CN111318718B - 一种具有增敏肿瘤放疗的金纳米组装体及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种增敏肿瘤放疗的金纳米组装体及其制备方法和应用，该金纳米组装体具有肿瘤部位pH响应性和高渗透性。所述金纳米组装体为核壳结构，内核为金纳米颗粒，外壳为聚2‑(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段聚乙二醇、聚2‑(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段硫辛酸甲基丙烯酸羟基乙基酯。金对X射线具有很高的吸收系数，具有增敏放疗的功能。聚乙二醇具有很好的生物相容性，可以提高金纳米组装体在血液中的循环时间。2‑(六甲撑亚胺)具有pH响应性能，使得金纳米组装体的尺寸变小，更易渗透到肿瘤深部，进一步增强放疗对肿瘤细胞的杀伤力。本发明制备的金纳米组装体具有优异的放疗增敏性和稳定性，有利于其在生物医学的应用。

Description

一种具有增敏肿瘤放疗的金纳米组装体及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及生物医药领域，尤其涉及一种具有增敏肿瘤放疗的金纳米组装体及其制备方法和应用。
背景技术
肿瘤是一种由于自身细胞病变，导致突变基因累积，引起癌细胞无限增殖，侵袭正常组织和器官的疾病。根据调查研究，全球每年有超过1000万的病人被确诊患癌，超过800万的患者因无法获得及时的治疗而死亡。2019年统计结果显示，我国在2015年新增恶性肿瘤发病例为400万左右，死亡病例高达200多万。
放疗是一种常见的肿瘤治疗手段，它通过产生活性氧引起肿瘤细胞的DNA损伤，进而使其生长停滞或死亡。由于肿瘤的代谢异常于正常细胞，使得肿瘤微环境呈现出乏氧、低pH和高致密性的特征。其中乏氧微环境因为氧气的不足，使得放疗产生的活性氧较少，难以有效杀伤肿瘤细胞，限制了放疗的效果。之前有研究报道，通过递送携载氧气的纳米颗粒到达肿瘤部位，缓解乏氧微环境进而增强放疗的效果。
除此之外，递送高原子序数的金属元素也可以增敏放疗，如金、铊和铂等。但是如何有效将含有金属元素的纳米颗粒高效递送到深部肿瘤部位存在着巨大的困难。一方面，纳米颗粒在血液循环中容易被网状内皮细胞清除。另一方面，小尺寸的纳米颗粒可以向肿瘤深部渗透，但是却很容易被肾脏清除，大尺寸的纳米颗粒不易被脏器清除，却很难到达肿瘤深部。
发明内容
有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种具有增敏肿瘤放疗的金纳米组装体及其制备方法和应用，制备的金纳米组装体具有优异的放疗增敏性和稳定性，有利于其在生物医学的应用。
本发明提供的金纳米组装体应用了尺寸可变的纳米颗粒制备技术，通过聚合物与金纳米颗粒间的配位作用制备金纳米组装体。大尺寸的金纳米组装体可以高效富集在肿瘤部位，pH响应后的小尺寸纳米颗粒可以渗透到肿瘤深部，提高放疗的治疗效果。
具体的，本发明提供了一种增敏肿瘤放疗的金纳米组装体，所述金纳米组装体为核壳结构，内核为金纳米颗粒，外壳为聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段聚乙二醇(以下简称PAEMA-b-mPEG)、聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段硫辛酸甲基丙烯酸羟基乙基酯(以下简称PAEMA-b-PEAL)。
所述金纳米组装体具有肿瘤放疗增敏的功能。
其中，所述金纳米组装体为核壳结构，包括内核和包裹内核的外壳。
所述内核为金纳米颗粒，具体为5价金纳米颗粒。
所述内核，即金纳米颗粒的粒径优选为4～7nm，更优选为5～6nm。
所述外壳为聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段聚乙二醇、聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段硫辛酸甲基丙烯酸羟基乙基酯。
所述外壳的粒径优选为100～200nm，更优选为120～160nm。
所述聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段聚乙二醇与金纳米颗粒的摩尔比优选为2.5～15：1，更优选为10:1。
所述聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段硫辛酸甲基丙烯酸羟基乙基酯通过硫辛酸的二硫键与金的配位作用，吸附于金纳米颗粒表面。
所述聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段硫辛酸甲基丙烯酸羟基乙基酯的聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯链段，和聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段聚乙二醇的聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯链段，通过疏水相互作用以及同种化学结构的链段焓优先相互作用，封装连接。
当pH为7.4时，所述金纳米组装体为大尺寸，优选的粒径为120-140nm；当pH为6.8时，所述金纳米组装体为小尺寸，优选的粒径为5-10nm。
参见图1，图1为本发明提供的具有增敏肿瘤放疗作用的金纳米组装体的制备与尺寸变化示意图。
本发明提供的增敏肿瘤放疗的金纳米组装体是尺寸可变的纳米药物体系，其通过提高肿瘤部位的放疗增敏剂的富集来增强放疗的治疗效果。具体的，聚乙二醇修饰的金纳米组装体可以提高金纳米组装体在肿瘤部位的富集，提高其利用效率。此外，pH响应一方面可以使得金纳米组装体的尺寸变小，更易向肿瘤深部渗透；另一方面pH响应可以使得金纳米组装体的表面电势增大，肿瘤细胞可以通过主动转运的方式向肿瘤深部递送金纳米组装体。最后，被肿瘤细胞摄取的金能进一步加重放疗引起的DNA损伤，增强放疗的治疗效果。
本发明提供了上述增敏肿瘤放疗的金纳米组装体的制备方法，包括以下步骤：
A)将氯金酸、四氢化萘和十八胺混合，加入四丁基溴化铵，加热反应，然后加入丙酮，过膜得到金纳米颗粒；
B)将所述金纳米颗粒和聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段硫辛酸甲基丙烯酸羟基乙基酯混合于四氢呋喃溶液中，搅拌，正己烷中沉淀，离心，重悬，得到未加聚乙二醇修饰的金纳米组装体；
C)将未加聚乙二醇修饰的金纳米组装体和聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段聚乙二醇混合于四氢呋喃溶液中，搅拌，透析，得到金纳米组装体。
所述聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段硫辛酸甲基丙烯酸羟基乙基酯的制备方法优选为：
1)丙烯酰氯、2-(六甲撑二亚胺)乙醇和三乙胺反应，得到2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯；
2)将所述2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯与偶氮二异丁氰和氰甲基十二烷基三硫代碳酸酯溶于二氧六环，加热反应，得到聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯；
3)将所述聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯、硫辛酸甲基丙烯酸羟基乙基酯和偶氮二异丁氰溶于二氧六环，加热反应，浓缩，正己烷沉淀得到聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段硫辛酸甲基丙烯酸羟基乙基酯。
优选的，将丙烯酰氯滴加至2-(六甲撑二亚胺)乙醇和三乙胺中。
所述反应优选为过夜反应。
上述反应的方程式如下：
Figure BDA0002390214110000041
所述聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段聚乙二醇的制备方法优选为：
将聚乙二醇-氰甲基十二烷基三硫代碳酸酯、偶氮二异丁氰和2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯溶于二氧六环，加热反应，浓缩，正己烷沉淀得到聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段聚乙二醇。
所述反应优选为过夜反应。
上述反应的方程式如下：
Figure BDA0002390214110000042
本发明提供了上述增敏肿瘤放疗的金纳米组装体或上述制备方法制备的金纳米组装体在制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明提供了一种抗肿瘤药物，包括上述增敏肿瘤放疗的金纳米组装体或上述制备方法制备的金纳米组装体。
与现有技术相比，本发明提供了一种增敏肿瘤放疗的金纳米组装体，所述金纳米组装体为核壳结构，内核为金纳米颗粒，外壳为聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段聚乙二醇、聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段硫辛酸甲基丙烯酸羟基乙基酯。其中，金对X射线具有很高的吸收系数，具有增敏放疗的功能。聚乙二醇具有很好的生物相容性，可以提高金纳米组装体在血液中的循环时间。2-(六甲撑亚胺)具有pH响应性能，使得金纳米组装体的尺寸变小，更易渗透到肿瘤深部，进一步增强放疗对肿瘤细胞的杀伤力。本发明制备的金纳米组装体具有优异的放疗增敏性和稳定性，有利于其在生物医学的应用。
附图说明
图1为本发明实施例提供的具有增敏肿瘤放疗的金纳米组装体的制备与尺寸变化示意图；
图2为实施例1中嵌段共聚物PAEMA-b-PEAL的核磁共振氢谱图；
图3为实施例2中嵌段共聚物PAEMA-b-mPEG的核磁共振氢谱图；
图4为实施例6中金纳米组装体的动态光散射谱图；
图5为实施例6中金纳米组装体的尺寸大小随时间变化谱图；
图6为不同PAEMA-b-mPEG与金的摩尔比例的金纳米组装体的紫外吸收光谱图；
图7为在pH为7.4和6.7两种条件下，RNPs的透射电镜图片；
图8为pH在7.4和6.7两种条件下，NNPs的透射电镜图片；
图9为在pH为7.4和6.7两种条件下，金纳米组装体的电势变化结果图片；
图10为PAEMA具有pH响应的原理示意图；
图11为实施例9中不同金浓度的金纳米组装体的细胞毒性结果图；
图12为实施例10中金纳米组装体增敏放疗产生的DNA损伤结果图片；
图13为实施例11中激光共聚焦拍摄的金纳米组装体在细胞球的渗透结果图；
图14为金纳米组装体具有高渗透性的原理示意图。
具体实施方式
为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的具有增敏肿瘤放疗的金纳米组装体及其制备方法和应用进行详细描述。
实施例1、嵌段共聚物PAEMA-b-PEAL的合成：
(1)首先制备2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯，即AEMA：
具体的，冰浴环境下，将6.4g丙烯酰氯滴加至10.1g 2-(六甲撑二亚胺)乙醇和7.0g三乙胺的混合THF溶液中，反应过夜。反应结束后通过过滤除去反应体系中产生的三乙胺盐，然后旋蒸浓缩，真空抽过夜，得到无色透明液体产物，产率为65.7％。
(2)其次合成硫辛酸甲基丙烯酸羟基乙基酯，即EAL：
室温条件下，将2g硫辛酸和1.6g甲基丙烯酸羟乙酯在二氯甲烷中溶解，滴加0.5g二甲基吡啶和3.9g 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺，反应48h。反应结束后依次用盐酸洗涤，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，用饱和食盐水进行洗涤，最后用无水硫酸镁干燥。过滤、浓缩，抽干，得到粘黄色液体，产率为58.5％。
Figure BDA0002390214110000061
(3)其次合成聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯，即PAEMA：
具体的，0.034g氰甲基十二烷基三硫代碳酸酯，2.1g 2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯与0.005g偶氮二异丁氰在二氧六环中混合。氮气环境下，75℃反应12h。反应结束减压浓缩，正己烷沉淀，得到黄色固体，产率：51.7％，聚合度为59。
Figure BDA0002390214110000062
(4)最后合成PAEMA-b-PEAL：
具体的，将之前制备好的PAEMA、硫辛酸甲基丙烯酸羟基乙基酯和偶氮二异丁氰溶解于DMF中，氮气环境下，70℃反应8h。透析，干燥，浓缩得到产物。
Figure BDA0002390214110000063
采用核磁共振氢谱对制备的化合物进行表征，PAEMA-b-PE AL合成成功，结果如图2所示。
实施例2嵌段共聚物PAEMA-b-mPEG的合成：
(1)首先制备mPEG-CPAD，聚乙二醇-4-氰基-4-(硫代苯甲酰)戊酸酯：
具体的，将二环己基碳二亚胺、4-二甲氨基吡啶、4-氰基-4-(硫代苯甲酰)戊酸溶于二氯甲烷中。搅拌反应12h之后，用冰乙醚沉淀，得到粉红色固体，接枝率为75％。
(2)制备PAEMA-b-mPEG：
具体的，0.051g mPEG-CPAD，3.2g 2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯，和0.003g偶氮二异丁氰溶于二氧六环中，氮气环境下，75℃反应12h。反应结束后，减压浓缩，用正己烷沉淀，真空抽过夜，得到粉红色的固体，产率为62.6％，聚合度为97。
Figure BDA0002390214110000071
采用核磁共振氢谱对制备的化合物进行表征，PAEMA-b-mPEG合成成功，结果如图3所示。
实施例3、聚2-环己基甲基丙烯酸酯嵌段硫辛酸甲基丙烯酸羟基乙基酯的合成，即PCMA-b-PEAL：
(1)首先制备2-环己基甲基丙烯酸酯，即CMA，：
具体的，0℃条件下，将甲基丙烯酰氯滴加到三乙胺与2-环己基乙醇的四氢呋喃溶液中。反应过夜，反应结束后过滤，旋蒸浓缩，然后进行减压蒸馏纯化，最后得到无色透明液体，产率为53.2％。
(2)其次制备聚2-环己基甲基丙烯酸酯，即PCMA：
具体的，0.034g氰甲基十二烷基三硫代碳酸酯，1.95g 2-环己基甲基丙烯酸酯与0.005g偶氮二异丁氰在二氧六环溶剂中混合均匀。冻抽、氮气环境下，75℃反应12h。反应结束后，减压浓缩，用甲醇沉淀，真空抽过夜，抽干，得到黄色固体，产率为56.8％，聚合度为63。
Figure BDA0002390214110000072
(3)制备PCMA-b-PEAL：
具体的，1.25g聚2-环己基甲基丙烯酸酯，0.16g硫辛酸甲基丙烯酸羟基乙基酯和0.004g偶氮二异丁氰溶解在DMF中，冻抽、氮气环境下，70℃反应8h。反应结束后，在DMF中透析、浓缩，聚合物溶解于四氢呋喃中，产率为91.4％。
Figure BDA0002390214110000081
实施例4、聚2-环己基甲基丙烯酸酯嵌段聚乙二醇的合成，即PCMA-b-mPEG。
具体的，0.051g mPEG-CPAD，2.95g CMA和0.003g偶氮二异丁氰溶解在二氧六环中，冻抽、氮气环境下，75℃反应12h。反应结束后，浓缩、正己烷中沉淀，真空抽过夜，得到粉红色的固体。产率为64.7％，聚合度为101。
Figure BDA0002390214110000082
实施例5、金纳米组装体的内核制备：
具体的，将10mL四氢化萘和10mL十八胺与0.1g氯金酸均匀混合，然后将1mL四氢化萘和1mL十八胺与0.0434g四丁基溴化铵混合均匀，加入到上述溶液中，35℃反应10min。随后加入50mL丙酮，滤膜过滤，将得到的金纳米颗粒在甲苯中重悬，保存。
实施例6、金纳米组装体的制备，即RNPs：
取2mL重悬于甲苯的金纳米颗粒，加入4mL的THF稀释，向其中再加入400μL 25mg/mL的PAEMA-b-PEAL溶液。然后室温搅拌6小时。反应结束之后，使用正己烷沉淀该溶液，离心，除去上清，在THF重悬备用。
取1.0mL的上述THF的金纳米颗粒溶液，加入2.5mg PAEMA-b-mPEG，室温搅拌1h，然后利用注射泵缓慢加入蒸馏水。接着再在室温搅拌1h，最后将颗粒进行透析，得到金纳米组装体，即为RNPs。
通过动态光散射分析仪，测得样品的尺寸，主要分布在100-130nm，结果如图4所示。
通过动态光散射分析仪，测得样品的尺寸在0-50h内无显著性变化，结果如图5所示。
通过紫外分光光度计，测得样品的紫外吸收，确定内核和外壳很好组装成为完整的核壳结构，结果如图6所示。
实施例7、金纳米组装体对照组的制备，即NNPs：
取2mL重悬于甲苯的金纳米颗粒，加入4mL的THF稀释，向其中再加入400μL 25mg/mL的PCMA-b-PEAL溶液。然后室温搅拌6小时。反应结束之后，使用正己烷沉淀该溶液，离心，除去上清，在THF重悬备用。
取1.0mL的上述THF的金纳米颗粒溶液，加入2.5mg PCMA-b-mPEG，室温搅拌1h，然后利用注射泵缓慢加入蒸馏水。接着再在室温搅拌1h，最后将颗粒进行透析，得到金纳米组装体，即为NNPs。
实施例8、金纳米组装体的pH响应性研究：
将金纳米组装体置于pH为6.7和7.4的溶液中，测得其尺寸和电势变化。
通过透射电镜，测得RNPs在pH为7.4时的尺寸，为120-140nm；而在pH为6.7，RNPs的尺寸变为5-10nm。说明RNPs具有很好的pH响应性，结果如图7所示。
通过透射电镜，测得NNPs在pH为7.4时的尺寸，为120-140nm；而在pH为6.7，RNPs的尺寸仍为120-140nm。说明对照组NNPs不具有pH响应性，结果如图8所示。
通过动态光散射分析仪，测得RNPs和NNPs在pH为6.7和7.4两种条件下的电势。RNPs在pH为6.7时的电势为15.7-19.4mV，而pH为7.4时电势为0-0.1mV。NNPs在pH为6.7时的电势为-0.1-0mV，而pH为7.4时电势为-0.1-0mV。说明RNPs具有很好的pH响应性，而对照组NNPs不具有pH响应性，结果如图9所示。
金纳米组装体具有pH响应性的原因是其中的PAEMA组分在pH为7.4时是疏水的，而pH为6.7时PAEMA被质子化，变为亲水，引起金纳米组装体尺寸变小，pH响应原理图如图10所示。
实施例9、金纳米组装体的细胞毒性研究：
将EMT-6细胞种植在96孔板中，每孔5×103个，每孔加入100μL培养液，37℃条件下培养12h。每孔更换为含有不同浓度的RNPs和NNPs两种金纳米组装体，37℃条件下再培养4h。随后用新的DMEM培养液再培养48h。培养结束后，将2.5mg/mL的MTT储液加到每个孔中，每孔50μL。37℃条件下培养6h后，每孔加入100μL细胞裂解液，37℃下培养4h。最后使用酶标仪检测样品在490nm下的吸收值，通过紫外吸收，换算得到细胞的存活率，得到结果如图11所示。两种金纳米组装体的浓度从0-100μg/mL，细胞的存活率无显著性差异，说明该材料的生物相容性好。
实施例10、金纳米组装体增强放疗对DNA损伤的研究：
将EMT-6细胞种在细胞板中，每孔为5.0×103个细胞，每孔加入100μL培养液，37℃下培养12h。每孔更换为含RNPs和NNPs两种金纳米组装体的新培养液，37℃条件下再培养4h，放疗细胞(放疗强度为0、2、4、6Gy)。放疗结束后，除去培养液，随后加入4％的多聚甲醛固定，PBS洗三次。然后加入0.1％的Triton X-100，孵育。接着加入PBS洗三次，1％BSA溶液在37℃条件下封闭，随后除去其中残余的BSA，4℃条件下将γ-H2AX抗体和细胞共孵育过夜。用PBS洗涤三次，加入Cy3抗体在37度条件下共同培养30min。随后用PBS清洗三次，室温条件下用DAPI染色2-3min，最后用PBS清洗细胞三次，封片。用激光共聚焦显微镜观察细胞的DNA损伤情况，结果如图12所示。从结果来看，金纳米颗粒组可以明显增强放疗产生的DNA损伤，增敏放疗。
实施例11、金纳米组装体提高肿瘤深部渗透的研究：
(1)培养多细胞球模型
首先制备一批无菌的2％琼脂糖溶液，然后将其加热后转移到培养瓶中，待其冷却后，加入培养基和EMT-6细胞，进行培养。培养一段时间后，即可得到细胞球。
(2)多细胞球的渗透实验
将培养好的细胞球放在24孔板中，然后加入RNPs和NNPs两种金纳米组装体进行孵育12h，每隔一段时间进行轻微摇晃，预防细胞球贴壁。待培养结束，将细胞球转移到培养皿，PBS洗涤，去除游离的金纳米组装体。培养结束之后，使用激光共聚焦显微镜观察金纳米组装体在细胞球中的分布，结果如图13所示。从结果上来看，金纳米颗粒可以明显提高放疗增敏剂在细胞球的渗透。
以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。

Claims (10)

1.一种增敏肿瘤放疗的金纳米组装体，其特征在于，所述金纳米组装体为核壳结构，内核为金纳米颗粒，外壳为聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段聚乙二醇和聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段硫辛酸甲基丙烯酸羟基乙基酯；
所述聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段聚乙二醇具有以下结构：
Figure FDA0003224722110000011
所述聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段硫辛酸甲基丙烯酸羟基乙基酯具有以下结构：
Figure FDA0003224722110000012
2.根据权利要求1所述的金纳米组装体，其特征在于，所述聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段聚乙二醇与金纳米颗粒的摩尔比为2.5～15：1。
3.根据权利要求1所述的金纳米组装体，其特征在于，所述聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段硫辛酸甲基丙烯酸羟基乙基酯通过二硫键与金的配位作用，吸附于金纳米颗粒表面；
所述聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段硫辛酸甲基丙烯酸羟基乙基酯的聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯链段，和聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段聚乙二醇的聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯链段，通过疏水相互作用以及同种化学结构的链段焓优先相互作用，封装连接。
4.根据权利要求1所述的金纳米组装体，其特征在于，所述内核的粒径为4～7nm；所述外壳的粒径为100～200nm。
5.根据权利要求1所述的金纳米组装体，其特征在于，当pH为7.4时，所述金纳米组装体的粒径为120-140nm；当pH为6.8时，所述金纳米组装体的粒径为5-10nm。
6.一种如权利要求1～5任意一项所述的增敏肿瘤放疗的金纳米组装体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
A)将氯金酸、四氢化萘和十八胺混合，加入四丁基溴化铵，加热反应，然后加入丙酮，过膜得到金纳米颗粒；
B)将所述金纳米颗粒和聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段硫辛酸甲基丙烯酸羟基乙基酯混合于四氢呋喃溶液中，搅拌，正己烷中沉淀，离心，重悬，得到未加聚乙二醇修饰的金纳米组装体；
C)将未加聚乙二醇修饰的金纳米组装体和聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段聚乙二醇混合于四氢呋喃溶液中，搅拌，透析，得到金纳米组装体。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段硫辛酸甲基丙烯酸羟基乙基酯的制备方法为：
1)丙烯酰氯、2-(六甲撑二亚胺)乙醇和三乙胺反应，得到2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯；
2)将所述2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯与偶氮二异丁氰和氰甲基十二烷基三硫代碳酸酯溶于二氧六环，加热反应，得到聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯；
3)将所述聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯、硫辛酸甲基丙烯酸羟基乙基酯和偶氮二异丁氰溶于二氧六环，加热反应，浓缩，正己烷沉淀得到聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段硫辛酸甲基丙烯酸羟基乙基酯。
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段聚乙二醇的制备方法为：
将聚乙二醇-氰甲基十二烷基三硫代碳酸酯、偶氮二异丁氰和2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯溶于二氧六环，加热反应，浓缩，正己烷沉淀得到聚2-(六甲撑亚胺)乙基甲基丙烯酸酯嵌段聚乙二醇。
9.权利要求1～5任意一项所述的增敏肿瘤放疗的金纳米组装体或权利要求6～8任一项所述的制备方法制备的金纳米组装体在制备抗肿瘤药物中的应用。
10.一种抗肿瘤药物，包括权利要求1～5任意一项所述的增敏肿瘤放疗的金纳米组装体或权利要求6～8任一项所述的制备方法制备的金纳米组装体。
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