CN111387366A - 一种蛋鸡抗热应激发酵饲料及其制备方法与应用 - Google Patents

一种蛋鸡抗热应激发酵饲料及其制备方法与应用 Download PDF

Info

Publication number
CN111387366A
CN111387366A CN202010404692.1A CN202010404692A CN111387366A CN 111387366 A CN111387366 A CN 111387366A CN 202010404692 A CN202010404692 A CN 202010404692A CN 111387366 A CN111387366 A CN 111387366A
Authority
CN
China
Prior art keywords
laying hens
fermented feed
feed
preparation
preparing
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202010404692.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111387366B (zh
Inventor
卢垚
刘世杰
陈达
邓雪娟
任婉丽
王刚
杨继帅
张孟阳
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Boyide Beijing Biotechnology Co ltd
Original Assignee
Boyide Beijing Biotechnology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Boyide Beijing Biotechnology Co ltd filed Critical Boyide Beijing Biotechnology Co ltd
Priority to CN202010404692.1A priority Critical patent/CN111387366B/zh
Publication of CN111387366A publication Critical patent/CN111387366A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111387366B publication Critical patent/CN111387366B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/70—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for birds
    • A23K50/75—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for birds for poultry
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
    • A01K67/02—Breeding vertebrates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/12—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes by fermentation of natural products, e.g. of vegetable material, animal waste material or biomass
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/14—Pretreatment of feeding-stuffs with enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/30—Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/30—Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms
    • A23K10/37—Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms from waste material
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/20—Inorganic substances, e.g. oligoelements
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/20—Inorganic substances, e.g. oligoelements
    • A23K20/26—Compounds containing phosphorus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/16—Yeasts; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2405—Glucanases
    • C12N9/2408—Glucanases acting on alpha -1,4-glucosidic bonds
    • C12N9/2411—Amylases
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2405—Glucanases
    • C12N9/2434—Glucanases acting on beta-1,4-glucosidic bonds
    • C12N9/2437—Cellulases (3.2.1.4; 3.2.1.74; 3.2.1.91; 3.2.1.150)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2477—Hemicellulases not provided in a preceding group
    • C12N9/248—Xylanases
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01004—Cellulase (3.2.1.4), i.e. endo-1,4-beta-glucanase
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P60/00—Technologies relating to agriculture, livestock or agroalimentary industries
    • Y02P60/80—Food processing, e.g. use of renewable energies or variable speed drives in handling, conveying or stacking
    • Y02P60/87—Re-use of by-products of food processing for fodder production

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Fodder In General (AREA)

Abstract

本发明公开了一种蛋鸡抗热应激发酵饲料及其制备方法与应用。本发明公开的蛋鸡抗热应激发酵饲料的制备方法包括：向由玉米、豆粕、麦麸、石粉和磷酸二氢钙组成的发酵原料中添加复合菌剂和复合酶制剂获得发酵体系，将发酵体系进行发酵，得到蛋鸡抗热应激发酵饲料；复合菌剂的活性成分为地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母和屎肠球菌；复合酶制剂的活性成分为中性蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶和淀粉酶。

Description

一种蛋鸡抗热应激发酵饲料及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及生物饲料领域中，一种蛋鸡抗热应激发酵饲料及其制备方法与应用。
背景技术
近年来，生物饲料发展迅猛，其在降低饲料成本，新原料开发利用和替代抗生素方面取得了一定进展，根据T/CSWSL 001-2018《生物饲料产品分类》，生物饲料是指使用《饲料原料目录(2013)》和《饲料添加剂品种目录(2013)》等国家相关法规允许使用的饲料原料和添加剂，通过发酵工程、酶工程、蛋白质工程和基因工程等生物工程技术开发的饲料产品总称，包括发酵饲料、酶解饲料、菌酶协同发酵饲料和生物饲料添加剂等。
我国是世界蛋鸡养殖大国，近年来商品代蛋鸡占世界存栏量的40％～45％，鸡蛋年产量近2000万吨，我国蛋鸡养殖从小规模大群体逐渐向规模化方向发展已经成为不争的事实，大型企业多采用封闭鸡舍叠层高密度笼养，自动化程度高，投资大，养殖水平高。然而在夏季，尤其是在重庆、湖北等地夏季高温可达近40℃，高温可持续近1个多月，高密度养殖鸡舍内最高温度可达33℃。蛋鸡没有汗腺，不能通过排汗消除体热。因此，持续的高温可造成蛋鸡严重的热应激，这导致蛋鸡采食量下降，营养物质摄入不足导致生产性能下降，破蛋率增多。此外，蛋品质也受到严重影响，蛋壳厚度和蛋壳强度降低，哈氏单位降低，鸡蛋保存时间缩短。这无疑给企业带来巨大经济损失，寻找一种能有效缓解热应激的绿色、经济的饲料方案迫在眉睫。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是如何通过改良蛋鸡饲料来缓解热应激导致的蛋鸡生产性能下降，并进一步提高蛋鸡采食量和蛋品质。
为解决上述技术问题，本发明首先提供了一种蛋鸡用发酵饲料的制备方法，所述方法包括：向由玉米、豆粕、麦麸、石粉和磷酸二氢钙组成的发酵原料中添加复合菌剂和复合酶制剂获得发酵体系，所述发酵原料由玉米、豆粕、麦麸、石粉和磷酸二氢钙组成，将所述发酵体系进行发酵，所得发酵产物即为蛋鸡用发酵饲料；
所述复合菌剂的活性成分为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、产朊假丝酵母(Candida utilis)和屎肠球菌(Enterococcus faecium)；
所述复合酶制剂的活性成分为中性蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶和淀粉酶。
上述方法中，所述发酵原料中各物质的重量份数可为：玉米48-52份、豆粕22-28份、麦麸10-14份、石粉8-12份、磷酸二氢钙2-4份。具体的，所述发酵原料中各物质的重量份数可为：玉米50份、豆粕25份、麦麸12份、石粉10份、磷酸二氢钙3份。
上述方法中，所述复合酶制剂中各酶均可为天津博菲德科技有限公司产品。
上述方法中，所述地衣芽孢杆菌可为在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏号为CGMCC NO.18911的菌株。
所述产朊假丝酵母可为在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏号为CGMCC NO.18917的菌株。
所述屎肠球菌可为在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏号为CGMCC NO.18914的菌株。
上述方法中，所述复合菌剂可由所述地衣芽孢杆菌、所述产朊假丝酵母、所述屎肠球菌与载体组成。所述载体可以是稻壳粉、石粉、次粉或淀粉的一种或多种。
具体的，所述复合菌剂可按照包括如下步骤的方法获得：培养所述地衣芽孢杆菌得到地衣芽孢杆菌悬液，培养所述产朊假丝酵母得到产朊假丝酵母悬液，培养所述屎肠球菌得到屎肠球菌悬液，混合所述地衣芽孢杆菌悬液、所述产朊假丝酵母悬液与所述屎肠球菌悬液得到复合菌体混合物；将所述复合菌体混合物与所述载体混合，然后低温干燥得到所述复合菌剂。
上述方法中，所述复合菌剂中地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母和屎肠球菌的活菌数之比可为(1-2)：(1-3)：(2-5)。进一步，所述复合菌剂中地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母和屎肠球菌的活菌数之比可为1：1：3。
所述复合菌剂中每种菌的活菌数不低于5×109cfu/g。在本发明的一个实施例中，所述复合菌剂中地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母和屎肠球菌的活菌数分别为7×109cfu/g、7×109cfu/g和2.1×1010cfu/g。
所述复合菌剂可先扩繁后加至所述发酵原料中。所述扩繁可在2％(质量百分比)红糖水中进行。所述扩繁可在30℃下进行。所述扩繁的时间可为12小时。
上述方法中，所述复合菌剂的接种量可满足：所述复合菌剂中每种菌的接种量不低于5×107cfu/g所述发酵原料。
所述复合酶制剂的添加量可满足：所述复合酶制剂中每种酶的添加量不低于20U/g所述发酵原料。
上述方法中，所述发酵可在30℃下进行。所述发酵的时间可为3-5天，如4天。
所述发酵体系的中水分含量可为32～35％。
上述方法中，所述复合酶制剂中中性蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶和淀粉酶的酶活之可比为(1-3)：(1-3)：1：(5-8)。进一步，所述复合酶制剂中中性蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶和淀粉酶的酶活之比可为2：3：1：5。
所述复合酶制剂中每种酶的活性不低于1000U/g。在本发明的一个实施例中，所述复合酶制剂中各酶的酶活含量分别为中性蛋白酶2326U/g、纤维素酶3488U/g、木聚糖酶1163U/g和淀粉酶5814U/g。
本发明还提供了由所述蛋鸡用发酵饲料的制备方法得到的蛋鸡用发酵饲料。
本发明还提供了一种微生态制剂，所述微生态制剂由所述复合菌剂和所述复合酶制剂组成。
所述复合菌剂和复合酶制剂的配比可为：总有效活菌数1×107cfu：总酶活(5-10)U。在本发明的一个实施例中，所述微生态制剂中所述复合菌剂和所述复合酶制剂的比例为总有效活菌数1×107cfu：总酶活8U。
所述微生态制剂还可以包括载体，所述载体可以是稻壳粉、石粉、次粉或淀粉的一种或多种。
本发明还提供了具有如下M1)-M3)中任一功能的成套产品，所述成套产品由所述微生态制剂和所述发酵原料组成：
M1)制备蛋鸡用发酵饲料；
M2)制备改善蛋鸡的生产性能产品；
M3)制备改善蛋鸡鸡蛋品质产品。
所述蛋鸡用发酵饲料的下述任一应用，也属于本发明的保护范围：
A1)改善蛋鸡的生产性能；
A2)制备改善蛋鸡的生产性能产品；
A3)改善蛋鸡鸡蛋品质；
A4)制备改善蛋鸡鸡蛋品质产品。
所述微生态制剂或所述成套产品的下述任一应用，也属于本发明的保护范围：
A1)改善蛋鸡的生产性能；
A2)制备改善蛋鸡的生产性能产品；
A3)改善蛋鸡鸡蛋品质；
A4)制备改善蛋鸡鸡蛋品质产品；
A5)制备蛋鸡用发酵饲料。
本发明还提供了一种蛋鸡的饲养方法，所述方法包括：将在基础饲料中添加所述蛋鸡用发酵饲料得到的饲料作为饲喂饲料饲喂蛋鸡，实现蛋鸡的饲养。
上述方法中，所述蛋鸡用发酵饲料的添加量为所述基础饲料的5％。
本发明中，所述改善蛋鸡的生产性能具体可为改善热应激下(如28～31℃下)蛋鸡的生产性能。所述改善蛋鸡的生产性能可体现在采食量、蛋重和/或产蛋率的增加和/或破蛋率和/或料蛋比的下降上。
所述改善鸡蛋品质具体可为改善热应激下(如28～31℃下)蛋鸡所产鸡蛋的品质。所述改善鸡蛋品质可体现在蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋白高度和/或哈氏单位的增加上。
在本发明的一个实施例中，所述蛋鸡为海兰褐壳蛋鸡。
试验证明，在基础饲料中添加本发明的蛋鸡用发酵饲料后，蛋鸡的日采食量、所产蛋重、产蛋率均显著提高，且破蛋率和料蛋比显著降低；蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋白高度和哈氏单位也均显著增加。可见，热应激条件下，在蛋鸡基础饲料中添加本发明的蛋鸡用发酵饲料不仅可以显著提高蛋鸡生产性能，缓解热应激带来的生产性能损失，还可以显著提高蛋品质，缓解热应激对蛋品质的影响，说明，本发明的蛋鸡用发酵饲料及其制备方法具有广泛的应用前景。
生物材料保藏说明
生物材料的分类命名：地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)
生物材料的菌株编号：BFC190102
生物材料的保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
生物材料的保藏单位简称：CGMCC
生物材料的保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101
生物材料的保藏日期：2019年11月7日
生物材料的保藏中心登记入册编号：CGMCC No.18911
生物材料保藏说明
生物材料的分类命名：产朊假丝酵母(Candida utilis)
生物材料的菌株编号：BFC190301
生物材料的保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
生物材料的保藏单位简称：CGMCC
生物材料的保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101
生物材料的保藏日期：2019年11月7日
生物材料的保藏中心登记入册编号：CGMCC No.18917
生物材料保藏说明
生物材料的分类命名：屎肠球菌(Enterococcus faecium)
生物材料的菌株编号：BFC190203
生物材料的保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
生物材料的保藏单位简称：CGMCC
生物材料的保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101
生物材料的保藏日期：2019年11月7日
生物材料的保藏中心登记入册编号：CGMCC No.18914
生物材料保藏说明
生物材料的分类命名：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)
生物材料的菌株编号：BFC1601
生物材料的保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
生物材料的保藏单位简称：CGMCC
生物材料的保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101
生物材料的保藏日期：2016年10月21日
生物材料的保藏中心登记入册编号：CGMCC No.13131
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂、仪器等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。
实施例1、蛋鸡用发酵饲料的制备及其在蛋鸡饲养中的应用
一、复合菌剂的制备
1)地衣芽孢杆菌悬液的制备
地衣芽孢杆菌菌株：地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)BFC190102保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.18911。
将活化好的地衣芽孢杆菌接种于装有100ml的发酵培养基的500ml三角瓶中，33℃、静置培养24小时，收集发酵液，得到地衣芽孢杆菌种子液。
将地衣芽孢杆菌种子液按照6％(体积比)的接种量接入装有200L的发酵培养基的500L发酵罐中，在33℃，搅拌转速为100rpm的条件下培养24小时，收集发酵液；将发酵液进行离心收集湿菌体，用生理盐水或pH6.8的磷酸缓冲液重悬菌体，得到地衣芽孢杆菌悬液。
每升发酵培养基按照如下方法配制：10g葡萄糖，10g蛋白胨，1.5g KH2PO4，0.80gMnSO4，1.00g MgSO4，1.0g NaCl，用蒸馏水定容至l000 mL，pH值6.5；121℃条件下灭菌20分钟。
2)产朊假丝酵母悬液的制备
产朊假丝酵母菌株：产朊假丝酵母(Candida utilis)BFC190301保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.18917。
将活化好的产朊假丝酵母接种于装有100ml的发酵培养基的500ml三角瓶中，33℃、静置培养24小时，收集发酵液，得到产朊假丝酵母种子液。
将产朊假丝酵母种子液按照6％(体积比)的接种量接入装有200L的发酵培养基的500L发酵罐中，在33℃，搅拌转速为100rpm的条件下培养24小时，收集发酵液；将发酵液进行离心收集湿菌体，用生理盐水或pH6.8的磷酸缓冲液重悬菌体，得到产朊假丝酵母悬液。
每升发酵培养基按照如下方法配制：10g葡萄糖，10g蛋白胨，1.5g KH2PO4，0.80gMnSO4，1.00g MgSO4，1.0g NaCl，用蒸馏水定容至l000mL，pH值6.5；121℃条件下灭菌20分钟。
3)屎肠球菌悬液的制备
屎肠球菌菌株：屎肠球菌(Enterococcus faecium)BFC190203保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.18914。
将活化好的屎肠球菌接种于装有100ml的发酵培养基的500ml三角瓶中，33℃、静置培养24小时，收集发酵液，得到屎肠球菌种子液。
将屎肠球菌种子液按照6％(体积比)的接种量接入装有200L的发酵培养基的500L发酵罐中，在33℃，搅拌转速为100rpm的条件下培养24小时，收集发酵液；将发酵液进行离心收集湿菌体，用生理盐水或pH6.8的磷酸缓冲液重悬菌体，得到屎肠球菌悬液。
每升发酵培养基按照如下方法配制：10g葡萄糖，10g蛋白胨，1.5g KH2PO4，0.80gMnSO4，1.00g MgSO4，1.0g NaCl，用蒸馏水定容至l000 mL，pH值6.5；121℃条件下灭菌20分钟。
4)复合菌剂的制备
将步骤1)-3)得到的地衣芽孢杆菌悬液、产朊假丝酵母悬液与屎肠球菌悬液混合，按照有效活菌数1:1:3混合得到复合菌体混合物，将复合菌体混合物与稻壳粉混合低温干燥制得复合菌剂，其中所得复合菌剂中地衣芽孢杆菌和产朊假丝酵母的含量均为7×109cfu/g，屎肠球菌含量为2.1×1010cfu/g。低温干燥条件为65℃烘干至水分含量在15％以下。
二、复合酶制剂的制备
将中性蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶和淀粉酶按2：3：1：5比例混合，以U计，得到复合酶制剂，复合酶制剂中各酶的酶活含量分别为中性蛋白酶2326U/g、纤维素酶3488U/g、木聚糖酶1163U/g和淀粉酶5814U/g。
中性蛋白酶：天津博菲德科技有限公司，酶活10000U/g。中性蛋白酶的酶活定义：在40℃和pH为7.2的条件下，1min水解酪蛋白产生相当于1μg酚基氨基酸(由酪氨酸等同物)的酶量，为一个酶活力单位U。
纤维素酶：天津博菲德科技有限公司，酶活20000U/g。纤维素酶的酶活定义：在37℃、pH为5.5的条件下，每分钟从浓度为4mg/ml的羧甲基纤维素钠溶液中释放1μmol还原糖所需的酶量，为一个酶活性单位U。
木聚糖酶：天津博菲德科技有限公司，酶活100000U/g。木聚糖酶的酶活定义：在37℃、pH为5.5的条件下，每分钟从浓度为5mg/ml的木聚糖溶液中降解释放1μmol还原糖所需要的酶量，为一个酶活力单位U。
淀粉酶：天津博菲德科技有限公司，酶活10000U/g。淀粉酶的酶活定义：1g固体酶粉(或1mL液体酶)，于60℃，pH＝6.0条件，1h液化1g可溶性淀粉所需要的酶量，即为1个酶活力单位。
三、微生态制剂的制备
将步骤一的复合菌剂和步骤二的复合酶制剂按照总有效活菌数1×107cfu：总酶活8U混合，得到微生态制剂。
四、蛋鸡用发酵饲料的制备
(1)称取步骤一的复合菌剂0.72kg，加36kg的2％(质量百分比)红糖水在30℃恒温条件下扩繁12小时，得到发酵菌液；称取步骤二的复合酶制剂1.58kg加入到发酵菌液中混合3分钟，得到混合液。
(2)将玉米、麸皮、豆粕分别粉碎，过20目粉碎筛，然后按照50kg的玉米、25kg的豆粕、12kg的麦麸、10kg的石粉、3kg的磷酸二氢钙的配比混合后加入混合机中混合均匀，得到发酵原料；
(3)将步骤(1)的混合液喷至步骤(2)的发酵原料上，边喷涂边翻搅，混合10分钟，并调节水分含量至32～35％得到发酵物料；
(4)将步骤(3)得到的发酵物料装入带有单向呼吸阀的包装袋热封，放置于恒温30℃的发酵房内发酵4天，得到蛋鸡用发酵饲料。
检测蛋鸡用发酵饲料的营养成分、活菌数、代谢产物含量，并将发酵原料作为对照，结果见表1。相比发酵前，发酵后的蛋鸡用发酵饲料酸溶蛋白提高180.9％，pH明显降低至4.87；发酵后产生大量乳酸，总酸含量也明显升高；加入地衣芽孢杆菌和产朊假丝酵母和屎肠球菌发酵后，活菌数均不低于107。
其中，各指标的检测方法如下：
粗蛋白：按照GB/T 6432-2018进行。
酸溶蛋白：按照GB/T 22492-2008进行。
pH：按照GB 5009.237-2016进行。
乳酸：按照GB 2023-2003进行。
总酸：按照GB/T 12456-2008进行。
地衣芽孢杆菌：按照GB/T 26428-2010进行。
产朊假丝酵母：按照NY/T1969-2010进行。
表1、蛋鸡用发酵饲料发酵前后对比
Figure BDA0002490852820000081
五、其他发酵饲料的制备
1、发酵饲料甲
复合菌剂的制备：按照步骤一的方法，将地衣芽孢杆菌替换为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BFC1601(保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.13131)，其他步骤均不变，得到复合菌剂1。
复合酶制剂的制备：同步骤二。
发酵饲料甲的制备：按照步骤四的方法，将“步骤一的复合菌剂”替换为上述“复合菌剂1”，其他步骤均不变，得到发酵饲料，记为发酵饲料甲。
2、发酵饲料乙
复合菌剂的制备：同步骤一。
复合酶制剂的制备：按照步骤二的方法，将中性蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶和淀粉酶按2：3：1：3的酶活比混合，其他步骤均不变，得到复合酶制剂1。
发酵饲料乙的制备：按照步骤四的方法，将“步骤二的复合酶制剂”替换为上述“复合酶制剂1”，其他步骤均不变，得到发酵饲料，记为发酵饲料乙。
3、发酵饲料丙
复合菌剂的制备：同步骤一。
发酵饲料丙的制备：步骤四的方法中不添加“步骤二的复合酶制剂”，其他步骤均不变，得到发酵饲料，记为发酵饲料丙。
六、蛋鸡用发酵饲料在蛋鸡饲养中的应用
1、蛋鸡的饲养
选用夏季鸡舍内温度长期在28～31℃时，处于热应激下38周龄的海兰褐壳蛋鸡1000只，随机分作5组，即试验1组、试验2组、试验3组、试验4组和对照组，每组5个重复，每个重复40只鸡。试验期共30天，试验期间采用笼养方式，每笼4只鸡，每日分三次饲喂，自由采食，自由饮水，每日光照16.5小时。对照组饲喂基础饲料；试验1组饲喂在基础饲料中添加步骤四所得蛋鸡用发酵饲料得到的混合料，蛋鸡用发酵饲料的添加量为基础饲料重量的5％；试验2组饲喂在基础饲料中添加步骤五所得发酵饲料甲得到的混合料，发酵饲料甲的添加量为基础饲料重量的5％；试验3组饲喂在基础饲料中添加步骤五所得发酵饲料乙得到的混合料，发酵饲料乙的添加量为基础饲料重量的5％；试验4组饲喂在基础饲料中添加步骤五所得发酵饲料丙得到的混合料，发酵饲料丙的添加量为基础饲料重量的5％。其中，基础饲料中各原料的名称和质量百分比含量分别为：玉米62.5％，豆粕23.5％，石粉8.5％，豆油0.5％，预混料5％。每千克预混料中含维生素A 330000U，维生素B1 120mg，核黄素(维生素B2)500mg，D-泛酸钙1200mg，维生素B6 300mg，维生素D3 82500U，维生素E 2000U，维生素K180mg，生物素14mg，叶酸55mg，烟酸(尼克酸)2300mg，胆碱45g，铜0.8g，铁6g，锰9g，锌6g，碘90mg，硒21mg。
2、测定指标：
(1)生产性能
日均采食量：每天记录每组每个重复蛋鸡采食量，并计算每只鸡的日采食量；
产蛋枚数和破损蛋枚数：每天记录每组每个重复产蛋枚数和破损蛋枚数；
蛋重：每天记录每组每个重复总蛋重，并计算平均蛋重；
产蛋率：产蛋枚数/存栏数×100％；
破蛋率：破损蛋枚数/总产蛋枚数×100％。
料蛋比：日均采食量/(平均蛋重×产蛋率)。
(2)蛋品质采用蛋品质测定仪测量。
蛋壳厚度：试验结束时，每组每个重复收集10枚鸡蛋测定蛋壳厚度。
蛋壳强度：试验结束时，每组每个重复收集10枚鸡蛋测定蛋壳强度。
蛋白高度：试验结束时，每组每个重复收集10枚鸡蛋测定蛋白高度。
蛋黄颜色：试验结束时，每组每个重复收集10枚鸡蛋测定蛋黄颜色。
哈氏单位：100×log(蛋白高度-1.7×平均蛋重0.37+7.57)。
3、试验结果
表2、蛋鸡用发酵饲料对的蛋鸡生产性能的影响
Figure BDA0002490852820000091
Figure BDA0002490852820000101
注：同列数据肩标小写字母表示差异显著(P<0.05)，字母相同或无字母表示差异不显著(P＞0.05)。
由表2可知，相比于对照组，试验1组日均采食量、平均蛋重、产蛋率均显著提高(P<0.05)；破蛋率和料蛋比显著降低(P<0.05)；试验1组平均蛋重、产蛋率均显著高于试验2-3组，破蛋率和料蛋比相比试验2-3组也有下降趋势。可见，热应激条件下，蛋鸡基础饲料中添加蛋鸡用发酵饲料可显著提高蛋鸡生产性能，缓解热应激带来的生产性能损失。
表3、蛋鸡用发酵饲料对蛋品质的影响
Figure BDA0002490852820000102
注：同行数据肩标小写字母表示差异显著(P<0.05)，字母相同或无字母表示差异不显著(P＞0.05)。
由表3可知，试验1组蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋白高度和哈氏单位均显著高于对照组(P<0.05)，而蛋黄颜色两组无显著差异；试验1组蛋壳厚度和哈氏单位显著高于试验2-4组，蛋壳强度和蛋白高度显著高于试验2组和试验4组，与试验3组差异不显著，但有升高趋势。可见，热应激条件下，蛋鸡基础饲料中添加本发明的蛋鸡用发酵饲料可显著提高蛋品质，缓解热应激对蛋品质的影响。

Claims (10)

1.蛋鸡用发酵饲料的制备方法，包括：向由玉米、豆粕、麦麸、石粉和磷酸二氢钙组成的发酵原料中添加复合菌剂和复合酶制剂获得发酵体系，将所述发酵体系进行发酵，所得发酵产物即为蛋鸡用发酵饲料；
所述复合菌剂的活性成分为地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母和屎肠球菌；
所述复合酶制剂的活性成分为中性蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶和淀粉酶。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述地衣芽孢杆菌为在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏号为CGMCC NO.18911的菌株；
和/或，所述产朊假丝酵母为在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏号为CGMCC NO.18917的菌株；
和/或，所述屎肠球菌为在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏号为CGMCC NO.18914的菌株。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述复合菌剂中地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母和屎肠球菌的活菌数之比为(1-2)：(1-3)：(2-5)。
4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：所述复合酶制剂中中性蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶和淀粉酶的酶活之比为(1-3)：(1-3)：1：(5-8)。
5.由权利要求1-4中任一所述方法得到的蛋鸡用发酵饲料。
6.微生态制剂，由权利要求1-4中任一所述复合菌剂和所述复合酶制剂组成。
7.具有如下M1)-M3)中任一功能的成套产品，由权利要求6所述微生态制剂和所述发酵原料组成：
M1)制备蛋鸡用发酵饲料；
M2)制备改善蛋鸡的生产性能产品；
M3)制备改善蛋鸡鸡蛋品质产品。
8.权利要求5所述的蛋鸡用发酵饲料的下述任一应用：
A1)改善蛋鸡的生产性能；
A2)制备改善蛋鸡的生产性能产品；
A3)改善蛋鸡鸡蛋品质；
A4)制备改善蛋鸡鸡蛋品质产品。
9.权利要求6所述微生态制剂或权利要求7所述成套产品的下述任一应用：
A1)改善蛋鸡的生产性能；
A2)制备改善蛋鸡的生产性能产品；
A3)改善蛋鸡鸡蛋品质；
A4)制备改善蛋鸡鸡蛋品质产品；
A5)制备蛋鸡用发酵饲料。
10.一种蛋鸡的饲养方法，包括：将在基础饲料中添加权利要求5所述的蛋鸡用发酵饲料得到的饲料作为饲喂饲料饲喂蛋鸡，实验蛋鸡的饲养。
CN202010404692.1A 2020-05-12 2020-05-12 一种蛋鸡抗热应激发酵饲料及其制备方法与应用 Active CN111387366B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010404692.1A CN111387366B (zh) 2020-05-12 2020-05-12 一种蛋鸡抗热应激发酵饲料及其制备方法与应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010404692.1A CN111387366B (zh) 2020-05-12 2020-05-12 一种蛋鸡抗热应激发酵饲料及其制备方法与应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111387366A true CN111387366A (zh) 2020-07-10
CN111387366B CN111387366B (zh) 2022-11-15

Family

ID=71412587

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010404692.1A Active CN111387366B (zh) 2020-05-12 2020-05-12 一种蛋鸡抗热应激发酵饲料及其制备方法与应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111387366B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117562190A (zh) * 2024-01-19 2024-02-20 山东菁华农牧发展有限公司 一种改善蛋鸡产蛋后期蛋品质量和产蛋性能的饲料添加剂

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100663066B1 (ko) * 2005-07-26 2007-01-02 주식회사 농협사료 난각질 개선을 위한 브로멜라인이 함유된 산란계사료첨가용 조성물
CN103892134A (zh) * 2014-04-15 2014-07-02 湖南农业大学 一种蛋鸡饲料复合酶制剂及其生产方法和应用
CN104304819A (zh) * 2014-11-13 2015-01-28 安徽科技学院 一种蛋鸡用抗热应激发酵饲料及其制备方法
CN106260547A (zh) * 2016-08-05 2017-01-04 湖北凌卓生物工程有限公司 一种发酵生物饲料及其制备方法
CN108541807A (zh) * 2018-04-03 2018-09-18 南京宝辉生物饲料有限公司 一种能提高蛋壳品质的蛋鸡专用发酵饲料及其制备方法
CN109370960A (zh) * 2018-12-24 2019-02-22 中国农业科学院饲料研究所 一种蛋鸡用复合微生物发酵剂及其应用
CN110214871A (zh) * 2019-04-29 2019-09-10 山东苏柯汉生物工程股份有限公司 一种蛋鸡饲养用微生态制剂及其制备方法

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100663066B1 (ko) * 2005-07-26 2007-01-02 주식회사 농협사료 난각질 개선을 위한 브로멜라인이 함유된 산란계사료첨가용 조성물
CN103892134A (zh) * 2014-04-15 2014-07-02 湖南农业大学 一种蛋鸡饲料复合酶制剂及其生产方法和应用
CN104304819A (zh) * 2014-11-13 2015-01-28 安徽科技学院 一种蛋鸡用抗热应激发酵饲料及其制备方法
CN106260547A (zh) * 2016-08-05 2017-01-04 湖北凌卓生物工程有限公司 一种发酵生物饲料及其制备方法
CN108541807A (zh) * 2018-04-03 2018-09-18 南京宝辉生物饲料有限公司 一种能提高蛋壳品质的蛋鸡专用发酵饲料及其制备方法
CN109370960A (zh) * 2018-12-24 2019-02-22 中国农业科学院饲料研究所 一种蛋鸡用复合微生物发酵剂及其应用
CN110214871A (zh) * 2019-04-29 2019-09-10 山东苏柯汉生物工程股份有限公司 一种蛋鸡饲养用微生态制剂及其制备方法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117562190A (zh) * 2024-01-19 2024-02-20 山东菁华农牧发展有限公司 一种改善蛋鸡产蛋后期蛋品质量和产蛋性能的饲料添加剂

Also Published As

Publication number Publication date
CN111387366B (zh) 2022-11-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101940267B (zh) 一种能够提高猪肉肉质的微生物发酵饲料的制作方法
CN107022493B (zh) 一种高产饲用复合酶的米曲霉菌株及其应用
CN111436526A (zh) 改善育肥猪生长性能菌酶协同发酵米糠粕制备方法及应用
CN110724651B (zh) 凝结芽孢杆菌l-h7及其应用
CN103468604B (zh) 一种枯草芽孢杆菌及其应用
CN110591943B (zh) 一株产复合酶枯草芽孢杆菌,组合物及其应用
CN103740601B (zh) 一种高产饲用复合酶的黑曲霉及其应用
CN111593036B (zh) 以酸性蛋白酶为主的酶制剂的制备及其菌株和应用
CN113980817B (zh) 一种分枝横梗霉及其用途
CN106520642B (zh) 一种解淀粉芽孢杆菌及其应用
CN107535671A (zh) 提高瘤胃蛋白利用率的微生物发酵黄酒糟饲料及制备方法
CN111387366B (zh) 一种蛋鸡抗热应激发酵饲料及其制备方法与应用
CN110679785A (zh) 一种鱼用啤酒糟-杂粕型生物发酵饲料及其制备方法和应用
CN113367237A (zh) 一种反刍动物专用菌酶复合饲料添加剂的制备方法
CN116254194B (zh) 复合微生物发酵南瓜的生产方法及其应用
CN115316496B (zh) 一种利用废弃羽毛制备高蛋白益生动物饲料的方法
CN114410486B (zh) 一株米曲霉菌株及其在饲用蛋白开发方面的应用
CN114806927B (zh) 一种发酵剂及利用其制备青稞酒糟发酵饲料的方法
CN115956625A (zh) 一种棕榈粕发酵饲料的生产方法及应用
CN111607581B (zh) 富含β-甘露聚糖酶的复合酶的制备及其菌株和应用
CN112931685A (zh) 饲用多功能复合型生物饲料、制备方法和应用
CN113598270A (zh) 一种菊花叶微生物发酵饲料的制备方法
CN116286548B (zh) 一株降解纤维的微杆菌属新菌种及其应用
CN114395490B (zh) 一株粗糙脉孢菌及其在饲用蛋白开发的应用
CN113207999B (zh) 发酵竹粉及其产品在猪生产中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant