CN111466370A - 一种低成本且高效的葡萄花粉长期贮藏方法 - Google Patents

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CN111466370A CN202010442601.3A CN202010442601A CN111466370A CN 111466370 A CN111466370 A CN 111466370A CN 202010442601 A CN202010442601 A CN 202010442601A CN 111466370 A CN111466370 A CN 111466370A
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韩斌
郭紫娟
赵胜建
刘长江
袁军伟
李敏敏
尹勇刚
孙艳
贾楠
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N3/00—Preservation of plants or parts thereof, e.g. inhibiting evaporation, improvement of the appearance of leaves or protection against physical influences such as UV radiation using chemical compositions; Grafting wax

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Abstract

本发明涉及一种低成本且高效的葡萄花粉长期贮藏方法，所述方法包括：S1:将阴干的花粉收集到西林瓶中，瓶口盖上丁基胶塞，用封口膜包缠以将西林瓶瓶口封严；S2：准备至少四个封口袋；在第一封口袋内装入1/4～1/2容积量的变色干燥硅胶，然后将已封口的存放花粉的西林瓶放入第一封口袋内，将第一封口袋空气赶出进行真空封口；将第一封口袋装入第二封口袋内，将第二封口袋空气赶出进行真空封口；将第二封口袋卷折再次装入第三封口袋内，将第三封口袋空气赶出进行真空封口；再将第三封口袋卷折再次装入第四封口袋内，将第四封口袋空气赶出进行真空封口；S3:于‑80℃以下超低温冰箱中存放。本发明的贮藏方法，所用物品成本低，占用体积小、在‑80℃下贮藏3年仍可达鲜花粉生活力的80％。

Description

一种低成本且高效的葡萄花粉长期贮藏方法
技术领域
本发明涉及植物发育生物学领域，具体涉及一种低成本且高效的葡萄花粉长期贮藏方法。
背景技术
杂交育种是葡萄品种创制的重要途径，而花粉是进行杂交实验和研究的载体。花粉的生活力是确保杂交育种成功的一个重要条件。由于我国南北地区栽培普通的花期不一致，这为南北地区不同品种间杂交带来一定的困扰。花粉采集和贮藏是普通种质资源创新过程中亟待解决的问题。目前葡萄花粉长期贮藏方法以液氮超低温贮藏为主，需要专门的保藏人员长期保证液氮浸没花粉、液氮较贵，耗费人力，花费成本较高。
发明内容
(一)要解决的技术问题
为了解决现有技术的上述问题，本发明提供一种低成本且高效的葡萄花粉长期贮藏方法，用于替代“液氮超低温”贮藏方法，以实现低成本、高效率的葡萄花粉长期贮藏。
(二)技术方案
为了达到上述目的，本发明采用的主要技术方案包括：
一种低成本且高效的葡萄花粉长期贮藏方法，所述方法包括：
S1:将阴干的花粉收集到西林瓶中，瓶口盖上丁基胶塞，用封口膜包缠以将西林瓶瓶口封严；
S2：准备至少四个封口袋；在第一封口袋内装入1/4～1/2容积量的变色干燥硅胶，然后将已封口的存放花粉的西林瓶放入第一封口袋内，将第一封口袋空气赶出进行真空封口；将第一封口袋装入第二封口袋内，将第二封口袋空气赶出进行真空封口；将第二封口袋卷折再次装入第三封口袋内，将第三封口袋空气赶出进行真空封口；再将第三封口袋卷折再次装入第四封口袋内，将第四封口袋空气赶出进行真空封口；
S3:放入制冷温度在-80℃以下超低温冰箱中存放。
根据本发明较佳实施例，步骤S1中，花粉阴干的环境条件为：在室温25℃，室内相对湿度60％环境下，花粉自然阴干72小时。
根据本发明较佳实施例，在步骤S1之前，还包括花粉的采集步骤：在花初开期，即花序有5％花朵开放时，将整个花序采回；用小镊子镊人工剖取花药，放于硫酸纸制成的纸盒中平铺阴干；收集花药中的花粉。
根据本发明较佳实施例，所述变色干燥硅胶占第一第一封口袋容积量的1/3。
根据本发明较佳实施例，步骤S2中，所述对第一封口袋、第二封口袋、第三封口袋、第四封口袋进行真空封口时，可借助专门的真空封口设备或工具，或者人工手动将空气赶出。
根据本发明较佳实施例，手动将空气赶出的方法为：将第一、第二、第三、第四封口袋的封闭端先折叠出一个条形，然后向袋口方向不断地卷折，以将空气赶出，最后进行封口后，第一、第二、第三、第四封口袋被卷折成细条状。
根据本发明较佳实施例，在使用西林瓶和丁基胶塞前，还包括对西林瓶和丁腈胶塞的沸水清洗和高温烘干的消毒程序。
按照本发明的方法贮藏的花粉，在花粉取用时，从超低温冰箱中取出后，首先在4℃下恢复至少4小时，然后使用。
按照本发明的方法贮藏的花粉，贮藏3年仍可达鲜花粉生活力的80％。贮藏3年的花粉在田间杂交授粉坐果率同鲜花粉授粉的坐果率无显著差异。
(三)有益效果
本发明的有益效果是：
本发明设计了一种利用西林瓶、丁基胶塞，封口膜，封口袋，硅胶干燥剂、超低温冰箱等主要用品及设备的葡萄花粉长期贮藏方法，所用物品价格便宜成本低，最终装有花粉的封口袋占用体积小、便于存放，还可以放入带有干冰的泡沫箱中远距离运输，便于杂交育种工作开展。
按照本发明方法贮藏的花粉，在-80℃条件下贮藏3年仍可达鲜花粉生活力的80％。贮藏3年的花粉在田间杂交授粉坐果率同鲜花粉授粉的坐果率无显著差异。
附图说明
图1为本发明低成本且高效的葡萄花粉长期贮藏方法的流程图。
具体实施方式
为了更好的解释本发明，以便于理解，下面结合附图，通过具体实施方式，对本发明作详细描述。
如图1所示，本发明较佳实施例的低成本且高效的葡萄花粉长期贮藏方法，包括如下步骤：
第一步：花粉的采集
在花初开期，即花序有5％花朵开放时，将整个花序采回；用小镊子镊人工剖取花药，放于硫酸纸制成的纸盒中平铺阴干；干燥后，对折纸盒，将花粉连同花药一起收集贮藏。阴干的环境条件为：在室温25℃，室内相对湿度60％环境下，花粉自然阴干72小时以上。
第二步：花粉装入西林瓶
将阴干的花粉收集到西林瓶中，瓶口盖上丁基胶塞，用封口膜包缠以将西林瓶瓶口封严。在使用西林瓶和丁基胶塞前，还包括对西林瓶和丁腈胶塞的沸水清洗和高温烘干的消毒程序。
第三步：西林瓶装入多重封口袋
在第一封口袋内装入1/3容积量的变色干燥硅胶，然后将已封口的存放花粉的西林瓶放入第一封口袋内，将第一封口袋空气手动赶出并封口；将第一封口袋装入第二封口袋内，将第二封口袋空气手动赶出并封口；将第二封口袋卷折再次装入第三封口袋内，将第三封口袋空气手动赶出并封口；再将第三封口袋卷折再次装入第四封口袋内，将第四封口袋手动赶出并封口。
手动赶出空气的方法为：将封口袋的封闭底端沿着底边折叠出一个细长条(细长条以西林瓶的直径为宽度)，然后向封口袋的袋口方向不断地卷折，以将封口袋内的空气几乎赶出，最后进行封口后，封口袋卷折成细条状；如此可减少占据空间，也不易进空气。
第四步：超低温并行冷藏：放入制冷温度在-80℃以下超低温冰箱中存放。
按照本发明的方法贮藏的花粉，在花粉取用时，从超低温冰箱中取出后，首先在4℃下恢复至少4小时，然后使用。经实际使用发现，按照上述方法，即使贮藏3年，花粉的活力也可达鲜花粉生活力的80％。贮藏3年的花粉在田间杂交授粉坐果率同鲜花粉授粉的坐果率无显著差异。

Claims (7)

1.一种低成本且高效的葡萄花粉长期贮藏方法，其特征在于，所述方法包括：
S1:将阴干的花粉收集到西林瓶中，瓶口盖上丁基胶塞，用封口膜包缠以将西林瓶瓶口封严；
S2：准备至少四个封口袋；在第一封口袋内装入1/4～1/2容积量的变色干燥硅胶，然后将已封口的存放花粉的西林瓶放入第一封口袋内，将第一封口袋空气赶出进行真空封口；将第一封口袋装入第二封口袋内，将第二封口袋空气赶出进行真空封口；将第二封口袋卷折再次装入第三封口袋内，将第三封口袋空气赶出进行真空封口；再将第三封口袋卷折再次装入第四封口袋内，将第四封口袋空气赶出进行真空封口；
S3:放入制冷温度在-80℃以下超低温冰箱中存放。
2.根据权利要求1所述的葡萄花粉长期贮藏方法，其特征在于，步骤S1中，花粉阴干的环境条件为：在室温25℃，室内相对湿度60％环境下，花粉自然阴干72小时。
3.根据权利要求1所述的葡萄花粉长期贮藏方法，其特征在于，在步骤S1之前，还包括花粉的采集步骤：在花初开期，即花序有5％花朵开放时，将整个花序采回；用小镊子镊人工剖取花药，放于硫酸纸制成的纸盒中平铺阴干；收集花药中的花粉。
4.根据权利要求1所述的葡萄花粉长期贮藏方法，其特征在于，步骤S2中，所述变色干燥硅胶占第一第一封口袋容积量的1/3。
5.根据权利要求1所述的葡萄花粉长期贮藏方法，其特征在于，步骤S2中，所述对第一封口袋、第二封口袋、第三封口袋、第四封口袋进行真空封口时，可借助专门的真空封口设备或工具，或者人工手动将空气赶出。
6.根据权利要求5所述的葡萄花粉长期贮藏方法，其特征在于，手动将空气赶出的方法为：将第一、第二、第三、第四封口袋的封闭端先折叠出一个条形，然后向袋口方向不断地卷折，以将空气赶出，最后进行封口后，第一、第二、第三、第四封口袋被卷折成细条状。
7.根据权利要求1所述的葡萄花粉长期贮藏方法，其特征在于，在使用西林瓶和丁基胶塞前，还包括对西林瓶和丁腈胶塞的沸水清洗和高温烘干的消毒程序。
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