CN111358784B - 己糖激酶抑制剂在制备预防和/或治疗阿尔茨海默病的药物中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了己糖激酶抑制剂在制备防治阿尔茨海默病的药物中的用途。本发明提出了己糖激酶抑制剂特别是氯尼达明和3‑溴代丙酮酸能够改善阿尔茨海默症模型小鼠的认知水平，清除Aβ和减少Aβ聚集，具有明显的抗阿尔茨海默症进展的作用，为己糖激酶抑制剂特别是氯尼达明和3‑溴代丙酮酸用于制备预防和/或治疗阿尔茨海默病的药物提供了依据。

Description

己糖激酶抑制剂在制备预防和/或治疗阿尔茨海默病的药物 中的用途

技术领域

本发明属于药物领域，具体涉及己糖激酶抑制剂在制备预防和/或治疗阿尔茨海默病的药物中的用途。

背景技术

阿尔茨海默病(Alzheimer disease，AD)是一种进行性发展的神经退行性疾病，主要发生于老年人，是一种与年龄相关的、以进行性的记忆和认知功能障碍为主要临床特征的中枢神经系统退行性疾病，临床主要症状包括记忆障碍、失语、失认、执行功能障碍等。阿尔茨海默病病变部位集中在海马和大脑皮层，大脑半球出现皮质弥漫性萎缩，重量变轻，脑回变窄，脑沟增宽。往往在早期AD患者脑中就已经出现病变并伴随临床症状，病变区域随年龄增长而恶化，导致大脑功能受损，身体机能无法改善。1906年德国神经病理学家AloisAlzheimer首次对这种疾病进行了报道，描述了在患者脑中发现的此类疾病的病理特征，其一为神经细胞内高度磷酸化的微管相关蛋白(Microtubule-associated protein，Tau)构成的神经纤维缠结(neurofibrillary tangles，NFTs)，其二为细胞外由β-淀粉样蛋白(Aβ)聚集和沉积形成的淀粉样斑(amyloid plaques)。随后，神经纤维缠结和淀粉样斑成为诊断阿尔茨海默病的两个重要的病理学特征。

阿尔茨海默病多发生在65岁以上的人群中，据统计在65岁以上的人群中发病几率约10％，85岁以上的人群中有约50％的人患有此病。阿尔茨海默病患者占到痴呆症患者总数的60％～80％。临床研究表明AD可分为多见的、散发型的AD(sporadic AD，SAD)及少数(约占15％～20％)有家族遗传史的家族型AD(familial AD，FAD)。常见的散发类型AD主要影响65岁以上的老年人，并且发病率随年龄的增加而增高。因此，AD发病机理的研究及药物开发对于人类的健康来说越来越重要。

对于阿尔茨海默病的发病机制已有假说中，除了β-淀粉样蛋白的聚集和沉淀、Tau的过度磷酸化导致的神经纤维的缠结，还有神经血管的功能障碍、细胞周期异常以及线粒体功能障碍等。其中，Aβ在神经元胞外堆积形成淀粉样斑，干扰突触信息的传递是导致AD的重要因素，淀粉样斑的数量与痴呆的严重程度之间存在相关性。Aβ的沉积不仅与神经元的退行性病变有关，而且可以引发一系列病理变化，例如血脑屏障的破坏等，同时也是AD病人脑组织中老年斑周边神经元变形和死亡的主要原因。同时可溶性的Aβ低聚物可能通过抑制海马的长时程增强效应和干扰突触可塑性而发挥作用，Aβ低聚物与记忆的紊乱相关。由此可见，研发一种通过减少Aβ聚集而改善AD临床症状的药物十分迫切。

己糖激酶(hexokinase，HK)是糖酵解的第一个限速酶，它能催化葡萄糖磷酸化生成6-磷酸葡萄糖。哺乳动物体内已知有4种不同的亚型HK1、HK2、HK3、HK4。己糖激酶抑制剂可抑制己糖激酶的活性。目前已有关于己糖激酶抑制剂在治疗肿瘤方面的报道，但在AD研究领域中目前暂未见到己糖激酶抑制剂的相关内容。

3-溴代丙酮酸(3-bromopyruvic acid，3-BP)，CAS#:1113-59-3，是杀菌剂噻菌灵的中间体，可以作为半胱氨酸残基的亲和标记以及核酸和蛋白质之间的交联剂，同时3-BP是己糖激酶-II(HK2)的小分子抑制剂，可以通过降低细胞内ATP水平升高细胞对化疗药物的敏感性。在AD研究领域中未见3-BP的相关作用。

氯尼达明(Lonidamine)，CAS#:50264-69-2，别名为洛尼达酸，商品名Doridamina，由德国Angelopharm公司开发，1986年作为抗肿瘤药在意大利上市。氯尼达明是一种己糖激酶抑制剂，其不同于传统抗肿瘤药，它不影响细胞的增生，主要作用于细胞的能量代谢，抑制与线粒体结合的己糖激酶活性从而降低肿瘤细胞的糖酵解，并对凋亡相关蛋白的表达产生影响，抑制恶变细胞的氧耗达到抑杀肿瘤细胞的目的。可用于各种肿瘤如乳腺癌、前列腺癌、肺癌及脑瘤等的治疗，但是在AD研究领域中未见到氯尼达明的相关内容。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供了己糖激酶抑制剂在制备防治阿尔茨海默病的药物中的用途。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案之一是：

己糖激酶抑制剂在制备预防和/或治疗阿尔茨海默病的药物中的用途。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案之二是：

一种包括己糖激酶抑制剂的组合物在制备预防和/或治疗阿尔茨海默病的药物中的用途。

一实施例中：所述己糖激酶抑制剂为己糖激酶-II抑制剂。

一实施例中：所述己糖激酶抑制剂为氯尼达明或其类似物，所述氯尼达明或其类似物的结构式如下式Ⅰ所示：

其中，所述R₁为-H、脂肪烃基、取代的脂肪烃基、芳基或取代芳基，所述R₂为-H、脂肪烃基、取代的脂肪烃基、芳基、取代芳基、羧基、酯基、醛基。

所述氯尼达明或其类似物中，氮杂吲哚结构(2-氮杂吲哚结构)可能为其必要基团。

一实施例中：所述己糖激酶抑制剂为氯尼达明、或氯尼达明的药学上可接受的盐、或氯尼达明的药学上可接受的酯。

一实施例中：所述己糖激酶抑制剂为3-溴代丙酮酸或其类似物，所述3-溴代丙酮酸或其类似物的结构式如下式Ⅱ所示：

其中，所述R₃为-H、-Cl、-Br、-F、脂肪烃基、取代的脂肪烃基、芳基或取代芳基。

所述3-溴代丙酮酸或其类似物中，丙酮酸结构可能为其必要基团。

一实施例中：所述己糖激酶抑制剂为3-溴代丙酮酸、或3-溴代丙酮酸的药学上可接受的盐、或3-溴代丙酮酸的药学上可接受的酯。

一实施例中：所述用途为改善认知能力。

一实施例中：所述用途为清除β-淀粉样蛋白。

一实施例中：所述用途为减少β-淀粉样蛋白聚集。

一实施例中：所述用途为改善突触可塑性损伤。

本发明中，除有特别说明外，所述脂肪烃基例如为C1～C6的烷基、C1～C6的烯基、或C1～C6的炔基等，所述取代的脂肪烃基例如为卤素取代的C1～C6的烷基、卤素取代的C1～C6的烯基、或卤素取代的C1～C6的炔基等，所述芳基例如为苯基、苄基、苯甲基、苯乙基等，所述取代芳基例如为卤素取代的苯基、卤素取代的苄基、卤素取代的苯甲基、卤素取代的苯乙基等，所述酯基例如为在式Ⅰ或式Ⅱ的化合物具有羧基的基础上与C1～C6的醇等反应形成，或者在式Ⅰ或式Ⅱ的化合物具有羟基的基础上与C1～C6的酸等反应形成。

本发明中，术语“药学上可接受的盐”涵盖了氯尼达明或3-溴代丙酮酸与无机酸或有机酸的盐，酸例如盐酸、氢溴酸、硝酸、硫酸、磷酸、柠檬酸、甲酸、马来酸、乙酸、富马酸、琥珀酸、酒石酸、甲磺酸、对甲苯磺酸等。

本发明中，术语“药学上可接受的酯”涵盖了氯尼达明或3-溴代丙酮酸与醇形成的酯，醇例如C1～C6的醇如甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等，或芳香醇如苯甲醇等。

本发明中，所述药物还可包括至少一种药学上可接受的辅料或载体。所述辅料包括但不限于稀释剂、溶剂、赋形剂、吸收剂、润湿剂、黏合剂、崩解剂、润滑剂、增溶剂、乳化剂、助悬剂、表面活性剂、成膜剂、抛射剂、抗氧剂、矫味剂、芳香剂、杀菌剂、防腐剂等；所述载体指能够担载化合物，并且具有改变化合物进入人体的方式和在体内的分布，控制释放速度达到控释或缓释，靶向输送至靶器官等作用的体系，包括但不限于脂质体、微球、微囊、固体分散体、胶束、微乳液、凝胶、缓释型载体、控释型载体、靶向型载体、纳米颗粒材料等。

本技术方案与背景技术相比，它具有如下优点：

本发明提出了己糖激酶抑制剂，特别是氯尼达明和3-溴代丙酮酸能够改善阿尔茨海默症模型小鼠的认知水平，清除Aβ和减少Aβ聚集，具有明显的抗阿尔茨海默症作用，为己糖激酶抑制剂，特别是氯尼达明和3-溴代丙酮酸用于制备预防和/或治疗阿尔茨海默病的药物提供了依据。

附图说明

图1用于说明腹腔注射3-BP可以有效改善5×FAD小鼠的认知损伤，其中A为空间探索试验阶段各组小鼠到达目标平台的探索时间，B为测试阶段中各组小鼠在目标平台区域的停留时间，C为测试阶段中各组小鼠在目标平台区域的穿梭次数，D为测试阶段各组小鼠到达目标平台的探索时间，E为各组小鼠的运动速度，F为各组小鼠的运动距离。

图2用于说明3-BP可以减少5×FAD小鼠脑内β-淀粉样蛋白(Aβ)的数量，其中A为免疫组化照片，B为脑内Aβ的数量(B中上图)和直径(B中下图)。

图3用于说明3-BP可以显著减少体外β-淀粉样蛋白(Aβ)的聚集，其中A为透射电镜照片，B为体外Aβ的直径。

图4用于说明3-BP可以显著改善5×FAD小鼠的突触可塑性损伤。

图5用于说明氯尼达明可以减少5×FAD小鼠脑内β-淀粉样蛋白(Aβ)的数量，其中A为免疫荧光照片，B为脑内Aβ的数量(B中左图)和直径(B中右图)。

图6用于说明氯尼达明可以显著减少体外β-淀粉样蛋白(Aβ)的聚集，其中A为透射电镜照片，B为体外Aβ的直径。

图7用于说明氯尼达明可以改善5×FAD小鼠的突触可塑性损伤。

具体实施方式

以下实施方式是对本发明做进一步的说明，本发明的实施方式不局限于以下的实施例，凡是按照本发明的原理所作的变化都视为本发明的保护范围。

在一些实施例中，所述对象是指哺乳动物对象，如人类，施用方法包括通过皮下，静脉，动脉，胃肠道等给药方式将药物作用于如人体。

在没有特别指明的情况下，本发明使用的材料和实验方法为常规实验材料方法。

在没有特别指明的情况下，本发明实验结果统计图中，*是与对照组相比较，#是与5×FAD或者Aβ组相比较(*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001；#p<0.05,##p<0.01,###p<0.001)。

实施例1：3-BP对阿尔茨海默症模型小鼠认知能力的改善作用

(1)实验小鼠背景及分组

5×FAD转基因小鼠是经典的AD转基因小鼠，5×FAD转基因小鼠过度表达两个人源化与家族性阿尔茨海默症相关基因APP和PS1的突变，这两个基因的表达都由小鼠朊病毒蛋白启动子启动。人类早老素基因的PS1-dE9突变是该基因的第九个外显子缺失产生的，此突变会导致早发性老年痴呆症。对照小鼠来源于同窝生野生型小鼠。实验采用9个月的5×FAD小鼠和对照小鼠。

实验分组分为四组：野生型小鼠给予对照试剂组(WT)，5×FAD小鼠给予对照试剂组(5xFAD)，野生小鼠给予3-BP组(WT+3-BP)，5×FAD小鼠给予3-BP组(5×FAD+3-BP)。药物和对照试剂采用腹腔注射的方式进行注射，3-BP药物浓度为10mg/kg，每天注射一次，连续注射一周。

(2)水迷宫行为学方法

水迷宫系统由一个蓝色的圆形水池和一套数据采集系统组成，水池直径120cm，装有乳白色不透明的水，装水量为水池总体积的三分之二，水池四周贴有不同形状标志物供小鼠参考，水迷宫被虚拟的划分为四个象限，其中一个象限的中心在水面1.5cm以下装有一个直径14cm的平台。信号采集系统包括水迷宫正中间的摄像机及计算机系统，数据分析由软件Smart V3.0自行完成。小鼠结束最后一次给药处理后进行水迷宫检测，在空间探索实验阶段，空间探索实验4～9d完成，每天训练4次完成东西南北不同入水点的训练，且每天入水点的顺序不同(伪随机)。每次实验间隔15～20min。每只小鼠测试1min。将小鼠头朝迷宫壁，轻轻从入水点放入水迷宫中，同时按下遥控器的开始键。当小鼠1min内找到平台，并在平台上站立10s后软件将自动停止。若小鼠未能在1min内找到平台，应当用玻璃棒引导小鼠到达平台，并在平台上站立10s。在此阶段，记录各组小鼠从入水到找到平台的路径，将四次训练的平均值作为该小鼠当天的成绩，以此评估小鼠的空间学习能力。定向航行实验阶段，将平台移走，小鼠在水迷宫中自由探索60s，记录其在目标象限(平台所在象限)的停留时间及其游泳轨迹每个点到目标平台的平均距离，以此评估小鼠的空间参考记忆。测定结果详见图1，其中，图A为空间探索试验阶段，每一天不同组小鼠找到平台所需要的时间。

从图1可以看出，在定向航行学习阶段，四组小鼠找到平台的时间随天数增加逐渐降低，说明各组小鼠均学会了如何找到平台所在的位置。但是，5×FAD组的小鼠找到平台所经历的时间比其他三组小鼠要长，说明5×FAD小鼠的空间学习能力明显弱于正常小鼠的空间学习能力，表现出一定的空间学习能力损伤。但是对5×FAD小鼠给予3-BP药物处理后，与5×FAD小鼠相比，5×FAD+3-BP组小鼠找到平台的所经历的时间与对照组相比没有差别。

在水迷宫定向航行试验的测试阶段，当平台被移走后，小鼠在迷宫中探索1min时间内，5×FAD组小鼠在目标平台区域的停留时间显著小于其他组小鼠，而5×FAD+3-BP组小鼠的停留时间显著大于5×FAD组小鼠。同时，5×FAD组小鼠在目标平台区域的穿梭次数显著小于其他组小鼠，而5×FAD+3-BP组小鼠的穿梭次数显著大于5×FAD组小鼠。而给予3-BP治疗后的5×FAD组小鼠到目标平台的探索时间明显短于5×FAD组小鼠，图1中图B和图C和图D结合说明5×FAD小鼠的空间参考记忆明显下降，而3-BP能够有效地改善提高5×FAD小鼠的空间参考记忆能力。图1中的图E和图F说明小鼠的运动能力在给药前后没有显著的差异。

实施例2：免疫组化和免疫荧光染色检测3-BP对阿尔茨海默症模型小鼠脑内Aβ的清除作用

(1)小鼠脑立体定位侧脑室注射

5×FAD小鼠腹腔注射5％水合氯醛(0.1mL/15g)，待彻底麻醉后将头部毛发剔除固定在脑立体定位仪器上。碘伏消毒，剪开头皮，在显微镜下找到前囟点与后囟点进行调平定位，用0.5mm钻头在脑室位置钻开小孔(x±1.0mm，y-0.4mm)，清除骨屑，将微量注射器缓缓插入侧脑室，下降至合适深度坐标(z2.2mm)进行注射(3-BP，2.5μL，0.5mg/kg)。注射完成后，停针十分钟，缓慢退针，将小鼠头部皮肤缝合。

(2)组织固定切片

小鼠进行侧脑室给药处理一周后按照体重(0.1mL/15g)腹腔注射5％水合氯醛，小鼠彻底麻醉后将小鼠腹部向上，四肢展开固定住。剪开腹腔至胸腔，注意避开动脉。用注射器针尖从小鼠左心室轻轻插入，并将右心耳背部静脉剪开，慢慢推入50mL冷的PBS，然后将PBS换成4％的多聚甲醛溶液，慢慢推动注射器，直至小鼠全身僵直。将小鼠从固定板上取下，断头剪开嗅球连接处，从小鼠脑干处横向剪短，再沿脑后中线将脑袋上的皮肤剪开，用小解剖镊小心将头骨解剖开，将脑组织置于15mL离心管中用4％的多聚甲醛固定1～2天后再转移至30％的蔗糖溶液中脱水1～2天。随后，将固定好的鼠脑取出，干冰包埋一个小时后，将包埋组织取出，固定于冰冻切片机上进行组织切片，进行下一步染色处理。

(3)Aβ免疫组化染色

第一天，将脑组织切片取出，用PBS洗三次，每次5min；用组化笔在每个脑组织周围画圈，将脑组织圈住，滴加88％的甲酸，室温下处理10min；用真空泵吸走甲酸，用PBS再洗三次，每次5min；吸走PBS，用过氧化物酶阻断剂在室温下处理组织样品10min；吸走过氧化物酶阻断剂，用PBS洗三次，每次5min；吸走PBS，加动物血清，室温封闭10min；配制一抗Aβ：5％BSA＝1：500，4℃，孵育过夜。第二天将前一天处理过的组织样品取出，用PBS洗三次，每次5min；吸走PBS，用生物素标记的二抗室温孵育10min；PBS再洗三次，每次5min；用链霉素抗生物素—过氧化物酶溶液在室温下处理10min；PBS洗三次，每次5min；DAB染色大约1min，显微镜下观察染色情况；蒸馏水冲洗20min后，用苏木素染核大约30s；清水冲洗10min；梯度酒精脱水75％、80％、90％、100％、100％各5min；二甲苯固定10min；晾干，用中性树脂封片。待干片后，在显微镜下观察。

图2可见，注射3-BP组，小鼠脑片各层面均可见到Aβ阳性信号明显减少，皮层和海马区域的Aβ阳性信号几乎消失，说明单剂量3-BP侧脑室给药对阿尔茨海默症模型小鼠脑内Aβ具有显著的清除作用。

实施例3：电镜观察体外3-BP对Aβ聚集状态的影响

制备的Aβ1-42如下：用不含酚的冷F-12细胞培养液(Gibco)将DMSO(5mM)中溶解的多肽稀释至100μM，超声处理10min，制成新鲜使用的寡聚的Aβ1-42。部分肽在22℃的220rpm下培养72小时使其体外聚集老化，并在这一个过程中加入不同浓度的3-BP。之后4℃下培养24小时，16000×g离心15分钟，收集的上清中含有Aβ1-42聚集物，透射电镜观察分析。由图3可见，当加入3-BP后，随着加入3-BP浓度的增加，Aβ的聚集状态变得松散，多聚体体积更小。这一实验说明3-BP可减少Aβ聚集，形成更小体积的聚集物，便于小胶质细胞对Aβ的包围和吞噬清除。

实施例4：3-BP对阿尔茨海默症模型小鼠突触可塑性的影响-长时程增强(Longterm potentiation，LTP)

(1)实验小鼠分组

野生型小鼠对照组(WT)，5×FAD小鼠组(5xFAD)，5×FAD小鼠给予3-BP组(5×FAD+3-BP)。药物采用腹腔注射的方式进行注射，3-BP药物浓度为10mg/kg，每天注射一次，连续注射一周。

(2)脑片制备

将各组小鼠用异氟烷麻醉后迅速在冰上断头取脑，可通过切掉小脑(提供一个平坦的表面以供大脑安装时用)以及前额皮质的一小部分来修整大脑。用超强力胶水将脑组织(嗅球朝上)安装在振动切片机的样品盘上，即刻置于通入95％(v/v)的O₂和5％(v/v)的CO₂混合气体进行饱和处理的0～4℃预冷的人工脑脊液(ACSF)中，调整样品角度令皮质面向切割刀片，为防止组织受力变形，可以在大脑后方、远离振动切片机一侧处添加支撑琼脂块，从而在切片过程中提供结构支撑。用振动切片机在海马脑区处冠状面切片，得到厚度为400μm的海马脑片，沿中线将大脑仔细地切成两半，将单独的脑片移至预先持续通入95％(v/v)的O₂和5％(v/v)的CO₂混合气体，注有ACSF的34℃孵育槽中，恒温孵育1h，让脑组织从切片的机械冲击中恢复。然后将装有脑片的孵育槽置于室温继续孵育1～2h，期间持续通入气体。ACSF包括127mM NaCl、1.0mM KCl、1.2mM KH₂PO₄、26mM NaHCO₃、2.4mM CaCl₂、1.3mMMgCl₂、10mM D-glucose。

(3)LTP记录

将孵育好的海马脑片用小刷子放于恒温灌流槽内(25℃～28℃)并固定，以3mL/min的流速不断通入ACSF及混合气体(即95％(v/v)的O₂和5％(v/v)的CO₂)。将相同的ACSF注入一根玻璃微电极，将玻璃电极和刺激电极连接到膜片钳放大器顶台的电极夹上，并调整好位置。在解剖显微镜下用微调控制显微操作器将玻璃电极置于海马CA1区的辐射层，然后将刺激电极末端慢慢移动接触到海马CA3区锥体细胞的谢弗侧支(Schaffer collaterals)从而诱发场兴奋性突触后电位(field excitatory postsynaptic potential，fEPSP)群峰电位，用每20秒一次的单个脉冲刺激脑片，刺激逐渐增强，选取刺激引起群峰电位最大反应30％～40％左右对应的强度记录基线值，每20s记录一次fEPSP，总时间为20min，20min内基线值没有太明显浮动可认为突触传递稳定。之后施加强直刺激(100Hz，持续30s)，随后记录群峰电位反应一个小时，每20s记录一次fEPSP。

由图4可以看出，WT组小鼠在强直刺激20分钟后的fEPSP斜率降低至150％左右，而5×FAD小鼠的fEPSP斜率仅在120％左右，说明存在明显的突触可塑性受损，而给予3-BP治疗组小鼠fEPSP斜率高于120％且稳定保持，说明3-BP可以改善阿尔茨海默症模型小鼠的突触可塑性受损现象。

实施例5：免疫组化染色检测氯尼达明对阿尔茨海默症模型小鼠脑内Aβ的清除作用

(1)小鼠脑立体定位注射

实验方法参考实施例2，氯尼达明注射给药剂量为0.5mg/kg。

(2)组织固定切片

实验方法参考实施例2。

(3)Aβ免疫荧光染色

第一天，将脑组织切片取出，用PBS洗三次，每次5min；用组化笔在每个脑组织周围画圈，将脑组织圈住，滴加88％的甲酸，室温下处理10min；用真空泵吸走甲酸，用PBS再洗三次，每次5min；吸走PBS，用过氧化物酶阻断剂在室温下处理组织样品10min；吸走过氧化物酶阻断剂，用PBS洗三次，每次5min；吸走PBS，加动物血清，室温封闭10min；配制一抗Aβ：5％BSA＝1：500，4℃，孵育过夜。第二天将前一天处理过的组织样品取出，用PBS洗三次，每次5min；吸走PBS，用荧光标记的二抗室温孵育10min；PBS再洗三次，每次5min；之后用含有DAPI的封片剂封片，然后在共聚焦显微镜下观察。图5可见，注射氯尼达明后，Aβ阳性信号明显减少。说明氯尼达明对阿尔茨海默症模型小鼠脑内Aβ具有清除作用。

实施例6：电镜观察体外氯尼达明对Aβ聚集状态的影响

实验方法参考实施例3。由图6可见，当加入氯尼达明(300μM)后，Aβ的聚集状态产生变化，数量明显减少。说明氯尼达明可减少Aβ聚集。

实施例7：氯尼达明对阿尔茨海默症模型小鼠突触可塑性的影响-长时程增强(Long term potentiation，LTP)

(1)实验小鼠分组

野生型小鼠对照组(WT)，5×FAD小鼠组(5xFAD)，5×FAD小鼠给予氯尼达明组(5×FAD+lonidamine)。药物采用腹腔注射的方式进行注射，氯尼达明药物浓度为100mg/kg，每隔一天注射一次，持续注射三次。

(2)脑片制备

实验方法参考实施例4。

(3)LTP记录

实验方法参考实施例4。

由图7可以看出，WT组小鼠在强直刺激20分钟后的fEPSP斜率降低至150％左右，而5×FAD小鼠的fEPSP斜率仅在120％左右，说明存在明显的突触可塑性受损，而给予氯尼达明治疗组小鼠fEPSP斜率高于120％，说明氯尼达明可以改善阿尔茨海默症模型小鼠的突触可塑性受损现象。

Claims (7)

1.己糖激酶抑制剂在制备预防和/或治疗阿尔茨海默病的药物中的用途，所述己糖激酶抑制剂为氯尼达明、或氯尼达明的药学上可接受的盐、或氯尼达明的药学上可接受的酯。

2.己糖激酶抑制剂在制备预防和/或治疗阿尔茨海默病的药物中的用途，所述己糖激酶抑制剂为3-溴代丙酮酸、或3-溴代丙酮酸的药学上可接受的盐、或3-溴代丙酮酸的药学上可接受的酯。

3.一种包括己糖激酶抑制剂的组合物在制备预防和/或治疗阿尔茨海默病的药物中的用途，所述己糖激酶抑制剂为氯尼达明、或氯尼达明的药学上可接受的盐、或氯尼达明的药学上可接受的酯。

4.一种包括己糖激酶抑制剂的组合物在制备预防和/或治疗阿尔茨海默病的药物中的用途，所述己糖激酶抑制剂为3-溴代丙酮酸、或3-溴代丙酮酸的药学上可接受的盐、或3-溴代丙酮酸的药学上可接受的酯。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的用途，其特征在于：所述用途为改善认知能力。

6.根据权利要求1至4中任一项所述的用途，其特征在于：所述用途为清除β-淀粉样蛋白和/或减少β-淀粉样蛋白聚集。

7.根据权利要求1至4中任一项所述的用途，其特征在于：所述用途为改善突触可塑性损伤。

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