CN111387509A - 一种具有保护胃粘膜功能的保健食品及其制备方法 - Google Patents

一种具有保护胃粘膜功能的保健食品及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种具有保护胃粘膜功能的保健食品，按照重量份数包括：松花粉肽20‑30份、海参肽5‑9份、牡蛎肽6‑9份、大豆肽3‑6份、大米肽3‑6份、小麦肽3‑7份、阿胶肽5‑8份、豌豆肽3‑6份、黄芪1‑3份、岩藻多糖1‑3份、白及5‑8份、干姜5‑10份、旋覆花5‑8份。本发明还公开了上述保健食品的制备方法，包括花粉肽、海参肽与牡蛎肽的酶解法制备。通过各组分间的协同作用，对胃黏膜损伤具有很好的保护和修复作用，可应用于保护胃粘膜功能的保健食品，改善机体的健康状况。本发明所得组合物气味、滋味俱佳，且成本低廉，具有操作简单、质量稳定、食用安全的特点。

Description

一种具有保护胃粘膜功能的保健食品及其制备方法
技术领域
本发明属于保健食品领域，尤其涉及一种具有保护胃粘膜功能的保健食品及其制备方法。
背景技术
胃是人体重要的消化器官，担负着储存、消化食物和吸收部分营养物质的功能。胃部疾病，如消化性溃疡、急慢性胃炎、胃部肿瘤多是从胃粘膜病变开始的。长期情绪紧张、不良的生活和饮食习惯等因素会导致胃粘膜的正常结构受到破坏，使胃壁将直接暴露于强酸环境下，反复刺激损伤和修复会形成慢性胃炎，最终可能会导致胃癌的发生，因此保护胃粘膜对预防胃部疾病具有重要的意义。
目前，临床上广泛应用于抗胃粘膜损伤的药物有奥美拉唑、兰索拉唑、氢氧化镁、H2-受体阻滞剂等，疗效虽好，但会出现头晕、头痛、恶心、腹泻等不良反应。治疗胃粘膜损伤的药物还有雷贝拉唑，它是质子泵抑制剂中非常典型的一种，具有快速抑制胃酸分泌、迅速缓解胃痛等症状、个体差异较小和安全性较高等特点，但是有少数患者对其治疗的敏感性较低且疗效较差，治愈后易复发。另外，替普瑞酮为萜烯类的一种，也具有广谱抗溃疡作用，可促进胃粘膜、胃粘液中主要的再生防御因子、高分子糖蛋白、磷脂的合成与分泌，提高胃粘液中的重碳酸盐，但可引起肝功能障碍、黄疸、腹泻、腹痛、头痛等副作用。
有临床和实验研究证明，保健食品在医学理论的指导下，根据科学的组方原则，所形成的复方保健食品，在保护胃粘膜方面有显著成效，并且可降低药物治疗所带来的副作用，因此精选具有安全性高、效果明显的中药及其提取物做成保健食品具有重要意义。
发明内容
本发明针对上述现有技术存在的不足，提供一种具有保护胃粘膜功能的保健食品及其制备方法。
具体技术方案如下：
一种具有保护胃粘膜功能的保健食品，按重量份数包括：松花粉肽20-30份、海参肽5-9份、牡蛎肽6-9份、大豆肽3-6份、大米肽3-6份、小麦肽3-7份、阿胶肽5-8份、豌豆肽3-6份、黄芪1-3份、岩藻多糖1-3份、白及5-8份、干姜5-10份、旋覆花5-8份。
上述成分均为水分含量不超过10wt％的干制品。
经动物实验与人体试食实验证明，本发明的配方通过各组分间的协同作用，对胃黏膜损伤具有很好的保护和修复作用，可应用于保护胃粘膜功能的保健食品，改善机体的健康状况。此外，本发明配方安全性高，服用量小，可作为胃粘膜损伤等胃病人群的日常保健食品。
进一步，所述的保健食品按重量份数包括：松花粉肽28份、海参肽6份、牡蛎肽7份、大豆肽4份、大米肽3份、小麦肽3份、阿胶肽6份、豌豆肽4份、黄芪2份、岩藻多糖2份、白及6份、干姜5份、旋覆花7份。
进一步，所述的松花粉肽为从裸子植物松花粉中提取的分子量不超过5000Da的小分子多肽；所述的海参肽为从海参中提取的分子量不超过5000Da的小分子多肽；所述的牡蛎肽为从牡蛎中提取的分子量不超过5000Da的小分子多肽。
本发明还公开了上述保健食品的制备方法，所述的松花粉肽、海参肽与牡蛎肽均通过酶解法制备。
进一步，松花粉肽的制备包括如下步骤：
(1)将松花粉经球磨机粉碎破壁，投入酶解罐中，向其中加入水混合均匀，松花粉与水的质量比为1：(10-20)；
(2)调节pH为8-10，向其中加入以步骤(1)获得的反应体系计5000-8000U/ml的碱性蛋白酶，置于45-65℃的条件下水解2-3小时后灭酶；
(3)调节pH为6-7，向其中加入以步骤(2)获得的反应体系计5000-8000U/ml的木瓜蛋白酶，置于55-65℃的条件下水解2-3小时后灭酶，得松花粉酶解液；
(4)将步骤(3)获得的松花粉酶解液离心，收集清液后经截留分子量为5000Da的超滤膜过滤，得到松花粉肽溶液；
(5)将步骤(4)获得的松花粉肽溶液经孔径为0.2nm的纳滤膜纳滤除盐并浓缩得浓缩液，浓缩液经过冷冻干燥或者喷雾干燥得到松花粉肽。
其中，松花粉的破壁率优选在95％以上，破壁率通过染色法涂片法测定。
其中，使用的水优选为纯化水。
其中，步骤(2)与步骤(3)中所述的灭酶为高温灭酶，灭酶方法优选为：酶解结束5分钟内升温至85-100℃，保持5-20分钟，使酶失去活性。
进一步，海参肽的制备包括如下步骤：
(1)将去内脏海参破碎后加水匀浆，得匀浆液；
(2)匀浆液用氢氧化钠调节pH为8-9，向匀浆液中加入以其重量计1.5wt％-2.5wt％的复合蛋白酶，温度50-60℃，酶解3-5小时，灭酶，得海参酶解液；
(3)使用阴离子吸附树脂对海参酶解液进行脱色处理，树脂与海参酶解液体积比为1：(2-5)；
(4)使用以步骤(3)获得的料液计2wt％-5wt％的粉末活性炭进行进一步脱色脱腥处理，离心，取清液；
(5)将步骤(4)获得的清夜过截留分子量5000D的超滤膜，除去大分子蛋白，剩余液体浓缩后冷冻干燥，得到海参肽。
其中，步骤(1)中，海参优选为新鲜海参，海参与水的重量比优选为1:1。
其中，使用的水优选为纯化水。
其中，所述的灭酶为高温灭酶，灭酶方法优选为：酶解结束5分钟内升温至85-95℃，保持5-10分钟，使复合蛋白酶失去活性。
进一步，牡蛎肽的制备方法包括如下步骤：
(1)牡蛎肉加水后匀浆，得匀浆液；
(2)向步骤(1)获得的匀浆液中加入以其重量计1.0wt％的壳聚糖和1.0wt％的β-环糊精，35-45℃下脱腥20-30分钟，得脱腥匀浆液；
(3)脱腥匀浆液用氢氧化钠调节pH为8-9，向脱腥匀浆液中加入以其重量计1.5-2.5wt％的复合蛋白酶，温度50-60℃，酶解3-5小时，灭酶，得牡蛎酶解液；
(4)将牡蛎酶解液离心，收集上清液，将上清液过阴离子树脂和阳离子树脂的混合床脱盐。
(5)将步骤(4)获得的料液通过截留分子量5000D的超滤膜，除去大分子蛋白，剩余液体浓缩后冷冻干燥，得到牡蛎肽。
其中，步骤(1)中，牡蛎肉与水的重量比优选为1:1。
其中，步骤(4)中阴离子树脂与阳离子树脂的重量比例为1：(1.5-2)，通过流速为5-8BV/h。
其中，使用的水优选为纯化水。
其中，所述的灭酶为高温灭酶，灭酶方法优选为：酶解结束5分钟内升温至85-95℃，保持5-10分钟，使复合蛋白酶失去活性。
所得保健食品组合物可结合辅料加工成临床接受的各种剂型，可以为粉剂、片剂、颗粒剂或硬/软胶囊剂等，日服用量为2.5-3.6g。
其中，所述辅料为各种药学上常用的辅料和/或赋形剂，包括(但不限于)糖类(如乳糖)，淀粉(如玉米淀粉)，纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠)，明胶，滑石粉，固体润滑剂(如硬脂酸镁)，硫酸钙，植物油，多元醇(如甘露糖醇)，海藻酸，乳化剂，润湿剂，着色剂，调味剂，稳定剂，抗氧化剂，防腐剂，无热原水等渗盐溶液和磷酸盐缓冲液等。辅料可根据需要提高配方的稳定性、活性及生物有效性等，改善在口服的情况下的口感或气味。
更进一步，所述辅料为微晶纤维素、麦芽糊精、赤藓糖醇、异麦芽酮糖醇、低聚异麦芽糖、乳糖或淀粉中的一种或两种以上的混合。
药理分析如下：
松花粉甘，温，归肝、脾经。在《神农本草经》、《本草纲目》及《新修本草》等多部医籍中均记载松花粉具有益气除风、收敛止血、养颜益寿等功效。现代研究表明，松花粉具有调节胃肠功能的效果，有助于动物预防便秘、预防结肠癌、改善肠道菌群。此外，《广西本草选编》、广州部队《常用中草药手册》等书籍中有松花粉治疗胃脘痛及胃溃疡的记载。
海参记载于《本草从新》，味甘咸，性平，归心、肾经。具有补肾益精，养血润燥的功能，用于精血亏损，虚弱劳怯等。现代研究发现，海参多肽在12.5mg/mL的质量浓度条件下有广谱的抗菌活性，能够对大多数测定中的革兰氏阳性和阴性菌有抑制活性。
牡蛎肉记载于《本草拾遗》，是传统中药材，味甘咸，性平，能滋阴养血、养心安神，用于虚损劳疾、阴虚血亏等。现代医学研究表明，可以有效缓解临床病人表现出的营养不良和胃肠道功能障碍。
大豆肽等小分子多肽具有水溶性好、稳定性强、易于消化吸收、蛋白含量高、氨基酸组成均衡等优势，还具有低致敏性的的特点。
本发明的有益效果如下：
1、本发明提供的保健食品安全性高，服用量小，疗效确切，可作为胃粘膜损伤等胃病人群的日常保健食品。本发明保健食品的制备方法稳定，可操作性强，适宜工业化生产。
2、本发明中松花粉肽采用特有的两步酶解工艺，提高酶解效率，获得更小分子量的松花粉肽，更易于吸收，快速起效。
3、本发明中海参肽、牡蛎肽采用特有工艺进行脱色脱腥处理，在保留较多的有效活性成分的同时还具有较好的口感，易于被消费者接受，有利于其在市场上的推广。
具体实施方式
以下结合实例对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
本发明中的碱性蛋白酶购买自夏盛(北京)生物科技开发有限公司，活力为105U/g；木瓜蛋白酶购买自夏盛(北京)生物科技开发有限公司，活力为105U/g；复合蛋白酶(海产品水解酶：菠萝蛋白酶：胰蛋白酶的质量比＝2:1：1)购买自南宁东恒华道生物科技有限责任公司，活力为30万U/g。
实施例1
一种具有保护胃粘膜功能的保健食品，按重量份数包括：松花粉肽28份、海参肽6份、牡蛎肽7份、大豆肽4份、大米肽3份、小麦肽3份、阿胶肽6份、豌豆肽4份、黄芪2份、岩藻多糖2份、白及6份、干姜5份、旋覆花7份。
其制备方法包括如下步骤：
1、松花粉肽的制备：
(1)将松花粉经球磨机粉碎破壁，破壁率在95％以上，投入酶解罐中，向其中加入纯化水混合均匀，松花粉与纯化水的质量比为1：10；
(2)调节pH为9.5，向其中加入以步骤(1)获得的反应体系计7500U/ml的碱性蛋白酶，置于60℃的条件下水解2小时后，5分钟内升温至100℃，保持5分钟，使酶失去活性；
(3)调节pH为7，向其中加入以步骤(2)获得的反应体系计5000U/ml的木瓜蛋白酶，置于55℃的条件下水解3小时后，5分钟内升温至100℃，保持5分钟，得松花粉酶解液；
(4)将步骤(3)获得的松花粉酶解液离心，收集清液后经截留分子量为5000Da的超滤膜过滤，得到松花粉肽溶液；
(5)将步骤(4)获得的松花粉肽溶液经孔径为0.2nm的纳滤膜纳滤除盐并浓缩得浓缩液，浓缩液经过冷冻干燥或者喷雾干燥得到松花粉肽。
2、海参肽的制备包括如下步骤：
(1)取鲜海参洗净后去内脏后，切碎，加入与海参等重量的纯化水放入均质机中匀浆，得匀浆液；
(2)匀浆液用氢氧化钠调节pH为9，向匀浆液中加入以其重量计1.5wt％的复合蛋白酶，温度50℃，酶解5小时后，5分钟内升温至95℃，保持5分钟，使复合蛋白酶失去活性，得海参酶解液；
(3)使用阴离子吸附树脂对海参酶解液进行脱色处理，树脂与海参酶解液体积比为1：3；
(4)使用以步骤(3)获得的料液计2wt％的粉末活性炭进行进一步脱色脱腥处理，离心，取清液；
(5)将步骤(4)获得的清夜过截留分子量5000D的超滤膜，除去大分子蛋白，剩余液体浓缩后冷冻干燥，得到海参肽。
3、牡蛎肽的制备方法包括如下步骤：
(1)取鲜牡蛎洗净后去壳取肉，加入与牡蛎肉等重量的纯化水放入均质机中匀浆，得匀浆液；
(2)向步骤(1)获得的匀浆液中加入以其重量计1.0wt％的壳聚糖和1.0wt％的β-环糊精，35℃下脱腥30分钟，得脱腥匀浆液；
(3)脱腥匀浆液用氢氧化钠调节pH为9，向脱腥匀浆液中加入以其重量计1.5wt％的复合蛋白酶，温度50℃，酶解5小时后，5分钟内升温至95℃，保持5分钟，使复合蛋白酶失去活性，得牡蛎酶解液；
(4)将牡蛎酶解液离心收集上清液，将上清液过阳离子树脂和阴离子树脂的混合床脱盐；阴离子树脂与阳离子树脂的重量比例为1：1.5，通过流速为8BV/h；
(5)将步骤(4)获得的料液通过截留分子量5000D的超滤膜，除去大分子蛋白，剩余液体浓缩后冷冻干燥，得到牡蛎肽。
4、颗粒剂制备：
取上述制备方法获得的松花粉肽28kg、海参肽6kg、牡蛎肽7kg，以及大豆肽4kg、大米肽3kg、小麦肽3kg、阿胶肽6kg、豌豆肽4kg、黄芪2kg、岩藻多糖2kg、白及6kg、干姜5kg、旋覆花7kg，以上各原料分别过40目筛，取筛下物，加入符合药物制剂需要的辅料，混合、制粒、干燥、分装，制备成临床可用的颗粒剂。
实施例2
一种具有保护胃粘膜功能的保健食品，按重量份数包括：松花粉肽26份、海参肽6份、牡蛎肽6份、大豆肽4份、大米肽3份、小麦肽3份、阿胶肽6份、豌豆肽4份、黄芪2份、岩藻多糖2份、白及5份、干姜8份、旋覆花6份。
松花粉肽、海参肽、牡蛎肽的制备方法同实施例1。
颗粒剂制备：
取上述制备方法获得的松花粉肽26kg、海参肽6kg、牡蛎肽6kg，以及大豆肽4kg、大米肽3kg、小麦肽3kg、阿胶肽6kg、豌豆肽4kg、黄芪2kg、岩藻多糖2kg、白及5kg、干姜8kg、旋覆花6kg，以上各原料分别过40目筛，取筛下物，加入符合药物制剂需要的辅料，混合、制粒、干燥、分装，制备成临床可用的颗粒剂。
实施例3
一种具有保护胃粘膜功能的保健食品，按重量份数包括：松花粉肽25份、海参肽6份、牡蛎肽5份、大豆肽3份、大米肽3份、小麦肽3份、阿胶肽5份、豌豆肽6份、黄芪2份、岩藻多糖2份、白及6份、干姜5份、旋覆花7份。
松花粉肽、海参肽、牡蛎肽的制备方法同实施例1。
颗粒剂制备：
取实施例1制备方法获得的松花粉肽25kg、海参肽6kg、牡蛎肽5kg，以及大豆肽3kg、大米肽3kg、小麦肽3kg、阿胶肽5kg、豌豆肽6kg、黄芪2kg、岩藻多糖2kg、白及6kg、干姜5kg、旋覆花7kg，以上各原料分别过40目筛，取筛下物，加入符合药物制剂需要的辅料，混合、制粒、干燥、分装，制备成临床可用的颗粒剂。
实施例4
一种具有保护胃粘膜功能的保健食品，配方同实施例1。
其制备方法包括如下步骤：
1、松花粉肽的制备：
(1)将松花粉经球磨机粉碎破壁，破壁率在95％以上，投入酶解罐中，向其中加入纯化水混合均匀，松花粉与纯化水的质量比为1：20；
(2)调节pH为8，向其中加入以步骤(1)获得的反应体系计5000U/ml的碱性蛋白酶，置于45℃的条件下水解3小时后，5分钟内升温至85℃，保持20分钟，使酶失去活性；
(3)调节pH为6，向其中加入以步骤(2)获得的反应体系计7000U/ml的木瓜蛋白酶，置于62℃的条件下水解2小时后，5分钟内升温至85℃，保持20分钟，得松花粉酶解液；
(4)将步骤(3)获得的松花粉酶解液离心，收集清液后经截留分子量为5000Da的超滤膜过滤，得到松花粉肽溶液；
(5)将步骤(4)获得的松花粉肽溶液经孔径为0.2nm的纳滤膜纳滤除盐并浓缩得浓缩液，浓缩液经过冷冻干燥或者喷雾干燥得到松花粉肽。
2、海参肽的制备包括如下步骤：
(1)取鲜海参洗净后去内脏后，切碎，加入与海参等重量的纯化水放入均质机中匀浆，得匀浆液；
(2)匀浆液用氢氧化钠调节pH为8，向匀浆液中加入以其重量计2.5wt％的复合蛋白酶，温度60℃，酶解3.5小时后，5分钟内升温至85℃，保持10分钟，使复合蛋白酶失去活性，得海参酶解液；
(3)使用阴离子吸附树脂对海参酶解液进行脱色处理，树脂与海参酶解液体积比为1：5；
(4)使用以步骤(3)获得的料液计4wt％的粉末活性炭进行进一步脱色脱腥处理，离心，取清液；
(5)将步骤(4)获得的清夜过截留分子量5000D的超滤膜，除去大分子蛋白，剩余液体浓缩后冷冻干燥，得到海参肽。
3、牡蛎肽的制备方法包括如下步骤：
(1)取鲜牡蛎洗净后去壳取肉，加入与牡蛎肉等重量的纯化水放入均质机中匀浆，得匀浆液；
(2)向步骤(1)获得的匀浆液中加入以其重量计1.0wt％的壳聚糖和1.0wt％的β-环糊精，45℃下脱腥20分钟，得脱腥匀浆液；
(3)脱腥匀浆液用氢氧化钠调节pH为8，向脱腥匀浆液中加入以其重量计2.5wt％的复合蛋白酶，温度60℃，酶解3小时后，5分钟内升温至85℃，保持10分钟，使复合蛋白酶失去活性，得牡蛎酶解液；
(4)将牡蛎酶解液离心收集上清液，将上清液过阳离子树脂和阴离子树脂的混合床脱盐；阴离子树脂与阳离子树脂的重量比例为1：2，通过流速为5BV/h；
(5)将步骤(4)获得的料液通过截留分子量5000D的超滤膜，除去大分子蛋白，剩余液体浓缩后冷冻干燥，得到牡蛎肽。
4、颗粒剂制备：
取上述制备方法获得的松花粉肽28kg、海参肽6kg、牡蛎肽7kg，以及大豆肽4kg、大米肽3kg、小麦肽3kg、阿胶肽6kg、豌豆肽4kg、黄芪2kg、岩藻多糖2kg、白及6kg、干姜5kg、旋覆花7kg，以上各原料分别过40目筛，取筛下物，加入符合药物制剂需要的辅料，混合、制粒、干燥、分装，制备成临床可用的颗粒剂。
以下通过实验进一步说明本发明的有益效果。
实验1动物实验
将实施例1提供的药物组合物样品为研究对象，参照SFDA制定的“对胃粘膜损伤有辅助保护功能评价方法”，开展本发明对急性酒精性胃粘膜损伤的保护作用研究。
1试验材料与主要仪器
1.1试验动物
SPF级SD大鼠，雄性，体重180g～220g。
1.2主要仪器与试剂
动物天平，游标卡尺，解剖器械等；水合氯醛、甲醛、0.9％氯化钠注射液、氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒、一氧化氮(NO)试剂盒。
2试验方法
2.1样品制备
样品1：实施例1制备的保健食品颗粒剂；
样品2：实施例1制备的松花粉肽；
样品3：将实施例1的配方去除松花粉肽的保健食品颗粒剂，其余技术方案与实施例1相同(与实施例1的区别仅在于不包含松花粉肽)；
样品4：将实施例1的配方去除海参肽和牡蛎肽的保健食品颗粒剂，其余技术方案与实施例1相同(与实施例1的区别仅在于不包含海参肽和牡蛎肽)；
样品5：海参肽6份和牡蛎肽7份的混合物，海参肽与牡蛎肽均按照实施例1方法制备；所述的份为重量份数。
2.2动物分组
70只SD大鼠按体重随机分为7组：正常组、模型组、样品1-5组，每组10只。
2.3给药与造模
正常组和模型组灌胃(ig)给予0.9％生理盐水，各给药组分别给予样品1-5，给药剂量为3.0g/kg﹒d，药物均用生理盐水配制，连续给药30天，每日1次，给药体积10ml/kg。期间每天观察大鼠状态并作相应记录。造模前一天早上灌胃给药后，禁食不禁水24h。次日，除正常对照组外，各组大鼠均灌胃给予无水乙醇1ml进行造模，1h后用10％的水合氯醛(0.35mL/100g)麻醉动物，然后打开腹腔，使胃完全暴露出来，分别结扎贲门和幽门，向胃内注入1％甲醛溶液8ml。取出胃，浸泡于1％甲醛溶液中，20min后取出，沿胃大弯剖开胃，用生理盐水轻轻冲洗胃壁，冲掉内容物，展开观察胃粘膜损伤情况。
2.4肉眼观察
肉眼观察胃粘膜病变情况，用游标卡尺测量出血点或出血带的长度和宽度。损伤严重程度按表1进行评分，观察指标包括：各试验组胃粘膜损伤发生率(％)、损伤积分指数和损伤抑制率。损伤发生率(％)＝试验组出现出血或溃疡的大鼠数量/该组大鼠数量×100％；损伤积分指数＝组损伤评分总和/组动物数量；损伤抑制率(％)＝(模型组损伤积分-给药组损伤积分)/模型组损伤积分×100％。
表1急性酒精损伤肉眼观查评分标准
Figure BDA0002423006440000131
2.5组织病理学检查
将10％甲醛固定的胃粘膜组织进行病理学检查：常规石蜡包埋，苏木精-伊红(HE)染色，做病理切片。在HE染色的连续切片上，用显微镜观察胃粘膜损伤情况并给出评分，评分方法：以充血、出血、粘膜细胞变性坏死在整个粘膜上皮层的累及程度分为5级。充血权重为1，出血权重为2，上皮细胞变性坏死权重为3，评分标准及病变总积分公式见表2。
表2急性胃粘膜损伤镜下评分标准
Figure BDA0002423006440000132
2.6生化指标测定
按照相应的测试试剂盒提供的检测步骤测定胃组织均浆中的超氧化物岐化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量、一氧化氮(NO)含量。
2.7数据分析
用SPSS软件对实验数据进行统计学分析，数据以均数±标准差
Figure BDA0002423006440000133
表示。组间比较采用t检验，p＜0.05表示有显著性差异，p＜0.01表示有极显著性差异。
3结果与分析
3.1肉眼观察病变
观察对比各组大鼠胃粘膜形态、色泽及出血损伤情况。正常对照组动物胃粘膜形态及色泽正常，粘膜光滑，未见异常。模型对照组动物胃粘膜可见明显充血水肿，有条索状出血、糜烂，花斑样改变。样品3组、样品5组动物胃粘膜有明显充血水肿，条索状出血，有点片状糜烂，胃粘膜出血及糜烂程度稍轻于模型组。样品2组、样品4组有一定的减轻动物胃粘膜损伤的作用，动物胃粘膜可见少量充血水肿，花斑样改变，有散在出血、糜烂。样品1组显著抑制大鼠乙醇致胃粘膜损伤(P＜0.05)，动物胃形态及色泽较好，胃粘膜有散在的、较小的出血点和糜烂，出血及糜烂程度最轻，显示出明显的胃粘膜保护作用，见表3。
表3各组大鼠胃粘膜病变(
Figure BDA0002423006440000141
n＝10)
Figure BDA0002423006440000142
注：*与模型组比较，P＜0.05
3.2病理学观察情况
样品1-5组对乙醇致胃粘膜损伤模型大鼠的胃粘膜具有保护作用，尤其是样品1组对胃粘膜保护作用最好，腺体细胞较密集、排列较整齐，细胞数目缺失也较少，胃粘膜损伤较小，出血、充血也较少，因此其病理学评分也较低，见表4。
表4各组大鼠病理学评分结果
Figure BDA0002423006440000151
3.3胃粘膜生化指标改变的影响
测定不同处理组大鼠胃组织的SOD活性、NO含量和MDA含量，结果见表5。由表5可知，与空白对照组相比，乙醇能导致大鼠胃组织的SOD活力及NO含量明显降低(P<0.01)，而MDA含量显著增加(P<0.01)；与模型对照组比较，样品1组、样品4组能够显著提高胃组织的SOD、NO水平，降低MDA水平(P<0.05或P<0.01)；样品2组、样品3组能升高SOD、NO水平，降低MDA水平；样品5组能略微改变三种生化指标水平，单无显著性差异。
表5各组大鼠胃粘膜组织生化指标变化(
Figure BDA0002423006440000152
n＝10)
Figure BDA0002423006440000153
注：##与空白组比较，P＜0.01；*与模型组比较，P＜0.05；**与模型组比较，P＜0.01
结果表明，样品1组肉眼病变、损伤积分指数较模型组明显降低，生化指标测定表明样品1组能显著升高乙醇引起的胃组织NO含量和SOD，以及阻遏乙醇引起的胃粘膜MDA水平升高。由此证实本发明对急性酒精性胃粘膜损伤大鼠具有明显保护作用。
实验2人体试食实验
选取2018年6月至2019年7月威海市立医院门诊以及住院患者，并为经胃镜筛选确诊为胃粘膜损伤的自愿受试者。现选取其中的428例患者进行食用治疗，其中男性305人，女性123人，平均年龄42.3(25～65)岁，现将428例胃病患者根据病情严重程度分成3组，浅表性胃炎组286人，慢性萎缩性胃炎组117人，胃溃疡组25人，每一组再随机平均分成3小组。每一组分别服用实施1-3中的保健食品制剂，服用方式为口服，每次1.2g，一日3次，经过一个月的疗程后，对三组的治疗结果进行了统计，统计结果见表6。
表6实施例1-3保健食品制剂的效果统计
Figure BDA0002423006440000161
从统计结果可知，实施例1-3制得的保健食品制剂对三种胃粘膜损伤性胃部疾病均有很好的治疗作用，总有效率为86.7％。其中，实施例1制得的保健食品制剂对三种胃部疾病的有效率最高，分别达到92.7％、84.6％和77.8％，总有效率为89.6％。实施例1-3制得的保健食品制剂对浅表性胃炎的有效率高于慢性萎缩性胃炎和胃溃疡，总有效率分别为90.2％、82.1％和68.0％。总之，本发明所得保健食品制剂对胃粘膜损伤有很好的保护作用。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种具有保护胃粘膜功能的保健食品，其特征在于，按重量份数包括：松花粉肽20-30份、海参肽5-9份、牡蛎肽6-9份、大豆肽3-6份、大米肽3-6份、小麦肽3-7份、阿胶肽5-8份、豌豆肽3-6份、黄芪1-3份、岩藻多糖1-3份、白及5-8份、干姜5-10份、旋覆花5-8份。
2.根据权利要求1所述的保健食品，其特征在于，按重量份数包括：松花粉肽28份、海参肽6份、牡蛎肽7份、大豆肽4份、大米肽3份、小麦肽3份、阿胶肽6份、豌豆肽4份、黄芪2份、岩藻多糖2份、白及6份、干姜5份、旋覆花7份。
3.根据权利要求1所述的保健食品，其特征在于，所述的松花粉肽为从裸子植物松花粉中提取的分子量不超过5000Da的小分子多肽；所述的海参肽为从海参中提取的分子量不超过5000Da的小分子多肽；所述的牡蛎肽为从牡蛎中提取的分子量不超过5000Da的小分子多肽。
4.一种如权利要求1所述的保健食品的制备方法，其特征在于，所述的松花粉肽、海参肽与牡蛎肽均通过酶解法制备。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，松花粉肽的制备包括如下步骤：
(1)将松花粉经球磨机粉碎破壁，投入酶解罐中，向其中加入水混合均匀，松花粉与水的质量比为1：(10-20)；
(2)调节pH为8-10，向其中加入以步骤(1)获得的反应体系计5000-8000U/ml的碱性蛋白酶，置于45-65℃的条件下水解2-3小时后灭酶；
(3)调节pH为6-7，向其中加入以步骤(2)获得的反应体系计5000-8000U/ml的木瓜蛋白酶，置于55-65℃的条件下水解2-3小时后灭酶，得松花粉酶解液；
(4)将步骤(3)获得的松花粉酶解液离心，收集清液后经截留分子量为5000Da的超滤膜过滤，得到松花粉肽溶液；
(5)将步骤(4)获得的松花粉肽溶液经孔径为0.2nm的纳滤膜纳滤除盐并浓缩得浓缩液，浓缩液经过冷冻干燥或者喷雾干燥得到松花粉肽。
6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，海参肽的制备包括如下步骤：
(1)将海参破碎后加水匀浆，得匀浆液；
(2)匀浆液用氢氧化钠调节pH为8-9，向匀浆液中加入以其重量计1.5wt％-2.5wt％的复合蛋白酶，温度50-60℃，酶解3-5小时，灭酶，得海参酶解液；
(3)使用阴离子吸附树脂对海参酶解液进行脱色处理，树脂与海参酶解液体积比为1：(2-5)；
(4)使用以步骤(3)获得的料液计2wt％-5wt％的粉末活性炭进行进一步脱色脱腥处理，离心，取清液；
(5)将步骤(4)获得的清夜过截留分子量5000D的超滤膜，除去大分子蛋白，剩余液体浓缩后冷冻干燥，得到海参肽。
7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，牡蛎肽的制备方法包括如下步骤：
(1)牡蛎肉加水后匀浆，得匀浆液；
(2)向步骤(1)获得的匀浆液中加入以其重量计1.0wt％的壳聚糖和1.0wt％的β-环糊精，35-45℃下脱腥20-30分钟，得脱腥匀浆液；
(3)脱腥匀浆液用氢氧化钠调节pH为8-9，向脱腥匀浆液中加入以其重量计1.5-2.5wt％的复合蛋白酶，温度50-60℃，酶解3-5小时，灭酶，得牡蛎酶解液；
(4)将牡蛎酶解液离心收集上清液，将上清液过阴离子树脂和阳离子树脂的混合床脱盐；
(5)将步骤(4)获得的料液通过截留分子量5000D的超滤膜，除去大分子蛋白，剩余液体浓缩后冷冻干燥，得到牡蛎肽。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，牡蛎肽的制备方法的步骤(4)中，阴离子树脂与阳离子树脂的重量比例为1：(1.5-2)，通过流速为5-8BV/h。
9.一种如权利要求1-3任一项所述的保健食品在保护胃黏膜领域的应用。
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