CN111337678A

CN111337678A - 与肿瘤免疫治疗效果相关的生物标志物及其应用

Info

Publication number: CN111337678A
Application number: CN202010106659.0A
Authority: CN
Inventors: 孙苏彭; 杨盼盼; 隗啸南; 周静; 康美华; 孙立平
Original assignee: Hangzhou Kaibaoluo Biological Science & Technology Co ltd
Current assignee: Hangzhou Kaibaoluo Biological Science & Technology Co ltd
Priority date: 2020-02-21
Filing date: 2020-02-21
Publication date: 2020-06-26
Anticipated expiration: 2040-02-21
Also published as: CN111337678B; WO2021164713A1

Abstract

本发明为与肿瘤免疫治疗效果相关的生物标志物及其应用，公开了一种用于预测肿瘤免疫治疗效果的生物标志物，该生物标志物为一组肿瘤相关抗原的自身抗体。该生物标志物可以在来自肿瘤患者的样本中进行检测，以预测施用免疫治疗的临床效果，从而有助于判断该肿瘤患者能否从免疫治疗中获益。本发明还提供用于检测该生物标志物的抗原蛋白组合以及包含该抗原蛋白组合的试剂盒，以及相应的检测或诊断方法。

Description

与肿瘤免疫治疗效果相关的生物标志物及其应用

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体而言，本发明涉及一种与肿瘤免疫治疗效果相关的生物标志物、检测其的蛋白组合以及相应的在预测肿瘤免疫治疗效果中的应用。

背景技术

免疫疗法是目前肿瘤治疗领域中最具前景的研究方向，热点之一为采用免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitor，ICI)的免疫阻断疗法，例如基于阻断程序性死亡因子-1(programmed death-1，PD-1)/程序性死亡因子配体-1(programmed deathligand-1，PD-L1)免疫检查点通路的疗法。

PD-1/PD-L1免疫检查点通路的阻断疗法通常是指，将抗PD-1或PD-L1 的特异性抗体注射入肿瘤患者体内，使得肿瘤不再具备逃避免疫系统攻击的能力，从而促进机体免疫系统清除肿瘤细胞。这一疗法已经在部分患者中实现了显著抑制肿瘤生长和清除肿瘤的疗效，已获批用于黑色素瘤、霍奇金淋巴瘤、肺癌、头颈部鳞癌、肝癌、食管癌、乳腺癌、胃癌、鼻咽癌、淋巴瘤等多种适应症。

然而，虽然ICI(例如抗PD-1/PD-L1抗体)在肿瘤治疗中取得了令人瞩目的成就，但是有数据表明，大多数接受ICI的患者并没有从中获益。例如，相当比例的肿瘤患者对抗PD-1/PD-L1抗体无反应。因此，迫在眉睫的是识别和开发可预测ICI疗效的生物标志物，以精准发现ICI获益患者。

多项临床研究表明，PD-L1表达量升高的肿瘤患者采用ICI治疗后获益更多，因此一些研究将PD-L1表达视为主要评估目标，并且基于PD-L1表达水平在部分肿瘤中就ICI疗效预测具有的良好区分作用，其已经成为目前 ICI治疗唯一的伴随诊断。但是也有研究发现，部分患者的PD-L1表达和ICI 治疗响应或总生存期(overall survival，OS)之间并无关联。例如，PD-L1 高表达(PD-L1的表达量为50％或更高)，免疫检查点分子抑制剂药物的应答率仅在30％至40％之间；但此外，发现10％的PD-L1低表达(PD-L1的表达量＜50％)或PD-L1呈阴性的病例则是应答病例，甚至许多PD-L1表达低至无法检测到的患者从ICI治疗中获得持久的临床益处。并且，将PD-L1表达作为ICI疗效预测因素还有以下缺陷：相当比例的晚期肿瘤患者不能提供足够的肿瘤组织进行PD-L1表达的检测；PD-L1的表达在肿瘤的不同发展阶段、不同区域会存在异质性，其检测结果可能受取样时间和取样位点的影响；此外，检测方法、评估标准和阳性临界值的界定等方面的差异也会导致结果判定不同，这些都导致了PD-L1表达不能作为用于临床治疗决策的足够全面的独立生物标志物。除此之外，目前比较常用的ICI疗效预测因素还包括肿瘤突变负荷(tumor mutation burden，TMB)、新抗原负担、错配修复(mismatch repair，MMR)/微卫星不稳定性高(Microsatellite instability-high， MSI-H)、人类白细胞抗原(HLA)基因型等，但是这些预测因素均存在无法准确区分响应者和非响应者、无法提供明确的敏感性或特异性、预测性差或者检测要求如活检取样或成本过高等缺陷。

因此，临床上用于区分对ICI治疗有无响应的患者的手段仍然是非常有限的，需要提供准确率更高、使用更简便、成本更低、更容易推广应用的生物标志物及其应用手段，以改善免疫检查点阻断疗法以及肿瘤免疫疗法的治疗效果。

早在上世纪60年代，Robert W.Baldwin证实在肿瘤发生发展的极早期阶段，人体免疫系统已经可以产生针对肿瘤细胞的自身抗体，奠定了肿瘤相关抗原(tumor-associated antigen，TAA)研究的理论基础。人体在肿瘤免疫监视过程中产生的自身抗体已经被应用于肿瘤的早期诊断，而且被认为是预测肿瘤治疗疗效的一个极具潜力的生物标志物。例如，已有研究表明，不论EGFR是否突变，肿瘤患者中抗XAGE1(GAGED2a)抗体的存在是XAGE1 (GAGED2a)抗原阳性的肿瘤患者OS延长的一个强有力的预测因子。此外，有研究提出抗p53自身抗体、抗PGP9.5自身抗体水平等可以作为预测肺癌复发的工具。

肿瘤抗原表达与肿瘤浸润免疫细胞的细胞活性也存在相关性。因此，抗肿瘤相关抗原的自身抗体也有可能成为高特异性免疫治疗的靶点或预测标志物。目前已有相关研究报道，包括Sachet a.Shukla鉴定了肿瘤睾丸抗原MAGE-A的一个亚类，其位于Xq28染色体的一个狭窄的75kb区域内，该区域能用于预测抗CTLA-4抗体的疗效。另有研究表明，抗NY-ESO-1和/或XAGE1肿瘤睾丸抗原的血清抗体可用于预测初始及后线非小细胞肺癌 (NSCLC)的ICI疗效和患者生存期。此外，在一项对81名采用抗PD-1/PD-L1 抗体进行后线治疗的NSCLC患者的评估中，评估了抗十多种肿瘤相关抗原的自身抗体对抗PD-1治疗的预测价值，表明抗IMP2的自身抗体与肿瘤进展显著相关。但是值得注意的是，迄今为止，就针对肿瘤相关抗原的自身抗体表达和ICI响应之间的关系而言，相关报道仍然是非常有限的；并且，这些自身抗体均为单一的生物标志物，预测可能并不准确，其实际预测效果仍需要进一步的验证。

免疫检查点抑制剂是一种非常昂贵的药物，与常规化疗不同，虽然免疫检查点抑制剂药物对一些患者有效，但也可能导致严重的不良反应，特别是系统性自身免疫疾病的发展。因此，仍然需要识别新的可用于预测ICI疗效的自身抗体生物标志物，以及开发针对该自身抗体生物标志物的检测用抗原、特别是抗原组合，以提供针对肿瘤免疫治疗效果的新的预测手段。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明通过检测肺癌患者血液中针对不同抗原靶点的自身抗体，最终鉴定了一组可用于预测或判断肿瘤、特别是肺癌的免疫检查点抑制剂(ICI)治疗效果的自身抗体生物标志物。

因此，本发明的一个目的是提供用于预测或判断肿瘤免疫治疗效果的自身抗体生物标志物组合。

基于自身抗体生物标志物的鉴别，本发明的另一个目的是提供用于检测该自身抗体标志物的试剂，例如抗原蛋白组合，该抗原蛋白组合可用于检测肿瘤患者样本(例如血液)中该自身抗体生物标志物是否为阳性，从而预测或判断肿瘤患者的免疫治疗效果；以及提供包含该检测试剂的试剂盒，其可用于相应的检测。

本发明的再一个目的是提供该自身抗体生物标志物组合或抗原蛋白组合在制备用于预测或判断肿瘤免疫治疗效果的产品中的用途。

本发明的还一个目的是提供一种预测或判断肿瘤患者的免疫治疗效果的方法或者一种治疗肿瘤的方法。

本发明的技术方案如下。

一方面，本发明提供一种用于预测或判断受试者的肿瘤免疫治疗效果的生物标志物，所述生物标志物为自身抗体组合，所述自身抗体组合包括选自抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体的至少一种：Trim21、BRCA2、Annexin 1、 HUD、NY-ESO-1、P53、IMP2、HSP105、MAGE-A3、AKAP4、PRAME。

就本发明提供的生物标志物所指示的肿瘤免疫治疗效果而言，所述自身抗体组合可包括选自抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体的至少一种：Trim21、 BRCA2、Annexin 1、HUD、NY-ESO-1、P53、IMP2。所述生物标志物可以用于预测或判断：受试者的良好的肿瘤治疗效果；受试者受益于肿瘤免疫治疗；该治疗有效；或，受试者的肿瘤对免疫治疗敏感。

优选地，所述自身抗体组合包括选自抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体的两种、三种或四种：Trim21、BRCA2、Annexin 1、HUD；更优选地，所述自身抗体组合包括抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体：Trim21和BRCA2；进一步优选地，所述自身抗体组合还包括抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体中的一种或两种：Annexin 1、HUD。

根据本发明的具体实施方式，所述自身抗体组合包括抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体：

(A)Trim21，BRCA2，IMP2；

(B)Trim21，BRCA2，NY-ESO-1；

(C)Trim21，BRCA2，NY-ESO-1，IMP2；

(D)Trim21，BRCA2，P53；

(E)Trim21，BRCA2，Annexin 1；

(F)Trim21，BRCA2，Annexin 1，P53；

(G)Trim21，BRCA2，Annexin 1，NY-ESO-1，IMP2；

(H)Trim21，BRCA2，Annexin 1，HUD，NY-ESO-1，IMP2；

(I)Trim21，BRCA2，Annexin 1，NY-ESO-1，P53，IMP2；

(R)Trim21，BRCA2，Annexin 1，HUD；

(RN)Trim21，BRCA2，Annexin 1，HUD，NY-ESO-1；

(RP)Trim21，BRCA2，Annexin 1，HUD，P53；或

(RNP)Trim21，BRCA2，Annexin 1，HUD，NY-ESO-1，P53。

最优选地，本发明提供一种用于预测或判断受试者的肿瘤免疫治疗效果的生物标志物，所述生物标志物为自身抗体组合，所述自身抗体组合包括抗肿瘤相关抗原Trim21、BRCA2、Annexin 1、HUD的自身抗体，即抗Trim21 自身抗体、抗BRACA2自身抗体、抗Annexin1自身抗体和抗HUD自身抗体。

或者，就本发明提供的生物标志物所指示的肿瘤免疫治疗效果而言，所述自身抗体组合可包括选自抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体的至少一种： HSP105、MAGE-A3、AKAP4、PRAME。所述生物标志物可以用于预测或判断：受试者的差的肿瘤治疗效果；受试者不受益于肿瘤免疫治疗；该治疗无效；或，受试者的肿瘤对免疫治疗不敏感。

优选地，所述自身抗体组合包括抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体： HSP105，或HSP105和AKAP4。

(K)HSP105；

(L)HSP105，AKAP4；

(M)HSP105，MAGE-A3，AKAP4；或

(P)HSP105，AKAP4，PRAME。

最优选地，本发明提供一种用于预测或判断受试者的免疫肿瘤治疗效果的生物标志物，所述生物标志物为自身抗体组合，所述自身抗体组合包括抗肿瘤相关抗原HSP105、AKAP4的自身抗体，即抗HSP105自身抗体和抗AKAP4 自身抗体。

根据本发明，所述自身抗体为受试者接受肿瘤免疫治疗之前血清、血浆、组织间隙液、脑脊液或尿液中的自身抗体；优选地，所述自身抗体为IgA(例如IgA1、IgA2)、IgM或IgG(例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)。

根据本发明，所述受试者为哺乳动物，优选为灵长类哺乳动物，更优选为人。并且，优选地，所述肿瘤为肾癌、肝癌、卵巢癌、宫颈癌、头颈部鳞状细胞癌、鼻咽癌、尿路上皮癌、喉癌、胃癌、黑色素瘤、前列腺癌、霍奇金氏淋巴瘤、膀胱癌、结直肠癌、肺癌，特别是肺癌，例如小细胞肺癌、非小细胞肺癌、肺鳞癌、肺腺癌和其他亚型肺癌。

根据本发明，所述免疫治疗包括采用免疫检查点抑制剂治疗；优选地，所述免疫治疗为单独施用免疫检查点抑制剂治疗或免疫检查点抑制剂与化疗、放疗、抗血管治疗、靶向治疗或其他肿瘤治疗手段的联合治疗，其中所述免疫检查点抑制剂为针对PD-1、PD-L1、CTLA-4、BTLA、TIM-3、LAG-3、 TIGIT、LAIR1、2B4和/或CD160的免疫检查点抑制剂，优选为抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体。根据本发明的具体实施方式，所述抗体为纳武单抗、帕姆单抗、信迪利单抗、特瑞普利单抗以及国产的免疫检查点抑制剂，特别是抗 PD-1抗体或抗PD-L1抗体。

根据本发明，该生物标志物即自身抗体组合可以在受试者、例如肿瘤患者的样本(例如血浆或血清)中进行检测，以预测或判断该受试者进行肿瘤免疫治疗的疗效。数据表明，当受试者的血液中这些自身抗体生物标志物为阳性时，其更易于或更不易于从免疫治疗例如ICI治疗中获益。因此，本发明提供的自身抗体生物标志物可用于预测或判断受试者、例如肿瘤患者能否从免疫治疗中获益(该免疫治疗效果为良好或差；该免疫治疗是否有效；或受试者的肿瘤对免疫治疗敏感或不敏感)，至少可用于相应的辅助判断。在本发明中，自身抗体生物标志物的“存在”或“不存在”与“阳性”或“阴性”可互换使用；对此进行判断为本领域常规技术。根据本发明的具体实施方式，可以通过参照标准曲线对样本中自身抗体的水平进行定量，进而参照 cutoff值进行自身抗体生物标志物的存在(≥cutoff值，为阳性)或不存在(＜cutoff值，为阴性)的判断。自身抗体水平的cutoff值可以是来自健康人或健康人群的参照水平；例如,可以被定义为经身体检查确认未患有癌症的人群的平均值加2个标准偏差。

本发明提供的自身抗体生物标志物可以通过多种方法进行检测，例如可以通过导致该自身抗体出现的肿瘤相关抗原与其之间的抗原-抗体特异性反应进行检测。因此相应地，本发明还提供一种用于检测该自身抗体生物标志物的试剂。

取决于具体技术手段，所述试剂可以是用于酶联免疫吸附法(ELISA)、蛋白/肽段芯片检测、免疫印迹、微珠免疫检测、微流控免疫检测等检测方法的试剂。优选地，所述试剂用于通过抗原抗体反应对本发明的自身抗体生物标志物进行检测，例如通过ELISA。

在这一方面，所述试剂可以是用于检测所述自身抗体组合的抗原蛋白组合，所述抗原蛋白组合包括选自以下抗原蛋白的至少一种：Trim21、BRCA2、 Annexin 1、HUD、NY-ESO-1、P53、IMP2、HSP105、MAGE-A3、AKAP4、PRAME。

该试剂可用于检测受试者、例如肿瘤患者的样本(例如血浆或血清)中相应自身抗体生物标志物是否为阳性的，进而实现上文所述的对施用肿瘤免疫治疗的临床效果的预测或判断。

在本发明中，例如，肿瘤相关抗原或抗原蛋白包含的氨基酸序列如下：

Trim21包含如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；

BRCA2包含如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列；

Annexin 1包含如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；

HUD包含如SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列；

NY-ESO-1包含如SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列；

P53包含如SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列；

IMP2包含如SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列；

HSP105包含如SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列；

MAGE-A3包含如SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列；

AKAP4包含如SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列；

PRAME包含如SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列。

另一方面，本发明提供所述生物标志物或试剂在制备用于预测或判断受试者的肿瘤免疫治疗效果的产品中的用途。如上文所述，所述肿瘤免疫治疗效果包括分别良好的肿瘤免疫治疗效果和差的肿瘤免疫治疗效果，取决于相对应的生物标志物或试剂。

根据本发明，所述免疫治疗包括采用免疫检查点抑制剂治疗；优选地，所述免疫治疗为单独施用免疫检查点抑制剂治疗或免疫检查点抑制剂与化疗、放疗、抗血管治疗、靶向治疗或其他肿瘤治疗手段的联合治疗，其中所述免疫检查点抑制剂为针对PD-1、PD-L1、CTLA-4、BTLA、TIM-3、LAG-3、 TIGIT、LAIR1、2B4和/或CD160的免疫检查点抑制剂，优选为抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体。根据本发明的具体实施方式，所述抗体为纳武单抗、帕姆单抗、信迪利单抗、特瑞普利单抗，以及国产的免疫检查点抑制剂，特别是抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体。

又一方面，本发明提供一种试剂盒，所述试剂盒包含本发明所述的试剂。

取决于具体技术手段，所述试剂盒可以是用于酶联免疫吸附法(ELISA)、蛋白/肽段芯片检测、免疫印迹、微珠免疫检测、微流控免疫检测等对该自身抗体生物标志物进行检测的试剂盒。优选地，所述试剂盒用于通过抗原抗体反应对本发明的自身抗体生物标志物进行检测，例如通过ELISA。

因此，优选地，试剂盒为酶联免疫吸附法(ELISA)检测试剂盒。即，采用该试剂盒，通过酶联免疫吸附法来检测受试者的样本中自身抗体生物标志物是否是阳性的。相应地，所述试剂盒还可包括用于对自身抗体生物标志物进行ELISA检测的所需其他组分，这些均是本领域公知的。出于检测目的，例如，试剂盒中的抗原蛋白可连接有标签肽，例如His标签、链霉亲和素标签、Myc标签；又如，该试剂盒可以包括固相载体，如具有可固定抗原蛋白的微孔的载体，如酶标板；还可以包括用于将抗原蛋白固定于固相载体上的吸附蛋白、血液如血清的稀释液、洗涤液、带有酶标记的二抗、显色液、终止液等。

还一方面，本发明提供一种用于预测或判断受试者的肿瘤免疫治疗效果的方法。或者，本发明提供一种用于预测或判断受试者的肿瘤对免疫治疗的敏感性的方法。

上述方法包括检测来自受试者的样本中如下生物标志物是否是阳性的：

所述生物标志物为自身抗体组合，所述自身抗体组合包括选自抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体的至少一种：Trim21、BRCA2、Annexin 1、HUD、 NY-ESO-1、P53、IMP2、HSP105、MAGE-A3、AKAP4、PRAME。

就本发明提供的生物标志物所指示的肿瘤免疫治疗效果而言，该方法可包括检测来自受试者的样本中如下生物标志物是否是阳性的：

所述生物标志物为自身抗体组合，所述自身抗体组合包括选自抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体的至少一种：Trim21、BRCA2、Annexin 1、HUD、 NY-ESO-1、P53、IMP2。所述生物标志物是阳性时预测或判断：受试者具有良好的肿瘤免疫治疗效果；受试者受益于肿瘤免疫治疗；该治疗有效；或，受试者的肿瘤对免疫治疗敏感。

(A)Trim21，BRCA2，IMP2；

(B)Trim21，BRCA2，NY-ESO-1；

(C)Trim21，BRCA2，NY-ESO-1，IMP2；

(D)Trim21，BRCA2，P53；

(E)Trim21，BRCA2，Annexin 1；

(F)Trim21，BRCA2，Annexin 1，P53；

(G)Trim21，BRCA2，Annexin 1，NY-ESO-1，IMP2；

(H)Trim21，BRCA2，Annexin 1，HUD，NY-ESO-1，IMP2；

(I)Trim21，BRCA2，Annexin 1，NY-ESO-1，P53，IMP2；

(R)Trim21，BRCA2，Annexin 1，HUD；

(RN)Trim21，BRCA2，Annexin 1，HUD，NY-ESO-1；

(RP)Trim21，BRCA2，Annexin 1，HUD，P53；或

(RNP)Trim21，BRCA2，Annexin 1，HUD，NY-ESO-1，P53。

最优选地，本发明提供一种预测或判断受试者的肿瘤免疫治疗效果的方法，或者一种用于预测或判断受试者的肿瘤对免疫治疗的敏感性的方法，该方法包括检测来自受试者的样本中如下生物标志物是否是阳性的：

所述生物标志物为自身抗体组合，所述自身抗体组合包括抗肿瘤相关抗原Trim21、BRCA2、Annexin 1、HUD的自身抗体，即抗Trim21自身抗体、抗BRACA2自身抗体、抗Annexin 1自身抗体和抗HUD自身抗体。

或者，就本发明提供的生物标志物所指示的肿瘤免疫治疗效果而言，该方法可包括检测来自受试者的样本中如下生物标志物是否是阳性的：

所述生物标志物为自身抗体组合，所述自身抗体组合包括选自抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体的至少一种：HSP105、MAGE-A3、AKAP4、PRAME。所述生物标志物是阳性时预测或判断：受试者具有差的肿瘤免疫治疗效果；受试者不受益于肿瘤免疫治疗；该治疗无效；或，受试者的肿瘤对免疫治疗不敏感。

优选地，所述自身抗体组合包括选自抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体： HSP105，或HSP105和AKAP4。

(K)HSP105；

(L)HSP105，AKAP4；

(M)HSP105，MAGE-A3，AKAP4；或

(P)HSP105，AKAP4，PRAME。

所述生物标志物为自身抗体组合，所述自身抗体组合包括抗肿瘤相关抗原HSP105、AKAP4的自身抗体，即抗HSP105自身抗体和抗AKAP4自身抗体。

其中，所述检测可采用本发明的试剂、例如抗原蛋白组合或包含该试剂的试剂盒进行。

根据本发明，所述样本为受试者接受肿瘤免疫治疗之前的血清、血浆、组织间隙液、脑脊液或尿液；优选地，所述自身抗体为IgA(例如IgA1、IgA2)、 IgM或IgG(例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)。

例如，所述方法包括以下步骤：

(1)从所述受试者获得样本；

(2)检测所述样本中本发明的自身抗体生物标志物是否是阳性的；

(3)当样本中所述自身抗体生物标志物为阳性时，预测或判断：受试者具有良好或差的肿瘤免疫治疗效果；受试者受益于或不受益于肿瘤免疫治疗；该治疗有效或无效；或，受试者的肿瘤对免疫治疗敏感或不敏感。

还一方面，本发明提供一种治疗受试者的肿瘤的方法，该方法包括检测来自所述受试者的样本中如下生物标志物是否是阳性的：

所述生物标志物为自身抗体组合，所述自身抗体组合包括选自抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体的至少一种：Trim21、BRCA2、Annexin 1、HUD、 NY-ESO-1、P53、IMP2。所述生物标志物是阳性的时，使受试者进行肿瘤免疫治疗。

(A)Trim21，BRCA2，IMP2；

(B)Trim21，BRCA2，NY-ESO-1；

(C)Trim21，BRCA2，NY-ESO-1，IMP2；

(D)Trim21，BRCA2，P53；

(E)Trim21，BRCA2，Annexin 1；

(F)Trim21，BRCA2，Annexin 1，P53；

(G)Trim21，BRCA2，Annexin 1，NY-ESO-1，IMP2；

(H)Trim21，BRCA2，Annexin 1，HUD，NY-ESO-1，IMP2；

(I)Trim21，BRCA2，Annexin 1，NY-ESO-1，P53，IMP2；

(R)Trim21，BRCA2，Annexin 1，HUD；

(RN)Trim21，BRCA2，Annexin 1，HUD，NY-ESO-1；

(RP)Trim21，BRCA2，Annexin 1，HUD，P53；或

(RNP)Trim21，BRCA2，Annexin 1，HUD，NY-ESO-1，P53。

最优选地，本发明提供一种治疗受试者的肿瘤的方法，该方法包括检测来自所述受试者的样本中如下生物标志物是否是阳性的：

所述生物标志物为自身抗体组合，所述自身抗体组合包括选自抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体的至少一种：HSP105、MAGE-A3、AKAP4、PRAME。所述生物标志物是阳性的时，使受试者不进行肿瘤免疫治疗。

(K)HSP105；

(L)HSP105，AKAP4；

(M)HSP105，MAGE-A3，AKAP4；或

(P)HSP105，AKAP4，PRAME。

例如，所述方法包括以下步骤：

(1)从所述受试者获得样本；

(2)检测所述样本中该自身抗体生物标志物是否是阳性的；其中优选地采用酶联免疫吸附法进行检测。

当样本中所述自身抗体生物标志物为阳性时，使受试者进行肿瘤免疫治疗，或者使受试者不进行肿瘤免疫治疗。

与现有技术相比，本发明提供了一种用于预测或判断肿瘤免疫治疗效果的生物标志物，所述生物标志物为自身抗体组合。并且本发明的自身抗体组合包括了预测良好的肿瘤免疫治疗效果和差的肿瘤免疫治疗效果的两种组合，前者可称为对肿瘤免疫治疗效果的正向预测，而后者可称为对肿瘤免疫治疗效果的负向预测。

实验表明，不论PD-L1表达水平与TMB水平，无论是免疫一线治疗还是后线治疗，就正向预测的自身抗体组合，检测阳性的肿瘤患者的免疫检查点阻断治疗的有效率要显著高于该自身抗体组合检测阴性的肿瘤患者(P＜ 0.05)；同样地，无论是免疫单药治疗还是免疫联合化疗，这些肿瘤患者的免疫检查点阻断治疗的有效率同样显著高于自身抗体组合检测阴性的肿瘤患者(P＜0.05)，尤其是采用免疫单药治疗时，前者的有效率更为显著。而就负向预测的自身抗体组合而言，无论是免疫一线治疗还是后线治疗，无论是免疫单药治疗还是免疫联合化疗，检测阳性的肿瘤患者的免疫检查点阻断治疗的有效率要显著低于该自身抗体组合检测阴性的肿瘤患者(P＜ 0.05)。

因此，就肿瘤患者能否从免疫治疗、特别是免疫检查点抑制剂治疗中获益，本发明提供的自身抗体生物标志物能够提供准确的预测或判断结果。基于该预测或判断结果，患者或临床医生可以更好地决定患者是否要进行免疫治疗，从而避免过度医疗，降低治疗成本，减少或避免不良反应产生。

并且，根据需要，本发明提供的这两种自身抗体组合还可单独使用或组合使用。例如，在组合使用时，可以综合正向预测的自身抗体生物标志物的阳性情况与负向预测的自身抗体生物标志物的阴性情况。

附图说明

以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中：

图1显示了治疗前显示自身抗体组合阳性或阴性的患者在治疗后肿瘤对免疫治疗的响应，其中图1-A：P_Ab.组合，图1-B：N_Ab.组合。

图2显示了治疗前显示自身抗体组合阳性或阴性的患者在治疗后的生存曲线，其中图2-A：训练集，图2-B：验证集。

图3显示了治疗前显示自身抗体组合阳性或阴性的患者在治疗后的生存曲线，其中图3-A至图3-RNP分别示出对应自身抗体组合A至自身抗体组合 RNP的结果。

图4显示了治疗前显示自身抗体组合阳性或阴性的患者在治疗后的生存曲线，其中图4-K至图4-P分别示出对应自身抗体组合K至自身抗体组合P 的结果。

图5显示了治疗前显示自身抗体或自身抗体组合阳性或阴性的患者在治疗后的生存曲线，其中图5-A：IMP2，图5-B：抗XAGE-1和抗NY-ESO-1。

图6显示了治疗前显示自身抗体组合阳性或阴性的患者在治疗后的生存曲线，其中图6-A：一线免疫治疗，图6-B：后线免疫治疗，图6-C：免疫单药治疗)，图6-D：免疫治疗结合化疗。

具体实施方式

在本发明中，术语“抗原”或术语“抗原蛋白”可互换使用。此外，本发明中涉及以下实验操作或定义。应注意，本发明还可采用本领域其他常规技术进行实施，并不仅限于以下实验操作。

(一)抗原蛋白的制备与固定

将肿瘤相关抗原(TAA)的cDNA克隆到含6XHis标记的PET28(a)表达载体上。在抗原的N端或C端，引入链霉亲和素蛋白或类似物(结合生物素的标签蛋白)。获得的重组表达载体转化大肠杆菌进行表达，当蛋白在包涵体表达后，用6M盐酸胍对蛋白进行变性处理，并在体外按照标准方法进行复性折叠，然后通过6XHis标签进行Ni-NTA亲和柱纯化，获得抗原蛋白。

(二)血浆的制备

在免疫治疗前一周至1天内取静脉血在EDTA处理过或柠檬酸处理过的采血管中。然后室温1000-2000RCF离心15min；离心后，在室温下轻轻地把上清转移到另一个干净的离心管中，置于-80℃冰箱中长期保存。

(三)自身抗体的ELISA检测与定量

将制得的抗原蛋白包被到96孔固相板的微孔表面。采用间接包被：96- 孔固相板过夜包被5-10ug/ml的生物素标记的牛血清白蛋白；第2天，洗去固相板微孔中未包被的牛血清白蛋白，加入300uL含有BSA的封闭液室温封闭1h；加入抗原蛋白孵育1.5h，然后洗去未吸附的抗原蛋白。包被抗原蛋白后，微孔中加入300ul的含有BSA的稳定液，孵育1h后现用或真空干燥备用。

如上，纯化的抗原蛋白通过生物素与链霉亲和素之间的特异反应间接包被到固相板表面。往包被抗原蛋白的微孔中加入稀释好的血浆样本，经孵育使血浆样本中的自身抗体与固相板表面上的抗原蛋白发生特异性结合。洗掉没有结合的自身抗体，加入辣根过氧化物酶标记抗人IgG抗体，第二次孵育使该酶标记抗人IgG抗体与吸附到固相板表面上的自身抗体结合，形成抗原 -抗体-酶标记抗体的复合物，继而洗掉没有结合的酶标记抗人IgG抗体，加入显色剂底物反应后用酶标仪在450nm波长下测定吸光度。最终通过与 cutoff值相比较来判断自身抗体检测结果为阴性还是阳性。检测步骤如下：

一、准备步骤

1.将检测用试剂放置室温至少30min使试剂恢复到室温。

2.稀释待测血浆样本：在1.5ml EP管内加入545ul的样本稀释液(PBS, 含1％BSA)，再将5ul待测血浆样本加入到样本稀释液中(可根据所需量自行调整样本量，血浆样本与样本稀释液的体积比为1:109)，上下颠倒5-6 次轻轻混匀。

3.将各待测血浆样本稀释混匀后，转移530ul到干净的深孔槽。

4.制备洗液工作液：将10倍PBST洗液，用纯化水或蒸馏水稀释10倍，配成原倍洗液，备用。

5.PBS缓冲液：自备，pH值为7.6。

二、检测步骤

1.加一抗：用PBS缓冲液270ul/孔洗酶标板1次后，向酶标板加入50ul/ 孔已经稀释好的待测血浆，室温在微孔振荡器上反应1h。

2.加二抗：使用前配制二抗(恢复到室温的辣根过氧化物酶标记抗人 IgG抗体浓缩液:酶结合物稀释液＝1:19，该稀释液为含1％BSA的PBS)。用 1*PBST洗液270ul/孔洗板3次，每次均拍干，然后以50ul/孔加入二抗稀释液，贴膜，室温在微孔振荡器上反应0.5h。

3.加显色剂：使用前配制显色剂(显色剂A液：显色剂B液＝1:19)。用1*洗液270ul/孔洗板3次，每次均拍干，然后以100ul/孔加入显色剂，加第一行开始计时，贴膜，室温在微孔振荡器上反应15min。

4.终止并读数：按照加入显色剂的顺序，加入终止液50ul/孔，在酶标仪450nm下读数。

5.阴阳性结果判断：OD值通过与cutoff值相比较来判断检测结果。

(四)自身抗体的临界值(cutoff值)

自身抗体水平的cutoff值被定义为等于对照组(经身体检查确认未患有癌症的人群)中健康对照队列的平均值加2个标准偏差(SD)。

(五)单个自身抗体的阳性判断

对样本中自身抗体的水平进行定量后，将其与cutoff值进行比较，≥cutoff值为阳性，＜cutoff值为阴性。

(六)自身抗体组合的阳性判断

由于单个自身抗体的阳性率低，为了增加自身抗体检出的阳性率，分析结果时联合多个自身抗体的结果来判断预测效果。规则是：在患者样本中检测多个自身抗体，只要有其中一个或者多个自身抗体显示阳性，则判断抗体组合结果为阳性；而如果所有的自身抗体均为阴性，则判断抗体组合结果为阴性。

(七)临床疗效评估指标

根据实体肿瘤的疗效评价标准1.1版(Response Evaluation Criteria in SolidTumors RECIST Version 1.1，RECIST v1.1)评估基线(治疗前) 时的目标病灶，记录目标病灶最长直径的基线和，用于确定客观反应。

BOR：最佳疗效，是指考虑了各种因素后确认的从治疗研究开始到治疗结束的最佳疗效的记录。

PD：与治疗前所有靶病灶直径和的最小值相比，所有靶病灶直径的总和至少增加20％且直径总和增加的绝对值还必须大于5mm；或者出现新的病灶。

PR：与治疗前所有靶病灶的直径和相比，所有靶病灶直径的总和至少减小30％。

SD：与治疗前所有靶病灶直径和的最小值相比，靶病灶的缩小程度不符合部分缓解(PR)，增大程度不符合疾病进展(PD)，是指一种介于PR和 PD之间的状态。

CR：所有靶病灶消失，任何病理性淋巴结(无论是否为靶病灶)的短轴值必须<10mm。

PFS：无进展生存时间，即从随机化开始至疾病复发或由于各种原因导致患者死亡的时间。

mPFS：中位无进展生存时间，即从随机化开始至疾病复发或由于各种原因导致患者死亡的中位时间。

PD-L1表达水平：采用免疫组化法进行，评估有任何强度PD-L1膜染色的肿瘤细胞在所有肿瘤细胞中所占的百分比，将检测结果分为四组，即阴性 (小于1％)，低表达组(1％-49％)，高表达组(≥50％)，未知。

(八)统计分析方法

使用GraphPad Prism v.6(Graphpad Prism软件，加利福尼亚州圣地亚哥)和针对Windows的IBM SPSS Statistics 23(IBM，纽约，纽约)，使用Mann–Whitney U检验对两组进行统计学分析。在分析每个参数之间的关系时，执行了Spearman的相关分析。通过Kaplan-Meier方法分析了中位无进展生存(median Progression Free Survival，mPFS)。使用对数秩检验分析患者亚组之间的mPFS差异。

以下参照具体的实施例来说明本发明。本领域技术人员能够理解，这些实施例仅用于说明本发明，其不以任何方式限制本发明的范围。样本采集已经患者知情同意，且获得监管部门(上海肺科医院审查委员会)的批准。

下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的药材原料、试剂材料等，如无特殊说明，均为市售购买产品。

实施例1

为了寻找能指示免疫治疗效果的自身抗体，首先用47例正常健康人(健康对照组)和47例诊断为肺癌患者(肺癌组)的血浆，检测肺癌患者是否存在针对纯化的抗原蛋白的自身抗体。健康对照组人群是体检人员中过去和现在没有被诊断为癌症的人。肺癌组人群为确诊为肺癌的患者，包括小细胞肺癌10人，肺鳞癌12人，肺腺癌19人，其他亚型肺癌6人，并在治疗前抽取血浆。实验人群信息见表1。

表1.初筛实验人群信息

为了平行对比各个抗原对应的自身抗体在健康对照组人群和肺癌组人群中的浓度，这里将每个抗原的检测特异性设定为≥93.6％(在47例的健康对照组人群中有≤6.4％的阳性率)；而就在肺癌组人群中的敏感性(阳性率，即自身抗体阳性占肺癌患者总人数47例的比例)，和其他文献发现的类似，单个自身抗体的阳性检出率低，通常在5-20％之间。因此，在初步筛选肺癌相关抗原中，根据敏感性将抗原蛋白分为四组。筛选的抗原蛋白以及经检测确定的灵敏度和特异性见表2。

表2.肿瘤相关抗原的初筛结果

实施例2

在免疫治疗患者(表3)的基线(治疗前)血浆中检测自身抗体，采用实施例1表2前面三组(敏感性>5％)的抗原蛋白，筛选和肺癌患者治疗疗效相关的自身抗体。

为了能筛选到适合临床应用的免疫治疗预测标志物，本研究尽量入组肺癌患者免疫治疗的各种场景。有38个肺癌患者使用免疫治疗为一线治疗，而40个肺癌患者先进行了化疗、靶向治疗等一种或多种治疗，然后再选择免疫治疗(后线治疗)。此外，入组患者使用的免疫治疗包括免疫检查点抑制剂，既包含进口的纳武单抗、派姆单抗，也包括国产的免疫检查点抑制剂 (表3)。无论是一线还是后线免疫治疗，肺癌患者的治疗方案包括两种情况：免疫治疗为单一疗法(25个患者)，或者免疫联合化疗(53个患者)。

首先，将初筛出来的肺癌相关抗原作为抗原蛋白，将一线免疫治疗患者的基线血浆作为“训练集”进行自身抗体的ELISA检测，然后将判断为阳性的自身抗体结果(参照上文所述的cutoff值)与肿瘤对免疫治疗的反应结果(BOR)进行比对。结果显示，自身抗体阳性的检测结果和免疫治疗疗效的关系归为三类(见表4)：

一部分肿瘤相关抗原属于“正相关”抗原，本发明中将针对这种抗原的自身抗体命名为“P_Ab.”，显示这种自身抗体阳性信号的患者均基本实现了BOR中“PR”和“SD”，即良好的疗效，并且患者人群整体上满足“PR”百分比/“PD”百分比≥2。将这类自身抗体初步确定为正向预测抗体，具有免疫治疗疗效良好的正向预测效果。

一部分肿瘤相关抗原属于“负相关”抗原，本发明中将针对这种抗原的自身抗体命名为“N_Ab.”，显示这种自身抗体阳性信号的患者均出现了BOR 中“PD”和“SD”，并且患者人群整体上满足“PD”百分比/“PR”百分比≥2。将这类自身抗体确定为负向预测抗体，具有免疫治疗疗效差的负向预测效果。初步确定，该正向预测抗体和负向预测抗体均可用于预测免疫治疗效果，分别具有免疫治疗疗效良好和差的预测效果。

另外一部分肿瘤相关抗原的自身抗体属于“相关性不显著”抗原，显示不能用来预测疗效。

表3.患者基线特征

表4.所采用的抗原蛋白以及检测到的自身抗体阳性与肿瘤对免疫疗法的响应的相关性

在使用一线免疫治疗患者为训练集，发现了潜在可以用来指导免疫治疗的标志物之后，接着使用联合后线免疫治疗(后线治疗是指之前的治疗失败后采用免疫治疗的患者，后线治疗的方式包括免疫单药治疗患者和免疫联合化疗治疗的患者(表3))作为“验证集”，来验证已发现的自身抗体是否仍有疗效预测的特性。

由于单个自身抗体的阳性率低，为了增加自身抗体检出的阳性率，分析结果时联合多个自身抗体的结果来判断预测效果。规则是：在患者中检测多个自身抗体，只要有其中一个或者多个自身抗体显示阳性，则判断抗体组合结果为阳性；而如果所有的自身抗体均为阴性，则判断抗体组合结果为阴性。此次检测选择抗Trim21自身抗体、抗BRACA2自身抗体、抗Annexin 1自身抗体和抗HUD抗体作为一个自身抗体组合。

在训练集和验证集中，用PD-1抑制剂治疗(所用的免疫检查点抑制剂包含进口的纳武单抗、派姆单抗，也包括国产的免疫检测点抑制剂，即为其中的任何一种)后患者显示出肿瘤对免疫治疗响应的百分比见图1。其中，图1-A(P_Ab.组合)中的“P_Ab.阳性”是指抗Trim21自身抗体、抗BRACA2 自身抗体、抗Annexin 1自身抗体和抗HUD抗体中有任一个阳性的患者(即抗体组合阳性)，“P_Ab.阴性”是指抗Trim21自身抗体、抗BRACA2自身抗体、抗Annexin 1自身抗体和抗HUD抗体均为阴性的患者(即抗体组合阴性)；图1-B(N_Ab.组合)中的“N_Ab.阳性”是指抗HSP105自身抗体和抗 AKAP4抗体中有任一个阳性的患者(即抗体组合阳性)，“N_Ab.阴性”是指抗HSP105自身抗体和抗AKAP4抗体均为阴性的患者(即抗体组合阴性)。

图1中的图1-A显示，在训练集(一线)中，正相关自身抗体组合阳性的患者在治疗后47.6％的患者治疗效果为“PR”，42％的患者治疗效果为“SD”， 9.5％的患者治疗效果为“PD”；而正相关自身抗体组合阴性的患者则出现了 28.6％的患者治疗效果为“PR”，50％的患者治疗效果为“SD”，21.4％的患者治疗效果为“PD”。在验证集(后线)中，正相关自身抗体组合阳性的患者在治疗后50％的患者治疗效果为“PR”，37.5％的患者治疗效果为“SD”，12.5％的患者治疗效果为“PD”；而正相关自身抗体组合阴性的患者在治疗后则有50％的患者治疗效果为“PD”和50％的患者治疗效果为“SD”。

图1中的图1-B显示，在训练集(一线)中，负相关自身抗体组合阳性的患者在治疗后50％的患者治疗效果为“PD”，50％的患者治疗效果为“SD”， 0％的患者治疗效果为“PR”。在验证集(后线)中，负相关自身抗体组合阳性的患者在治疗后42.9％的患者治疗效果为“PD”，42.9％的患者治疗效果为“SD”，14.3％的患者治疗效果为“PR”。

因此，证明了正相关自身抗体组合的联合检测能有效预测好的免疫治疗效果，而负相关自身抗体组合的联合检测能有效预测差的免疫治疗效果。

使用Kaplan-Meier方法分析训练集和验证集的患者的无进展生存，并绘制生存曲线。结果发现，正相关自身抗体组合阳性人群和阴性人群在无进展生存曲线上显示有很大的差别，其中在训练集(一线)中，抗体组合阳性的患者的中位无进展生存时间为大于10个月，而抗体组合阴性的患者为 5.52个月，p-值为0.0512，见图2中的图2-A；而在验证集(后线)中，同一组正相关自身抗体组合阳性的患者的中位无进展时间为7.56个月，而抗体组合阴性的患者为2.43个月，p-值小于0.005,见图2中的图2-B。

实施例3

由于同一个肺癌患者可能同时检测到几种均为阳性结果的抗体，需要确定是否联合采用数目更少的自身抗体，也能同样地预测免疫治疗的疗效，甚至达到更好的效果。

根据单个自身抗体阳性检测结果和BOR的相关性，预测7种肿瘤相关抗原的相应自身抗体和良好的免疫治疗效果最可能相关，从而可能有最佳的肿瘤免疫治疗响应预测效果。因此，分析了七种自身抗体的不同组合，包括其在肺癌患者中的抗体组合阳性比例(敏感性)，以及对应抗体组合检测结果阳性和阴性的两个不同组患者在无进展生存曲线上的差别，列出中位无进展时间和p-值，来寻找最佳的自身抗体组合。自身抗体的不同组合以及分析结果见表5。

表5.自身抗体组合及其阳性结果以及患者的中位无进展时间

相应地，患者用PD-1抑制剂治疗后的中位无进展时间(Kaplan-Meier 法)分别见图3中图3-A至图3-RNP。

实施例4

根据单个自身抗体阳性检测结果和BOR的相关性，预测4种肿瘤相关抗原的相应自身抗体和差的免疫治疗效果最可能相关，从而可能有最佳的肿瘤免疫治疗响应预测效果。因此，分析了四种自身抗体的不同组合，包括其在肺癌患者中的抗体阳性比例(敏感性)，以及对应抗体组合检测结果阳性和阴性的两个不同组患者在无进展生存曲线上的差别，列出中位无进展时间和 p-值，来寻找最佳的自身抗体组合。自身抗体的不同组合以及分析结果见表 6。

表6.自身抗体组合及其阳性结果以及患者的中位无进展时间

相应地，患者用PD-1抑制剂治疗后的中位无进展时间(Kaplan-Meier 法)分别见图4中图4-K至图4-P。

结果显示，抗HSP105和AKAP4的自身抗体组合能最好地预测差的免疫治疗效果，有分析统计意义。

实施例5

用PD-L1表达水平以及采用IMP2、XAGE-1和NY-ESO-1自身抗体作为预测方式，并观察患者对免疫疗法的响应，结果见表7。

在临床应用中，PD-L1作为用于预测免疫治疗效果的常用标志物。由于荧光检测PD-L1的组织表达量时需要使用肺癌患者合格的肿瘤组织样本，样本的来源不容易得到，并且出于其他原因，在本发明研究的免疫治疗的患者中，50％左右的患者没有PD-L1标志物的信息。

如表7中显示，有PD-L1表达的患者中，高的PD-L1表达量(>1％)的患者在治疗后出现了45.5％的PR，14.3％的SD，和15％的PD。低的PD-L1表达量(<1％)的患者中则在治疗后出现了4.5％的PR，28.6％的SD，和30％的 PD。如果把一线治疗和后线治疗区分开，数据结果类似。

作为对比，抗体组合R阳性患者在治疗后出现了68.2％的PR，22.9％的 SD和10％的PD；抗体组合RPN阳性患者在治疗后出现了72.7％的PR，28.6％的SD和15％的PD。这些自身抗体组合和PD-L1一样能较好地预测免疫治疗疗效。

作为对比，还分析了抗XAGE-1自身抗体和抗NY-ESO-1自身抗体两者联合和抗IMP2抗体单独对免疫治疗效果的预测效果。如表7中显示，抗XAGE-1 自身抗体和抗NY-ESO-1自身抗体组合阳性的患者预测了31.8％的PR，17.1％的SD，和20％的PD；IMP2抗体阳性的患者在治疗后出现了18.2％的PR，5.7％的SD，和10％的PD。同时，本研究中抗XAGE-1和抗NY-ESO-1自身抗体组合，和IMP2抗体分别进行Kaplan-Meier生存曲线分析。如图5中的图5-A显示， IMP2抗体阳性和阴性两组患者的中位无进展生存时间分别为10.02月和 5.52月，但P值为0.7867，没有统计意义。而如图5中的图5-B显示，抗XAGE-1和抗NY-ESO-1自身抗体组合结果阳性和阴性两组患者的生存曲线基本重叠，结果为阳性和阴性两组患者的中位无进展生存时间也不存在差别。因此，无论抗XAGE-1抗体和抗NY-ESO-1抗体的组合还是抗IMP2抗体，对患者采用免疫疗法的治疗效果的预测效果均并不特别理想。

表7.肿瘤自身抗体与其他预测方式以及对免疫治疗的响应预测对比 (人数(％))

实施例6

以检测自身抗体组合RNP为例，综合Trim21、BRCA2、Annexin1、HUD、 P53和NY-ESO-1自身抗体，其中任何一个抗体检测结果为阳性，判断结果为阳性，所有的抗体检测结果都为阴性，判断结果为阴性。分析结果见图6。

如图6中的图6-A(一线免疫治疗)和图6-B(后线免疫治疗)显示，一线免疫治疗的肺癌患者中，抗体组合阳性的风险比(HR：Hazard Ratio) (Mantel-Haenszel)预测值为0.2541(0.0684-0.8786)，抗体组合阳性和阴性两组患者的中位无进展生存时间分别为(>10月)和5.52月(P值为 0.0309)，在后线免疫治疗的肺癌患者中，抗体组合阳性的HR预测值为 0.2948(0.1409-0.6167))，抗体组合阳性和阴性两组患者的中位无进展生存时间分别为(8.18月)和2.43月(P值为0.0012)。如图6中的图6-C (免疫单药治疗)和图6-D(免疫治疗结合化疗)显示，在所有进行免疫单药治疗的患者中，抗体组合阳性的HR预测值为0.1876(0.0677-0.520)，抗体组合阳性和阴性两组患者的中位无进展生存时间分别为(>10月)和2.94 月(P值为0.0013)，而对于免疫治疗结合化疗的患者中，抗体组合阳性的 HR为0.3863(0.1714-0.8705),抗体组合阳性和阴性两组患者的中位无进展生存时间分别为(9.36月)和4.27月(P值为0.0218)。

以上对本发明具体实施方式的描述并不限制本发明，本领域技术人员可以根据本发明作出各种改变或变形，只要不脱离本发明的精神，均应属于本发明所附权利要求的范围。

序列表

<110> 杭州凯保罗生物科技有限公司

<120> 与肿瘤免疫治疗效果相关的生物标志物及其应用

<130> LC20110003

<160> 11

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 475

<212> PRT

<213> human

<400> 1

Met Ala Ser Ala Ala Arg Leu Thr Met Met Trp Glu Glu Val Thr Cys

1 5 10 15

Pro Ile Cys Leu Asp Pro Phe Val Glu Pro Val Ser Ile Glu Cys Gly

20 25 30

His Ser Phe Cys Gln Glu Cys Ile Ser Gln Val Gly Lys Gly Gly Gly

35 40 45

Ser Val Cys Pro Val Cys Arg Gln Arg Phe Leu Leu Lys Asn Leu Arg

50 55 60

Pro Asn Arg Gln Leu Ala Asn Met Val Asn Asn Leu Lys Glu Ile Ser

65 70 75 80

Gln Glu Ala Arg Glu Gly Thr Gln Gly Glu Arg Cys Ala Val His Gly

85 90 95

Glu Arg Leu His Leu Phe Cys Glu Lys Asp Gly Lys Ala Leu Cys Trp

100 105 110

Val Cys Ala Gln Ser Arg Lys His Arg Asp His Ala Met Val Pro Leu

115 120 125

Glu Glu Ala Ala Gln Glu Tyr Gln Glu Lys Leu Gln Val Ala Leu Gly

130 135 140

Glu Leu Arg Arg Lys Gln Glu Leu Ala Glu Lys Leu Glu Val Glu Ile

145 150 155 160

Ala Ile Lys Arg Ala Asp Trp Lys Lys Thr Val Glu Thr Gln Lys Ser

165 170 175

Arg Ile His Ala Glu Phe Val Gln Gln Lys Asn Phe Leu Val Glu Glu

180 185 190

Glu Gln Arg Gln Leu Gln Glu Leu Glu Lys Asp Glu Arg Glu Gln Leu

195 200 205

Arg Ile Leu Gly Glu Lys Glu Ala Lys Leu Ala Gln Gln Ser Gln Ala

210 215 220

Leu Gln Glu Leu Ile Ser Glu Leu Asp Arg Arg Cys His Ser Ser Ala

225 230 235 240

Leu Glu Leu Leu Gln Glu Val Ile Ile Val Leu Glu Arg Ser Glu Ser

245 250 255

Trp Asn Leu Lys Asp Leu Asp Ile Thr Ser Pro Glu Leu Arg Ser Val

260 265 270

Cys His Val Pro Gly Leu Lys Lys Met Leu Arg Thr Cys Ala Val His

275 280 285

Ile Thr Leu Asp Pro Asp Thr Ala Asn Pro Trp Leu Ile Leu Ser Glu

290 295 300

Asp Arg Arg Gln Val Arg Leu Gly Asp Thr Gln Gln Ser Ile Pro Gly

305 310 315 320

Asn Glu Glu Arg Phe Asp Ser Tyr Pro Met Val Leu Gly Ala Gln His

325 330 335

Phe His Ser Gly Lys His Tyr Trp Glu Val Asp Val Thr Gly Lys Glu

340 345 350

Ala Trp Asp Leu Gly Val Cys Arg Asp Ser Val Arg Arg Lys Gly His

355 360 365

Phe Leu Leu Ser Ser Lys Ser Gly Phe Trp Thr Ile Trp Leu Trp Asn

370 375 380

Lys Gln Lys Tyr Glu Ala Gly Thr Tyr Pro Gln Thr Pro Leu His Leu

385 390 395 400

Gln Val Pro Pro Cys Gln Val Gly Ile Phe Leu Asp Tyr Glu Ala Gly

405 410 415

Met Val Ser Phe Tyr Asn Ile Thr Asp His Gly Ser Leu Ile Tyr Ser

420 425 430

Phe Ser Glu Cys Ala Phe Thr Gly Pro Leu Arg Pro Phe Phe Ser Pro

435 440 445

Gly Phe Asn Asp Gly Gly Lys Asn Thr Ala Pro Leu Thr Leu Cys Pro

450 455 460

Leu Asn Ile Gly Ser Gln Gly Ser Thr Asp Tyr

465 470 475

<210> 2

<211> 3418

<212> PRT

<213> human

<400> 2

Met Pro Ile Gly Ser Lys Glu Arg Pro Thr Phe Phe Glu Ile Phe Lys

1 5 10 15

Thr Arg Cys Asn Lys Ala Asp Leu Gly Pro Ile Ser Leu Asn Trp Phe

20 25 30

Glu Glu Leu Ser Ser Glu Ala Pro Pro Tyr Asn Ser Glu Pro Ala Glu

35 40 45

Glu Ser Glu His Lys Asn Asn Asn Tyr Glu Pro Asn Leu Phe Lys Thr

50 55 60

Pro Gln Arg Lys Pro Ser Tyr Asn Gln Leu Ala Ser Thr Pro Ile Ile

65 70 75 80

Phe Lys Glu Gln Gly Leu Thr Leu Pro Leu Tyr Gln Ser Pro Val Lys

85 90 95

Glu Leu Asp Lys Phe Lys Leu Asp Leu Gly Arg Asn Val Pro Asn Ser

100 105 110

Arg His Lys Ser Leu Arg Thr Val Lys Thr Lys Met Asp Gln Ala Asp

115 120 125

Asp Val Ser Cys Pro Leu Leu Asn Ser Cys Leu Ser Glu Ser Pro Val

130 135 140

Val Leu Gln Cys Thr His Val Thr Pro Gln Arg Asp Lys Ser Val Val

145 150 155 160

Cys Gly Ser Leu Phe His Thr Pro Lys Phe Val Lys Gly Arg Gln Thr

165 170 175

Pro Lys His Ile Ser Glu Ser Leu Gly Ala Glu Val Asp Pro Asp Met

180 185 190

Ser Trp Ser Ser Ser Leu Ala Thr Pro Pro Thr Leu Ser Ser Thr Val

195 200 205

Leu Ile Val Arg Asn Glu Glu Ala Ser Glu Thr Val Phe Pro His Asp

210 215 220

Thr Thr Ala Asn Val Lys Ser Tyr Phe Ser Asn His Asp Glu Ser Leu

225 230 235 240

Lys Lys Asn Asp Arg Phe Ile Ala Ser Val Thr Asp Ser Glu Asn Thr

245 250 255

Asn Gln Arg Glu Ala Ala Ser His Gly Phe Gly Lys Thr Ser Gly Asn

260 265 270

Ser Phe Lys Val Asn Ser Cys Lys Asp His Ile Gly Lys Ser Met Pro

275 280 285

Asn Val Leu Glu Asp Glu Val Tyr Glu Thr Val Val Asp Thr Ser Glu

290 295 300

Glu Asp Ser Phe Ser Leu Cys Phe Ser Lys Cys Arg Thr Lys Asn Leu

305 310 315 320

Gln Lys Val Arg Thr Ser Lys Thr Arg Lys Lys Ile Phe His Glu Ala

325 330 335

Asn Ala Asp Glu Cys Glu Lys Ser Lys Asn Gln Val Lys Glu Lys Tyr

340 345 350

Ser Phe Val Ser Glu Val Glu Pro Asn Asp Thr Asp Pro Leu Asp Ser

355 360 365

Asn Val Ala Asn Gln Lys Pro Phe Glu Ser Gly Ser Asp Lys Ile Ser

370 375 380

Lys Glu Val Val Pro Ser Leu Ala Cys Glu Trp Ser Gln Leu Thr Leu

385 390 395 400

Ser Gly Leu Asn Gly Ala Gln Met Glu Lys Ile Pro Leu Leu His Ile

405 410 415

Ser Ser Cys Asp Gln Asn Ile Ser Glu Lys Asp Leu Leu Asp Thr Glu

420 425 430

Asn Lys Arg Lys Lys Asp Phe Leu Thr Ser Glu Asn Ser Leu Pro Arg

435 440 445

Ile Ser Ser Leu Pro Lys Ser Glu Lys Pro Leu Asn Glu Glu Thr Val

450 455 460

Val Asn Lys Arg Asp Glu Glu Gln His Leu Glu Ser His Thr Asp Cys

465 470 475 480

Ile Leu Ala Val Lys Gln Ala Ile Ser Gly Thr Ser Pro Val Ala Ser

485 490 495

Ser Phe Gln Gly Ile Lys Lys Ser Ile Phe Arg Ile Arg Glu Ser Pro

500 505 510

Lys Glu Thr Phe Asn Ala Ser Phe Ser Gly His Met Thr Asp Pro Asn

515 520 525

Phe Lys Lys Glu Thr Glu Ala Ser Glu Ser Gly Leu Glu Ile His Thr

530 535 540

Val Cys Ser Gln Lys Glu Asp Ser Leu Cys Pro Asn Leu Ile Asp Asn

545 550 555 560

Gly Ser Trp Pro Ala Thr Thr Thr Gln Asn Ser Val Ala Leu Lys Asn

565 570 575

Ala Gly Leu Ile Ser Thr Leu Lys Lys Lys Thr Asn Lys Phe Ile Tyr

580 585 590

Ala Ile His Asp Glu Thr Ser Tyr Lys Gly Lys Lys Ile Pro Lys Asp

595 600 605

Gln Lys Ser Glu Leu Ile Asn Cys Ser Ala Gln Phe Glu Ala Asn Ala

610 615 620

Phe Glu Ala Pro Leu Thr Phe Ala Asn Ala Asp Ser Gly Leu Leu His

625 630 635 640

Ser Ser Val Lys Arg Ser Cys Ser Gln Asn Asp Ser Glu Glu Pro Thr

645 650 655

Leu Ser Leu Thr Ser Ser Phe Gly Thr Ile Leu Arg Lys Cys Ser Arg

660 665 670

Asn Glu Thr Cys Ser Asn Asn Thr Val Ile Ser Gln Asp Leu Asp Tyr

675 680 685

Lys Glu Ala Lys Cys Asn Lys Glu Lys Leu Gln Leu Phe Ile Thr Pro

690 695 700

Glu Ala Asp Ser Leu Ser Cys Leu Gln Glu Gly Gln Cys Glu Asn Asp

705 710 715 720

Pro Lys Ser Lys Lys Val Ser Asp Ile Lys Glu Glu Val Leu Ala Ala

725 730 735

Ala Cys His Pro Val Gln His Ser Lys Val Glu Tyr Ser Asp Thr Asp

740 745 750

Phe Gln Ser Gln Lys Ser Leu Leu Tyr Asp His Glu Asn Ala Ser Thr

755 760 765

Leu Ile Leu Thr Pro Thr Ser Lys Asp Val Leu Ser Asn Leu Val Met

770 775 780

Ile Ser Arg Gly Lys Glu Ser Tyr Lys Met Ser Asp Lys Leu Lys Gly

785 790 795 800

Asn Asn Tyr Glu Ser Asp Val Glu Leu Thr Lys Asn Ile Pro Met Glu

805 810 815

Lys Asn Gln Asp Val Cys Ala Leu Asn Glu Asn Tyr Lys Asn Val Glu

820 825 830

Leu Leu Pro Pro Glu Lys Tyr Met Arg Val Ala Ser Pro Ser Arg Lys

835 840 845

Val Gln Phe Asn Gln Asn Thr Asn Leu Arg Val Ile Gln Lys Asn Gln

850 855 860

Glu Glu Thr Thr Ser Ile Ser Lys Ile Thr Val Asn Pro Asp Ser Glu

865 870 875 880

Glu Leu Phe Ser Asp Asn Glu Asn Asn Phe Val Phe Gln Val Ala Asn

885 890 895

Glu Arg Asn Asn Leu Ala Leu Gly Asn Thr Lys Glu Leu His Glu Thr

900 905 910

Asp Leu Thr Cys Val Asn Glu Pro Ile Phe Lys Asn Ser Thr Met Val

915 920 925

Leu Tyr Gly Asp Thr Gly Asp Lys Gln Ala Thr Gln Val Ser Ile Lys

930 935 940

Lys Asp Leu Val Tyr Val Leu Ala Glu Glu Asn Lys Asn Ser Val Lys

945 950 955 960

Gln His Ile Lys Met Thr Leu Gly Gln Asp Leu Lys Ser Asp Ile Ser

965 970 975

Leu Asn Ile Asp Lys Ile Pro Glu Lys Asn Asn Asp Tyr Met Asn Lys

980 985 990

Trp Ala Gly Leu Leu Gly Pro Ile Ser Asn His Ser Phe Gly Gly Ser

995 1000 1005

Phe Arg Thr Ala Ser Asn Lys Glu Ile Lys Leu Ser Glu His Asn Ile

1010 1015 1020

Lys Lys Ser Lys Met Phe Phe Lys Asp Ile Glu Glu Gln Tyr Pro Thr

1025 1030 1035 1040

Ser Leu Ala Cys Val Glu Ile Val Asn Thr Leu Ala Leu Asp Asn Gln

1045 1050 1055

Lys Lys Leu Ser Lys Pro Gln Ser Ile Asn Thr Val Ser Ala His Leu

1060 1065 1070

Gln Ser Ser Val Val Val Ser Asp Cys Lys Asn Ser His Ile Thr Pro

1075 1080 1085

Gln Met Leu Phe Ser Lys Gln Asp Phe Asn Ser Asn His Asn Leu Thr

1090 1095 1100

Pro Ser Gln Lys Ala Glu Ile Thr Glu Leu Ser Thr Ile Leu Glu Glu

1105 1110 1115 1120

Ser Gly Ser Gln Phe Glu Phe Thr Gln Phe Arg Lys Pro Ser Tyr Ile

1125 1130 1135

Leu Gln Lys Ser Thr Phe Glu Val Pro Glu Asn Gln Met Thr Ile Leu

1140 1145 1150

Lys Thr Thr Ser Glu Glu Cys Arg Asp Ala Asp Leu His Val Ile Met

1155 1160 1165

Asn Ala Pro Ser Ile Gly Gln Val Asp Ser Ser Lys Gln Phe Glu Gly

1170 1175 1180

Thr Val Glu Ile Lys Arg Lys Phe Ala Gly Leu Leu Lys Asn Asp Cys

1185 1190 1195 1200

Asn Lys Ser Ala Ser Gly Tyr Leu Thr Asp Glu Asn Glu Val Gly Phe

1205 1210 1215

Arg Gly Phe Tyr Ser Ala His Gly Thr Lys Leu Asn Val Ser Thr Glu

1220 1225 1230

Ala Leu Gln Lys Ala Val Lys Leu Phe Ser Asp Ile Glu Asn Ile Ser

1235 1240 1245

Glu Glu Thr Ser Ala Glu Val His Pro Ile Ser Leu Ser Ser Ser Lys

1250 1255 1260

Cys His Asp Ser Val Val Ser Met Phe Lys Ile Glu Asn His Asn Asp

1265 1270 1275 1280

Lys Thr Val Ser Glu Lys Asn Asn Lys Cys Gln Leu Ile Leu Gln Asn

1285 1290 1295

Asn Ile Glu Met Thr Thr Gly Thr Phe Val Glu Glu Ile Thr Glu Asn

1300 1305 1310

Tyr Lys Arg Asn Thr Glu Asn Glu Asp Asn Lys Tyr Thr Ala Ala Ser

1315 1320 1325

Arg Asn Ser His Asn Leu Glu Phe Asp Gly Ser Asp Ser Ser Lys Asn

1330 1335 1340

Asp Thr Val Cys Ile His Lys Asp Glu Thr Asp Leu Leu Phe Thr Asp

1345 1350 1355 1360

Gln His Asn Ile Cys Leu Lys Leu Ser Gly Gln Phe Met Lys Glu Gly

1365 1370 1375

Asn Thr Gln Ile Lys Glu Asp Leu Ser Asp Leu Thr Phe Leu Glu Val

1380 1385 1390

Ala Lys Ala Gln Glu Ala Cys His Gly Asn Thr Ser Asn Lys Glu Gln

1395 1400 1405

Leu Thr Ala Thr Lys Thr Glu Gln Asn Ile Lys Asp Phe Glu Thr Ser

1410 1415 1420

Asp Thr Phe Phe Gln Thr Ala Ser Gly Lys Asn Ile Ser Val Ala Lys

1425 1430 1435 1440

Glu Ser Phe Asn Lys Ile Val Asn Phe Phe Asp Gln Lys Pro Glu Glu

1445 1450 1455

Leu His Asn Phe Ser Leu Asn Ser Glu Leu His Ser Asp Ile Arg Lys

1460 1465 1470

Asn Lys Met Asp Ile Leu Ser Tyr Glu Glu Thr Asp Ile Val Lys His

1475 1480 1485

Lys Ile Leu Lys Glu Ser Val Pro Val Gly Thr Gly Asn Gln Leu Val

1490 1495 1500

Thr Phe Gln Gly Gln Pro Glu Arg Asp Glu Lys Ile Lys Glu Pro Thr

1505 1510 1515 1520

Leu Leu Gly Phe His Thr Ala Ser Gly Lys Lys Val Lys Ile Ala Lys

1525 1530 1535

Glu Ser Leu Asp Lys Val Lys Asn Leu Phe Asp Glu Lys Glu Gln Gly

1540 1545 1550

Thr Ser Glu Ile Thr Ser Phe Ser His Gln Trp Ala Lys Thr Leu Lys

1555 1560 1565

Tyr Arg Glu Ala Cys Lys Asp Leu Glu Leu Ala Cys Glu Thr Ile Glu

1570 1575 1580

Ile Thr Ala Ala Pro Lys Cys Lys Glu Met Gln Asn Ser Leu Asn Asn

1585 1590 1595 1600

Asp Lys Asn Leu Val Ser Ile Glu Thr Val Val Pro Pro Lys Leu Leu

1605 1610 1615

Ser Asp Asn Leu Cys Arg Gln Thr Glu Asn Leu Lys Thr Ser Lys Ser

1620 1625 1630

Ile Phe Leu Lys Val Lys Val His Glu Asn Val Glu Lys Glu Thr Ala

1635 1640 1645

Lys Ser Pro Ala Thr Cys Tyr Thr Asn Gln Ser Pro Tyr Ser Val Ile

1650 1655 1660

Glu Asn Ser Ala Leu Ala Phe Tyr Thr Ser Cys Ser Arg Lys Thr Ser

1665 1670 1675 1680

Val Ser Gln Thr Ser Leu Leu Glu Ala Lys Lys Trp Leu Arg Glu Gly

1685 1690 1695

Ile Phe Asp Gly Gln Pro Glu Arg Ile Asn Thr Ala Asp Tyr Val Gly

1700 1705 1710

Asn Tyr Leu Tyr Glu Asn Asn Ser Asn Ser Thr Ile Ala Glu Asn Asp

1715 1720 1725

Lys Asn His Leu Ser Glu Lys Gln Asp Thr Tyr Leu Ser Asn Ser Ser

1730 1735 1740

Met Ser Asn Ser Tyr Ser Tyr His Ser Asp Glu Val Tyr Asn Asp Ser

1745 1750 1755 1760

Gly Tyr Leu Ser Lys Asn Lys Leu Asp Ser Gly Ile Glu Pro Val Leu

1765 1770 1775

Lys Asn Val Glu Asp Gln Lys Asn Thr Ser Phe Ser Lys Val Ile Ser

1780 1785 1790

Asn Val Lys Asp Ala Asn Ala Tyr Pro Gln Thr Val Asn Glu Asp Ile

1795 1800 1805

Cys Val Glu Glu Leu Val Thr Ser Ser Ser Pro Cys Lys Asn Lys Asn

1810 1815 1820

Ala Ala Ile Lys Leu Ser Ile Ser Asn Ser Asn Asn Phe Glu Val Gly

1825 1830 1835 1840

Pro Pro Ala Phe Arg Ile Ala Ser Gly Lys Ile Val Cys Val Ser His

1845 1850 1855

Glu Thr Ile Lys Lys Val Lys Asp Ile Phe Thr Asp Ser Phe Ser Lys

1860 1865 1870

Val Ile Lys Glu Asn Asn Glu Asn Lys Ser Lys Ile Cys Gln Thr Lys

1875 1880 1885

Ile Met Ala Gly Cys Tyr Glu Ala Leu Asp Asp Ser Glu Asp Ile Leu

1890 1895 1900

His Asn Ser Leu Asp Asn Asp Glu Cys Ser Thr His Ser His Lys Val

1905 1910 1915 1920

Phe Ala Asp Ile Gln Ser Glu Glu Ile Leu Gln His Asn Gln Asn Met

1925 1930 1935

Ser Gly Leu Glu Lys Val Ser Lys Ile Ser Pro Cys Asp Val Ser Leu

1940 1945 1950

Glu Thr Ser Asp Ile Cys Lys Cys Ser Ile Gly Lys Leu His Lys Ser

1955 1960 1965

Val Ser Ser Ala Asn Thr Cys Gly Ile Phe Ser Thr Ala Ser Gly Lys

1970 1975 1980

Ser Val Gln Val Ser Asp Ala Ser Leu Gln Asn Ala Arg Gln Val Phe

1985 1990 1995 2000

Ser Glu Ile Glu Asp Ser Thr Lys Gln Val Phe Ser Lys Val Leu Phe

2005 2010 2015

Lys Ser Asn Glu His Ser Asp Gln Leu Thr Arg Glu Glu Asn Thr Ala

2020 2025 2030

Ile Arg Thr Pro Glu His Leu Ile Ser Gln Lys Gly Phe Ser Tyr Asn

2035 2040 2045

Val Val Asn Ser Ser Ala Phe Ser Gly Phe Ser Thr Ala Ser Gly Lys

2050 2055 2060

Gln Val Ser Ile Leu Glu Ser Ser Leu His Lys Val Lys Gly Val Leu

2065 2070 2075 2080

Glu Glu Phe Asp Leu Ile Arg Thr Glu His Ser Leu His Tyr Ser Pro

2085 2090 2095

Thr Ser Arg Gln Asn Val Ser Lys Ile Leu Pro Arg Val Asp Lys Arg

2100 2105 2110

Asn Pro Glu His Cys Val Asn Ser Glu Met Glu Lys Thr Cys Ser Lys

2115 2120 2125

Glu Phe Lys Leu Ser Asn Asn Leu Asn Val Glu Gly Gly Ser Ser Glu

2130 2135 2140

Asn Asn His Ser Ile Lys Val Ser Pro Tyr Leu Ser Gln Phe Gln Gln

2145 2150 2155 2160

Asp Lys Gln Gln Leu Val Leu Gly Thr Lys Val Ser Leu Val Glu Asn

2165 2170 2175

Ile His Val Leu Gly Lys Glu Gln Ala Ser Pro Lys Asn Val Lys Met

2180 2185 2190

Glu Ile Gly Lys Thr Glu Thr Phe Ser Asp Val Pro Val Lys Thr Asn

2195 2200 2205

Ile Glu Val Cys Ser Thr Tyr Ser Lys Asp Ser Glu Asn Tyr Phe Glu

2210 2215 2220

Thr Glu Ala Val Glu Ile Ala Lys Ala Phe Met Glu Asp Asp Glu Leu

2225 2230 2235 2240

Thr Asp Ser Lys Leu Pro Ser His Ala Thr His Ser Leu Phe Thr Cys

2245 2250 2255

Pro Glu Asn Glu Glu Met Val Leu Ser Asn Ser Arg Ile Gly Lys Arg

2260 2265 2270

Arg Gly Glu Pro Leu Ile Leu Val Gly Glu Pro Ser Ile Lys Arg Asn

2275 2280 2285

Leu Leu Asn Glu Phe Asp Arg Ile Ile Glu Asn Gln Glu Lys Ser Leu

2290 2295 2300

Lys Ala Ser Lys Ser Thr Pro Asp Gly Thr Ile Lys Asp Arg Arg Leu

2305 2310 2315 2320

Phe Met His His Val Ser Leu Glu Pro Ile Thr Cys Val Pro Phe Arg

2325 2330 2335

Thr Thr Lys Glu Arg Gln Glu Ile Gln Asn Pro Asn Phe Thr Ala Pro

2340 2345 2350

Gly Gln Glu Phe Leu Ser Lys Ser His Leu Tyr Glu His Leu Thr Leu

2355 2360 2365

Glu Lys Ser Ser Ser Asn Leu Ala Val Ser Gly His Pro Phe Tyr Gln

2370 2375 2380

Val Ser Ala Thr Arg Asn Glu Lys Met Arg His Leu Ile Thr Thr Gly

2385 2390 2395 2400

Arg Pro Thr Lys Val Phe Val Pro Pro Phe Lys Thr Lys Ser His Phe

2405 2410 2415

His Arg Val Glu Gln Cys Val Arg Asn Ile Asn Leu Glu Glu Asn Arg

2420 2425 2430

Gln Lys Gln Asn Ile Asp Gly His Gly Ser Asp Asp Ser Lys Asn Lys

2435 2440 2445

Ile Asn Asp Asn Glu Ile His Gln Phe Asn Lys Asn Asn Ser Asn Gln

2450 2455 2460

Ala Ala Ala Val Thr Phe Thr Lys Cys Glu Glu Glu Pro Leu Asp Leu

2465 2470 2475 2480

Ile Thr Ser Leu Gln Asn Ala Arg Asp Ile Gln Asp Met Arg Ile Lys

2485 2490 2495

Lys Lys Gln Arg Gln Arg Val Phe Pro Gln Pro Gly Ser Leu Tyr Leu

2500 2505 2510

Ala Lys Thr Ser Thr Leu Pro Arg Ile Ser Leu Lys Ala Ala Val Gly

2515 2520 2525

Gly Gln Val Pro Ser Ala Cys Ser His Lys Gln Leu Tyr Thr Tyr Gly

2530 2535 2540

Val Ser Lys His Cys Ile Lys Ile Asn Ser Lys Asn Ala Glu Ser Phe

2545 2550 2555 2560

Gln Phe His Thr Glu Asp Tyr Phe Gly Lys Glu Ser Leu Trp Thr Gly

2565 2570 2575

Lys Gly Ile Gln Leu Ala Asp Gly Gly Trp Leu Ile Pro Ser Asn Asp

2580 2585 2590

Gly Lys Ala Gly Lys Glu Glu Phe Tyr Arg Ala Leu Cys Asp Thr Pro

2595 2600 2605

Gly Val Asp Pro Lys Leu Ile Ser Arg Ile Trp Val Tyr Asn His Tyr

2610 2615 2620

Arg Trp Ile Ile Trp Lys Leu Ala Ala Met Glu Cys Ala Phe Pro Lys

2625 2630 2635 2640

Glu Phe Ala Asn Arg Cys Leu Ser Pro Glu Arg Val Leu Leu Gln Leu

2645 2650 2655

Lys Tyr Arg Tyr Asp Thr Glu Ile Asp Arg Ser Arg Arg Ser Ala Ile

2660 2665 2670

Lys Lys Ile Met Glu Arg Asp Asp Thr Ala Ala Lys Thr Leu Val Leu

2675 2680 2685

Cys Val Ser Asp Ile Ile Ser Leu Ser Ala Asn Ile Ser Glu Thr Ser

2690 2695 2700

Ser Asn Lys Thr Ser Ser Ala Asp Thr Gln Lys Val Ala Ile Ile Glu

2705 2710 2715 2720

Leu Thr Asp Gly Trp Tyr Ala Val Lys Ala Gln Leu Asp Pro Pro Leu

2725 2730 2735

Leu Ala Val Leu Lys Asn Gly Arg Leu Thr Val Gly Gln Lys Ile Ile

2740 2745 2750

Leu His Gly Ala Glu Leu Val Gly Ser Pro Asp Ala Cys Thr Pro Leu

2755 2760 2765

Glu Ala Pro Glu Ser Leu Met Leu Lys Ile Ser Ala Asn Ser Thr Arg

2770 2775 2780

Pro Ala Arg Trp Tyr Thr Lys Leu Gly Phe Phe Pro Asp Pro Arg Pro

2785 2790 2795 2800

Phe Pro Leu Pro Leu Ser Ser Leu Phe Ser Asp Gly Gly Asn Val Gly

2805 2810 2815

Cys Val Asp Val Ile Ile Gln Arg Ala Tyr Pro Ile Gln Trp Met Glu

2820 2825 2830

Lys Thr Ser Ser Gly Leu Tyr Ile Phe Arg Asn Glu Arg Glu Glu Glu

2835 2840 2845

Lys Glu Ala Ala Lys Tyr Val Glu Ala Gln Gln Lys Arg Leu Glu Ala

2850 2855 2860

Leu Phe Thr Lys Ile Gln Glu Glu Phe Glu Glu His Glu Glu Asn Thr

2865 2870 2875 2880

Thr Lys Pro Tyr Leu Pro Ser Arg Ala Leu Thr Arg Gln Gln Val Arg

2885 2890 2895

Ala Leu Gln Asp Gly Ala Glu Leu Tyr Glu Ala Val Lys Asn Ala Ala

2900 2905 2910

Asp Pro Ala Tyr Leu Glu Gly Tyr Phe Ser Glu Glu Gln Leu Arg Ala

2915 2920 2925

Leu Asn Asn His Arg Gln Met Leu Asn Asp Lys Lys Gln Ala Gln Ile

2930 2935 2940

Gln Leu Glu Ile Arg Lys Ala Met Glu Ser Ala Glu Gln Lys Glu Gln

2945 2950 2955 2960

Gly Leu Ser Arg Asp Val Thr Thr Val Trp Lys Leu Arg Ile Val Ser

2965 2970 2975

Tyr Ser Lys Lys Glu Lys Asp Ser Val Ile Leu Ser Ile Trp Arg Pro

2980 2985 2990

Ser Ser Asp Leu Tyr Ser Leu Leu Thr Glu Gly Lys Arg Tyr Arg Ile

2995 3000 3005

Tyr His Leu Ala Thr Ser Lys Ser Lys Ser Lys Ser Glu Arg Ala Asn

3010 3015 3020

Ile Gln Leu Ala Ala Thr Lys Lys Thr Gln Tyr Gln Gln Leu Pro Val

3025 3030 3035 3040

Ser Asp Glu Ile Leu Phe Gln Ile Tyr Gln Pro Arg Glu Pro Leu His

3045 3050 3055

Phe Ser Lys Phe Leu Asp Pro Asp Phe Gln Pro Ser Cys Ser Glu Val

3060 3065 3070

Asp Leu Ile Gly Phe Val Val Ser Val Val Lys Lys Thr Gly Leu Ala

3075 3080 3085

Pro Phe Val Tyr Leu Ser Asp Glu Cys Tyr Asn Leu Leu Ala Ile Lys

3090 3095 3100

Phe Trp Ile Asp Leu Asn Glu Asp Ile Ile Lys Pro His Met Leu Ile

3105 3110 3115 3120

Ala Ala Ser Asn Leu Gln Trp Arg Pro Glu Ser Lys Ser Gly Leu Leu

3125 3130 3135

Thr Leu Phe Ala Gly Asp Phe Ser Val Phe Ser Ala Ser Pro Lys Glu

3140 3145 3150

Gly His Phe Gln Glu Thr Phe Asn Lys Met Lys Asn Thr Val Glu Asn

3155 3160 3165

Ile Asp Ile Leu Cys Asn Glu Ala Glu Asn Lys Leu Met His Ile Leu

3170 3175 3180

His Ala Asn Asp Pro Lys Trp Ser Thr Pro Thr Lys Asp Cys Thr Ser

3185 3190 3195 3200

Gly Pro Tyr Thr Ala Gln Ile Ile Pro Gly Thr Gly Asn Lys Leu Leu

3205 3210 3215

Met Ser Ser Pro Asn Cys Glu Ile Tyr Tyr Gln Ser Pro Leu Ser Leu

3220 3225 3230

Cys Met Ala Lys Arg Lys Ser Val Ser Thr Pro Val Ser Ala Gln Met

3235 3240 3245

Thr Ser Lys Ser Cys Lys Gly Glu Lys Glu Ile Asp Asp Gln Lys Asn

3250 3255 3260

Cys Lys Lys Arg Arg Ala Leu Asp Phe Leu Ser Arg Leu Pro Leu Pro

3265 3270 3275 3280

Pro Pro Val Ser Pro Ile Cys Thr Phe Val Ser Pro Ala Ala Gln Lys

3285 3290 3295

Ala Phe Gln Pro Pro Arg Ser Cys Gly Thr Lys Tyr Glu Thr Pro Ile

3300 3305 3310

Lys Lys Lys Glu Leu Asn Ser Pro Gln Met Thr Pro Phe Lys Lys Phe

3315 3320 3325

Asn Glu Ile Ser Leu Leu Glu Ser Asn Ser Ile Ala Asp Glu Glu Leu

3330 3335 3340

Ala Leu Ile Asn Thr Gln Ala Leu Leu Ser Gly Ser Thr Gly Glu Lys

3345 3350 3355 3360

Gln Phe Ile Ser Val Ser Glu Ser Thr Arg Thr Ala Pro Thr Ser Ser

3365 3370 3375

Glu Asp Tyr Leu Arg Leu Lys Arg Arg Cys Thr Thr Ser Leu Ile Lys

3380 3385 3390

Glu Gln Glu Ser Ser Gln Ala Ser Thr Glu Glu Cys Glu Lys Asn Lys

3395 3400 3405

Gln Asp Thr Ile Thr Thr Lys Lys Tyr Ile

3410 3415

<210> 3

<211> 346

<212> PRT

<213> human

<400> 3

Met Ala Met Val Ser Glu Phe Leu Lys Gln Ala Trp Phe Ile Glu Asn

1 5 10 15

Glu Glu Gln Glu Tyr Val Gln Thr Val Lys Ser Ser Lys Gly Gly Pro

20 25 30

Gly Ser Ala Val Ser Pro Tyr Pro Thr Phe Asn Pro Ser Ser Asp Val

35 40 45

Ala Ala Leu His Lys Ala Ile Met Val Lys Gly Val Asp Glu Ala Thr

50 55 60

Ile Ile Asp Ile Leu Thr Lys Arg Asn Asn Ala Gln Arg Gln Gln Ile

65 70 75 80

Lys Ala Ala Tyr Leu Gln Glu Thr Gly Lys Pro Leu Asp Glu Thr Leu

85 90 95

Lys Lys Ala Leu Thr Gly His Leu Glu Glu Val Val Leu Ala Leu Leu

100 105 110

Lys Thr Pro Ala Gln Phe Asp Ala Asp Glu Leu Arg Ala Ala Met Lys

115 120 125

Gly Leu Gly Thr Asp Glu Asp Thr Leu Ile Glu Ile Leu Ala Ser Arg

130 135 140

Thr Asn Lys Glu Ile Arg Asp Ile Asn Arg Val Tyr Arg Glu Glu Leu

145 150 155 160

Lys Arg Asp Leu Ala Lys Asp Ile Thr Ser Asp Thr Ser Gly Asp Phe

165 170 175

Arg Asn Ala Leu Leu Ser Leu Ala Lys Gly Asp Arg Ser Glu Asp Phe

180 185 190

Gly Val Asn Glu Asp Leu Ala Asp Ser Asp Ala Arg Ala Leu Tyr Glu

195 200 205

Ala Gly Glu Arg Arg Lys Gly Thr Asp Val Asn Val Phe Asn Thr Ile

210 215 220

Leu Thr Thr Arg Ser Tyr Pro Gln Leu Arg Arg Val Phe Gln Lys Tyr

225 230 235 240

Thr Lys Tyr Ser Lys His Asp Met Asn Lys Val Leu Asp Leu Glu Leu

245 250 255

Lys Gly Asp Ile Glu Lys Cys Leu Thr Ala Ile Val Lys Cys Ala Thr

260 265 270

Ser Lys Pro Ala Phe Phe Ala Glu Lys Leu His Gln Ala Met Lys Gly

275 280 285

Val Gly Thr Arg His Lys Ala Leu Ile Arg Ile Met Val Ser Arg Ser

290 295 300

Glu Ile Asp Met Asn Asp Ile Lys Ala Phe Tyr Gln Lys Met Tyr Gly

305 310 315 320

Ile Ser Leu Cys Gln Ala Ile Leu Asp Glu Thr Lys Gly Asp Tyr Glu

325 330 335

Lys Ile Leu Val Ala Leu Cys Gly Gly Asn

340 345

<210> 4

<211> 385

<212> PRT

<213> human

<400> 4

Met Glu Trp Asn Gly Leu Lys Met Ile Ile Ser Thr Met Glu Pro Gln

1 5 10 15

Val Ser Asn Gly Pro Thr Ser Asn Thr Ser Asn Gly Pro Ser Ser Asn

20 25 30

Asn Arg Asn Cys Pro Ser Pro Met Gln Thr Gly Ala Thr Thr Asp Asp

35 40 45

Ser Lys Thr Asn Leu Ile Val Asn Tyr Leu Pro Gln Asn Met Thr Gln

50 55 60

Glu Glu Phe Arg Ser Leu Phe Gly Ser Ile Gly Glu Ile Glu Ser Cys

65 70 75 80

Lys Leu Val Arg Asp Lys Ile Thr Gly Gln Ser Leu Gly Tyr Gly Phe

85 90 95

Val Asn Tyr Ile Asp Pro Lys Asp Ala Glu Lys Ala Ile Asn Thr Leu

100 105 110

Asn Gly Leu Arg Leu Gln Thr Lys Thr Ile Lys Val Ser Tyr Ala Arg

115 120 125

Pro Ser Ser Ala Ser Ile Arg Asp Ala Asn Leu Tyr Val Ser Gly Leu

130 135 140

Pro Lys Thr Met Thr Gln Lys Glu Leu Glu Gln Leu Phe Ser Gln Tyr

145 150 155 160

Gly Arg Ile Ile Thr Ser Arg Ile Leu Val Asp Gln Val Thr Gly Val

165 170 175

Ser Arg Gly Val Gly Phe Ile Arg Phe Asp Lys Arg Ile Glu Ala Glu

180 185 190

Glu Ala Ile Lys Gly Leu Asn Gly Gln Lys Pro Ser Gly Ala Thr Glu

195 200 205

Pro Ile Thr Val Lys Phe Ala Asn Asn Pro Ser Gln Lys Ser Ser Gln

210 215 220

Ala Leu Leu Ser Gln Leu Tyr Gln Ser Pro Asn Arg Arg Tyr Pro Gly

225 230 235 240

Pro Leu His His Gln Ala Gln Arg Phe Arg Leu Asp Asn Leu Leu Asn

245 250 255

Met Ala Tyr Gly Val Lys Arg Leu Met Ser Gly Pro Val Pro Pro Ser

260 265 270

Ala Cys Pro Pro Arg Phe Ser Pro Ile Thr Ile Asp Gly Met Thr Ser

275 280 285

Leu Val Gly Met Asn Ile Pro Gly His Thr Gly Thr Gly Trp Cys Ile

290 295 300

Phe Val Tyr Asn Leu Ser Pro Asp Ser Asp Glu Ser Val Leu Trp Gln

305 310 315 320

Leu Phe Gly Pro Phe Gly Ala Val Asn Asn Val Lys Val Ile Arg Asp

325 330 335

Phe Asn Thr Asn Lys Cys Lys Gly Phe Gly Phe Val Thr Met Thr Asn

340 345 350

Tyr Asp Glu Ala Ala Met Ala Ile Ala Ser Leu Asn Gly Tyr Arg Leu

355 360 365

Gly Asp Arg Val Leu Gln Val Ser Phe Lys Thr Asn Lys Ala His Lys

370 375 380

Ser

385

<210> 5

<211> 180

<212> PRT

<213> human

<400> 5

Met Gln Ala Glu Gly Arg Gly Thr Gly Gly Ser Thr Gly Asp Ala Asp

1 5 10 15

Gly Pro Gly Gly Pro Gly Ile Pro Asp Gly Pro Gly Gly Asn Ala Gly

20 25 30

Gly Pro Gly Glu Ala Gly Ala Thr Gly Gly Arg Gly Pro Arg Gly Ala

35 40 45

Gly Ala Ala Arg Ala Ser Gly Pro Gly Gly Gly Ala Pro Arg Gly Pro

50 55 60

His Gly Gly Ala Ala Ser Gly Leu Asn Gly Cys Cys Arg Cys Gly Ala

65 70 75 80

Arg Gly Pro Glu Ser Arg Leu Leu Glu Phe Tyr Leu Ala Met Pro Phe

85 90 95

Ala Thr Pro Met Glu Ala Glu Leu Ala Arg Arg Ser Leu Ala Gln Asp

100 105 110

Ala Pro Pro Leu Pro Val Pro Gly Val Leu Leu Lys Glu Phe Thr Val

115 120 125

Ser Gly Asn Ile Leu Thr Ile Arg Leu Thr Ala Ala Asp His Arg Gln

130 135 140

Leu Gln Leu Ser Ile Ser Ser Cys Leu Gln Gln Leu Ser Leu Leu Met

145 150 155 160

Trp Ile Thr Gln Cys Phe Leu Pro Val Phe Leu Ala Gln Pro Pro Ser

165 170 175

Gly Gln Arg Arg

180

<210> 6

<211> 393

<212> PRT

<213> human

<400> 6

Met Glu Glu Pro Gln Ser Asp Pro Ser Val Glu Pro Pro Leu Ser Gln

1 5 10 15

Glu Thr Phe Ser Asp Leu Trp Lys Leu Leu Pro Glu Asn Asn Val Leu

20 25 30

Ser Pro Leu Pro Ser Gln Ala Met Asp Asp Leu Met Leu Ser Pro Asp

35 40 45

Asp Ile Glu Gln Trp Phe Thr Glu Asp Pro Gly Pro Asp Glu Ala Pro

50 55 60

Arg Met Pro Glu Ala Ala Pro Pro Val Ala Pro Ala Pro Ala Ala Pro

65 70 75 80

Thr Pro Ala Ala Pro Ala Pro Ala Pro Ser Trp Pro Leu Ser Ser Ser

85 90 95

Val Pro Ser Gln Lys Thr Tyr Gln Gly Ser Tyr Gly Phe Arg Leu Gly

100 105 110

Phe Leu His Ser Gly Thr Ala Lys Ser Val Thr Cys Thr Tyr Ser Pro

115 120 125

Ala Leu Asn Lys Met Phe Cys Gln Leu Ala Lys Thr Cys Pro Val Gln

130 135 140

Leu Trp Val Asp Ser Thr Pro Pro Pro Gly Thr Arg Val Arg Ala Met

145 150 155 160

Ala Ile Tyr Lys Gln Ser Gln His Met Thr Glu Val Val Arg Arg Cys

165 170 175

Pro His His Glu Arg Cys Ser Asp Ser Asp Gly Leu Ala Pro Pro Gln

180 185 190

His Leu Ile Arg Val Glu Gly Asn Leu Arg Val Glu Tyr Leu Asp Asp

195 200 205

Arg Asn Thr Phe Arg His Ser Val Val Val Pro Tyr Glu Pro Pro Glu

210 215 220

Val Gly Ser Asp Cys Thr Thr Ile His Tyr Asn Tyr Met Cys Asn Ser

225 230 235 240

Ser Cys Met Gly Gly Met Asn Arg Arg Pro Ile Leu Thr Ile Ile Thr

245 250 255

Leu Glu Asp Ser Ser Gly Asn Leu Leu Gly Arg Asn Ser Phe Glu Val

260 265 270

Arg Val Cys Ala Cys Pro Gly Arg Asp Arg Arg Thr Glu Glu Glu Asn

275 280 285

Leu Arg Lys Lys Gly Glu Pro His His Glu Leu Pro Pro Gly Ser Thr

290 295 300

Lys Arg Ala Leu Pro Asn Asn Thr Ser Ser Ser Pro Gln Pro Lys Lys

305 310 315 320

Lys Pro Leu Asp Gly Glu Tyr Phe Thr Leu Gln Ile Arg Gly Arg Glu

325 330 335

Arg Phe Glu Met Phe Arg Glu Leu Asn Glu Ala Leu Glu Leu Lys Asp

340 345 350

Ala Gln Ala Gly Lys Glu Pro Gly Gly Ser Arg Ala His Ser Ser His

355 360 365

Leu Lys Ser Lys Lys Gly Gln Ser Thr Ser Arg His Lys Lys Leu Met

370 375 380

Phe Lys Thr Glu Gly Pro Asp Ser Asp

385 390

<210> 7

<211> 599

<212> PRT

<213> human

<400> 7

Met Met Asn Lys Leu Tyr Ile Gly Asn Leu Ser Pro Ala Val Thr Ala

1 5 10 15

Asp Asp Leu Arg Gln Leu Phe Gly Asp Arg Lys Leu Pro Leu Ala Gly

20 25 30

Gln Val Leu Leu Lys Ser Gly Tyr Ala Phe Val Asp Tyr Pro Asp Gln

35 40 45

Asn Trp Ala Ile Arg Ala Ile Glu Thr Leu Ser Gly Lys Val Glu Leu

50 55 60

His Gly Lys Ile Met Glu Val Asp Tyr Ser Val Ser Lys Lys Leu Arg

65 70 75 80

Ser Arg Lys Ile Gln Ile Arg Asn Ile Pro Pro His Leu Gln Trp Glu

85 90 95

Val Leu Asp Gly Leu Leu Ala Gln Tyr Gly Thr Val Glu Asn Val Glu

100 105 110

Gln Val Asn Thr Asp Thr Glu Thr Ala Val Val Asn Val Thr Tyr Ala

115 120 125

Thr Arg Glu Glu Ala Lys Ile Ala Met Glu Lys Leu Ser Gly His Gln

130 135 140

Phe Glu Asn Tyr Ser Phe Lys Ile Ser Tyr Ile Pro Asp Glu Glu Val

145 150 155 160

Ser Ser Pro Ser Pro Pro Gln Arg Ala Gln Arg Gly Asp His Ser Ser

165 170 175

Arg Glu Gln Gly His Ala Pro Gly Gly Thr Ser Gln Ala Arg Gln Ile

180 185 190

Asp Phe Pro Leu Arg Ile Leu Val Pro Thr Gln Phe Val Gly Ala Ile

195 200 205

Ile Gly Lys Glu Gly Leu Thr Ile Lys Asn Ile Thr Lys Gln Thr Gln

210 215 220

Ser Arg Val Asp Ile His Arg Lys Glu Asn Ser Gly Ala Ala Glu Lys

225 230 235 240

Pro Val Thr Ile His Ala Thr Pro Glu Gly Thr Ser Glu Ala Cys Arg

245 250 255

Met Ile Leu Glu Ile Met Gln Lys Glu Ala Asp Glu Thr Lys Leu Ala

260 265 270

Glu Glu Ile Pro Leu Lys Ile Leu Ala His Asn Gly Leu Val Gly Arg

275 280 285

Leu Ile Gly Lys Glu Gly Arg Asn Leu Lys Lys Ile Glu His Glu Thr

290 295 300

Gly Thr Lys Ile Thr Ile Ser Ser Leu Gln Asp Leu Ser Ile Tyr Asn

305 310 315 320

Pro Glu Arg Thr Ile Thr Val Lys Gly Thr Val Glu Ala Cys Ala Ser

325 330 335

Ala Glu Ile Glu Ile Met Lys Lys Leu Arg Glu Ala Phe Glu Asn Asp

340 345 350

Met Leu Ala Val Asn Gln Gln Ala Asn Leu Ile Pro Gly Leu Asn Leu

355 360 365

Ser Ala Leu Gly Ile Phe Ser Thr Gly Leu Ser Val Leu Ser Pro Pro

370 375 380

Ala Gly Pro Arg Gly Ala Pro Pro Ala Ala Pro Tyr His Pro Phe Thr

385 390 395 400

Thr His Ser Gly Tyr Phe Ser Ser Leu Tyr Pro His His Gln Phe Gly

405 410 415

Pro Phe Pro His His His Ser Tyr Pro Glu Gln Glu Ile Val Asn Leu

420 425 430

Phe Ile Pro Thr Gln Ala Val Gly Ala Ile Ile Gly Lys Lys Gly Ala

435 440 445

His Ile Lys Gln Leu Ala Arg Phe Ala Gly Ala Ser Ile Lys Ile Ala

450 455 460

Pro Ala Glu Gly Pro Asp Val Ser Glu Arg Met Val Ile Ile Thr Gly

465 470 475 480

Pro Pro Glu Ala Gln Phe Lys Ala Gln Gly Arg Ile Phe Gly Lys Leu

485 490 495

Lys Glu Glu Asn Phe Phe Asn Pro Lys Glu Glu Val Lys Leu Glu Ala

500 505 510

His Ile Arg Val Pro Ser Ser Thr Ala Gly Arg Val Ile Gly Lys Gly

515 520 525

Gly Lys Thr Val Asn Glu Leu Gln Asn Leu Thr Ser Ala Glu Val Ile

530 535 540

Val Pro Arg Asp Gln Thr Pro Asp Glu Asn Glu Glu Val Ile Val Arg

545 550 555 560

Ile Ile Gly His Phe Phe Ala Ser Gln Thr Ala Gln Arg Lys Ile Arg

565 570 575

Glu Ile Val Gln Gln Val Lys Gln Gln Glu Gln Lys Tyr Pro Gln Gly

580 585 590

Val Ala Ser Gln Arg Ser Lys

595

<210> 8

<211> 858

<212> PRT

<213> human

<400> 8

Met Ser Val Val Gly Leu Asp Val Gly Ser Gln Ser Cys Tyr Ile Ala

1 5 10 15

Val Ala Arg Ala Gly Gly Ile Glu Thr Ile Ala Asn Glu Phe Ser Asp

20 25 30

Arg Cys Thr Pro Ser Val Ile Ser Phe Gly Ser Lys Asn Arg Thr Ile

35 40 45

Gly Val Ala Ala Lys Asn Gln Gln Ile Thr His Ala Asn Asn Thr Val

50 55 60

Ser Asn Phe Lys Arg Phe His Gly Arg Ala Phe Asn Asp Pro Phe Ile

65 70 75 80

Gln Lys Glu Lys Glu Asn Leu Ser Tyr Asp Leu Val Pro Leu Lys Asn

85 90 95

Gly Gly Val Gly Ile Lys Val Met Tyr Met Gly Glu Glu His Leu Phe

100 105 110

Ser Val Glu Gln Ile Thr Ala Met Leu Leu Thr Lys Leu Lys Glu Thr

115 120 125

Ala Glu Asn Ser Leu Lys Lys Pro Val Thr Asp Cys Val Ile Ser Val

130 135 140

Pro Ser Phe Phe Thr Asp Ala Glu Arg Arg Ser Val Leu Asp Ala Ala

145 150 155 160

Gln Ile Val Gly Leu Asn Cys Leu Arg Leu Met Asn Asp Met Thr Ala

165 170 175

Val Ala Leu Asn Tyr Gly Ile Tyr Lys Gln Asp Leu Pro Ser Leu Asp

180 185 190

Glu Lys Pro Arg Ile Val Val Phe Val Asp Met Gly His Ser Ala Phe

195 200 205

Gln Val Ser Ala Cys Ala Phe Asn Lys Gly Lys Leu Lys Val Leu Gly

210 215 220

Thr Ala Phe Asp Pro Phe Leu Gly Gly Lys Asn Phe Asp Glu Lys Leu

225 230 235 240

Val Glu His Phe Cys Ala Glu Phe Lys Thr Lys Tyr Lys Leu Asp Ala

245 250 255

Lys Ser Lys Ile Arg Ala Leu Leu Arg Leu Tyr Gln Glu Cys Glu Lys

260 265 270

Leu Lys Lys Leu Met Ser Ser Asn Ser Thr Asp Leu Pro Leu Asn Ile

275 280 285

Glu Cys Phe Met Asn Asp Lys Asp Val Ser Gly Lys Met Asn Arg Ser

290 295 300

Gln Phe Glu Glu Leu Cys Ala Glu Leu Leu Gln Lys Ile Glu Val Pro

305 310 315 320

Leu Tyr Ser Leu Leu Glu Gln Thr His Leu Lys Val Glu Asp Val Ser

325 330 335

Ala Val Glu Ile Val Gly Gly Ala Thr Arg Ile Pro Ala Val Lys Glu

340 345 350

Arg Ile Ala Lys Phe Phe Gly Lys Asp Ile Ser Thr Thr Leu Asn Ala

355 360 365

Asp Glu Ala Val Ala Arg Gly Cys Ala Leu Gln Cys Ala Ile Leu Ser

370 375 380

Pro Ala Phe Lys Val Arg Glu Phe Ser Val Thr Asp Ala Val Pro Phe

385 390 395 400

Pro Ile Ser Leu Ile Trp Asn His Asp Ser Glu Asp Thr Glu Gly Val

405 410 415

His Glu Val Phe Ser Arg Asn His Ala Ala Pro Phe Ser Lys Val Leu

420 425 430

Thr Phe Leu Arg Arg Gly Pro Phe Glu Leu Glu Ala Phe Tyr Ser Asp

435 440 445

Pro Gln Gly Val Pro Tyr Pro Glu Ala Lys Ile Gly Arg Phe Val Val

450 455 460

Gln Asn Val Ser Ala Gln Lys Asp Gly Glu Lys Ser Arg Val Lys Val

465 470 475 480

Lys Val Arg Val Asn Thr His Gly Ile Phe Thr Ile Ser Thr Ala Ser

485 490 495

Met Val Glu Lys Val Pro Thr Glu Glu Asn Glu Met Ser Ser Glu Ala

500 505 510

Asp Met Glu Cys Leu Asn Gln Arg Pro Pro Glu Asn Pro Asp Thr Asp

515 520 525

Lys Asn Val Gln Gln Asp Asn Ser Glu Ala Gly Thr Gln Pro Gln Val

530 535 540

Gln Thr Asp Ala Gln Gln Thr Ser Gln Ser Pro Pro Ser Pro Glu Leu

545 550 555 560

Thr Ser Glu Glu Asn Lys Ile Pro Asp Ala Asp Lys Ala Asn Glu Lys

565 570 575

Lys Val Asp Gln Pro Pro Glu Ala Lys Lys Pro Lys Ile Lys Val Val

580 585 590

Asn Val Glu Leu Pro Ile Glu Ala Asn Leu Val Trp Gln Leu Gly Lys

595 600 605

Asp Leu Leu Asn Met Tyr Ile Glu Thr Glu Gly Lys Met Ile Met Gln

610 615 620

Asp Lys Leu Glu Lys Glu Arg Asn Asp Ala Lys Asn Ala Val Glu Glu

625 630 635 640

Tyr Val Tyr Glu Phe Arg Asp Lys Leu Cys Gly Pro Tyr Glu Lys Phe

645 650 655

Ile Cys Glu Gln Asp His Gln Asn Phe Leu Arg Leu Leu Thr Glu Thr

660 665 670

Glu Asp Trp Leu Tyr Glu Glu Gly Glu Asp Gln Ala Lys Gln Ala Tyr

675 680 685

Val Asp Lys Leu Glu Glu Leu Met Lys Ile Gly Thr Pro Val Lys Val

690 695 700

Arg Phe Gln Glu Ala Glu Glu Arg Pro Lys Met Phe Glu Glu Leu Gly

705 710 715 720

Gln Arg Leu Gln His Tyr Ala Lys Ile Ala Ala Asp Phe Arg Asn Lys

725 730 735

Asp Glu Lys Tyr Asn His Ile Asp Glu Ser Glu Met Lys Lys Val Glu

740 745 750

Lys Ser Val Asn Glu Val Met Glu Trp Met Asn Asn Val Met Asn Ala

755 760 765

Gln Ala Lys Lys Ser Leu Asp Gln Asp Pro Val Val Arg Ala Gln Glu

770 775 780

Ile Lys Thr Lys Ile Lys Glu Leu Asn Asn Thr Cys Glu Pro Val Val

785 790 795 800

Thr Gln Pro Lys Pro Lys Ile Glu Ser Pro Lys Leu Glu Arg Thr Pro

805 810 815

Asn Gly Pro Asn Ile Asp Lys Lys Glu Glu Asp Leu Glu Asp Lys Asn

820 825 830

Asn Phe Gly Ala Glu Pro Pro His Gln Asn Gly Glu Cys Tyr Pro Asn

835 840 845

Glu Lys Asn Ser Val Asn Met Asp Leu Asp

850 855

<210> 9

<211> 314

<212> PRT

<213> human

<400> 9

Met Pro Leu Glu Gln Arg Ser Gln His Cys Lys Pro Glu Glu Gly Leu

1 5 10 15

Glu Ala Arg Gly Glu Ala Leu Gly Leu Val Gly Ala Gln Ala Pro Ala

20 25 30

Thr Glu Glu Gln Glu Ala Ala Ser Ser Ser Ser Thr Leu Val Glu Val

35 40 45

Thr Leu Gly Glu Val Pro Ala Ala Glu Ser Pro Asp Pro Pro Gln Ser

50 55 60

Pro Gln Gly Ala Ser Ser Leu Pro Thr Thr Met Asn Tyr Pro Leu Trp

65 70 75 80

Ser Gln Ser Tyr Glu Asp Ser Ser Asn Gln Glu Glu Glu Gly Pro Ser

85 90 95

Thr Phe Pro Asp Leu Glu Ser Glu Phe Gln Ala Ala Leu Ser Arg Lys

100 105 110

Val Ala Glu Leu Val His Phe Leu Leu Leu Lys Tyr Arg Ala Arg Glu

115 120 125

Pro Val Thr Lys Ala Glu Met Leu Gly Ser Val Val Gly Asn Trp Gln

130 135 140

Tyr Phe Phe Pro Val Ile Phe Ser Lys Ala Ser Ser Ser Leu Gln Leu

145 150 155 160

Val Phe Gly Ile Glu Leu Met Glu Val Asp Pro Ile Gly His Leu Tyr

165 170 175

Ile Phe Ala Thr Cys Leu Gly Leu Ser Tyr Asp Gly Leu Leu Gly Asp

180 185 190

Asn Gln Ile Met Pro Lys Ala Gly Leu Leu Ile Ile Val Leu Ala Ile

195 200 205

Ile Ala Arg Glu Gly Asp Cys Ala Pro Glu Glu Lys Ile Trp Glu Glu

210 215 220

Leu Ser Val Leu Glu Val Phe Glu Gly Arg Glu Asp Ser Ile Leu Gly

225 230 235 240

Asp Pro Lys Lys Leu Leu Thr Gln His Phe Val Gln Glu Asn Tyr Leu

245 250 255

Glu Tyr Arg Gln Val Pro Gly Ser Asp Pro Ala Cys Tyr Glu Phe Leu

260 265 270

Trp Gly Pro Arg Ala Leu Val Glu Thr Ser Tyr Val Lys Val Leu His

275 280 285

His Met Val Lys Ile Ser Gly Gly Pro His Ile Ser Tyr Pro Pro Leu

290 295 300

His Glu Trp Val Leu Arg Glu Gly Glu Glu

305 310

<210> 10

<211> 854

<212> PRT

<213> human

<400> 10

Met Met Ala Tyr Ser Asp Thr Thr Met Met Ser Asp Asp Ile Asp Trp

1 5 10 15

Leu Arg Ser His Arg Gly Val Cys Lys Val Asp Leu Tyr Asn Pro Glu

20 25 30

Gly Gln Gln Asp Gln Asp Arg Lys Val Ile Cys Phe Val Asp Val Ser

35 40 45

Thr Leu Asn Val Glu Asp Lys Asp Tyr Lys Asp Ala Ala Ser Ser Ser

50 55 60

Ser Glu Gly Asn Leu Asn Leu Gly Ser Leu Glu Glu Lys Glu Ile Ile

65 70 75 80

Val Ile Lys Asp Thr Glu Lys Lys Asp Gln Ser Lys Thr Glu Gly Ser

85 90 95

Val Cys Leu Phe Lys Gln Ala Pro Ser Asp Pro Val Ser Val Leu Asn

100 105 110

Trp Leu Leu Ser Asp Leu Gln Lys Tyr Ala Leu Gly Phe Gln His Ala

115 120 125

Leu Ser Pro Ser Thr Ser Thr Cys Lys His Lys Val Gly Asp Thr Glu

130 135 140

Gly Glu Tyr His Arg Ala Ser Ser Glu Asn Cys Tyr Ser Val Tyr Ala

145 150 155 160

Asp Gln Val Asn Ile Asp Tyr Leu Met Asn Arg Pro Gln Asn Leu Arg

165 170 175

Leu Glu Met Thr Ala Ala Lys Asn Thr Asn Asn Asn Gln Ser Pro Ser

180 185 190

Ala Pro Pro Ala Lys Pro Pro Ser Thr Gln Arg Ala Val Ile Ser Pro

195 200 205

Asp Gly Glu Cys Ser Ile Asp Asp Leu Ser Phe Tyr Val Asn Arg Leu

210 215 220

Ser Ser Leu Val Ile Gln Met Ala His Lys Glu Ile Lys Glu Lys Leu

225 230 235 240

Glu Gly Lys Ser Lys Cys Leu His His Ser Ile Cys Pro Ser Pro Gly

245 250 255

Asn Lys Glu Arg Ile Ser Pro Arg Thr Pro Ala Ser Lys Ile Ala Ser

260 265 270

Glu Met Ala Tyr Glu Ala Val Glu Leu Thr Ala Ala Glu Met Arg Gly

275 280 285

Thr Gly Glu Glu Ser Arg Glu Gly Gly Gln Lys Ser Phe Leu Tyr Ser

290 295 300

Glu Leu Ser Asn Lys Ser Lys Ser Gly Asp Lys Gln Met Ser Gln Arg

305 310 315 320

Glu Ser Lys Glu Phe Ala Asp Ser Ile Ser Lys Gly Leu Met Val Tyr

325 330 335

Ala Asn Gln Val Ala Ser Asp Met Met Val Ser Leu Met Lys Thr Leu

340 345 350

Lys Val His Ser Ser Gly Lys Pro Ile Pro Ala Ser Val Val Leu Lys

355 360 365

Arg Val Leu Leu Arg His Thr Lys Glu Ile Val Ser Asp Leu Ile Asp

370 375 380

Ser Cys Met Lys Asn Leu His Asn Ile Thr Gly Val Leu Met Thr Asp

385 390 395 400

Ser Asp Phe Val Ser Ala Val Lys Arg Asn Leu Phe Asn Gln Trp Lys

405 410 415

Gln Asn Ala Thr Asp Ile Met Glu Ala Met Leu Lys Arg Leu Val Ser

420 425 430

Ala Leu Ile Gly Glu Glu Lys Glu Thr Lys Ser Gln Ser Leu Ser Tyr

435 440 445

Ala Ser Leu Lys Ala Gly Ser His Asp Pro Lys Cys Arg Asn Gln Ser

450 455 460

Leu Glu Phe Ser Thr Met Lys Ala Glu Met Lys Glu Arg Asp Lys Gly

465 470 475 480

Lys Met Lys Ser Asp Pro Cys Lys Ser Leu Thr Ser Ala Glu Lys Val

485 490 495

Gly Glu His Ile Leu Lys Glu Gly Leu Thr Ile Trp Asn Gln Lys Gln

500 505 510

Gly Asn Ser Cys Lys Val Ala Thr Lys Ala Cys Ser Asn Lys Asp Glu

515 520 525

Lys Gly Glu Lys Ile Asn Ala Ser Thr Asp Ser Leu Ala Lys Asp Leu

530 535 540

Ile Val Ser Ala Leu Lys Leu Ile Gln Tyr His Leu Thr Gln Gln Thr

545 550 555 560

Lys Gly Lys Asp Thr Cys Glu Glu Asp Cys Pro Gly Ser Thr Met Gly

565 570 575

Tyr Met Ala Gln Ser Thr Gln Tyr Glu Lys Cys Gly Gly Gly Gln Ser

580 585 590

Ala Lys Ala Leu Ser Val Lys Gln Leu Glu Ser His Arg Ala Pro Gly

595 600 605

Pro Ser Thr Cys Gln Lys Glu Asn Gln His Leu Asp Ser Gln Lys Met

610 615 620

Asp Met Ser Asn Ile Val Leu Met Leu Ile Gln Lys Leu Leu Asn Glu

625 630 635 640

Asn Pro Phe Lys Cys Glu Asp Pro Cys Glu Gly Glu Asn Lys Cys Ser

645 650 655

Glu Pro Arg Ala Ser Lys Ala Ala Ser Met Ser Asn Arg Ser Asp Lys

660 665 670

Ala Glu Glu Gln Cys Gln Glu His Gln Glu Leu Asp Cys Thr Ser Gly

675 680 685

Met Lys Gln Ala Asn Gly Gln Phe Ile Asp Lys Leu Val Glu Ser Val

690 695 700

Met Lys Leu Cys Leu Ile Met Ala Lys Tyr Ser Asn Asp Gly Ala Ala

705 710 715 720

Leu Ala Glu Leu Glu Glu Gln Ala Ala Ser Ala Asn Lys Pro Asn Phe

725 730 735

Arg Gly Thr Arg Cys Ile His Ser Gly Ala Met Pro Gln Asn Tyr Gln

740 745 750

Asp Ser Leu Gly His Glu Val Ile Val Asn Asn Gln Cys Ser Thr Asn

755 760 765

Ser Leu Gln Lys Gln Leu Gln Ala Val Leu Gln Trp Ile Ala Ala Ser

770 775 780

Gln Phe Asn Val Pro Met Leu Tyr Phe Met Gly Asp Lys Asp Gly Gln

785 790 795 800

Leu Glu Lys Leu Pro Gln Val Ser Ala Lys Ala Ala Glu Lys Gly Tyr

805 810 815

Ser Val Gly Gly Leu Leu Gln Glu Val Met Lys Phe Ala Lys Glu Arg

820 825 830

Gln Pro Asp Glu Ala Val Gly Lys Val Ala Arg Lys Gln Leu Leu Asp

835 840 845

Trp Leu Leu Ala Asn Leu

850

<210> 11

<211> 509

<212> PRT

<213> human

<400> 11

Met Glu Arg Arg Arg Leu Trp Gly Ser Ile Gln Ser Arg Tyr Ile Ser

1 5 10 15

Met Ser Val Trp Thr Ser Pro Arg Arg Leu Val Glu Leu Ala Gly Gln

20 25 30

Ser Leu Leu Lys Asp Glu Ala Leu Ala Ile Ala Ala Leu Glu Leu Leu

35 40 45

Pro Arg Glu Leu Phe Pro Pro Leu Phe Met Ala Ala Phe Asp Gly Arg

50 55 60

His Ser Gln Thr Leu Lys Ala Met Val Gln Ala Trp Pro Phe Thr Cys

65 70 75 80

Leu Pro Leu Gly Val Leu Met Lys Gly Gln His Leu His Leu Glu Thr

85 90 95

Phe Lys Ala Val Leu Asp Gly Leu Asp Val Leu Leu Ala Gln Glu Val

100 105 110

Arg Pro Arg Arg Trp Lys Leu Gln Val Leu Asp Leu Arg Lys Asn Ser

115 120 125

His Gln Asp Phe Trp Thr Val Trp Ser Gly Asn Arg Ala Ser Leu Tyr

130 135 140

Ser Phe Pro Glu Pro Glu Ala Ala Gln Pro Met Thr Lys Lys Arg Lys

145 150 155 160

Val Asp Gly Leu Ser Thr Glu Ala Glu Gln Pro Phe Ile Pro Val Glu

165 170 175

Val Leu Val Asp Leu Phe Leu Lys Glu Gly Ala Cys Asp Glu Leu Phe

180 185 190

Ser Tyr Leu Ile Glu Lys Val Lys Arg Lys Lys Asn Val Leu Arg Leu

195 200 205

Cys Cys Lys Lys Leu Lys Ile Phe Ala Met Pro Met Gln Asp Ile Lys

210 215 220

Met Ile Leu Lys Met Val Gln Leu Asp Ser Ile Glu Asp Leu Glu Val

225 230 235 240

Thr Cys Thr Trp Lys Leu Pro Thr Leu Ala Lys Phe Ser Pro Tyr Leu

245 250 255

Gly Gln Met Ile Asn Leu Arg Arg Leu Leu Leu Ser His Ile His Ala

260 265 270

Ser Ser Tyr Ile Ser Pro Glu Lys Glu Glu Gln Tyr Ile Ala Gln Phe

275 280 285

Thr Ser Gln Phe Leu Ser Leu Gln Cys Leu Gln Ala Leu Tyr Val Asp

290 295 300

Ser Leu Phe Phe Leu Arg Gly Arg Leu Asp Gln Leu Leu Arg His Val

305 310 315 320

Met Asn Pro Leu Glu Thr Leu Ser Ile Thr Asn Cys Arg Leu Ser Glu

325 330 335

Gly Asp Val Met His Leu Ser Gln Ser Pro Ser Val Ser Gln Leu Ser

340 345 350

Val Leu Ser Leu Ser Gly Val Met Leu Thr Asp Val Ser Pro Glu Pro

355 360 365

Leu Gln Ala Leu Leu Glu Arg Ala Ser Ala Thr Leu Gln Asp Leu Val

370 375 380

Phe Asp Glu Cys Gly Ile Thr Asp Asp Gln Leu Leu Ala Leu Leu Pro

385 390 395 400

Ser Leu Ser His Cys Ser Gln Leu Thr Thr Leu Ser Phe Tyr Gly Asn

405 410 415

Ser Ile Ser Ile Ser Ala Leu Gln Ser Leu Leu Gln His Leu Ile Gly

420 425 430

Leu Ser Asn Leu Thr His Val Leu Tyr Pro Val Pro Leu Glu Ser Tyr

435 440 445

Glu Asp Ile His Gly Thr Leu His Leu Glu Arg Leu Ala Tyr Leu His

450 455 460

Ala Arg Leu Arg Glu Leu Leu Cys Glu Leu Gly Arg Pro Ser Met Val

465 470 475 480

Trp Leu Ser Ala Asn Pro Cys Pro His Cys Gly Asp Arg Thr Phe Tyr

485 490 495

Asp Pro Glu Pro Ile Leu Cys Pro Cys Phe Met Pro Asn

500 505

Claims

1.一种用于预测或判断受试者的肿瘤免疫治疗效果的生物标志物，所述生物标志物为自身抗体组合，所述自身抗体组合包括选自抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体的至少一种：Trim21、BRCA2、Annexin 1、HUD、NY-ESO-1、P53、IMP2、HSP105、MAGE-A3、AKAP4、PRAME。

2.根据权利要求1所述的生物标志物，其特征在于，所述自身抗体组合包括选自抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体的至少一种：Trim21、BRCA2、Annexin 1、HUD、NY-ESO-1、P53、IMP2；

优选地，所述自身抗体组合包括选自抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体的两种、三种或四种：Trim21、BRCA2、Annexin 1、HUD；

更优选地，所述自身抗体组合包括抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体：Trim21和BRCA2；

进一步优选地，所述自身抗体组合还包括抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体中的一种或两种：Annexin 1、HUD；

再更优选地，所述自身抗体组合包括抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体：

(A)Trim21，BRCA2，IMP2；

(B)Trim21，BRCA2，NY-ESO-1；

(C)Trim21，BRCA2，NY-ESO-1，IMP2；

(D)Trim21，BRCA2，P53；

(E)Trim21，BRCA2，Annexin 1；

(F)Trim21，BRCA2，Annexin 1，P53；

(G)Trim21，BRCA2，Annexin 1，NY-ESO-1，IMP2；

(H)Trim21，BRCA2，Annexin 1，HUD，NY-ESO-1，IMP2；

(I)Trim21，BRCA2，Annexin 1，NY-ESO-1，P53，IMP2；

(R)Trim21，BRCA2，Annexin 1，HUD；

(RN)Trim21，BRCA2，Annexin 1，HUD，NY-ESO-1；

(RP)Trim21，BRCA2，Annexin 1，HUD，P53；或

(RNP)Trim21，BRCA2，Annexin 1，HUD，NY-ESO-1，P53。

3.根据权利要求1或2所述的生物标志物，其特征在于，所述自身抗体组合包括选自抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体的至少一种：HSP105、MAGE-A3、AKAP4、PRAME；

优选地，所述自身抗体组合包括抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体：HSP105，或HSP105和AKAP4；

更优选地，所述自身抗体组合包括抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体：

(K)HSP105；

(L)HSP105，AKAP4；

(M)HSP105，MAGE-A3，AKAP4；或

(P)HSP105，AKAP4，PRAME。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的生物标志物，其特征在于，所述自身抗体为受试者接受肿瘤免疫治疗之前的血清、血浆、组织间隙液、脑脊液或尿液中的自身抗体；

优选地，所述自身抗体为IgA、IgM或IgG。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的生物标志物，其特征在于，所述受试者为哺乳动物，优选为灵长类哺乳动物，更优选为人；

优选地，所述肿瘤为肾癌、肝癌、卵巢癌、宫颈癌、头颈部鳞状细胞癌、鼻咽癌、尿路上皮癌、喉癌、胃癌、黑色素瘤、前列腺癌、霍奇金氏淋巴瘤、膀胱癌、结直肠癌、肺癌，特别是肺癌，例如小细胞肺癌、非小细胞肺癌、肺鳞癌、肺腺癌和其他亚型肺癌；

优选地，所述免疫治疗包括采用免疫检查点抑制剂治疗；优选地，所述免疫治疗为单独施用免疫检查点抑制剂治疗或免疫检查点抑制剂与化疗、放疗、抗血管治疗、靶向治疗或其他肿瘤治疗手段的联合治疗，其中所述免疫检查点抑制剂为针对PD-1、PD-L1、CTLA-4、BTLA、TIM-3、LAG-3、TIGIT、LAIR1、2B4和/或CD160的免疫检查点抑制剂，优选为抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体。

6.一种用于检测权利要求1至5中任一项所述的生物标志物的试剂。

7.根据权利要求6所述的试剂，其特征在于，所述试剂是用于酶联免疫吸附法(ELISA)、蛋白/肽段芯片检测、免疫印迹、微珠免疫检测、微流控免疫检测的试剂；优选地，所述试剂用于通过抗原抗体反应对所述生物标志物进行检测，例如通过ELISA；

更优选地，所述试剂为用于检测所述自身抗体组合的抗原蛋白组合，所述抗原蛋白组合包括选自以下抗原蛋白的至少一种：Trim21、BRCA2、Annexin1、HUD、NY-ESO-1、P53、IMP2、HSP105、MAGE-A3、AKAP4、PRAME。

8.权利要求1至5中任一项所述的生物标志物或权利要求6或7所述的试剂在制备用于预测或判断受试者的肿瘤免疫治疗效果的产品中的用途。

9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于，所述受试者为哺乳动物，优选为灵长类哺乳动物，更优选为人；

10.一种试剂盒，其包含权利要求6或7所述的试剂。

11.根据权利要求10所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒是用于酶联免疫吸附法(ELISA)、蛋白/肽段芯片检测、免疫印迹、微珠免疫检测、微流控免疫检测的试剂盒；优选地，所述试剂盒用于通过抗原抗体反应对所述生物标志物进行检测；

更优选地，所述试剂盒为ELISA检测试剂盒。