CN111432818A - 用于治疗神经精神性系统性红斑狼疮的吡唑并哌啶衍生物和吡唑并嘧啶衍生物 - Google Patents
用于治疗神经精神性系统性红斑狼疮的吡唑并哌啶衍生物和吡唑并嘧啶衍生物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111432818A CN111432818A CN201880078211.3A CN201880078211A CN111432818A CN 111432818 A CN111432818 A CN 111432818A CN 201880078211 A CN201880078211 A CN 201880078211A CN 111432818 A CN111432818 A CN 111432818A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- compound
- formula
- pharmaceutically acceptable
- alkyl
- acceptable salt
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
- A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
- A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
- A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
- A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
Abstract
本发明涉及某些吡唑并哌啶衍生物在治疗与toll样受体的相互作用相关的疾病和病症中的用途。更具体地,所述治疗涉及NPSLE的治疗。
Description
技术领域
本发明涉及某些吡唑衍生物在治疗与Toll样受体的相互作用潜在相关的疾病和病症中的用途。更具体地,所述治疗涉及神经精神性红斑狼疮(NPSLE),包括中枢神经系统(CNS)-狼疮的治疗。
背景技术
US 9,126,999 B2和WO 2018/047081描述了某些吡唑并-哌啶衍生物的合成和一些功用。已知所述化合物可拮抗Toll样受体7和8(TLR7、TLR8),并且可用于治疗SLE和狼疮性肾炎。然而,US 9,126,999 B2和WO 2018/047081并未提及关于NPSLE的治疗。
NPSLE(包括CNS-狼疮)的潜在病理生理机制在很大程度上仍是未知的。
然而,已经鉴定出若干种致病途径,包括I型干扰素依赖性途径(参见Bialas等人,Nature[自然],2017年6月,22:546(7659):539-543)。当前认为没有可用于治疗NPSLE(包括CNS狼疮)的治疗方法,因此对相应治疗有着很高的医疗需求。
发明内容
本发明提供了用于治疗和/或预防需要这种治疗的受试者的NPSLE的新颖方法,所述方法包括向患有NPSLE的患者施用有效量的TLR7/TLR8拮抗剂,例如具有式(I)的化合物或具有式(II)的化合物;或其药学上可接受的盐。
附图说明
图1:在NZBW/F1模型中,具有式(Ib)的化合物对系统性疾病参数的功效。
图2:在NZBW/F1模型中,具有式(IIc)的化合物对系统性和神经病理学疾病参数的功效。
具体实施方式
在第一实施例中,本发明提供了用于在NPSLE的治疗和/或预防中使用的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐,由以下结构表示:
其中
R1是氢或任选地被卤素取代一次或多次的C1-C4烷基;
R2和R3彼此独立地是氢或C1-C6烷氧基;
R4是氢或C1-C6烷基;并且
R5是氢或C1-C6烷基。
在第二实施例中,本发明提供了用于根据第一实施例所述使用的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐,其中
R1是任选地被卤素取代一次或多次的C1-C4烷基;
R2和R3彼此独立地是C1-C6烷氧基;
R4是氢或C1-C6烷基;并且
R5是氢或甲基。
在第三实施例中,本发明提供了用于根据第一实施例所述使用的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐,其中
R1是被卤素取代一次或多次的C1-C4烷基;
R2和R3彼此独立地是C1-C6烷氧基;
R4是氢或C1-C6烷基;并且
R5是氢。
在第四实施例中,本发明提供了用于根据第一实施例所述使用的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐,其中
R1是三氟甲基或二氟甲基;
R2和R3均是甲氧基;
R4是氢;并且
R5是氢或甲基。
在第五实施例中,本发明提供了用于根据第一实施例所述使用的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐,其中所述化合物是具有式(Ia)的化合物,
或其药学上可接受的盐。
在第六实施例中,本发明提供了用于根据第一实施例所述使用的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐,其中所述化合物是具有式(Ib)的化合物,
或其药学上可接受的盐。
在第七实施例中,本发明提供了用于根据第一实施例所述使用的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐,其中所述化合物是(4-((5S,7R)-5-(3,4-二甲氧基苯基)-7-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)苯基)(哌嗪-1-基)甲酮。
在实施例8中,本发明提供了用于在NPSLE的治疗和/或预防中使用的具有式(II)的化合物或其药学上可接受的盐。具有式(II)的化合物或其药学上可接受的盐,由以下结构表示:
其中
L是-CH2-或-CH2CH2-;
R1是-NHC(=O)R6、-NHC(=O)(CH2)nR6、-NHC(=O)(CH2)mNHR5、-NHC(=O)(CH2)mN(R5)2、-NHC(=O)(CHR7)mNHR5、-NHC(=O)(CH2)mNH2、-NHC(=O)(CH2)nOR7、-NHC(=O)OR7、-NHC(=O)(CHR7)nR6、-NHC(=O)(CHR7)nN(R8)2、-NHC(=O)(CHR7)nNHR8、-NHC(=O)(CH2)nN(CD3)2、-NR7C(=O)R5、-NR7C(=O)(CH2)nR5、-NR7C(=O)OR5、-NHS(=O)2R5、-NHC(=O)(CH2)nNR7C(=O)R5、或-NHC(=O)(CH2)nNR7S(=O)2R5;
R2是H、C1-C6烷基或C1-C6卤代烷基;
R3是H、C1-C6烷基或-CD3;
R4是H、NH2、C1-C6烷基或卤代;
每个R5独立地选自C1-C6烷基、-CD3和-(CH2)nOR7;
R6是C3-C6环烷基或具有独立地选自N、NH、N(C1-C6烷基)和O的1至2个环成员的、未经取代或被1-2个R9基团取代的4-6元杂环烷基;
每个R7独立地选自H和C1-C6烷基;
每个R8独立地选自C1-C6卤代烷基、-(C(R7)2)nOR7和被1至3个-OH取代的C1-C6烷基;
每个R9独立地选自C1-C6烷基、羟基、卤代和被1至3个-OH取代的C1-C6烷基;
n是1、2、3、4、5或6;并且
m是1、2、3、4、5或6。
在实施例9中,本发明提供了用于根据实施例8所述使用的具有式(II)的化合物或其药学上可接受的盐,其中所述化合物是具有式(IIa)的化合物:
R2是H、C1-C6烷基或C1-C6卤代烷基;
R3是H、C1-C6烷基或-CD3;
R4是H、NH2、C1-C6烷基或卤代;
R6是C3-C6环烷基或具有独立地选自N、NH、N(C1-C6烷基)和O的1至2个环成员的、未经取代或被1-2个R9基团取代的4-6元杂环烷基;
每个R9独立地选自C1-C6烷基、羟基、卤代和被1至3个-OH取代的C1-C6烷基;
在实施例10中,本发明提供了用于根据实施例9所述使用的具有式(IIa)的化合物或其药学上可接受的盐,其中
R2是C1-C4烷基;
R3是C1-C4烷基;
R4是C1-C4烷基或卤代;
R6是具有独立地选自N、NH、N(C1-C6烷基)和O的1至2个环成员的4-6元杂环烷基。
在实施例11中,本发明提供了用于根据实施例9或10所述使用的具有式(IIa)的化合物或其药学上可接受的盐,其中所述化合物是具有式(IIb)的化合物:
R2是C1-C4烷基;
R3是C1-C4烷基;
R4是C1-C4烷基。
在实施例12中,本发明提供了用于根据实施例8至11中任一项所述使用的具有式(II)、(IIa)或(IIb)的化合物或其药学上可接受的盐,其中所述化合物是(S)-N-(4-((5-(1,6-二甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基)-3-甲基-4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)甲基)双环[2.2.2]辛-1-基)吗啉-3-甲酰胺;或其药学上可接受的盐。该化合物还由式(IIc)表示:
在实施例12a中,本发明提供了用于根据实施例8至11中任一项所述使用的呈其游离形式的具有式(IIc)的化合物。
在实施例12b中,本发明提供了用于根据实施例8至11中任一项所述使用的呈水合物形式的具有式(IIc)的化合物。
在实施例12c中,本发明提供了用于根据实施例8至11中任一项所述使用的(S)-N-(4-((5-(1,6-二甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基)-3-甲基-4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)甲基)双环[2.2.2]辛-1-基)吗啉-3-甲酰胺的水合物的结晶形式。在该实施例的另一个方面,本发明提供了用于根据实施例8至11中任一项所述使用的(S)-N-(4-((5-(1,6-二甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基)-3-甲基-4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)甲基)双环[2.2.2]辛-1-基)吗啉-3-甲酰胺的七水合物的结晶形式。在2018年5月18日提交的专利申请PCT/CN2018/087448(代理人案号:PAT058103-WO-PCT)中描述了这种结晶形式,所述申请通过引用特此并入。
如本文所用,神经精神性系统性红斑狼疮(NPSLE)是指患有系统性红斑狼疮(SLE)的患者的不同神经学和/或行为学临床综合征,其包括中枢神经系统(CNS)临床表现(CNS-狼疮)和周围神经系统(PNS)神经病。狼疮的神经精神性临床表现从轻度到重度不等(参见Kivity等人,BMC Med.[BMC医学]2015年3月4日;13:43),并影响多达75%的SLE患者。神经精神性临床表现对疾病严重程度、生活质量和预后的影响被认为是SLE患者发病率和死亡率的主要原因之一。
本发明涉及典型地经由抑制Toll样受体(TLR)治疗NPSLE患者,并且尤其可包括抑制TLR7。重要的是,由于申请人不希望受机械性考虑因素的限制,本发明涉及用于在NPSLE的治疗和/或预防中使用的根据实施例1至12中任一项所述的具有式(I)的化合物或具有式(II)的化合物,或其药学上可接受的盐。
在另一个实施例中,本发明提供了用于在NPSLE的治疗和/或预防中使用的药物组合物,所述药物组合物包含具有式(I)的化合物或具有式(II)的化合物或根据实施例1至12中任一项所述的化合物;或其药学上可接受的盐以及一种或多种药学上可接受的载体。
在仍另一个实施例中,本发明提供了用于在对其有需要的患者中治疗和/或预防NPSLE的方法,所述方法包括施用有效量的具有式(I)的化合物,其中所述化合物如实施例1至7中任一项所描述;或其药学上可接受的盐。
在仍另一个实施例中,本发明提供了用于在对其有需要的患者中治疗和/或预防NPSLE的方法,所述方法包括施用有效量的具有式(II)的化合物,其中所述化合物如实施例8至12中任一项所描述;或其药学上可接受的盐。
在仍另一个实施例中,本发明提供了用于在对其有需要的患者中治疗和/或预防NPSLE的方法,所述方法包括施用药物组合物,所述药物组合物包含有效量的根据实施例1至7中任一项所述的具有式(I)的化合物;或其药学上可接受的盐以及一种或多种药学上可接受的载体。
在仍另一个实施例中,本发明提供了用于在对其有需要的患者中治疗和/或预防NPSLE的方法,所述方法包括施用药物组合物,所述药物组合物包含有效量的根据实施例8至12中任一项所述的具有式(II)的化合物;或其药学上可接受的盐以及一种或多种药学上可接受的载体。
在仍另一个实施例中,本发明提供了根据实施例1至7中任一项所述的根据式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于治疗和/或预防NPSLE的药物中的用途。
在仍另一个实施例中,本发明提供了根据实施例7至12所述的根据式(II)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于治疗和/或预防NPSLE的药物中的用途。
出于解释本说明书的目的,将应用下面的定义,并且在适宜的情况下,以单数形式使用的术语还包括复数形式,并且反之亦然。
如本文所用,术语“烷基”是指具有至多20个碳原子的完全饱和的支链或无支链的烃部分。除非另有说明,否则烷基是指具有1至16个碳原子、1至10个碳原子、1至6个碳原子或1至4个碳原子的烃部分。烷基的代表性实例包括但不限于,甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、3-甲基己基、2,2-二甲基戊基、2,3-二甲基戊基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基等。
如本文所用,术语“烷氧基”是指烷基-O-,其中烷基如上文所定义。烷氧基的代表性实例包括但不限于,甲氧基、乙氧基、丙氧基、2-丙氧基、丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基等。典型地,烷氧基基团具有约1-6个、更优选约1-4个碳。
如本文所用,术语卤素是指氟、氯、溴或碘基团或残基。卤素可优选地是氟。
如本文所用,术语烷基(其任选地被卤素取代一次或多次)可以例如是指甲基、乙基、丙基、叔丁基、单氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氟乙基、四氟乙基或五氟乙基。
可以用无机酸和有机酸形成药学上可接受的酸加成盐。
可以用无机碱和有机碱形成药学上可接受的碱加成盐。
术语“药学上可接受的盐”是指保留本发明化合物的生物有效性和特性,并且典型地不是生物学上或其他方面不希望的盐。在许多情况下,由于氨基和/或羧基基团或与其类似的基团的存在,本发明的化合物能够形成酸盐和/或碱盐。
可以用无机酸和有机酸形成药学上可接受的酸加成盐,例如乙酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、溴化物/氢溴酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、樟脑磺酸盐、氯化物/盐酸盐、胆茶碱(chlortheophyllonate)、柠檬酸盐、乙二磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、马尿酸盐、氢碘酸盐/碘化物、羟乙基磺酸盐、乳糖酸盐、乳糖醛酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、萘甲酸盐、萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、十八酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、聚半乳糖醛酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、磺基水杨酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐和三氟乙酸盐。
可以衍生出盐的无机酸包括例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。
可以衍生出盐的有机酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、磺基水杨酸等。可以用无机碱和有机碱形成药学上可接受的碱加成盐。
可以衍生出盐的无机碱包括例如铵盐和来自元素周期表第I至XII列的金属。在某些实施例中,盐衍生自钠、钾、铵、钙、镁、铁、银、锌和铜;特别合适的盐包括铵盐、钾盐、钠盐、钙盐和镁盐。
可以衍生出盐的有机碱包括例如伯胺、仲胺和叔胺;取代的胺(包括天然存在的取代的胺);环胺;碱性离子交换树脂等。某些有机胺包括异丙胺、苄星、胆碱盐、二乙醇胺、二乙胺、赖氨酸、葡甲胺、哌嗪和氨丁三醇。
本发明的药学上可接受的盐可以通过常规的化学方法从碱或酸部分合成。通常,此类盐可以通过将这些化合物的游离酸形式与化学计算量的适当碱(例如Na、Ca、Mg或K的氢氧化物,碳酸盐,碳酸氢盐等)反应来制备,或通过将这些化合物的游离碱形式与化学计算量的适当酸反应来制备。这样的反应典型地在水或有机溶剂或两者的混合物中进行。通常,在可行的情况下,希望使用非水性介质,如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。另外的合适的盐的列表可见于例如:“Remington's Pharmaceutical Sciences[雷明顿药物科学]”,第20版,Mack Publishing Company[马克出版公司],Easton[伊斯顿],Pa.[宾夕法尼亚州],(1985)中;以及Stahl和Wermuth的“Handbook of Pharmaceutical Salts:Properties,Selection,and Use[药用盐手册:特性、选择和使用]”(Wiley-VCH[威利-VCH出版社],Weinheim[韦因海姆],德国,2002)中。
如本文所用,术语“游离形式”是指化合物本身而没有形成盐。
如本文所用,术语“药学上可接受的载体”包括任何及所有溶剂、分散介质、包衣、表面活性剂、抗氧化剂、防腐剂(例如抗细菌剂、抗真菌剂)、等渗剂、吸收延迟剂、盐、防腐剂、药物、药物稳定剂、粘合剂、赋形剂、崩解剂、润滑剂、甜味剂、调味剂、染料等及其组合,如本领域技术人员将已知的(参见,例如Remington's Pharmaceutical Sciences[雷明顿药物科学],第18版,Mack Printing Company[马克出版公司],1990,第1289-1329页)。除非任何常规载体与活性成分不相容,否则考虑将其用于治疗或药物组合物中。
术语“治疗有效量”的本发明化合物是指将引起受试者的生物或医学应答(例如,酶或蛋白活性的减小或抑制,或改善症状、缓解病症、减缓或延迟疾病进展或预防疾病(例如,改善与NPSLE相关的症状;缓解NPSLE病症,减缓或延迟NPSLE的进展))的本发明化合物的量。
如本文所用,术语“受试者”是指动物。典型地,所述动物为哺乳动物。受试者也是指例如灵长类动物(例如人)、牛、绵羊、山羊、马、狗、猫、兔、大鼠、小鼠、鱼、鸟等。在某些实施例中,所述受试者是灵长类动物。在又其他实施例中,所述受试者是人。在一些实施例中,人受试者也被称为患者。
如本文所用,术语“抑制(inhibit、inhibition或inhibiting)”是指减少或抑制给定的病症、症状或障碍、或疾病,或在生物活性或过程的基线活性方面的显著降低。
如本文所用,术语任何疾病或障碍的“治疗(treat、treating或treatment)”在一个实施例中是指改善疾病或障碍(即,减慢或阻止或减少疾病或其至少一种临床症状的发展)。在另一个实施例中,“治疗(treat、treating或treatment)”是指减轻或改善至少一种身体参数,包括不能被患者辨别的那些。在又另一个实施例中,“治疗(treat、treating或treatment)”是指在身体上(例如,可辨别的症状的稳定化)或在生理上(例如,身体参数的稳定化)或二者调节疾病或障碍。在一个实施例中,治疗NPSLE是指治疗患有系统性红斑狼疮(SLE)的患者的不同神经学和/或行为学临床综合征。根据美国风湿病学会(AmericanCollege of Rheumatology)的定义(Arthritis Rheum.[关节炎与风湿病]1999,42(4):599-608),这些神经学和/或行为学临床综合征包括19种综合征:无菌性脑膜炎、脑血管疾病、脱髓鞘性综合征、头痛、运动障碍、脊髓病、癫痫症、急性精神错乱状态、焦虑障碍、认知功能障碍、神经病、情绪障碍和精神病、以及周围综合征格-巴二氏综合征(Guillain Barrésyndrome)、自主神经病变、单神经病变、重症肌无力、颅神经病变、神经丛病变和多神经病。
如本文所用,术语“预防”是指延迟疾病或障碍的发作或发展或进展(即,延迟如上所定义的神经学和/或行为学临床综合征的发作或发展或进展)
如本文所用,如果受试者将在生物学上、在医学上或在生活质量上从治疗中获益,则所述受试者是“需要”这种治疗的。
如本文所用,术语“一个/种(a/an)”、“所述(the)”以及在本发明的上下文中使用的类似术语(特别是在权利要求的上下文中)应被解释为涵盖单数和复数二者,本文中除非另外指示或与上下文明显相矛盾。
本文所述的所有方法均能够以任何合适顺序进行,除非本文中另有指示或者与上下文明显相矛盾。本文提供的任何和所有实例或示例性语言(例如“如”)的应用仅旨在更好地说明本发明,而不对另外要求保护的本发明范围做出限制。
本发明的一种或多种化合物的任何非对称原子(例如,碳等)可以以外消旋或对映异构体富集的形式存在,例如,(R)-、(S)-或(R,S)-构型。在某些实施例中,每个不对称原子在(R)-或(S)-构型中具有至少50%对映异构体过量、至少60%对映异构体过量、至少70%对映异构体过量、至少80%对映异构体过量、至少90%对映异构体过量、至少95%对映异构体过量、或至少99%对映异构体过量。如果可能,在具有不饱和键的原子上的取代基可以以顺式-(Z)-或反式-(E)-形式存在。
因此,如本文所用,本发明化合物的用途可以为可能的异构体,如旋转异构体、阻转异构体、互变异构体或其混合物中的任何一者的形式,例如,呈基本上纯的几何(顺式或反式)异构体、非对映异构体、光学异构体(对映体)、外消旋体或其混合物。为清楚起见,位置异构体不为上文涵盖。
可以基于组分的物理化学差异,例如通过色谱法和/或分级结晶法将任何所得的异构体混合物分离成纯的或基本上纯的几何或光学异构体、非对映异构体、外消旋体。
可以通过已知方法将任何所得的终产物或中间体的外消旋体拆分成光学对映体,例如通过分离用光学活性酸或碱得到的其非对映异构体盐,并释放出光学活性的酸性或碱性化合物。特别地,因此可以采用碱性部分将本发明的化合物拆分成它们的光学对映体,例如通过用光学活性酸形成的盐的分级结晶,例如酒石酸、联苯甲酰酒石酸、二乙酰酒石酸、二-O,O'-对甲苯甲酰酒石酸、扁桃酸、苹果酸或樟脑-10-磺酸。外消旋产物还可以通过手性色谱法,例如,使用手性吸附剂的高效液相色谱法(HPLC)或超临界流体色谱(SFC)来拆分。
施用和药物组合物
就本发明的化合物的治疗用途而言,这些化合物是以治疗有效量单独或作为药物组合物的一部分施用。因此,本发明提供包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物。出于本发明的目的,除非另有指定,否则溶剂化物和水合物通常被认为是组合物。优选地,药学上可接受的载体是无菌的。
本发明的药物组合物对于约50-70kg的受试者可以是呈约1-1000mg一种或多种活性成分的单位剂量。化合物、药物组合物、或其组合的治疗有效剂量取决于所述受试者的物种、体重、年龄和所治疗的个体病症、障碍或疾病或其严重程度。具有普通技能的医师、临床医生或兽医可以容易地确定预防、治疗障碍或疾病或抑制所述障碍或疾病的进展所必需的每种活性成分的有效量。
使用有利的哺乳动物(例如,小鼠、大鼠、狗、猴)或其分离的器官、组织和制品在体外和体内测试中证明上述剂量特性。本发明化合物可以以溶液(例如水溶液)的形式体外应用,和例如以悬浮液或以水溶液的形式肠内、肠胃外(有利地,静脉内)体内应用。体外剂量可以在约10-3摩尔浓度与10-9摩尔浓度之间的范围内。体内治疗有效量可取决于施用途径而在约0.1-500mg/kg之间的范围内变化。
本发明的药物组合物可使用包括混合本发明的化合物或其药学上可接受的盐与一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的方法加以制备。作为实例,本发明的药物组合物是借由混合、造粒和/或包衣方法使用本发明的化合物以游离形式或以药学上可接受的盐形式结合至少一种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂进行制造。
本发明进一步提供包含作为活性成分的本发明化合物的无水药物组合物及剂型,因为水可以促进某些化合物的降解。
本发明的无水药物组合物及剂型可以使用无水或低含水量成分及低水分或低湿度条件进行制备。无水药物组合物可以经制备及储存使得保持其无水性质。因此,无水组合物是使用已知可防止暴露在水中的材料进行包装的,使得它们可包括在合适的规定试剂盒中。合适的包装的实例包括但不限于经气密密封的箔、塑料、单位剂量容器(例如,小瓶)、泡罩包装、以及条形包装。
本发明进一步提供包含减小作为活性成分的本发明化合物分解的速率的一种或多种药剂的药物组合物及剂型。此类药剂(本文中称为“稳定剂”)包括但不限于抗氧化剂(如抗坏血酸)、pH缓冲剂、或盐缓冲液等。
药物组合物可针对特定的施用途径加以配制,例如口服施用、直肠施用、透皮施用、肠胃外、静脉施用、肌内施用、肺部施用、吸入施用、鼻内施用、眼部施用及局部施用。
口服施用剂型
本发明的药物组合物可作为离散剂型口服施用,其中这些剂型包括但不限于胶囊、明胶胶囊、胶囊型片剂、片剂、可咀嚼片剂、锭剂、可分散粉末、颗粒、糖浆、调味糖浆、在水性或非水性液体中的溶液或悬浮液、可食用泡沫或搅打泡沫及水包油液体乳剂或油包水液体乳剂。
因此,就口服施用而言,包含有效量的本发明的化合物的本发明的药物组合物可以固体形式(包括但不限于胶囊、明胶胶囊、硬或软胶囊、片剂、可咀嚼片剂、锭剂、胶囊型片剂、丸剂、颗粒或可分散粉末)或以液体形式(包括但不限于溶液、水性或油性悬浮液、糖浆、酏剂、泡沫、搅打泡沫或乳剂)制成。可以对药物组合物进行常规的制药操作,如灭菌,和/或可以使其含有常规的惰性稀释剂、润滑剂或缓冲液,以及辅助剂(如防腐剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂和缓冲剂等)。
旨在用于口服使用的组合物是根据本领域中已知用于制造药物组合物的任何方法制备的且此类组合物可含有选自由以下组成的组的一种或多种药剂:甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂,以提供药学上精致且可口的制剂。
典型地,药物组合物是包含活性成分及以下中的一种或多种的片剂或明胶胶囊:
a)稀释剂,例如,乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素和/或甘氨酸;
b)润滑剂,例如二氧化硅、滑石、硬脂酸、其镁盐或钙盐和/或聚乙二醇;就片剂而言还包含
c)粘合剂,例如硅酸镁铝、淀粉糊、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮;如果希望还包含
d)崩解剂,例如淀粉、琼脂、海藻酸或其钠盐,或泡腾混合物;以及
e)吸附剂、着色剂、调味剂及甜味剂。
片剂可含有与适用于制造片剂的非毒性药学上可接受的赋形剂混合的活性成分。这些赋形剂是例如惰性稀释剂,如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠;制粒剂及崩解剂,例如,玉米淀粉或海藻酸;粘合剂,例如,淀粉、明胶或阿拉伯胶;以及润滑剂,例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。片剂可以根据本领域已知的方法进行薄膜包衣或肠溶包衣。片剂是未包衣的,或者根据已知技术进行包衣以延缓在胃肠道中的崩解和吸收,从而在较长的时间段内提供持久的作用。例如,可以采用时间延迟材料,如甘油单硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯。用于口服使用的配制品可以呈现为硬明胶胶囊,其中活性成分是与惰性固体稀释剂(例如,碳酸钙、磷酸钙或高岭土)混合,或呈现为软明胶胶囊,其中活性成分是与水或油培养基(例如,花生油、液体石蜡或橄榄油)混合。
肠胃外剂型
在某些实施例中,本发明的药物组合物可以是通过各种途径肠胃外施用,包括但不限于皮下、静脉内(包括推注)、肌内及动脉内。
某些可注射组合物是水性等渗溶液或悬浮液,并且栓剂有利地由脂肪乳剂或悬浮液制备。所述组合物可以是灭菌的和/或含有辅助剂(例如,防腐剂、稳定剂、润湿剂或乳化剂、溶液促进剂、用于调节渗透压的盐和/或缓冲剂)。另外,它们也可以含有其他有治疗价值的物质。所述组合物分别根据常规的混合、制粒或包衣方法来制备,并且典型地含有约0.1%-75%、或约1%-50%的活性成分。
局部剂型
在某些实施例中,本发明的药物组合物可以是通过呈洗剂、凝胶、软膏剂、溶液、乳剂、悬浮液或霜剂的形式的含有本发明的化合物的药物组合物的局部应用来施用。
适用于局部应用(例如,应用至皮肤和眼睛)的组合物包括水溶液、悬浮液、软膏剂、霜剂、凝胶或可喷雾配制品,例如,用于通过气溶胶等递送。这些局部递送系统将尤其适用于真皮应用,例如,用于治疗皮肤癌,例如,用于防晒霜、洗剂、喷雾等中的预防用途。因此它尤其适用于局部中的用途,包括本领域中熟知的化妆品、配制品。这些可含有增溶剂、稳定剂、张力增强剂、缓冲剂及防腐剂。
如本文所用,局部应用还可涉及吸入或鼻内应用。其可在使用或不使用合适的推进剂的情况下自干燥粉末吸入器以干燥粉末的形式(单独、作为混合物,例如与乳糖的干燥掺混物,或经混合的组分颗粒,例如与磷脂质混合的组分颗粒)或自加压容器、泵、喷雾、雾化器或喷雾器以气溶胶喷雾形式便利地递送。
直肠施用
在某些实施例中,本发明的本发明的药物组合物可以是以栓剂、灌肠剂、软膏剂、霜剂直肠泡沫或直肠凝胶的形式进行直肠施用。在某些实施例中,这些栓剂是制备自脂肪乳剂或悬浮液、可可脂或其他甘油酯。
储积施用(Depot Administration)
在某些实施例中,本发明的本发明的药物组合物可以配制成储积制剂。这些配制品是通过移植(例如,皮下或肌内)或通过肌内注射进行施用。在某些实施例中,这些配制品包括聚合或疏水材料(例如,作为在可接受的油中的乳剂)或离子交换树脂,或作为微溶衍生物,例如,作为微溶盐。
在一个实施例中,根据实施例1至12中任一项所述的具有式(I)或(II)的化合物优选地通过口服途径进行施用。
组合治疗
本文提供的本发明的化合物和药物组合物可以单独或与一种或多种另外的治疗剂(例如,低分子量抗疟疾药或选自例如抗CD40抗体的生物制剂)组合施用。
本发明的组合对于约50-70kg的受试者可以是呈约1-1000mg一种或多种活性成分的单位剂量。这类组合的治疗有效剂量取决于所述受试者的物种、体重、年龄和所治疗的个体病症、障碍或疾病或其严重程度。具有普通技能的医师、临床医生或兽医可以容易地确定预防、治疗障碍或疾病或抑制所述障碍或疾病的进展所必需的每种活性成分的有效量。
典型地,使用有利的哺乳动物(例如,小鼠、大鼠、狗、猴)或其分离的器官、组织和制品在体外和体内测试中证明上述剂量特性。本发明化合物可以以溶液(例如水溶液)的形式体外应用,和例如以悬浮液或以水溶液的形式肠内、肠胃外(有利地,静脉内)体内应用。体外剂量可以在约10-3摩尔浓度与10-9摩尔浓度之间的范围内。体内治疗有效量可取决于施用途径而在约0.1-500mg/kg之间的范围内变化。
本发明化合物可以与一种或多种其他治疗剂同时施用,或者在其之前或之后施用。本发明化合物可以通过与其他药剂相同或不同的施用途径分开施用,或在相同的药物组合物中一起施用。治疗剂是例如化学化合物、肽、抗体、抗体片段或核酸,所述治疗剂当与本发明化合物组合施用至患者时具有治疗活性或增强治疗活性。
与本发明的化合物组合使用的另外的治疗剂包括但不限于抗炎剂、免疫调节剂、免疫抑制剂、细胞因子、非甾体抗炎药(NSAID)、抗疟疾化合物、抗风湿化合物、B细胞活化因子(BAFF)的抑制剂、B淋巴细胞刺激因子(BLyS)的抑制剂及甾体激素、神经性药物以及抗凝剂。
与本发明的化合物组合使用的非甾体抗炎药(NSAID)包括但不限于水杨酸、乙酰水杨酸、水杨酸甲酯、二氟尼柳(diflunisal)、水杨酸盐、奥色拉嗪(olsalazine)、柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine)、对乙酰氨基酚(acetaminophen)、吲哚美辛(indomethacin)、舒林酸(sulindac)、依托度酸(etodolac)、甲氧芬那酸(mefenamic acid)、甲氯芬那酸钠(meclofenamate sodium)、托美丁(tolmetin)、酮咯酸(ketorolac)、双氯芬酸(dichlofenac)、布洛芬(ibuprofen)、萘普生(naproxen)、萘普生钠(naproxen sodium)、非诺洛芬(fenoprofen)、酮洛芬(ketoprofen)、氟洛芬(flurbinprofen)、奥沙普秦(oxaprozin)、吡罗昔康(piroxicam)、美洛昔康(meloxicam)、安吡昔康(ampiroxicam)、屈恶昔康(droxicam)、吡罗昔康(pivoxicam)、替诺昔康(tenoxicam)、萘丁美酮(nabumetome)、保泰松(phenylbutazone)、羟基保泰松(oxyphenbutazone)、安替比林(antipyrine)、氨基比林(aminopyrine)、阿帕酮(apazone)及尼美舒利(nimesulide)。
与本发明的化合物组合使用的抗风湿化合物包括但不限于甲氨蝶呤。
与本发明的化合物组合使用的抗疟疾化合物包括但不限于氯喹及羟基氯喹。
与本发明的化合物组合使用的免疫抑制剂包括但不限于霉酚酸吗啉乙酯(MMF)、麦考酚酸、环磷酰胺、咪唑硫嘌呤及拉喹莫德(Laquinimod)(5-氯-N-乙基-4-羟基-1-甲基-2-氧代-N-苯基-1,2-二氢喹啉-3-甲酰胺)。
与本发明的化合物组合使用的甾体激素包括但不限于脱氢表雄甾酮(DHEA)。
取决于NPSLE的特定神经精神性临床表现,可以设想与神经性药物(包括但不限于抗抑郁药、抗癫痫药、抗精神病药)的组合。由于怀疑血栓是引起NPSLE的原因之一,可以设想与抗血小板治疗方法或抗凝剂的组合。
实验部分
用于在本发明中使用的化合物的制备:
具有式(I)和式(II)的化合物的合成已分别描述于美国专利号9,126,999和PCT申请WO 2018/047081中。因此,将US 9,126,999和WO 2018/047081均通过引用并入。
现有技术和意义:
最近,抗1型干扰素受体(IFNAR)抗体在狼疮患者的Ph2b研究中已显示出功效(由R.Furie等人,Arthritis and Rheumatology[关节炎与风湿病],69,376-386,2017年出版)。IFNAR的阻断还降低了狼疮564Igi鼠模型的自身免疫表型。在该模型中,已确定滤泡树突状细胞(FDC)为IFNα的主要来源:自身抗体和核仁的免疫络合物经由内体受体TLR7自FDC引发IFNα(由A.Das等人,Immunity[免疫学]46,106-119,2017年出版)。
在564Igi模型的相关研究中,抗IFNAR治疗针对CNS病理学(反应性小胶质细胞、突触损失和神经元物质的小胶质细胞吞噬)和行为表型具有保护作用(由Bialas等人,Nature[自然]546,第539页,2017年出版)。
概念:
基于上述,发明人开发了如下科学概念:TLR7拮抗剂(例如本发明的化合物,例如具有式(I)的化合物、或特别是具有式(Ia)或式(Ib)的化合物,或具有式(II)的化合物、且特别是具有式(IIa)或(IIb)或(IIc)的化合物)可在564Igi小鼠狼疮模型中阻断IFNα产生、恢复B细胞耐受性、阻止周围自身免疫的进展,并因此减少CNS病理学。
实验和注意事项:
使用交错两步法研究具有式(Ib)的化合物和具有式(IIc)的化合物在564Igi小鼠中的功效。
从文献中已知(参见Forsbach等人,J.Immunol[免疫学杂志],2008,180:3729-3738)TLR8在啮齿类动物中是无功能的。然而,从US 9,126,999B2已知它们的潜在化合物(包括具有式(Ib)的化合物)是双重TLR7/8拮抗剂。还从WO 2018/047081已知具有式(II)、(IIa)、(IIb)或(IIc)的化合物是双重TLR7/8拮抗剂。由于这个原因,本发明化合物的结果可以取决于或可以不取决于所述化合物对TLR7和TLR8受体的功效,因为如上所述,TLR8在啮齿类动物中是无功能的。因此,在以下动物实验中获得的本发明化合物的作用不一定与TLR8有关。
(1)测试具有式(Ib)的化合物或具有式(IIc)的化合物降低IFNα依赖性自身免疫的能力:
经由食物用具有式(Ib)的化合物或用媒剂处理564Igi小鼠(n=5/组),持续两周的时间段。具有式(Ib)的化合物是有效的TLR7拮抗剂,即具有35nM的IC50,如通过用与脂质体转染试剂络合的单链RNA(ssRNA)刺激后,抑制自人周围血液单核细胞(PBMC)的IFNα分泌所确定的。所述化合物还具有TLR8拮抗剂成分,因为它在相似测定中可抑制TNFα,其中IC50为36nM。
具有式(IIc)的化合物是有效的TLR7拮抗剂,即具有4nM的IC50,如通过2017年9月6日提交的WO 2018/04081中披露的huPBMC TLR7拮抗剂IFNα测定所确定的。所述化合物还具有TLR8拮抗剂成分,因为它在相似测定中可抑制TNFα,其中IC50为166nM。
定期给小鼠放血,并通过qPCR测定血细胞中干扰素刺激基因(ISG)的表达。在离体R848刺激后,从血液中测量CD69的表达作为药效动力学标志物,并确定血液中的化合物暴露。在第15天,处死小鼠,并取脾和淋巴结用于流式细胞术分析和免疫组织化学。该分析集中于自身抗体特异性(Id pos)B细胞、生发中心B细胞(GC)和浆母细胞的频率以及IFNα的表达。收获脾组织用于进行ISG分析。通过ELISA从血清确定抗核仁抗体滴度。
实验结果:ISG和离体刺激的CD69在用具有式(Ib)的化合物或具有式(IIc)的化合物处理的564Igi小鼠中受到抑制,这与媒剂组相反,证实564Igi模型是TLR7依赖性的。
(2)测试具有式(Ib)的化合物或具有式(IIc)的化合物减少NPSLE症状的能力:
经由食物用具有式(Ib)的化合物或具有式(IIc)的化合物或用媒剂处理564Igi和NZB/W F1小鼠(n=10/组),持续自8周龄开始直至14周龄的6周的时间段。类似于上述实验1,定期给小鼠放血,并通过qPCR测定血细胞中干扰素刺激基因(ISG)的表达。在离体R848刺激后,从血液中测量CD69的表达作为药效动力学标志物,并确定血液中的化合物暴露。
自12周龄开始,小鼠将经受行为测试,例如高架十字迷宫、新型Y迷宫、三腔室社交互动测定、和前脉冲抑制测试。实验结束时,处死小鼠以收获血清、脑脊液(CSF)、脾和脑组织用于进行以下分析:
通过qPCR分析脾的ISG表达,并通过免疫组织化学和流式细胞术分析自身抗体特异性(Id pos)B细胞、生发中心B细胞(GC)和浆母细胞。通过ELISA从血清确定抗核仁抗体滴度。通过qPCR分析脑的ISG,并通过免疫组织化学和流式细胞术研究小胶质细胞。另外,在离体R848刺激后,从血液中测量CD69的表达作为药效动力学标志物,确定血液中的化合物暴露,并确定血清、脑和CSF中的代谢物水平。
实验结果:与媒剂组的小鼠相反,用具有式(Ib)的化合物或具有式(IIc)的化合物处理的564Igi或NZB/W F1小鼠显示出NPSLE症状的进展降低,即,在不同行为测试中异常行为减少,指示干扰素信号传导和神经病理学症状的CNS的组织学和分子变化更少,且潜在神经毒性代谢物的量更低。平行于这些神经病理学发现,抗核仁抗体和针对周围血液中的神经元成分的抗体的滴度更低,且脾中ISG的表达更低。总之,在用具有式(Ib)的化合物或用具有式(IIc)的化合物处理后,NPSLE的564Igi或NZB/W F1动物模型中更弱的神经病理学发现可尤其表明TLR7在NPSLE中的致病作用。
3)NPSLE小鼠模型中由TLR7/8拮抗剂赋予的神经保护作用
NPSLE的诊断定义了CNS受累的SLE患者的亚组。狼疮的NZBW/F1小鼠模型显示出神经病理学症状(Bialas等人,Nature[自然]2017 546(7659):539-543;Kier等人J CompPathol[比较病理学杂志]1990,102(2)”165-177),并且在该模型中,具有下式的化合物为系统性读数提供了保护,例如肾病理学(图1)。
图1:在NZBW/F1模型中,具有式(Ib)的化合物对系统性疾病参数的功效。自28周龄开始,将NZBW/F1小鼠用100mg/kg具有式(Ib)的化合物(实心圆圈)或媒剂(空心圆圈)p.o.、q.d.处理。自20周龄开始,在整个实验过程中每周记录NZB/W F1小鼠的蛋白尿(Uristix,拜耳公司(Bayer),勒沃库森,德国)和体重。在蛋白尿得分为2时(得分0:未检测到蛋白质,1:痕量,2:>30mg/dl,3:>100mg/dl,4:>300mg/dl,5:>2000mg/dl),将动物随机分配至n=15的实验组中。一旦个体动物的体重减轻已达到20%或一旦动物的连续两次蛋白尿得分为5,就将其从实验中取出,并记录其在所述实验剩余部分的最后蛋白尿得分。一旦将任何一组的50%动物从实验中取出,就终止研究。A,存活,p=0.02,对数秩检验;B,蛋白尿,*,p<0.05,**,p<0.01,***p<0,001,****,p<0.0001,非配对t检验。点表示平均值±SEM。
发现在该模型中具有式(IIc)的化合物减少脑病理学的特异性标志物。具有式(IIc)的化合物阻断系统性读数(图2a、b),并且剂量依赖性地抑制与人类NPSLE相关的NMDAR自身抗体的表达(图2c)(Omdal等人,Eur J Neurol[欧洲神经病学杂志]2005 12(5):392-398;Robbins等人,Arthritis Rheum[关节炎与风湿病]1998 31(5):623-31),并直接干扰神经元功能(Faust等人,PNAS[美国国家科学院院刊]2010,107(43):18569-74)。另外,具有式(IIc)的化合物阻断循环中的NF-L水平(图2d),而NF-L是CNS炎性损害的广泛使用的临床生物标志物(例如Cai等人,Neuropsychiatr Dis.Treat[神经精神性疾病治疗],201814:2241-2254)。由于具有式(IIc)的化合物抑制抗NMDAR自身抗体和NF-L的血清水平,证明了具有式(IIc)的化合物在NPSLE中具有神经保护作用。
材料和方法
从Envigo RMS有限公司(Blackthorn,比斯特,英国)获得了12周龄的雌性NZB/WF1小鼠(NZBNZWF1/OlaHsd)。将小鼠在21℃±2℃和55%±10%相对湿度下,以从6:00a.m至6:00p.m的时间调节的光照时间段圈养(3-5只小鼠/单独通风笼,IVC)并随意喂养。来自Envigo公司的健康监测报告(报告参考:17-9212;自2017年1月4日起)报告了以下机会性细菌感染:大肠杆菌、乳酸杆菌属物种、葡萄球菌属物种(包括金黄色葡萄球菌)、链球菌属物种(包括α-溶血性链球菌)。在15周龄时,在异氟烷麻醉下,将射频识别转发器(T-SL超薄聚合物微芯片(T-SL Slim Polymer Microchip),DataMars公司)用刺血针皮下注射到颈背,以唯一地鉴定小鼠。所有研究均在严格遵守瑞士动物保护法下进行,并经巴塞尔市兽医办公室(Veterinary Office Basel Stadt)(动物许可证号BS-2868)批准。
体重和蛋白尿的监测
自出生到20周龄,每周记录体重。自20周龄开始,每周记录体重两次并且每周测量蛋白尿,直至实验结束。小鼠23周龄时开始药物治疗。
对于每周的蛋白尿测量,通过按摩腹部将尿液采样入玻璃毛细管中,并立即转移至冰冷的96孔板中。使用定量蛋白质测定法(伯乐公司(Bio-rad),赫拉克勒斯(Hercules),加利福尼亚州,编号5000006)以牛血清白蛋白(BSA)为标准品(西格玛-奥德里奇公司(SigmaAldrich),圣路易斯,密苏里州,A-8806)测量新鲜尿液中的蛋白质水平。当大多数小鼠已经达到大约0.5mg/ml的蛋白尿水平时,将小鼠分配至不同的治疗组。
一旦个体小鼠较10天前的体重减轻已达到20%或动物的连续两次蛋白尿水平为≥10mg/ml(相隔24-48h),就将其从实验中取出。一旦对照组(也称为“媒剂”组,接受不含药物的食物)的50%动物出现临床相关蛋白尿(≥5mg/ml),就终止研究。
负载化合物(具有式(IIc)的化合物)的食物的制备
如下将具有式(IIc)的化合物混合到小鼠食物中:将具有式(IIc)的化合物添加到干燥粉末状食物(Maus/Ratte Haltung“GLP”NAFAG3890和NAFAG3302用于实验的最后2.5周,普罗唯美集团(Provimi Kliba),凯瑟奥古斯特(Kaiseraugst),瑞士)中。添加水(50%w/w)以产生均匀的面团,将其挤出并切成1.5-2.0cm长的丸。将丸在37℃下在脱水器(Excalibur EXC10EL,萨克拉门托,加利福尼亚州)中脱水24h。平行制备不含药物的对照丸。
在使用混入食物的化合物的NZB/W F1雌性小鼠中进行的初步PK/PD研究表明,基于离体血液PD读数,食物中0.03%是最低的充分有效剂量。基于此,选择0.01%和0.1%的具有式(IIc)的化合物,即0.1或1g/kg食物用于本研究。
小鼠每两周接受新鲜食物,并且每只小鼠的每日食物消耗通过食物摄入量除以天数和每笼的小鼠数量来计算。食物消耗被定义为给予的食物减去笼中剩余的食物。
治疗组
在23周龄时,将小鼠分配至以下四个治疗组之一:
(1)食物中含0.01%具有式(IIc)的化合物(n=14),起始时蛋白尿为0.5mg/ml,
(2)食物中含0.1%具有式(IIc)的化合物(n=14),起始时蛋白尿为0.5mg/ml,
(3)对照食物(n=14),未添加化合物,起始时蛋白尿为0.5mg/ml(即“媒剂”组)
所有小鼠的治疗均在同一天开始,并维持到实验结束,即41周龄。在实验期间的指定时间点,对血液采样进行药物暴露(PK)、PD和ANA测量。
1.血清中自身抗体的测量
将NZB/W F1小鼠从尾静脉(活体)或通过心脏穿刺(末端)放血至Z凝胶微管(莎斯特公司(Sarstedt),纽姆布莱希特(Nümbrecht),德国)中。通过离心(10000g,10min,RT)分离血清,并保持在-80℃。
在PBS中在4℃下,将Nunc Maxisorp板(Huberlab,埃施(Aesch),瑞士)用稀释的100μg/ml鲑精DNA(赛默飞世尔科技公司(Thermo Fisher Scientific),沃尔瑟姆,马萨诸塞州)、10μg/ml小牛胸腺组蛋白(西格玛-奥德里奇公司,圣路易斯,密苏里州)、1单位/孔的核糖体P(免疫视觉公司(Immunovision),斯普林代尔(Springdale),阿拉斯加州)、1单位/孔的Smith抗原(免疫视觉公司)、或20μg/ml DWEYS肽(Ac-Asp-Trp-Glu-Tyr-Ser-Val-Trp-Leu-Ser-Asn-AEEAc-NHz三氟乙酸盐,巴亨公司(Bachem),布本多夫(Bubendorf),瑞士)涂覆过夜,用于检测抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)亚基2A(NR2A)抗体。将板在PBS/0.05%吐温-20(伯乐公司)中洗涤,用PBS/1%v/v BSA(默克公司(Merck),达姆施塔特(Darmstadt),德国)在室温下孵育1h,并在PBS/0.05%吐温-20中洗涤。在RT下添加在PBS/1%BSA(100μl)中的1:100或1:300的血清稀释液持续2h,将板在PBS/0.05%吐温-20中洗涤,并在RT下添加HRP缀合的同种型特异性检测抗体持续2h(1/5000的多克隆山羊抗小鼠IgG1,多克隆山羊抗小鼠IgG2a,多克隆山羊抗小鼠IgG3和多克隆山羊抗小鼠IgM,均来自南方生物技术公司(Southern Biotechnology),伯明翰,阿拉巴马州;1/10000的多克隆山羊抗小鼠IgG,西格玛-奥德里奇公司)。将板洗涤并添加100μl/孔的TMB底物(BD生物科学公司(BD Biosciences))。通过添加100μl/孔的1N HCl终止反应,并在λ=450nm处测量OD(Spectramax M5,美谷分子仪器有限公司(Molecular Devices),森尼韦尔(Sunnyvale),加利福尼亚州)。数据表示为OD(450nm)/(x背景)。
将SS-A预涂板(来自得克萨斯州圣安东尼奥市的阿尔法诊断国际公司(Alphadiagnostic)的Elisa试剂盒)用100μl校准物或1/100稀释的血清孵育。在室温下1h后,将板用洗涤缓冲液洗涤,并在室温下添加试剂盒中提供的1/100山羊抗小鼠Ig HRP持续30min。将板洗涤并添加100μl/孔的TMB底物。通过添加100μl/孔的终止溶液终止反应,并在λ=450nm处测量OD(Spectramax M5)。
通过将每种经化合物治疗的动物的每种自身抗体水平表示为百分比来计算自身抗体水平的百分比,其中100%定义为媒剂治疗组中相应自身抗体的平均水平。将抗Smith、抗核糖体P和抗NMDAR(IgG2a、IgG2、IgG)的百分比进行平均,以获得综合得分。
2.血清中神经丝轻链的测量
使用夹心ELISA测量血清中的神经丝轻链(NF-L)。在4℃以550rpm搅拌下,在0.05M碳酸盐-碳酸氢盐缓冲液(pH 9.6,西格玛-奥德里奇公司)中,将MultiArray 96板(中尺度诊断公司(Meso Scale Diagnostics),罗克维尔(Rockville),马里兰州)用50μl/孔的1.25μg/ml抗NF-L小鼠单克隆抗体(47:3(UD1),Uman诊断公司(UmanDiagnostics),于默奥(Umea),瑞典)涂覆过夜。第二天,在RT下伴随搅拌(800rpm),使用100μl/孔的TBS/3%BSA(均来自西格玛-奥德里奇公司)将板阻断持续1h。在此期间,在含有300μg/ml HeteroBlock(欧米茄生物制剂公司(Omega Biologics),波兹曼(Bozeman),蒙大纳州)的测定稀释液(Tris缓冲盐水TBS/0.1%吐温-20/1%BSA)中制备从牛脊髓(Uman诊断公司)纯化的NF-L标准品,以获取范围为4000pg/ml至7.8125pg/ml的连续两倍10点标准曲线。将板用TBS/0.1%吐温-20洗涤,并添加25μl/孔的测定稀释液(含有用于标准孔的300μg/ml HeteroBlock或用于样品孔的600μg/ml HeteroBlock)。将标准品或未稀释的样品(25μl/孔)添加至板中,并在RT下伴随搅拌(800rpm)孵育2h。将板用TBS/0.1%吐温-20洗涤,并添加在测定稀释液中的25μl/孔的0.1875μg/ml生物素化抗NFL小鼠单克隆抗体(2:1(UD3),Umana诊断公司)。将板在RT下伴随搅拌(800rpm)孵育1h,用TBS/0.1%吐温-20洗涤,并添加在测定稀释液中的25μl/孔的SULFO-TAG标记的链霉亲和素(0.25μg/ml,中尺度诊断公司)。将板在RT下伴随搅拌(800rpm)孵育1h,用TBS/0.1%吐温-20洗涤,并添加150μl/孔的读取缓冲液T(中尺度诊断公司)。使用Meso Sector S600读取器(中尺度诊断公司)对电化学发光进行定量。
其他枚举的实施例
实施例1a.治疗和/或预防NPSLE的方法,所述方法包括向对其有需要的患者施用有效量的具有式(II)的化合物:
其中
L是-CH2-或-CH2CH2-;
R1是-NHC(=O)R6、-NHC(=O)(CH2)nR6、-NHC(=O)(CH2)mNHR5、-NHC(=O)(CH2)mN(R5)2、-NHC(=O)(CHR7)mNHR5、-NHC(=O)(CH2)mNH2、-NHC(=O)(CH2)nOR7、-NHC(=O)OR7、-NHC(=O)(CHR7)nR6、-NHC(=O)(CHR7)nN(R8)2、-NHC(=O)(CHR7)nNHR8、-NR7C(=O)OR11、-NHC(=O)(CH2)nN(CD3)2、-NR7C(=O)R5、-NR7C(=O)(CH2)nR5、-NR7C(=O)OR5、-NHS(=O)2R5、-NHC(=O)(CH2)nNR7C(=O)R5、或-NHC(=O)(CH2)nNR7S(=O)2R5;
R2是H、C1-C6烷基或C1-C6卤代烷基;
R3是H、C1-C6烷基或-CD3;
R4是H、NH2、C1-C6烷基或卤代;
每个R5独立地选自C1-C6烷基、-CD3和-(CH2)nOR7;
R6是C3-C6环烷基或具有独立地选自N、NH、N(C1-C6烷基)和O的1至2个环成员的、未经取代或被1-2个R9基团取代的4-6元杂环烷基;
每个R7独立地选自H和C1-C6烷基;
每个R8独立地选自C1-C6卤代烷基、-(C(R7)2)nOR7和被1至3个-OH取代的C1-C6烷基;
每个R9独立地选自C1-C6烷基、羟基、卤代和被1至3个-OH取代的C1-C6烷基;
n是1、2、3、4、5或6;并且
m是1、2、3、4、5或6;或其药学上可接受的盐。
实施例2a.根据实施例1a所述的方法,其中所述化合物是具有式(IIa)的化合物:
其中
R2是H、C1-C6烷基或C1-C6卤代烷基;
R3是H、C1-C6烷基或-CD3;
R4是H、NH2、C1-C6烷基或卤代;
R6是C3-C6环烷基或具有独立地选自N、NH、N(C1-C6烷基)和O的1至2个环成员的、未经取代或被1-2个R9基团取代的4-6元杂环烷基;
每个R9独立地选自C1-C6烷基、羟基、卤代和被1至3个-OH取代的C1-C6烷基;或其药学上可接受的盐。
实施例3a.根据实施例2a所述的方法,其中所述化合物是具有式(IIa)的化合物并且:
R2是C1-C4烷基;
R3是C1-C4烷基;
R4是C1-C4烷基或卤代;
R6是具有独立地选自N、NH、N(C1-C6烷基)和O的1至2个环成员的4-6元杂环烷基;或其药学上可接受的盐。
实施例4a.根据施例1a至3a中任一项所述的方法,其中所述化合物是具有式(IIb)的化合物:
其中
R2是C1-C4烷基;
R3是C1-C4烷基;
R4是C1-C4烷基;或其药学上可接受的盐。
实施例5a.根据施例1a至4a中任一项所述的方法,其中所述化合物具有式(IIc):
实施例6a.治疗和/或预防NPSLE的方法,所述方法包括向对其有需要的患者施用有效量的具有式(I)的化合物:
其中
R1是氢或任选地被卤素取代一次或多次的C1-C4烷基;
R2和R3彼此独立地是氢或C1-C6烷氧基;
R4是氢或C1-C6烷基;并且
R5是氢或C1-C6烷基;或其药学上可接受的盐。
实施例7a.根据实施例6a所述的方法,其中所述化合物是具有式(I)的化合物,并且
R1是三氟甲基或二氟甲基;
R2和R3均是甲氧基;
R4是氢;并且
R5是氢或甲基;或其药学上可接受的盐。
实施例8a.根据实施例6a或7a所述的方法,其中所述化合物是具有式(Ia)的化合物:
或其药学上可接受的盐。
实施例9a.根据实施例6a、7a或8a所述的方法,其中所述化合物是具有式(Ib)的化合物:
或其药学上可接受的盐。
实施例10a.根据施例1a至9a中任一项所述的方法,其中NPSLE是指患有系统性红斑狼疮(SLE)的患者的不同神经学和/或行为学临床综合征。
Claims (15)
1.一种具有式(II)的化合物或其药学上可接受的盐,用于在NPSLE的治疗和/或预防中使用,
其中
L是-CH2-或-CH2CH2-;
R1是-NHC(=O)R6、-NHC(=O)(CH2)nR6、-NHC(=O)(CH2)mNHR5、-NHC(=O)(CH2)mN(R5)2、-NHC(=O)(CHR7)mNHR5、-NHC(=O)(CH2)mNH2、-NHC(=O)(CH2)nOR7、-NHC(=O)OR7、-NHC(=O)(CHR7)nR6、-NHC(=O)(CHR7)nN(R8)2、-NHC(=O)(CHR7)nNHR8、-NR7C(=O)OR11、-NHC(=O)(CH2)nN(CD3)2、-NR7C(=O)R5、-NR7C(=O)(CH2)nR5、-NR7C(=O)OR5、-NHS(=O)2R5、-NHC(=O)(CH2)nNR7C(=O)R5、或-NHC(=O)(CH2)nNR7S(=O)2R5;
R2是H、C1-C6烷基或C1-C6卤代烷基;
R3是H、C1-C6烷基或-CD3;
R4是H、NH2、C1-C6烷基或卤代;
每个R5独立地选自C1-C6烷基、-CD3和-(CH2)nOR7;
R6是C3-C6环烷基或具有独立地选自N、NH、N(C1-C6烷基)和O的1至2个环成员的、未经取代或被1-2个R9基团取代的4-6元杂环烷基;
每个R7独立地选自H和C1-C6烷基;
每个R8独立地选自C1-C6卤代烷基、-(C(R7)2)nOR7和被1至3个-OH取代的C1-C6烷基;
每个R9独立地选自C1-C6烷基、羟基、卤代和被1至3个-OH取代的C1-C6烷基;
n是1、2、3、4、5或6;并且
m是1、2、3、4、5或6。
3.根据权利要求1或2所述使用的具有式(IIa)的化合物,或其药学上可接受的盐,其中
R2是C1-C4烷基;
R3是C1-C4烷基;
R4是C1-C4烷基或卤代;
R6是具有独立地选自N、NH、N(C1-C6烷基)和O的1至2个环成员的4-6元杂环烷基。
7.根据权利要求6所述使用的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐,其中
R1是三氟甲基或二氟甲基;
R2和R3均是甲氧基;
R4是氢;并且
R5是氢或甲基。
10.根据权利要求1至5中任一项所述使用的具有式(II)的化合物或其药学上可接受的盐,其中NPSLE是指患有系统性红斑狼疮(SLE)的患者的不同神经学和/或行为学临床综合征。
11.根据权利要求6至9中任一项所述使用的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐,其中NPSLE是指患有系统性红斑狼疮(SLE)的患者的不同神经学和/或行为学临床综合征。
12.一种药物组合物,所述药物组合物包含根据权利要求1至5中任一项所述的具有式(II)的化合物或其药学上可接受的盐以及一种或多种药学上可接受的载体,用于在NPSLE的治疗和/或预防中使用。
13.一种药物组合物,所述药物组合物包含根据权利要求6至9中任一项所述的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐以及一种或多种药学上可接受的载体,用于在NPSLE的治疗和/或预防中使用。
14.根据权利要求1至5中任一项所述的根据式(II)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于治疗NPSLE的药物中的用途。
15.根据权利要求6至9中任一项所述的根据式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于治疗NPSLE的药物中的用途。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP17210059.6 | 2017-12-22 | ||
EP17210059 | 2017-12-22 | ||
US201862769635P | 2018-11-20 | 2018-11-20 | |
US62/769,635 | 2018-11-20 | ||
PCT/IB2018/060309 WO2019123294A2 (en) | 2017-12-22 | 2018-12-19 | Novel uses of pyrazolo piperidine derivatives |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN111432818A true CN111432818A (zh) | 2020-07-17 |
Family
ID=65201642
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201880078211.3A Pending CN111432818A (zh) | 2017-12-22 | 2018-12-19 | 用于治疗神经精神性系统性红斑狼疮的吡唑并哌啶衍生物和吡唑并嘧啶衍生物 |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP2021507889A (zh) |
CN (1) | CN111432818A (zh) |
WO (1) | WO2019123294A2 (zh) |
Families Citing this family (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP3752505B1 (en) | 2018-02-12 | 2023-01-11 | F. Hoffmann-La Roche AG | Novel sulfone compounds and derivatives for the treatment and prophylaxis of virus infection |
US11713327B2 (en) | 2018-06-12 | 2023-08-01 | Hoffmann-La Roche Inc. | Heteroaryl heterocyclyl compounds for the treatment of autoimmune disease |
EP3826724B1 (en) | 2018-07-23 | 2022-10-05 | F. Hoffmann-La Roche AG | Novel piperazine compounds for the treatment of autoimmune disease |
WO2020048583A1 (en) | 2018-09-04 | 2020-03-12 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Benzothiazole compounds for the treatment of autoimmune diseases |
CN112654618A (zh) | 2018-09-06 | 2021-04-13 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 用于治疗自身免疫性疾病的新型环脒化合物 |
IL307203A (en) | 2021-04-16 | 2023-11-01 | Gilead Sciences Inc | THIENOPYRROLE COMPOUNDS |
TW202337443A (zh) * | 2022-01-11 | 2023-10-01 | 瑞士商諾華公司 | 使用tlr7/8拮抗劑治療sjogren氏症候群或混合性結締組織病之方法 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JO3407B1 (ar) | 2012-05-31 | 2019-10-20 | Eisai R&D Man Co Ltd | مركبات رباعي هيدرو بيرازولو بيريميدين |
RU2671496C2 (ru) * | 2013-10-14 | 2018-11-01 | Эйсай Ар Энд Ди Менеджмент Ко., Лтд. | Производные 5-пиперидин-8-цианохинолина |
KR101865120B1 (ko) | 2016-06-29 | 2018-06-08 | 숭실대학교 산학협력단 | 테스트 노드 기반의 무선 측위 방법 및 그 장치 |
WO2018047081A1 (en) | 2016-09-09 | 2018-03-15 | Novartis Ag | Compounds and compositions as inhibitors of endosomal toll-like receptors |
-
2018
- 2018-12-19 CN CN201880078211.3A patent/CN111432818A/zh active Pending
- 2018-12-19 WO PCT/IB2018/060309 patent/WO2019123294A2/en active Application Filing
- 2018-12-19 JP JP2020533229A patent/JP2021507889A/ja active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2021507889A (ja) | 2021-02-25 |
WO2019123294A3 (en) | 2019-08-01 |
WO2019123294A2 (en) | 2019-06-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN111432818A (zh) | 用于治疗神经精神性系统性红斑狼疮的吡唑并哌啶衍生物和吡唑并嘧啶衍生物 | |
US7893260B2 (en) | Substituted quinazolin-4-one compounds for antagonizing TRPV3 function | |
US9486455B2 (en) | Compounds for modulating TRPV3 function | |
US11382907B2 (en) | Methods and compositions for treating aging-associated impairments using CCR3-inhibitors | |
JP6621534B2 (ja) | 慢性咳の処置のためのオルブピタント | |
JP2022514089A (ja) | 胃腸疾患の治療のためのjak1経路阻害剤 | |
JP2020529995A (ja) | 行動の変化の治療方法 | |
EP2535049A1 (en) | Tadalafil for the treatment of dementia | |
JP2009506036A (ja) | ピロロピリジン、ピロロピリミジンおよびピラゾロピリジン化合物、それらを含む組成物、ならびにそれらの使用方法 | |
JP6563998B2 (ja) | 治療計画 | |
US20200054622A1 (en) | Methods and Compositions for Treating Aging-Associated Impairments Using CCR3-Inhibitors | |
JP2023506118A (ja) | 皮膚エリテマトーデス及び扁平苔癬(lp)の治療のためのjak1阻害剤の使用 | |
EP2686429A1 (en) | Compositions, process of preparation of said compositions and method of treating inflammatory diseases | |
JP2018150357A (ja) | 治療レジメン | |
JP2023527509A (ja) | 全身性硬化症を治療する方法 | |
CN115835862A (zh) | 治疗阿尔茨海默病的组合及其应用 | |
RU2799049C2 (ru) | Способы лечения изменений поведения | |
CA2416706C (en) | Dementia remedies containing 2-aryl-8-oxodihydropurine derivatives as the active ingredient | |
WO2024117172A1 (ja) | 痒みの予防又は改善剤 | |
US20230165852A1 (en) | Method for treating central nervous system disorders using dopamine d3 partial agonists | |
WO2023174314A1 (zh) | 氮杂环丁烷衍生物的用途及治疗方法 | |
CN112789044A (zh) | 使用ccr3-抑制剂治疗衰老相关损伤的方法及组合物 | |
EA041892B1 (ru) | Способы и композиции для лечения ассоциированных со старением нарушений с применением ccr3-ингибиторов | |
US20100227844A1 (en) | Cannabinoid-1 receptor modulators useful for the treatment of alzheimer's disease |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20200717 |