CN111420067A - 一种复合微球纳米载体及其制备方法和应用 - Google Patents

一种复合微球纳米载体及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN111420067A
CN111420067A CN202010160254.5A CN202010160254A CN111420067A CN 111420067 A CN111420067 A CN 111420067A CN 202010160254 A CN202010160254 A CN 202010160254A CN 111420067 A CN111420067 A CN 111420067A
Authority
CN
China
Prior art keywords
solution
chitosan
nano
sodium tripolyphosphate
composite microsphere
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202010160254.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111420067B (zh
Inventor
陈俊英
王倩
李莉
王焕然
魏来
曾铮
谭建英
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Southwest Jiaotong University
Original Assignee
Southwest Jiaotong University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Southwest Jiaotong University filed Critical Southwest Jiaotong University
Priority to CN202010160254.5A priority Critical patent/CN111420067B/zh
Publication of CN111420067A publication Critical patent/CN111420067A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111420067B publication Critical patent/CN111420067B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
    • A61K47/6921—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere
    • A61K47/6927—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A61K47/643—Albumins, e.g. HSA, BSA, ovalbumin or a Keyhole Limpet Hemocyanin [KHL]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A61K48/0008—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'non-active' part of the composition delivered, e.g. wherein such 'non-active' part is not delivered simultaneously with the 'active' part of the composition
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5021—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/5036—Polysaccharides, e.g. gums, alginate; Cyclodextrin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/02—Inorganic materials
    • A61L27/025—Other specific inorganic materials not covered by A61L27/04 - A61L27/12
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/14—Macromolecular materials
    • A61L27/20—Polysaccharides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/14—Macromolecular materials
    • A61L27/22—Polypeptides or derivatives thereof, e.g. degradation products
    • A61L27/227—Other specific proteins or polypeptides not covered by A61L27/222, A61L27/225 or A61L27/24
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/54—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/60—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a special physical form
    • A61L2300/62—Encapsulated active agents, e.g. emulsified droplets
    • A61L2300/622—Microcapsules

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

一种复合微球纳米载体及其制备方法和应用，属于医药技术领域。复合微球纳米载体的制备方法包括将包含壳聚糖‑三聚磷酸钠复合微球与牛血清白蛋白的混合溶液在85～95℃反应0.5～1h后形成纳米混合物溶液，待纳米混合物溶液冷却至15～30℃后调节纳米混合物溶液的pH值至5.9～6，搅拌0.5～1h形成复合微球纳米载体。壳聚糖‑三聚磷酸钠复合微球能够在特定pH值下与高温变性的牛血清白蛋白交联形成粒径均匀的壳聚糖‑三聚磷酸钠‑牛血清白蛋白复合微球。此制备方法简便，制得的壳聚糖‑三聚磷酸钠‑牛血清白蛋白复合微球可以接枝生物功能因子及药物且可以延长生物功能因子及药物的作用时间，控制其释放。

Description

一种复合微球纳米载体及其制备方法和应用
技术领域
本申请涉及医药技术领域，具体而言，涉及一种复合微球纳米载体及其制备方法和应用。
背景技术
纳米颗粒尺寸大概在几百纳米左右，较小的粒径决定了它们独特的理化特性，使其在各种生物应用中特别突出，并且纳米材料表现出高表面积-体积比，通过对其表面进行功能性修饰以及接枝配体等可以改变他们在体内的作用。
纳米载体不仅能够提高药物的靶向性并且实现可控释放，还有助于改善药物的体内循环时间和溶解度、细胞内递送以及穿透生物膜。
壳聚糖作为自然界唯一含游离氨基碱性阳离子多糖，因其无毒无刺激，组织相容性好，具有良好的可降解性，应用于体内安全，且壳聚糖因具有活性基团-NH2，可与含官能团的醛或酸酐药物化学偶连，使药物大量分布于偶联结构内，再通过壳聚糖自身溶胀、表面溶蚀、本体降解等途径释放药物，因此壳聚糖成为理想的药物控释载体。
目前用于壳聚糖微球的制备方法以乳化交联法较为常用，壳聚糖在交联剂三聚磷酸钠的作用下可以形成壳聚糖微球，但是通过该方法制得的微球粒径不均一。
发明内容
本申请提供了一种复合微球纳米载体及其制备方法和应用，其能够制得粒径均一的纳米载体，制得的纳米载体形态稳定，不容易聚集。
本申请的实施例是这样实现的：
在第一方面，本申请示例提供了一种复合微球纳米载体的制备方法，其包括：将包含壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球与牛血清白蛋白的混合溶液在85～95℃反应0.5～1h后形成纳米混合物溶液，待纳米混合物溶液冷却至15～30℃后调节纳米混合物溶液的pH值至5.9～6，搅拌0.5～1h形成复合微球纳米载体。
在上述技术方案中，壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球能够在特定pH值下与高温变性的牛血清白蛋白交联形成粒径均匀的壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球。此制备方法简便，制得的壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球可以接枝生物功能因子及药物且可以延长生物功能因子及药物的作用时间，控制其释放。
结合第一方面，在本申请的第一方面的第一种可能的示例中，上述混合溶液中壳聚糖与牛血清白蛋白的质量比为1:2～1:6。
结合第一方面，在本申请的第一方面的第二种可能的示例中，采用碱溶液调节上述纳米混合物溶液的pH值至5.9～6。
可选地，碱溶液包括氢氧化钠溶液。
在上述示例中，纳米混合物溶液呈现酸性，需要通过碱溶液调节其pH值至5.9～6。
结合第一方面，在本申请的第一方面的第三种可能的示例中，上述壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球的溶液通过以下方法制得：
将pH值为4.5～5.5的壳聚糖溶液和pH值为4.5～5.5的三聚磷酸钠混合，在15～30℃下搅拌1～2h形成壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球的溶液。
在上述示例中，壳聚糖能够在特定pH值的条件下与三聚磷酸钠反应形成壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球。
结合第一方面，在本申请的第一方面的第四种可能的示例中，上述三聚磷酸钠溶液和壳聚糖溶液的体积比为1:2～1:5。
其中，壳聚糖溶液的浓度为1～2mg/mL，三聚磷酸钠溶液的浓度为1～2mg/mL。
第二方面，本申请示例提供了一种复合微球纳米载体，其根据上述的复合微球纳米载体的制备方法制备得到。
在上述技术方案中，此复合微球纳米载体形态稳定，不容易聚集，并且可以接枝多种生物功能因子及药物且可以延长生物功能因子及药物的作用时间，控制其释放。
第三方面，本申请示例提供了一种复合微球纳米载体在仿生设计、药物及基因运输、组织工程以及材料表面的功能化设计中的应用。
在上述技术方案中，牛血清白蛋白表面含有许多羧基、氨基类官能团，为复合微球纳米载体进行各种表面修饰提供基础，复合微球纳米载体因其具有优异的生物相容性和可降解性能够作为药物载体可以对生物功能因子及药物进行装载与释放。
结合第三方面，在本申请的第三方面的第一种可能的示例中，将生物功能因子及药物装载到上述复合微球纳米载体上形成功能化纳米材料并且通过功能化纳米材料实现运输和释放生物功能因子及药物。
在上述示例中，生物功能因子及药物能够通过与牛血清白蛋白表面含有许多羧基、氨基类官能团结合，从而实现复合微球纳米载体运输和控制释放生物功能因子及药物。
结合第三方面，在本申请的第三方面的第一种可能的示例中，上述生物功能因子及药物包括组织因子途径抑制物。
在上述示例中，组织因子途径抑制物是控制凝血启动阶段的一种体内天然抗凝蛋白，它对组织因子途径(即外源性凝血途径)具有特异性抑制作用。
结合第三方面，在本申请的第三方面的第一种可能的示例中，将上述复合微球纳米载体的溶液与组织因子途径抑制物混合在15～30℃反应3～6h制得装载有组织因子途径抑制物的纳米材料。
在上述示例中，通过将组织因子途径抑制物与复合微球纳米载体反应形成装载有组织因子途径抑制物的复合微球纳米载体。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本申请的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为本申请壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球的合成示意图；
图2为本申请实施例4的装载有组织因子途径抑制物的纳米材料合成示意图；
图3为本申请对比例1制得的壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球的粒径强度分布图；
图4为本申请实施例1制得的壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球的粒径强度分布图；
图5为本申请实施例实施例1制得的壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球、实施例4～6制得的装载有组织因子途径抑制物的纳米材料的粒径分布图；
图6为本申请实施例5制得的装载有组织因子途径抑制物的纳米材料放置42h内的粒径变化图；
图7为本申请实施例4的装载有组织因子途径抑制物的纳米材料接枝于具有多巴胺涂层的玻璃片的示意图；
图8为本申请实施例1制得的壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球接枝在多巴胺涂层表面的第一扫描电镜图。
图9为本申请实施例1制得的壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球接枝在多巴胺涂层表面的第二扫描电镜图；
图10为本申请实施例1制得的壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球接枝在多巴胺涂层表面的第三扫描电镜图；
图11为本申请实施例5制得的装载有组织因子途径抑制物的纳米材料接枝在多巴胺涂层表面的第一扫描电镜图；
图12为本申请实施例5制得的装载有组织因子途径抑制物的纳米材料接枝在多巴胺涂层表面的第二扫描电镜图；
图13为本申请实施例5制得的装载有组织因子途径抑制物的纳米材料接枝在多巴胺涂层表面的第三扫描电镜图；
图14为本申请对比例1制得的壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球的第一扫描电镜图；
图15为本申请对比例1制得的壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球的第二扫描电镜图；
图16为本申请对比例1制得的壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球的第三扫描电镜图；
图17为本申请实施例1制得的壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球接枝于多巴胺涂层玻璃片浸没在PBS缓冲液中的第一扫描电镜图；
图18为本申请实施例1制得的壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球接枝于多巴胺涂层玻璃片浸没在PBS缓冲液中的第二扫描电镜图；
图19为本申请实施例1制得的壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球接枝于多巴胺涂层玻璃片浸没在PBS缓冲液中的第三扫描电镜图；
图20为本申请实施例5制得的装载有组织因子途径抑制物的纳米材料接枝于多巴胺涂层玻璃片浸没在PBS缓冲液中的第一扫描电镜图；
图21为本申请实施例5制得的装载有组织因子途径抑制物的纳米材料接枝于多巴胺涂层玻璃片浸没在PBS缓冲液中的第二扫描电镜图；
图22为本申请实施例5制得的装载有组织因子途径抑制物的纳米材料接枝于多巴胺涂层玻璃片浸没在PBS缓冲液中的第三扫描电镜图；
图23为本申请试验例4的血栓吸附结果图。
具体实施方式
下面将结合实施例对本申请的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本申请，而不应视为限制本申请的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
以下针对本申请实施例的一种复合微球纳米载体及其制备方法和应用进行具体说明：
本申请提供一种复合微球纳米载体的制备方法，其包括：
(1)制备壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球
将壳聚糖(英文chitosan，简写CS)溶解于质量分数为0.3～0.8％的醋酸溶液中，搅拌1～3h，配制得到浓度为1～2mg/mL的壳聚糖溶液，采用碱溶液调节壳聚糖溶液的pH值至4.5～5.5。
可选地，采用碱溶液调节壳聚糖溶液的pH值至4.8～5.2；
可选地，采用碱溶液调节壳聚糖溶液的pH值至5。
其中，碱溶液包括浓度为0.1～1moL/L的氢氧化钠溶液。
需要说明的是，由于钾离子可能对反应体系造成影响，一般情况下，不采用氢氧化钾作为调节壳聚糖溶液pH值的碱溶液。
将三聚磷酸钠(英文Sodium tripolyphosphate，简写TPP)溶解于超纯水或蒸馏水中搅拌均匀，配制得到浓度为1～2mg/mL的三聚磷酸钠溶液，采用酸溶液调节三聚磷酸钠溶液的pH值至4.5～5.5。
可选地，采用酸溶液调节三聚磷酸钠溶液的pH值至4.8～5.2；
可选地，采用酸溶液调节三聚磷酸钠溶液的pH值至5。
其中，酸溶液包括浓度为0.1～1moL/L的盐酸溶液或硝酸溶液。
需要说明的是，由于硫酸根离子可能对反应体系造成影响，一般情况下，不采用硫酸作为调节三聚磷酸钠溶液pH值的酸溶液。
如图1所示，将pH值为4.5～5.5的壳聚糖溶液和pH值为4.5～5.5的三聚磷酸钠按照体积比为1:2～1:5的投料比混合均匀得到第一混合液，将第一混合液在15～30℃下搅拌1～2h形成壳聚糖-三聚磷酸钠(CS-TPP)复合微球的溶液。
当pH值为4.5～5.5时，壳聚糖表面的氨基与三聚磷酸钠表面的磷酸基团由于静电作用可以形成壳聚糖微球，通过调控反应pH值、反应物浓度以及投料比等可以实现对壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球尺寸的调控。
制得的壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球以三聚磷酸钠为核，多个壳聚糖为壳的微球结构。
可选地，每个壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球以一个三聚磷酸钠为核，四个壳聚糖为壳的微球结构。
需要说明的是，需要在壳聚糖溶液和三聚磷酸钠溶液混合前分别调节其pH值至4.5～5.5，再将其混合。如果先将壳聚糖溶液和三聚磷酸钠溶液混合后再调节第一混合液的pH值至4.5～5.5，在将壳聚糖溶液和三聚磷酸钠溶液混合后壳聚糖和三聚磷酸钠已经开始反应，可能导出生成的产物并不是我们需要的壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球。
(2)制备壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球
将牛血清白蛋白(英文Bovine albumin，简写BSA)溶解于超纯水或蒸馏水中搅拌均匀，配制得到质量分数为0.4～0.6w/w牛血清白蛋白溶液。
将(2)步骤制得的壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球的溶液与牛血清白蛋白溶液混合均匀得到第二混合溶液，将第二混合溶液在85～95℃反应0.5～1h后形成纳米混合物溶液，待纳米混合物溶液冷却后至15～30℃后，采用碱溶液调节纳米混合物溶液的pH值至5.9～6，搅拌0.5～1h形成壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白(CS-TPP-BSA)复合微球。
第二混合溶液中壳聚糖与牛血清白蛋白的质量比为1:2～1:6。
可选地，采用碱溶液调节纳米混合物溶液的pH值至5.92～5.96；
可选地，采用碱溶液调节纳米混合物溶液的pH值至5.95。
其中，碱溶液包括浓度为0.1～1moL/L的氢氧化钠溶液。
当第二混合溶液温度超过80℃时，热诱导牛血清白蛋白变性形成牛血清白蛋白过渡态/中间态，其过渡态进一步成核化形成球状聚集体。纳米混合物溶液即牛血清白蛋白过渡态与壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球共混存在于溶液中。pH值为5.95时由于接近牛血清白蛋白的等电点，分子间可出现凝聚，降温后调节纳米混合物溶液的pH值至5.9～6，此时带负电荷的牛血清白蛋白与壳聚糖由于静电相互作用可形成以牛血清白蛋白聚集体为核，以壳聚糖为壳结构的自组装体，从而使牛血清白蛋白修饰到壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球表面形成壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球。
本申请提供一种复合微球纳米载体，其根据上述的复合微球纳米载体的制备方法制备得到。
复合微球纳米载体是一种三聚磷酸钠为核，多个壳聚糖为内壳，多个牛血清白蛋白为外壳的壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球。
此复合微球纳米载体形态稳定，不容易聚集。由于牛血清白蛋白表面含有许多羧基、氨基类官能团，为复合微球纳米载体进行各种表面修饰提供基础，使复合微球纳米载体可以接枝多种生物功能因子及药物且可以延长生物功能因子及药物的作用时间，控制其释放。
本申请还提供一种复合微球纳米载体在仿生设计、药物及基因运输、组织工程以及材料表面的功能化设计中的应用。
复合微球纳米载体的牛血清白蛋白表面含有许多羧基、氨基类官能团，为复合微球纳米载体进行各种表面修饰提供基础，复合微球纳米载体因其具有优异的生物相容性和可降解性能够作为药物载体可以对生物功能因子及药物进行装载与释放。
生物功能因子及药物包括组织因子途径抑制物(TFPI)，组织因子途径抑制物是控制凝血启动阶段的一种体内天然抗凝蛋白，它对组织因子途径(即外源性凝血途径)具有特异性抑制作用。
将组织因子途径抑制物溶解于超纯水或蒸馏水中搅拌均匀，配制得到浓度为1～2ng/μL的组织因子途径抑制物溶液。
将上述复合微球纳米载体的溶液与组织因子途径抑制物混合均匀得到第三混合溶液，在15～30℃反应3～6h制得装载有组织因子途径抑制物的纳米材料(CS-TPP-BSA-TFPI)。
第三混合溶液中组织因子途径抑制物的浓度为200～500ng/mL；
可选地，第三混合溶液中组织因子途径抑制物的浓度为300ng/mL。
以下结合实施例对本申请的一种复合微球纳米载体及其制备方法和应用作进一步的详细描述。
实施例1
本申请实施例提供一种复合微球纳米载体及其制备方法，其包括：
(1)制备壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球
配制浓度为1mg/mL的壳聚糖溶液，采用浓度为0.1moL/L的氢氧化钠溶液调节壳聚糖溶液的pH值至5；
配制浓度为1mg/mL的三聚磷酸钠溶液，采用浓度为0.1moL/L的盐酸溶液调节三聚磷酸钠溶液的pH值至5；
将上述配制的壳聚糖溶液和三聚磷酸钠溶液按照体积比为1:4的投料比混合均匀得到第一混合液，将第一混合液在25℃下搅拌1.5h形成壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球的溶液。
(2)制备壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球
配制质量分数为0.5w/w牛血清白蛋白溶液；
将(1)中制得的壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球的溶液与配制的牛血清白蛋白溶液混合均匀得到第二混合溶液，第二混合溶液中壳聚糖与牛血清白蛋白的质量比为1:4，将第二混合溶液在90℃反应1h后形成纳米混合物溶液，待纳米混合物溶液冷却后至25℃后，采用浓度为0.1moL/L的氢氧化钠溶液调节纳米混合物溶液的pH值至5.95，搅拌1h形成包含壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球的溶液，壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球即为复合微球纳米载体。
实施例2
本申请实施例提供一种复合微球纳米载体及其制备方法，其包括：
(1)制备壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球
配制浓度为2mg/mL的壳聚糖溶液，采用浓度为0.1moL/L的氢氧化钠溶液调节壳聚糖溶液的pH值至5；
配制浓度为2mg/mL的三聚磷酸钠溶液，采用浓度为0.1moL/L的盐酸溶液调节三聚磷酸钠溶液的pH值至5；
将上述配制的壳聚糖溶液和三聚磷酸钠溶液按照体积比为1:4的投料比混合均匀得到第一混合液，将第一混合液在20℃下搅拌2h形成壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球的溶液。
(2)制备壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球
配制质量分数为0.6w/w牛血清白蛋白溶液；
将(1)中制得的壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球的溶液与配制的牛血清白蛋白溶液混合均匀得到第二混合溶液，第二混合溶液中壳聚糖与牛血清白蛋白的质量比为1:4，将第二混合溶液在95℃反应1h后形成纳米混合物溶液，待纳米混合物溶液冷却后至20℃后，采用浓度为0.1moL/L的氢氧化钠溶液调节纳米混合物溶液的pH值至5.95，搅拌1h形成包含壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球的溶液，壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球即为复合微球纳米载体。
实施例3
本申请实施例提供一种复合微球纳米载体及其制备方法，其包括：
(1)制备壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球
配制浓度为2mg/mL的壳聚糖溶液，采用浓度为0.2moL/L的氢氧化钠溶液调节壳聚糖溶液的pH值至5；
配制浓度为1.5mg/mL的三聚磷酸钠溶液，采用浓度为0.2moL/L的盐酸溶液调节三聚磷酸钠溶液的pH值至5；
将上述配制的壳聚糖溶液和三聚磷酸钠溶液按照体积比为1:5的投料比混合均匀得到第一混合液，将第一混合液在15℃下搅拌1h形成壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球的溶液。
(2)制备壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球
配制质量分数为0.6w/w牛血清白蛋白溶液；
将(1)中制得的壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球的溶液与配制的牛血清白蛋白溶液混合均匀得到第二混合溶液，第二混合溶液中壳聚糖与牛血清白蛋白的质量比为1:4，将第二混合溶液在95℃反应0.5h后形成纳米混合物溶液，待纳米混合物溶液冷却后至15℃后，采用浓度为0.2moL/L的氢氧化钠溶液调节纳米混合物溶液的pH值至5.95，搅拌0.5h形成包含壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球的溶液，壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球即为复合微球纳米载体。
实施例4
本申请实施例提供一种复合微球纳米载体的应用，即一种装载有组织因子途径抑制物的纳米材料及其制备方法：
配制浓度为1ng/μL的组织因子途径抑制物溶液；
将实施例1制得的包含壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球的溶液与配制的组织因子途径抑制物溶液混合均匀得到第三混合溶液，第三混合溶液中组织因子途径抑制物的浓度为100ng/mL，将第三混合溶液在25℃下反应5h制得装载有组织因子途径抑制物的纳米材料。
装载有组织因子途径抑制物的纳米材料制备方法如图2所示。
实施例5
本申请实施例提供一种复合微球纳米载体的应用，即一种装载有组织因子途径抑制物的纳米材料及其制备方法：
配制浓度为1ng/μL的组织因子途径抑制物溶液；
将实施例1制得的包含壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球的溶液与配制的组织因子途径抑制物溶液混合均匀得到第三混合溶液，第三混合溶液中组织因子途径抑制物的浓度为300ng/mL，将第三混合溶液在25℃下反应5h制得装载有组织因子途径抑制物的纳米材料。
实施例6
本申请实施例提供一种复合微球纳米载体的应用，即一种装载有组织因子途径抑制物的纳米材料及其制备方法：
配制浓度为1ng/μL的组织因子途径抑制物溶液；
将实施例1制得的包含壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球的溶液与配制的组织因子途径抑制物溶液混合均匀得到第三混合溶液，第三混合溶液中组织因子途径抑制物的浓度为500ng/mL，将第三混合溶液在25℃下反应5h制得装载有组织因子途径抑制物的纳米材料。
对比例1
本申请对比例提供一种壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球及其制备方法，其包括：
配制1mg/mL的壳聚糖溶液，采用浓度为0.1moL/L的氢氧化钠溶液调节壳聚糖溶液的pH值至5；
配制1mg/mL的三聚磷酸钠溶液，采用浓度为0.1moL/L的盐酸溶液调节三聚磷酸钠溶液的pH值至5；
将上述配制的壳聚糖溶液和三聚磷酸钠溶液按照体积比为1:4的投料比混合均匀得到第一混合液，将第一混合液在25℃下搅拌1.5h形成壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球的溶液。
试验例1
分别取实施例1制得的壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球(CS-TPP-BSA)、实施例4～6制得的装载有组织因子途径抑制物的纳米材料(CS-TPP-BSA-TFPI)和对比例1制得的壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球(CS-TPP)，采用动态光散射(DLS)法对其粒径进行检测，检测结果如图3～6、表1～2所示。
图3为对比例1制得的壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球(CS-TPP-BSA)的粒径强度分布图，分析图3得到表1的数据。
表1图3(CS-TPP)各峰尺寸
尺寸(d.nm) 强度(％) 标准偏差(d.nm)
峰1 570.9 94.3 428.7
峰2 4510 5.7 901.5
峰3 0.000 0.0 0.000
由图3和表1所示，壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球(CS-TPP)的平均粒径为346.2nm，分散性指数为0.481，截距为0.964，即壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球的粒径分布不均匀。
图4为实施例1制得的壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球(CS-TPP-BSA)的粒径强度分布图，分析图4得到表2的数据。
表2图4(CS-TPP-BSA)各峰尺寸
尺寸(d.nm) 强度(％) 标准偏差(d.nm)
峰1 440.3 100.3 144.9
峰2 0.000 0.0 0.000
峰3 0.000 0.0 0.000
由图4和表2所示，壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球(CS-TPP-BSA)的平均粒径为404.7nm，分散性指数为0.172，截距为0.932，即壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球的粒径分布较均匀。
图5为实施例1制得的壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球(CS-TPP-BSA)、实施例4～6制得的装载有组织因子途径抑制物的纳米材料(CS-TPP-BSA-TFPI)的粒径分布图。由图4～5可知，当组织因子途径抑制物的浓度为0ng/mL(实施例1)、100ng/mL(实施例4)、300ng/mL(实施例5)、500ng/mL(实施例6)时制得的装载有组织因子途径抑制物的纳米材料(CS-TPP-BSA-TFPI)的粒径均在400～420nm之间，较为稳定。
图6为实施例5制得的装载有组织因子途径抑制物的纳米材料(CS-TPP-BSA-TFPI)放置42h内的粒径变化图。由图6所示，装载有组织因子途径抑制物的纳米材料(CS-TPP-BSA-TFPI)粒径大小没有发生较大的改变，说明通过该方法制备的装载有组织因子途径抑制物的纳米材料较为稳定，不易发生团聚。
试验例2
分别取实施例1制得的壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球(CS-TPP-BSA)和实施例5制得的装载有组织因子途径抑制物的纳米材料(CS-TPP-BSA-TFPI)和对比例1制得的壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球(CS-TPP)，将壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球(CS-TPP-BSA)和装载有组织因子途径抑制物的纳米材料(CS-TPP-BSA-TFPI)分别接枝于具有多巴胺涂层的玻璃片，其中，将装载有组织因子途径抑制物的纳米材料(CS-TPP-BSA-TFPI)接枝于具有多巴胺涂层的玻璃片的示意图如图7所示，采用扫描电子显微镜(SEM)分别观察，得到的扫描电镜图如图8～16所示。
图8～10为壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球(CS-TPP-BSA)接枝在多巴胺涂层表面的扫描电镜图；
图11～13为装载有组织因子途径抑制物的纳米材料接枝在多巴胺涂层表面(CS-TPP-BSA-TFPI)的扫描电镜图。
图14～16为壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球(CS-TPP)的扫描电镜图。
由图8～图16可知，壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球(CS-TPP-BSA)和装载有组织因子途径抑制物的纳米材料(CS-TPP-BSA-TFPI)均为大小均一的球形纳米颗粒，且在材料表面均匀分散，没有出现大量团聚的现象。而壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球(CS-TPP)粒径大小不一样，不是大小均匀的微球，并且制备效果不好。
试验例3
取实施例1制得的壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球(CS-TPP-BSA)和实施例5制得的装载有组织因子途径抑制物的纳米材料(CS-TPP-BSA-TFPI)接枝于多巴胺涂层的玻璃片，分别浸没于PBS缓冲液中常温条件下反应12h，随后用超纯水清洗3次，取出后用洗耳球吹干，采用扫描电子显微镜(SEM)观察玻璃片，得到的扫描电镜图如图17～22所示。
图17～19为壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球(CS-TPP-BSA)接枝于多巴胺涂层玻璃片浸没在PBS缓冲液中的扫描电镜图；
图20～22为装载有组织因子途径抑制物的纳米材料(CS-TPP-BSA-TFPI)接枝于多巴胺涂层玻璃片浸没在PBS缓冲液中的扫描电镜图。
由图17～22可知，壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球(CS-TPP-BSA)和装载有组织因子途径抑制物的纳米材料(CS-TPP-BSA-TFPI)为大小均一、分散均匀的球形纳米颗粒，且稳固接枝于多巴胺涂层材料表面，在PBS缓冲液中浸泡过后不会被冲洗掉，壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球(CS-TPP-BSA)和装载有组织因子途径抑制物的纳米材料(CS-TPP-BSA-TFPI)稳固接枝到多巴胺涂层表面。
试验例4
分别取实施例1制得的壳聚糖-三聚磷酸钠-牛血清白蛋白复合微球(CS-TPP-BSA)、实施例4～6制得的装载有组织因子途径抑制物的纳米材料(CS-TPP-BSA-TFPI)接枝到多巴胺图层玻璃片表面，在材料表面引入全血，观察得到图23。
由图23可知，空白玻璃片以及具有多巴胺图涂层的玻璃片表面吸附了大量血栓，而引入了装载有组织因子途径抑制物的纳米材料(CS-TPP-BSA-TFPI)的多巴胺涂层玻璃片表面未见明显的血栓吸附，说明装载有组织因子途径抑制物的纳米材料(CS-TPP-BSA-TFPI)能够抑制材料表面的血栓形成，使装载有组织因子途径抑制物的纳米材料(CS-TPP-BSA-TFPI)能够应用于心血管支架中防止血栓生成。
以上所述仅为本申请的具体实施例而已，并不用于限制本申请，对于本领域的技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种复合微球纳米载体的制备方法，其特征在于，所述复合微球纳米载体的制备方法包括：将包含壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球与牛血清白蛋白的混合溶液在85～95℃反应0.5～1h后形成纳米混合物溶液，待所述纳米混合物溶液冷却至15～30℃后调节所述纳米混合物溶液的pH值至5.9～6，搅拌0.5～1h形成所述复合微球纳米载体。
2.根据权利要求1所述的复合微球纳米载体的制备方法，其特征在于，所述混合溶液中壳聚糖与所述牛血清白蛋白的质量比为1:2～1:6。
3.根据权利要求1所述的复合微球纳米载体的制备方法，其特征在于，采用碱溶液调节所述纳米混合物溶液的pH值至5.9～6；
可选地，所述碱溶液包括氢氧化钠溶液。
4.根据权利要求1所述的复合微球纳米载体的制备方法，其特征在于，所述壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球的溶液通过以下方法制得：
将pH值为4.5～5.5的壳聚糖溶液和pH值为4.5～5.5的三聚磷酸钠混合，在15～30℃下搅拌1～2h形成所述壳聚糖-三聚磷酸钠复合微球的溶液。
5.根据权利要求4所述的复合微球纳米载体的制备方法，其特征在于，所述三聚磷酸钠溶液和所述壳聚糖溶液的体积比为1:2～1:5；
其中，所述壳聚糖溶液的浓度为1～2mg/mL，所述三聚磷酸钠溶液的浓度为1～2mg/mL。
6.一种复合微球纳米载体，其特征在于，所述复合微球纳米载体根据权利要求1～5任一项所述的复合微球纳米载体的制备方法制备得到。
7.一种权利要求6所述的复合微球纳米载体在仿生设计、药物及基因运输、组织工程以及材料表面的功能化设计中的应用。
8.根据权利要求7所述的复合微球纳米载体在仿生设计、药物及基因运输、组织工程以及材料表面的功能化设计中的应用，其特征在于，将生物功能因子及药物装载到复合微球纳米载体上形成功能化纳米材料并且通过所述功能化纳米材料实现运输和释放所述生物功能因子及药物。
9.根据权利要求8所述的复合微球纳米载体在仿生设计、药物及基因运输、组织工程以及材料表面的功能化设计中的应用，其特征在于，所述生物功能因子及药物包括组织因子途径抑制物。
10.根据权利要求9所述的复合微球纳米载体在仿生设计、药物及基因运输、组织工程以及材料表面的功能化设计中的应用，其特征在于，将所述复合微球纳米载体的溶液与所述组织因子途径抑制物混合在15～30℃反应3～6h制得装载有组织因子途径抑制物的纳米材料。
CN202010160254.5A 2020-03-09 2020-03-09 一种复合微球纳米载体及其制备方法和应用 Active CN111420067B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010160254.5A CN111420067B (zh) 2020-03-09 2020-03-09 一种复合微球纳米载体及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010160254.5A CN111420067B (zh) 2020-03-09 2020-03-09 一种复合微球纳米载体及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111420067A true CN111420067A (zh) 2020-07-17
CN111420067B CN111420067B (zh) 2021-08-27

Family

ID=71546319

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010160254.5A Active CN111420067B (zh) 2020-03-09 2020-03-09 一种复合微球纳米载体及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111420067B (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112972430A (zh) * 2021-03-24 2021-06-18 齐鲁工业大学 一种牛血清白蛋白-氧化石墨烯改性壳聚糖纳米载药系统及其制备方法
CN112999355A (zh) * 2021-03-24 2021-06-22 齐鲁工业大学 一种负载小檗碱和多柔比星的牛血清白蛋白-叶酸改性壳聚糖纳米载药系统及其制备方法
CN114317478A (zh) * 2022-01-05 2022-04-12 北京化工大学 一种蔗糖磷酸化酶的应用及利用其制备2-α-甘油葡萄糖苷的方法

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1561460A1 (en) * 2002-07-19 2005-08-10 ADVANCELL - Advanced In Vitro Cell Technologies Nanoparticles for the administration of active ingredients, method of producing said particles and composition containing same
CN103127002A (zh) * 2013-03-11 2013-06-05 南京中医药大学 一种注射用载纳米粒的微球系统及其制备方法
CN103948914A (zh) * 2014-05-14 2014-07-30 广东石油化工学院 一种可载药的低分子量水溶性壳聚糖纳米粒子的制备方法
CN104605228A (zh) * 2015-01-29 2015-05-13 安徽农业大学 一种EGCG壳聚糖/β-乳球蛋白复合纳米粒及其制备方法
CN104710630A (zh) * 2013-12-17 2015-06-17 南京理工大学 一种牛血清白蛋白纳米微球的制备方法
CN105664167A (zh) * 2016-01-22 2016-06-15 上海交通大学 蛋白包载方法
CN105983100A (zh) * 2015-02-09 2016-10-05 南开大学 特异靶向巨噬细胞的蛋白质传递系统
CN106177924A (zh) * 2016-07-15 2016-12-07 黑龙江省科学院高技术研究院 纳米级乳铁蛋白壳聚糖微粒的制备方法
CN110251658A (zh) * 2019-07-31 2019-09-20 西安市红会医院 包埋gdnf的壳聚糖/三聚磷酸钠微球缓释系统的制备方法

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1561460A1 (en) * 2002-07-19 2005-08-10 ADVANCELL - Advanced In Vitro Cell Technologies Nanoparticles for the administration of active ingredients, method of producing said particles and composition containing same
CN103127002A (zh) * 2013-03-11 2013-06-05 南京中医药大学 一种注射用载纳米粒的微球系统及其制备方法
CN104710630A (zh) * 2013-12-17 2015-06-17 南京理工大学 一种牛血清白蛋白纳米微球的制备方法
CN103948914A (zh) * 2014-05-14 2014-07-30 广东石油化工学院 一种可载药的低分子量水溶性壳聚糖纳米粒子的制备方法
CN104605228A (zh) * 2015-01-29 2015-05-13 安徽农业大学 一种EGCG壳聚糖/β-乳球蛋白复合纳米粒及其制备方法
CN105983100A (zh) * 2015-02-09 2016-10-05 南开大学 特异靶向巨噬细胞的蛋白质传递系统
CN105664167A (zh) * 2016-01-22 2016-06-15 上海交通大学 蛋白包载方法
CN106177924A (zh) * 2016-07-15 2016-12-07 黑龙江省科学院高技术研究院 纳米级乳铁蛋白壳聚糖微粒的制备方法
CN110251658A (zh) * 2019-07-31 2019-09-20 西安市红会医院 包埋gdnf的壳聚糖/三聚磷酸钠微球缓释系统的制备方法

Non-Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ABDELRAHMAN M. ABDELGAWAD ET AL: "Chitosan nanoparticles: Polyphosphates cross-linking and protein delivery properties", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF BIOLOGICAL MACROMOLECULES》 *
CLARA MATTU ET AL: "Chitosan Nanoparticles as Therapeutic Protein Nanocarriers: the Effect of pH on Particle Formation and Encapsulation Efficiency", 《POLYMER COMPOSITES》 *
DONGDONG YUAN ET AL: "Entrapment of protein in chitosan-tripolyphosphate beads and its release in an in vitro digestive model", 《FOOD CHEMISTRY》 *
EHSAN TAYERANI NICKNEJAD ET AL: "Electrospinning of Cross-Linked Magnetic Chitosan Nanofibers for Protein Release", 《AAPS PHARMSCITECH》 *
MAI BAY STIE ET AL: "Delivery of proteins encapsulated in chitosan-tripolyphosphate nanoparticles to human skin melanoma cells", 《COLLOIDS AND SURFACES B: BIOINTERFACES》 *
方华丰，等: "牛血清白蛋白壳聚糖微球的研制", 《广东药学院学报》 *
李思阳，等: "载牛血清白蛋白壳聚糖微球的制备及其体外释药特性评价", 《食品工业科技》 *
李正艳: "壳聚糖纳米载体用于细胞因子缓释制剂的研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》 *
梁雪莉，等: "载牛血清白蛋白壳聚糖微球的制备与检测", 《华夏医学》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112972430A (zh) * 2021-03-24 2021-06-18 齐鲁工业大学 一种牛血清白蛋白-氧化石墨烯改性壳聚糖纳米载药系统及其制备方法
CN112999355A (zh) * 2021-03-24 2021-06-22 齐鲁工业大学 一种负载小檗碱和多柔比星的牛血清白蛋白-叶酸改性壳聚糖纳米载药系统及其制备方法
CN114317478A (zh) * 2022-01-05 2022-04-12 北京化工大学 一种蔗糖磷酸化酶的应用及利用其制备2-α-甘油葡萄糖苷的方法
CN114317478B (zh) * 2022-01-05 2023-10-20 北京化工大学 一种蔗糖磷酸化酶的应用及利用其制备2-α-甘油葡萄糖苷的方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN111420067B (zh) 2021-08-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111420067B (zh) 一种复合微球纳米载体及其制备方法和应用
Fernando et al. Alginate-based nanomaterials: Fabrication techniques, properties, and applications
Mallakpour et al. Polymeric nanoparticles: Recent development in synthesis and application
Masalova et al. Alginate and chitosan gel nanoparticles for efficient protein entrapment
Yao et al. Microcapsules/microspheres related to chitosan
Kim Biomedical nanocomposites of hydroxyapatite/polycaprolactone obtained by surfactant mediation
US8293819B2 (en) Method for producing particles and particles
Wu et al. Chitosan–polycaprolactone copolymer microspheres for transforming growth factor-β1 delivery
EP0869774A1 (en) Sustained release particles
CN112205628A (zh) 一种具有双包埋功能的复合凝聚物及其制备方法与应用
US7879131B2 (en) Metal encapsulation
CN115521627A (zh) 一种结构蛋白/透明质酸复合微纳米颗粒及颗粒水凝胶材料和应用
JP2008056827A (ja) 磁性粒子及びその製造方法
Tabata et al. Phagocytosis of polymeric microspheres
Rostamabadi et al. Nanostructures of starch for encapsulation of food ingredients
JP5158835B2 (ja) 生分解性高分子リン酸カルシウム複合ナノ粒子及びその製造方法
Wang et al. Amphiphilic drug delivery microcapsules via layer-by-layer self-assembly
Ofridam et al. Effect of secondary polymer on self‐precipitation of pH‐sensitive polymethylmethacrylate derivatives Eudragit E100 and Eudragit L100
EP2170302A1 (en) Sustained release bionanocomposites, a process for producing the same and use thereof
Yazdi et al. Ionically gelled carboxymethyl polysaccharides for drug delivery
CN1203119C (zh) 一种离子交联壳聚糖微球的制备方法
CN105366735A (zh) 表面为羧基的阴离子性四氧化三铁纳米颗粒的制备方法
Te et al. A Study on chitosan coated polycaprolactone (Ch-PCL) microspheres prepared via double emulsion solvent evaporation method
Hu et al. A core–shell double-layer structured polylactic acid/chitosan delivery system containing large molecular protein
CN113730374A (zh) 一种甜菜果胶基口服缓释凝胶珠及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant