CN105191581A - 一种授粉用梨花粉的获得方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及授粉用花粉采集技术领域，具体涉及一种授粉用梨花粉的获得方法；所要解决的技术问题是提供一种活性稳定、操作简单的授粉用花粉的获取方法；采用的技术方案包括以下步骤：选择种植单一品种梨树的梨园，在梨园中梨树开花达20%以上时，将蜂群分散放入梨园中自由采集，每日上午9点到11点之间收集蜜蜂采集到的花粉团，每隔8-15min收集一次，将收集到的花粉团采用真空冷冻干燥处理，获得授粉用梨花粉；所述真空冷冻干燥处理的步骤为：花粉团的预冻处理2小时；预冻处理的花粉团冷冻干燥处理10-13小时；干燥好的花粉团粉碎；花粉品质更均匀，质量更好，形成了一套获得授粉用高纯度、高活性梨花粉的技术。

Description

一种授粉用梨花粉的获得方法

技术领域

本发明涉及授粉用花粉采集技术领域，具体涉及一种授粉用梨花粉的获得方法。

背景技术

梨树在生物分类学上属于蔷薇科、梨属，为多年生木本植物，在我国种植极为广泛。绝大多数梨品种自交不亲和，自花授粉不结实或者结实率极低，在生产中必须配置授粉树或进行人工授粉才能获得丰收。但是，随着我国农业现代化进程的不断推进和单一品种农作物的大面积种植，农田里的传粉昆虫数量大幅度下降，梨树生产对人工授粉的依赖度逐渐加大。人工为梨树授粉，首先需要有充足的、活性高的梨花粉。在生产实践中，梨花粉的获得一般有两种渠道：一是人工摘取当年授粉树上尚未开放的花骨朵，然后通过复杂手段制成花粉；二是从外地购买商品花粉。然而，人工制作梨树花粉既费时间又费人力，并且无法确保所获得花粉的活性，而购买的商品花粉则一般是商家通过复杂的储藏方法储存的往年的花粉，这种花粉的活性参差不齐，而且由于储藏成本比较高，价格自然也十分昂贵，无形中增加了梨树的生产成本。

利用蜜蜂采粉的过程完成授粉或者驯养蜜蜂进行授粉是比较广知的技术。利用蜜蜂采集的花粉制作高营养价值和药效价值的食品，也已经形成完整的产业链。但是，利用蜜蜂采集的花粉作为授粉用花粉的技术很不成熟，目前应用还很少。这主要还是因为蜜蜂在采集花粉的过程中会混入花蜜和唾液，将花粉黏集成团，花粉团中的花粉粒在花蜜和蜜蜂唾液的作用下很容易失去活性，因此利用脱粉器脱下的花粉团如果不及时处理或者处理方法不得当，花粉的活性将很快丧失殆尽，难以形成有价值的产业。

专利CN104823833A涉及一种利用蜜蜂快速高效获取梨人工授粉用花粉的方法，其采摘花粉的时间选择为晴天或阴天于上午9点露干后，或雨天于雨停花朵水干后，其目的是防止花粉过湿对蜜蜂采粉造成困难，为后续干燥过程带来难度。并且现有技术人工采摘花朵的方式收集花粉或者采用采粉器采集花粉的方法也需要考虑这些因素。但是蜜蜂采集花粉时，将花粉黏集成团的过程虽然有利于增加花粉团本身的营养价值，但却对花粉本身的活性产生影响，降低花粉萌发率。另外掺入松花粉或者常规的干燥方式，难以充分破坏花粉团的沾黏性，较多的花粉依然粘在一起，即使过筛也难以把花粉分散，对花粉的利用很不充分。

专利CN103222459A涉及一种烟草花粉冷冻真空干燥、低温中长期保存方法，披露了采用冷冻真空干燥技术对新鲜花粉进行处理，从而得到能够长期保存的授粉用烟草花粉的方法。该方法将新鲜花粉经预冻处理后，利用冷冻真空干燥机的冻晶真空升华脱水原理进行冷冻干燥处理，在保持花粉原有形态、生理机能的前提下，排查了95-99％的水分，由于是在低温条件下进行的真空冻晶升华干燥，因此与其它保存方法比较，脱水更彻底，花粉细胞组织损伤最小，各种酶的活性迅速停滞，细胞内营养物质消耗小，从而保证了花粉的活性。但是该处理方法是得到适宜长期保存的超脱水状态的花粉，该花粉不能直接用于授粉，而需要进行复水处理，恢复活性。

本发明利用蜜蜂的生物学规律，通过对梨园的选择、脱粉的时机和花粉的处理方式等重要环节进行改善，形成了一套获得授粉用高纯度、高活性梨花粉的技术。该方法简单方便，易于操作，成本低廉，能够获得高质量的梨树花粉，在梨树生产中具有重要的应用价值。

发明内容

本发明克服现有技术的不足，所要解决的技术问题是提供一种活性稳定、操作简单的授粉用梨花粉的获取方法。

为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案包括以下步骤：

1、梨园选择：为了保证所采集花粉的品种单一性，梨园中应该只有单一品种的梨树，并且梨园种植面积最好为10000平方米以上，种植面积过小蜜蜂容易到梨园外采集其他品种或树种的花粉，影响花粉的品质纯净度。

2、蜂群调整与放置：可以选择国内饲养较为广泛的意大利蜜蜂，通过调整蜂群，使其群势强壮，并且采花粉积极性较高。待至少20%梨花开放时，将所选蜂群分散放置在梨园内的适当位置。优选的每一蜂群的蜂量为不低于5脾。

3、脱粉器安装：上午9点之前为每群蜂安装标准脱粉器。

4、花粉收集：收取花粉的时间为上午9点到11点之间，每8-15分钟收取一次脱下的花粉，每次收集的花粉用不透明纸袋装起来放在冰箱内暂时保存。

5、花粉处理：最后一次收取后，将当天收集到的花粉进行真空冷冻干燥处理。

真空冷冻干燥处理的工艺为：

a、花粉团的预冻处理，将收集到的新鲜花粉团轻轻压成薄片状，放入培养皿中，加上盖，放入冷冻干燥机的冷阱内-50℃下冷冻处理2小时；

b、花粉团的干燥处理，将步骤a预冻处理的花粉团轻轻倒在干燥机的专用托盘上，将花粉平铺，将托盘放在真空冷冻干燥机的样品架上，盖上有机玻璃罩，开启真空泵，温度控制在-50℃、压力为10Pa，处理的时间为10-13小时，优选12小时；

c、花粉团的粉碎处理，将步骤b干燥好的花粉迅速转入预冷的粉碎机内，加入2倍的预冷硼砂，粉碎2分钟，即得到授粉用梨花粉，所得花粉可以直接用于人工授粉或也可以装入不透明纸袋内-18℃下贮藏。

在实际使用时，为了提高利用效率，可以根据需要将本发明的梨花粉再加入适量硼砂混合稀释。

本发明中所用硼砂为花粉稀释用硼砂。

与现有技术相比本发明具有以下有益效果。

1、本发明的方法适用于种植面积大的梨园的花粉采集，解决了现有技术人工采集工作效率低，后处理工序耗时较长，费工费时，而所得花粉活性差异大、稳定性不好的问题。

2、本发明通过对采集时间、脱粉时机和后处理工艺等关键环节进行控制，保证了通过蜜蜂采集所获得花粉的品种纯净度和活性的一致性，花粉品质更均匀，质量更好，形成了一套获得授粉用高纯度、高活性梨花粉的技术。

3、本发明的方法，可以通过真空冷冻干燥处理采集的新鲜花粉团，获得可以直接作为授粉用的花粉。

4、本发明的粉碎方法在保持花粉活性的同时，能够轻易的将花粉团充分分散，对采集的花粉原料基本没有浪费，授粉利用率高。

5、本发明的操作方法和实施步骤相对简单、可控，易于操作，成本低廉，避免了大量的人力投入，在梨树生产中具有重要的应用价值。

附图说明

图1为TTC法和离体培养法检测花粉的活性；

图2为花粉管萌发速率比较；

图3为大田人工授粉坐果率比较。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明作进一步说明。

（一）实验方法

1、梨园选择与蜂群入场：本发明以鸭梨为研究试材。选择种植面积为10000平方米以上、周围无竞争花开放以及只有鸭梨树的梨园为花粉采集地。待大约20%梨花开放时，将已经调整完毕的蜂群搬至梨园内，将蜂群分散摆放在梨园内，于脱粉前安装脱粉器。

2、花粉收集：收集人工采集和蜜蜂采集两种花粉进行比较。

人工采集花粉的方法：采含苞待放的大蕾期花苞，带回室内，揉搓花朵，使花药与花丝分离，用孔径1.43mm细孔筛筛下花药，雨后采花或花瓣沾有露时，先晾干再揉搓花朵，花药在温度20～25℃、相对湿度体积比70％～80％、无阳光直射的室内单层摊匀，经1～2天后散出花粉，爆出的花粉收集于棕色瓶内。

蜜蜂采集花粉采用本发明所公布的方法，于上午9点到11点之间，每10分钟收集一次花粉，将收集的花粉团真空冷冻干燥和低温粉碎处理后，装在不透明纸袋内低温储藏备用。

3、花粉活性检测与花粉管萌发试验：本实验采用TTC法和离体培养法检测花粉活性。TTC法所用试剂为0.5%的2，3，5-三苯基氯化四氮唑水溶液，将少许待测花粉撒在载玻片上，然后滴1-2滴TTC溶液，放在25℃的培养箱内。1小时后在显微镜下观察，若花粉颜色变为红色或淡红色，则说明花粉有活性，否则无活性。染色花粉数与所测花粉总数的比值即为花粉的活性值。离体培养法检测所用培养基组分为10%蔗糖、1%琼脂和89ml蒸馏水。将所配培养基融化为透明液体状，轻轻倒在载玻片上，在载玻片上形成厚度为2mm左右的薄层培养基。待该培养基冷却后，将待测花粉均匀散播在上面，迅速转入底部放有湿润纱布的培养皿中，将培养皿放入培养箱内，在30℃下避光培养。每隔30分钟在显微镜下拍照记录一次花粉管萌发情况。2小时后根据所记录图像检测花粉萌发和花粉管伸长情况。将花粉管长度大于花粉粒直径的视为已萌发，其余视为未萌发。重复3次，每次计数100粒以上。已萌发花粉数与所测花粉总数的比值即为花粉的萌发率。

（二）结果与分析

1、花粉的活性检测

分别用TTC法和离体培养法检测了人工和蜜蜂采集花粉的活性，结果见图1。分析数据得知，人工采集花粉的TTC法检测结果为75%以上，离体培养法的结果为50%，而蜜蜂采集的花粉在两种检测方法下的结果较为相近，约为60%，说明按照本发明的方法获得的花粉活性稳定性更高。

2、花粉管萌发速率比较

将两种花粉在离体培养基上进行培养，每隔30分钟记录一次花粉管萌发长度，每次记录20条以上，分别记录了30、60、90和120分钟时花粉管的萌发长度，结果见图2。对数据分析发现，在第30、60和90分钟时，蜜蜂采集花粉的花粉管萌发长度显著大于人工采集的花粉，而在第120分钟时，二者的花粉管萌发长度几近相等。

3、大田人工授粉坐果率比较

大田试验结果如图3所示，人工采集与蜜蜂采集的花粉均能使梨树的坐果率达到70%以上，蜜蜂采集的花粉的坐果率稍高于人工采集的花粉，而空白对照的坐果率仅为5%左右。说明，蜜蜂采集的花粉活力与人工采集的花粉一样，均能满足生产上梨树授粉的需要。

由此可见，蜜蜂采集的花粉无论是在活性、花粉管萌发长度以及大田实践上，都与人工采集的花粉相当甚至优于人工采集的花粉。

根据以上结论提出本发明内容：选择一个面积为10000平方米以上、种植单一品种梨树的梨园，待梨树开花20%以上时，将5脾蜂以上的强壮蜂群分散摆放在梨园内，为每个蜂箱安装标准脱粉器，于上午9点到11点之间，每10分钟收取一次花粉，完毕后将所取花粉真空冷冻干燥12小时，然后加入预冷硼砂粉碎，获得授粉用梨花粉，装在不透明纸袋内低温保存备用。

本发明可用其他的不违背本发明的精神或主要特征的具体形式来概述。因此，无论从哪一点来看，本发明的上述实施方案都只能认为是对本发明的说明而不能限制发明，权利要求书指出了本发明的范围，而上述的说明并未指出本发明的范围，因此，在与本发明的权利要求书相当的含义和范围内的任何变化，都应认为是包括在权利要求书的范围内。

Claims (6)

1.一种授粉用梨花粉的获得方法，其特征在于包括以下步骤：

选择种植单一品种梨树的梨园，在梨园中梨树开花达20%以上时，将蜂群分散放入梨园中自由采集，每日上午9点到11点之间收集蜜蜂采集到的花粉团，每隔8-15min收集一次，将收集到的花粉团采用真空冷冻干燥处理后加入预冷硼砂粉碎，获得授粉用梨花粉；

所述真空冷冻干燥处理和加入预冷硼砂粉碎的步骤为：

a、花粉团的预冻处理，将收集到的新鲜花粉团轻压成薄片状，在-50℃下冷冻处理2小时；

b、花粉团的干燥处理，将步骤a预冻处理的花粉团在温度-50℃、压力10Pa条件下，冷冻干燥处理10-13小时；

c、花粉团的粉碎处理，将步骤b干燥好的花粉团迅速转入预冷的粉碎机内，加入花粉团2倍质量的预冷硼砂，粉碎2分钟，得到分散开的授粉用梨花粉。

2.根据权利要求1所述的一种授粉用梨花粉的获得方法，其特征在于：在9点时为蜂箱安装脱粉器，收集上午9点到11点之间脱下的花粉团。

3.根据权利要求1所述的一种授粉用梨花粉的获得方法，其特征在于：所得到的授粉用梨花粉能够直接用于人工授粉，或者装入不透明纸袋内-18℃下贮藏。

4.根据权利要求1所述的一种授粉用梨花粉的获得方法，其特征在于：梨园的面积为10000平方米以上。

5.根据权利要求1所述的一种授粉用梨花粉的获得方法，其特征在于：步骤b处理时间为12小时。

6.根据权利要求1所述的一种授粉用梨花粉的获得方法，其特征在于：采用的蜂群的群势为强群，每群的蜂量≥5脾。