH24)、鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)鞭毛蛋白(GH73)和拟鞘孢属(Chalaropsis)胞壁质酶(GH25)。从母鸡卵清中提取的胞壁质酶(GH22胞壁质酶)是可在商业市场上获得的主要产品,并且即使现今有许多其他已知的胞壁质酶,其也在传统上直接被称为胞壁质酶。
本发明的发明人出乎意料地发现,胞壁质酶可用于动物饲料或动物饲料添加剂中来改善营养物吸收,因而对动物健康有益处并且可改善肉特性例如质量和着色。
发明概述
本发明涉及一种动物饲料或动物饲料添加剂,所述动物饲料或动物饲料添加剂包含具有胞壁质酶活性的一种或多种多肽。本发明还涉及一种改善动物中营养物吸收的方法,其包括向所述动物施用这种动物饲料或动物饲料添加剂;以及这种动物饲料或动物饲料添加剂用于改善动物中营养物吸收的用途。
序列表的概述
SEQ ID NO:1是如在WO2013/076253(SEQ ID NO:4)中所述的来自嗜碱枝顶孢菌(Acremonium alcalophilum)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:2是如在WO2013/076253(SEQ ID NO:8)中所述的来自嗜碱枝顶孢菌的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:3是如在WO2011/104339(SEQ ID NO:3)中所述的来自烟曲霉(Aspergillus fumigatus)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
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SEQ ID NO:5是如在WO2005/080559(SEQ ID NO:2)中所述的来自红栓菌(Trametes cinnabarina)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
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SEQ ID NO:7是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:6)中所述的来自点孔座壳菌(Poronia punctata)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:8是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:9)中所述的来自点孔座壳菌的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:9是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:12)中所述的来自轮枝菌属WMM742(Lecanicillium sp.WMM742)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:10是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:15)中所述的来自轮枝菌属WMM742的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:11是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:18)中所述的来自马爪甲团囊菌(Onygena equina)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:12是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:21)中所述的来自淡紫拟青霉菌(Purpureocillium lilacinum)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:13是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:24)中所述的来自Trichobolus zukaiii的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:14是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:27)中所述的来自桔青霉(Penicillium citrinum)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:15是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:30)中所述的来自珠芽枝鼻菌(Cladorrhinum bulbillosum)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:16是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:33)中所述的来自Umbelopsis westeae的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:17是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:36)中所述的来自接合菌属XZ2655(Zygomycetes sp.XZ2655)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:18是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:39)中所述的来自角毛壳菌(Chaetomium cupreum)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:19是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:42)中所述的来自深红虫草(Cordyceps cardinalis)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:20是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:45)中所述的来自青霉属'qii'(Penicillium sp.'qii')的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:21是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:48)中所述的来自曲霉属novXZ2609(Aspergillus sp.novXZ2609)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:22是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:51)中所述的来自拟青霉属XZ2658(Paecilomyces sp.XZ2658)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:23是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:54)中所述的来自拟青霉属XZ2658的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:24是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:60)中所述的来自Pycnidiophora cf dispera的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:25是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:63)中所述的来自Thermomucor indicae-seudaticae的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:26是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:66)中所述的来自虫草棒束孢(Isaria farinosa)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:27是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:69)中所述的来自轮枝菌属WMM742的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:28是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:72)中所述的来自柄孢壳属t180-6(Zopfiella sp.t180-6)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:29是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:75)中所述的来自黄畸枝霉(Malbranchea flava)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:30是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:80)中所述的来自多毛垂幕菇(Hypholoma polytrichi)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:31是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:83)中所述的来自弯头曲霉(Aspergillus defiectus)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:32是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:86)中所述的来自Ascobolus stictoideus的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:33是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:89)中所述的来自锥毛壳属(Coniochaeta sp.)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:34是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:92)中所述的来自开裂炭轮菌(Daldinia fissa)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:35是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:95)中所述的来自座坚壳属(Rosellinia sp.)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:36是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:98)中所述的来自粪盘菌属ZY179(Ascobolus sp.ZY179)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:37是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:101)中所述的来自Curreya属XZ2623的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:38是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:104)中所述的来自盾壳霉属(Coniothyrium sp.)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:39是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:107)中所述的来自炭团菌属(Hypoxylon sp.)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:40是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:110)中所述的来自炭角菌属1653h(Xylariaceae sp.1653h)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:41是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:113)中所述的来自炭团菌属的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:42是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:116)中所述的来自青霉云南菌(Yunnania penicillata)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:43是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:119)中所述的来自白色侧齿霉菌(Engyodontium album)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:44是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:122)中所述的来自球芽普可尼亚菌(Metapochonia bulbillosa)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:45是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:125)中所述的来自副榛色钩囊菌(Hamigera paravellanea)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:46是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:128)中所述的来自翠绿绿僵菌(Metarhizium iadini)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:47是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:131)中所述的来自嗜热子囊菌(Thermoascus aurantiacus)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:48是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:134)中所述的来自罗斯曼枝穗霉(Clonostachys rossmaniae)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:49是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:137)中所述的来自棒状简枝霉(Simplicillium obclavatum)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:50是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:140)中所述的来自膨梗曲霉(Aspergillus inflatus)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:51是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:143)中所述的来自Paracremonium inflatum的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:52是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:146)中所述的来自韦斯特壳属(Westerdykella sp.)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:53是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:155)中所述的来自半球盖菇(Stropharia semiglobata)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:54是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:158)中所述的来自Gelasinospora cratophora的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:55是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:221)中所述的来自金针菇(Flammulina velutipes)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:56是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:224)中所述的来自喜粪裸盖菇(Deconica coprophila)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:57是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:227)中所述的来自微小毛霉(Rhizomucor pusillus)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:58是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:230)中所述的来自半球盖菇的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:59是如在PCT/CN2017/075978(SEQ ID NO:233)中所述的来自半球盖菇的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:60是如在PCT/CN2017/075960(SEQ ID NO:3)中所述的来自弗格斯毁丝霉(Myceliophthora fergusii)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:61是如在PCT/CN2017/075960(SEQ ID NO:15)中所述的来自高山被孢霉(Mortierella alpina)的GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
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SEQ ID NO:63是如在WO2017/000922(SEQ ID NO:257)中所述的来自囊状长毛盘菌(Trichophaea saccata)的GH24胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:64是如在WO2017/000922(SEQ ID NO:264)中所述的来自嗜热毛壳菌(Chaetomium thermophilum)的GH24胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:65是如在WO2017/000922(SEQ ID NO:267)中所述的来自哈茨木霉(Trichoderma harzianum)的GH24胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:66是如在WO2017/000922(SEQ ID NO:291)中所述的来自小毛盘菌(Trichophaea minuta)的GH24胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:67是如在WO2017/000922(SEQ ID NO:294)中所述的来自毛壳菌属ZY287(Chaetomium sp.ZY287)的GH24胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:68是如在WO2017/000922(SEQ ID NO:297)中所述的来自被孢霉属ZY002(Mortierella sp.ZY002)的GH24胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:69是如在WO2017/000922(SEQ ID NO:300)中所述的来自绿僵菌属XZ2431(Metarhizium sp.XZ2431)的GH24胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:70是如在WO2017/000922(SEQ ID NO:303)中所述的来自Geomycesauratus的GH24胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
SEQ ID NO:71是如在WO2017/000922(SEQ ID NO:306)中所述的来自Ilyonectriarufa的GH24胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
定义
动物:术语“动物”是指除人类以外的任何动物。动物的实例是单胃动物,包括但不限于猪(pigs)或猪科动物(swine)(包括但不限于仔猪、成长猪和母猪);家禽,例如火鸡、鸭、鹌鹑、珍珠鸡、鹅、鸽子(包括乳鸽)和鸡(包括但不限于肉鸡(在本文中称为肉鸡)、雏鸡、蛋鸡(在本文中称为产卵鸡));宠物,例如猫和狗;马(包括但不限于热血马、冷血马和温血马);甲壳动物(包括但不限于河虾(shrimps)和对虾(prawns))以及鱼(包括但不限于琥珀鱼(amberjack)、巨滑舌鱼(arapaima)、魮鱼(barb)、鲈鱼(bass)、蓝鱼(bluefish)、菖鲉(bocachico)、鲷科海鱼(bream)、大头鱼(bullhead)、卡叉马鱼(cachama)、鲤鱼(carp)、鲶鱼(catfish)、卡特拉鱼(catla)、遮目鱼(chanos)、红点鲑鱼(char)、丽体鱼(cichlid)、军曹鱼(cobia)、鳕鱼(cod)、莓鲈(crappie)、黄金河虎(dorada)、鼓鱼(drum)、鳗鱼(eel)、虾虎鱼(goby)、金鱼(goldfish)、丝足鱼(gourami)、石斑鱼(grouper)、瓜波特鱼(guapote)、大比目鱼(halibut)、爪哇鱼(java)、野鲮鱼(labeo)、莱鱼(lai)、泥鳅(loach)、鲭鱼(mackerel)、虱目鱼(milkfish)、银鲈(mojarra)、泥鱼(mudfish)、鲻鱼(mullet)、帕高鱼(paco)、珍珠斑点鱼(pearlspot)、佩杰瑞鱼(pejerrey)、河鲈鱼(perch)、狗鱼(pike)、鲳参鱼(pompano)、斜齿鳊(roach)、鲑鱼(salmon)、长丝异鳃鲶(sampa)、加拿大梭鲈(sauger)、黑鲈(sea bass)、海鲷鱼(seabream)、发光鱼(shiner)、睡鱼(sleeper)、黑鱼(snakehead)、鲷鱼(snapper)、锯盖鱼(snook)、比目鱼(sole)、刺足鱼(spinefoot)、鲟鱼(sturgeon)、翻车鱼(sunfish)、香鱼(sweetfish)、丁鲷(tench)、特罗尔鱼(terror)、罗非鱼(tilapia)、鳟鱼(trout)、鲔鱼(tuna)、多宝鱼(turbot)、白鳟鱼(vendace)、碧古鱼(walleye)和白鲑(whitefish))。
动物饲料:术语“动物饲料”是指适合于或意在供由动物摄入的任何化合物、制剂或混合物。用于单胃动物的动物饲料通常包含浓缩物以及维生素、矿物质、酶、直接饲喂的微生物、氨基酸和/或其他饲料成分(例如在预混料中),然而用于反刍动物的动物饲料通常包含草料(包括粗饲料和青贮料)并且还可以包含浓缩物以及维生素、矿物质、酶、直接饲喂的微生物、氨基酸和/或其他饲料成分(例如在预混料中)。
浓缩物:术语“浓缩物”意指具有高蛋白和能量浓度的饲料,例如鱼粉、糖蜜、低聚糖、高粱、种子和谷物(完整的或通过压碎、碾磨等从例如玉米、燕麦、黑麦、大麦、小麦制备的)、油籽压榨饼(例如来自棉籽、红花、向日葵、大豆(例如大豆粉)、油菜籽/加拿大油菜、花生或落花生)、棕榈仁饼、酵母衍生材料和酒糟(例如湿酒糟(wet distillers grains,WDS))和具有可溶物的干酒糟(dried distillers grains with solubles,DDGS)。
饲料效率:术语“饲料效率”意指当在一定时间段期间动物以随意方式饲喂或给动物饲喂指定量的食物时每单位饲料的增重量。通过“提高的饲料效率”意味着与在不存在根据本发明的饲料添加剂组合物的情况下饲喂的动物相比,在饲料中使用所述饲料添加剂组合物导致每单位饲料摄入的增重增加。
草料:如本文所定义的术语“草料”还包括粗饲料。草料是新鲜的植物材料,例如来自草料植物的干草和青贮料、草和其他草料植物、海草、发芽谷物和豆科植物或它们的任何组合。草料植物的实例是紫花苜蓿(苜蓿)、百脉根、芸苔属植物(例如羽衣甘蓝,油菜籽(加拿大油菜)、大头菜(瑞典)、芜菁)、三叶草(例如杂三叶、红三叶、地三叶、白三叶)、草(例如百慕大草、雀麦草、假燕麦草、羊茅、石南草、草甸草、野茅、黑麦草、梯牧草)、玉米(玉蜀黍)、小米、大麦、燕麦、黑麦、高粱、大豆和小麦及蔬菜(例如甜菜)。草料还包括来自谷物生产的作物残余物(例如玉米秸秆;来自小麦、大麦、燕麦、黑麦和其他谷物的禾秆);来自蔬菜像甜菜缨的残余物;来自油籽生产像来自大豆、油菜籽和其他豆科植物的茎和叶的残余物;以及来自用于动物或人消耗的谷物精制或来自燃料生产或其他工业的级分。
片段:术语“片段”意指从成熟多肽或结构域的氨基和/或羧基端缺失一个或多个(例如,若干个)氨基酸的多肽或催化结构域;其中片段具有胞壁质酶活性。若干个)氨基酸从成熟多肽或结构域的氨基和/或羧基端缺失;其中片段具有胞壁质酶活性。
在一个方面中,GH24胞壁质酶(例如SEQ ID NO:63至SEQ ID NO:71中的一个)的片段包含至少230个氨基酸,例如至少235个氨基酸、至少240个氨基酸、或至少245个氨基酸并且具有胞壁质酶活性。在另一方面中,GH24胞壁质酶(例如SEQ ID NO:63至SEQ ID NO:71中的一个)的片段包含成熟多肽的长度的至少90%,例如成熟多肽的长度的至少92%、至少94%、至少96%、至少98%或至少99%并且具有胞壁质酶活性。
在一个方面中,GH25胞壁质酶(例如SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:72中的一个)的片段包含至少180个氨基酸,例如至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少195个氨基酸、至少200个氨基酸、至少205个氨基酸或至少210个氨基酸并且具有胞壁质酶活性。在另一方面中,GH25胞壁质酶(例如SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:72中的一个)的片段包含成熟多肽的长度的至少90%,例如成熟多肽的长度的至少92%、至少94%、至少96%、至少98%或至少99%并且具有胞壁质酶活性。
分离的:术语“分离的”意指处于自然界中不存在的形式或环境中的物质。分离的物质的非限制性实例包括:(1)任何非天然存在的物质;(2)包括但不限于任何酶、变体、核酸、蛋白、肽或辅因子的任何物质,所述物质至少部分地从与其在自然界中相关联的一种或多种或所有天然存在的成分中移除;(3)相对于自然界中发现的物质通过人工修饰的任何物质;或(4)通过相对于与其天然相关联的其他组分增加物质的量而修饰的任何物质(例如,对物质进行编码的基因的多个拷贝;使用比与对物质进行编码的基因天然相关联的启动子更强的启动子)。分离的物质可以存在于发酵液样品中。
胞壁质酶活性:术语“胞壁质酶活性”意指肽聚糖中N-乙酰基胞壁酸和N-乙酰基-D-葡糖胺残基之间或壳糊精中N-乙酰基-D-葡糖胺残基之间的1,4-β-键的酶促水解,从而由于渗透压而导致溶菌。胞壁质酶属于酶类别EC 3.2.1.17。通常通过比浊法测定来测量胞壁质酶活性。该方法基于由胞壁质酶的裂解作用诱发的藤黄微球菌(Micrococcus luteus)ATCC 4698悬浮液的浊度变化。在适当的实验条件下,这些变化与培养基中胞壁质酶的量成比例(参考联合国粮食及农业组织食品添加剂规范联合纲要的INS 1105(www.fao.org))。出于本发明的目的,根据实施例3中所述的浊度测定(“胞壁质酶活性的测定”)来测定胞壁质酶活性,并且如果多肽对一种或多种细菌例如藤黄微球菌(Micrococcus luteus)ATCC4698和/或不死微小杆菌(Exiguobacterium undea)(DSM14481)示出活性,则多肽具有胞壁质酶活性。在一个方面中,本发明的GH25胞壁质酶具有SEQ ID NO:1的胞壁质酶活性的至少20%、例如至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%或至少100%。在一个方面中,本发明的GH24胞壁质酶具有SEQ ID NO:63的胞壁质酶活性的至少20%、例如至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%或至少100%。
成熟多肽:术语“成熟多肽”意指在翻译和任何翻译后修饰例如N-末端加工、C-末端截短、糖基化、磷酸化等之后处于其最终形式的多肽。
获自或能够获自:术语“获自或能够获自”意味着可以在来自特定分类学等级的生物中找到多肽。在一个实施方式中,多肽获自或能够获自真菌界,其中术语界是分类学等级。在一个优选的实施方式中,多肽获自或能够获自子囊菌门(Ascomycota),其中术语门是分类学等级。在另一优选的实施方式中,多肽获自或能够获自盘菌亚门(Pezizomycotina),其中术语亚门是分类学等级。在另一优选的实施方式中,多肽获自或能够获自散囊菌纲(Eurotiomycetes),其中术语纲是分类学等级。
如果多肽的分类学等级是未知的,则可由本领域的技术人员通过对多肽执行BLASTP搜索(使用例如美国国家生物技术信息中心(NCIB)网站http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)并且将该多肽与最接近的同源物相比较来容易地确定。技术人员还可将序列与所提交的申请的序列相比较。作为已知多肽的片段的未知多肽被认为具有相同的分类学物种。在最多10个位置中包含取代、缺失和/或插入的未知天然多肽或人工变体被认为来自与已知多肽相同的分类学物种。
粗饲料:术语“粗饲料”意指纤维水平高的干植物材料,例如纤维、麸皮、来自种子和谷物的壳以及作物残余物(例如秸秆、椰干、禾秆、谷壳、甜菜废料)。
序列同一性:两个氨基酸序列之间或两个核苷酸序列之间的关联度通过参数“序列同一性”来描述。
出于本发明的目的,两个氨基酸序列之间的序列同一性使用如在EMBOSS包(EMBOSS:The European Molecular Biology Open Software Suite,Rice等人,2000,Trends Genet.16:276-277)(优选地5.0.0版或以后版本)的Needle程序中所实现的Needleman-Wunsch算法(Needleman和Wunsch,1970,J.Mol.Biol.48:443-453)来测定。所用参数是空位开放罚分10、空位延伸罚分0.5和EBLOSUM62(BLOSUM62的EMBOSS版本)替代矩阵。标记为“最长同一性”的Needle的输出(使用-nobrief选项获得)被用作百分比同一性并且被计算如下:
(相同残基×100)/(比对长度-比对中空位的总数)
基本上纯的多肽:术语“基本上纯的多肽”意指含有按重量计至多10%、至多8%、至多6%、至多5%、至多4%、至多3%、至多2%、至多1%和至多0.5%的与其天然或重组地相关联的其他多肽材料的制剂。优选地,多肽按存在于制剂中的总多肽材料的重量计为至少92%纯的,例如至少94%纯的、至少95%纯的、至少96%纯的、至少97%纯的、至少98%纯的、至少99%纯的、至少99.5%纯的和100%纯的。本发明的多肽优选地为基本上纯的形式。例如,这可通过公知的重组方法或通过经典的纯化方法制备多肽来完成。
变体:术语“变体”意指包含改变的具有胞壁质酶活性的多肽,即,变体:术语“变体”意指在一个或多个(若干个)位置处包含改变(即,一个或多个(若干个)氨基酸残基的取代、插入和/或缺失)的具有胞壁质酶活性的多肽。取代意指用不同的氨基酸替换占据位置的氨基酸;缺失意指去除占据位置的氨基酸;并且插入意指与占据位置的氨基酸相邻并紧接在该占据位置的氨基酸之后添加1、2或3个氨基酸。
在一个方面中,胞壁质酶变体可以包含1至10个改变,即1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个改变,并且具有亲本胞壁质酶(例如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:63)的胞壁质酶活性的至少20%,例如,至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%或至少100%。
营养物:术语“营养物”在本发明中意指在动物的膳食饲料中含有的组分或元素,包括水溶性成分,脂溶性成分等。水溶性成分的示例包括但不限于碳水化合物,例如糖,包括葡萄糖、果糖、半乳糖和淀粉;矿物质例如钙、镁、锌、磷、钾、钠和硫;氮源例如氨基酸和蛋白质,维生素例如维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B6、叶酸、维生素B12、生物素和泛酸。脂溶性成分的示例包括但不限于脂肪例如脂肪酸,包括饱和脂肪酸(SFA);单不饱和脂肪酸(MUFA)和多不饱和脂肪酸(PUFA),纤维,类胡萝卜素例如β-胡萝卜素、α-胡萝卜素、β-隐黄质、γ-胡萝卜素、叶黄素、玉米黄质及其混合物;维生素例如维生素A、维生素E和维生素K。优选地,本发明中的营养物涉及叶黄素、玉米黄质、维生素如维生素A和维生素E。
发明详述
包含具有胞壁质酶活性的多肽的动物饲料
在第一方面中,本发明涉及一种包含动物饲料添加剂、一种或多种蛋白源和一种或多种能量源的动物饲料,其特征在于,所述动物饲料包含具有胞壁质酶活性的一种或多种多肽。
在一个实施方式中,所述胞壁质酶是GH24胞壁质酶,优选地为真菌GH24胞壁质酶,优选地获自或能够获自子囊菌门,更优选地来自散囊菌纲。在一个实施方式中,所述具有胞壁质酶活性的多肽是GH25胞壁质酶,优选地为真菌GH25胞壁质酶,优选地获自或能够获自子囊菌门,更优选地来自散囊菌纲。
在一个实施方式中,本发明涉及一种包含动物饲料添加剂、一种或多种蛋白源和一种或多种能量源的动物饲料,其特征在于,所述动物饲料还包含具有胞壁质酶活性的一种或多种多肽,其中所述具有胞壁质酶活性的多肽选自由以下项组成的组:
(a)与SEQ ID NO:1具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(b)与SEQ ID NO:2具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(c)与SEQ ID NO:3具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(d)与SEQ ID NO:4具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(e)与SEQ ID NO:5具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(f)与SEQ ID NO:6具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(g)与SEQ ID NO:7具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(h)与SEQ ID NO:8具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(i)与SEQ ID NO:9具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(j)与SEQ ID NO:10具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(k)与SEQ ID NO:11具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(l)与SEQ ID NO:12具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(m)与SEQ ID NO:13具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(n)与SEQ ID NO:14具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(o)与SEQ ID NO:15具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(p)与SEQ ID NO:16具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(q)与SEQ ID NO:17具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(r)与SEQ ID NO:18具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(s)与SEQ ID NO:19具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(t)与SEQ ID NO:20具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(u)与SEQ ID NO:21具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(v)与SEQ ID NO:22具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(w)与SEQ ID NO:23具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(x)与SEQ ID NO:24具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(y)与SEQ ID NO:25具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(z)与SEQ ID NO:26具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(aa)与SEQ ID NO:27具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ab)与SEQ ID NO:28具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ac)与SEQ ID NO:29具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ad)与SEQ ID NO:30具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ae)与SEQ ID NO:31具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(af)与SEQ ID NO:32具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ag)与SEQ ID NO:33具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ah)与SEQ ID NO:34具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ai)与SEQ ID NO:35具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(aj)与SEQ ID NO:36具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ak)与SEQ ID NO:37具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(al)与SEQ ID NO:38具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(am)与SEQ ID NO:39具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(an)与SEQ ID NO:40具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ao)与SEQ ID NO:41具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ap)与SEQ ID NO:42具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(aq)与SEQ ID NO:43具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ar)与SEQ ID NO:44具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(as)与SEQ ID NO:45具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(at)与SEQ ID NO:46具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(au)与SEQ ID NO:47具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(av)与SEQ ID NO:48具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(aw)与SEQ ID NO:49具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ax)与SEQ ID NO:50具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ay)与SEQ ID NO:51具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(az)与SEQ ID NO:52具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ba)与SEQ ID NO:53具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bb)与SEQ ID NO:54具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bc)与SEQ ID NO:55具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bd)与SEQ ID NO:56具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(be)与SEQ ID NO:57具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bf)与SEQ ID NO:58具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bg)与SEQ ID NO:59具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bh)与SEQ ID NO:60具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bi)与SEQ ID NO:61具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bj)与SEQ ID NO:62具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bk)与SEQ ID NO:63具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bl)与SEQ ID NO:64具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bm)与SEQ ID NO:65具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bn)与SEQ ID NO:66具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bo)与SEQ ID NO:67具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bp)与SEQ ID NO:68具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bq)与SEQ ID NO:69具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(br)与SEQ ID NO:70具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bs)与SEQ ID NO:71具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bt)在1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置中包含一个或多个氨基酸取代(优选地保守取代)和/或一个或多个氨基酸缺失和/或一个或多个氨基酸插入或它们的任何组合的SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ IDNO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ IDNO:19、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24、SEQ IDNO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQ ID NO:30、SEQ IDNO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:34、SEQ ID NO:35、SEQ ID NO:36、SEQ IDNO:37、SEQ ID NO:38、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:40、SEQ ID NO:41、SEQ ID NO:42、SEQ IDNO:43、SEQ ID NO:44、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:46、SEQ ID NO:47、SEQ ID NO:48、SEQ IDNO:49、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53、SEQ ID NO:54、SEQ IDNO:55、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:58、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:60、SEQ IDNO:61、SEQ ID NO:62、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:64、SEQ ID NO:65、SEQ ID NO:66、SEQ IDNO:67、SEQ ID NO:68、SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:70或SEQ ID NO:71的变体;
(bu)包含(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)、(q)、(r)、(s)、(t)、(u)、(v)、(w)、(x)、(y)、(z)、(aa)、(ab)、(ac)、(ad)、(ae)、(af)、(ag)、(ah)、(ai)、(aj)、(ak)、(al)、(am)、(an)、(ao)、(ap)、(aq)、(ar)、(as)、(at)、(au)、(av)、(aw)、(ax)、(ay)、(az)、(ba)、(bb)、(bc)、(bd)、(be)、(bf)、(bg)、(bh)、(bi)、(bj)、(bk)、(bl)、(bm)、(bn)、(bo)、(bp)、(bq)、(br)、(bs)或(bt)的多肽和介于1个与10个氨基酸之间的N-末端和/或C-末端延伸的多肽;以及
(bv)具有胞壁质酶活性并且具有成熟多肽的长度的至少90%的(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)、(q)、(r)、(s)、(t)、(u)、(v)、(w)、(x)、(y)、(z)、(aa)、(ab)、(ac)、(ad)、(ae)、(af)、(ag)、(ah)、(ai)、(aj)、(ak)、(al)、(am)、(an)、(ao)、(ap)、(aq)、(ar)、(as)、(at)、(au)、(av)、(aw)、(ax)、(ay)、(az)、(ba)、(bb)、(bc)、(bd)、(be)、(bf)、(bg)、(bh)、(bi)、(bj)、(bk)、(bl)、(bm)、(bn)、(bo)、(bp)、(bq)、(br)、(bs)或(bt)的多肽的片段。
在一个实施方式中,所述具有胞壁质酶活性的多肽包含以下项或由以下项组成:SEQ ID NO:1的氨基酸1至208、SEQ ID NO:2的氨基酸1至213、SEQ ID NO:3的氨基酸1至218、SEQ ID NO:4的氨基酸1至208、SEQ ID NO:5的氨基酸1至215、SEQ ID NO:6的氨基酸1至207、SEQ ID NO:7的氨基酸1至201、SEQ ID NO:8的氨基酸1至201、SEQ ID NO:9的氨基酸1至203、SEQ ID NO:10的氨基酸1至208、SEQ ID NO:11的氨基酸1至207、SEQ ID NO:12的氨基酸1至208、SEQ ID NO:13的氨基酸1至207、SEQ ID NO:14的氨基酸1至207、SEQ ID NO:15的氨基酸1至207、SEQ ID NO:16的氨基酸1至208、SEQ ID NO:17的氨基酸1至208、SEQ IDNO:18的氨基酸1至206、SEQ ID NO:19的氨基酸1至207、SEQ ID NO:20的氨基酸1至216、SEQID NO:21的氨基酸1至218、SEQ ID NO:22的氨基酸1至204、SEQ ID NO:23的氨基酸1至203、SEQ ID NO:24的氨基酸1至208、SEQ ID NO:25的氨基酸1至210、SEQ ID NO:26的氨基酸1至207、SEQ ID NO:27的氨基酸1至207、SEQ ID NO:28的氨基酸1至208、SEQ ID NO:29的氨基酸1至217、SEQ ID NO:30的氨基酸1至208、SEQ ID NO:31的氨基酸1至201、SEQ ID NO:32的氨基酸1至202、SEQ ID NO:33的氨基酸1至207、SEQ ID NO:34的氨基酸1至202、SEQ ID NO:35的氨基酸1至201、SEQ ID NO:36的氨基酸1至202、SEQ ID NO:37的氨基酸1至206、SEQ IDNO:38的氨基酸1至202、SEQ ID NO:39的氨基酸1至202、SEQ ID NO:40的氨基酸1至202、SEQID NO:41的氨基酸1至202、SEQ ID NO:42的氨基酸1至206、SEQ ID NO:43的氨基酸1至207、SEQ ID NO:44的氨基酸1至208、SEQ ID NO:45的氨基酸1至215、SEQ ID NO:46的氨基酸1至217、SEQ ID NO:47的氨基酸1至214、SEQ ID NO:48的氨基酸1至208、SEQ ID NO:49的氨基酸1至203、SEQ ID NO:50的氨基酸1至216、SEQ ID NO:51的氨基酸1至207、SEQ ID NO:52的氨基酸1至208、SEQ ID NO:53的氨基酸1至207、SEQ ID NO:54的氨基酸1至208、SEQ ID NO:55的氨基酸1至207、SEQ ID NO:56的氨基酸1至207、SEQ ID NO:57的氨基酸1至208、SEQ IDNO:58的氨基酸1至207、SEQ ID NO:59的氨基酸1至207、SEQ ID NO:60的氨基酸1至207、SEQID NO:61的氨基酸1至204、SEQ ID NO:62的氨基酸1至216、SEQ ID NO:63的氨基酸1至245、SEQ ID NO:64的氨基酸1至249、SEQ ID NO:65的氨基酸1至248、SEQ ID NO:66的氨基酸1至245、SEQ ID NO:67的氨基酸1至249、SEQ ID NO:68的氨基酸1至245、SEQ ID NO:69的氨基酸1至247、SEQ ID NO:70的氨基酸1至250或SEQ ID NO:71的氨基酸1至240。
保守取代的实例在以下项的组内:碱性氨基酸(精氨酸、赖氨酸和组氨酸)、酸性氨基酸(谷氨酸和天冬氨酸)、极性氨基酸(谷氨酰胺和天冬酰胺)、疏水性氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸)、芳香族氨基酸(苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸)以及小氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸和蛋氨酸)。通常不改变比活性的氨基酸取代是本领域中已知的并且例如通过H.Neurath和R.L.Hill,1979,在The Proteins,Academic Press,New York来描述。常见取代是Ala/Ser、Val/lle、Asp/Glu、Thr/Ser、Ala/Gly、Ala/Thr、Ser/Asn、Ala/Val、Ser/Gly、Tyr/Phe、Ala/Pro、Lys/Arg、Asp/Asn、Leu/lle、Leu/Val、Ala/Glu和Asp/Gly。保守取代的另一些实例是G至A;A至G、S;V至I、L、A、T、S;I至V、L、M;L至I、M、V;M至L、I、V;P至A、S、N;F至Y、W、H;Y至F、W、H;W至Y、F、H;R至K、E、D;K至R、E、D;H至Q、N、S;D至N、E、K、R、Q;E至Q、D、K、R、N;S至T、A;T至S、V、A;C至S、T、A;N至D、Q、H、S;Q至E、N、H、K、R。
可根据本领域中已知的程序例如定点诱变或丙氨酸扫描诱变(Cunningham和Wells,1989,Science 244:1081-1085)鉴定出多肽中的必需氨基酸。在后一种技术中,在分子中的每一残基处引入单丙氨酸突变,并且针对胞壁质酶活性测试所得的突变分子以鉴定出对分子的活性关键的氨基酸残基。另参见Hilton等人,1996,J.Biol.Chem.271:4699-4708。也可与推定接触位点氨基酸的突变相结合地通过例如核磁共振、晶体照相术、电子衍射或光亲和标记这样的技术所测定的通过结构的物理分析来测定酶或其他生物相互作用的活性位点。例如,参见de Vos等人,1992,Science255:306-312;Smith等人,1992,J.Mol.Biol.224:899-904;Wlodaver等人,1992,FEBS Lett.309:59-64。必需氨基酸的身份也可从与相关多肽的比对推断出。
WO 2013/076253公开了WO 2013/076253的SEQ ID NO:8的氨基酸残基D95和E97是催化残基。PCT/CN2017/075960公开了12种GH25胞壁质酶的催化氨基酸。这种比对可用于测定用于所要求保护的胞壁质酶的催化氨基酸的位置。在一个实施方式中,当将SEQ ID NO:39用于编号时,不对与E97和D95相对应的氨基酸做出改变。可通过将序列与已经测定了催化氨基酸的已知序列比对来测定GH24胞壁质酶的催化氨基酸(参见www.uniprot.org)。
在一个实施方式中,本发明涉及一种包含动物饲料添加剂、一种或多种蛋白源和一种或多种能量源的动物饲料,其特征在于,所述动物饲料还包含如以上所述的具有胞壁质酶活性的一种或多种多肽,其用于改善动物中营养物吸收。
在一个实施方式中,具有胞壁质酶活性的多肽的剂量水平为100至1000mg酶蛋白/kg动物饲料,例如200至900mg、300至800mg、400至700mg或500至600mg酶蛋白/kg动物饲料,或这些区间的任何组合。
在一个实施方式中,动物是单胃动物,例如猪或猪科动物(包括但不限于仔猪、成长猪和母猪);家禽(包括但不限于家禽、火鸡、鸭、鹌鹑、珍珠鸡、鹅、鸽子、乳鸽、鸡、肉鸡、产卵鸡、小母鸡(pullet)和雏鸡(chick));宠物(包括但不限于猫和狗);鱼(包括但不限于琥珀鱼(amberjack)、巨滑舌鱼(arapaima)、魮鱼(barb)、鲈鱼(bass)、蓝鱼(bluefish)、菖鲉(bocachico)、鲷科海鱼(bream)、大头鱼(bullhead)、卡叉马鱼(cachama)、鲤鱼(carp)、鲶鱼(catfish)、卡特拉鱼(catla)、遮目鱼(chanos)、红点鲑鱼(char)、丽体鱼(cichlid)、军曹鱼(cobia)、鳕鱼(cod)、莓鲈(crappie)、黄金河虎(dorada)、鼓鱼(drum)、鳗鱼(eel)、虾虎鱼(goby)、金鱼(goldfish)、丝足鱼(gourami)、石斑鱼(grouper)、瓜波特鱼(guapote)、大比目鱼(halibut)、爪哇鱼(java)、野鲮鱼(labeo)、莱鱼(lai)、泥鳅(loach)、鲭鱼(mackerel)、虱目鱼(milkfish)、银鲈(mojarra)、泥鱼(mudfish)、鲻鱼(mullet)、帕高鱼(paco)、珍珠斑点鱼(pearlspot)、佩杰瑞鱼(pejerrey)、河鲈鱼(perch)、狗鱼(pike)、鲳参鱼(pompano)、斜齿鳊(roach)、鲑鱼(salmon)、长丝异鳃鲶(sampa)、加拿大梭鲈(sauger)、黑鲈(sea bass)、海鲷鱼(seabream)、发光鱼(shiner)、睡鱼(sleeper)、黑鱼(snakehead)、鲷鱼(snapper)、锯盖鱼(snook)、比目鱼(sole)、刺足鱼(spinefoot)、鲟鱼(sturgeon)、翻车鱼(sunfish)、香鱼(sweetfish)、丁鲷(tench)、特罗尔鱼(terror)、罗非鱼(tilapia)、鳟鱼(trout)、鲔鱼(tuna)、多宝鱼(turbot)、白鳟鱼(vendace)、碧古鱼(walleye)和白鲑(whitefish));以及甲壳动物(包括但不限于河虾和对虾)。在一个更优选的实施方式中,动物选自由以下项组成的组:猪科动物、家禽、甲壳动物和鱼。在一个甚至更优选的实施方式中,动物选自由以下项组成的组:猪科动物、仔猪、成长猪、母猪、鸡、肉鸡、产卵鸡、小母鸡和雏鸡。
本发明的动物饲料可以为液体制剂。在一个实施方式中,具有胞壁质酶活性的多肽的剂量为介于0.001%至25%w/w之间的液体制剂,优选地0.01%至25%w/w、更优选地0.05%至20%w/w、更优选地0.2%至15%w/w、甚至更优选地0.5%至15%w/w或最优选地1.0%至10%w/w的多肽。
在一个实施方式中,所述液体制剂还包含20%-80%的多元醇(即多元醇的总量),优选地25%-75%的多元醇,更优选地30%-70%的多元醇,更优选地35%-65%的多元醇或最优选地40%-60%的多元醇。在一个实施方式中,所述液体制剂包含20%-80%的多元醇,优选地25%-75%的多元醇,更优选地30%-70%的多元醇,更优选地35%-65%的多元醇或最优选地40%-60%的多元醇,其中所述多元醇选自由以下项组成的组:甘油、山梨糖醇、丙二醇(MPG)、乙二醇、二甘醇、三甘醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、二丙二醇、平均分子量低于约600的聚乙二醇(PEG)和平均分子量低于约600的聚丙二醇(PPG)。在一个实施方式中,所述液体制剂包含20%-80%的多元醇(即多元醇的总量),优选地25%-75%的多元醇,更优选地30%-70%的多元醇,更优选地35%-65%的多元醇或最优选地40%-60%的多元醇,其中所述多元醇选自由以下项组成的组:甘油、山梨糖醇和丙二醇(MPG)。
在一个实施方式中,所述液体制剂还包含防腐剂,所述防腐剂优选地选自由以下项组成的组:山梨酸钠、山梨酸钾、苯甲酸钠和苯甲酸钾或它们的任何组合。在一个实施方式中,所述液体制剂包含0.02%至1.5%w/w的防腐剂,更优选地0.05%至1.0%w/w的防腐剂或最优选地0.1%至0.5%w/w的防腐剂。在一个实施方式中,所述液体制剂包含0.001%至2.0%w/w的防腐剂(即防腐剂的总量),优选地0.02%至1.5%w/w的防腐剂,更优选地0.05%至1.0%w/w的防腐剂或最优选地0.1%至0.5%w/w的防腐剂,其中所述防腐剂选自由以下项组成的组:山梨酸钠、山梨酸钾、苯甲酸钠和苯甲酸钾或它们的任何组合。
在一个实施方式中,所述液体制剂包含一种或多种配制剂(formulating agents)(例如本文所述的配制剂),优选地为选自由以下项组成的列表的配制剂:甘油、乙二醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、乳糖、淀粉、PVA、醋酸盐/酯和磷酸盐/酯,优选地选自由以下项组成的列表:1,2-丙二醇、1,3-丙二醇、硫酸钠、糊精、纤维素、硫代硫酸钠、高岭土和碳酸钙。
在一个实施方式中,所述蛋白源选自由以下项组成的组:大豆、野生大豆、菜豆(beans)、羽扇豆、花菜豆(tepary bean)、红花菜豆(scarlet runner bean)、斯姆吉姆豆(slimjim bean)、利马豆(lima bean)、法国菜豆(French bean)、蚕豆(Broad bean/favabean)、鹰嘴豆、扁豆、花生、西班牙花生、加拿大油菜(canola)、葵花籽、棉籽、油菜籽(油籽油菜)或豌豆,或者为经加工形式例如大豆粉、全脂大豆粉、大豆蛋白浓缩物(SPC)、发酵大豆粉(FSBM)、葵花粉、棉籽粉、油菜籽粉、鱼粉、骨粉、羽毛粉、乳清或它们的任何组合。
在一个实施方式中,所述能量源选自由以下项组成的组:玉蜀黍、玉米、高粱、大麦、小麦、燕麦、稻米、黑小麦、黑麦、甜菜、糖用甜菜、菠菜、马铃薯、木薯、藜麦、卷心菜、柳枝稷、小米、珍珠粟、狗尾粟,或者为经加工形式例如磨碎玉米、磨碎玉蜀黍、马铃薯淀粉、木薯淀粉、磨碎高梁、磨碎柳枝稷、磨碎小米、磨碎狗尾粟、磨碎珍珠粟或它们的任何组合。
在一个实施方式中,所述动物饲料添加剂还包含选自由以下项组成的列表的一种或多种组分:一种或多种附加酶;一种或多种微生物;一种或多种维生素;一种或多种矿物质;一种或多种氨基酸;和一种或多种其他饲料成分,如本文所述。
在一个实施方式中,所述动物饲料添加剂还包含一种或多种附加酶,优选地其中所述酶选自由以下项组成的组:植酸酶、半乳聚糖酶、α-半乳糖苷酶、β-半乳糖苷酶、蛋白酶、木聚糖酶、磷脂酶A1、磷脂酶A2、溶血磷脂酶、磷脂酶C、磷脂酶D、淀粉酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、β-木糖苷酶、乙酰木聚糖酯酶、阿魏酸酯酶、纤维素酶、纤维二糖水解酶、β-葡糖苷酶、支链淀粉酶、甘露糖苷酶、甘露聚糖酶和β-葡聚糖酶或它们的任何组合。
在一个实施方式中,所述动物饲料添加剂还包含一种或多种微生物,优选地其中所述微生物选自由以下项组成的组:枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)、多粘芽孢杆菌(Bacillus polymyxa)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、凝结芽孢杆菌(Bacilluscoagulans)、环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)、两歧双歧杆菌(Bifidobacteriumbifidum)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)、双歧杆菌属(Bifidobacteriumsp.)、肉杆菌属(Carnobacterium sp.)、丁酸梭菌(Clostridium butyricum)、梭菌属(Clostridium sp.)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)、肠球菌属(Enterococcus sp.)、乳杆菌属(Lactobacillus sp.)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、香肠乳杆菌(Lactobacillus farciminus)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)、唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)、乳球菌属(Lactococcus sp.)、明串珠菌属(Leuconostoc sp.)、埃氏巨球形菌(Megasphaera elsdenii)、巨球形菌属(Megasphaera sp.)、乳酸片球菌(Pediococsus acidilactici)、片球菌属(Pediococcus sp.)、特氏丙酸杆菌(Propionibacterium thoenii)、丙酸杆菌属(Propionibacterium sp)和链球菌属(Streptococcus sp.)或它们的任何组合。
在一个实施方式中,所述动物饲料添加剂还包含如本文所述的一种或多种维生素。在一个实施方式中,所述动物饲料添加剂还包含如本文所述的一种或多种矿物质。在一个实施方式中,所述动物饲料添加剂还包含如本文所述的一种或多种摄生素(eubiotics)。在一个实施方式中,所述动物饲料添加剂还包含如本文所述的一种或多种益生元。在一个实施方式中,所述动物饲料添加剂还包含如本文所述的一种或多种有机酸。在一个实施方式中,所述动物饲料添加剂还包含如本文所述的一种或多种摄生素。
酶制剂
可以将本发明的具有胞壁质酶活性的多肽配制为液体或固体。对于液体制剂,配制剂可以包括多元醇(例如甘油、乙二醇或丙二醇)、盐(例如氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾)或糖或糖衍生物(例如糊精、葡萄糖、蔗糖和山梨糖醇)。因此,在一个实施方式中,所述组合物是包含本发明的多肽和选自由以下项组成的列表的一种或多种配制剂的液体组合物:甘油、乙二醇、1,2-丙二醇、1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、糊精、葡萄糖、蔗糖和山梨糖醇。液体制剂可以在它已制粒之后被喷洒到饲料上或者可以被添加到给予动物的饮用水。
对于固体制剂,制剂可以例如作为颗粒体、喷雾干燥粉末或团块(例如如在WO2000/70034中所公开的)。配制剂可以包括盐(有机或无机锌、钠、钾或钙盐,例如醋酸钙、苯甲酸钙、碳酸钙、氯化钙、柠檬酸钙、山梨酸钙、硫酸钙、醋酸钾、苯甲酸钾、碳酸钾、氯化钾、柠檬酸钾、山梨酸钾、硫酸钾、醋酸钠、苯甲酸钠、碳酸钠、氯化钠、柠檬酸钠、硫酸钠、醋酸锌、苯甲酸锌、碳酸锌、氯化锌、柠檬酸锌、山梨酸锌、硫酸锌)、淀粉或糖或糖衍生物(例如蔗糖、糊精、葡萄糖、乳糖、山梨糖醇)。
在一个实施方式中,所述组合物是固体组合物,例如喷雾干燥组合物,包含本发明的具有胞壁质酶活性的多肽和选自由以下项组成的列表的一种或多种配制剂:氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、乳糖、淀粉和纤维素。在一个优选的实施方式中,配制剂选自以下化合物中的一种或多种:硫酸钠、糊精、纤维素、硫代硫酸钠、硫酸镁和碳酸钙。
本发明还涉及酶颗粒体/粒子,所述酶颗粒体/粒子包含与一种或多种附加酶任选地组合的本发明的具有胞壁质酶活性的多肽。颗粒体由芯和任选地围绕该芯的一个或多个包衣(外层)构成。
通常颗粒体的颗粒体/粒子尺寸(测量为等效球面直径(基于体积的平均粒子尺寸))是20-2000μm,特别是50-1500μm、100-1500μm或250-1200μm。
可通过以下来制备芯:使成分的共混物成粒,例如通过包括成粒技术的方法,所述成粒技术例如为结晶、沉淀、锅包衣、流化床包衣、流化床团聚、旋转雾化、挤出、成球(prilling)、滚圆、尺寸减小法、鼓成粒和/或高剪切成粒。
用于制备芯的方法可在Handbook of Powder Technology;Particle sizeenlargement,C.E.Capes;第1卷;1980;Elsevier中找到。制备方法包括已知的饲料和颗粒体制剂技术,例如:
a)喷雾干燥产品,其中液体含酶溶液在喷雾干燥塔中雾化以形成小液滴,所述小液滴在其沿干燥塔而下期间干燥以形成含酶粒子材料;
b)分层产品,其中酶被作为围绕预制惰性芯粒子的层包被,其中含酶溶液雾化,通常在流化床设备中进行,其中预制芯粒子流体化,并且含酶溶液附着到芯粒子并且干燥,以在芯粒子的表面上留下干燥酶的层。如果可找到期望尺寸的有用芯粒子,则可这样获得期望尺寸的粒子。在例如WO 97/23606中描述了这种类型的产品;
c)吸附芯粒子,其中不是将酶作为围绕芯的层包被,而是酶被吸附到芯的表面上和/或到芯的表面中。在WO 97/39116中描述了这样的工艺。
d)挤出或制粒产品,其中含酶膏剂被压为团粒或在压力下通过小开口挤出并切成随后干燥的粒子。由于用来制成挤出开口(通常为具有镗孔的板)的材料对经过挤出开口的容许压降设置限制,所以此类粒子通常具有相当大的尺寸。另外,当使用小开口时的非常高的挤出压力增加酶膏剂中的热发生,这对酶有害;
e)成球产品,其中含酶粉末悬浮在熔融蜡中并且悬浮液例如通过转盘喷雾器被喷洒到液滴快速固化的冷却室中(Michael S.Showell(编者);Powdered detergents;Surfactant Science Series;1998;第71卷;第140-142页;Marcel Dekker)。所获得的产品是其中酶均匀地分布在惰性材料中而不是集中于其表面上的产品。另外US 4,016,040和US4,713,245是与这种技术有关的文献;
f)混合成粒产品,其中液体被添加到例如常规成粒组分的干粉末组合物,酶是经由液体或粉末或二者引入的。液体和粉末被混合并且随着液体的水分被吸附在干粉末中,干粉末的组分将开始附着和团聚,并且粒子将变大,从而形成包含酶的颗粒体。在US 4,106,991以及相关文献EP 170360、EP 304332、EP 304331、WO 90/09440和WO 90/09428中描述了这样的工艺。在其中各种高剪切混合器可被用作成粒机的这种工艺的一个特定产品中,由作为酶的酶、填料和粘合剂等组成的颗粒体与纤维素纤维混合以增强粒子以产生所谓的T-颗粒体。增强粒子更稳固,释放更少的酶尘(enzymatic dust)。
g)尺寸减小,其中芯是通过磨碎或压碎含有酶的更大的粒子、团粒、片剂、坯块等而产生的。所想要的芯粒子级分是通过筛选磨碎或压碎产品而获得的。可循环利用尺寸过大或不足的粒子。在(Martin Rhodes(编者);Principles of Powder Technology;1990;第10章;John Wiley&Sons)中描述了尺寸减小;
h)流化床成粒,其涉及将颗粒悬浮在气流中并且经由喷嘴将液体喷洒到流体化粒子上。被喷洒液滴击中的粒子变湿并变得发粘。发粘粒子与其他粒子碰撞并附着到它们且形成颗粒体。
i)芯可以经受干燥,例如在流化床干燥器中。用于在饲料或去污剂行业中干燥颗粒体的其他已知方法可由技术人员使用。干燥优选地在从25℃至90℃的产品温度下进行。对于一些酶,重要的是包含酶的芯在包被之前含有少量水。如果在去除过量水之前包被水敏感的酶,则它将被困住在芯内并且这可负面地影响酶的活性。在干燥之后,芯优选地含有0.1-10%w/w的水。
芯可以包含附加材料,例如填料、纤维材料(纤维素或合成纤维)、稳定剂、增溶剂、悬浮剂、粘度调节剂、光球(light sphere)、增塑剂、盐、润滑剂和香精。
芯可以包含粘合剂,例如合成聚合物、蜡、脂肪或碳水化合物。
芯可以包含多价阳离子的盐、还原剂、抗氧化剂、过氧化物分解催化剂和/或酸性缓冲液组分,通常作为均匀共混物。
在一个实施方式中,芯包含选自由以下项组成的组的材料:盐(例如醋酸钙、苯甲酸钙、碳酸钙、氯化钙、柠檬酸钙、山梨酸钙、硫酸钙、醋酸钾、苯甲酸钾、碳酸钾、氯化钾、柠檬酸钾、山梨酸钾、硫酸钾、醋酸钠、苯甲酸钠、碳酸钠、氯化钠、柠檬酸钠、硫酸钠、醋酸锌、苯甲酸锌、碳酸锌、氯化锌、柠檬酸锌、山梨酸锌、硫酸锌)、淀粉或糖或糖衍生物(例如蔗糖、糊精、葡萄糖、乳糖、山梨糖醇)、糖或糖衍生物(例如蔗糖、糊精、葡萄糖、乳糖、山梨糖醇)、小有机分子、淀粉、面粉、纤维素以及矿物质和粘土材料(也称为水合铝页硅酸盐(hydrousaluminium phyllosilicate))。在一个实施方式中,芯包含粘土材料,例如高岭石或高岭土。
芯可以包含惰性粒子,其中酶吸附到所述惰性粒子,或者例如通过流化床包衣施加到表面上。
芯的直径可以为20-2000μm,特别是50-1500μm、100-1500μm或250-1200μm。
芯可以被至少一个包衣围绕,例如,以改善存储稳定性,以减少处理期间的尘形成,或者用于给颗粒体着色。任选的包衣可以包括盐和/或蜡和/或面粉包衣,或其他合适的包衣材料。
可以以按芯的重量计至少0.1%例如至少0.5%、1%或5%的量施加包衣。所述量可以为至多100%、70%、50%、40%或30%。
包衣优选地至少0.1μm厚,特别是至少0.5μm、至少1μm或至少5μm。在一些实施方式中,包衣的厚度低于100μm,例如低于60μm,或者低于40μm。
包衣应该通过形成基本上连续的层来包封芯单元。基本上连续的层将被理解为具有很少或没有孔的包衣,使得芯单元被很少或没有未包被区域地被包封或包裹。层或包衣应该特别是厚度均匀的。
包衣还可含有本领域中已知的其他材料,例如填料、抗粘剂、颜料、染料、增塑剂和/或粘合剂,诸如二氧化钛、高岭土、碳酸钙或滑石。
所述颗粒体可包含芯,所述芯包含本发明的具有胞壁质酶活性的多肽,一种或多种盐包衣和一种或多种蜡包衣。具有多种包衣的酶颗粒体的示例示于WO1993/07263、WO1997/23606和WO2016/149636中。
盐包衣可以包含按重量计至少60%的盐,例如,按重量计至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或至少99%。
可以从盐完全溶解的盐溶液或从其中细粒子小于50μm例如小于10μm或小于5μm的盐悬浮液添加盐。
盐包衣可以包含单盐或两种或更多种盐的混合物。盐可以是水溶性的,特别地具有在20℃下在100g的水中至少0.1g的溶解度,优选地至少0.5g/100g水,例如,至少1g/100g水,例如,至少5g/100g水。
盐可以是无机盐,例如,硫酸盐、亚硫酸盐、磷酸盐、膦酸盐、硝酸盐、盐酸盐或碳酸盐的盐或简单有机酸(少于10个碳原子,例如6个或更少的碳原子)的盐,例如柠檬酸盐、丙二酸盐或醋酸盐。这些盐中的阳离子的实例是碱金属离子或碱土金属离子、第一过渡系(例如纳、钾、镁、钙、锌或铝)的铵离子或金属离子。阴离子的实例包括氯化物、溴化物、碘化物、硫酸盐、亚硫酸盐、重亚硫酸盐、硫代硫酸盐、磷酸盐、一碱价磷酸盐、二碱价磷酸盐、次磷酸盐、焦磷酸二氢、四硼酸盐、硼酸盐、碳酸盐、重碳酸盐、硅酸盐、柠檬酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、丁二酸盐、山梨酸盐、乳酸盐、甲酸盐、醋酸盐、丁酸盐、丙酸盐、苯甲酸盐、酒石酸盐、抗坏血酸盐或葡糖酸盐。特别地,可以使用硫酸盐、亚硫酸盐、磷酸盐、膦酸盐、硝酸盐、盐酸盐或碳酸盐或简单有机酸的例如柠檬酸盐、丙二酸盐或醋酸盐的碱金属或碱土金属的盐。
包衣中的盐可以具有在20℃下高于60%、特别地高于70%、高于80%或高于85%的恒定湿度,或者它可以是这样的盐的另一水合形式(例如,无水物)。盐包衣可以是如在WO1997/05245、WO1998/54980、WO1998/55599、WO2000/70034、WO2006/034710、WO2008/017661、WO2008/017659、WO2000/020569、WO2001/004279、WO1997/05245、WO2000/01793、WO2003/059086、WO2003/059087、WO2007/031483、WO2007/031485、WO2007/044968、WO2013/192043、WO2014/014647和WO2015/197719中所述的或者是如在WO 2001/00042中所述的聚合物包衣。
合适的盐的具体实例是NaCl(CH20℃=76%)、Na2CO3(CH20℃=92%)、NaNO3(CH20℃=73%)、Na2HPO4(CH20℃=95%)、Na3PO4(CH25℃=92%)、NH4Cl(CH20℃=79.5%)、(NH4)2HPO4(CH20℃=93.0%)、NH4H2PO4(CH20℃=93.1%)、(NH4)2SO4(CH20℃=81.1%)、KCl(CH20℃=85%)、K2HPO4(CH20℃=92%)、KH2PO4(CH20℃=96.5%)、KNO3(CH20℃=93.5%)、Na2SO4(CH20℃=93%)、K2SO4(CH20℃=98%)、KHSO4(CH20℃=86%)、MgSO4(CH20℃=90%)、ZnSO4(CH20℃=90%)和柠檬酸钠(CH25℃=86%)。另一些实例包括NaH2PO4、(NH4)H2PO4、CuSO4、Mg(NO3)2、醋酸镁、醋酸钙、苯甲酸钙、碳酸钙、氯化钙、柠檬酸钙、山梨酸钙、硫酸钙、醋酸钾、苯甲酸钾、碳酸钾、氯化钾、柠檬酸钾、山梨酸钾、醋酸钠、苯甲酸钠、柠檬酸钠、硫酸钠、醋酸锌、苯甲酸锌、碳酸锌、氯化锌、柠檬酸锌和山梨酸锌。
盐可以是无水形式,或者它可以是水合盐,即具有结晶的结合水的结晶盐水合物,如在WO 99/32595中所描述的。具体实例包括无水硫酸钠(Na2SO4)、无水硫酸镁(MgSO4)、硫酸镁七水合物(MgSO4.7H2O)、硫酸锌七水合物(ZnSO4.7H2O)、磷酸氢二钠七水合物(Na2HPO4.7H2O)、硝酸镁六水合物(Mg(NO3)2(6H2O))、柠檬酸钠二水合物和醋酸镁四水合物。
优选地,例如使用流化床将盐作为盐的溶液来施加。
蜡包衣可以包含按重量计至少60%的蜡,例如,按重量计至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或至少99%。
蜡的具体实例是聚乙二醇;聚丙烯;巴西棕榈蜡;小烛树蜡;蜂蜡;氢化植物油或牛脂,例如聚乙二醇(PEG)、羟丙基甲基纤维素(MHPC)、聚乙烯醇(PVA)、氢化牛脂、氢化棕榈油、氢化棉籽和/或氢化大豆油;脂肪酸醇;甘油单酯和/或甘油二酯,例如甘油硬脂酸酯,其中硬脂酸酯是硬脂酸和棕榈酸的混合物;微晶蜡;石蜡;以及脂肪酸,例如氢化线性长链脂肪酸和它们的衍生物。一种优选的蜡是棕榈油或氢化棕榈油。
无尘颗粒体可以例如如美国专利号4,106,991和4,661,452中所公开的那样生产,并且可以任选地通过本领域中已知的方法来包被。包衣材料可以是蜡包衣材料和成膜包衣材料。蜡包衣材料的实例是平均分子量为1000至20000的聚(环氧乙烷)产品(聚乙二醇,PEG);具有从16至50个环氧乙烷单元的乙氧基化壬基酚;乙氧基化脂肪醇,其中醇含有从12至20个碳原子并且其中存在15至80个环氧乙烷单元;脂肪醇;脂肪酸;以及脂肪酸的甘油单酯及甘油二酯和甘油三酯。在GB 1483591中给出了适合于通过流化床技术应用的成膜包衣材料的实例。
颗粒体还可以包含一种或多种附加酶。则每种酶将存在于更多的颗粒体中从而保证酶的更均匀分布,并且由于不同的粒子尺寸,还减少不同酶的物理隔离。在ip.com公开IPCOM000200739D中公开了用于生产多酶共颗粒体的方法。
在WO 2013/188331中公开了通过使用共颗粒(co-granulates)配制酶的另一实例。
本发明还涉及根据EP 238,216中所公开的方法制备的经保护的酶。
因此,在另一个方面中,本发明提供了一种颗粒体,所述颗粒体包含:
(a)芯,所述芯包含根据本发明的具有胞壁质酶活性的多肽,以及
(b)包衣,所述包衣由围绕所述芯的一个或多个层组成。
在一个实施方式中,所述包衣包括如本文所述的盐包衣。在一个实施方式中,所述包衣包括如本文所述的蜡包衣。在一个实施方式中,所述包衣包括如本文所述的后面有蜡包衣的盐包衣。
包含具有胞壁质酶活性的多肽的液体制剂
在第三方面中,本发明涉及一种液体制剂,所述液体制剂包含具有胞壁质酶活性的一种或多种多肽。
在一个实施方式中,所述具有胞壁质酶活性的多肽是GH24胞壁质酶,优选地为真菌GH24胞壁质酶,优选地获自或能够获自子囊菌门,更优选地来自散囊菌纲。在一个实施方式中,所述具有胞壁质酶活性的多肽是GH25胞壁质酶,优选地为真菌GH25胞壁质酶,优选地获自或能够获自子囊菌门,更优选地来自散囊菌纲。
在一个实施方式中,具有胞壁质酶活性的多肽的剂量为介于0.001%至25%w/w之间的液体制剂,优选地0.01%至25%w/w、更优选地0.05%至20%w/w、更优选地0.2%至15%w/w、甚至更优选地0.5%至15%w/w或最优选地1.0%至10%w/w的多肽。
在一个实施方式中,所述液体制剂包含20%-80%的多元醇(即多元醇的总量),优选地25%-75%的多元醇,更优选地30%-70%的多元醇,更优选地35%-65%的多元醇或最优选地40%-60%的多元醇。在一个实施方式中,所述液体制剂包含20%-80%的多元醇,优选地25%-75%的多元醇,更优选地30%-70%的多元醇,更优选地35%-65%的多元醇或最优选地40%-60%的多元醇,其中所述多元醇选自由以下项组成的组:甘油、山梨糖醇、丙二醇(MPG)、乙二醇、二甘醇、三甘醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、二丙二醇、平均分子量低于约600的聚乙二醇(PEG)和平均分子量低于约600的聚丙二醇(PPG)。在一个实施方式中,所述液体制剂包含20%-80%的多元醇(即多元醇的总量),优选地25%-75%的多元醇,更优选地30%-70%的多元醇,更优选地35%-65%的多元醇或最优选地40%-60%的多元醇,其中所述多元醇选自由以下项组成的组:甘油、山梨糖醇和丙二醇(MPG)。
在一个实施方式中,所述液体制剂还包含防腐剂,所述防腐剂优选地选自由以下项组成的组:山梨酸钠、山梨酸钾、苯甲酸钠和苯甲酸钾或它们的任何组合。在一个实施方式中,所述液体制剂包含0.02%至1.5%w/w的防腐剂,更优选地0.05%至1.0%w/w的防腐剂或最优选地0.1%至0.5%w/w的防腐剂。在一个实施方式中,所述液体制剂包含0.001%至2.0%w/w的防腐剂(即防腐剂的总量),优选地0.02%至1.5%w/w的防腐剂,更优选地0.05%至1.0%w/w的防腐剂或最优选地0.1%至0.5%w/w的防腐剂,其中所述防腐剂选自由以下项组成的组:山梨酸钠、山梨酸钾、苯甲酸钠和苯甲酸钾或它们的任何组合。
在一个实施方式中,所述液体制剂包含一种或多种配制剂(例如本文所述的配制剂),优选地为选自由以下项组成的列表的配制剂:甘油、乙二醇、1,2-丙二醇或1-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、乳糖、淀粉、PVA、醋酸盐/酯和磷酸盐/酯,优选地选自由以下项组成的列表:1,2-丙二醇、1,3-丙二醇、硫酸钠、糊精、纤维素、硫代硫酸钠、高岭土和碳酸钙。
在一个实施方式中,所述液体制剂还包含选自由以下项组成的列表的一种或多种组分:一种或多种附加酶;一种或多种微生物;一种或多种维生素;一种或多种矿物质,如本文所述。
动物饲料
动物饲料组合物或膳食具有相对高的蛋白含量。可如在WO 01/58275的表B的第2-3栏中所指示的那样表征家禽和猪的膳食。可如在此表B的第4栏中所指示的那样表征鱼的膳食。此外,此类鱼的膳食的粗脂肪含量通常为200-310g/kg。
根据本发明的动物饲料组合物的粗蛋白含量为50-800g/kg,并且此外包含如本文所述的具有胞壁质酶活性的一种或多种多肽。
此外,或者在替代(对上述粗蛋白含量而言)方案中,本发明的动物饲料组合物具有10-30MJ/kg的可代谢能量含量;和/或0.1-200g/kg的钙含量;和/或0.1-200g/kg的有效磷含量;和/或0.1-100g/kg的蛋氨酸含量;和/或0.1-150g/kg的蛋氨酸加半胱氨酸含量;和/或0.5-50g/kg的赖氨酸含量。
在一些特定实施方式中,可代谢能量、粗蛋白、钙、磷、蛋氨酸、蛋氨酸加半胱氨酸和/或赖氨酸的含量在WO 01/58275的表B中的范围2、3、4或5中的任何一个内(R.2-5)。
粗蛋白被计算为氮(N)乘以系数6.25,即粗蛋白(g/kg)=N(g/kg)×6.25。通过Kjeldahl法(A.O.A.C.,1984,Official Methods of Analysis,第14版,Association ofOfficial Analytical Chemists,Washington DC)测定氮含量。
可基于1988年第九次修订版,国家研究会农业委员会动物营养会猪科动物营养会(subcommittee on swine nutrition,committee on animal nutrition,board ofagriculture,national research council),National Academy Press,Washington,D.C.,第2-6页和家禽饲料物质的能量质欧洲会议家禽研究Spelderholt中心和分会(European Table of Energy Values for Poultry Feed-stuffs,Spelderholt centrefor poultry research and extension),7361DA Beekbergen,荷兰.Grafisch bedrijfPonsen&looijen bv,Wageningen.ISBN 90-71463-12-5中的猪科动物中NRC公开营养物要求来计算可代谢能量。
全动物膳食中钙、有效磷和氨基酸的膳食含量是基于饲料表例如Veevoedertabel1997,gegevens over chemische samenstelling,verteerbaarheid en voederwaardevan voedermiddelen,Central Veevoederbureau,Runderweg 6,8219pk Lelystad.ISBN90-72839-13-7而计算出的。
在一个特定实施方式中,本发明的动物饲料组合物含有如上定义的至少一种植物蛋白。
本发明的动物饲料组合物还可以含有动物蛋白,例如肉粉和骨粉、羽毛粉和/或鱼粉,通常量为0-25%。本发明的动物饲料组合物还可以包含通常量为0-30%的具有可溶物的干酒糟(Dried Distillers Grains with Solubles,DDGS)。
在另外的特定实施方式中,本发明的动物饲料组合物含有0-80%的玉蜀黍;和/或0-80%的高粱;和/或0-70%的小麦;和/或0-70%的大麦;和/或0-30%的燕麦;和/或0-40%的大豆粉;和/或0-25%的鱼粉;和/或0-25%的肉粉和骨粉;和/或0-20%的乳清。
动物饲料可以包含植物蛋白。在一些特定实施方式中,植物蛋白的蛋白含量为至少10%(w/w)、20%(w/w)、30%(w/w)、40%(w/w)、50%(w/w)、60%(w/w)、70%(w/w)、80%(w/w)或90%(w/w)。植物蛋白可以源自植物蛋白源,例如豆科植物和谷类,例如来自豆科(Fabaceae)(豆科蝶形花亚科(Leguminosae))、十字花科(Cruciferaceae)、藜科(Chenopodiaceae)和禾本科(Poaceae)的材料,例如大豆粉、羽扇豆粉、菜籽粉和它们的组合。
在一个特定实施方式中,植物蛋白源是来自豆科的一种或多种植物(例如,大豆、羽扇豆、豌豆或菜豆)的材料。在另一特定实施方式中,植物蛋白源是来自藜科的一种或多种植物(例如,甜菜、糖用甜菜、菠菜或藜麦)的材料。植物蛋白源的另一些实例是油菜籽和卷心菜。在另一特定实施方式中,大豆是优选的植物蛋白源。植物蛋白源的另一些实例是谷类,例如大麦、小麦、黑麦、燕麦、玉蜀黍(玉米)、稻米和高粱。
可例如将动物膳食制成糊状(mash)饲料(非团粒)或团粒饲料。通常,将磨碎饲料物质混合并且根据针对目标物种的规定添加足够量的必需维生素和矿物质。可将酶作为固体或液体酶制剂添加。例如,对于糊状饲料,可以在成分混合步骤之前或期间添加固体或液体酶制剂。对于团粒饲料,也可以在饲料成分步骤之前或期间添加(液体或固体)胞壁质酶/酶制剂。通常,液体酶制剂包含任选地具有多元醇例如甘油、乙二醇或丙二醇的本发明的胞壁质酶,并且在制粒步骤之后添加,例如通过将液体制剂喷洒到团粒上。也可以在饲料添加剂或预混料中并入胞壁质酶。
在一个实施方式中,所述组合物包含一种或多种附加酶。在一个实施方式中,所述组合物包含一种或多种微生物。在一个实施方式中,所述组合物包含一种或多种维生素。在一个实施方式中,所述组合物包含一种或多种矿物质。在一个实施方式中,所述组合物包含一种或多种氨基酸。在一个实施方式中,所述组合物包含一种或多种其他饲料成分。
在另一实施方式中,所述组合物包含以下项中的一种或多种:本发明的多肽、一种或多种配制剂和一种或多种附加酶。在一个实施方式中,所述组合物包含以下项中的一种或多种:本发明的多肽、一种或多种配制剂和一种或多种微生物。在一个实施方式中,所述组合物包含以下项中的一种或多种:本发明的多肽、一种或多种配制剂和一种或多种维生素。在一个实施方式中,所述组合物包含以下项中的一种或多种:本发明的多肽和一种或多种矿物质。在一个实施方式中,所述组合物包含本发明的多肽、一种或多种配制剂和一种或多个氨基酸。在一个实施方式中,所述组合物包含以下项中的一种或多种:本发明的多肽、一种或多种配制剂和一种或多种其他饲料成分。
在另一个实施方式中,所述组合物包含以下项中的一种或多种:本发明的多肽、一种或多种配制剂和一种或多种组分,所述组分选自由以下项组成的列表:一种或多种附加酶;一种或多种微生物;一种或多种维生素;一种或多种矿物质;一种或多个氨基酸;和一种或多种其他饲料成分。
膳食中的最终胞壁质酶浓度在以下范围内:100至1000mg酶蛋白/kg动物饲料,例如200至900mg、300至800mg、400至700mg或500至600mg酶蛋白/kg动物饲料,或这些区间的任何组合。
附加酶
在另一实施方式中,本文所述的组合物任选地包含一种或多种酶。可以基于来自NC-IUBMB,1992的酶命名法手册对酶进行分类,另参见互联网:http://www.expasy.ch/enzyme/处的ENZYME网站。ENZYME是相对于酶命名法的信息库。其主要基于国际生物化学与分子生物学联合会命名委员会(IUB-MB)学术出版社有限公司1992的建议,并且其描述已经提供了EC(酶委员会)编号的每种类型的表征酶(Bairoch A.ENZYME数据库,2000,NucleicAcids Res 28:304-305)。这种IUB-MB酶命名法是基于其底物特异性,并且有时基于其分子机理;这样的分类未反映这些酶的结构特征。
在Henrissat等人,“The carbohydrate-active enzymes database(CAZy)in2013”,Nucl.Acids Res.(2014年月1日)42(D1):D490-D495中描述了某些糖苷水解酶例如内切葡聚醣、半乳聚糖酶、甘露聚糖酶、葡聚糖酶和半乳糖苷酶的另一分类;另参见www.cazy.org。
因此,本发明的组合物还可以包含至少一种其他酶,所述酶选自包含以下的组:乙酰木聚糖酯酶(EC 3.1.1.23)、酰基甘油脂肪酶(EC 3.1.1.72)、α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)、β-淀粉酶(EC 3.2.1.2)、阿拉伯呋喃糖苷酶(EC 3.2.1.55)、纤维二糖水解酶(EC 3.2.1.91)、纤维素酶(EC 3.2.1.4)、阿魏酸酯酶(EC 3.1.1.73)、半乳聚糖酶(EC 3.2.1.89)、α-半乳糖苷酶(EC 3.2.1.22)、β-半乳糖苷酶(EC 3.2.1.23)、β-葡聚糖酶(EC 3.2.1.6)、β-葡糖苷酶(EC 3.2.1.21)、甘油三酯脂肪酶(EC 3.1.1.3)、溶血磷脂酶(EC 3.1.1.5)、α-甘露糖苷酶(EC 3.2.1.24)、β-甘露糖苷酶(甘露聚糖酶)(EC 3.2.1.25)、植酸酶(EC 3.1.3.8、EC3.1.3.26、EC 3.1.3.72)、磷脂酶A1(EC 3.1.1.32)、磷脂酶A2(EC 3.1.1.4)、磷脂酶D(EC3.1.4.4)、支链淀粉酶(EC 3.2.1.41)、果胶酯酶(EC 3.1.1.11)、β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)或它们的任何组合。
在一个特定实施方式中,本发明的组合物包含半乳聚糖酶(EC 3.2.1.89)和β-半乳糖苷酶(EC 3.2.1.23)。
在一个特定实施方式中,本发明的组合物包含植酸酶(EC 3.1.3.8或3.1.3.26)。可商购的植酸酶的实例包括Bio-FeedTM植酸酶(诺维信公司)、
Figure BDA0002545519700000391
P、
Figure BDA0002545519700000392
NP和
Figure BDA0002545519700000393
HiPhos(帝斯曼营养产品公司)、NatuphosTM(巴斯夫公司)、NatuphosTME(巴斯夫公司)、
Figure BDA0002545519700000395
Figure BDA0002545519700000394
Blue(AB酶制剂公司)、
Figure BDA0002545519700000396
(浩卫制药公司)、Ave
Figure BDA0002545519700000397
植酸酶(Aveve Biochem)、
Figure BDA0002545519700000398
XP(范恩尼姆/杜邦公司)和
Figure BDA0002545519700000399
PHY(杜邦公司)。另一些优选的植酸酶包括在例如WO 98/28408、WO00/43503和WO 03/066847中描述的那些。
在一个特定实施方式中,本发明的组合物包含α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)。可商购的α-淀粉酶的实例包括
Figure BDA00025455197000003911
A和
Figure BDA00025455197000003910
RumiStarTM(帝斯曼营养产品公司)。
在一个实施方式中,本发明的组合物包含多组分酶产品,例如
Figure BDA00025455197000003912
Octazyme(Framelco)、
Figure BDA00025455197000003913
G2、
Figure BDA00025455197000003914
VP和
Figure BDA00025455197000003915
MultiGrain(帝斯曼营养产品公司)、
Figure BDA00025455197000003916
Excel或
Figure BDA00025455197000003917
Advance(安迪苏公司)。
摄生素
摄生素是被设计成给予胃肠道中微生物菌群的健康平衡的化合物。摄生素涵盖许多不同的饲料添加剂,例如在下面更详细地描述的益生菌、益生元、植物源性物质(精油)和有机酸。
益生菌
在一个实施方式中,动物饲料组合物还包含一种或多种附加益生菌。在一个特定实施方式中,动物饲料组合物还包含来自以下属中的一种或多种的细菌:乳杆菌、乳球菌、链球菌、芽孢杆菌、片球菌、肠球菌、明串珠菌、肉杆菌、丙酸杆菌、双歧杆菌、梭菌和巨球形菌或它们的任何组合。
在一个优选的实施方式中,动物饲料组合物还包含来自以下菌株的一种或多种的细菌:枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、屎肠球菌、肠球菌属和片球菌属、乳杆菌属、双歧杆菌属、嗜酸乳杆菌、乳酸片球菌、乳酸乳球菌、两歧双歧杆菌、特氏丙酸杆菌、香肠乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、丁酸梭菌、动物双歧杆菌动物亚种、罗伊氏乳杆菌、唾液乳杆菌唾液亚种、埃氏巨球形菌、丙酸杆菌属。
在一个更优选的实施方式中,组合物、动物饲料添加剂或动物饲料还包含来自枯草芽孢杆菌的以下菌株的一种或多种的细菌:3A-P4(PTA-6506)、15A-P4(PTA-6507)、22C-P1(PTA-6508)、2084(NRRL B-500130)、LSSA01(NRRL-B-50104)、BS27(NRRL B-501 05)、BS18(NRRL B-50633)、BS 278(NRRL B-50634)、DSM 29870、DSM 29871、DSM 32315、NRRL B-50136、NRRL B-50605、NRRL B-50606、NRRL B-50622和PTA-7547。
在一个更优选的实施方式中,组合物、动物饲料添加剂或动物饲料还包含来自短小芽孢杆菌的以下菌株的一种或多种的细菌:NRRL B-50016、ATCC 700385、NRRL B-50885或NRRL B-50886。
在一个更优选的实施方式中,组合物、动物饲料添加剂或动物饲料还包含来自地衣芽孢杆菌的以下菌株中的一种或多种的细菌:NRRL B 50015、NRRL B-50621或NRRL B-50623。
在一个更优选的实施方式中,组合物、动物饲料添加剂或动物饲料还包含来自解淀粉芽孢杆菌的以下菌株中的一种或多种的细菌:DSM 29869、DSM 29869、NRRL B 50607、PTA-7543,PTA-7549、NRRL B-50349、NRRL B-50606、NRRL B-50013、NRRL B-50151、NRRL B-50141、NRRL B-50147或NRRL B-50888。
动物饲料组合物中每种细菌菌株的细菌计数在1×104与1×1014CFU/kg干物质之间,优选地在1×106与1×1012CFU/kg干物质之间,并且更优选地在1×107与1×1011CFU/kg干物质之间。在一个更优选的实施方式中,动物饲料组合物中每种细菌菌株的细菌计数在1×108与1×1010CFU/kg干物质之间。
动物饲料组合物中每种细菌菌株的细菌计数在1×105与1×1015CFU/动物/天之间,优选地在1×107与1×1013CFU/动物/天之间,并且更优选地在1×108与1×1012CFU/动物/天之间。在一个更优选的实施方式中,动物饲料组合物中每种细菌菌株的细菌计数在1×109与1×1011CFU/动物/天之间。在一个实施方式中,益生菌的量为组合物的0.001重量%至10重量%。
在另一实施方式中,一种或多种细菌菌株以稳定孢子的形式存在。
商用产品的实例是
Figure BDA0002545519700000411
(帝斯曼营养产品公司)、Alterion(安迪苏公司)、Enviva PRO(杜邦动物营养公司)、
Figure BDA0002545519700000412
(混合酶+益生菌,杜邦动物营养公司)、
Figure BDA0002545519700000414
Figure BDA0002545519700000413
(Norel/赢创公司)和Gut
Figure BDA0002545519700000415
PY1(赢创公司)。
益生元
益生元是诱发微生物(例如,细菌和真菌)的生长或活性的物质,所述微生物有助于其宿主的健康。益生元通常是不可消化的纤维化合物,其不被消化地通过胃肠道的上部并且通过作为定殖在大肠的有益细菌的底物来刺激有益细菌的生长或活性。通常,益生元增加肠胃道中的双歧杆菌和乳酸细菌的数量或活性。
也可将酵母衍生物(灭活全酵母或酵母细胞壁)认为是益生元。它们常常包含甘露寡糖、酵母β-葡聚糖或蛋白内含物并且通常源自酵母酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)的细胞壁。
在一个实施方式中,益生元的量为组合物的0.001重量%至10重量%。酵母产品的实例是
Figure BDA0002545519700000421
和Agrimos(拉曼动物营养公司)。
植物源性物质(Phytogenics)
植物源性物质是源自草药、香料或其他植物的用作饲料添加剂的一组自然生长促长剂或非抗生素生长促长剂。植物源性物质可以是从精油/提取物、精油/提取物、单植物和植物的混合物(草药产品)或精油/提取物/植物的混合物(专用产品)制备的单一物质。
植物源性物质的实例是迷迭香、洋苏草、牛至、百里香、丁香和柠檬草。精油的实例是百里酚、丁香酚、间甲酚、香草醛、水杨酸盐、间苯二酚、愈创木酚、姜醇、熏衣草油、紫罗酮、鸢尾酮、桉油精、薄荷醇、薄荷油、α-蒎烯;柠檬烯、茴香脑、芳樟醇、二氢茉莉酮酸甲酯、香芹酚、丙酸/丙酸盐、醋酸/醋酸盐、丁酸/丁酸盐、迷迭香油、丁香油、香叶醇、松油醇、香茅醇、水杨酸戊酯和/或水杨酸苄酯、肉桂醛、植物多酚(单宁)、莪术和姜黄提取物。
在一个实施方式中,植物源性物质的量为组合物的0.001重量%至10重量%。商用产品的实例是
Figure BDA0002545519700000422
(帝斯曼营养产品公司);CinergyTM、BiacidTM、ProHacidTM Classic和ProHacidTM AdvanceTM(全部来自Promivi/嘉吉公司)和Envivo EO(杜邦动物营养公司)。
有机酸
有机酸(C1-C7)作为植物或动物组织的正常组分广泛地分布在自然界中。它们也通过碳水化合物主要在大肠中的微生物发酵而形成。它们常常作为抗生素生长促长剂的替换用于猪科动物和家禽生产中,因为它们对像鸡中的坏死性肠炎和幼猪中的大肠杆菌(Escherichia coli)感染这样的肠道问题具有预防效果。有机酸可作为单组分或通常为2或3种不同的有机酸的混合物出售。有机酸的实例是短链脂肪酸(例如甲酸、乙酸、丙酸、丁酸)、中链脂肪酸(例如己酸、辛酸、癸酸、月桂酸)、二/三羧酸(例如富马酸)、羟基酸(例如乳酸)、芳族酸(例如苯甲酸)、柠檬酸、山梨酸、苹果酸和酒石酸或其盐(通常是钠盐或钾盐,例如二甲酸钾或丁酸钠)。
在一个实施方式中,有机酸的量为组合物的0.001重量%至10重量%。商用产品的实例是Vevo
Figure BDA0002545519700000431
(帝斯曼营养产品公司)、
Figure BDA0002545519700000436
Figure BDA0002545519700000432
Lupro-
Figure BDA0002545519700000433
Lupro-
Figure BDA0002545519700000434
Lupro-
Figure BDA0002545519700000435
(巴斯夫公司)、n-Butyric Acid AF(OXEA)和AdimixPrecision(Nutriad)。
预混料
将如上文所例示的饲料添加剂的组合物并入到动物饲料(例如家禽饲料)在实践中使用浓缩物或预混料来进行。预混料表示一种或多种微量成分与稀释剂和/或载体的优选均匀的混合物。预混料用于促进微量成分在较大混合物中的均匀分散。可将根据本发明的预混料作为固体(例如,作为水溶性粉末)或液体添加到饲料成分或饮用水。
氨基酸
本发明的组合物还可以包含一种或多种氨基酸。用在动物饲料中的氨基酸的实例是赖氨酸、丙氨酸、β-丙氨酸、苏氨酸、蛋氨酸和色氨酸。在一个实施方式中,氨基酸的量为组合物的0.001重量%至10重量%。
维生素和矿物质
在另一实施方式中,动物饲料可以包含一种或多种维生素,例如一种或多种脂溶性维生素和/或一种或多种水溶性维生素。在另一实施方式中,动物饲料可以任选地包含一种或多种矿物质,例如一种或多种微量矿物质和/或一种或多种巨量矿物质。
通常脂溶性维生素和水溶性维生素以及微量矿物质形成旨在添加到饲料的所谓预混料的一部分,然而巨量矿物质通常被单独地添加到饲料。
脂溶性维生素的非限制性实例包括维生素A、维生素D3、维生素E和维生素K,例如维生素K3。
水溶性维生素的非限制性实例包括维生素C、维生素B12、生物素和胆碱、维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酸、叶酸和泛酸盐,例如Ca-D-泛酸。
微量矿物质的非限制性实例包括硼、钴、氯化物、铬、铜、氟化物、碘、铁、锰、钼、碘、硒和锌。
巨量矿物质的非限制性实例包括钙、镁、磷、钾和钠。
在一个实施方式中,维生素的量为组合物的0.001重量%至10重量%。在一个实施方式中,矿物质的量为组合物的0.001重量%至10重量%。
这些组分(按家禽和仔猪/猪例示)的营养要求列于WO 01/58275的表A中。营养要求意味着应该在膳食中以所指示的浓度提供这些组分。
在替代方案中,本发明的动物饲料添加剂包含WO 01/58275的表A中指定的各组分中的至少一种。至少一种是指每个、一种或多种、一种、或两种、或三种、或四种等直至全部十三种,或直至全部十五种单独组分。更特别地,此至少一种单独组分包含在本发明的添加剂中的量使得提供在表A的第四栏或第五栏或第六栏中指示的范围内的饲料内浓度。
在再一个实施方式中,本发明的动物饲料添加剂包含以下维生素中的至少一种,优选地以提供在下表1中指定的范围内的饲料内浓度(分别用于仔猪膳食和肉鸡膳食)。
表1:典型维生素推荐
维生素 仔猪膳食 肉鸡膳食
维生素A 10,000-15,000 1U/kg饲料 8-12,500 1U/kg饲料
维生素D3 1800-2000 1U/kg饲料 3000-5000 1U/kg饲料
维生素E 60-100mg/kg饲料 150-240mg/kg饲料
维生素K3 2-4mg/kg饲料 2-4mg/kg饲料
维生素B1 2-4mg/kg饲料 2-3mg/kg饲料
维生素B2 6-10mg/kg饲料 7-9mg/kg饲料
维生素B6 4-8mg/kg饲料 3-6mg/kg饲料
维生素B12 0.03-0.05mg/kg饲料 0.015-0.04mg/kg饲料
烟酸(维生素B3) 30-50mg/kg饲料 50-80mg/kg饲料
泛酸 20-40mg/kg饲料 10-18mg/kg饲料
叶酸 1-2mg/kg饲料 1-2mg/kg饲料
生物素 0.15-0.4mg/kg饲料 0.15-0.3mg/kg饲料
氯化胆碱 200-400mg/kg饲料 300-600mg/kg饲料
另一些饲料成分
本发明的组合物还可以包含着色剂、稳定剂、促生长添加剂和芳香化合物/调味剂、多不饱和脂肪酸(PUFA);产生活性氧的物质、抗氧化剂、抗微生物肽、抗真菌多肽和真菌毒素管理化合物(mycotoxin management compounds)。
着色剂的实例是类胡萝卜素,例如β-胡萝卜素、虾青素和叶黄素。
芳香化合物/调味剂的实例是甲氧甲酚、茴香脑、十内酯、十一内酯和/或十二内酯、紫罗酮、鸢尾酮、姜醇、哌啶、亚丙基苯并呋喃酮(propylidene phatalide)、亚丁基苯并呋喃酮(butylidene phatalide)、辣椒素和单宁。
抗微生物肽(AMP’s)的实例是CAP18、林可霉素A、Tritrpticin、Protegrin-1、Thanatin、防御素、乳铁蛋白(Lactoferrin)、乳铁素(Lactoferricin)和Ovispirin(例如Novispirin)(Robert Lehrer,2000)、菌丝霉素和他汀类,包括WO 03/044049和WO 03/048148中公开的化合物和多肽,以及保留抗微生物活性的上述的变体或片段。
抗真菌多肽(AFP’s)的实例是巨曲霉(Aspergillus giganteus)肽和黑曲霉(Aspergillus niger)肽,以及它们的保留抗真菌活性的变体和片段,如在WO 94/01459和WO 02/090384中所公开的。
多不饱和脂肪酸的实例是C18、C20和C22多不饱和脂肪酸,例如花生四烯酸、二十二碳六烯酸、二十碳五烯酸和γ-亚油酸。
产生活性氧的物质的实例是例如过硼酸盐、过硫酸盐或过碳酸盐的化学品;以及例如氧化酶、加氧酶或合成酶的酶。
抗氧化剂可用于限制可产生的活性氧物质的数量,使得活性氧物质的水平与抗氧化剂平衡。
真菌毒素例如脱氧雪腐镰孢霉烯醇(deoxynivalenol)、黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和伏马菌素可在动物饲料中出现并且可导致负面的动物表现或疾病。可将可管理(经由例如真菌毒素的灭活或经由真菌毒素的结合)真菌毒素的水平的化合物添加到饲料以改良这些负面的效果。真菌毒素管理化合物的实例是
Figure BDA0002545519700000451
Vitafix Ultra(Nuscience)、
Figure BDA0002545519700000452
Figure BDA0002545519700000453
Secure、FU
Figure BDA0002545519700000454
BBSH、
Figure BDA0002545519700000455
MTV(Biomin)、Mold-
Figure BDA0002545519700000456
Toxy-
Figure BDA0002545519700000457
Figure BDA0002545519700000458
Plus(Nutriad)。
改善动物消化率的方法
在另一个实施方式中,本发明涉及一种用于改善动物中营养物吸收的方法,所述方法包括向所述动物施用如以上所定义的包含具有胞壁质酶活性的多肽的动物饲料组合物。
在本发明中,所述改善是与相同但不包含胞壁质酶的饲料比较的。
在本发明中,饲喂胞壁质酶的动物中营养物之一的血液含量可以提高至少0.5%,例如至少1.0%,至少1.5%,或至少2.0%。
在本发明中,具有胞壁质酶活性的多肽的剂量水平可以为100至1000mg酶蛋白/kg动物饲料,例如200至900mg、300至800mg、400至700mg或500至600mg酶蛋白/kg动物饲料,或这些区间的任何组合。
在本发明中,动物是单胃动物,例如猪或猪科动物(包括但不限于仔猪、成长猪和母猪);家禽(包括但不限于家禽、火鸡、鸭、鹌鹑、珍珠鸡、鹅、鸽子、乳鸽、鸡、肉鸡、产卵鸡、小母鸡(pullet)和雏鸡(chick));宠物动物(例如猫和狗);鱼(包括但不限于琥珀鱼(amberjack)、巨滑舌鱼(arapaima)、魮鱼(barb)、鲈鱼(bass)、蓝鱼(bluefish)、菖鲉(bocachico)、鲷科海鱼(bream)、大头鱼(bullhead)、卡叉马鱼(cachama)、鲤鱼(carp)、鲶鱼(catfish)、卡特拉鱼(catla)、遮目鱼(chanos)、红点鲑鱼(char)、丽体鱼(cichlid)、军曹鱼(cobia)、鳕鱼(cod)、莓鲈(crappie)、黄金河虎(dorada)、鼓鱼(drum)、鳗鱼(eel)、虾虎鱼(goby)、金鱼(goldfish)、丝足鱼(gourami)、石斑鱼(grouper)、瓜波特鱼(guapote)、大比目鱼(halibut)、爪哇鱼(java)、野鲮鱼(labeo)、莱鱼(lai)、泥鳅(loach)、鲭鱼(mackerel)、虱目鱼(milkfish)、银鲈(mojarra)、泥鱼(mudfish)、鲻鱼(mullet)、帕高鱼(paco)、珍珠斑点鱼(pearlspot)、佩杰瑞鱼(pejerrey)、河鲈鱼(perch)、狗鱼(pike)、鲳参鱼(pompano)、斜齿鳊(roach)、鲑鱼(salmon)、长丝异鳃鲶(sampa)、加拿大梭鲈(sauger)、黑鲈(sea bass)、海鲷鱼(seabream)、发光鱼(shiner)、睡鱼(sleeper)、黑鱼(snakehead)、鲷鱼(snapper)、锯盖鱼(snook)、比目鱼(sole)、刺足鱼(spinefoot)、鲟鱼(sturgeon)、翻车鱼(sunfish)、香鱼(sweetfish)、丁鲷(tench)、特罗尔鱼(terror)、罗非鱼(tilapia)、鳟鱼(trout)、鲔鱼(tuna)、多宝鱼(turbot)、白鳟鱼(vendace)、碧古鱼(walleye)和白鲑(whitefish));以及甲壳动物(包括但不限于河虾和对虾)。在一个更优选的实施方式中,动物选自由以下项组成的组:猪科动物、家禽、甲壳动物和鱼。在一个甚至更优选的实施方式中,动物选自由以下项组成的组:猪科动物、仔猪、成长猪、母猪、鸡、肉鸡、产卵鸡、小母鸡和雏鸡。
改善动物消化率的用途
在另一个实施方式中,本发明涉及如以上所定义的包含具有胞壁质酶活性的多肽的动物饲料组合物用于改善动物中营养物吸收的用途。
在本发明中,所述改善是与相同但不包含胞壁质酶的饲料比较的。
在本发明中,在饲喂胞壁质酶的动物中营养物之一的血液含量可以提高至少0.5%,例如至少1.0%,至少1.5%,或至少2.0%。
在本发明中,具有胞壁质酶活性的多肽的剂量水平可以为100至1000mg酶蛋白/kg动物饲料,例如200至900mg、300至800mg、400至700mg或500至600mg酶蛋白/kg动物饲料,或这些区间的任何组合。
在本发明中,动物是单胃动物,例如猪或猪科动物(包括但不限于仔猪、成长猪和母猪);家禽(包括但不限于家禽、火鸡、鸭、鹌鹑、珍珠鸡、鹅、鸽子、乳鸽、鸡、肉鸡、产卵鸡、小母鸡(pullet)和雏鸡(chick));宠物动物(例如猫和狗);鱼(包括但不限于琥珀鱼(amberjack)、巨滑舌鱼(arapaima)、魮鱼(barb)、鲈鱼(bass)、蓝鱼(bluefish)、菖鲉(bocachico)、鲷科海鱼(bream)、大头鱼(bullhead)、卡叉马鱼(cachama)、鲤鱼(carp)、鲶鱼(catfish)、卡特拉鱼(catla)、遮目鱼(chanos)、红点鲑鱼(char)、丽体鱼(cichlid)、军曹鱼(cobia)、鳕鱼(cod)、莓鲈(crappie)、黄金河虎(dorada)、鼓鱼(drum)、鳗鱼(eel)、虾虎鱼(goby)、金鱼(goldfish)、丝足鱼(gourami)、石斑鱼(grouper)、瓜波特鱼(guapote)、大比目鱼(halibut)、爪哇鱼(java)、野鲮鱼(labeo)、莱鱼(lai)、泥鳅(loach)、鲭鱼(mackerel)、虱目鱼(milkfish)、银鲈(mojarra)、泥鱼(mudfish)、鲻鱼(mullet)、帕高鱼(paco)、珍珠斑点鱼(pearlspot)、佩杰瑞鱼(pejerrey)、河鲈鱼(perch)、狗鱼(pike)、鲳参鱼(pompano)、斜齿鳊(roach)、鲑鱼(salmon)、长丝异鳃鲶(sampa)、加拿大梭鲈(sauger)、黑鲈(sea bass)、海鲷鱼(seabream)、发光鱼(shiner)、睡鱼(sleeper)、黑鱼(snakehead)、鲷鱼(snapper)、锯盖鱼(snook)、比目鱼(sole)、刺足鱼(spinefoot)、鲟鱼(sturgeon)、翻车鱼(sunfish)、香鱼(sweetfish)、丁鲷(tench)、特罗尔鱼(terror)、罗非鱼(tilapia)、鳟鱼(trout)、鲔鱼(tuna)、多宝鱼(turbot)、白鳟鱼(vendace)、碧古鱼(walleye)和白鲑(whitefish));以及甲壳动物(包括但不限于河虾和对虾)。在一个更优选的实施方式中,动物选自由以下项组成的组:猪科动物、家禽、甲壳动物和鱼。在一个甚至更优选的实施方式中,动物选自由以下项组成的组:猪科动物、仔猪、成长猪、母猪、鸡、肉鸡、产卵鸡、小母鸡和雏鸡。
本发明的一些优选的实施方式描述于权利要求书中。
实施例
实施例1:胞壁质酶活性的测定
胞壁质酶的活性是通过测量在450nm下在微板读数器(Tecan Infinite M200)中测量的悬浮溶壁微球菌(Micrococcus lysodeikticus)ATTC No.4698(Sigma-AldrichM3770)的溶液的吸光率/光密度的减小(下降)来测定的。
溶壁微球菌底物的制备
在使用之前,将细胞悬浮于去离子水中至10mg细胞/mL的浓度并且测量450nm下的吸光率/光密度(OD)。然后调节细胞悬浮液,使得浊度测定(180μL缓冲液+20μL样品+20μL底物)中的细胞浓度等于OD450=1.0。经调节的细胞悬浮液然后在使用之前在环境温度下存储。在3小时内使用悬浮细胞。
柠檬酸-磷酸盐缓冲液pH 4的制备
将61.45ml的0.1M柠檬酸与38.55ml的0.2M磷酸氢二钠混合,并且用盐酸或氢氧化钠调节pH至4。
浊度测定中的胞壁质酶抗微生物活性的测量
待测量的胞壁质酶样品被在去离子水中稀释至50mg酶蛋白/L的浓度,并且保持在冰上直到使用。在96孔微量滴定板(Nunc)中添加180μL柠檬酸-磷酸盐缓冲液pH 4和20μL的稀释胞壁质酶样品并保持冷却(5℃)。为了开始活性测量,将20μL的底物(溶壁微球菌)添加到每个孔,并且在微板读数器中在37℃下启动450nm下的吸光率的动力学测量1小时。针对每个孔监测所测得的450nm下的吸光率并且随着时间的推移,在胞壁质酶具有胞壁质酶活性的情况下看到吸光率的下降。
在保温之后,抗溶壁微球菌的胞壁质酶活性被测定为在1小时之后每个孔的450nm下的△吸光率(开始值-结束值)。在来自SAS研究所有限公司的
Figure BDA0002545519700000491
版本12.1.0统计软件包中按对照测试p水平0.05使用Dunnett’s来计算显著性。
实施例2:胞壁质酶的克隆、表达和纯化
如在WO 2013/076253的实施例2中所述的那样克隆和表达SEQ ID NO:1至SEQ IDNO:2的GH25胞壁质酶。可以使用基本分子技术来克隆SEQ ID NO:3的GH25胞壁质酶(Ausubel等人,2003,Curr.Prot.Mol.Biol.,John Wiley&Sons,Cambridge,USA;Christgau等人,1995,Curr.Genet.27,135-141)。可以如在WO2009/102755中所述的那样克隆和表达SEQ ID NO:4的GH25胞壁质酶。如在WO2005/080559中所述的那样克隆和表达SEQ ID NO:5的GH25胞壁质酶。如在PCT/CN2017/075978中所述的那样克隆和表达SEQ ID NO:6至SEQ IDNO:59的GH25胞壁质酶。如在PCT/CN2017/075960中所述的那样克隆和表达SEQ ID NO:60至SEQ ID NO:62的GH25胞壁质酶。如在WO2017/000922中所述的那样克隆和表达SEQ ID NO:63至SEQ ID NO:71的GH24胞壁质酶。
实施例3:体内试验1
实验设计
位置:创新和应用科学中心,Mairinque–SP,巴西(I&ASC-MQ)
开始日期:2016年5月
结束日期:2016年6月
动物和收容
使用了600只1日龄的Ross雄性肉鸡,收容在完全随机设计的盒中。肉鸡以新的窝生长。
接种程序:在测试期间没有进行疫苗接种。禽鸟仅在孵化舍接受了常规疫苗接种和抗球虫病疫苗用于攻击。
肉鸡养在具有电和气体加热器、风扇和控制百叶窗(允许换气和控制温度)的传统的巴西肉鸡谷仓中。可自由获得水和饲料。
收容:鸡平栏:每个25只禽鸟的32个2.2m2的平栏。将禽鸟分配给3个处理,8个重复,每个25只禽鸟。每个处理总共200只禽鸟。测试时间为42天。
处理
1-阴性对照(NC)=0LSU(F)/kg胞壁质酶
2-NC+25,000LSU(F)/kg(466mg/kg)胞壁质酶
3-NC+35,000LSU(F)/kg(653mg/kg)胞壁质酶。
饲喂和处理
根据巴西的实际条件,基于玉米和大豆粉(起始,生长和最终阶段),用植酸酶(
Figure BDA0002545519700000502
HiPhos GT)-添加1000FYT/kg的饲料和商用水平的预混料维生素和矿物质来配制实验膳食(表2)。
表2:基础实验膳食的组成和营养物含量
Figure BDA0002545519700000501
Figure BDA0002545519700000511
*PX ROVIMIX AVES(DSM):维生素A9,000,000UI/kg;维生素D3 2,500,000UI/kg;维生素E 20,000UI/kg;维生素K3 2,500mg/kg;维生素B1 2,000mg/kg;维生素B2 6,000mg/kg;泛酸12g/kg;维生素B6 3,000mg/kg;维生素B12 15,000mcg/kg;烟酸35g/kg;叶酸1,500mg/kg;生物素100mg/kg;硒250mg/kg预混料。
**PX ROLIGOMIX AVES(DSM):铁100g/kg;铜20g/kg;锰130g/kg;钴2,000mg/kg;锌130mg/kg;碘2,000mg/kg预混料。
向所有处理添加肉鸡膳食中4ppm的阿卜酯(40mg/kg的
Figure BDA0002545519700000512
黄10%)用于测量在28日龄血清中的总类胡萝卜素含量。
实验参数和分析
总类胡萝卜素:
·添加肉鸡膳食中4ppm的阿卜酯(40mg/kg的
Figure BDA0002545519700000522
黄10%);
·在28日龄对每个处理的至少20只禽鸟用EDTA收集血液;
·用iCheckTM胡萝卜素测量总类胡萝卜素含量。
统计分析
用SAS统计包的GLM程序分析所有数据,通过Tukey测试在5%概率水平比较各方式。在必要时,在R环境进行非参数分析用于统计计算(版本3.2.2)。
结果和讨论
来自35,000LSU(F)/kg胞壁质酶膳食的禽鸟血中的总类胡萝卜素水平比阴性对照组高。在25,000LSU(F)/kg胞壁质酶组,类胡萝卜素水平与其他处理类似(表3)。
表3:28日龄时禽鸟血中的类胡萝卜素水平
Figure BDA0002545519700000521
通过Tukey测试,相同行的不同字母差异(P<0.05)。CV=变异系数。
结论
在本实验中,补充胞壁质酶导致类胡萝卜素吸收的显著改善。
实施例4:体内试验2
位置和收容
在Universitat Autònoma de Barcelona(UAB)的Servei de Granges i CampsExperimentals执行试验。
动物收容在16个平栏的单个房间中(在房间个各侧8个栏(1.5m x 1m))。根据Ross肉鸡管理指南控制环境条件(温度,相对湿度和通风率)。动物被安排有乳头饮水器(3个饮水器/栏)和人工盘式给料器(1个盘/栏)。
试验动物
使用了408只一日龄雄性肉鸡(Ross 308)(30/栏)。它们从当地孵化舍获得,称重,被单独在翅膀上加标签,并在完全随机化的设计中分配膳食处理。动物在胚内针对甘布罗(Gumboro)和马雷克(Marek)以及球虫病接种(Hypracox,在第1天粗喷雾)以及在出生后针对支气管炎(细喷雾)接种。
试验组
每栏分配给两个试验处理之一:A对照膳食(T1)或包括溶菌酶的相同膳食(T2)。
饲喂程序
配制基础试验膳食来满足或超过对Ross肉鸡推荐的营养需求。在表4中给出膳食的成分,矿物质-维生素预混料,计算和实际分析。基础膳食不含有任何酶或饲料添加剂(除了溶菌酶),抗球虫药,兽用抗生素或任何其他生长促进剂。所有膳食包括60mg/kg的加丽素黄(10%)。
表4:基础试验膳食的组成和营养物含量
Figure BDA0002545519700000531
Figure BDA0002545519700000541
1每千克膳食提供的矿物质-维生素预混料:维生素A:10,000I.U;维生素E:40I.U;维生素K3:3.0mg;维生素C:100mg;维生素B1:2.50mg;维生素B2:8.00mg;维生素B6:5.00mg;维生素B12:0.03mg;烟酸:50.0mg;泛酸钙:12.0mg;叶酸:1.50mg;生物素0.15mg;胆碱:450mg;乙氧基喹啉:54mg;Na:1.17g;Mg:0.8g;Mn:80mg;Fe:60mg;Cu:30mg;Zn:54mg;I:1.24mg;Co:0.6mg;Se:0.3mg
动物随机分配给两个试验处理,所述试验处理由以下组成:补充或不补充35,000LSU(F)/kg饲料(534mg溶菌酶/kg饲料)溶菌酶的平衡膳食。在试验期间,动物接受两种膳食(起始是0-21天,生长是21-35天),起始膳食是粉碎形式,生长是团粒形式。所有膳食包括二氧化钛(0.5%)作为消化率标记。
试验设计
在第9天,处死每笼21只禽鸟(随机选择),从每栏取(肝素化管)一个血液的合并样品(来自2-3只动物)至总体积达到5ml用于类胡萝卜素分析。
分析
通过HPLC测定类胡萝卜素(叶黄素、玉米黄质)、维生素A、维生素E和唾液酸的血浆浓度。
统计学分析
除非另有说明,结果表示为具有其标准误差的平均值。使用GLM程序考虑试验膳食作为主要作用利用ANOVA分析数据。使用Fisher’s精确性测试来分析频率。使用统计分析软件SAS版本9.2(SAS Institute Inc.)来进行所有统计分析。用于所有分析的显著性测定的α水平为P=0.05。P值>0.05和<0.10也被考虑为统计趋势。
结果和讨论
表5中显示了来自肉鸡的血浆中类胡萝卜素、维生素A、维生素E和唾液酸的含量的结果。
表5:在第9天来自肉鸡的血浆中类胡萝卜素、维生素A、维生素E和唾液酸的含量
Figure BDA0002545519700000551
与对照组(T1)相比,在第9天血浆中类胡萝卜素和包括维生素A和维生素E的维生素的含量显著增加。
唾液酸(神经氨酸的乙酰化衍生物)是糖蛋白和糖脂的碳水化合物链非还原末端的末端组分。SA的浓度在炎症和损伤过程后快速升高。这是首次在补充或不补充胞壁质酶的健康禽鸟中测量唾液酸。对于两个组,在第9天血浆中SA的含量显著提高,而补充胞壁质酶的组提高更多。
结论
本研究获得的结果证实加入微生物胞壁质酶对于改善肉鸡中的营养物吸收是有效的。
本文描述和要求保护的发明将不在范围上受本文公开的具体方面限制,因为这些方面旨在作为本发明的若干方面的说明。任何等效方面旨在为在本发明的范围内。实际上,根据前面的描述,除了本文示出和描述的修改之外的本发明的各种修改将变得对本领域的技术人员而言显而易见。此类修改也旨在落在所附权利要求的范围内。在冲突的情况下,以包括定义的本公开为准。
序列表
<110> 诺维信专利公司
帝斯曼知识产权资产管理有限公司
<120> 包含胞壁质酶的动物饲料组合物及其用途
<130> 33232-WO-PCT
<160> 71
<170> PatentIn版本3.5
<210> 1
<211> 208
<212> PRT
<213> 嗜碱枝顶孢菌
<400> 1
Arg Ile Pro Gly Phe Asp Ile Ser Gly Trp Gln Pro Thr Thr Asp Phe
1 5 10 15
Ala Arg Ala Tyr Ala Asn Gly Asp Arg Phe Val Tyr Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Phe Lys Ser Ser Ala Phe Ser Arg Gln Tyr Thr Gly
35 40 45
Ala Thr Gln Asn Gly Phe Ile Arg Gly Ala Tyr His Phe Ala Gln Pro
50 55 60
Ala Ala Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Arg Tyr Phe Ala Ser Asn Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Lys Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Ala Leu Asp Ile
85 90 95
Glu Tyr Asn Pro Asn Gly Ala Thr Cys Tyr Gly Leu Ser Gln Ser Ala
100 105 110
Met Val Asn Trp Ile Glu Asp Phe Val Thr Thr Tyr His Gly Ile Thr
115 120 125
Ser Arg Trp Pro Val Ile Tyr Thr Thr Thr Asp Trp Trp Thr Gln Cys
130 135 140
Thr Gly Asn Ser Asn Arg Phe Ala Asn Arg Cys Pro Leu Trp Ile Ala
145 150 155 160
Arg Tyr Ala Ser Ser Val Gly Thr Leu Pro Asn Gly Trp Gly Phe Tyr
165 170 175
Thr Phe Trp Gln Tyr Asn Asp Lys Tyr Pro Gln Gly Gly Asp Ser Asn
180 185 190
Trp Phe Asn Gly Asp Ala Ser Arg Leu Arg Ala Leu Ala Asn Gly Asp
195 200 205
<210> 2
<211> 213
<212> PRT
<213> 嗜碱枝顶孢菌
<400> 2
Ser Pro Ile Arg Arg Arg Ile Pro Gly Phe Asp Ile Ser Gly Trp Gln
1 5 10 15
Pro Thr Thr Asp Phe Ala Arg Ala Tyr Ala Asn Gly Asp Arg Phe Val
20 25 30
Tyr Ile Lys Ala Thr Glu Gly Thr Thr Phe Lys Ser Ser Ala Phe Ser
35 40 45
Arg Gln Tyr Thr Gly Ala Thr Gln Asn Gly Phe Ile Arg Gly Ala Tyr
50 55 60
His Phe Ala Gln Pro Ala Ala Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Arg Tyr
65 70 75 80
Phe Ala Ser Asn Gly Gly Gly Trp Ser Lys Asp Gly Ile Thr Leu Pro
85 90 95
Gly Ala Leu Asp Ile Glu Tyr Asn Pro Asn Gly Ala Thr Cys Tyr Gly
100 105 110
Leu Ser Gln Ser Ala Met Val Asn Trp Ile Glu Asp Phe Val Thr Thr
115 120 125
Tyr His Gly Ile Thr Ser Arg Trp Pro Val Ile Tyr Thr Thr Thr Asp
130 135 140
Trp Trp Thr Gln Cys Thr Gly Asn Ser Asn Arg Phe Ala Asn Arg Cys
145 150 155 160
Pro Leu Trp Ile Ala Arg Tyr Ala Ser Ser Val Gly Thr Leu Pro Asn
165 170 175
Gly Trp Gly Phe Tyr Thr Phe Trp Gln Tyr Asn Asp Lys Tyr Pro Gln
180 185 190
Gly Gly Asp Ser Asn Trp Phe Asn Gly Asp Ala Ser Arg Leu Arg Ala
195 200 205
Leu Ala Asn Gly Asp
210
<210> 3
<211> 218
<212> PRT
<213> 烟曲霉
<400> 3
Leu Pro Ser Gln Pro Glu Ala Arg Ala Thr Thr Val Gln Gly Phe Asp
1 5 10 15
Ile Ser Asn His Gln Lys Ser Val Asn Phe Glu Ala Ala Lys Lys Asp
20 25 30
Gly Ala Gln Phe Val Met Ile Lys Ala Thr Glu Gly Thr Thr Tyr Lys
35 40 45
Asp Thr Val Phe Asn Ser His Tyr Thr Gly Ala Thr Lys Ala Gly Leu
50 55 60
Leu Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Arg Pro Asp Lys Ser Thr Gly Ser
65 70 75 80
Thr Gln Ala Lys Phe Phe Leu Lys Asn Gly Gly Gly Trp Ser Asp Asp
85 90 95
Asn Arg Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Ile Glu Tyr Asn Pro Tyr Gly
100 105 110
Ala Thr Cys Tyr Gly Leu Ser His Ser Gln Met Val Ala Trp Ile His
115 120 125
Asp Phe Val Asn Glu Tyr His His Ala Thr Ser Arg Trp Pro Met Ile
130 135 140
Tyr Thr Thr Ala Asp Trp Trp Asn Arg Cys Thr Gly Asn Ala Lys Gly
145 150 155 160
Phe Gly Asp Lys Cys Pro Leu Val Leu Ala Ala Tyr Ser Ser Ser Pro
165 170 175
Pro Lys Thr Ile Pro Gly Asp Trp Lys Thr Trp Thr Ile Trp Gln Asn
180 185 190
Ser Asp Lys Tyr Lys His Gly Gly Asp Ser Asp Lys Phe Asn Gly Pro
195 200 205
Met Thr Gln Leu Arg Lys Leu Ala Ser Gly
210 215
<210> 4
<211> 208
<212> PRT
<213> 里氏木霉
<400> 4
Thr Val Pro Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ala Thr Val Asp Phe
1 5 10 15
Ala Lys Ala Tyr Ala Asp Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asp Pro Ser Phe Ser Asp His Tyr Thr Lys
35 40 45
Ala Thr Asn Ala Gly Phe Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Gln Pro
50 55 60
Ala Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Asn Tyr Phe Leu Lys His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Ala Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu
85 90 95
Glu Tyr Ala Pro Ser Gly Asp Ser Cys Tyr Gly Leu Ser Ala Ser Ala
100 105 110
Met Val Ser Trp Ile Asn Asp Phe Val Asn Thr Tyr His Ala Ala Thr
115 120 125
Thr Gln Tyr Pro Leu Ile Tyr Thr Ser Thr Ser Trp Trp Gln Leu Cys
130 135 140
Thr Gly Asn Asn Gly Ser Phe Gly Ser Lys Ser Pro Leu Val Ile Ala
145 150 155 160
Arg Tyr Ala Ser Ser Val Gly Ala Leu Pro Asn Gly Trp Ser Val Tyr
165 170 175
Thr Ile Trp Gln Asn Ser Asp Ala Ser Pro Trp Gly Gly Asp Asn Asp
180 185 190
Ile Phe Asn Gly Asn Leu Ala Gln Leu Gln Lys Ile Ala Arg Gly Ser
195 200 205
<210> 5
<211> 215
<212> PRT
<213> 红栓菌
<400> 5
Ser Pro Thr Pro Glu Lys Arg Ala Asn Pro Lys Gly Ile Asp Val Ser
1 5 10 15
Ala Tyr Gln Pro Asn Ile Asn Trp Ser Thr Val Lys Ala Asn Gly Ile
20 25 30
Ser Phe Ala Tyr Ile Lys Ala Thr Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asn Pro
35 40 45
Asp Phe Ser Ser Gln Tyr Thr Gly Ala Thr Asn Ala Gly Leu Ile Arg
50 55 60
Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro Asp Ser Ser Ser Gly Ala Thr Gln
65 70 75 80
Ala Lys Tyr Phe Leu Ala His Gly Gly Gly Trp Thr Ser Asp Gly Ile
85 90 95
Thr Leu Pro Gly Ala Leu Asp Ile Glu Tyr Asn Pro Ser Gly Ala Glu
100 105 110
Cys Tyr Gly Leu Ser Ala Ser Ala Met Val Ser Trp Ile Lys Asp Phe
115 120 125
Ser Asn Thr Tyr His Ser Ser Thr Gly Val Tyr Pro Val Ile Tyr Thr
130 135 140
Thr Thr Asp Trp Trp Thr Thr Cys Thr Gly Asn Ser Ala Ala Phe Ala
145 150 155 160
Ser Thr Asn Pro Leu Trp Ile Ala Arg Tyr Ala Ser Ser Ile Gly Thr
165 170 175
Leu Pro Ala Gly Trp Ser Tyr Thr Thr Phe Trp Gln Tyr Ala Asp Ser
180 185 190
Gly Pro Asn Pro Gly Asp Gln Asp Glu Phe Asn Gly Ser Met Ala Gly
195 200 205
Leu Lys Gln Leu Ala Leu Gly
210 215
<210> 6
<211> 207
<212> PRT
<213> Sporormia fimetaria
<400> 6
Ala Val Pro Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Ser Val Asn Tyr
1 5 10 15
Ala Gly Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Tyr Ile Asp Pro Lys Phe Ser Asp His Tyr Ile Gly
35 40 45
Ala Thr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Ala Tyr His Phe Ala Arg Pro
50 55 60
Ala Ala Ser Thr Gly Ala Ala Gln Ala Asn Tyr Phe Val Ser His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Ala Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Met
85 90 95
Glu Tyr Gly Ser Thr Ser Ala Cys His Gly Leu Ser Gln Ser Ala Met
100 105 110
Val Thr Trp Ile Thr Ser Phe Val Asn Gln Tyr Asn Ser Leu Thr Gly
115 120 125
Arg Tyr Pro Met Ile Tyr Thr Thr Ala Asp Trp Trp Gln Thr Cys Thr
130 135 140
Gly Asn Ser Ala Ala Phe Asn Thr Lys Ser Pro Leu Val Leu Ala Arg
145 150 155 160
Tyr Ser Ser Ser Ala Gly Thr Val Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Tyr Thr
165 170 175
Ile Trp Gln Phe Asn Asp Ala Tyr Ala Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Thr
180 185 190
Phe Asn Gly Asp Leu Ala Gly Leu Lys Arg Leu Ala Lys Gly Ser
195 200 205
<210> 7
<211> 201
<212> PRT
<213> 点孔座壳菌
<400> 7
Ala Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Ser Val Asn Phe
1 5 10 15
Gly Ala Ala Lys Ser Ser Gly Ala Gln Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Ser Tyr Thr Asp Pro Ser Phe Ser Ser His Tyr Thr Gly
35 40 45
Ala Thr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Leu
50 55 60
Asp Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Lys Tyr Phe Leu Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu
85 90 95
Glu Gly Ser Cys Val Leu Ser Ala Ser Ala Thr Val Ser Trp Ile Lys
100 105 110
Asp Phe Ser Asn Thr Tyr His Ser Ser Thr Gly Val Tyr Pro Leu Ile
115 120 125
Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Ser Ser Cys Thr Gly Asn Ser Lys Ala
130 135 140
Phe Ile Asp Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala Arg Tyr Ala Ser Ser Ala
145 150 155 160
Gly Thr Pro Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Tyr Thr Ile Trp Gln Tyr Asn
165 170 175
Asp Ala Tyr Lys Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Val Phe Asn Gly Asp Leu
180 185 190
Ala Gly Leu Lys Arg Leu Ala Lys Gly
195 200
<210> 8
<211> 201
<212> PRT
<213> 点孔座壳菌
<400> 8
Gln Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser Ser Tyr Gln Pro Ser Val Asp Phe
1 5 10 15
Ala Gly Ala Tyr Ala Asp Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Gly Tyr Ile Asp Pro Thr Phe Ser Asp His Tyr Val Gly
35 40 45
Ala Thr Asn Ala Gly Leu Leu Arg Gly Gly Tyr His Tyr Ala His Leu
50 55 60
Asp Ser Thr Ser Gly Ala Thr Gln Ala Gln Tyr Phe Leu Ala Asn Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu
85 90 95
Glu Gly Asp Cys Val Leu Ser Ala Ala Asp Ala Val Ala Trp Ile Lys
100 105 110
Asp Phe Ser Asp Thr Tyr His Ala Ser Thr Gly Val Tyr Pro Leu Leu
115 120 125
Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Ala Ser Cys Thr Gly Asp Ser Ser Ala
130 135 140
Phe Ile Asp Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala His Tyr Ala Asp Ala Ala
145 150 155 160
Gly Thr Pro Pro Gly Gly Trp Pro Phe Tyr Ser Phe Trp Gln Tyr Asn
165 170 175
Asp Ala Tyr Pro Tyr Gly Gly Asp Ser Glu Val Trp Asn Gly Asp Met
180 185 190
Asp Gly Leu Leu Arg Leu Ala Ser Gly
195 200
<210> 9
<211> 203
<212> PRT
<213> 轮枝菌属WMM742
<400> 9
Val Asp Ser Ser Ser Glu Val Ser Val Ala Ile Tyr Lys Lys Ala Leu
1 5 10 15
Gly Gln Gly Phe Thr Arg Ala Ile Phe Arg Gly Tyr Gln Glu Ala Cys
20 25 30
Ser Gln Gly Gly Arg Val Asp Pro Thr Phe Val Pro Ser Tyr Lys Asn
35 40 45
Ala Val Ala Ala Gly Tyr Lys Asp Phe Asp Ala Tyr Phe Phe Pro Cys
50 55 60
Thr Gly Lys Thr Asn Lys Cys Lys Pro Tyr Ala Ala Gln Leu Ala Glu
65 70 75 80
Leu Leu Asp Thr Ile Lys Gly Gln Lys Leu Ala Ile Arg Arg Ile Trp
85 90 95
Leu Asp Ile Glu Thr Asp Arg Val Cys Asn Pro Phe Asp Tyr Gly Ala
100 105 110
Gln Gly Asn Leu Ala Glu Ala Lys Lys Leu Val Ala Ala Phe Arg Asp
115 120 125
Ala Lys Leu Asp Trp Gly Ile Tyr Thr Ser Pro Thr Gln Trp Glu Thr
130 135 140
Ile Phe Gly Ala Lys Thr Val Glu Leu Ala Lys Asp Val Pro Leu Trp
145 150 155 160
Phe Ala Lys Phe Asp Asn Val Glu Thr Leu Glu Leu Lys Thr Pro Phe
165 170 175
Gly Gly Trp Thr Lys Ala Asp Ala Lys Gln Tyr Thr Asp Gln Ser Ala
180 185 190
Ser Asn Lys Phe Asp Leu Asn Val Phe Ser Ala
195 200
<210> 10
<211> 208
<212> PRT
<213> 轮枝菌属WMM742
<400> 10
Thr Val Gln Gly Phe Asp Val Ser Gly Tyr Gln Pro Thr Val Asn Trp
1 5 10 15
Gly Ala Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Arg Phe Val Met Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Gly Tyr Ile Ser Ser Ser Phe Gly Ser Gln Tyr Pro Gly
35 40 45
Ala Thr Asn Ala Gly Phe Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Leu Pro
50 55 60
Asp Arg Ser Ser Gly Ser Ala Gln Ala Asp Tyr Phe Leu Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Ile
85 90 95
Glu Tyr Asn Pro Tyr Gly Ala Thr Cys Tyr Gly Leu Ser Gln Gly Ala
100 105 110
Met Val Asn Trp Ile Ser Asp Phe Val Glu His Tyr Lys Ala Arg Thr
115 120 125
Thr Gln Tyr Pro Ile Ile Tyr Thr Thr Thr Asp Trp Trp Lys Thr Cys
130 135 140
Thr Gly Asn Ser Pro Ala Phe Gly Gln Lys Cys Pro Leu Ser Leu Ala
145 150 155 160
Arg Tyr Ser Ser Ser Val Gly Glu Ile Pro Asn Gly Trp Pro Phe Gln
165 170 175
Thr Phe Trp Gln Asn Ser Asp Lys Tyr Ala Tyr Gly Gly Asp Ser Gln
180 185 190
Ile Phe Asn Gly Ala Tyr Ser Gln Leu Gln Lys Ile Ala Arg Gly Gly
195 200 205
<210> 11
<211> 207
<212> PRT
<213> 马爪甲团囊菌
<400> 11
Ala Val Pro Gly Ile Asp Val Ser Gly Tyr Gln Gly Asn Val Asn Trp
1 5 10 15
Ala Asn Val Ala Asn Ala Gly Lys Lys Phe Ala Tyr Val Lys Ala Thr
20 25 30
Glu His Thr Asn Tyr Ile Asn Pro Tyr Phe Ala Gln Gln Tyr Asn Gly
35 40 45
Ala Tyr Asn Gln Gly Ile Ile Arg Gly Ala Tyr His Tyr Ala His Pro
50 55 60
Asn Gly Ala Ser Gly Ala Ser Gln Ala Asn Tyr Phe Leu Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Ala Asp Gly Lys Thr Leu Pro Gly Ala Val Asp Leu
85 90 95
Glu Tyr Gly Pro Asn Gly Ser Thr Cys Trp Gly Ile Ser Gln Ser Ala
100 105 110
Met Ile Ala Trp Ile Arg Asp Phe Ser Asn Thr Tyr Arg Ala Lys Thr
115 120 125
Gly Arg Pro Pro Val Ile Tyr Thr Ser Thr Ser Trp Trp Lys Thr Cys
130 135 140
Thr Gly Asn Tyr Gly Gly Phe Gly Asn Asp Asn Pro Leu Trp Ile Ala
145 150 155 160
Arg Tyr Ser Ser Thr Val Gly Glu Leu Pro Ala Gly Trp Pro Phe His
165 170 175
Ser Ile Trp Gln Asn Asn Asp Asn Ser Gly Val Gly Gly Asp Gly Asp
180 185 190
Ile Trp Asn Gly Asp Leu Ala Gly Leu Gln Arg Phe Ala Lys Gly
195 200 205
<210> 12
<211> 208
<212> PRT
<213> 淡紫拟青霉菌
<400> 12
Ala Val Lys Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Pro Asn Val Asp Phe
1 5 10 15
Ala Lys Ala Tyr Ala Asp Gly Ala Arg Phe Val Met Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asp Pro Ser Phe Ser Ser His Tyr Thr Gly
35 40 45
Ala Thr Lys Ala Gly Phe Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Arg Pro
50 55 60
Ala Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Lys Tyr Phe Ile Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Lys Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Met
85 90 95
Glu Tyr Gln Ser Ser Ser Ser Ala Cys Gly Gly Leu Ser Gln Ser Ala
100 105 110
Met Val Ser Trp Ile Asn Asp Phe Val Asn Thr Tyr His Ala Ala Thr
115 120 125
Gly Val Tyr Pro Leu Ile Tyr Thr Ser Thr Ser Trp Trp Thr Gln Cys
130 135 140
Thr Gly Asn Ser Ala Ala Phe Gly Ser Lys Cys Pro Leu Val Val Ala
145 150 155 160
Arg Tyr Ala Ser Ser Val Gly Thr Leu Pro Ala Gly Trp Gly Phe Tyr
165 170 175
Thr Phe Trp Gln Tyr Ser Asp Ala Ala Pro Trp Gly Gly Asp Ala Asp
180 185 190
Thr Phe Asn Gly Asp Ile Thr Ala Leu Lys Lys Ile Ala Asn Ala Gly
195 200 205
<210> 13
<211> 207
<212> PRT
<213> Trichobolus zukalii
<400> 13
Ala Val Pro Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Pro Ser Val Asn Tyr
1 5 10 15
Ala Gly Ala Tyr Asn Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asp Pro Val Phe Ser Thr His Tyr Thr Gly
35 40 45
Ala Thr Lys Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Arg Pro
50 55 60
Ala Ser Ser Ser Gly Ser Ala Gln Ala Asp Phe Phe Phe Lys Asn Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Ala Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Met
85 90 95
Glu Tyr Gly Ser Thr Ser Ser Cys His Gly Leu Ser Gln Thr Ala Met
100 105 110
Val Asn Trp Ile Ser Asp Phe Val Asn Arg Tyr Lys Thr Leu Ser Gly
115 120 125
Arg Tyr Pro Met Ile Tyr Thr Gly Tyr Tyr Trp Trp Val Glu Cys Thr
130 135 140
Gly Asn Ser Asn Lys Phe Ala Thr Thr Cys Pro Leu Val Leu Ala Arg
145 150 155 160
Tyr Ser Ser Ser Val Gly Glu Ile Pro Gly Gly Trp Gly Tyr Gln Thr
165 170 175
Ile Trp Gln Phe Asn Asp Lys Tyr Ala Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Ser
180 185 190
Phe Asn Gly Ser Leu Asp Arg Leu Lys Ala Leu Ala Lys Gly Thr
195 200 205
<210> 14
<211> 207
<212> PRT
<213> 桔青霉
<400> 14
Leu Ile His Ala Val Asp Ser Ser Ser Glu Val Ser Val Asp Ile Tyr
1 5 10 15
Lys Lys Ala Leu Ser Glu Gly Phe Ser Arg Ala Ile Phe Arg Gly Tyr
20 25 30
Gln Glu Ala Cys Ser Gln Gly Gly Arg Val Asp Pro Thr Phe Leu Pro
35 40 45
Ser Tyr Lys Asn Ala Gln Thr Ala Gly Tyr Lys Asp Phe Asp Ala Tyr
50 55 60
Phe Phe Pro Cys Thr Gly Ser Gly Asn Lys Cys Lys Pro Tyr Asp Val
65 70 75 80
Gln Ile Gly Glu Leu Val Asp Ala Ile Lys Lys Asn Asn Met Ala Ile
85 90 95
Arg Arg Ile Trp Val Asp Phe Glu Lys Asp Lys Thr Cys Asn Pro Phe
100 105 110
Asn Trp Asp Pro Lys Arg Asn Ile Asp Glu Ala Lys Arg Ile Ile Gly
115 120 125
Ala Val Arg Lys Thr Lys Phe Asp Phe Gly Val Tyr Thr Ser Ala Thr
130 135 140
Gln Trp Thr Ser Ile Phe Gly Ser Lys Asp Val Val Leu Ala Asn Asp
145 150 155 160
Val Pro Leu Trp Phe Ala Lys Phe Asp Asn Val Glu Asn Leu Asp Leu
165 170 175
Ala Gln Pro Phe Gly Gly Trp Thr Lys Ala Asp Gly Lys Gln Tyr Thr
180 185 190
Asp Lys Ser Ala Ser Lys Lys Phe Asp Leu Asn Val Phe Ser Ala
195 200 205
<210> 15
<211> 207
<212> PRT
<213> 珠芽枝鼻菌
<400> 15
Ala Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Ser Val Asn Phe
1 5 10 15
Gln Ala Ala Tyr Asn Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Tyr Ile Asp Pro Lys Phe Ser Ser His Tyr Thr Gly
35 40 45
Ala Thr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro
50 55 60
Asp Ser Ser Thr Gly Ala Ala Gln Ala Asp Phe Phe Leu Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu
85 90 95
Glu Ser Val Ser Gly Lys Ala Thr Cys Phe Gly Leu Ser Ala Ser Ser
100 105 110
Met Val Ala Trp Ile Lys Ser Phe Ser Asp Arg Tyr His Thr Arg Thr
115 120 125
Gly Arg Tyr Pro Met Leu Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Thr Thr Cys
130 135 140
Thr Gly Asn Ser Asn Ala Phe Val Asn Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala
145 150 155 160
Arg Tyr Ala Ser Ala Pro Gly Thr Ile Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Gln
165 170 175
Thr Ile Trp Gln Asn Ser Asp Ser Tyr Thr Tyr Gly Gly Asp Ser Asp
180 185 190
Ile Phe Asn Gly Ala Leu Ser Gly Leu Gln Lys Leu Ala Ser Gly
195 200 205
<210> 16
<211> 208
<212> PRT
<213> Umbelopsis westeae
<400> 16
Lys Leu Lys Gly Leu Asp Val Ser Gly Tyr Gln Pro Asn Val Ala Trp
1 5 10 15
Ser Thr Val Lys Ala Asn Gly Ala Ser Phe Ala Tyr Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Asn Tyr Lys Asn Pro Ser Phe Ala Gln Gln Tyr Asn Gly
35 40 45
Ala Tyr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Ser Tyr His Phe Ala Gln Pro
50 55 60
Ser Ser Ser Thr Gly Ala Ala Gln Ala Asn Tyr Phe Leu Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Pro Asp Gly Lys Thr Leu Pro Gly Ala Leu Asp Met
85 90 95
Glu Tyr Asn Pro His Gly Ser Thr Cys Tyr Gly Leu Ser Lys Asp Ala
100 105 110
Met Val Lys Trp Ile Lys Asp Phe Ser Asn Thr Tyr His Ser Ala Thr
115 120 125
Gly Arg Tyr Pro Val Ile Tyr Thr Thr Thr Ser Trp Trp Thr Thr Cys
130 135 140
Thr Gly Asn Ser Ala Ala Phe Gly Ala Thr Asn Pro Leu Trp Ile Ala
145 150 155 160
Arg Tyr Ser Ser Thr Ala Gly Asn Leu Pro Asn Gly Trp Ala Phe Tyr
165 170 175
Ser Phe Trp Gln Asn Ala Asp Ser Gly Ile Phe Pro Gly Asp Gln Asp
180 185 190
Ile Trp Asn Gly Asp Ala Ala Ala Leu Ser Arg Met Ala Lys Gly Ala
195 200 205
<210> 17
<211> 208
<212> PRT
<213> 接合菌属XZ2655
<400> 17
Thr Leu Pro Gly Leu Asp Val Ser Ser Tyr Gln Gly Asn Val Asn Trp
1 5 10 15
Gly Thr Val Ala Ser Gln Gly Ala Lys Phe Ala Tyr Val Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asn Pro Tyr Phe Ala Ser Gln Tyr Asp Gly
35 40 45
Ser Tyr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Ala Tyr His Phe Ala His Pro
50 55 60
Asp Ser Ser Ser Gly Ala Thr Gln Ala Asn Tyr Phe Leu Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Ala Asp Gly Lys Thr Leu Pro Gly Ala Leu Asp Ile
85 90 95
Glu Tyr Asn Pro Asn Gly Ala Glu Cys Tyr Gly Leu Ser Gln Leu Ala
100 105 110
Met Ile Ser Trp Ile Gln Asp Phe Ser Asn Thr Tyr His Ser His Thr
115 120 125
Gly Arg Tyr Pro Val Ile Tyr Thr Thr Thr Asp Trp Trp Thr Thr Cys
130 135 140
Thr Gly Asn Ser Ala Ala Phe Gly Thr Asn Asn Pro Leu Trp Ile Ala
145 150 155 160
Arg Tyr Ser Ser Ser Val Gly Thr Leu Pro Ala Gly Trp Gly Tyr Glu
165 170 175
Ser Phe Trp Gln Lys Ala Ser Ser Gly Thr Phe Pro Gly Asp Gln Asp
180 185 190
Ile Trp Asn Gly Asp Ala Ala Gly Leu Ser Arg Phe Ala Thr Gly Lys
195 200 205
<210> 18
<211> 206
<212> PRT
<213> 角毛壳菌
<400> 18
Thr Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser Gly Tyr Gln Pro Asn Val Asn Phe
1 5 10 15
Ala Ala Ala Tyr Ala Ala Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Ser Tyr Ile Ser Pro Ser Phe Ser Ser Gln Tyr Thr Gly
35 40 45
Ala Thr Asn Ala Gly Phe Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro
50 55 60
Gly Ala Ser Ser Gly Thr Thr Gln Ala Asp Tyr Phe Ile Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Thr Pro Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu
85 90 95
Glu Ser Glu Ser Ser Gly Thr Cys Trp Gly Leu Ser Ala Ser Ala Met
100 105 110
Val Ala Trp Ile Lys Asp Phe Ser Asp His Tyr His Ser Arg Met Gly
115 120 125
Val Tyr Pro Leu Leu Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Glu Glu Cys Thr
130 135 140
Gly Asn Ser Asn Ala Phe Val Asp Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala His
145 150 155 160
Tyr Ser Ser Ser Val Gly Thr Ile Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Glu Thr
165 170 175
Ile Trp Gln Asn Ser Asp Ser Tyr Ala Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Val
180 185 190
Phe Asn Gly Asp Leu Ala Gly Leu Gln Arg Leu Ala Arg Gly
195 200 205
<210> 19
<211> 207
<212> PRT
<213> 深红虫草
<400> 19
Leu Ile His Ala Val Asp Ser Ser Ser Glu Val Ser Val Asp Val Tyr
1 5 10 15
Lys Lys Ala Leu Ala Glu Gly Phe Thr Arg Ala Ile Phe Arg Gly Tyr
20 25 30
Gln Glu Ala Cys Ser Gln Gly Gly Arg Val Asp Pro Thr Phe Leu Pro
35 40 45
Ser Tyr Lys Asn Ala Gln Lys Ala Gly Tyr Lys Asp Phe Asp Ala Tyr
50 55 60
Phe Phe Pro Cys Thr Gly Ser Gly Asn Lys Cys Lys Pro Tyr Ala Lys
65 70 75 80
Gln Ile Gly Glu Leu Val Asp Ala Ile Glu Gly Asn Gln Leu Ala Ile
85 90 95
Arg Arg Ile Trp Ile Asp Ile Glu Thr Asp Lys Val Cys Asn Ala Phe
100 105 110
Asn Trp Gly Ala Glu Gly Asn Ile Gln Glu Ala Lys Lys Leu Ile Ala
115 120 125
Ala Val Arg Gly Thr Lys Arg Asp Phe Gly Ile Tyr Thr Ser Ala Thr
130 135 140
Gln Trp Glu Asn Ile Phe Gly Ser Arg Thr Val Glu Leu Ala Lys Asp
145 150 155 160
Val Pro Leu Trp Phe Ala Lys Phe Asp Asn Val Glu Thr Leu Glu Leu
165 170 175
Lys Thr Pro Phe Gly Gly Trp Thr Lys Ala Asp Ala Lys Gln Tyr Thr
180 185 190
Asp Lys Ser Ala Ser Lys Lys Phe Asp Leu Asn Val Phe Ser Ala
195 200 205
<210> 20
<211> 216
<212> PRT
<213> 青霉属 'qii'
<400> 20
Ser Thr Ile Gln Pro Arg Ala Ser Gly Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser
1 5 10 15
Ser Tyr Gln Gly Thr Val Asn Phe Ala Gly Ala Tyr Gly Ala Gly Ala
20 25 30
Arg Phe Val Met Ile Lys Ala Thr Glu Gly Thr Thr Tyr Ile Asp Ser
35 40 45
Thr Phe Ser Ser His Tyr Asp Gly Ala Thr Ser Ala Gly Leu Ile Arg
50 55 60
Gly Ala Tyr His Phe Ala His Pro Asp Ser Ser Ser Gly Ala Thr Gln
65 70 75 80
Ala Glu Tyr Phe Leu Ala His Gly Gly Gly Trp Thr Asn Asp Gly Ile
85 90 95
Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Ile Glu Tyr Asn Pro Ser Gly Ser Thr
100 105 110
Cys Tyr Gly Leu Ser Ala Ser Ala Met Val Ser Trp Ile Lys Asp Phe
115 120 125
Gly Glu Thr Tyr Asn Ser Lys Thr Gly Arg Tyr Pro Met Ile Tyr Ser
130 135 140
Thr Ala Asp Trp Trp Ser Thr Cys Thr Gly Asp Ser Thr Ser Phe Ser
145 150 155 160
Ser Asp Tyr Pro Leu Val Leu Ala Gln Tyr Ala Ser Ser Ile Ser Thr
165 170 175
Val Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Gln Ser Phe Trp Gln Asn Ala Asp Ser
180 185 190
Tyr Ser Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Leu Trp Asn Gly Ser Glu Asp Ser
195 200 205
Leu Lys Thr Phe Ala Lys Gly Ser
210 215
<210> 21
<211> 218
<212> PRT
<213> 曲霉属nov XZ2609
<400> 21
Leu Pro Thr Lys Leu Ala Ala Arg Tyr Ser Thr Val Gln Gly Phe Asp
1 5 10 15
Val Ser Asn Tyr Gln Pro Asn Val Asp Phe Ser Ala Ala Lys Ser Ala
20 25 30
Gly Ala Glu Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr Glu Gly Thr Asp Tyr Lys
35 40 45
Asp Thr Tyr Phe Asn Ser His Tyr Thr Gly Ala Thr Asn Ala Gly Leu
50 55 60
Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Arg Pro Asp Lys Ser Ser Gly Thr
65 70 75 80
Ala Gln Ala Glu Tyr Phe Leu Ala His Gly Gly Gly Trp Ser Lys Asp
85 90 95
Gly Arg Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Ile Glu Tyr Asn Pro Tyr Gly
100 105 110
Ala Thr Cys Tyr Gly Leu Ser His Ser Ala Met Val Ser Trp Val Asn
115 120 125
Glu Phe Leu Asn Glu Tyr His Ser Lys Thr Gly Val Tyr Pro Leu Leu
130 135 140
Tyr Thr Thr Ala Asp Trp Trp Asn Gln Cys Thr Gly Asn Ala His Gly
145 150 155 160
Phe Gly Asn Lys Ser Pro Leu Val Leu Ala Ser Tyr Ser Ser Glu Ser
165 170 175
Pro Arg Thr Val Pro Gly Asp Trp Gln Thr Trp Thr Ile Trp Gln Asn
180 185 190
Ala Asp Lys Tyr Lys Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Ile Phe Asn Gly Asp
195 200 205
Leu Thr Gln Leu Lys Lys Ile Val Glu Gly
210 215
<210> 22
<211> 204
<212> PRT
<213> 拟青霉属XZ2658
<400> 22
Thr Val Ala Gly Phe Asp Ile Ser Asn Tyr Gln Pro Ser Val Asn Phe
1 5 10 15
Ala Lys Ala Tyr Ala Asp Gly Ala Arg Phe Ala Thr Glu Gly Thr Thr
20 25 30
Tyr Ile Asp Pro Ser Phe Ser Ser His Tyr Thr Gly Ala Thr Asn Ala
35 40 45
Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro Gly Ser Ser Thr
50 55 60
Gly Ala Ala Gln Ala Thr Tyr Phe Leu Ala His Gly Gly Gly Trp Ser
65 70 75 80
Lys Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Ile Asp Leu Glu Tyr Asn Pro
85 90 95
Ser Gly Ala Thr Cys Tyr Gly Leu Ser Thr Ser Ala Met Val Ser Trp
100 105 110
Ile Ser Asp Phe Val Glu Thr Tyr His Ser Lys Thr Gly Val Tyr Pro
115 120 125
Leu Ile Tyr Thr Ser Thr Ser Trp Trp Asn Gln Cys Thr Gly Ser Ser
130 135 140
Thr Ala Phe Ala Ser Lys Cys Pro Leu Val Val Ala Arg Tyr Ala Ser
145 150 155 160
Ser Val Gly Thr Leu Pro Ala Gly Trp Gly Tyr Gln Thr Ile Trp Gln
165 170 175
Asn Ser Asp Ser Ser Pro Trp Gly Gly Asp Asn Asp Ile Phe Asn Gly
180 185 190
Ser Leu Asp Gln Leu Lys Arg Ile Ala Asn Ala Ser
195 200
<210> 23
<211> 203
<212> PRT
<213> 拟青霉属XZ2658
<400> 23
Ala Val Gln Gly His Asp Val Ser His Trp Gln Gly Asn Ile Asn Trp
1 5 10 15
Gly Ala Val Lys Ala Ala Gly Val Lys Phe Thr Tyr Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Ser Thr Asn Tyr Ile Asp Pro Ser Phe Asn Ala Asn Tyr Val Gly
35 40 45
Ala Thr Asn Thr Gly Leu Ile Arg Gly Ala Tyr His Phe Ala Arg Pro
50 55 60
Gly Asp Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Asn Tyr Phe Val Ser His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Ala Asp Gly Arg Thr Leu Pro Gly Ala Leu Asp Leu
85 90 95
Glu Ala Gly Cys Ser Gly Leu Ser Gln Ser Ala Met Thr Ala Trp Ile
100 105 110
Arg Asp Phe Ser Asn Thr Tyr His Ala Arg Thr Gly Arg Phe Pro Val
115 120 125
Ile Tyr Thr Thr Thr Ser Trp Trp Lys Thr Cys Thr Gly Asn Ala Ser
130 135 140
Gly Phe Gln Asn Asp His Pro Leu Trp Ile Ala Arg Trp Gly Pro Ser
145 150 155 160
Pro Gly Glu Leu Pro Ala Gly Tyr Gly Phe His Thr Phe Trp Gln Tyr
165 170 175
Ala Asp Lys Gly Pro Leu Pro Gly Asp Gln Asp Asn Phe Asn Gly Asp
180 185 190
Glu Ala Gly Leu Ala Arg Leu Ala Arg Gly Ser
195 200
<210> 24
<211> 208
<212> PRT
<213> Pycnidiophora cf dispera
<400> 24
Ala Val Ser Gly Met Asp Ile Ser His Tyr Gln Gly Thr Asn Tyr Asn
1 5 10 15
Phe Ala Gly Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala
20 25 30
Thr Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asp Pro Gln Phe Ser Ala Asn Tyr Ile
35 40 45
Gly Ala Thr Asn Ala Gly Phe Ile Arg Gly Ala Tyr His Phe Ala Arg
50 55 60
Pro Ala Ala Ser Thr Gly Ala Val Gln Ala Ser Tyr Phe Val Ser His
65 70 75 80
Gly Gly Gly Trp Ser Ser Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp
85 90 95
Met Glu Tyr Gly Ser Thr Ser Thr Cys His Gly Leu Ser Val Ser Ala
100 105 110
Met Asn Thr Trp Ile Ala Ser Phe Val Asn Gln Tyr Lys Ser Leu Thr
115 120 125
Gly Ala Tyr Pro Met Ile Tyr Thr Thr Ala Asp Trp Trp Lys Thr Cys
130 135 140
Thr Gly Asp Ser Thr Ala Trp Asn Thr Lys Cys Pro Leu Val Leu Ala
145 150 155 160
Arg Tyr Ser Ser Ser Val Gly Thr Ile Pro Gly Gly Trp Pro Tyr His
165 170 175
Thr Ile Trp Gln Tyr Ser Asp Ser Tyr Ala Tyr Gly Gly Asp Ser Asp
180 185 190
Thr Phe Asn Gly Asp Leu Ala Gly Leu Lys Arg Leu Ala Lys Gly Ser
195 200 205
<210> 25
<211> 210
<212> PRT
<213> Thermomucor indicae-seudaticae
<400> 25
Tyr Gln Thr Gly Leu Asp Val Ser Ala Leu Thr Ser Thr Ser Ser Phe
1 5 10 15
Ser Cys Ala Lys Asn Leu Gly Tyr Asp His Val Ile Ala Arg Cys Tyr
20 25 30
Met Glu Ala Tyr Gly Asn Asn Pro Gly Gly Lys Val Asp Pro Asn Cys
35 40 45
Tyr Ser Asn Tyr Lys Asn Ala Lys Ala Ala Gly Phe Thr Ser Val Asp
50 55 60
Ile Tyr Met Phe Pro Cys Thr Gly Arg Ser Thr Cys Lys Ser Pro Ala
65 70 75 80
Thr Gln Val Gln Glu Ile Val Asp Tyr Val Gly Ala His Lys Met Ile
85 90 95
Val Gly Thr Leu Trp Leu Asp Val Glu Val Asp Ser Ala Ala Asn Asn
100 105 110
Trp Pro Ser Thr Ser Glu Ala Arg Ser Thr Leu Arg Ala Phe Lys Thr
115 120 125
Ala Leu Asp Lys Ser Gly Trp Lys Trp Gly Val Tyr Ser Ser Lys Ser
130 135 140
Gln Trp Thr Arg Ile Thr Gly Ser Ala Ser Trp Val Leu Asp Pro Ser
145 150 155 160
Val Pro Leu Trp Tyr Ser His Tyr Asp Asp Thr Leu Ser Phe Ser Asp
165 170 175
Tyr Pro Ser His Ala Phe Gly Gly Trp Ser Lys Pro Thr Ile Lys Gln
180 185 190
Tyr Thr Gly Asp Ala Ser Phe Cys Ser Ala Ser Trp Asp Lys Asn Tyr
195 200 205
Tyr Gly
210
<210> 26
<211> 207
<212> PRT
<213> 虫草棒束孢
<400> 26
Leu Thr His Ala Val Asp Ser Ser Ser Glu Val Ser Val Asp Ile Tyr
1 5 10 15
Lys Lys Ala Leu Gly Gln Gly Phe Thr Arg Ala Ile Phe Arg Gly Tyr
20 25 30
Gln Glu Ala Cys Ser Leu Gly Gly Arg Val Asp Pro Thr Phe Val Pro
35 40 45
Ser Tyr Lys Asn Ala Val Ala Ala Gly Tyr Lys Asp Phe Asp Ala Tyr
50 55 60
Phe Phe Pro Cys Thr Gly Thr Thr Asn Lys Cys Lys Pro Tyr Ala Thr
65 70 75 80
Gln Leu Ala Glu Leu Leu Asp Thr Ile Ser Ser Gln Lys Leu Ala Ile
85 90 95
Arg Arg Ile Trp Leu Asp Ile Glu Thr Asp Gln Val Cys Ser Pro Phe
100 105 110
Asp Tyr Gly Ala Gln Gly Asn Ile Ala Glu Ala Lys Lys Leu Val Ala
115 120 125
Ala Phe Arg Ala Ala Lys His Asp Trp Gly Ile Tyr Thr Ser Pro Thr
130 135 140
Gln Trp Glu Thr Ile Phe Gly Ser Lys Thr Phe Val Leu Ala Asn Asp
145 150 155 160
Val Pro Leu Trp Phe Ala Lys Phe Asp Asn Val Glu Thr Leu Asp Leu
165 170 175
Lys Thr Pro Phe Gly Gly Trp Thr Lys Ala Asp Ala Lys Gln Tyr Thr
180 185 190
Asp Gln Ser Ala Ser Lys Lys Phe Asp Leu Asn Val Phe Ser Ala
195 200 205
<210> 27
<211> 207
<212> PRT
<213> 轮枝菌属WMM742
<400> 27
Ser Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Ser Val Asn Phe
1 5 10 15
Gly Ala Ala Tyr Ala Asp Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Tyr Arg Asp Pro Lys Phe Ser Glu His Tyr Gly Gly
35 40 45
Ala Thr Lys Ala Gly Phe Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Gln Pro
50 55 60
Ala Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Asn Phe Phe Leu Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu
85 90 95
Glu Tyr Gly Pro Asn Gly Asn Thr Cys Tyr Gly Leu Gly Pro Ala Ser
100 105 110
Met Arg Ser Trp Ile Ser Asp Phe Val Glu Thr Tyr His Ala Lys Thr
115 120 125
Gly Arg Tyr Pro Leu Ile Tyr Thr Ser Thr Ser Trp Trp Lys Thr Cys
130 135 140
Thr Gly Asn Thr Ser Leu Phe Ala Asp Lys Cys Pro Leu Val Val Ala
145 150 155 160
Arg Tyr Asn Ser Gln Val Gly Glu Leu Pro Ala Gly Trp Gly Phe Tyr
165 170 175
Thr Phe Trp Gln Phe Asn Asp His Tyr Lys His Gly Gly Asp Ser Asp
180 185 190
Val Phe Asn Gly Ala Tyr Ser Gln Leu Gln Lys Ile Ala Thr Gly
195 200 205
<210> 28
<211> 208
<212> PRT
<213> 柄孢壳属t180-6
<400> 28
Ala Val Gln Gly Phe Asp Val Ser His Trp Gln Ser Ser Val Asn Phe
1 5 10 15
Ala Ala Ala Tyr Asn Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Ser Asn Asn Tyr Ile Asp Pro Lys Phe Asn Thr Tyr Tyr Pro Ala
35 40 45
Ala Thr Ser Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro
50 55 60
Gly Glu Thr Thr Gly Ala Val Gln Ala Asp Tyr Phe Ile Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Ser Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu
85 90 95
Glu Asn Ala Ser Gly Tyr Pro Ala Cys Trp Gly Leu Ser Gln Ser Ala
100 105 110
Met Val Ser Trp Ile Lys Ala Phe Ser Asp Arg Tyr Lys Ala Arg Thr
115 120 125
Gly Val Tyr Pro Met Leu Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Thr Ser Cys
130 135 140
Thr Gly Asn Ser Asn Ala Phe Val Asn Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala
145 150 155 160
Arg Tyr Ala Ser Ser Pro Gly Thr Ile Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Gln
165 170 175
Thr Ile Trp Gln Asn Ser Asp Ser Tyr Thr Tyr Gly Gly Asp Ser Asp
180 185 190
Ile Phe Asn Gly Asp Leu Ala Gly Leu Lys Arg Leu Ala Lys Gly Ser
195 200 205
<210> 29
<211> 217
<212> PRT
<213> 黄畸枝霉
<400> 29
Gly Pro Lys Glu Phe Glu Ser Arg Ala Ser Gly Val Gln Gly Phe Asp
1 5 10 15
Ile Ser Gly Trp Gln Ser Asn Val Asn Phe Ala Gly Ala Tyr Asn Ser
20 25 30
Gly Ala Arg Phe Val Met Ile Lys Ala Ser Glu Gly Thr Thr Phe Lys
35 40 45
Asp Arg Gln Phe Ser Asn His Tyr Ile Gly Ala Thr Lys Ala Gly Phe
50 55 60
Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Leu Pro Asp Val Ser Ser Ala Thr
65 70 75 80
Ala Gln Val Asn His Phe Leu Ala Ser Gly Gly Gly Trp Ser Arg Asp
85 90 95
Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Ile Glu Ser Asn Pro Tyr Gly
100 105 110
Ala Gln Cys Tyr Gly Leu Asp Ala Gly Arg Met Val Ala Trp Ile Arg
115 120 125
Glu Phe Val Asp Ala Tyr Lys Arg Ala Thr Gly Arg Tyr Pro Leu Ile
130 135 140
Tyr Thr Ser Pro Ser Trp Trp Gln Thr Cys Thr Gly Asn Ser Asn Ala
145 150 155 160
Phe Ile Asp Lys Cys Pro Leu Val Leu Ala Arg Trp Ala Ser Ser Pro
165 170 175
Gly Thr Pro Pro Gly Gly Trp Pro Phe His Ser Phe Trp Gln Tyr Ala
180 185 190
Asp Ser Tyr Gln Phe Gly Gly Asp Ala Gln Val Phe Asn Gly Asp Glu
195 200 205
Ala Gly Leu Lys Arg Met Ala Leu Gly
210 215
<210> 30
<211> 208
<212> PRT
<213> 多毛垂幕菇
<400> 30
Leu Val Tyr Gly Val Asp Ser Ser Ser Leu Val Pro Val Ala Thr Tyr
1 5 10 15
Gln Lys Ala Leu Gly Glu Gly Phe Thr Lys Ala Val Ile Arg Gly Tyr
20 25 30
Glu Glu Ala Cys Gly Val Gly Gly Glu Val Asp Pro Asn Phe Val Pro
35 40 45
Ser Tyr Lys Asn Ala Arg Ala Ala Gly Tyr Thr Asp Ile Asp Met Tyr
50 55 60
Trp Phe Pro Cys Asn Gly Ser Thr His Ser Cys Lys Ser Tyr Ala Ala
65 70 75 80
Gln Leu Ala Ala Ile Ala Ala Ala Phe Ser Ala Asn Ala Met Lys Ile
85 90 95
Gly Thr Ile Trp Ile Asp Ile Glu Lys Asp Ala Ala Ile Cys Asn Asn
100 105 110
Trp Asp Tyr Gly Thr Ala Gly Asn Leu Ala Gln Ala Lys Ala Leu Ile
115 120 125
Ala Ala Ala Lys Ala Ser Gly Phe Asn Phe Gly Ile Tyr Ser Ser Pro
130 135 140
Gly Glu Trp Ser Thr Ile Phe Gly Ser Thr Ser Val Val Val Asp Asn
145 150 155 160
Ser Ala Pro Leu Trp Phe Ala Thr Tyr Asn Asn Val Gln Thr Leu Thr
165 170 175
Leu Gly Thr Pro Phe Gly Gly Trp Ser Thr Ala Val Gly His Gln Tyr
180 185 190
Thr Asp Val Ser Ala Ser Gly Leu Phe Asp Leu Asn Val Phe Ala His
195 200 205
<210> 31
<211> 201
<212> PRT
<213> 弯头曲霉
<400> 31
Ala Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Ser Val Asp Tyr
1 5 10 15
Ala Gly Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Arg Phe Val Met Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asp Pro Ala Phe Ser Thr His Tyr Thr Gly
35 40 45
Ala Thr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Arg Pro
50 55 60
Gly Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Glu Tyr Phe Leu Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Thr Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu
85 90 95
Glu Ala Gly Cys Ser Gly Leu Ser Ala Ser Ala Met Val Ser Trp Ile
100 105 110
Gln Asp Phe Gly Glu Thr Tyr Lys Ala Ser Thr Gly Arg Tyr Pro Met
115 120 125
Ile Tyr Thr Thr Thr Ser Trp Trp Ser Ser Cys Thr Gly Asn Asn Gly
130 135 140
Gly Phe Gly Asp Tyr Pro Leu Val Leu Ala Arg Trp Ala Ser Ser Pro
145 150 155 160
Gly Glu Leu Pro Asn Gly Trp Ser Val His Ser Phe Trp Gln Asn Ala
165 170 175
Asp Thr Tyr Glu Tyr Gly Gly Asp Ser Glu Ile Trp Asn Gly Ser Gln
180 185 190
Glu Asn Leu Val Lys Phe Ala Ser Gln
195 200
<210> 32
<211> 202
<212> PRT
<213> Ascobolus stictoideus
<400> 32
Ala Val Pro Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Thr Val Asn Phe
1 5 10 15
Ala Asp Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Tyr Lys Asp Pro Lys Phe Ser Ser His Tyr Thr Gly
35 40 45
Ala Thr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Arg Pro
50 55 60
Ala Ser Ser Thr Gly Ala Val Gln Ala Gln Tyr Phe Val Ser Asn Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Leu Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu
85 90 95
Glu Gly Asp Cys Ala Gly Leu Ser Gln Ala Gly Met Val Ser Trp Ile
100 105 110
Thr Ser Phe Val Asn Lys Tyr Lys Ala Leu Thr Thr Arg Tyr Pro Met
115 120 125
Ile Tyr Thr Thr Asn Ser Trp Trp Asn Thr Cys Thr Gly Asn Ser Gln
130 135 140
Ala Phe Ser Ala Asn Cys Pro Leu Val Ile Ala Arg Tyr Asn Ser Val
145 150 155 160
Val Gly Thr Ile Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Tyr Thr Ile Trp Gln Phe
165 170 175
Asn Asp Ala Tyr Ser Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Thr Phe Asn Gly Ala
180 185 190
Tyr Ser Gln Leu Val Lys Leu Ala Thr Gly
195 200
<210> 33
<211> 207
<212> PRT
<213> 锥毛壳属
<400> 33
Thr Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Pro Thr Val Asn Tyr
1 5 10 15
Ala Gly Ala Tyr Asn Ala Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asp Pro Ser Phe Ser Thr His Tyr Asn Gly
35 40 45
Ala Thr Lys Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro
50 55 60
Gly Val Thr Thr Gly Ala Ala Glu Ala Asn Phe Phe Leu Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu
85 90 95
Glu Ser Glu Gly Ser Asn Pro Gln Cys Trp Gly Leu Ser Thr Ser Gly
100 105 110
Met Val Ala Trp Ile Lys Ser Phe Ser Asp Arg Tyr His Thr Val Thr
115 120 125
Gly Arg Tyr Pro Met Leu Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Ser Thr Cys
130 135 140
Thr Gly Asn Ser Asn Ala Phe Val Asn Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala
145 150 155 160
Arg Tyr Ala Ser Ala Pro Gly Thr Ile Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Gln
165 170 175
Thr Ile Trp Gln Asn Ser Asp Ser Tyr Ser Tyr Gly Gly Asp Ser Asp
180 185 190
Ile Phe Asn Gly Asn Leu Ala Ser Leu Gln Lys Leu Ala Thr Gly
195 200 205
<210> 34
<211> 202
<212> PRT
<213> 开裂炭轮菌
<400> 34
Ala Val Pro Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Ser Val Asp Phe
1 5 10 15
Gly Ala Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Tyr Gln Asp Pro Lys Phe Ser Ser His Tyr Ala Gly
35 40 45
Ala Thr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Arg Pro
50 55 60
Ala Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Thr Phe Phe Leu Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu
85 90 95
Glu Gly Asp Cys Ala Gly Leu Ser Thr Ser Ala Met Val Ser Trp Ile
100 105 110
Arg Asp Phe Ser Asp Thr Tyr His Gly Lys Thr Gly Arg Tyr Pro Leu
115 120 125
Leu Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Ser Ser Cys Thr Gly Gly Ser Ser
130 135 140
Ala Phe Val Asn Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala Arg Tyr Ala Ser Ser
145 150 155 160
Pro Gly Ala Leu Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Tyr Thr Ile Trp Gln Phe
165 170 175
Asn Asp Ala Tyr Lys Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Thr Phe Asn Gly Asp
180 185 190
Leu Thr Gln Leu Lys Lys Leu Ala Ser Gly
195 200
<210> 35
<211> 201
<212> PRT
<213> 座坚壳属
<400> 35
Ala Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Ser Val Asn Phe
1 5 10 15
Ala Gly Ala Tyr Ser Ala Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Ser Tyr Ile Asp Pro Lys Phe Ser Ser His Tyr Ile Gly
35 40 45
Ala Thr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Leu
50 55 60
Gly Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Asn Tyr Phe Leu Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu
85 90 95
Glu Gly Asp Cys Val Leu Ser Ala Ser Gly Ala Val Ala Trp Ile Lys
100 105 110
Asp Phe Ser Asp Thr Tyr His Ser Lys Thr Gly Val Tyr Pro Leu Leu
115 120 125
Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Ser Ser Cys Thr Gly Asn Ser Asn Ala
130 135 140
Phe Val Asn Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala Arg Tyr Ser Ser Ser Ala
145 150 155 160
Gly Thr Pro Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Tyr Thr Ile Trp Gln Tyr Asn
165 170 175
Asp Ala Tyr Ala Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Val Phe Asn Gly Asp Met
180 185 190
Ala Gly Leu Leu Arg Leu Ala Lys Gly
195 200
<210> 36
<211> 202
<212> PRT
<213> 粪盘菌属ZY179
<400> 36
Ala Val Pro Gly Phe Asp Ile Ser His Trp Gln Ser Ser Val Asn Phe
1 5 10 15
Ala Ser Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Tyr Lys Asp Pro Lys Phe Ser Ser His Tyr Thr Gly
35 40 45
Ala Thr Lys Ala Gly Phe Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Arg Pro
50 55 60
Ala Ser Ser Thr Gly Ala Ala Gln Ala Gln Phe Phe Ala Ser Asn Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu
85 90 95
Glu Gly Asp Cys Ala Gly Leu Ser Gln Ser Gly Met Val Ser Trp Ile
100 105 110
Ser Ser Phe Val Asn Lys Tyr Arg Ser Leu Thr Gly Arg Tyr Pro Met
115 120 125
Ile Tyr Thr Thr Asn Ser Trp Trp Val Thr Cys Thr Gly Asn Ser Lys
130 135 140
Ala Phe Ser Ser Asn Cys Pro Leu Val Ile Ala Arg Tyr Asn Ser Val
145 150 155 160
Val Gly Thr Ile Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Tyr Thr Ile Trp Gln Tyr
165 170 175
Asn Asp Ala Tyr Lys Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Thr Phe Asn Gly Ala
180 185 190
Tyr Ser Gln Leu Val Lys Leu Ala Thr Gly
195 200
<210> 37
<211> 206
<212> PRT
<213> Curreya属XZ2623
<400> 37
Thr Val Pro Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Gly Thr Val Asn Phe
1 5 10 15
Ala Gly Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asp Pro Asn Phe Ser Asn Asn Tyr Val Gly
35 40 45
Ala Thr Asn Ala Lys Phe Ile Arg Gly Ala Tyr His Phe Ala Arg Pro
50 55 60
Asp Gly Gly Ser Gly Ser Thr Gln Ala Gln Phe Phe His Ser His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Ile
85 90 95
Glu Tyr Gly Pro Thr Ser Thr Cys Tyr Gly Leu Ser Thr Ser Ala Met
100 105 110
Val Thr Trp Ile Thr Asp Phe Val Asn Glu Tyr His Ala Leu Thr Gly
115 120 125
Arg Tyr Pro Leu Ile Tyr Thr Thr Asn Asp Trp Trp Asn Thr Cys Thr
130 135 140
Gly Asn Thr Asn Lys Phe Ser Thr Thr Cys Pro Leu Val Leu Ala Arg
145 150 155 160
Tyr Ser Ser Ser Val Gly Thr Ile Pro Gly Gly Trp Pro Phe Gln Thr
165 170 175
Ile Trp Gln Phe Asn Asp Asn Tyr Ala Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Thr
180 185 190
Phe Asn Gly Asp Leu Ala Gly Leu Lys Lys Leu Ala Thr Gly
195 200 205
<210> 38
<211> 202
<212> PRT
<213> 盾壳霉属
<400> 38
Ala Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ala Ser Val Asn Phe
1 5 10 15
Ala Ala Ala Tyr Ser Gly Gly Leu Arg Phe Val Tyr Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Tyr Gln Asp Pro Ala Phe Ser Ser His Tyr Ser Gly
35 40 45
Ala Thr Ser Ala Gly Phe Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Arg Pro
50 55 60
Ala Ser Ser Thr Gly Ala Ala Gln Ala Ser Tyr Phe Val Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Asn Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu
85 90 95
Glu Gly Asp Cys Ala Gly Leu Ser Thr Ala Ser Met Val Ser Trp Ile
100 105 110
Ser Ser Phe Ser Asn Gln Tyr His Ser Leu Thr Gly Arg Trp Pro Val
115 120 125
Ile Tyr Thr Thr Asn Ser Trp Trp Thr Thr Cys Thr Gly Asn Ser Ala
130 135 140
Ala Phe Asn Ala Asn Ser Pro Leu Met Leu Ala Arg Trp Gly Ser Thr
145 150 155 160
Ala Gly Thr Ile Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Tyr Thr Ile Trp Gln Tyr
165 170 175
Lys Asp Ser Asn Thr Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Val Phe Asn Gly Asp
180 185 190
Ala Thr Gln Leu Lys Lys Leu Ala Thr Gly
195 200
<210> 39
<211> 202
<212> PRT
<213> 炭团菌属
<400> 39
Ala Val Pro Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Asn Val Asp Phe
1 5 10 15
Gly Ala Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Tyr Gln Asp Pro Ser Phe Ser Thr His Tyr Thr Gly
35 40 45
Ala Thr Lys Ala Gly Leu Ile Arg Gly Ser Tyr His Phe Ala Arg Pro
50 55 60
Gly Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Thr Tyr Phe Leu Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu
85 90 95
Glu Gly Asp Cys Ala Gly Leu Ser Thr Asn Ala Met Val Ala Trp Ile
100 105 110
Arg Asp Phe Ser Asp Thr Tyr His Gly Arg Thr Gly Arg Tyr Pro Leu
115 120 125
Leu Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Ser Gly Cys Ala Gly Gly Ser Ala
130 135 140
Ala Phe Val Gly Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala Arg Tyr Ala Gly Ser
145 150 155 160
Pro Gly Ala Leu Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Tyr Thr Ile Trp Gln Phe
165 170 175
Asp Asp Ala Tyr Lys Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Thr Phe Asn Gly Asp
180 185 190
Leu Thr Gln Leu Lys Lys Leu Ala Ser Gly
195 200
<210> 40
<211> 202
<212> PRT
<213> 炭角菌属1653h
<400> 40
Ala Val Pro Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Ser Val Asp Phe
1 5 10 15
Ala Ala Ala Tyr Ser Ala Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Tyr Ile Asp Pro Ser Phe Ser Ser His Tyr Thr Gly
35 40 45
Ala Thr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro
50 55 60
Gly Ser Ser Ser Gly Ala Thr Gln Ala Asn Tyr Phe Leu Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu
85 90 95
Glu Gly Asp Cys Ala Gly Leu Ser Thr Ser Ala Met Val Ser Trp Ile
100 105 110
Lys Asp Phe Ser Asn Ala Tyr His Ser Lys Thr Gly Arg Tyr Pro Leu
115 120 125
Leu Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Ser Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser
130 135 140
Ala Phe Val Asn Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala Arg Tyr Ser Ser Ser
145 150 155 160
Ala Gly Thr Pro Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Tyr Thr Ile Trp Gln Phe
165 170 175
Asn Asp Ala Tyr Lys Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Thr Phe Asn Gly Glu
180 185 190
Tyr Ala Ser Leu Gln Lys Leu Ala Thr Gly
195 200
<210> 41
<211> 202
<212> PRT
<213> 炭团菌属
<400> 41
Ala Val Pro Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Ser Val Asp Phe
1 5 10 15
Ala Ala Ala Tyr Asn Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Tyr Ile Asp Pro Ser Phe Ser Ser His Tyr Thr Gly
35 40 45
Ala Thr Lys Ala Gly Phe Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro
50 55 60
Gly Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Asn Tyr Phe Leu Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Phe Pro Gly Met Leu Asp Leu
85 90 95
Glu Gly Asp Cys Ala Gly Leu Ser Thr Ser Ala Met Val Ser Trp Ile
100 105 110
Lys Asp Phe Ser Asp Thr Tyr His Ser Lys Thr Gly Arg Tyr Pro Leu
115 120 125
Leu Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Ser Ser Cys Thr Gly Asp Ser Ser
130 135 140
Ala Phe Val Asn Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala Arg Tyr Ser Ser Ser
145 150 155 160
Ala Gly Thr Pro Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Tyr Thr Ile Trp Gln Phe
165 170 175
Asn Asp Ala Tyr Lys Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Thr Phe Asn Gly Asn
180 185 190
Tyr Ala Ser Leu Gln Lys Leu Ala Thr Gly
195 200
<210> 42
<211> 206
<212> PRT
<213> 青霉云南菌
<400> 42
Asp Val Asp Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Glu Thr Val Asp Tyr
1 5 10 15
Ala Gly Ala Tyr Gly Ala Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Asn Tyr Ile Asp Ser Ser Phe Asn Thr His Tyr Ala Gly
35 40 45
Ala Thr Asp Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro
50 55 60
Gly Glu Thr Thr Gly Ala Glu Gln Ala Asp Tyr Phe Ile Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Asn Trp Ser Asn Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu
85 90 95
Glu Gly Glu Gly Ser Thr Thr Cys Trp Asp Leu Ser Ala Ala Asp Met
100 105 110
Val Ala Trp Ile Lys Ala Phe Ser Asp Arg Tyr Gln Glu Val Thr Ser
115 120 125
Arg Tyr Pro Leu Leu Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Ser Glu Cys Thr
130 135 140
Gly Asn Ser Asp Ala Phe Val Asp Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala Arg
145 150 155 160
Tyr Ala Ser Ser Pro Gly Glu Ile Pro Gly Gly Trp Pro Ala Gln Thr
165 170 175
Ile Trp Gln Asn Ser Asp Ser Tyr Ser Phe Gly Gly Asp Ser Asp Ile
180 185 190
Phe Asn Gly Asp Glu Ala Gly Leu Lys Lys Leu Ala Ser Gly
195 200 205
<210> 43
<211> 207
<212> PRT
<213> 白色侧齿霉菌
<400> 43
Arg Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Pro Ser Val Asp Phe
1 5 10 15
Asn Ala Ala Tyr Ala Asp Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Tyr Lys Asp Pro Lys Phe Ser Gln His Tyr Ile Gly
35 40 45
Ala Thr Asn Ala Gly Phe Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Gln Pro
50 55 60
Ala Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Asp Tyr Phe Leu Lys Asn Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Ser Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Met
85 90 95
Glu Tyr Asn Pro Asn Gly Ser Ala Cys Tyr Gly Leu Ser Gln Ala Ser
100 105 110
Met Arg Asn Trp Ile Asn Asp Phe Val Asn Thr Tyr His Ser Arg Thr
115 120 125
Gly Val Tyr Pro Leu Leu Tyr Thr Thr Thr Ser Trp Trp Lys Thr Cys
130 135 140
Thr Gly Asn Thr Ala Met Phe Ala Asp Lys Cys Pro Leu Val Ile Ala
145 150 155 160
Arg Tyr Asn Ser Val Val Gly Glu Leu Pro Ala Gly Trp Ser Phe Trp
165 170 175
Thr Ile Trp Gln Tyr Asn Asp His Tyr Lys His Gly Gly Asp Ser Asp
180 185 190
Ala Phe Asn Gly Asp Tyr Ser Gln Leu Gln Arg Ile Ala Arg Gly
195 200 205
<210> 44
<211> 208
<212> PRT
<213> 球芽普可尼亚菌
<400> 44
Thr Val Ala Gly Phe Asp Ile Ser Asn Tyr Gln Pro Thr Val Asp Phe
1 5 10 15
Lys Lys Ala Tyr Ala Asp Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asp Pro Ser Phe Ser Ser His Tyr Thr Gly
35 40 45
Ala Thr Gln Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro
50 55 60
Gly Ser Gly Thr Gly Ala Ala Gln Ala Asn Tyr Phe Leu Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Lys Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Ile Asp Leu
85 90 95
Glu Tyr Asn Pro Ser Gly Ala Thr Cys Tyr Gly Leu Ser Ala Ser Gly
100 105 110
Met Val Ser Trp Ile Ser Asp Phe Val Glu Thr Tyr His Ser Lys Thr
115 120 125
Gly Val Tyr Pro Leu Ile Tyr Thr Ser Thr Ser Trp Trp Asn Gln Cys
130 135 140
Thr Gly Ser Ser Thr Ala Phe Gly Asn Lys Cys Pro Leu Val Val Ala
145 150 155 160
Arg Tyr Ala Ser Ser Val Gly Ala Leu Pro Ala Gly Trp Gly Phe Gln
165 170 175
Thr Ile Trp Gln Asn Ser Asp Lys Ser Pro Trp Gly Gly Asp Asn Asp
180 185 190
Ile Phe Asn Gly Ser Leu Asp Gln Leu Lys Arg Ile Ala Asn Ala Ser
195 200 205
<210> 45
<211> 215
<212> PRT
<213> 副榛色钩囊菌
<400> 45
Ala Pro Leu Glu Ala Arg Ala Gly Ser Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser
1 5 10 15
His Tyr Gln Ala Lys Val Asp Phe Ala Ala Ala Tyr Arg Ser Gly Ala
20 25 30
Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asp Pro
35 40 45
Ala Phe Ser Ser His Tyr Thr Ser Ala Thr Asn Ala Gly Phe Ile Arg
50 55 60
Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro Asp Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln
65 70 75 80
Ala Thr Tyr Phe Leu Ala His Gly Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile
85 90 95
Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu Glu Tyr Asn Pro Ser Gly Ala Thr
100 105 110
Cys Tyr Gly Leu Ser Asp Ala Ala Met Val Ala Trp Ile Gln Asp Phe
115 120 125
Val Asp Thr Tyr His Ala Arg Thr Gly Arg Tyr Pro Met Ile Tyr Thr
130 135 140
Thr Ala Asp Trp Trp Asn Thr Cys Thr Gly Asn Ser Ser Lys Phe Ser
145 150 155 160
Gln Thr Cys Pro Leu Val Leu Ala Arg Tyr Ala Ser Ser Val Gly Thr
165 170 175
Val Pro Gly Gly Trp Gly Tyr Gln Thr Ile Trp Gln Asn Ser Asp Ser
180 185 190
Tyr Ala Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Ile Phe Asn Gly Asp Glu Thr Gln
195 200 205
Leu Lys Lys Leu Ala Ser Gly
210 215
<210> 46
<211> 217
<212> PRT
<213> 翠绿绿僵菌
<400> 46
Ser Pro Val Glu Leu Glu Gln Arg Ala Ala Ser Val Lys Gly Phe Asp
1 5 10 15
Ile Ser Gly Tyr Gln Pro Asn Val Asp Phe Asn Lys Ala Tyr Ala Asp
20 25 30
Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr Glu Gly Thr Thr Tyr Ile
35 40 45
Asp Lys Thr Phe Ser Lys His Tyr Thr Gly Ala Thr Lys Ala Lys Leu
50 55 60
Ile Arg Gly Ala Tyr His Phe Ala His Pro Gly Gln Asn Lys Ala Ser
65 70 75 80
Ala Glu Ala Asp Phe Phe Val Gln His Gly Gly Asn Trp Ser Lys Asp
85 90 95
Ala Ile Thr Leu Pro Gly Met Val Asp Leu Glu Ser Glu Lys Gly His
100 105 110
Pro Pro Cys Trp Gly Leu Ser His Ser Ala Met Val Ala Trp Ile Ser
115 120 125
Glu Phe Val Ala Ala Tyr His Lys Lys Thr Thr Arg Tyr Pro Met Leu
130 135 140
Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Ser Ala Cys Thr Gly Asn Ser Lys Ala
145 150 155 160
Phe Lys Asp Thr Cys Pro Leu Val Leu Ala Arg Tyr Ala Ser Ser Pro
165 170 175
Gly Ala Ile Pro Gly Gly Trp Pro Ala Gln Thr Ile Trp Gln Asn Ser
180 185 190
Asp Lys Ser Pro Trp Gly Gly Asp Ser Asp Met Phe Asn Gly Asp Leu
195 200 205
Ala Gln Leu Lys Lys Leu Ala Thr Gly
210 215
<210> 47
<211> 214
<212> PRT
<213> 嗜热子囊菌
<400> 47
Glu Leu Asp Lys Arg Ala Arg Gly Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser His
1 5 10 15
Tyr Gln Pro Asn Val Asp Phe Lys Gly Ala Tyr Asn Ser Gly Ala Arg
20 25 30
Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr Glu Gly Thr Thr Tyr Lys Asp Pro Ala
35 40 45
Phe Ser Lys His Tyr Ile Gly Ala Thr Glu Ala Gly Leu Ile Arg Gly
50 55 60
Gly Tyr His Phe Ala His Pro Asp Lys Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala
65 70 75 80
Asn Phe Phe Leu Ala His Gly Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr
85 90 95
Leu Pro Gly Met Val Asp Leu Glu Tyr Asn Pro Ser Gly Asp Ala Cys
100 105 110
Tyr Gly Leu Ser Asp Ser Gln Met Val Ser Trp Ile Arg Asp Phe Val
115 120 125
Asn Thr Tyr His Ala His Thr Gly Arg Tyr Pro Met Ile Tyr Thr Thr
130 135 140
Ala Asp Trp Trp Lys Arg Cys Thr Gly Asp Ser His Ala Phe Ser Thr
145 150 155 160
Thr Cys Pro Leu Val Leu Ala Arg Tyr Asn Ser Ser Pro Gly Thr Val
165 170 175
Pro Gly Gly Trp Pro Tyr His Thr Ile Trp Gln Asn Ser Asp Lys Tyr
180 185 190
Arg Phe Gly Gly Asp Ser Asp Ile Phe Asn Gly Asp Leu Ala Gly Leu
195 200 205
Lys Arg Leu Ala Lys Gly
210
<210> 48
<211> 208
<212> PRT
<213> 罗斯曼枝穗霉
<400> 48
Ala Val Pro Gly Phe Asp Ile Ser Gly Trp Gln Lys Ser Thr Asp Phe
1 5 10 15
Ala Lys Ser Tyr Ala Asn Gly Asp Arg Phe Val Tyr Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Phe Lys Asn Pro Leu Phe Ser Lys Gln Tyr Thr Gly
35 40 45
Ala Thr Asn Ala Arg Leu Ile Arg Gly Ala Tyr His Phe Ala Gln Pro
50 55 60
Ala Ser Ser Ser Gly Ala Ser Gln Ala Arg Phe Phe Val Ala Asn Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Asn Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Ala Val Asp Met
85 90 95
Glu Tyr Asn Pro Ser Gly Ala Thr Cys Tyr Gly Leu Ser Lys Thr Ala
100 105 110
Met Val Asn Trp Ile Glu Asp Phe Val Ser Thr Tyr Gln Ala Leu Thr
115 120 125
Gly Arg Trp Pro Val Val Tyr Thr Thr Leu Asp Trp Trp Thr Gln Cys
130 135 140
Thr Gly Asn Ser Ala Lys Phe Gly Asp Arg Cys Pro Leu Trp Val Ala
145 150 155 160
Arg Tyr Ala Ser Ala Val Gly Gln Ile Pro Ala Gly Trp Ser Phe His
165 170 175
Thr Ile Trp Gln Tyr Asn Ala Lys Tyr Pro Glu Gly Gly Asp Ser Asp
180 185 190
Ile Phe Asn Gly Asp Glu Thr Arg Leu Lys Ala Leu Ala Ser Gly Ala
195 200 205
<210> 49
<211> 203
<212> PRT
<213> 棒状简枝霉
<400> 49
Ala Pro Lys Gly Ile Asp Val Ser His Trp Gln Gly Ser Ile Asn Trp
1 5 10 15
Gly Ala Val Lys Ala Asn Gly Ile Glu Trp Ala Tyr Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Ser Thr Asn Tyr Lys Asp Pro Asn Phe Asn Ala Asn Tyr Val Gly
35 40 45
Ala Thr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Ala Tyr His Phe Ala Arg Pro
50 55 60
Gly Asp Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Asn Tyr Phe Ala Ser Asn Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Ala Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Ala Val Asp Leu
85 90 95
Glu Ala Gly Cys Ser Gly Leu Ser Gln Ser Ala Met Thr Ala Trp Ile
100 105 110
Lys Asp Phe Ser Asn Thr Tyr His Ala Arg Thr Gly Arg Tyr Pro Ala
115 120 125
Ile Tyr Thr Thr Thr Ser Trp Trp Lys Gln Cys Thr Gly Asn Ala Ser
130 135 140
Gly Phe Gln Asn Asn Asn Pro Leu Trp Ile Ala Arg Trp Ala Ser Ser
145 150 155 160
Val Gly Glu Leu Pro Ala Gly Tyr Ser Tyr His Thr Phe Trp Gln Tyr
165 170 175
Ala Asp His Gly Pro Asn Pro Gly Asp Gln Asp Val Phe Asn Gly Asp
180 185 190
Ser Ala Gly Leu Lys Arg Met Ala Lys Gly Ser
195 200
<210> 50
<211> 216
<212> PRT
<213> 膨梗曲霉
<400> 50
Ala Pro Leu Glu Ala Arg Ala Asn Thr Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser
1 5 10 15
Ser Phe Gln Pro Asn Val Asp Phe Ala Ala Ala Tyr Lys Ala Gly Ala
20 25 30
Arg Phe Val Met Met Lys Ala Thr Gln Asn Thr Asn Tyr Val Asp Lys
35 40 45
Thr Phe Asn Ala His Tyr Glu Gly Ala Thr Lys Ala Gly Leu Ile Arg
50 55 60
Gly Gly Tyr His Phe Ala Ile Pro Asn Gly Pro Ser Gly Ala Ala Gln
65 70 75 80
Ala Glu Tyr Phe Leu Ala His Gly Gly Gly Trp Ser Asp Asp Gly Lys
85 90 95
Thr Leu Pro Gly Met Ile Asp Leu Glu Tyr Asn Pro Tyr Gly Gln Thr
100 105 110
Cys Tyr Asp Leu Ser Ala Ala Lys Met Val Asp Trp Ile Lys Asp Phe
115 120 125
Ser Asn Thr Tyr His Ala Lys Thr Lys Arg Tyr Pro Met Ile Tyr Thr
130 135 140
Thr Ala Asn Trp Trp Lys Glu Cys Thr Gly Asp Ser Lys Glu Phe Ser
145 150 155 160
Gln Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala Arg Tyr Ser Ser Ser Ala Gly Thr
165 170 175
Val Pro Gly Gly Trp Pro Ala Tyr Ser Phe Trp Gln Asn Ala Asp Lys
180 185 190
Tyr Lys Phe Gly Gly Asp Ser Asp Ile Trp Asn Gly Ser Glu Asp Asn
195 200 205
Leu Lys Lys Phe Ala Lys Gly Ala
210 215
<210> 51
<211> 207
<212> PRT
<213> Paracremonium inflatum
<400> 51
Lys Val Leu Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ala Thr Val Asp Phe
1 5 10 15
Asn Ala Ala Lys Asp Ala Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Tyr Lys Asp Pro Ala Phe Ser Lys His Tyr Thr Gly
35 40 45
Ala Thr Lys Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Gln Pro
50 55 60
Ala Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Thr Phe Phe Leu Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Ser Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu
85 90 95
Glu Tyr Asn Pro Ser Gly Ser Thr Cys Tyr Gly Leu Ser Gln Ser Ser
100 105 110
Met Val Gln Trp Ile Ser Asp Phe Ile Asp Thr Tyr His Ser Lys Thr
115 120 125
Gly Arg Tyr Pro Leu Ile Tyr Thr Ser Thr Ser Trp Trp Lys Thr Cys
130 135 140
Thr Gly Asn Ser Ser Lys Phe Ala Ala Asn Cys Pro Leu Val Val Ala
145 150 155 160
Arg Tyr Ser Ser Ser Val Gly Glu Leu Pro Ala Gly Trp Thr Tyr Tyr
165 170 175
Thr Ile Trp Gln Asn Ser Asp Ser Tyr Lys Tyr Gly Gly Asp Ser Asp
180 185 190
Ile Phe Asn Gly Asp Glu Ser Gln Leu Gln Lys Leu Ala Lys Gly
195 200 205
<210> 52
<211> 208
<212> PRT
<213> 韦斯特壳属
<400> 52
Ala Val Ser Gly Met Asp Ile Ser His Tyr Gln Gly Thr Asn Tyr Asn
1 5 10 15
Phe Ala Gly Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala
20 25 30
Thr Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asp Pro Gln Phe Ser Ala Asn Tyr Ile
35 40 45
Ala Ala Thr Asn Ala Gly Phe Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Arg
50 55 60
Pro Ala Asp Ser Thr Gly Ala Ala Gln Ala Lys Tyr Phe Val Ser His
65 70 75 80
Gly Gly Gly Trp Ser Ser Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp
85 90 95
Leu Glu Tyr Gly Ser Ser Ser Ala Cys His Gly Leu Ser Val Ser Ala
100 105 110
Met Asn Thr Trp Ile Ala Ser Phe Ile Asn Gln Tyr Arg Ser Leu Thr
115 120 125
Gly Ala Tyr Pro Met Ile Tyr Thr Thr Ala Asp Trp Trp Lys Thr Cys
130 135 140
Thr Gly Asp Ser Gln Ala Trp Asn Thr Lys Cys Pro Leu Val Leu Ala
145 150 155 160
Arg Tyr Ser Ser Ser Val Gly Thr Ile Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Gln
165 170 175
Thr Ile Trp Gln Phe Asn Asp Ser Tyr Lys Tyr Gly Gly Asp Ser Asp
180 185 190
Thr Phe Asn Gly Asp Leu Ala Gly Leu Lys Arg Leu Ala Lys Gly Ser
195 200 205
<210> 53
<211> 207
<212> PRT
<213> 半球盖菇
<400> 53
Leu Thr Tyr Ala Val Asp Ser Ser Thr Leu Val Ser Val Ala Thr Tyr
1 5 10 15
Thr Lys Ala Lys Ser Gln Gly Phe Thr Lys Ala Ile Ile Arg Gly Tyr
20 25 30
Gln Glu Ala Cys Gly Ser Gly Gly Ala Val Asp Pro Asn Phe Val Gln
35 40 45
Thr Tyr Lys Asn Ala Arg Ala Ala Gly Tyr Thr Asp Ile Asp Met Tyr
50 55 60
Trp Phe Pro Cys Asn Gly Ser Thr His Asn Cys Lys Ser Tyr Ala Thr
65 70 75 80
Gln Ile Ala Ala Ile Ala Ala Thr Phe Ser Ala Asn Ser Met Lys Ile
85 90 95
Gly Arg Ile Trp Ile Asp Ile Glu Lys Asp Ala Ala Val Cys Asn Asn
100 105 110
Trp Asn Tyr Gly Thr Ala Gly Asn Leu Ser Gln Ala Lys Ala Leu Ile
115 120 125
Ser Ala Ile Lys Ala Ser Gly Phe Val Tyr Gly Ile Tyr Ser Ser Pro
130 135 140
Gly Glu Trp Gly Asn Ile Phe Gly Ser Thr Ser Val Val Val Asp Asn
145 150 155 160
Ser Ala Pro Leu Trp Phe Ala Thr Trp Asn Asn Val Gln Thr Leu Thr
165 170 175
Met Gly Thr Lys Phe Gly Gly Trp Thr Ser Ala Met Gly His Gln Tyr
180 185 190
Thr Asp Val Ser Ala Ser Gly Gln Phe Asp Leu Ser Val Phe Ala
195 200 205
<210> 54
<211> 208
<212> PRT
<213> Gelasinospora cratophora
<400> 54
Thr Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Ser Val Asn Phe
1 5 10 15
Ala Gly Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Tyr Ile Asp Ser Ser Phe Ser Ser His Tyr Thr Gly
35 40 45
Ala Thr Ser Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro
50 55 60
Asp Ser Ser Thr Gly Ala Ala Gln Ala Asp Tyr Phe Leu Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Ala Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Ile Asp Leu
85 90 95
Glu Ser Val Ser Gly Lys Ala Thr Cys Phe Gly Leu Ser Thr Ser Ala
100 105 110
Met Val Ser Trp Ile Lys Ser Phe Ser Asp Arg Tyr Tyr Ala Lys Thr
115 120 125
Gly Arg Tyr Pro Met Ile Tyr Thr Asn Tyr Ser Trp Trp Asn Gln Cys
130 135 140
Thr Gly Asn Ser Ala Ser Phe Ala Ala Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala
145 150 155 160
Arg Trp Ser Ser Thr Val Gly Thr Leu Pro Gly Gly Trp Ser Val Gln
165 170 175
Thr Ile Trp Gln Asn Ala Asp Thr Tyr Thr Tyr Gly Gly Asp Ser Asp
180 185 190
Val Phe Asn Gly Ser Leu Asp Arg Leu Lys Ala Leu Ala Lys Gly Ser
195 200 205
<210> 55
<211> 207
<212> PRT
<213> 金针菇
<400> 55
Arg Leu Asn Gly Ile Asp Val Ser Gly Tyr Gln Pro Asn Val Asn Trp
1 5 10 15
Ala Thr Val Lys Ala Asn Gly Val Ser Phe Ala Tyr Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asn Pro Ser Phe Ser Ser Gln Tyr Thr Gly
35 40 45
Ala Thr Lys Ala Gly Leu Ile Arg Gly Ser Tyr His Phe Ala His Pro
50 55 60
Ser Ser Ser Thr Gly Ala Ala Gln Ala Arg Tyr Phe Val Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Ala Leu Asp Ile
85 90 95
Glu Tyr Asn Pro Ser Gly Ala Thr Cys Tyr Gly Leu Ser Thr Ser Ser
100 105 110
Met Val Asn Trp Ile Ala Asp Phe Ser Asn Thr Tyr His Ser Leu Thr
115 120 125
Gly Arg Tyr Pro Val Ile Tyr Thr Thr Ala Asp Trp Trp Arg Thr Cys
130 135 140
Thr Gly Asn Ser Ala Ser Phe Ala Asn Asn Ser Pro Leu Trp Ile Ala
145 150 155 160
Arg Tyr Ala Ser Thr Ile Gly Thr Leu Pro Ala Gly Trp Ser Tyr Ala
165 170 175
Thr Phe Trp Gln Tyr Ala Asp Ser Gly Ser Asn Pro Gly Asp Gln Asp
180 185 190
Tyr Phe Asn Gly Asp Ala Ala Gly Leu Lys Arg Leu Ala Thr Ser
195 200 205
<210> 56
<211> 207
<212> PRT
<213> 喜粪裸盖菇
<400> 56
Leu Val His Ala Val Asp Ser Ser Ser Leu Val Ser Thr Ala Thr Phe
1 5 10 15
Ser Lys Ala Lys Ser Glu Gly Phe Thr Lys Ala Val Ile Arg Gly Tyr
20 25 30
Gln Glu Ala Cys Gly Ser Gly Gly Arg Val Asp Pro Asn Phe Val Gln
35 40 45
Thr Tyr Lys Asn Ala Arg Ala Ala Gly Ile Thr Asn Ile Asp Thr Tyr
50 55 60
Trp Tyr Pro Cys Asn Gly Ser Gly Asn Ser Cys Lys Ser Tyr Ala Lys
65 70 75 80
Gln Ile Ala Gly Ile Ser Ala Thr Phe Asn Ala His Ser Met Lys Ile
85 90 95
Gly Arg Ile Trp Ile Asp Ile Glu Lys Asp Ser Ile Cys Asn Asn Trp
100 105 110
Asn Tyr Gly Thr Ser Gly Asn Arg Asp His Ala Lys Lys Leu Ile Thr
115 120 125
Ala Ile Lys Asn Ser Gly Phe Lys Tyr Gly Ile Tyr Ser Ser Pro Gly
130 135 140
Glu Trp Ser Thr Ile Phe Gly Ser Glu Ser Phe Asp Leu Asp Ser Gly
145 150 155 160
Ala Pro Leu Trp Phe Ala Thr Trp Asn Asn Val Gln Thr Leu Thr Leu
165 170 175
Gly Thr His Phe Gly Gly Trp Thr Ser Ala His Gly His Gln Tyr Thr
180 185 190
Asp Lys Ser Ala Ser Gly Gln Phe Asp Leu Asn Val Phe Ser Ser
195 200 205
<210> 57
<211> 208
<212> PRT
<213> 微小毛霉
<400> 57
Tyr Glu Thr Gly Val Asp Val Ser Ala Leu Thr Ser Thr Ser Ala Trp
1 5 10 15
Ser Cys Ala Lys Lys Leu Gly Tyr Asp His Ala Ile Val Arg Cys Tyr
20 25 30
Ile Glu Ala Tyr Gly Gly Asn Pro Gly Gly Lys Ile Asp Ser Asn Cys
35 40 45
Phe Gln Asn Tyr Lys Asn Ala Lys Ala Gly Gly Phe Thr Ser Val Asp
50 55 60
Ile Tyr Met Phe Pro Cys Thr Gly Arg Ser Thr Cys Lys Ser Pro Ala
65 70 75 80
Ala Gln Val Lys Glu Val Val Asp Tyr Val Gly Ser Asn Lys Met Thr
85 90 95
Val Gly Arg Leu Trp Leu Asp Val Glu Ile Asp Pro Ser Ala Asn Asn
100 105 110
Trp Pro Ser Ala Ser Ser Ala Arg Ser Thr Leu Lys Ser Phe Lys Ser
115 120 125
Ala Leu Asp Ser Thr Gly Trp Lys Tyr Gly Ile Tyr Ser Ser Ala Ser
130 135 140
Gln Trp Ser Gln Ile Thr Gly Ser Ser Ser Trp Glu Leu Asp Ser Ser
145 150 155 160
Leu Pro Leu Trp Tyr Ala His Tyr Asp Ala Ser Leu Ser Phe Ser Asp
165 170 175
Phe Ser Pro Phe Gly Gly Trp Thr Lys Pro Thr Ile Lys Gln Tyr Ala
180 185 190
Gly Ser Val Ser Phe Cys Ser Ala Gly Trp Asp Lys Asn Tyr Tyr Gly
195 200 205
<210> 58
<211> 207
<212> PRT
<213> 半球盖菇
<400> 58
Leu Val Tyr Gly Val Asp Ser Ser Thr Leu Val Ser Thr Ala Thr Tyr
1 5 10 15
Ser Lys Ala Lys Ser Glu Gly Phe Thr Lys Ala Ile Ile Arg Gly Tyr
20 25 30
Gln Glu Ala Cys Gly Ser Gly Gly Arg Val Asp Pro Asn Phe Val Ala
35 40 45
Thr Tyr Lys Asn Ala Arg Ala Ala Gly Ile Thr Asp Ile Asp Met Tyr
50 55 60
Trp Phe Pro Cys Asn Gly Ser Gly Asn Ser Cys Lys Ser Tyr Ala Lys
65 70 75 80
Gln Leu Ser Glu Ile Ala Asn Val Phe Ser Ala Asn Ser Met Lys Ile
85 90 95
Gly Thr Ile Trp Ile Asp Phe Glu Lys Asp Ser Gly Cys Asn Asn Trp
100 105 110
Asn Tyr Gly Thr Thr Gly Asn Leu Asn His Ala Lys Ala Leu Ile Ser
115 120 125
Ala Ile Lys Ala Thr Gly Phe Lys Phe Gly Ile Tyr Ser Ser Pro Gly
130 135 140
Glu Trp Gly Thr Leu Phe Gly Ser Thr Gly Val Val Leu Asp Ser Ser
145 150 155 160
Ala Pro Leu Trp Phe Ala Thr Trp Asn Asn Val Lys Thr Leu Thr Leu
165 170 175
Gly Thr His Phe Gly Gly Trp Thr Lys Ala Val Gly His Gln Tyr Thr
180 185 190
Asp Val Ser Ala Ser Gly Gln Phe Asp Leu Asn Val Phe Ala Asn
195 200 205
<210> 59
<211> 207
<212> PRT
<213> 半球盖菇
<400> 59
Leu Val Tyr Gly Val Asp Ser Ser Thr Leu Val Ser Thr Ala Thr Tyr
1 5 10 15
Lys Lys Ala Lys Ser Glu Gly Phe Thr Lys Ala Ile Ile Arg Gly Tyr
20 25 30
Gln Glu Ala Cys Gly Ser Gly Gly Arg Val Asp Pro Asn Phe Val Ala
35 40 45
Thr Tyr Lys Asn Ala Arg Ala Ala Gly Ile Thr Asp Ile Asp Met Tyr
50 55 60
Trp Phe Pro Cys Asn Gly Ser Gly Asn Ser Cys Lys Ser Tyr Ala Lys
65 70 75 80
Gln Leu Ser Glu Ile Ala Asn Val Phe Ser Ala Asn Ser Met Lys Ile
85 90 95
Gly Thr Ile Trp Ile Asp Phe Glu Lys Asp Ser Gly Cys Asn Asn Trp
100 105 110
Asn Tyr Gly Thr Thr Gly Asn Leu Asn His Ala Lys Ala Leu Ile Ser
115 120 125
Ala Ile Lys Ala Thr Gly Phe Lys Phe Gly Ile Tyr Ser Ser Pro Gly
130 135 140
Glu Trp Gly Thr Leu Phe Gly Ser Thr Gly Val Val Leu Asp Ser Ser
145 150 155 160
Ala Pro Leu Trp Phe Ala Thr Trp Asn Asn Val Lys Thr Leu Thr Leu
165 170 175
Gly Thr His Phe Gly Gly Trp Thr Thr Ala Ala Gly His Gln Tyr Thr
180 185 190
Asp Val Ser Ser Ser Gly Gln Phe Asp Leu Asn Val Phe Ala Asn
195 200 205
<210> 60
<211> 207
<212> PRT
<213> 弗格斯毁丝霉
<400> 60
Ala Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser His Trp Gln Ser Ser Val Asp Phe
1 5 10 15
Lys Ala Ala Tyr Asn Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Gly Thr Ser Phe Ile Asp Pro Lys Phe Ser Ser His Tyr Thr Gly
35 40 45
Ala Thr Asn Ala Gly Phe Ile Arg Gly Ala Tyr His Phe Ala His Pro
50 55 60
Gly Gln Ser Ser Gly Glu Ala Gln Ala Asp Tyr Phe Leu Ala His Gly
65 70 75 80
Gly Gly Trp Thr Pro Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu
85 90 95
Glu Ala Tyr Asn Ala Gly Glu Cys Trp Gly Leu Ser Gln Ser Ala Met
100 105 110
Val Ala Trp Ile Lys Ala Phe Ser Asp Arg Tyr His Ala Arg Thr Gly
115 120 125
Val Tyr Pro Met Leu Tyr Thr Asn Leu Ser Trp Trp Lys Thr Cys Thr
130 135 140
Gly Asn Ser Lys Ala Phe Val Asn Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala Arg
145 150 155 160
Trp Ala Ser Ser Pro Gly Glu Ile Pro Gly Gly Trp Pro Trp Gln Thr
165 170 175
Ile Trp Gln Asn Ser Asp Ser Tyr Arg Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Ile
180 185 190
Phe Asn Gly Asp Met Asn Gln Leu Arg Arg Leu Ala Thr Ala Ala
195 200 205
<210> 61
<211> 204
<212> PRT
<213> 高山被孢霉
<400> 61
Ala Leu Pro Lys Gly Ile Asp Val Ser His Trp Gln Gly Asp Val Asn
1 5 10 15
Trp Asn Ser Val Lys Ala Ala Gly Ile Glu Phe Val Tyr Ile Lys Ala
20 25 30
Thr Glu Ser Ile Asn Tyr Ile Asp Ser Lys Phe Asp Ala Asn Tyr Val
35 40 45
Gly Ala Thr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Arg
50 55 60
Pro Ala Ala Ser Ser Gly Ala Val Gln Ala Asn Tyr Phe Leu Ala Asn
65 70 75 80
Gly Gly Gly Trp Ser Ser Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Ala Leu Asp
85 90 95
Leu Glu Ala Gly Cys Ser Gly Leu Ser Gln Ala Ala Met Thr Ala Trp
100 105 110
Val Arg Asp Phe Ser Asp Thr Tyr His Ala Arg Thr Gly Arg Tyr Pro
115 120 125
Val Ile Tyr Thr Thr Thr Ser Trp Trp Lys Gln Cys Thr Gly Asn Ala
130 135 140
Ser Gly Phe Gln Asn Asn Asn Pro Leu Trp Ile Ala Arg Trp Ala Ser
145 150 155 160
Ser Ala Gly Glu Leu Pro Ala Gly Tyr Ala Phe His Thr Phe Trp Gln
165 170 175
Tyr Ala Asp Lys Gly Pro Asn Pro Gly Asp Gln Asp Tyr Phe Asn Gly
180 185 190
Asp Ser Ala Gly Leu Arg Arg Phe Ala Lys Gly Ser
195 200
<210> 62
<211> 216
<212> PRT
<213> 深酒色青霉
<400> 62
Thr Pro Leu Glu Ser Arg Ala Ser Gly Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser
1 5 10 15
Ser Tyr Gln Gly Thr Val Asp Phe Ala Gly Ala Tyr Ala Ala Gly Ala
20 25 30
Arg Phe Val Met Ile Lys Ala Thr Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asp Lys
35 40 45
Thr Phe Ser Ser His Tyr Glu Gly Ala Ser Ser Ala Gly Leu Ile Arg
50 55 60
Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro Asp Ser Ser Ser Gly Ala Lys Gln
65 70 75 80
Ala Glu Tyr Phe Leu Ala His Gly Gly Gly Trp Ser Asn Asp Gly Lys
85 90 95
Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Ile Glu Tyr Asn Pro Ser Gly Ala Thr
100 105 110
Cys Tyr Gly Ile Ser Lys Ser Ala Met Val Ala Trp Val Lys Asp Phe
115 120 125
Gly Glu Thr Tyr Lys Gly Lys Thr Gly Arg Tyr Pro Met Ile Tyr Thr
130 135 140
Thr Ala Asp Trp Trp Asn Thr Cys Thr Gly Gly Ser Thr Ala Phe Ser
145 150 155 160
Lys Asp Tyr Pro Leu Val Leu Ala Arg Tyr Ser Ser Ser Val Gly Thr
165 170 175
Ile Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Gln Ser Phe Trp Gln Asn Ser Asp Lys
180 185 190
Tyr Thr Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Leu Trp Asn Gly Ser Glu Ala Ser
195 200 205
Leu Lys Thr Phe Ala Lys Gly Ala
210 215
<210> 63
<211> 245
<212> PRT
<213> 囊状长毛盘菌
<400> 63
Tyr Pro Val Lys Thr Asp Leu His Cys Arg Ser Ser Pro Ser Thr Ser
1 5 10 15
Ala Ser Ile Val Arg Thr Tyr Ser Ser Gly Thr Glu Val Gln Ile Gln
20 25 30
Cys Gln Thr Thr Gly Thr Ser Val Gln Gly Ser Asn Val Trp Asp Lys
35 40 45
Thr Gln His Gly Cys Tyr Val Ala Asp Tyr Tyr Val Lys Thr Gly His
50 55 60
Ser Gly Ile Phe Thr Thr Lys Cys Gly Ser Ser Ser Gly Gly Gly Ser
65 70 75 80
Cys Lys Pro Pro Pro Ile Asn Ala Ala Thr Val Ala Leu Ile Lys Glu
85 90 95
Phe Glu Gly Phe Val Pro Lys Pro Ala Pro Asp Pro Ile Gly Leu Pro
100 105 110
Thr Val Gly Tyr Gly His Leu Cys Lys Thr Lys Gly Cys Lys Glu Val
115 120 125
Pro Tyr Ser Phe Pro Leu Thr Gln Glu Thr Ala Thr Lys Leu Leu Gln
130 135 140
Ser Asp Ile Lys Thr Phe Thr Ser Cys Val Ser Asn Tyr Val Lys Asp
145 150 155 160
Ser Val Lys Leu Asn Asp Asn Gln Tyr Gly Ala Leu Ala Ser Trp Ala
165 170 175
Phe Asn Val Gly Cys Gly Asn Val Gln Thr Ser Ser Leu Ile Lys Arg
180 185 190
Leu Asn Ala Gly Glu Asn Pro Asn Thr Val Ala Ala Gln Glu Leu Pro
195 200 205
Lys Trp Lys Tyr Ala Gly Gly Lys Val Met Pro Gly Leu Val Arg Arg
210 215 220
Arg Asn Ala Glu Val Ala Leu Phe Lys Lys Pro Ser Ser Val Gln Ala
225 230 235 240
His Pro Pro Lys Cys
245
<210> 64
<211> 249
<212> PRT
<213> 嗜热毛壳菌
<400> 64
Pro Ala Ser Ala Tyr Ala Ile Thr Gly Asp Asn Val Asn Cys Arg Ser
1 5 10 15
Gly Pro Gly Thr Ser Tyr Ala Val Lys Lys Val Tyr Lys Lys Gly Thr
20 25 30
Asp Val Lys Ile Ser Cys Gln Thr Thr Gly Thr Asn Ile Asn Gly Asn
35 40 45
Asn Leu Trp Asp Lys Thr Ser Asp Gly Cys Tyr Val Ser Asp Tyr Tyr
50 55 60
Val Lys Thr Gly Ser Asn Gly Tyr Val Thr Ser Lys Cys Ser Ser Ser
65 70 75 80
Gly Gly Ser Thr Cys Ala Ala Pro Lys Ser Asn Gln Ala Thr Val Asp
85 90 95
Leu Ile Ala Glu Phe Glu Gly Phe Arg Ala Asn Ile Tyr Thr Asp Ala
100 105 110
Ala Gly Tyr Ala Thr Val Gly Tyr Gly His Lys Cys Gln Lys Ala Lys
115 120 125
Cys Ala Glu Val Lys Tyr Lys Ile Pro Leu Ser Lys Ala Asp Gly Lys
130 135 140
Lys Leu Leu Ala Asp Asp Met Arg Ser Phe Glu Val Cys Ile Thr Asn
145 150 155 160
Met Leu Asn Ser Lys Ala Lys Leu Asn Tyr Asn Gln Phe Gly Ala Leu
165 170 175
Val Ser Trp Ser Phe Asn Val Gly Cys Gly Ala Ala Lys Ser Ser Thr
180 185 190
Leu Ile Lys Arg Leu Asn Asn Gly Glu Asn Val Asn Lys Val Leu Ser
195 200 205
Glu Glu Leu Pro Lys Trp Asn Lys Ala Gly Gly Lys Val Leu Gln Gly
210 215 220
Leu Val Arg Arg Arg Ala Ala Glu Val Ala Leu Ala Lys Lys Ser Gly
225 230 235 240
Ser Ser Gln Ala Leu Pro Val Lys Cys
245
<210> 65
<211> 248
<212> PRT
<213> 哈茨木霉
<400> 65
Tyr Pro Ile Thr Gly Asp Val Val Asn Cys Arg Thr Gly Pro Gly Thr
1 5 10 15
Ser Tyr Ala Ile Lys Lys Ser Tyr Lys Lys Asn Gln Asp Ile Ser Ile
20 25 30
Ser Cys Gln Thr Ala Gly Thr Ser Val Asn Gly Asn Ser Ile Trp Asp
35 40 45
Lys Thr Ala Asp Gly Cys Tyr Val Ala Asp Tyr Tyr Val Lys Thr Gly
50 55 60
Ser Ser Gly Tyr Val Thr Lys Lys Cys Thr Ala Ser Ser Gly Gly Gly
65 70 75 80
Ser Ser Ser Ser Tyr Cys Lys Thr Ile Asn Ser Ala Gly Val Asp Leu
85 90 95
Ile Ala Lys Trp Glu Gly Phe Val Ala Ser Pro Lys Pro Asp Pro Ile
100 105 110
Gly Leu Pro Thr Val Gly Tyr Gly His Leu Cys Gln Gln Lys Asn Cys
115 120 125
Arg Glu Val Lys Tyr Lys Phe Pro Leu Thr Lys Thr Thr Ala Lys Glu
130 135 140
Leu Leu Leu Asp Asp Leu Pro Lys Tyr Thr Lys Cys Leu Ala Asp Tyr
145 150 155 160
Leu Asn Asp Lys Pro Lys Leu Asn Ala Asn Gln Trp Ala Ala Leu Thr
165 170 175
Ser Trp Val Phe Asn Val Gly Cys Gly Asn Ala Lys Thr Ser Thr Leu
180 185 190
Val Lys Arg Leu Asn Asn Gly Glu Ala Ala Asn Thr Val Ala Ala Glu
195 200 205
Glu Leu Pro Lys Trp Arg Met Ala Gly Gly Lys Val Leu Pro Gly Leu
210 215 220
Glu Ala Arg Arg Lys Asp Glu Val Lys Leu Phe Lys Thr Ala Ser Ser
225 230 235 240
Lys Gln Ala Tyr Pro Lys Cys Gln
245
<210> 66
<211> 245
<212> PRT
<213> 小毛盘菌
<400> 66
Tyr Pro Ala Lys Val Asp Leu Arg Cys Arg Ser Ser Pro Ser Thr Ser
1 5 10 15
Ala Ser Val Val Arg Thr Tyr Ser Lys Gly Ser Glu Ile Gln Ile Ser
20 25 30
Cys Gln Thr Thr Gly Thr Ser Val Glu Gly Ser Asn Val Trp Asp Lys
35 40 45
Thr Gln His Gly Cys Tyr Val Ala Asp Tyr Tyr Val Lys Thr Gly His
50 55 60
Ser Gly Ile Phe Thr Thr Lys Cys Gly Ser Ser Ser Gly Gly Gly Ser
65 70 75 80
Cys Lys Pro Pro Pro Ile Asn Ala Ala Thr Val Ala Leu Ile Lys Glu
85 90 95
Phe Glu Gly Phe Val Ala Lys Pro Ala Pro Asp Pro Ile Gly Leu Pro
100 105 110
Thr Val Gly Tyr Gly His Leu Cys Lys Thr Lys Gly Cys Lys Glu Val
115 120 125
Pro Tyr Ser Phe Pro Leu Thr Gln Thr Thr Ala Thr Lys Leu Leu Gln
130 135 140
Ser Asp Ile Lys Thr Phe Thr Ser Cys Val Ser Asn Tyr Val Lys Asp
145 150 155 160
Ser Val Lys Leu Asn Asp Asn Gln Phe Gly Ala Leu Ser Ser Trp Ala
165 170 175
Phe Asn Val Gly Cys Gly Asn Ile Gln Thr Ser Ser Leu Ile Lys Arg
180 185 190
Leu Asn Ala Gly Glu Asn Pro Asn Thr Val Ala Ala Gln Glu Leu Pro
195 200 205
Lys Trp Lys Tyr Ala Gly Gly Lys Val Leu Pro Gly Leu Val Arg Arg
210 215 220
Arg Lys Ala Glu Val Ala Leu Phe Lys Lys Pro Ser Ser Val Gln Ala
225 230 235 240
His Pro Pro Lys Cys
245
<210> 67
<211> 249
<212> PRT
<213> 毛壳菌属ZY287
<400> 67
Tyr Lys Ile Ser Gly Ser Ser Val Asn Cys Arg Ser Gly Pro Gly Thr
1 5 10 15
Asn Tyr Pro Val Lys Lys Thr Tyr Ala Asn Gly Asp Glu Val Thr Ile
20 25 30
Ser Cys Gln Thr Thr Gly Thr Asn Val Glu Gly Asn Asn Ile Trp Asp
35 40 45
Lys Thr Gln His Gly Cys Tyr Val Ala Asp Lys Tyr Val Lys Thr Gly
50 55 60
Lys Asp Gly Phe Val Thr Lys Lys Cys Gly Ser Ser Gly Gly Gly Gly
65 70 75 80
Gly Gly Lys Thr Cys Lys Ala Pro Lys Ser Asn Ala Ala Thr Val Asp
85 90 95
Leu Ile Ala Ser Phe Glu Gly Phe Arg Ala Asn Ile Tyr Thr Asp Ala
100 105 110
Thr Gly His Pro Thr Val Gly Tyr Gly His Met Cys Thr Lys Ser Arg
115 120 125
Cys Ala Glu Val Lys Tyr Lys Ile Pro Leu Ser Lys Ala Asp Gly Lys
130 135 140
Lys Leu Leu Ala Asp Asp Met Ala Lys Phe Glu Lys Cys Ile Lys Glu
145 150 155 160
Met Leu Asn Ser Lys Ala Lys Leu Asn Leu Asn Gln Tyr Gly Ala Leu
165 170 175
Val Ser Trp Ser Phe Asn Val Gly Cys Gly Ala Ala Lys Gly Ser Gln
180 185 190
Leu Val Ser Arg Leu Asn Lys Gly Glu Asn Pro Asn Thr Val Leu Ser
195 200 205
Asn Glu Leu Pro Lys Trp Val His Gly Asn Gly Lys Val Leu Pro Gly
210 215 220
Leu Val Arg Arg Arg Asn Ala Glu Ile Ala Leu Ala Lys Lys Ser Gly
225 230 235 240
Ser Gly Ala Ala Leu Pro Val Lys Cys
245
<210> 68
<211> 245
<212> PRT
<213> 被孢霉属ZY002
<400> 68
Tyr Pro Ile Thr Gly Ala Asp Ala Leu His Cys Arg Ser Gly Pro Gly
1 5 10 15
Thr Ser Tyr Pro Ile Gln Lys Thr Leu Arg Pro Pro Gln Asp Ile Lys
20 25 30
Ile Gln Cys Gln Glu Pro Gly Thr Val Val Asn Gly Val Ser Leu Trp
35 40 45
Asp Lys Thr Gln Phe Gly Cys Tyr Val Ser Asp Tyr Tyr Val Lys Thr
50 55 60
Gly Thr Gly Asn Tyr Val Ala Pro Arg Cys Asn Ser Gly Gly Ser Ser
65 70 75 80
Ser Ala Cys Thr Gly Leu Asn Asp Ala Gly Ile Asn Leu Ile Lys Glu
85 90 95
Phe Glu Gly Phe Val Pro Arg Pro Ala Pro Asp Pro Ile Gly Leu Pro
100 105 110
Thr Val Gly Tyr Gly His Leu Cys Gln Thr Lys Gly Cys Gly Glu Val
115 120 125
Lys Tyr Ser Phe Pro Leu Thr Thr Ala Thr Ala Thr Ala Leu Leu Lys
130 135 140
Asp Asp Leu Pro Lys Tyr Thr Ser Cys Leu Ala Lys Ala Leu Asn Gly
145 150 155 160
Lys Pro Lys Leu Asn Lys Asn Gln Trp Ala Ala Leu Ala Ser Trp Thr
165 170 175
Phe Asn Val Gly Cys Gly Asn Met Lys Ser Ser Ser Leu Ile Thr Arg
180 185 190
Leu Asn Ala Gly Gln Asn Pro Asn Thr Val Ala Thr Glu Glu Leu Pro
195 200 205
Lys Trp Lys Leu Ala Gly Gly Lys Val Leu Pro Gly Leu Val Arg Arg
210 215 220
Arg Ala Ala Glu Val Lys Leu Phe Lys Thr Ala Asn Ser Ser Gln Gly
225 230 235 240
Tyr Pro Lys Cys Ala
245
<210> 69
<211> 247
<212> PRT
<213> 绿僵菌属XZ2431
<400> 69
Tyr Pro Val Ser Ala Asp Ser Leu Asn Cys Arg Ala Glu Pro Asn Thr
1 5 10 15
Ser Ser Ala Ile Lys Thr Thr Tyr Lys Lys Gly Glu Asp Val Lys Ile
20 25 30
Ser Cys Gln Thr Glu Gly Pro Ser Ile Asn Gly Asn Thr Ile Trp Asp
35 40 45
Lys Thr Gln Asp Gly Cys Tyr Val Ala Asp Tyr Tyr Val Lys Thr Gly
50 55 60
Ser Ser Gly Tyr Val Thr Gly Lys Cys Gly Gly Ser Ser Pro Pro Ser
65 70 75 80
Gly Ser Gly Phe Cys Lys Thr Val Asn Lys Ala Gly Leu Asp Leu Ile
85 90 95
Thr Lys Trp Glu Gly Phe Val Ser Ser Pro Arg Gly Asp Pro Ile Gly
100 105 110
Leu Pro Thr Val Gly Tyr Gly His Leu Cys Gln Lys Lys Gly Cys Ala
115 120 125
Glu Val Lys Tyr Lys Phe Pro Leu Thr Lys Ala Thr Ala Leu Gln Leu
130 135 140
Leu Asn Asp Asp Leu Pro Lys Tyr Thr Gly Cys Leu Gly Lys Leu Leu
145 150 155 160
Asn Ser Lys Val Lys Leu Asn Asp Asn Gln Trp Ala Ala Leu Thr Ser
165 170 175
Trp Val Phe Asn Val Gly Cys Gly Asn Ala Gln Ser Ser Ser Leu Val
180 185 190
Arg Arg Leu Asn Asn Gly Glu Asn Pro Asn Thr Val Ala Pro Ser Glu
195 200 205
Leu Pro Lys Trp Lys Met Ala Gly Gly Lys Val Leu Glu Gly Leu Val
210 215 220
Lys Arg Arg Ala Asp Glu Val Arg Leu Phe Lys Val Ser Ser Ser Lys
225 230 235 240
Gly Ala Phe Pro Lys Cys Gln
245
<210> 70
<211> 250
<212> PRT
<213> Geomyces auratus
<400> 70
Ala Phe Pro Ile Thr Gly Ser Thr Val Asn Cys Arg Thr Gly Pro Gly
1 5 10 15
Thr Ser His Gly Val Lys Thr Ser Tyr Lys Lys Gly His Glu Val Thr
20 25 30
Val Ser Cys Gln Thr Gly Gly Thr Ser Val Asn Gly Asn Ser Ile Trp
35 40 45
Asp Lys Thr Ser Asp Gly Cys Tyr Val Ala Asp Tyr Tyr Val Lys Thr
50 55 60
Gly Ser Ser Gly Tyr Val Lys Pro Lys Cys Gly Ser Ser Ser Gly Gly
65 70 75 80
Gly Gly Gly Ser Ser Cys Gly Ala Pro Lys Ser Asn Ala Ala Thr Val
85 90 95
Asn Leu Ile Ala Glu Phe Glu Gly Phe Val Ser His Val Tyr Thr Asp
100 105 110
Ala Thr Gly His Pro Thr Val Gly Tyr Gly His Leu Cys Ser Asn Ser
115 120 125
Lys Cys Ser Gly Ile Gly Tyr Ser Ile Pro Ile Ser Lys Ala Asn Ala
130 135 140
Lys Lys Leu Leu Ala Lys Asp Met Ala Ile Ala Glu Lys Cys Ile Thr
145 150 155 160
Ala Met Ile Asn Lys Ser Arg Thr Leu Asn Leu Asn Gln Tyr Gly Ala
165 170 175
Leu Val Ser Trp Ala Phe Asn Glu Gly Cys Gly Ala Ala Lys Ser Ser
180 185 190
Thr Leu Ile Lys Arg Ile Asn Asn Gly Glu Lys Pro Ser Thr Val Ile
195 200 205
Pro Gln Glu Leu Pro Lys Trp Val Tyr Gly Gly Ser Ser Val Leu Pro
210 215 220
Gly Leu Val Arg Arg Arg Asn Ala Glu Ile Ala Leu Ala Lys Lys Ala
225 230 235 240
Thr Ser Ser Lys Ala Leu Pro Ala His Cys
245 250
<210> 71
<211> 240
<212> PRT
<213> Ilyonectria rufa
<400> 71
Tyr Lys Ile Thr Gly Asp Asn Val Asn Cys Arg Ser Gly Pro Gly Thr
1 5 10 15
Ser Tyr Ser Val Lys Arg Ser Phe Lys Lys Gly Thr Asp Val Thr Leu
20 25 30
Ser Cys Gln Thr Thr Gly Glu Asn Val Leu Gly Thr Ser Ile Trp Asp
35 40 45
Lys Thr Ser Tyr Gly Cys Tyr Val Ser Asp Tyr Tyr Val Lys Thr Gly
50 55 60
Ser Ser Gly Phe Val Val Lys Lys Cys Gly Thr Cys Gly Ala Pro Lys
65 70 75 80
Ser Asn Ala Ala Thr Val Asn Leu Ile Ser Asp Phe Glu Gly Phe Arg
85 90 95
Ala Asn Ile Tyr Lys Asp Ala Ala Gly Tyr Pro Thr Val Gly Tyr Gly
100 105 110
His Leu Cys Ser Asn Ser Arg Cys Thr Asp Val Pro Tyr Ser Ile Pro
115 120 125
Leu Ser Lys Ala Asn Gly Lys Asn Leu Leu Ala Thr Asp Met Thr Lys
130 135 140
Phe Glu Lys Cys Ile Thr Ala Met Val Ser Ser Ser Val Thr Leu Asn
145 150 155 160
Lys Asn Gln Tyr Gly Ala Leu Val Ser Trp Ala Phe Asn Met Gly Cys
165 170 175
Gly Ala Thr Lys Thr Ser Thr Leu Ile Lys Arg Leu Asn Gln Gly Gln
180 185 190
Asn Val Asn Thr Val Leu Ser Thr Glu Leu Pro Lys Trp Val Tyr Ala
195 200 205
Gly Gly Lys Lys Leu Asn Gly Leu Val Arg Arg Arg Asn Ala Glu Ile
210 215 220
Ala Leu Ala Lys Lys Lys Thr Thr Glu Lys Ala Leu Pro Asn Lys Cys
225 230 235 240

Claims (13)

1.一种包含动物饲料添加剂、一种或多种蛋白源和一种或多种能量源的动物饲料,其特征在于,所述动物饲料还包含具有胞壁质酶活性的一种或多种多肽。
2.根据权利要求1所述的动物饲料,其中所述具有胞壁质酶活性的多肽是真菌GH24胞壁质酶或GH25胞壁质酶。
3.根据权利要求1或2中任一项所述的动物饲料,其中所述具有胞壁质酶活性的多肽降解来自约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)的细胞壁碎片。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的动物饲料,其中所述具有胞壁质酶活性的多肽选自由以下项组成的组:
(a)与SEQ ID NO:1具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(b)与SEQ ID NO:2具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(c)与SEQ ID NO:3具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(d)与SEQ ID NO:4具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(e)与SEQ ID NO:5具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(f)与SEQ ID NO:6具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(g)与SEQ ID NO:7具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(h)与SEQ ID NO:8具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(i)与SEQ ID NO:9具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(j)与SEQ ID NO:10具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(k)与SEQ ID NO:11具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(l)与SEQ ID NO:12具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(m)与SEQ ID NO:13具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(n)与SEQ ID NO:14具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(o)与SEQ ID NO:15具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(p)与SEQ ID NO:16具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(q)与SEQ ID NO:17具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(r)与SEQ ID NO:18具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(s)与SEQ ID NO:19具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(t)与SEQ ID NO:20具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(u)与SEQ ID NO:21具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(v)与SEQ ID NO:22具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(w)与SEQ ID NO:23具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(x)与SEQ ID NO:24具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(y)与SEQ ID NO:25具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(z)与SEQ ID NO:26具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(aa)与SEQ ID NO:27具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ab)与SEQ ID NO:28具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ac)与SEQ ID NO:29具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ad)与SEQ ID NO:30具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ae)与SEQ ID NO:31具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(af)与SEQ ID NO:32具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ag)与SEQ ID NO:33具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ah)与SEQ ID NO:34具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ai)与SEQ ID NO:35具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(aj)与SEQ ID NO:36具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ak)与SEQ ID NO:37具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(al)与SEQ ID NO:38具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(am)与SEQ ID NO:39具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(an)与SEQ ID NO:40具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ao)与SEQ ID NO:41具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ap)与SEQ ID NO:42具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(aq)与SEQ ID NO:43具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ar)与SEQ ID NO:44具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(as)与SEQ ID NO:45具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(at)与SEQ ID NO:46具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(au)与SEQ ID NO:47具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(av)与SEQ ID NO:48具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(aw)与SEQ ID NO:49具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ax)与SEQ ID NO:50具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ay)与SEQ ID NO:51具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(az)与SEQ ID NO:52具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(ba)与SEQ ID NO:53具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bb)与SEQ ID NO:54具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bc)与SEQ ID NO:55具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bd)与SEQ ID NO:56具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(be)与SEQ ID NO:57具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bf)与SEQ ID NO:58具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bg)与SEQ ID NO:59具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bh)与SEQ ID NO:60具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bi)与SEQ ID NO:61具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bj)与SEQ ID NO:62具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bk)与SEQ ID NO:63具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bl)与SEQ ID NO:64具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bm)与SEQ ID NO:65具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bn)与SEQ ID NO:66具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bo)与SEQ ID NO:67具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bp)与SEQ ID NO:68具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bq)与SEQ ID NO:69具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(br)与SEQ ID NO:70具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bs)与SEQ ID NO:71具有至少80%例如至少85%、至少90%、至少95%或100%序列同一性的多肽;
(bt)在1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置中包含一个或多个氨基酸取代(优选地保守取代)和/或一个或多个氨基酸缺失和/或一个或多个氨基酸插入或它们的任何组合的SEQ IDNO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24、SEQ IDNO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQ ID NO:30、SEQ IDNO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:34、SEQ ID NO:35、SEQ ID NO:36、SEQ IDNO:37、SEQ ID NO:38、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:40、SEQ ID NO:41、SEQ ID NO:42、SEQ IDNO:43、SEQ ID NO:44、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:46、SEQ ID NO:47、SEQ ID NO:48、SEQ IDNO:49、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53、SEQ ID NO:54、SEQ IDNO:55、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:58、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:60、SEQ IDNO:61、SEQ ID NO:62、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:64、SEQ ID NO:65、SEQ ID NO:66、SEQ IDNO:67、SEQ ID NO:68、SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:70或SEQ ID NO:71的变体;
(bu)包含(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)、(q)、(r)、(s)、(t)、(u)、(v)、(w)、(x)、(y)、(z)、(aa)、(ab)、(ac)、(ad)、(ae)、(af)、(ag)、(ah)、(ai)、(aj)、(ak)、(al)、(am)、(an)、(ao)、(ap)、(aq)、(ar)、(as)、(at)、(au)、(av)、(aw)、(ax)、(ay)、(az)、(ba)、(bb)、(bc)、(bd)、(be)、(bf)、(bg)、(bh)、(bi)、(bj)、(bk)、(bl)、(bm)、(bn)、(bo)、(bp)、(bq)、(br)、(bs)或(bt)的多肽和介于1个与10个氨基酸之间的N-末端和/或C-末端延伸的多肽;以及
(bv)具有胞壁质酶活性并且具有成熟多肽的长度的至少90%的(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)、(q)、(r)、(s)、(t)、(u)、(v)、(w)、(x)、(y)、(z)、(aa)、(ab)、(ac)、(ad)、(ae)、(af)、(ag)、(ah)、(ai)、(aj)、(ak)、(al)、(am)、(an)、(ao)、(ap)、(aq)、(ar)、(as)、(at)、(au)、(av)、(aw)、(ax)、(ay)、(az)、(ba)、(bb)、(bc)、(bd)、(be)、(bf)、(bg)、(bh)、(bi)、(bj)、(bk)、(bl)、(bm)、(bn)、(bo)、(bp)、(bq)、(br)、(bs)或(bt)的多肽的片段。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的动物饲料,其中所述蛋白源选自由以下项组成的组:大豆、野生大豆、菜豆、羽扇豆、花菜豆、红花菜豆、斯姆吉姆豆、利马豆、法国菜豆、蚕豆、鹰嘴豆、扁豆、花生、西班牙花生、加拿大油菜、葵花籽、棉籽、油菜籽(油籽油菜)或豌豆,或者为经加工形式例如大豆粉、全脂大豆粉、大豆蛋白浓缩物(SPC)、发酵大豆粉(FSBM)、葵花粉、棉籽粉、油菜籽粉、鱼粉、骨粉、羽毛粉、乳清或它们的任何组合。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的动物饲料,其中所述能量源选自由以下项组成的组:玉蜀黍、玉米、高粱、大麦、小麦、燕麦、稻米、黑小麦、黑麦、甜菜、糖用甜菜、菠菜、马铃薯、木薯、藜麦、卷心菜、柳枝稷、小米、珍珠粟、狗尾粟,或者为经加工形式例如磨碎玉米、磨碎玉蜀黍、马铃薯淀粉、木薯淀粉、磨碎高梁、磨碎柳枝稷、磨碎小米、磨碎狗尾粟、磨碎珍珠粟或它们的任何组合。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的动物饲料,其中所述动物饲料添加剂改善营养物吸收。
8.一种用于改善动物中营养物吸收的方法,其包括向所述动物施用根据权利要求1至7中任一项所述的动物饲料。
9.根据权利要求8所述的方法,其中所述具有胞壁质酶活性的多肽的剂量水平可以为100至1000mg酶蛋白/kg动物饲料,例如200至900mg、300至800mg、400至700mg或500至600mg酶蛋白/kg动物饲料,或这些区间的任何组合。
10.根据权利要求8至9中任一项所述的方法,其中所述动物是单胃动物,例如猪或猪科动物(包括但不限于仔猪、成长猪和母猪);家禽(包括但不限于家禽、火鸡、鸭、鹌鹑、珍珠鸡、鹅、鸽子、乳鸽、鸡、肉鸡、产卵鸡、小母鸡和雏鸡);宠物动物例如猫和狗;鱼(包括但不限于琥珀鱼、巨滑舌鱼、魮鱼、鲈鱼、蓝鱼、菖鲉、鲷科海鱼、大头鱼、卡叉马鱼、鲤鱼、鲶鱼、卡特拉鱼、遮目鱼、红点鲑鱼、丽体鱼、军曹鱼、鳕鱼、莓鲈、黄金河虎、鼓鱼、鳗鱼、虾虎鱼、金鱼、丝足鱼、石斑鱼、瓜波特鱼、大比目鱼、爪哇鱼、野鲮鱼、莱鱼、泥鳅、鲭鱼、虱目鱼、银鲈、泥鱼、鲻鱼、帕高鱼、珍珠斑点鱼、佩杰瑞鱼、河鲈鱼、狗鱼、鲳参鱼、斜齿鳊、鲑鱼、长丝异鳃鲶、加拿大梭鲈、黑鲈、海鲷鱼、发光鱼、睡鱼、黑鱼、鲷鱼、锯盖鱼、比目鱼、刺足鱼、鲟鱼、翻车鱼、香鱼、丁鲷、特罗尔鱼、罗非鱼、鳟鱼、鲔鱼、多宝鱼、白鳟鱼、碧古鱼和白鲑);以及甲壳动物(包括但不限于河虾和对虾),在一个更优选的实施方式中,动物选自由以下项组成的组:猪科动物、家禽、甲壳动物和鱼,在一个甚至更优选的实施方式中,动物选自由以下项组成的组:猪科动物、仔猪、成长猪、母猪、鸡、肉鸡、产卵鸡、小母鸡和雏鸡。
11.根据权利要求1至7中任一项所述的动物饲料或饲料添加剂用于改善营养物吸收的用途。
12.根据权利要求11所述的用途,其中所述具有胞壁质酶活性的多肽的剂量水平可以为100至1000mg酶蛋白/kg动物饲料,例如200至900mg、300至800mg、400至700mg或500至600mg酶蛋白/kg动物饲料,或这些区间的任何组合。
13.根据权利要求11至12中任一项所述的用途,其中所述动物是单胃动物,例如猪或猪科动物(包括但不限于仔猪、成长猪和母猪);家禽(包括但不限于家禽、火鸡、鸭、鹌鹑、珍珠鸡、鹅、鸽子、乳鸽、鸡、肉鸡、产卵鸡、小母鸡和雏鸡);宠物动物例如猫和狗;鱼(包括但不限于琥珀鱼、巨滑舌鱼、魮鱼、鲈鱼、蓝鱼、菖鲉、鲷科海鱼、大头鱼、卡叉马鱼、鲤鱼、鲶鱼、卡特拉鱼、遮目鱼、红点鲑鱼、丽体鱼、军曹鱼、鳕鱼、莓鲈、黄金河虎、鼓鱼、鳗鱼、虾虎鱼、金鱼、丝足鱼、石斑鱼、瓜波特鱼、大比目鱼、爪哇鱼、野鲮鱼、莱鱼、泥鳅、鲭鱼、虱目鱼、银鲈、泥鱼、鲻鱼、帕高鱼、珍珠斑点鱼、佩杰瑞鱼、河鲈鱼、狗鱼、鲳参鱼、斜齿鳊、鲑鱼、长丝异鳃鲶、加拿大梭鲈、黑鲈、海鲷鱼、发光鱼、睡鱼、黑鱼、鲷鱼、锯盖鱼、比目鱼、刺足鱼、鲟鱼、翻车鱼、香鱼、丁鲷、特罗尔鱼、罗非鱼、鳟鱼、鲔鱼、多宝鱼、白鳟鱼、碧古鱼和白鲑);以及甲壳动物(包括但不限于河虾和对虾),在一个更优选的实施方式中,动物选自由以下项组成的组:猪科动物、家禽、甲壳动物和鱼,在一个甚至更优选的实施方式中,动物选自由以下项组成的组:猪科动物、仔猪、成长猪、母猪、鸡、肉鸡、产卵鸡、小母鸡和雏鸡。
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