CN111420084A - 一种低温微波真空杀灭猕猴桃花粉溃疡病致病菌（psa）的方法 - Google Patents
一种低温微波真空杀灭猕猴桃花粉溃疡病致病菌（psa）的方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了一种低温微波真空同时加工和杀灭猕猴桃花粉溃疡病致病菌(PSA)的方法，属于猕猴桃花粉处理技术领域，所述处理方法，包括以下步骤：1)将猕猴桃花粉进行预冻获得预冻花粉，所述预冻的温度为‑42～‑38℃，所述预冻的时间为8～12min；2)将所述预冻混合物进行低温微波真空处理后密封保存；所述低温微波真空处理的真空度为0.08～0.09MPa；所述低温微波真空处理的微波功率为20～100W；所述低温微波真空处理的温度为‑40～5℃，所述低温微波真空处理的时间为8～12min。本发明所述方法采用低温微波真空处理，一锅法完成花粉低温干燥，并迅速杀灭PSA，处理所得花粉能够长期保存至13个月，并保持花粉活性。
Description
技术领域
本发明属于猕猴桃花粉处理技术领域，尤其涉及一种低温微波真空杀灭猕猴桃花粉溃疡病致病菌(PSA)的方法。
背景技术
猕猴桃属雌雄异株植物，必须依靠外界良好的传粉才能够充分结实。在果树栽培实践中，授粉是果树结实的关键环节，授粉良好的果实果形好、产量高、品质佳。而猕猴桃花粉的质量，包括花粉的活性和是否携带溃疡病致病菌(Pseudomonassyringaepv.actinidiae,Psa)成为业内关注的热点。
在生产中果农大多都采取购买猕猴桃商品花粉进行人工授粉，而猕猴桃商品花粉是通过一系列的加工方法对猕猴桃花粉进行杀菌处理。在猕猴桃花粉加工过程中，往往将雄花花苞粉碎、过筛，然后烘干(20-70℃)。为脱去猕猴桃花粉中的PSA，通常采取混入杀菌剂、0℃以上辐照、臭氧处理等方式。上述烘干方式时间长(12～24h)，且需将花药薄铺(0.3cm左右)于盘内烘干，对场地、设备占用大。已见报道的猕猴桃花粉脱PSA方法，包括将花粉与杀菌剂混合、臭氧处理、辐照等。臭氧处理需要将花粉平铺冷库(占地大，若花粉层较厚，臭氧难以与花粉充分接触)；花粉与杀菌剂混合存在需要使用大剂量溶液(0.5g花粉需要1000mL溶液)、处理过程中花粉活性损失严重的问题。传统微波灭菌工艺，通过热效应与非热效应的共同作用，使蛋白质和生理活动物质发生变异，也存在花粉活性损失严重的问题。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种低温微波真空杀灭猕猴桃花粉溃疡病致病菌(PSA)的方法，采用低温低温微波真空处理，在低温状态下，迅速杀灭溃疡病致病菌(PSA)，处理后的花粉能够长期保存。
为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：
本发明提供了一种猕猴桃花粉的处理方法，包括以下步骤：
1)将猕猴桃花粉进行预冻获得预冻花粉；所述预冻的温度为-42～-38℃，所述预冻的时间为8～12min；
2)将所述预冻花粉进行低温微波真空处理后密封保存；
所述低温微波真空处理的真空度为0.08～0.09MPa；所述低温微波真空处理的微波功率为20～100W；
所述低温微波真空处理的温度为-40～5℃，所述低温微波真空处理的时间为8～12min。
优选的，所述低温微波真空处理包括第一阶段的低温微波真空处理和第二阶段的低温微波真空处理；所述第一阶段的低温微波真空处理的温度为-40～-20℃；所述第二阶段的低温微波真空处理的温度为-30～5℃。
优选的，所述第一阶段的低温微波真空处理的功率为90～100W；所述第二阶段的低温微波真空处理的功率为20～30W。
优选的，所述第一阶段的低温微波真空处理的时间为6～8min；所述第二阶段的低温微波真空处理的时间为2～4min。
优选的，步骤1)中所述猕猴桃花粉的厚度为4～6cm。
优选的，步骤1)中所述猕猴桃花粉通过以下方法获得：将猕猴桃雄花花苞与助剂混合后粉碎、过筛，收集筛下组分即为猕猴桃花粉。
优选的，所述助剂包括二烯丙基二硫醚；所述助剂还包括水杨酸、褐藻胶寡糖和褪黑素中的一种或几种。
优选的，所述助剂的质量为所述猕猴桃雄花花苞质量的6％～8％。
优选的，所述粉碎的温度为2～5℃。
优选的，所述过筛的筛孔目数为80～120目。
本发明的有益效果：本发明提供的猕猴桃花粉的处理方法，采用低温低温微波真空处理，在低温状态下，迅速杀灭溃疡病致病菌(PSA)，处理后的花粉保存期可达13个月，13个月后花粉活力仍保持在68％以上。
具体实施方式
本发明提供了一种猕猴桃花粉的处理方法，包括以下步骤：1)将猕猴桃花粉进行预冻获得预冻花粉；所述预冻的温度为-42～-38℃，所述预冻的时间为8～12min；2)将所述预冻花粉进行低温微波真空处理后密封保存；所述低温微波真空处理的真空度为0.08～0.09MPa；所述低温微波真空处理的微波功率为20～100W；所述低温微波真空处理的温度为-40～5℃，所述低温微波真空处理的时间为8～12min。
在本发明中，将猕猴桃花粉进行预冻获得预冻花粉。在本发明中，所述预冻的温度为-42～-38℃，优选为-40℃；所述预冻的时间为8～12min，优选为10min；所述猕猴桃花粉的预冻优选的在微波低温料盘中进行，所述猕猴桃花粉优选的平铺在所述微波低温料盘中，厚度优选为4～6cm，更优选为5cm；所述微波低温料盘中猕猴桃花粉的质量优选为0.25kg/次，优选的分装于3个圆形料盘中。
在本发明中，所述猕猴桃花粉通过以下方法获得：将猕猴桃雄花花苞与助剂混合后粉碎、过筛，收集筛下组分即为猕猴桃花粉。
在本发明中，优选的在所述猕猴桃雄花采摘前一周，向猕猴桃叶片和雄花喷施商品农药；所述商品农药优选为碧护和苯甲·中生混合物；本发明对所述农药的喷施量没有特殊限定，参考农药的使用说明书或常规喷施量即可；本发明对所述农药的喷施方法没有特殊限定，采用常规的喷施方法即可。本发明在所述猕猴桃雄花采摘前喷施商品农药的作用是增加雄花花粉量，确保雄花免受倒春寒等因素干扰，正常开放。
本发明将猕猴桃雄花花苞与助剂混合后粉碎、过筛。在本发明中，包括二烯丙基二硫醚；所述助剂还包括水杨酸、褐藻胶寡糖和褪黑素中的一种或几种；所述助剂的质量优选为所述猕猴桃雄花花苞质量的6％～8％，更优选为7％～9％。在本发明中，所述助剂的作用是杀灭PSA、保持花粉高活力增效剂。在本发明中，当所述助剂包括二烯丙基二硫醚及水杨酸、褐藻胶寡糖和褪黑素中的一种或多种时，所述二烯丙基二硫醚质量优选为花苞质量1％，水杨酸、褐藻胶寡糖和褪黑素单一或多种的质量为花苞总质量5～7％。
在本发明中，所述粉碎优选的在低温冷冻粉碎机中进行；所述粉碎的温度优选为2～5℃；本发明在所述粉碎优选的还包括混匀的步骤；本发明在所述粉碎后过筛，所述过筛的筛孔目数优选为80～120目，更优选为100目。本发明收集筛下组分获得猕猴桃花粉。
本发明在获得所述预冻花粉后，将所述预冻花粉进行低温微波真空处理后密封保存。在本发明中，所述低温微波真空处理的真空度为0.08～0.09MPa；所述低温微波真空处理的微波功率为20～100W。在本发明中，所述低温微波真空处理的温度优选为-40～5℃，所述低温微波真空处理的时间优选为8～12min，更优选为10min。在本发明中，所述低温微波真空处理优选的包括第一阶段的低温微波真空处理和第二阶段的低温微波真空处理；所述第一阶段的低温微波真空处理的温度优选为-40～-20℃；所述第一阶段的低温微波真空处理的功率优选为90～100W，更优选为95～99W；所述第一阶段的低温微波真空处理的时间优选为6～8min，更优选为7min。在本发明中，所述第二阶段的低温微波真空处理的温度优选为-30～5℃；所述第二阶段的低温微波真空处理的功率优选为20～30W，更优选为21～25W；所述第二阶段的低温微波真空处理的时间优选为2～4min，更优选为3min。在本发明中，采取二阶段低温微波真空处理目的为将花粉混合物干燥与杀灭PSA同步进行，尤其第二阶段为小功率处理，在确保花粉活力的前提下彻底杀灭PSA。
本发明在所述低温微波真空处理后，对所述处理后的猕猴桃花粉进行密封保存。在本发明中，优选的将所述处理后的猕猴桃花粉保存于密封瓶中；所述保存的温度优选为-20℃。
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
雄花采前一周，向叶片、雄花喷施商品农药碧护、苯甲·中生(碧护、苯甲·中生水溶液浓度分别为3000倍、1500倍)。将即将开放花苞采摘后与花苞质量1％二烯丙基二硫醚，各2％水杨酸、褪黑素、褐藻胶寡糖，然后使用低温冷冻粉碎机粉碎并充分混合(粉碎腔体的温度为2～5℃)，然后过100目筛收集花粉混合物。
将花粉装入微波低温料盘(100g，厚度：4cm)。-40±2℃预冻8min获得预冻花粉。
开启真空、微波进行处理5min；真空度为0.08-0.09MPa，前7min的温度为-40～-20℃，微波功率为100W，后3min温度为-30～5℃，微波功率20W。完成灭菌或，立即将花粉装入密封瓶，至于-20±2℃空间保存。保存期13个月。
猕猴桃花粉是否携带PSA按George等报道PCR法进行检测。(J.Rees-George,J.L.Vanneste,D.A.Cornish,et al.Detection of Pseudomonas syringaepv.actinidiae using polymerase chain reaction(PCR)primers based on the 16S–23S rDNA intertranscribed spacer region and comparison with PCR primers basedon other gene regions[J].PlantPathology,2010,59(3):453-464.)
猕猴桃花粉活力按杨红等报道离体萌发法进行检测。(杨红,余和明,李小艳,等.猕猴桃花粉生活力测定方法及花药处理方法研究[J].北方园艺,2015,8:36-39.)
表1系列处理条件对猕猴桃花粉活性及是否携带PSA结果
*除去助剂，按花粉含量折算(％)
由表1可见，经上述低温真空微波处理后猕猴桃花粉，最优条件产物经-20℃保存13个月，较刚采摘对照处理(处理1)降低7.10％，为70.11％。
实施例2
雄花采前一周，向叶片、雄花喷施商品农药碧护、苯甲·中生(碧护、苯甲·中生水溶液浓度分别为3000倍、1500倍)。将即将开放花苞采摘后与花苞质量1％二烯丙基二硫醚，5％褐藻胶寡糖，然后使用低温冷冻粉碎机粉碎并充分混合(粉碎腔体的温度为2～5℃)，然后过120目筛收集花粉混合物。
将600g花粉混合物装入微波低温料盘(200g/盘，厚度：5cm)。-40±2℃预冻12min获得预冻花粉混合物。
开启真空、微波进行处理8min；真空度为0.08-0.09MPa，前7min的温度为-40～-20℃，微波功率为100W，后5min温度为-30～5℃，微波功率30W。完成灭菌或，立即将花粉装入密封瓶，至于-20±2℃空间保存。保存期13个月。
2019年春，将当年采集雄花粉(活力：80.22％)与上述条件处理花粉(活力：73.17％)分别于石松子粉按1:1混合，经30℃活化4h，分别对600株6龄健康猕猴桃植株授粉。结果见表2。
表2本实施例中所述方法灭菌后的猕猴桃花粉与刚采摘的猕猴桃花粉SPA、花粉活力和果实品质的对比
*除去助剂，按花粉含量折算(％)
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种低温微波真空杀灭猕猴桃花粉溃疡病致病菌的方法，包括以下步骤：
1)将猕猴桃花粉进行预冻获得预冻花粉，所述预冻的温度为-40±2℃，所述预冻的时间为8～12min；
2)将所述预冻花粉进行低温微波真空处理后密封保存；
所述低温微波真空处理的真空度为0.08～0.09MPa；所述低温微波真空处理的微波功率为20～100W；
所述低温微波真空处理的温度为-40～5℃，所述低温微波真空处理的时间为8～12min。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述低温微波真空处理包括第一阶段的低温微波真空处理和第二阶段的低温微波真空处理；所述第一阶段的低温微波真空处理的温度为-40～-20℃；所述第二阶段的低温微波真空处理的温度为-30～5℃。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述第一阶段的低温微波真空处理的功率为90～100W；所述第二阶段的低温微波真空处理的功率为20～30W。
4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述第一阶段的低温微波真空处理的时间为6～8min；所述第二阶段的低温微波真空处理的时间为2～4min。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述猕猴桃花粉的厚度为4～6cm。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述猕猴桃花粉通过以下方法获得：将猕猴桃雄花花苞与助剂经低温粉碎、混合、过筛，收集筛下组分即获得猕猴桃花粉。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述助剂包括二烯丙基二硫醚；所述助剂还包括水杨酸、褐藻胶寡糖和褪黑素中的一种或几种。
8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述助剂的质量为所述猕猴桃雄花花苞质量的6％～8％。
9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述低温粉碎的温度为2～5℃。
10.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述过筛的筛孔目数为80～120目。
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