CN111454941A - 一种采样液以及气溶胶中dna病毒的采样方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种采样液以及气溶胶中DNA病毒的采样方法，所述采样液包括第一存储液、第二存储液、第三存储液、第四存储液、第五存储液和第六存储液，其中，所述第一存储液为pH 8.0～8.5的Tris饱和酚，所述第二存储液为氯仿与异戊醇体积比为24:1的混合溶液，所述第三存储液为质量浓度0.2～1％的β‑巯基乙醇水溶液，所述第四存储液为质量浓度10％的聚乙烯吡咯烷酮水溶液，所述第五存储液为摩尔浓度1M的乙二胺四乙酸水溶液，所述第六存储液为浓度19g/L的低熔点琼脂糖水溶液。本发明提供的采样液能够使气溶胶中的DNA病毒失活，释放病毒的核酸于采样液中，降低了研究人员在取样及检测过程中的操作风险。
Description
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种采样液以及气溶胶中DNA病毒的采样方法。
背景技术
气溶胶是固态和液态微粒与气体介质构成的分散系统，生物气溶胶则是悬浮于大气中的含有微生物或生物大分子等生命活性物质的固态或液态微粒。大气中的DNA病毒通常吸附于大气的颗粒物质表面，形成了生物气溶胶，其种类及致病性与人类的健康密切相关，可引起呼吸道感染以及其他疾病。
对环境中微生物气溶胶的检测包括两个重要的环节，其一为取样环节，其二为后期的检测环节。目前，气溶胶病原体的采样方法包括自然沉降法、撞击法、冲击法、离心法、采样膜法等，其往往存在对气溶胶颗粒物的采集效率低、采集气溶胶粒子粒径范围小、气溶胶中病原体存活率高等问题。近年来也出现了一些新的气溶胶病原体采样方式，例如有学者设计了首个便携式空气气溶胶病原体快速采样检测系统，通过微流控芯片实现病原体的采集与检测，操作简便；或者在微流控通道内加装鱼骨构型，可实现气溶胶病原体快速采集，9min样本采集效率接近100％；或者将微流控芯片与环介导恒温扩增(LAMP)结合，对金黄色葡萄球菌的检测限为24个/反应，检测总时间为1.5h。尽管在采样及后续检测技术上都取的了较大的进展，但对于高致病性的病毒，目前采样环节依然暴露了一些问题，如采样器的采样液中病原体依然具有活性，导致对后续的处理需要严格在高级生物安全实验室中进行，给后续的处理带来了极大的不便和极大的操作风险。
发明内容
本发明的主要目的是提出一种采样液以及气溶胶中DNA病毒的采样方法，旨在解决现有采样方式中采样液中收集到的病原体依然具有活性，不便于后续研究和检测的问题。
为实现上述目的，本发明提出一种采样液，用于气溶胶中DNA病毒的采样，所述采样液包括第一存储液、第二存储液、第三存储液、第四存储液、第五存储液和第六存储液，其中，所述第一存储液为pH 8.0～8.5的Tris饱和酚，所述第二存储液为氯仿与异戊醇体积比为24:1的混合溶液，所述第三存储液为质量浓度0.2～1％的β-巯基乙醇水溶液，所述第四存储液为质量浓度10％的聚乙烯吡咯烷酮水溶液，所述第五存储液为摩尔浓度1M的乙二胺四乙酸水溶液，所述第六存储液为浓度19g/L的低熔点琼脂糖水溶液。
可选地，所述第一存储液、第二存储液、第三存储液、第四存储液、第五存储液和第六存储液的体积比为(8～10)：(8～10)：(0.4～0.8)：(5～6)：(0.8～1)：(1～3)。
为实现上述目的，本发明还提出一种气溶胶中DNA病毒的采样方法，包括以下步骤：
步骤S20、使待采样的气溶胶与采样液混合，以使所述气溶胶中的DNA病毒失活，释放病毒的核酸于所述采样液中，得到收集于所述采样液中的失活病毒样品，其中，所述采样液为如上所述的采样液。
可选地，步骤S20包括：
将采样液装入到气溶胶采样器中设置的采样管中，开启气溶胶采样器采气，使待采样的气溶胶进入到所述采样管中与所述采样液混合，以使所述气溶胶中的DNA病毒失活，释放病毒的核酸于所述采样液中，得到收集于所述采样液中的失活病毒样品；其中，所述气溶胶采样器的采气过程中，采气量为7～10L/min，采气时间为5～10min。
可选地，步骤S20之后，还包括：
步骤S30、对所述失活病毒样品进行振荡，然后离心收集上清液；
步骤S40、向所述上清液加入异丙醇，混合后在室温下静置10～30min，然后离心收集沉淀；
步骤S50、将所述沉淀使用乙醇溶液清洗后干燥，然后溶于无菌水中，得到用于病毒基因检测的病毒样品。
可选地，步骤S30中：
所述振荡过程中的振荡转速为1000～3000r/min，振荡时间为3～5min；和/或，
所述离心过程中的离心力为8000～12000g。
可选地，步骤S40中：所述离心过程中的温度为3～5℃，离心力为8000～12000g，离心时间为5～10min。
可选地，步骤S20之前，还包括：
步骤S10、将待采样的病毒样品制备成病毒溶液，然后通过雾化将所述病毒溶液制成气溶胶，再对所述气溶胶进行稀释，得到待采样的气溶胶。
可选地，步骤S10中：所述雾化过程中的进样量为0.1～0.3mL/min，雾化时间为20～30min。
可选地，步骤S10中：所述病毒溶液中病毒的终浓度为(2～7)×108TU/mL。
本发明提供的技术方案中，以第一存储液、第二存储液、第三存储液、第四存储液、第五存储液和第六存储液配制成为采样液，该采样液在用于对气溶胶中的DNA病毒进行采样时，能够使气溶胶中的DNA病毒失活，释放病毒的核酸于采样液中，从而使得采集到的病毒样品不再具有传染性和致病性，降低了研究人员在后续研究检测过程中的操作风险。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅为本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为本发明提供的气溶胶中DNA病毒的采样方法的一实施例的流程示意图；
图2为本发明提供的气溶胶中DNA病毒的采样方法的一实施例中所采用的采样系统的结构示意图。
附图标号说明：
本发明目的的实现、功能特点及优点将结合实施例，参照附图做进一步说明。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
传统的气溶胶病原体的采样方法包括自然沉降法、撞击法、冲击法、离心法、采样膜法等，其往往存在对气溶胶颗粒物的采集效率低、采集气溶胶粒子粒径范围小、气溶胶中病原体存活率高等问题。尽管目前在采样及后续检测技术上都取的了较大的进展，但对于高致病性的病毒，现有的采样环节依然暴露了一些问题，如采样器的采样液中采集到的病原体依然具有活性，导致对后续的处理需要严格在高级生物安全实验室中进行，给研究人员后续的检测研究工作带来了极大的不便和极大的操作风险。
鉴于此，本发明提出一种采样液，用于气溶胶中DNA病毒的采样，所述采样液包括第一存储液、第二存储液、第三存储液、第四存储液、第五存储液和第六存储液，其中，所述第一存储液为pH 8.0～8.5的Tris饱和酚，所述第二存储液为氯仿与异戊醇体积比为24:1的混合溶液，所述第三存储液为质量浓度0.2～1％的β-巯基乙醇水溶液，所述第四存储液为质量浓度10％的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)水溶液，所述第五存储液为摩尔浓度1M的乙二胺四乙酸(EDTA)水溶液，所述第六存储液为浓度19g/L的低熔点琼脂糖水溶液。
本发明提供的技术方案中，以第一存储液、第二存储液、第三存储液、第四存储液、第五存储液和第六存储液配制成为采样液，该采样液在用于对气溶胶中的DNA病毒进行采样时，能够使气溶胶中的DNA病毒失活，释放病毒的核酸于采样液中，从而使得采集到的病毒样品不再具有传染性和致病性，降低了研究人员在后续研究检测过程中的操作风险，更便利于研究人员开展后续的研究工作。
进一步地，为保证所述采样液的使用效果，优选为先对应准备各个存储液，在需要使用时，再按比例配制新鲜的采样液，在配制时，所述第一存储液、第二存储液、第三存储液、第四存储液、第五存储液和第六存储液的体积比为(8～10)：(8～10)：(0.4～0.8)：(5～6)：(0.8～1)：(1～3)，在此比例下配制所得的采样液，均可以实现使气溶胶中的DNA病毒失活，释放病毒的核酸于所述采样液中。
基于上述提供的采样液，本发明还提出一种气溶胶中DNA病毒的采样方法，该方法使用过上述提供的采样液进行，图1所示为本发明提供的气溶胶中DNA病毒的采样方法的一实施例。请参阅图1，在本实施例中，所述气溶胶中DNA病毒的采样方法包括以下步骤：
步骤S20、使待采样的气溶胶与采样液混合，以使所述气溶胶中的DNA病毒失活，释放病毒的核酸于所述采样液中，得到收集于所述采样液中的失活病毒样品，其中，所述采样液为如上所述的采样液。
通过在采样过程中使气溶胶中的DNA病毒与所述采样液接触而失活，释放病毒的核酸于所述采样液中，从而使得采集到的待检测病毒不再具有传染性和致病性，降低了研究人员在相关工作中的操作风险。
在具体实施时，步骤S20可以通过气溶胶采样器进行，所述气溶胶采样器中设置有用于盛装采样液的采样管，步骤S20的实施方式如下：将采样液装入到气溶胶采样器中设置的采样管中，开启气溶胶采样器采气，使待采样的气溶胶进入到所述采样管中与所述采样液混合，以使所述气溶胶中的DNA病毒失活，释放病毒的核酸于所述采样液中，得到收集于所述采样液中的失活病毒样品。进一步地，所述气溶胶采样器的采气过程中，采气量为7～10L/min，采气时间为5～10min，通过控制采气参数，可以使得进入所述取样管13中的气溶胶与所述采样液具有充分的接触时间，而释放出DNA病毒的核酸于所述采样液中。
参阅图2所示，本发明还提供了本实施例中气溶胶中DNA病毒的采样方法所采用的采样系统100的结构图，该采样系统100包括气溶胶采样器10，所述气溶胶采样器10包括液体撞击瓶11、微流泵12和取样管，所述液体撞击瓶11设有进气口和出气口(附图未标示)；所述微流泵12与所述液体撞击瓶11的出气口连接；所述取样管13设于所述液体撞击瓶11的内部，且对应所述进气口设置，所述取样管13用于盛装本发明上述提供的采样液，以收集进入所述取样管13的气溶胶中DNA病毒的核酸。
使用所述气溶胶采样器10进行采气的具体方式如下：开启所述微流泵12，使气溶胶样品经由所述液体撞击瓶11的进气口进入，并对应与所述取样13管内预先放置的采样液接触混合，使所述气溶胶样品中的DNA病毒失活，并释放出病毒的核酸于所述采样液中，剩余的部分自所述液体撞击瓶11的出气口排出。通过此种方式，可以直接对空气环境中可能包含有DNA病毒的气溶胶样品进行采样，并收集气溶胶中DNA病毒的核酸，作为后续可用于基因检测的病毒样品。
在经过步骤S20采集到失活病毒样品之后，为便于后续的病毒基因检测等工作的开展，优选为对采集于所述采样液中的失活病毒样品进行进一步的处理，参阅图1所示，在本实施例中，步骤S20之后，还包括：
步骤S30、对所述失活病毒样品进行振荡，然后离心收集上清液；
待所述气溶胶采样器10采气结束后，从所述液体撞击瓶11中取出所述取样管13，置于涡旋振荡器上进行振荡，所述振荡过程中的振荡转速为1000～3000r/min，振荡时间为3～5min，使得采样管中所采集到的样本充分分散于所述采样液中，进一步确保DNA病毒与所述采样液的充分接触，使得采集到的DNA病毒全部失活；然后通过高速离心后收集上清液，所述离心过程中的离心力优选为8000～12000g，此外，为便于离心操作，所述取样管13优选为离心管，避免对收集有DNA病毒的核酸的采样液进行不必要的转移，导致影响采样结果。
步骤S40、向所述上清液加入异丙醇，混合后在室温下静置10～30min，然后离心收集沉淀；
离心收集所述上清液后，向所述上清液中加入异丙醇，优选为所述异丙醇的体积与所述上清液的体积等同，混合均匀后，在室温下静置10～30min，然后在4℃下，以8000～12000g的离心力离心5～10min，收集沉淀。
步骤S50、将所述沉淀使用乙醇溶液清洗后干燥，然后溶于无菌水中，得到用于病毒基因检测的病毒样品。
将收集到的沉淀使用1mL体积分数为75％的乙醇溶液(不含DNase)清洗一次并干燥，然后再将清洗、干燥后的沉淀溶于30μL不含有DNase(Deoxyribonuclease，脱氧核糖核酸酶)的无菌水中，得到可用于病毒基因检测的病毒样品。
经过上述步骤S20至步骤S50，可以对在空气中以气溶胶形式存在的DNA病毒直接进行采样，而当所需要采样检测的DNA病毒样品并非以气溶胶形式呈现时，还可以先将其雾化成为气溶胶，然后再加以采样。具体地，在本实施例中，步骤S20之前还包括：
步骤S10、将待采样的病毒样品制备成病毒溶液，然后通过雾化将所述病毒溶液制成气溶胶，再对所述气溶胶进行稀释，得到待采样的气溶胶。
将待采样的病毒样品制备成为病毒溶液，然后通过雾化作用形成为气溶胶，再使所述气溶胶进入到一个密闭环境中与空气接触混合而稀释，以模拟其在空气环境中以气溶胶形式存在的模式，更贴合于从空气环境中直接进行病毒采样的采样结果。进一步地，步骤S10中的雾化参数优选为：所述雾化过程中的进样量为0.1～0.3mL/min，雾化时间为20～30min，雾化效果较佳，能够将待采样的病毒样品充分被雾化为气溶胶。
更进一步地，在将待采样的病毒样品制备成为病毒溶液时，优选为所述病毒溶液中病毒的终浓度为(2～7)×108TU/mL，通过所述病毒溶液浓度的控制，以及雾化参数及采气参数的设置，使得所述病毒溶液经过雾化处理后所得的气溶胶，在经过所述密闭箱30稀释后进入到所述取样管13中后，能够完全释放出病毒的核酸，不会出现部分病毒无法释放其核酸于所述采样液中的情况。
对应地，参阅图2所示，采样系统100还包括气溶胶发生器20以及密闭箱30，其中，所述气溶胶发生器20设有第一进样口和第一出样口(附图未标示)，所述气溶胶发生器20用于使待采样的病毒样品雾化成为气溶胶；所述密闭箱30设有第二进样口和出第二出样口(附图未标示)，所述第二进样口与所述第一出样口连接，所述第二出样口与所述液体撞击瓶11的进气口连接，所述密闭箱30用于稀释所述气溶胶。
通过所述气溶胶发生器20和密闭箱30的设置，可以将待采样的病毒样品先雾化成为气溶胶，然后使所述气溶胶进入到所述密闭箱30中稀释，以模拟气溶胶在空气环境中的存在形式和浓度，然后再通过所述液体撞击瓶11的进气口进入到所述取样管13中，与所述取样管13中预置的采样液接触混合，释放DNA病毒的核酸于所述取样液中。其中，所述密闭箱30的作用是为经过所述气溶胶发生器20处理后的气溶胶提供一个密闭的空间，对于所述密闭箱30的尺寸和材质不作限定，而作为一种优选的实施方式，所述密闭箱30的尺寸为长1.5m、宽1m、高0.8m，材质为聚甲基丙烯酸甲酯有机玻璃。
可以理解的是，对于自身在空气中即可以以气溶胶形式存在的DNA病毒，也可以先经由所述气溶胶发生器20和所述密闭箱30处理后，再进入到所述气溶胶采样器10中，并不会对病毒采样结果造成影响。如此，本发明提供的气溶胶中DNA病毒的采样系统100不仅可以直接对在空气中以气溶胶形式存在的DNA病毒进行采样，对于待检测的、而又并非以气溶胶形式存在的病毒样品，也可以通过先将其雾化成为气溶胶后再采集气溶胶中DNA病毒的方式进行采样。
本发明提供的气溶胶中DNA病毒的采样方法，不仅可以直接对在空气中以气溶胶形式存在的DNA病毒进行采样，对于待检测的、而又并非以气溶胶形式存在的病毒样品，例如从患者身上采集到的唾液等可能含有病毒的样品，或者是以其他形式采集到的病毒样品，又或者是已经采集保存的已知病毒等等，也可以通过先将其雾化成为气溶胶后再采集气溶胶中DNA病毒的方式进行采样，并且通过在采样过程中使DNA病毒与采样液接触混合而失活，释放病毒的核酸于所述采样液中，从而使得采集到的病毒样品不再具有传染性和致病性，更便利于研究人员开展后续的研究、检测等工作，降低了研究人员在研究检测过程中的操作风险。
以下结合具体实施例和附图对本发明的技术方案作进一步详细说明，应当理解，以下实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
采样液：第一存储液9mL、第二存储液9mL、第三存储液600μL、第四存储液5.5mL、第五存储液0.9mL和第六存储液2mL。
实施例2
采样液：第一存储液8mL、第二存储液8mL、第三存储液400μL、第四存储液5mL、第五存储液0.8mL和第六存储液1mL。
实施例3
采样液：第一存储液10mL、第二存储液10mL、第三存储液800μL、第四存储液6mL、第五存储液1mL和第六存储液3mL。
实施例4
(1)将大肠杆菌T4病毒配制成终浓度5×108TU/mL的病毒溶液，然后取10mL病毒溶液置于气溶胶发生器中形成气溶胶，气溶胶发生器的雾化参数设置为：进样量0.2mL/min，雾化时间25min；
(2)在气溶胶采样器的液体撞击瓶中置入预先盛有实施例1中新鲜配制的采样液的离心管，在步骤(1)中的雾化停止后，开启微流泵使气溶胶采样器采气，设置采气量为8L/min，采气时间为7min；
(3)采气结束后，从气溶胶采样器的液体撞击瓶中取出离心管，置于涡旋振荡器上，以2000r/min的转速运行4min，然后以10000g的离心力离心后收集上清液；
(4)向上清液中加入等体积的异丙醇，混合均匀后，在室温下静置20min，然后在4℃下，以10000g的离心力离心8min，收集沉淀；
(5)将收集到的沉淀使用1mL体积分数为75％的乙醇溶液(不含DNase)清洗一次并干燥，然后再将清洗、干燥后的沉淀溶于30μL不含有DNase的无菌水中，得到可用于病毒基因检测的病毒样品。
对步骤(5)中采集到的大肠杆菌T4病毒进行相关检测(本文中后续实施例和对比例采集到的病毒的相关检测均采用此处提供的方法进行)：a、利用双层平板法检测病毒活性；b、利用PCR法检测病毒基因组(参见：黄慧珍等.基于g23基因的武汉东湖T4类浮游病毒多样性[J].中国环境科学,2011,31(3):443-447.)；c、利用DNA凝胶电泳法检测病毒基因组DNA抽提物。
检测结果为：未检测到T4病毒活性，PCR扩增正常，凝胶电泳检测到T4病毒基因组，病毒DNA浓度为3.1ng/μL。
实施例5
(1)将大肠杆菌T4病毒配制成终浓度2×108TU/mL的病毒溶液，然后取10mL病毒溶液置于气溶胶发生器中形成气溶胶，气溶胶发生器的雾化参数设置为：进样量0.1mL/min，雾化时间30min；
(2)在气溶胶采样器的液体撞击瓶中置入预先盛有实施例1中新鲜配制的采样液的离心管，在步骤(1)中的雾化停止后，开启微流泵使气溶胶采样器采气，设置采气量为7L/min，采气时间为10min；
(3)采气结束后，从气溶胶采样器的液体撞击瓶中取出离心管，置于涡旋振荡器上，以1000r/min的转速运行5min，然后以8000g的离心力离心后收集上清液；
(4)向上清液中加入等体积的异丙醇，混合均匀后，在室温下静置10min，然后在3℃下，以8000g的离心力离心10min，收集沉淀；
(5)将收集到的沉淀使用1mL体积分数为75％的乙醇溶液(不含DNase)清洗一次并干燥，然后再将清洗、干燥后的沉淀溶于30μL不含有DNase的无菌水中，得到可用于病毒基因检测的病毒样品。
对步骤(5)中采集到的鸡新城疫病毒进行相关检测，检测结果为：未检测到T4病毒活性，PCR扩增正常，凝胶电泳检测到T4病毒基因组，病毒DNA浓度为1.8ng/μL。
实施例6
(1)将大肠杆菌T4病毒配制成终浓度7×108TU/mL的病毒溶液，然后取10mL病毒溶液置于气溶胶发生器中形成气溶胶，气溶胶发生器的雾化参数设置为：进样量0.3mL/min，雾化时间30min；
(2)在气溶胶采样器的液体撞击瓶中置入预先盛有实施例1中新鲜配制的采样液的离心管，在步骤(1)中的雾化停止后，开启微流泵使气溶胶采样器采气，设置采气量为10L/min，采气时间为5min；
(3)采气结束后，从气溶胶采样器的液体撞击瓶中取出离心管，置于涡旋振荡器上，以3000r/min的转速运行3min，然后以12000g的离心力离心后收集上清液；
(4)向上清液中加入等体积的异丙醇，混合均匀后，在室温下静置30min，然后在5℃下，以12000g的离心力离心5min，收集沉淀；
(5)将收集到的沉淀使用1mL体积分数为75％的乙醇溶液(不含DNase)清洗一次并干燥，然后再将清洗、干燥后的沉淀溶于30μL不含有DNase的无菌水中，得到可用于病毒基因检测的病毒样品。
对步骤(5)中采集到的鸡新城疫病毒进行相关检测，检测结果为：未检测到T4病毒活性，PCR扩增正常，凝胶电泳检测到T4病毒基因组，病毒DNA浓度为3.9ng/μL。
对比例1
(1)采样液的配制与实施例1相同，不同之处在于不添加第一存储液；
(2)对大肠杆菌T4病毒进行采样，采样方法与实施例4相同，不同之处在于使用步骤(1)中配制的采样液。
对采集到的大肠杆菌T4病毒进行相关检测，检测结果为：检测到活病毒，PCR扩增正常，但凝胶电泳未检测到T4病毒基因组。
对比例2
(1)采样液的配制与实施例1相同，不同之处在于不添加第一存储液和第二存储液；
(2)对大肠杆菌T4病毒进行采样，采样方法与实施例4相同，不同之处在于使用步骤(1)中配制的采样液。
对采集到的大肠杆菌T4病毒进行相关检测，检测结果为：检测到活病毒，PCR扩增正常，但凝胶电泳未检测到T4病毒基因组。
对比例3
(1)采样液的配制与实施例1相同，不同之处在于不添加第六存储液；
(2)对大肠杆菌T4病毒进行采样，采样方法与实施例4相同，不同之处在于使用步骤(1)中配制的采样液。
对采集到的大肠杆菌T4病毒进行相关检测，检测结果为：未检测到活病毒，PCR扩增正常，凝胶电泳检测T4病毒基因组正常，病毒DNA浓度为25ng/μL。
从实施例4至6与对比例1至3的对比可知，本发明实施例提供的采样液同时包括第一存储液、第二存储液、第三存储液、第四存储液、第五存储液和第六存储液，在对气溶胶中的DNA病毒进行采样时，能够有效的使DNA病毒失活，释放病毒的核酸于采样液中，且不会对后续的相关病毒基因检测造成不良影响，而当缺少其中的一种或多种时，可能无法使病毒失活，或者出现对病毒的后续检测造成影响等问题。
以上仅为本发明的优选实施例，并非因此限制本发明的专利范围，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包括在本发明的专利保护范围内。
Claims (10)
1.一种采样液，用于气溶胶中DNA病毒的采样，其特征在于，所述采样液包括第一存储液、第二存储液、第三存储液、第四存储液、第五存储液和第六存储液，其中，所述第一存储液为pH 8.0～8.5的Tris饱和酚，所述第二存储液为氯仿与异戊醇体积比为24:1的混合溶液，所述第三存储液为质量浓度0.2～1％的β-巯基乙醇水溶液，所述第四存储液为质量浓度10％的聚乙烯吡咯烷酮水溶液，所述第五存储液为摩尔浓度1M的乙二胺四乙酸水溶液，所述第六存储液为浓度19g/L的低熔点琼脂糖水溶液。
2.如权利要求1所述的采样液，其特征在于，所述第一存储液、第二存储液、第三存储液、第四存储液、第五存储液和第六存储液的体积比为(8～10)：(8～10)：(0.4～0.8)：(5～6)：(0.8～1)：(1～3)。
3.一种气溶胶中DNA病毒的采样方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤S20、使待采样的气溶胶与采样液混合，以使所述气溶胶中的DNA病毒失活，释放病毒的核酸于所述采样液中，得到收集于所述采样液中的失活病毒样品，其中，所述采样液为如权利要求1或2所述的采样液。
4.如权利要求3所述的气溶胶中DNA病毒的采样方法，其特征在于，步骤S20包括：
将采样液装入到气溶胶采样器中设置的采样管中，开启气溶胶采样器采气，使待采样的气溶胶进入到所述采样管中与所述采样液混合，以使所述气溶胶中的DNA病毒失活，释放病毒的核酸于所述采样液中，得到收集于所述采样液中的失活病毒样品；其中，所述气溶胶采样器的采气过程中，采气量为7～10L/min，采气时间为5～10min。
5.如权利要求3所述的气溶胶中DNA病毒的采样方法，其特征在于，步骤S20之后，还包括：
步骤S30、对所述失活病毒样品进行振荡，然后离心收集上清液；
步骤S40、向所述上清液加入异丙醇，混合后在室温下静置10～30min，然后离心收集沉淀；
步骤S50、将所述沉淀使用乙醇溶液清洗后干燥，然后溶于无菌水中，得到用于病毒基因检测的病毒样品。
6.如权利要求5所述的气溶胶中DNA病毒的采样方法，其特征在于，步骤S30中：
所述振荡过程中的振荡转速为1000～3000r/min，振荡时间为3～5min；和/或，
所述离心过程中的离心力为8000～12000g。
7.如权利要求5所述的气溶胶中DNA病毒的采样方法，其特征在于，步骤S40中：所述离心过程中的温度为3～5℃，离心力为8000～12000g，离心时间为5～10min。
8.如权利要求3所述的气溶胶中DNA病毒的采样方法，其特征在于，步骤S20之前，还包括：
步骤S10、将待采样的病毒样品制备成病毒溶液，然后通过雾化将所述病毒溶液制成气溶胶，再对所述气溶胶进行稀释，得到待采样的气溶胶。
9.如权利要求8所述的气溶胶中DNA病毒的采样方法，其特征在于，步骤S10中：所述雾化过程中的进样量为0.1～0.3mL/min，雾化时间为20～30min。
10.如权利要求8所述的气溶胶中DNA病毒的采样方法，其特征在于，步骤S10中：所述病毒溶液中病毒的终浓度为(2～7)×108TU/mL。
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