CN111417633B - 一种β-内酰胺酶抑制剂的晶型及其制备方法 - Google Patents

一种β-内酰胺酶抑制剂的晶型及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111417633B
CN111417633B CN201880076738.2A CN201880076738A CN111417633B CN 111417633 B CN111417633 B CN 111417633B CN 201880076738 A CN201880076738 A CN 201880076738A CN 111417633 B CN111417633 B CN 111417633B
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
formula
crystal form
beta
preparation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201880076738.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111417633A (zh
Inventor
李程
黄志刚
丁照中
李卫东
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
QILU ANTIBIOTICS PHARMACEUTICAL CO Ltd
Qilu Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Qilu Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Qilu Pharmaceutical Co Ltd filed Critical Qilu Pharmaceutical Co Ltd
Publication of CN111417633A publication Critical patent/CN111417633A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111417633B publication Critical patent/CN111417633B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/551—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having two nitrogen atoms, e.g. dilazep
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/08—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/13—Crystalline forms, e.g. polymorphs

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

本发明公开了一种β‑内酰胺酶抑制剂的晶型及其制备方法，还包括所述晶型在制备β‑内酰胺酶抑制剂药物中的应用。(I)

Description

一种β-内酰胺酶抑制剂的晶型及其制备方法
本申请主张如下优先权：
CN201711251386.3，申请日2017年12月1日。
技术领域
本发明涉及一类新型β-内酰胺酶抑制剂，具体公开了式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐。
背景技术
细菌对β-内酰胺类抗生素产生耐药的机制有几种，最主要的是细菌能产生使β-内酰胺环水解开裂的酶，从而导致抗生素失去抗菌活性。细菌还可以选择性改变抗生素的作用靶标。如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌具有多重耐药性就与产生新的PBP2a、使PBPs合成增加、与药物亲和力下降有关。β-内酰胺酶可与某些耐酶β-内酰胺类抗生素迅速结合，使药物停留在胞质膜外间隙中，不能达到作用靶位发挥抗菌作用。另外，G-菌的外膜对某些β-内酰胺类抗生素不易透过，产生非特异性低水平耐药。还有些细菌的胞质膜上存在主动外排系统，细菌由此主动外排药物。因此，将β-内酰胺类抗生素和β-内酰胺酶抑制剂联合使用是临床上最有效的方法。细菌可以产生多种类型的β-内酰胺酶，按照其氨基酸和核苷酸序列可以分为A、B、C、D四类。A、B和D类酶以丝氨酸为活性位点来催化水解，B类酶通过其活性位点上的一个或多个金属原子使环开裂。
Figure GPA0000289292990000021
第一个广为人知的高活性β-内酰胺酶抑制剂是克拉维酸钾，迄今为止，它与阿莫西林的组合在市场上仍然畅销。市场上另外两个重要的β-内酰胺酶抑制剂是舒巴坦和他唑巴坦。这三个药物的共同之处是结构中都有高活性的β-内酰胺环，是抑制剂的活性位点。虽然这三个药物在市场销售情况火热，但是其本身的抗菌谱很窄。它们只对A和D类β-内酰胺酶有作用效果，而对C类酶和A类中极为重要的KPC酶则完全无效。
2015年2月，FDA批准了一种新的β-内酰胺酶抑制剂，名叫阿维巴坦(NXL-104)。该药物的结构中含有一个新型的二氮杂二环，具有比上述三个老一代的β-内酰胺酶抑制剂更广的抗菌谱。β-内酰胺酶抑制剂的专利中披露了大量的二氮杂二环的新化合物，包括：WO2009133442，WO2009091856，WO2010126820，WO2012086241，WO2013030733，WO2013030735，WO2013149121，WO2013149136，WO2013180197，WO20140191268，WO2014141132，WO2014135931，WO2015063653，WO2015110885，US20140296526。其中，MK-7655和OP-0595这两个新药已进入临床阶段。MK-7655已进入III期临床，OP-0595已进入I期临床。OP-0595体外活性极好，为罗氏制药所有。因此，二氮杂二环类抑制剂将会是β-内酰胺酶抑制剂开发的一个新的方向。
Figure GPA0000289292990000031
发明内容
式(I)化合物的A晶型，其特征在于其X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有特征衍射峰：16.053±0.2°，16.53±0.2°，22.782±0.2°，25.742±0.2°。
Figure GPA0000289292990000032
式(I)化合物的A晶型，其特征在于其X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有特征衍射峰：16.053±0.2°，16.53±0.2°，18.501±0.2°，21.302±0.2°，21.778±0.2°，22.782±0.2°，25.742±0.2°，27.833±0.2°。
在本发明的一些方案中，上述A晶型，其XRPD图谱如图1所示。
本发明的一些方案中，上述A晶型的XRPD图谱解析数据如表1所示：
表1
Figure GPA0000289292990000033
在本发明的一些方案中，上述A晶型，其差示扫描量热曲线在221.11±3℃处具有放热峰。
在本发明的一些方案中，上述A晶型，其DSC谱图如图2所示。
由DSC图谱可知，其在221.11℃附近有1个放热峰。
在本发明的一些方案中，上述A晶型，其热重分析曲线在194.61±3℃时失重达0.5689％。
TGA图谱显示加热至194.61℃时，重量减少了0.5689％，在200℃以后开始出现较大的重量损失。A晶型不含结晶水或结晶溶剂，热稳定性较好。
DVS谱图如图4所示，结果显示，在25℃/80％RH下A晶型引湿增重0.2910％，略有引湿性。
本发明还提供式(I)化合物A晶型的制备方法，包括：
(a)将(I)化合物用加入溶剂后加热到55～60℃至完全溶解；
(b)搅拌下缓慢冷却到0℃；
(c)搅拌10～16小时析晶；
(d)过滤、抽干；
其中，所述溶剂为纯水。
本发明还提供上述A晶型或上述制备方法得到的晶型在制备用于治疗细菌感染的β-内酰胺酶抑制剂中的应用。
技术效果
本发明的技术特点主要体现在二氮杂二环的基础上，引入了一个全新的氧胍基团的侧链。该基团相比较氨基，具有更多的氢键结合位点，因而有更好的水溶性等物化性质；另一方面，该基团的pKa＝8.83与氨基的pKa较为接近(如赖氨酸中末端侧链的氨基pKa＝8.95)，远小于传统的胍基(如精氨酸的pKa＝12.48)，因而化合物可以保持和OP-0595相同的化学稳定性。本发明中提供的化合物在体内外活性实验中测试数据也表明式(I)化合物相比OP-0595具有更好的活性优势。本发明中所描述的晶型具有易制备，稳定性好，不易转晶等技术优势，有利于后期药物的生产和应用。
定义和说明
除非另有说明，本文所用的下列术语和短语旨在含有下列含义。一个特定的短语或术语在没有特别定义的情况下不应该被认为是不确定的或不清楚的，而应该按照普通的含义去理解。当本文出现商品名时，旨在指代其对应的商品或其活性成分。
本发明的中间体化合物可以通过本领域技术人员所熟知的多种合成方法来制备，包括下面列举的具体实施方式、其与其他化学合成方法的结合所形成的实施方式以及本领域技术上人员所熟知的等同替换方式，优选的实施方式包括但不限于本发明的实施例。
本发明具体实施方式的化学反应是在合适的溶剂中完成的，所述的溶剂须适合于本发明的化学变化及其所需的试剂和物料。为了获得本发明的化合物，有时需要本领域技术人员在已有实施方式的基础上对合成步骤或者反应流程进行修改或选择。
下面会通过实施例具体描述本发明，这些实施例并不意味着对本发明的任何限制。
本发明所使用的所有溶剂是市售的，无需进一步纯化即可使用。
本发明采用下述缩略词：MW代表微波；r.t.代表室温；aq代表水溶液；DCM代表二氯甲烷；THF代表四氢呋喃；DMSO代表二甲基亚砜；NMP代表N-甲基吡咯烷酮；EtOAc代表乙酸乙酯；EtOH代表乙醇；MeOH代表甲醇；dioxane代表二氧六环；HOAc代表乙酸；Boc代表叔丁氧羰基，Cbz代表苄氧羰基，两者都是胺保护基团；Boc2O代表二-叔丁基二碳酸酯；DIPEA代表二异丙基乙胺；TEA或Et3N代表三乙胺；BnNH2代表苄胺；PMBNH2代表对甲氧基苄胺；KOAc代表醋酸钾；NaOAc代表醋酸钠；Cs2CO3代表碳酸铯；K2CO3代表碳酸钾；NaHCO3代表碳酸氢钠；Na2SO4代表硫酸钠；pyridine代表吡啶；NaOH代表氢氧化钠；TEA或Et3N代表三乙胺；NaH代表钠氢；LiHMDS代表双(三甲基硅基)胺基锂；i-PrMgBr代表异丙基溴化镁；t-BuOK代表叔丁醇钾；t-BuONa代表叔丁醇钠；Pd2(dba)3代表三(二亚苄基丙酮)二钯；Pd(PPh3)4代表三苯基膦钯；Pd(dppf)Cl2CH2Cl2代表[1，1′-双(二苯基磷)二茂铁]二氯化钯.二氯甲烷；Pd(OAc)2代表醋酸钯；Pd(PPh3)2Cl2代表二(三苯基膦)二氯化钯；Pd(PPh3)3Cl代表代表三(三苯基膦)氯化铑；Pd(OH)2代表氢氧化钯；Xantphos代表4，5-双(二苯基膦)-9，9-二甲基氧杂蒽；Xphos代表2-二环己基磷-2′，4′，6′-三异丙基联苯；BINAP代表(±)-2，2′-双-(二苯膦基)-1，1′-联萘；Xantphos代表4，5-双-(二苯基磷基)-9，9-二甲基氧杂蒽；Xphos-Pd-G1代表氯(2-二环己基膦基-2′，4′，6′-三异丙基-1，1′-联苯基)[2-(2′-氨基乙基苯基)]钯(II)；Xphos-PD-G2代表氯(2-二环己基膦基-2′，4′，6′-三异丙基-1，1′-联苯基)[2-(2′-氨基-1，1′-联苯)]钯(II)；Xphos-Pd-G3代表甲磺酸(2-二环己基膦基-2′，4′，6′-三异丙基-1，1′-联苯基)[2-(2′-氨基-1，1′-联苯)]钯(II)；I2代表碘单质；LiCl代表氯化锂；HCl代表盐酸；maleic acid代表马来酸。
化合物经手工或者
Figure GPA0000289292990000051
软件命名，市售化合物采用供应商目录名称。
本发明仪器及分析方法：
1.1粉末X-射线衍射(X-ray powder diffractometer，XRPD)
仪器型号：布鲁克D8 advance X-射线衍射仪
测试方法：大约10～20mg样品用于XRPD检测
详细的XRPD参数如下：
光管：Cu，kα，
Figure GPA0000289292990000052
光管电压：40kV，光管电流：40mA
发散狭缝：0.60mm
探测器狭缝：10.50mm
防散射狭缝：7.10mm
扫描范围：4-40deg
步径：0.02deg
步长：0.12秒
样品盘转速：15rpm
1.2差热分析(Differential Scanning Calorimeter，DSC)
仪器型号：TA Q2000差示扫描量热仪
测试方法：取样品(～1mg)置于DSC铝锅内进行测试，在50mL/min N2条件下，以10℃/min的升温速率，加热样品从30℃到300℃。
1.3热重分析(Thermal Gravimetric Analyzer，TGA)
仪器型号：TA Q5000热重分析仪
测试方法：取样品(2～5mg)置于TGA铂金锅内进行测试，在25mL/min N2条件下，以10℃/min的升温速率，加热样品从室温到210℃。
1.4动态蒸汽吸附分析(Dynamic Vapor Sorption，DVS)
仪器型号：SMS DVS Advantage动态蒸汽吸附仪
测试条件：取样品(10～15mg)置于DVS样品盘内进行测试。
详细的DVS参数如下：
温度：25℃
平衡：dm/dt＝0.01％/min(最短：10min，最长：180min)
干燥：0％RH下干燥120min
RH(％)测试梯级：10％
RH(％)测试梯级范围：0％-90％-0％
引湿性评价分类如下：
引湿性分类 引湿增重*
潮解 吸收足量水分形成液体
极具引湿性 ΔW％≥15％
有引湿性 15％＞ΔW％≥2％
略有引湿性 2％＞ΔW％≥0.2％
无或几乎无引湿性 ΔW％＜0.2％
*在25±1℃和80±2％RH下的引湿增重
附图说明
图1为式(I)化合物A晶型的Cu-Kα辐射的XRPD谱图。
图2为式(I)化合物A晶型的DSC谱图。
图3为式(I)化合物A晶型的TGA谱图。
图4为式(I)化合物A晶型的DVS谱图。
图5为式(I)化合物产对KPC型β-内酰胺酶的克雷伯肺炎杆菌实验结果谱图。
具体实施方式
为了更好的理解本发明的内容，下面结合具体实施例来做进一步的说明，但具体的实施方式并不是对本发明的内容所做的限制。
实施例1式(I)化合物的制备
Figure GPA0000289292990000071
步骤一：
将原料1-A(50克，26.62毫摩尔)，N-羟基邻苯二甲酰亚胺(8.69克，53.24毫摩尔)和三乙胺(6.73克，66.55毫摩尔)溶于100毫升N，N-二甲基甲酰胺中，加热到50℃，搅拌16小时。反应液冷却到室温，搅拌下倒入100毫升冰水中，抽滤，固体用10毫升冷水洗涤三次，干燥得化合物1-B。
步骤二：
将化合物1-B(6.0克，17.03毫摩尔)悬浮于400毫升二氯甲烷和150毫升甲醇中，向其中加入85％水合肼(1.71克，34.06毫摩尔，1.66毫升)。反应液在25℃下搅拌18小时，过滤，滤饼用50毫升乙酸乙酯洗涤，滤液浓缩至干，剩余物用40毫升石油醚/乙酸乙酸(3∶1)打浆，过滤，重复打浆两次，滤液合并浓缩得化合物1-C。
步骤三：
将化合物1-C(980毫克，10.64毫摩尔)溶于50毫升二氯甲烷中，冷却到-10℃，用注射器加入三乙胺(1.08克，10.64毫摩尔，1.47毫升)，然后滴入二碳酸二叔丁酯(2.32克，10.64毫摩尔)的30毫升二氯甲烷溶液。反应液缓慢升到室温(25℃)，搅拌20小时。浓缩，剩余物经硅胶柱纯化(乙酸乙酯/石油醚混合液，梯度30％～50％)得化合物1-D。
步骤四：
将化合物1-D(300毫克，1.56毫摩尔)，(2S，5R)-6-苄氧基-7-氧-1，6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-羧酸(431.23毫克，1.56毫摩尔)(合成方法参考专利WO2012172368A1)，EDCI(388.77毫克，2.03毫摩尔)，HOBt(274.02毫克，2.03毫摩尔)和二异丙基乙胺(201.62毫克，1.56毫摩尔，272.46微升)依次加入20毫升二氯甲烷中。反应液于室温(25℃)下搅拌20小时后加入30毫升二氯甲烷稀释，用15毫升水洗两次，15毫升盐水洗一次，有机相用无水硫酸钠干燥后过滤，滤液浓缩至干，粗品经硅胶柱纯化(乙酸乙酯/石油醚混合液，梯度30％～50％)得化合物1-E。
步骤五：
化合物1-E(760.00毫克，1.69毫摩尔)溶解在二氯甲烷(7.00毫升)中，20℃下加入三氟乙酸(3.08克，27.01毫摩尔，2.00毫升)并搅拌3小时，将反应混合物浓缩，用乙酸乙酯(50毫升)稀释并用饱和碳酸氢钠(50毫升)洗涤，再用饱和食盐水(50毫升)洗涤一次，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩得到化合物1-F。
步骤六：
化合物1-F(200.00毫克，570.83微摩尔)和微摩尔)和(E)-叔丁基(叔丁氧基羰基)氨基(亚甲基)氨基甲酸酯(177.16毫克，570.83微摩尔)溶解在乙腈(2毫升)中并在20℃搅拌16小时，反应完毕浓缩，将剩余物进行硅胶柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝0～2/1梯度洗脱)得到化合物1-G。
步骤七：
化合物1-G(300.00毫克，506.21微摩尔)溶解在异丙醇(3.00毫升)/水(3.00毫升)中，加入湿钯炭(50.00毫克，10％)，混合物在氢气氛围下于18-28℃搅拌2小时，过滤，得化合物1-H的异丙醇/水滤液，直接用于下一步反应。
步骤八：
在化合物1-H(250.00毫克，497.49微摩尔)的异丙醇(3.00毫升)/水(3.00毫升)中加入三氧化硫三甲胺配合物(69.24毫克，497.49微摩尔)和三乙胺(10.07毫克，99.50微摩尔，13.79微升)，将此混合物在18-28℃下搅拌16小时。反应完毕用乙酸乙酯/石油醚(2/1，6毫升，两次)洗涤，收集水相并加入四丁基硫酸氢胺(168.43毫克，496.07微摩尔)在室温下搅拌0.5小时，然后用乙酸乙酯(15毫升，两次)萃取，萃取液用饱和食盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得化合物1-I。
步骤九：
化合物1-I(200.00毫克，242.71微摩尔)溶解在无水二氯甲烷(2.00毫升)中，氮气氛围保护下冷却到0升)并加入三氟乙酸(1.54克，13.51毫摩尔，1.00毫升)搅拌2小时，再在25℃搅拌4小时，然后在空气中浓缩，剩余物用乙腈(2毫升)打浆三次得粗品用高效液相色谱分离得到式(I)化合物。
1H NMR(400MHz，D2O)4.15(s，1H)，4.10～4.08(m，2H)，4.03-3.99(m，3H)，3.26(d，J＝12Hz，1H)，3.09(d，J＝12Hz，1H)，2.13-1.99(m，2H)，1.94-1.74(m，2H)；LCMS(ESI)m/z：383.1(M+1)。
实施例2式(I)化合物A晶型的制备
将1.4千克式(I)化合物用7升纯水加热到55～60℃完全溶解后，搅拌下缓慢冷却到0℃，搅拌12小时析晶。过滤抽干得到式(I)化合物A晶型。
实施例3式(I)化合物A晶型的吸湿性研究
实验材料：式(I)化合物A晶型
实验方法：取样品(10～15mg)置于DVS样品盘内进行测试，采用动态蒸汽吸附分析(Dynamic Vapor Sorption，DVS)方法分析。
实验结果：引湿增重ΔW＝0.2910％
实验结论：式(I)化合物A晶型略有引湿性，XRPD显示晶型未改变。
实施例4式(I)化合物的多晶型研究
实验材料：式(I)化合物。
实验方法：
1.称取约35mg式(I)化合物3份，分别置于1.5mL硼硅玻璃瓶中，加入200μL溶剂(溶剂方案见表2)，超声混匀后置于恒温振荡仪上，40℃下避光搅拌2天，快速离心，所得固体进行XRPD检测(湿品)，然后置于30℃真空干燥箱中干燥约15小时，将得到的干燥样品进行XRPD检测(干品)。
表2式(I)化合物多晶型研究溶剂方案1
编号 溶剂 状态 晶型
1 甲醇 悬浊液 A晶型
2 乙醇 悬浊液 A晶型
3 乙腈 悬浊液 A晶型
4 丙酮 悬浊液 A晶型
5 乙酸乙酯 悬浊液 A晶型
6 四氢呋喃 悬浊液 A晶型
7 环己烷 悬浊液 A晶型
8 水 悬浊液 A晶型
9 甲醇-水(体积比1∶1) 悬浊液 A晶型
10 甲醇-水(体积比3∶1) 悬浊液 A晶型
11 乙醇-水(体积比1∶1) 悬浊液 A晶型
12 乙醇-水(体积比3∶1) 悬浊液 A晶型
13 异丙醇-水(体积比1∶1) 悬浊液 A晶型
2.称取约35mg式(I)化合物3份，分别置于1.5mL硼硅玻璃瓶中，加入600μL的溶剂(溶剂方案见表3)，超声混匀后置于恒温振荡仪上，40℃下避光搅拌2天，然后将样品置于通风橱中挥发干，所得样品进行XRPD检测(湿品)。继续将样品置于30℃真空干燥箱中干燥约15小时，得到的干燥样品进行XRPD检测(干品)。
表3式(I)化合物多晶型研究溶剂方案2
编号 溶剂 状态 晶型
1 丙酮-水(体积比1∶2) 溶解 A晶型
2 乙腈-水(体积比1∶1) 溶解 A晶型
实验结果：见表2和表3。
实验结论：悬浆和挥发后都没有观察到新的晶型，式(I)化合物A晶型稳定。
实施例5式(I)化合物A晶型的溶解度试验
实验材料：式(I)化合物A晶型
实验方法：称取约2.0mg样品到1.5mL的硼硅玻璃瓶中，分别用移液枪加入如下溶剂，适当超声溶解。该测试是在室温下进行，通过肉眼来判断溶解情况。
实验结果：见表5。
实验结论：式(I)化合物A晶型在各类有机溶剂中溶解度不高，在水和醇类溶剂有一定的溶解性。
表4式(I)化合物A晶型溶解度试验的溶剂方案
编号 溶剂 编号 溶剂 编号 溶剂
1 甲醇 10 醋酸异丙酯 19 甲醇-水(1∶1)
2 乙醇 11 叔丁基甲醚 20 甲醇-水(3∶1)
3 异丙醇 12 四氢呋喃 21 乙醇-水(1∶1)
4 正丁醇 13 2-甲基四氢呋喃 22 乙醇-水(3∶1)*
5 乙腈 14 甲苯 23 乙腈-水(1∶1)
6 丙酮 15 正庚烷 24 丙酮-水(1∶2)
7 丁酮 16 环己烷 25 异丙醇-水(1∶1)
8 甲基异丁基酮 17 1，4-二氧六环
9 乙酸乙酯 18 水
表5式(I)化合物A晶型溶解度试验结果
Figure GPA0000289292990000101
Figure GPA0000289292990000111
*式(I)化合物A晶型在乙醇-水(体积比3∶1)中的悬浊液放置约15小时后溶解变澄清溶液。
实验例6中国临床分离菌体外协同抑制浓度(SIC)测试方法
实验目的：
了解式(I)化合物对主要碳青霉烯酶活性的抑制作用。
实验方法：
肉汤微量稀释法测定式(I)化合物对临床分离产碳青霉烯酶菌株的最低抑菌浓度(MIC)。
1.药敏试验：按2016年版美国临床和实验室标准协会(CLSI)文件描述的抗微生物药药敏试验的方法进行，采用微量肉汤稀释法测定常用抗菌药对临床分离细菌的MIC。
2.菌株：产KPC-2型碳青霉烯酶和NDM-1金属酶菌株各8株，产OXA型碳青霉烯酶菌株6株。所有菌株均为临床分离的肺炎克雷伯菌。
3.浓度：抗菌药物浓度范围：0.06μg/mL-128μg/mL，共12个浓度；酶抑制剂浓度：固定为4μg/mL。4.质控菌株：药敏试验质控菌株包括大肠埃希菌ATCC 25922和ATCC 35218。
实验结果：
表6化合物对国内临床分离菌抑制试验结果
Figure GPA0000289292990000112
Figure GPA0000289292990000121
结论：
式(I)化合物和抗生素的组合无论对产KPC-2、NDM-1或OXA-181型碳青霉烯酶的临床分离克雷伯菌均具有强大的抑菌作用。尤其是在对NDM-1型碳青霉烯酶的细菌，式(I)化合物的抑制作用明显优于阿维巴坦。
实验例7小鼠肺部感染模型
实验目的：
本试验旨在考察式(I)化合物在小鼠肺部感染模型中的是否具有药效，并进一步评估其药效对比参照化合物OP-0595是否具有显著优势。
实验材料：
7周左右大小的雌性CD-1小鼠，体重26～28克左右；环磷酰胺感染前4天注射150毫克/千克，1天前再注射100毫克/千克；感染细菌为肺炎克雷伯细菌(ATCC BAA-1705，KPC-2)。式(I)化合物，参照化合物OP-0595均为实验室合成。
实验流程：
雌性CD-1小鼠通过滴鼻感染肺炎克雷伯菌，每只小鼠通过鼻腔滴入50μL菌液，剂量为每只小鼠3.14E+07CFU，在感染后2h，4h，6h和8h，各组小鼠通过腹腔注射分别给于对应的化合物或联用化合物治疗。
感染后10h，第1，2和3组的小鼠安乐死后，取肺置入盛有10ml无菌生理盐水的50ml离心管中，放在湿冰上转移至BSL-2实验室进行CFU计数。感染后20h，第4，5和6组的小鼠被安乐死，处置程序同前。
肺脏使用IKA T10匀浆机研磨(最高转速20S，重复一次)，匀浆液梯度稀释后点于胰蛋白胨大豆琼脂平板，置入37度培养箱进行细菌培养，24h后，取出平板，数出平板上各稀释梯度匀浆液长出的单菌落数，并由此计算每只小鼠肺部的荷菌量。
实验方案：
表7式(I)化合物和参照化合物OP-0595在小鼠大腿肌肉感染模型的药效评价方案
Figure GPA0000289292990000131
实验结果：
按照表7的实验方案，药效结果见附图5。从药效结果图可以看出，两个不同剂量下，式(I)化合物组在小鼠模型中的体内药效比参照化合物OP-0595组，荷菌量降低了0.5-1.5个log。式(I)化合物药效明显优于参照化合物OP-0595。
体外抑菌、体外抑酶实验、体内药效实验从不同的方面对实施例进行了评估，实施例中的式(I)化合物均表现出了相对于参照化合物OP-0595的明显优势。在目前急需临床新药来对抗日益严重的耐药菌感染的情况下，实施例中的化合物是解决这一问题的一类极具潜力的可开发药物。可以预测，相比较目前一致看好的参照化合物OP-0595，式(I)化合物可能会在未来的临床中显现出其更优的临床效果。

Claims (8)

1.式(I)化合物的A晶型，其特征在于其X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有特征衍射峰：16.053±0.2°，16.53±0.2°，18.501±0.2°，21.302±0.2°，21.778±0.2°，22.782±0.2°，25.742±0.2°，27.833±0.2°，
Figure FDA0003524982380000011
2.根据权利要求1所述的式(I)化合物的A晶型，其XRPD图谱如图1所示。
3.根据权利要求1～2任意一项所述的式(I)化合物的A晶型，其差示扫描量热曲线在221.11±3℃处具有放热峰。
4.根据权利要求3所述的式(I)化合物的A晶型，其DSC谱图如图2所示。
5.根据权利要求1～2任意一项所述的式(I)化合物的A晶型，其热重分析曲线在194.61±3℃时失重达0.5689％。
6.根据权利要求5所述的式(I)化合物的A晶型，其TGA谱图如图3所示。
7.根据权利要求1～6任意一项所述的式(I)化合物的A晶型的制备方法，包括：
(a)将(I)化合物加入溶剂后加热到55～60℃至完全溶解；
(b)搅拌下缓慢冷却到0℃；
(c)搅拌10～16小时析晶；
(d)过滤、抽干；
其中，所述溶剂为纯水。
8.根据权利要求1～6任意一项所述的式(I)化合物的A晶型或者权利要求7所述的制备方法得到的式(I)化合物的A晶型在制备用于治疗细菌感染的β-内酰胺酶抑制剂中的应用。
CN201880076738.2A 2017-12-01 2018-12-03 一种β-内酰胺酶抑制剂的晶型及其制备方法 Active CN111417633B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2017112513863 2017-12-01
CN201711251386 2017-12-01
PCT/CN2018/118864 WO2019105479A1 (zh) 2017-12-01 2018-12-03 一种β-内酰胺酶抑制剂的晶型及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111417633A CN111417633A (zh) 2020-07-14
CN111417633B true CN111417633B (zh) 2022-05-06

Family

ID=66665421

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201880076738.2A Active CN111417633B (zh) 2017-12-01 2018-12-03 一种β-内酰胺酶抑制剂的晶型及其制备方法

Country Status (7)

Country Link
US (1) US11180501B2 (zh)
EP (1) EP3719020B1 (zh)
JP (1) JP6974614B2 (zh)
CN (1) CN111417633B (zh)
CA (1) CA3084099C (zh)
ES (1) ES2928152T3 (zh)
WO (1) WO2019105479A1 (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113292499B (zh) * 2020-02-24 2024-05-28 齐鲁制药有限公司 一种β-内酰胺酶抑制剂的新制备方法及其中间体

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RS53052B (en) 2008-01-18 2014-04-30 Merck Sharp & Dohme Corp. INHIBITOR BETA-LACTAMASE
FR2930553B1 (fr) 2008-04-29 2010-05-21 Novexel Composes azabicycliques, leur preparation et leur utilisation comme medicaments, notamment inhibiteurs de beta-lactamases
US20120053350A1 (en) 2009-04-30 2012-03-01 Ian Mangion Preparation of alkyl esters of n-protected oxo-azacycloalkylcarboxylic acids
CN104892490B (zh) 2010-12-22 2017-07-21 明治制果药业株式会社 用于制备光学活性二氮杂环辛烷衍生物的中间体化合物的化合物
CA2780403C (en) 2011-06-17 2020-04-21 Forest Laboratories Holdings Ltd. Processes for preparing heterocyclic compounds including trans-7-oxo-6-(sulphooxy)-1,6-diazabicyclo[3,2,1]octane-2-carboxamide and salts thereof
PL2748165T3 (pl) 2011-08-27 2017-05-31 Wockhardt Limited Pochodne 1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-7-onu i ich zastosowanie w leczeniu zakażeń bakteryjnych
BR112013032974A2 (pt) 2011-08-30 2016-09-06 Wockhardt Ltd "derivados de 1,6-diazabiciclo [3,2,1]-octan-7-ona, seus usos, e composições farmacêuticas".
US8969567B2 (en) 2011-09-13 2015-03-03 Wockhardt Ltd. Nitrogen containing compounds and their use
US9505761B2 (en) * 2011-12-02 2016-11-29 Fedora Pharmaceuticals Inc. Bicyclic compounds and their use as antibacterial agents and beta-lactamase inhibitors
US8933232B2 (en) 2012-03-30 2015-01-13 Cubist Pharmaceuticals, Inc. 1,3,4-oxadiazole and 1,3,4-thiadiazole beta-lactamase inhibitors
EP2831069B1 (en) 2012-03-30 2017-07-12 Merck Sharp & Dohme Corp. Isoxazole beta-lactamase inhibitors
SI2857401T1 (sl) 2012-05-30 2020-01-31 Meiji Seika Pharma Co., Ltd. Novi inhibitor beta-laktamaze in metoda za proizvajanje le-tega
CA2881169C (en) 2012-08-25 2020-06-16 Wockhardt Limited 1,6-diazabicyclo [3,2,1]octan - 7 - one derivatives and their use in the treatment of bacterial infections
UA111925C2 (uk) * 2012-12-11 2016-06-24 Федора Фармасьютікалз Інк. БІЦИКЛІЧНІ СПОЛУКИ ТА ЇХ ВИКОРИСТАННЯ ЯК АНТИБАКТЕРІАЛЬНИХ АГЕНТІВ ТА ІНГІБІТОРІВ β-ЛАКТАМАЗИ
WO2014135931A1 (en) 2013-03-08 2014-09-12 Wockhardt Limited A process for preparation of (2s, 5r)-7-oxo-6-sulphooxy-2-[((3r)-piperidine-3-carbonyl)-hydrazino carbonyl]-1,6-diaza-bicyclo [3.2.1]- octane
WO2014141132A1 (en) 2013-03-14 2014-09-18 Naeja Pharmaceutical Inc. NEW HETEROCYCLIC COMPOUNDS AND THEIR USE AS ANTIBACTERIAL AGENTS AND β-LACTAMASE INHIBITORS
EP2808501A1 (de) 2013-05-27 2014-12-03 Siemens Aktiengesellschaft Verfahren zum Betreiben einer GuD-Kraftwerksanlage
RU2016115375A (ru) 2013-10-30 2017-12-01 Вокхардт Лимитед Фармацевтические композиции, содержащие антибактериальные агенты
US9771364B2 (en) 2014-01-21 2017-09-26 Wockhardt Limited Process for preparation of (2S,5R)-6-sulphooxy-7-oxo-2-[((3R)-piperidine-3-carbonyl)-hydrazinocarbonyl]-1,6-diaza-bicyclo[3.2.1] octane
CN109311881B (zh) * 2016-06-03 2021-07-13 齐鲁制药有限公司 新型β-内酰胺酶抑制剂

Also Published As

Publication number Publication date
US11180501B2 (en) 2021-11-23
CN111417633A (zh) 2020-07-14
CA3084099C (en) 2022-05-17
EP3719020A4 (en) 2021-08-04
ES2928152T3 (es) 2022-11-15
JP6974614B2 (ja) 2021-12-01
JP2021504416A (ja) 2021-02-15
CA3084099A1 (en) 2019-06-06
EP3719020A1 (en) 2020-10-07
WO2019105479A1 (zh) 2019-06-06
EP3719020B1 (en) 2022-09-21
US20200385385A1 (en) 2020-12-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP3353175B1 (en) Salts and solid forms of a monobactam antibiotic
EP3337485B1 (en) Crystalline forms of ibrutinib
CN108137574B (zh) 羟烷基噻二唑衍生物
CN108003205A (zh) 氨基糖苷类衍生物及其制备方法和应用
WO2016040764A1 (en) Carbonyl linked bicyclic heteroaryl n-benzimidazoles and analogs as antibiotic tolerance inhibitors
CN111417633B (zh) 一种β-内酰胺酶抑制剂的晶型及其制备方法
CN102224151A (zh) 新的抗微生物剂
WO2018045313A1 (en) Substituted urea depsipeptide analogs as activators of the clpp endopeptidase
CN101360712A (zh) 新颖的截短侧耳素衍生物和其用途
CN107739371B (zh) 一类四氢咔唑类小分子有机化合物及其在制备抗菌药物中的用途及其制备方法
CN106749213B (zh) 一种具有1,2,4-恶二唑结构的吲哚衍生物及制备方法和在制备抗菌药物中的应用
Khan et al. Synthesis, antibacterial, and antifungal evaluation of norfloxacin derivatives
CN106083994B (zh) 取代的噁唑烷酮水溶性衍生物及其应用
CN104530082A (zh) 头孢硫脒化合物
EP3717490B1 (en) Anti-bacterial heterocyclic compounds and their synthesis
WO2002057281A2 (en) Aminoglycosides as antibiotics
CN109665994B (zh) 青花椒碱衍生物及其作为抗菌药物的用途
WO2024037422A1 (en) Crystalline forms of a glucosylceramide synthase inhibitor and uses thereof
Mane et al. Month 2017 Design and Synthesis of Diverse Pyrrole-2-carboxamide Derivatives as a Potent Antibacterial Agents
ES2311391B1 (es) Forma cristalina de moxifloxacino base.
JP2020511457A (ja) ヒドロキシアルキルチアジアゾール誘導体のｎ−ホスホノキシメチルプロドラッグ
JP2020511457A5 (zh)
WO2012014109A1 (en) Heterocyclic sulfonamides as inhibitors of transfer rna synthetase for use as antibacterial agents

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 40022902

Country of ref document: HK

GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20240207

Address after: 250100 Xinlu Street 317, Jinan High-tech Zone, Shandong Province

Patentee after: Qilu Pharmaceutical Co.,Ltd.

Country or region after: China

Patentee after: QILU ANTIBIOTICS PHARMACEUTICAL Co.,Ltd.

Address before: 250100 Xinlu Street 317, Jinan High-tech Zone, Shandong Province

Patentee before: Qilu Pharmaceutical Co.,Ltd.

Country or region before: China