CN111474256A - 基于hplc-msms的粪便中胆汁酸定量分析方法 - Google Patents

基于hplc-msms的粪便中胆汁酸定量分析方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111474256A
CN111474256A CN202010298305.0A CN202010298305A CN111474256A CN 111474256 A CN111474256 A CN 111474256A CN 202010298305 A CN202010298305 A CN 202010298305A CN 111474256 A CN111474256 A CN 111474256A
Authority
CN
China
Prior art keywords
acid
bile acid
bile
methanol
phase
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202010298305.0A
Other languages
English (en)
Inventor
张惠萍
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shanghai Applied Protein Technology Co Ltd
Original Assignee
Shanghai Applied Protein Technology Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shanghai Applied Protein Technology Co Ltd filed Critical Shanghai Applied Protein Technology Co Ltd
Priority to CN202010298305.0A priority Critical patent/CN111474256A/zh
Publication of CN111474256A publication Critical patent/CN111474256A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G01N30/14—Preparation by elimination of some components
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
    • G01N30/72—Mass spectrometers
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N2030/042—Standards
    • G01N2030/045—Standards internal

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)

Abstract

一种基于HPLC‑MSMS的粪便中胆汁酸定量分析方法，以同位素胆汁酸为内标，采用超高效液相色谱‑三重四级杆质谱联用技术对粪便中人源结合型和非结合型胆汁酸进行定量检测，使胆汁酸检测具有灵敏度高，特异性强，和定量结果准确的优点，对28种人源结合型和非结合型胆汁酸的检测，覆盖了人体重要的胆汁酸，为临床检测和疾病研究提供技术手段，样本处理快速，结果准确，适用于临床诊断和科研应用。

Description

基于HPLC-MSMS的粪便中胆汁酸定量分析方法
技术领域
本发明涉及生物技术检测领域，具体涉及一种基于HPLC-MSMS的粪便中胆汁酸定量分析方法。
背景技术
胆汁酸是胆汁的重要主成，在肝脏中合成，具有多种生理功能，不仅在脂肪和脂溶性维生素的吸收、转运过程和防止胆石生成中发挥重要的作用，而且胆汁酸是胆固醇降解的主要通路。胆汁酸不仅与脂肪吸收和胆固醇降解有关，还是一种重要的信号分子，与能量的动态平衡及葡萄糖代谢有关。肠道菌群与胆汁酸代谢关系密切，均参与了肥胖、糖尿病等代谢性疾病的发生发展。
肠道菌群可以发挥生物屏障、免疫调节、营养支持、抗肿瘤等作用，并且人体肠道菌群的组成具有个体特异性。肠道微生物可以影响胆汁酸的代谢、合成和重吸收，同时胆汁酸亦可以反过来调控肠道菌群的稳态，抑制细菌生长。通过调节调节宿主-肠道菌群-胆汁酸轴可以实现治疗糖尿病、肥胖等代谢性疾病。因此检测粪便中的胆汁酸含量对诊断、治疗疾病具有重要意义。
发明内容
本发明的目的是提供一种基于HPLC-MSMS的粪便中胆汁酸定量分析方法，以同位素胆汁酸为内标，对粪便中人源结合型和非结合型胆汁酸进行定量检测，具有方法实验原理简单明确，样本处理快速，结果准确，适用于临床诊断和科研应用。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
一种基于HPLC-MSMS的粪便中胆汁酸定量分析方法，包括如下步骤：
步骤S1配制内标溶液，分别精密称取同位素胆汁酸，加入甲醇溶解，将各同位素胆汁酸甲醇溶液混合均匀，再用50％的甲醇溶液配制成混合内标溶液；
步骤S2配制标准品混合液，分别精密称取各胆汁酸标准品，加入甲醇溶解，将各胆汁酸标准品溶液混合均匀，再用50％的甲醇溶液配制成系列浓度梯度的混合内标溶液，系列浓度梯度的混合内标溶液加入步骤S1制得的混合内标溶液后进行步骤S4的色谱分析和S5的质谱分析，并绘制标准曲线；
步骤S3样品前处理，取粪便样品，加入超纯水进行混浆处理，取样品混浆加入甲醇和步骤S1制得的混合内标溶液，涡旋混合，孵育沉淀蛋白，离心取上清液，将上清液真空干燥，备用；色谱进样前采用甲醇水溶液复溶，离心，取上清液进行步骤S4和S5的分析；
步骤S4高效液相色谱分析，色谱条件是：8℃进样，柱温45℃，流速为250μL/min，相关液相梯度如下：0-7min，B相从60％线性变化到70％；7-15min，B相从70％线性变化至85％；15-17min，B相维持在85％；17-17.1min，B相从85％线性变化至60％；17.1-20min，B相维持在60％；
步骤S5质谱分析，串联质谱分析，两级质谱的条件都是：电喷雾电离负离子(ESI-)检测模式下，采用多反应监测(MRM)的质谱扫描模式对；离子源温度(sourcetemperature)：550℃，雾化气压(ion Source Gas1(Gas1))：40，辅助气压(Ion SourceGas2(Gas2))：40，气帘气(Curtain gas(CUR))：30，喷雾电压(ionSapary VoltageFloating(ISVF))：-4500V。
根据以上方案，所述的步骤S1中的混合内标溶液是各同位素胆汁酸的浓度均为200ng/mL的混合内标溶液；所述的同位素胆汁酸包括胆酸-d4(Cholic acid-d4)，鹅脱氧胆酸-d4(Chenodeoxycholic acid-d4)，脱氧胆酸-d5(Deoxycholic acid-d5)，甘胆酸-d5(Glycocholic acid-d5)，甘鹅脱氧胆酸-d7-钠盐(Glycochenodeoxycholic acid-d7sodium salt)，α-猪脱氧胆酸-d5(α-Hyodeoxycholic acid-d5)，熊脱氧胆酸(Ursodeoxycholic acid-d4)，甘熊脱氧胆酸-d5(Glycoursodeoxycholic acid-d5)，石胆酸-d4(Lithocholic acid-d4)，牛磺胆酸-d5-钠盐(Taurocholic acid-d5 sodium salt)，牛磺鹅脱氧胆酸-d5-钠盐(Taurochenodexycholic acid-d5 sodium salt)，甘脱氧胆酸-d4(Glycodeoxycholic acid-d4)，牛磺脱氧胆酸-d4-钠盐(Taurodeoxycholic acid-d4sodium salt)。
根据以上方案，所述的步骤S2中的系列浓度范围是1ng/mL-1000ng/mL；所述的胆汁酸标准品包括胆酸(Cholic acid)；α-鼠胆酸(α-Muricholic acid)；β-鼠胆酸(β-Muricholic acid)；γ-鼠胆酸(γ-Muricholic acid)；甘胆酸(Glycocholic acid)；牛磺胆酸(Taurocholic acid)；脱氧胆酸(Deoxycholic acid)；鹅脱氧胆酸(Chenodeoxycholicacid)；熊脱氧胆酸(Ursodeoxycholic acid)；猪脱氧胆酸(Hyodeoxycholic acid)；鼠胆酸(Murocholic acid)；甘脱氧胆酸(Glycodeoxycholic acid)；甘鹅脱氧胆酸(Glycochenodeoxycholic acid)；甘熊脱氧胆酸(Glycoursodeoxycholic acid)；甘熊脱氧胆酸(Glycohyodeoxycholic acid)；牛磺脱氧胆酸(Taurodeoxycholic acid)；牛磺鹅脱氧胆酸(Taurochenodexycholic acid)；牛磺熊脱氧胆酸(Tauroursodeoxycholic acid)；牛磺猪脱氧胆酸(Taurohyodeoxycholic acid)；石胆酸(Lithocholic acid)；异石胆酸(Isolithocholic acid)；甘石胆酸(Glycolithocholic acid)；牛磺石胆酸(Taurolithocholic acid)；去氢胆酸(3-Dehydrocholic acid)；7-酮基脱氧胆酸(7-Ketodeoxycholic acid)；6，7-二酮基石胆酸(6,7-Diketolithocholic acid)；7-酮基石胆酸(7-Ketolithocholic acid)和12-酮基石胆酸(12-Ketolithocholic acid)。
根据以上方案，所述的步骤S3中的超纯水和甲醇均预先冷冻到4℃；所述的孵育沉淀蛋白是-20℃孵育20min沉淀蛋白；所述的离心是4℃条件下，14000rcf离心15min；用于复溶的甲醇水溶液为50％甲醇水溶液。
根据以上方案，所述的步骤S4中的A相为0.1％FA水溶液，B相为甲醇。
根据以上方案，所述的步骤S5的质谱分析中各离子对及其对应的去簇电压、碰撞电压和碰撞池出口电压参数如下：
Figure BDA0002453041530000031
Figure BDA0002453041530000041
Figure BDA0002453041530000051
同时检测目标胆汁酸离子对以及同位素内标胆汁酸离子对，上半部分为目标胆汁酸离子对，下半部分是同位素内标胆汁酸离子对；其中，DP是去簇电压；CE是碰撞电压；EP是碰撞池出口电压；RT是色谱保留时间。
本发明的有益效果是：通过同位素内标定量，可对粪便中的28种人源性结合型和非结合型胆汁酸准确定量，方法精密度和准确度较高，可用于临床粪便样本的定量分析，为临床疾病提供了一种无创疾病诊断的方法，并为疾病肠道微生物研究提供了一种技术手段，具有方法灵敏度高、特异性高、准确且前处理方法简单的优点。
附图说明
图1是28种胆汁酸标品的提取离子色谱图；
图2是粪便中28种胆汁酸的提取离子色谱图。
附图为实施例中必然出现的实验结果图，每次实验的结果图谱会因每次实际实验的差异而发生变法，图中的文字不清晰不会影响本技术方案的重复实施。
具体实施方式
下面结合附图与实施例对本发明的技术方案进行说明。
一种基于HPLC-MSMS的粪便中胆汁酸定量分析方法，包括如下步骤：
步骤S1配制内标溶液，分别精密称取同位素胆汁酸，包括胆酸-d4，鹅脱氧胆酸-d4，脱氧胆酸-d5，甘胆酸-d5，甘鹅脱氧胆酸-d7-钠盐，α-猪脱氧胆酸-d5，熊脱氧胆酸，甘熊脱氧胆酸-d5，石胆酸-d4，牛磺胆酸-d5-钠盐，牛磺鹅脱氧胆酸-d5-钠盐，甘脱氧胆酸-d4，牛磺脱氧胆酸-d4-钠盐，加入甲醇溶解制成各种0.5mg/mL的同位素胆汁酸甲醇溶液，将各同位素胆汁酸甲醇溶液混合均匀，再用50％的甲醇溶液配制成各胆汁酸的成分均为200ng/mL的混合内标溶液。
步骤S2配制标准品混合液，分别精密称取各胆汁酸标准品，包括胆酸；α-鼠胆酸；β-鼠胆酸；γ-鼠胆酸；甘胆酸；牛磺胆酸；脱氧胆酸；鹅脱氧胆酸；熊脱氧胆酸；猪脱氧胆酸；鼠胆酸；甘脱氧胆酸；甘鹅脱氧胆酸；甘熊脱氧胆酸；甘熊脱氧胆酸；牛磺脱氧胆酸；牛磺鹅脱氧胆酸；牛磺熊脱氧胆酸；牛磺猪脱氧胆酸；石胆酸；异石胆酸；甘石胆酸；牛磺石胆酸；去氢胆酸；7-酮基脱氧胆酸；6，7-二酮基石胆酸；7-酮基石胆酸和12-酮基石胆酸，加入甲醇溶解制成5mg/mL的标准品溶液，将各胆汁酸标准品溶液混合均匀，再用50％的甲醇溶液配制成系列浓度梯度的混合内标溶液，包括1ng/mL、2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、500ng/mL和1000ng/mL，各浓度梯度的混合内标溶液都加入步骤S1制得的混合内标溶液后进行步骤S4的色谱分析和S5的质谱分析，并绘制标准曲线，标准品的离子色谱图如图1。
步骤S3样品前处理，取30g粪便样品，加入300μL预冷至4℃的超纯水进行混浆处理，匀浆液稀释10倍后，取100μL样品混浆加入500μL预冷至4℃的甲醇和10μL步骤S1制得的混合内标溶液，涡旋混合，-20℃孵育20min沉淀蛋白，4℃条件下，14000rcf离心15min，取上清液400μL真空干燥，备用；色谱进样前采用100μL50％甲醇水溶液复溶，4℃条件下，14000rcf离心15min，取上清液进行步骤S4和S5的分析，粪便中28种胆汁酸的提取离子色谱图如图2所示。
步骤S4高效液相色谱分析，采用超高效液相色谱系统进行分离；流动相：A相为0.1％FA水溶液，B相为甲醇。色谱柱：Waters,ACQUITY UPLC BEH C18 1.7μm,2.1mm×100mmcolumn，8℃进样，柱温45℃，流速为250μL/min，相关液相梯度如下：0-7min，B相从60％线性变化到70％；7-15min，B相从70％线性变化至85％；15-17min，B相维持在85％；17-17.1min，B相从85％线性变化至60％；17.1-20min，B相维持在60％。
步骤S5质谱分析，串联质谱分析，两级质谱的条件都是：电喷雾电离负离子检测模式下，采用多反应监测的质谱扫描模式对；离子源温度：550℃，雾化气压：40，辅助气压：40，气帘气：30，喷雾电压：-4500V；同时检测目标氨基酸离子对以及同位素内标氨基酸离子对，各离子对及其对应的去簇电压、碰撞电压和碰撞池出口电压参数如下：
Figure BDA0002453041530000061
Figure BDA0002453041530000071
Figure BDA0002453041530000081
上半部分为目标胆汁酸离子对，下半部分是同位素内标胆汁酸离子对；其中，DP是去簇电压；CE是碰撞电压；EP是碰撞池出口电压；RT是色谱保留时间。
取28种各100μg/mL浓度的标准品，用50％甲醇(1:1,v:v)配制成系列浓度的混合标准溶液(1ng/mL-1000ng/mL)，进样2μL分析。以各待测物峰面积与内标无峰面积比值为纵坐标y，相应的浓度为横坐标x，做线性回归曲线，y＝ax+b；以标曲最低点为定量限(LOQ)，结果如下：
Figure BDA0002453041530000082
Figure BDA0002453041530000091
从上述结果可以看出各待测物的线性相关系数R2均大于0.99，即28种胆汁酸在各自浓度线性范围内呈良好的线性关系，满足定量要求。
以上实施例仅用以说明而非限制本发明的技术方案，尽管上述实施例对本发明进行了详细说明，本领域的相关技术人员应当理解：可以对本发明进行修改或者同等替换，但不脱离本发明精神和范围的任何修改和局部替换均应涵盖在本发明的权利要求范围内。

Claims (6)

1.一种基于HPLC-MSMS的粪便中胆汁酸定量分析方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤S1配制内标溶液，分别精密称取同位素胆汁酸，加入甲醇溶解，将各同位素胆汁酸甲醇溶液混合均匀，再用50％的甲醇溶液配制成混合内标溶液；
步骤S2配制标准品混合液，分别精密称取各胆汁酸标准品，加入甲醇溶解，将各胆汁酸标准品溶液混合均匀，再用50％的甲醇溶液配制成系列浓度梯度的混合内标溶液，系列浓度梯度的混合内标溶液加入步骤S1制得的混合内标溶液后进行步骤S4的色谱分析和S5的质谱分析，并绘制标准曲线；
步骤S3样品前处理，取粪便样品，加入超纯水进行混浆处理，取样品混浆加入甲醇和步骤S1制得的混合内标溶液，涡旋混合，孵育沉淀蛋白，离心取上清液，将上清液真空干燥，备用；色谱进样前采用甲醇水溶液复溶，离心，取上清液进行步骤S4和S5的分析；
步骤S4高效液相色谱分析，色谱条件是：8℃进样，柱温45℃，流速为250μL/min，相关液相梯度如下：0-7min，B相从60％线性变化到70％；7-15min，B相从70％线性变化至85％；15-17min，B相维持在85％；17-17.1min，B相从85％线性变化至60％；17.1-20min，B相维持在60％；
步骤S5质谱分析，串联质谱分析，两级质谱的条件都是：电喷雾电离负离子检测模式下，采用多反应监测的质谱扫描模式对；离子源温度：550℃，雾化气压：40，辅助气压：40，气帘气：30，喷雾电压：-4500V。
2.根据权利要求1所述的基于HPLC-MSMS的粪便中胆汁酸定量分析方法，其特征在于，所述的步骤S1中的混合内标溶液是各同位素胆汁酸的浓度均为200ng/mL的混合内标溶液；所述的同位素胆汁酸包括胆酸-d4，鹅脱氧胆酸-d4，脱氧胆酸-d5，甘胆酸-d5，甘鹅脱氧胆酸-d7-钠盐，α-猪脱氧胆酸-d5，熊脱氧胆酸，甘熊脱氧胆酸-d5，石胆酸-d4，牛磺胆酸-d5-钠盐，牛磺鹅脱氧胆酸-d5-钠盐，甘脱氧胆酸-d4，牛磺脱氧胆酸-d4-钠盐。
3.根据权利要求1所述的基于HPLC-MSMS的粪便中胆汁酸定量分析方法，其特征在于，所述的步骤S2中的系列浓度范围是1ng/mL-1000ng/mL；所述的胆汁酸标准品包括胆酸；α-鼠胆酸；β-鼠胆酸；γ-鼠胆酸；甘胆酸；牛磺胆酸；脱氧胆酸；鹅脱氧胆酸；熊脱氧胆酸；猪脱氧胆酸；鼠胆酸；甘脱氧胆酸；甘鹅脱氧胆酸；甘熊脱氧胆酸；甘熊脱氧胆酸；牛磺脱氧胆酸；牛磺鹅脱氧胆酸；牛磺熊脱氧胆酸；牛磺猪脱氧胆酸；石胆酸；异石胆酸；甘石胆酸；牛磺石胆酸；去氢胆酸；7-酮基脱氧胆酸；6，7-二酮基石胆酸；7-酮基石胆酸和12-酮基石胆酸。
4.根据权利要求1所述的基于HPLC-MSMS的粪便中胆汁酸定量分析方法，其特征在于，所述的步骤S3中的超纯水和甲醇均预先冷冻到4℃；所述的孵育沉淀蛋白是-20℃孵育20min沉淀蛋白；所述的离心是4℃条件下，14000rcf离心15min；用于复溶的甲醇水溶液为50％甲醇水溶液。
5.根据权利要求1所述的基于HPLC-MSMS的粪便中胆汁酸定量分析方法，其特征在于，所述的步骤S4中的A相为0.1％FA水溶液，B相为甲醇。
6.根据权利要求1所述的基于HPLC-MSMS的粪便中胆汁酸定量分析方法，其特征在于，所述的步骤S5的质谱分析中各离子对及其对应的去簇电压、碰撞电压和碰撞池出口电压参数如下：
Figure FDA0002453041520000021
Figure FDA0002453041520000031
Figure FDA0002453041520000041
同时检测目标胆汁酸离子对以及同位素内标胆汁酸离子对，上半部分为目标胆汁酸离子对，下半部分是同位素内标胆汁酸离子对；其中，DP是去簇电压；CE是碰撞电压；EP是碰撞池出口电压；RT是色谱保留时间。
CN202010298305.0A 2020-04-16 2020-04-16 基于hplc-msms的粪便中胆汁酸定量分析方法 Pending CN111474256A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010298305.0A CN111474256A (zh) 2020-04-16 2020-04-16 基于hplc-msms的粪便中胆汁酸定量分析方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010298305.0A CN111474256A (zh) 2020-04-16 2020-04-16 基于hplc-msms的粪便中胆汁酸定量分析方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN111474256A true CN111474256A (zh) 2020-07-31

Family

ID=71753639

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010298305.0A Pending CN111474256A (zh) 2020-04-16 2020-04-16 基于hplc-msms的粪便中胆汁酸定量分析方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111474256A (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112505187A (zh) * 2020-12-11 2021-03-16 北京诺禾致源科技股份有限公司 Uplc-ms/ms联用检测粪便中胆汁酸的方法
CN113960221A (zh) * 2021-12-23 2022-01-21 中国中医科学院医学实验中心 基于粪便样本的胆汁酸全通路代谢轮廓的检测方法及其应用
CN113960222A (zh) * 2021-12-23 2022-01-21 中国中医科学院医学实验中心 基于血清样本的胆汁酸全通路代谢轮廓的检测方法及其应用
CN114923995A (zh) * 2022-04-21 2022-08-19 中山大学 一种广州管圆线虫病诊断生物标志物及其应用
CN117630240A (zh) * 2023-12-04 2024-03-01 浙江大学医学院附属儿童医院 粪便和肠道内容物的87种胆汁酸的提取及定量检测方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106885867A (zh) * 2017-03-30 2017-06-23 杭州佰辰医学检验所有限公司 高效液相色谱串联质谱检测血清中五种牛磺结合型胆汁酸的方法
CN107843671A (zh) * 2017-12-21 2018-03-27 杭州佰勤医疗器械有限公司 一种高通量液相色谱串联质谱的高通量液相色谱串联质谱的检测方法
CN108072704A (zh) * 2016-11-08 2018-05-25 中国科学院大连化学物理研究所 基于液相色谱质谱联用的粪便中胆汁酸的检测方法
CN110596295A (zh) * 2019-10-21 2019-12-20 上海百趣生物医学科技有限公司 一种检测胆汁酸的方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108072704A (zh) * 2016-11-08 2018-05-25 中国科学院大连化学物理研究所 基于液相色谱质谱联用的粪便中胆汁酸的检测方法
CN106885867A (zh) * 2017-03-30 2017-06-23 杭州佰辰医学检验所有限公司 高效液相色谱串联质谱检测血清中五种牛磺结合型胆汁酸的方法
CN107843671A (zh) * 2017-12-21 2018-03-27 杭州佰勤医疗器械有限公司 一种高通量液相色谱串联质谱的高通量液相色谱串联质谱的检测方法
CN110596295A (zh) * 2019-10-21 2019-12-20 上海百趣生物医学科技有限公司 一种检测胆汁酸的方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
KATRIN WEGNER ET AL: "Rapid analysis of bile acids in different biological matrices using LC-ESI-MS/MS for the investigation of bile acid transformation by mammalian gut bacteria", 《ANALYTICAL AND BIOANALYTICAL CHEMISTRY》 *
VIVALDY PRINVILLE ET AL: "Targeted Analysis of 46 Bile Acids to Study the Effect of Acetaminophen in Rat by LC-MS/MS", 《METABOLITES》 *
李檬 等: "粪便初次级胆汁酸检测在诊治婴儿胆汁淤积性肝病中的意义", 《中国实用儿科杂志》 *
胡红卫 等: "生物标记物粪便胆汁酸的测定在过敏性紫癜患儿诊治中的意义", 《中国当代儿科杂志》 *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112505187A (zh) * 2020-12-11 2021-03-16 北京诺禾致源科技股份有限公司 Uplc-ms/ms联用检测粪便中胆汁酸的方法
CN113960221A (zh) * 2021-12-23 2022-01-21 中国中医科学院医学实验中心 基于粪便样本的胆汁酸全通路代谢轮廓的检测方法及其应用
CN113960222A (zh) * 2021-12-23 2022-01-21 中国中医科学院医学实验中心 基于血清样本的胆汁酸全通路代谢轮廓的检测方法及其应用
CN113960222B (zh) * 2021-12-23 2022-02-25 中国中医科学院医学实验中心 基于血清样本的胆汁酸全通路代谢轮廓的检测方法及其应用
CN113960221B (zh) * 2021-12-23 2022-02-25 中国中医科学院医学实验中心 基于粪便样本的胆汁酸全通路代谢轮廓的检测方法及其应用
CN114923995A (zh) * 2022-04-21 2022-08-19 中山大学 一种广州管圆线虫病诊断生物标志物及其应用
CN117630240A (zh) * 2023-12-04 2024-03-01 浙江大学医学院附属儿童医院 粪便和肠道内容物的87种胆汁酸的提取及定量检测方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111474256A (zh) 基于hplc-msms的粪便中胆汁酸定量分析方法
Zhao et al. Application of faecal metabonomics on an experimental model of tubulointerstitial fibrosis by ultra performance liquid chromatography/high-sensitivity mass spectrometry with MSE data collection technique
Zhao et al. Elevated levels of circulating short-chain fatty acids and bile acids in type 2 diabetes are linked to gut barrier disruption and disordered gut microbiota
JP6082328B2 (ja) 胆汁酸同時分析方法
Qiao et al. Differentiation of various traditional Chinese medicines derived from animal bile and gallstone: simultaneous determination of bile acids by liquid chromatography coupled with triple quadrupole mass spectrometry
Daniel et al. Gut microbiota and fermentation-derived branched chain hydroxy acids mediate health benefits of yogurt consumption in obese mice
CN107843671A (zh) 一种高通量液相色谱串联质谱的高通量液相色谱串联质谱的检测方法
Zhou et al. Ginseng ameliorates exercise-induced fatigue potentially by regulating the gut microbiota
Zheng et al. In-situ layer-by-layer synthesized TpPa-1 COF solid-phase microextraction fiber for detecting sex hormones in serum
CN107621502A (zh) 基于lc‑ms/ms的胆汁和血清中16种胆汁酸的定量
Sharma Review on bile acid analysis
CN111830161A (zh) 一种检测血清中15种胆汁酸的方法
CN113960221B (zh) 基于粪便样本的胆汁酸全通路代谢轮廓的检测方法及其应用
CN111665308A (zh) 一种检测血清中15种胆汁酸的试剂盒及其应用
US20200003795A1 (en) Determination of analytes in liquid samples by mass spectrometry
Naritaka et al. Profile of bile acids in fetal gallbladder and meconium using liquid chromatography-tandem mass spectrometry
CN112098532A (zh) 一种改进的高效液相色谱串联质谱人血清中15种胆汁酸的检测方法
CN110988235A (zh) 一种人血清中15种胆汁酸谱的液相-质谱检测方法
Gao et al. Gut microbiota mediates the pharmacokinetics of Zhi-zi-chi decoction for the personalized treatment of depression
Zhang et al. Rapid identification of bile acids in snake bile using ultrahigh-performance liquid chromatography with electrospray ionization quadrupole time-of-flight tandem mass spectrometry
CN112505187A (zh) Uplc-ms/ms联用检测粪便中胆汁酸的方法
CN113960222B (zh) 基于血清样本的胆汁酸全通路代谢轮廓的检测方法及其应用
CN114509513B (zh) 多组织中胆汁酸的液相色谱高分辨质谱定性定量检测方法
Bhowmik et al. vMAlteration of bile acid metabolism in pseudo germ-free rats
Xuan et al. Characterization and quantification of representative bile acids in ileal contents and feces of diet-induced obese mice by UPLC-MS/MS

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20200731

RJ01 Rejection of invention patent application after publication