CN111286057A - 一种草莓保鲜壳聚糖基抑菌膜的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种草莓保鲜壳聚糖基抑菌膜的制备方法。肉桂醛作为抑菌剂,通过流延法制得水溶性较强的天然抑菌膜;实验表明,肉桂醛壳聚糖基抑菌膜对金黄色葡萄球菌、肠炎沙门氏菌、托拉斯假单胞杆菌有不同程度的抑制作用;将新鲜草莓用抑菌膜封盖在保鲜盒中以达到食品保鲜的效果。新鲜的草莓在室温下可保鲜7‑8d。本发明采用壳聚糖基抑菌膜对新鲜草莓进行保鲜贮藏,在没有大面积接触草莓果实的基础上,安全无毒、无二次污染、绿色环保,既保持了果蔬原有品质,又显著延长了果蔬的货架期。
Description
技术领域:
本发明属于果蔬保鲜技术领域,涉及一种草莓保鲜壳聚糖基抑菌膜的制备方法。
背景技术:
N-琥珀酰壳聚糖(NSC)是近年来研究出的一种新型水溶性壳聚糖衍生物,由壳聚糖与琥珀酸酐酞化反应而得。壳聚糖的N-酰化反应降低了壳聚糖分子内和分子间形成氢键的能力,破坏了壳聚糖分子链原有的规整性,导致其结晶性明显降低,所以NSC的水溶性大大提高,具有良好的生物相容性、低毒性、可以在人体内长期滞留,在琥珀酰化过程中,使得原有壳聚糖引入大量的羧基,通过EDC、NHS活化,与抑菌剂反应,实现两者的共价结合,对金黄色葡萄球菌和李斯特菌表现出良好的抑菌性。
肉桂醛是一种天然的芳香a,β-不饱和醛,是肉桂树的次生代谢产物肉桂精油中的一种主要物质,又名β-苯丙烯醛。肉桂醛在食品工业上大多用作食品添加剂,常用于食品的防腐、杀菌、保鲜等功能,可以作为一种安全有效的活性物质应用于食品包装中。肉桂醛主要从桂皮中提取,其高效抑菌性以及抗氧化性已被证实,对大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、志贺氏痢疾杆菌、伤寒和副伤寒甲杆菌、肺炎球菌、产气杆菌、变形杆菌、炭疽杆菌、肠炎沙门氏菌,霍乱弧菌等有抑制作用,且对革兰氏阳性菌杀菌效果显著。肉桂醛对灰葡萄孢菌菌丝生长和孢子萌发均有较好的抑制作用,能够有效的控制灰霉病的发生及延长草莓的保鲜期。肉桂醛难溶于水、甘油,易溶于醇、醚和石油醚中,能随水蒸气挥发,所以加入一定体积的吐温-80增加肉桂醛在NSC溶液中的溶解。
草莓是蔷薇科草莓属多年生的草本植物,因富含维生素、叶酸、酚类等生物活性成分,享有“水果皇后”之称。但草莓是一种采后寿命非常短暂的非呼吸跃变型果实,一般情况下,草莓采收后放置一天即失去了商品价值。草莓容易腐烂的原因是草莓的果实饱含果汁,果皮极薄,十分娇嫩,极易受损而腐烂。草莓在贮藏中易受灰霉、根霉危害,室温下草莓失水快,每天可失水,还有氧化作用引起果实变色等,均是影响有机草莓保鲜效果的主要原因。草莓采摘后如何保鲜是目前亟待解决的热点问题,为了解决草莓采摘后易引起的草莓霉变、腐烂、发酵、软化、氧化等问题,开发一种可以替代化学保险剂的安全有效、无公害的保鲜方法对草莓果实的贮藏保鲜具有非常重要的意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种草莓保鲜壳聚糖基抑菌膜的制备方法,以解决草莓采摘后易引起的草莓霉变、腐烂、发酵、软化、氧化等问题,提高了草莓的贮藏期。
本发明为解决技术方案采取如下技术方案:
本发明提供的一种草莓保鲜壳聚糖基抑菌膜的制备方法,其方法如下所述:
1、一种草莓保鲜壳聚糖基抑菌膜的制备方法:其特征在于:肉桂醛作为抑菌剂,通过流延法制成壳聚糖基抑菌薄膜;将新鲜草莓放置于无菌的保鲜盒中,在无菌环境下将壳聚糖基抑菌薄膜封盖住保鲜盒口,进行食品保鲜。
2、一种草莓保鲜壳聚糖基抑菌膜的制备方法,其特征在于:有以下步骤:
(1)制备NSC:N-琥珀酰壳聚糖(NSC)的制备参照CN 10651927A:壳聚糖粉末按照1:18~1:22mg/mL的质量体积比溶解在DMSO中,缓慢加入琥珀酸酐,使得壳聚糖与琥珀酸酐的质量比为1~3,在50~70℃加热6~8h,过滤,将沉淀物溶解在乙醇中,用1MNaOH溶液调节溶液pH为9~12,过滤后将沉淀物按照1:50~1:55mg/mL的质量体积比溶解在蒸馏水中,再加入丙酮,丙酮与蒸馏水的质量比为3~5,用乙醇和丙酮冲洗沉淀,将获得的产物在50℃真空条件下干燥;
(2)NSC固载肉桂醛:取1g NSC溶解在20mL pH为6的柠檬酸缓冲液/磷酸缓冲液中,加入EDC、NHS、肉桂醛、吐温-80制得所需溶液;
(3)涂膜液的制备:向上述制得溶液中加入5%~10%的甘油,搅拌均匀分散均匀后,超声处理15min,除去气泡后制得N-琥珀酰壳聚糖固载肉桂醛复合涂膜液;
(4)抑菌膜的制备:将上述制得的液体采用流延法制膜,在40℃条件下干燥10h;
(5)食品保鲜:将新鲜草莓用抑菌膜封盖在保鲜盒中,于室温下放置。
在步骤(2)中,所述NSC与缓冲液的比例为1:20(mg/ml);NSC与EDC的质量比为1:0.03;EDC与NHS的质量比为1:1;NSC与缓冲液的比例为1:7.5(mg/ml)。
在步骤(2)中,所述肉桂醛通过吐温-80来增加在N-琥珀酰壳聚糖溶液中的溶解。
在步骤(3)中,所述搅拌速度为10000±1000r/min;搅拌时间为1min。
在步骤(3)中,所述超声处理为40KHz/500W,时间为15min。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:
1、本发明采用食品工业中常用的食品添加剂且具有良好抑菌效果的肉桂醛与具有良好保鲜效果的N-琥珀酰壳聚糖溶液复配制成N-琥珀酰壳聚糖与肉桂醛复合涂膜液,采用流延法制成抑菌薄膜,采用封盖的手段,用于草莓保鲜,使草莓可以维持其原有的食品品质,从而达到既能抑制草莓表面微生物生长,又能延长食品的货架期。
2、本发明采用肉桂醛和吐温-80与N-琥珀酰壳聚糖配合使用,有效解决了壳聚糖水溶性差的特点,肉桂醛通过交联剂EDC/NHS固载在NSC上,并通过少量表面活性剂(吐温-80)增加肉桂醛在NSC溶液中的溶解,有效增强了抑菌膜的抑菌保鲜效果。
3、本发明采用的抑菌膜在保鲜过程中,没有大面积接触草莓果实本身,安全无毒,用以解决草莓采摘后易引起的草莓霉变、腐烂、发酵、软化、氧化等问题,新鲜的草莓在室温下可保鲜7-8d。
4、本发明的方法具有简单、高效、绿色环保的特点,具有广泛的应用前景。
附图说明
图1为本发明的抑菌圈直径测定结果;
图2为本发明的亮度测定结果;
图3为本发明的硬度测定结果;
图4为本发明的失重率测试结果。
具体实施方式
下面结合实施例,对本发明作进一步描述,但这些实施例仅用于解释本发明并不对本发明的保护范围构成任何限制。
具体实施例一:
N-琥珀酰壳聚糖(NSC)的制备参照CN 10651927A:壳聚糖粉末按照1:18~1:22mg/mL的质量体积比溶解在DMSO中,缓慢加入琥珀酸酐,使得壳聚糖与琥珀酸酐的质量比为1~3,在50~70℃加热6~8h,过滤,将沉淀物溶解在乙醇中,用1MNaOH溶液调节溶液pH为9~12,过滤后将沉淀物按照1:50~1:55mg/mL的质量体积比溶解在蒸馏水中,再加入丙酮,丙酮与蒸馏水的质量比为3~5,用乙醇和丙酮冲洗沉淀,将获得的产物在50℃真空条件下干燥;
取1.0g NSC溶解在20mL的PH=6的磷酸缓冲液中,分别加入0.03gEDC、0.03gNHS,在室温下搅拌3h,加入体积分数为5%的甘油,搅拌分散均匀后,在40KHz/500W下超声处理15min,除去气泡后制得涂膜液,倒膜后在40℃条件下干燥10h制得N-琥珀酰壳聚糖抑菌膜。通过抑菌试验检测其抑菌性。
具体实施例二:
N-琥珀酰壳聚糖(NSC)的制备参照CN 10651927A:壳聚糖粉末按照1:18~1:22mg/mL的质量体积比溶解在DMSO中,缓慢加入琥珀酸酐,使得壳聚糖与琥珀酸酐的质量比为1~3,在50~70℃加热6~8h,过滤,将沉淀物溶解在乙醇中,用1MNaOH溶液调节溶液pH为9~12,过滤后将沉淀物按照1:50~1:55mg/mL的质量体积比溶解在蒸馏水中,再加入丙酮,丙酮与蒸馏水的质量比为3~5,用乙醇和丙酮冲洗沉淀,将获得的产物在50℃真空条件下干燥;
称取1.0g NSC溶解在20mL的PH=6的磷酸缓冲液中,分别加入0.03gEDC、0.03gNHS,在室温下搅拌3h,加入体积分数为5%的甘油,搅拌30min,加入体积分数为2%的吐温-80,继续搅拌30min,加入体积分数为0.5%的肉桂醛,搅拌分散均匀后,在40KHz/500W下超声处理15min,除去气泡后制得涂膜液,倒膜后在40℃条件下干燥10h制得N-琥珀酰壳聚糖固载肉桂醛抑菌膜,。通过抑菌试验检测其抑菌性。
具体实施例三:
N-琥珀酰壳聚糖(NSC)的制备参照CN 10651927 A:壳聚糖粉末按照1:18~1:22mg/mL的质量体积比溶解在DMSO中,缓慢加入琥珀酸酐,使得壳聚糖与琥珀酸酐的质量比为1~3,在50~70℃加热6~8h,过滤,将沉淀物溶解在乙醇中,用1MNaOH溶液调节溶液pH为9~12,过滤后将沉淀物按照1:50~1:55mg/mL的质量体积比溶解在蒸馏水中,再加入丙酮,丙酮与蒸馏水的质量比为3~5,用乙醇和丙酮冲洗沉淀,将获得的产物在50℃真空条件下干燥;
称取1.0g NSC溶解在20mL的PH=6的磷酸缓冲液中,分别加入0.03gEDC、0.03gNHS,在室温下搅拌3h,加入体积分数为5%的甘油,搅拌30min,加入体积分数为2%的吐温-80,继续搅拌30min,加入体积分数为1%的肉桂醛,搅拌分散均匀后,在40KHz/500W下超声处理15min,除去气泡后制得涂膜液,倒膜后在40℃条件下干燥10h制得N-琥珀酰壳聚糖固载肉桂醛抑菌膜。通过抑菌试验检测其抑菌性。
具体实施例四:
N-琥珀酰壳聚糖(NSC)的制备参照CN 10651927 A:壳聚糖粉末按照1:18~1:22mg/mL的质量体积比溶解在DMSO中,缓慢加入琥珀酸酐,使得壳聚糖与琥珀酸酐的质量比为1~3,在50~70℃加热6~8h,过滤,将沉淀物溶解在乙醇中,用1MNaOH溶液调节溶液pH为9~12,过滤后将沉淀物按照1:50~1:55mg/mL的质量体积比溶解在蒸馏水中,再加入丙酮,丙酮与蒸馏水的质量比为3~5,用乙醇和丙酮冲洗沉淀,将获得的产物在50℃真空条件下干燥;
称取1.0g NSC溶解在20mL的PH=6的磷酸缓冲液中,分别加入0.03gEDC、0.03gNHS,在室温下搅拌3h,加入体积分数为5%的甘油,搅拌30min,加入体积分数为2%的吐温-80,继续搅拌30min,加入体积分数为1.5%的肉桂醛,搅拌分散均匀后,在40KHz/500W下超声处理15min,除去气泡后制得涂膜液,倒膜后在40℃条件下干燥10h制得N-琥珀酰壳聚糖固载肉桂醛抑菌膜。通过抑菌试验检测其抑菌性。
具体实施例五:
N-琥珀酰壳聚糖(NSC)的制备参照CN 10651927 A:壳聚糖粉末按照1:18~1:22mg/mL的质量体积比溶解在DMSO中,缓慢加入琥珀酸酐,使得壳聚糖与琥珀酸酐的质量比为1~3,在50~70℃加热6~8h,过滤,将沉淀物溶解在乙醇中,用1MNaOH溶液调节溶液pH为9~12,过滤后将沉淀物按照1:50~1:55mg/mL的质量体积比溶解在蒸馏水中,再加入丙酮,丙酮与蒸馏水的质量比为3~5,用乙醇和丙酮冲洗沉淀,将获得的产物在50℃真空条件下干燥;
称取1.0g NSC溶解在20mL的PH=6的磷酸缓冲液中,分别加入0.03gEDC、0.03gNHS,在室温下搅拌3h,加入体积分数为5%的甘油,搅拌30min,加入体积分数为2%的吐温-80,继续搅拌30min,加入体积分数为2%的肉桂醛,搅拌分散均匀后,在40KHz/500W下超声处理15min,除去气泡后制得涂膜液,倒膜后在40℃条件下干燥10h制得N-琥珀酰壳聚糖固载肉桂醛抑菌膜。通过抑菌试验检测其抑菌性。
实施例1~5的抑菌实验测定结果详见附图图1(图1中的“NSC”代表实施例一制备的N-琥珀酰壳聚糖抑菌膜;“Cin-NSC”代表实施例2~5制备的N-琥珀酰壳聚糖固载肉桂醛抑菌膜,百分制数字代表肉桂醛含量)。
具体实施例六:
为了进一步说明本发明对草莓的保鲜效果,选取品种为“丹东999”成熟草莓鲜果,进行以下6组保鲜试验,每隔1d观察草莓情况及取样测定草莓相关评价指标。
试验组1(对照组):草莓不做任何处理,逐个平摊放在保鲜盒中,置于室温条件下保藏。
试验组2:草莓使用本发明实施例1制备的N-琥珀酰壳聚糖抑菌膜封盖,置于室温下保藏。
试验组3:草莓使用本发明实施例2制备的N-琥珀酰壳聚糖固载肉桂醛抑菌膜(肉桂醛的体积分数为0.5%)封盖,置于室温下保藏。
试验组4:草莓使用本发明实施例3制备的N-琥珀酰壳聚糖固载肉桂醛抑菌膜(肉桂醛的体积分数为1%)封盖,置于室温下保藏。
试验组5:草莓使用本发明实施例4制备的N-琥珀酰壳聚糖固载肉桂醛抑菌膜(肉桂醛的体积分数为1.5%)封盖,置于室温下保藏。
试验组6:草莓使用本发明实施例5制备的N-琥珀酰壳聚糖固载肉桂醛抑菌膜(肉桂醛的体积分数为2%)封盖,置于室温下保藏。
以上6组保鲜试验,记录了草莓在八天内的感官评价:如形态、色泽(附图图2);并且测定了草莓硬度、失重率(附图图3、图4)的变化。
一、感官评价
试验组1和试验组2于第4天果实出现霉变、腐烂、软化严重、颜色暗。
试验组3和试验组4于第4天果实并无腐烂现象,第6天果实出现霉变、腐烂、软化、颜色暗。
试验组5和试验组6于第8天果实未出现腐烂现象,仅果实饱满度下降,软化程度轻,颜色变暗。
利用色差仪在草莓固定位置测定草莓果实的L值(亮/暗),并记录数据如图2。
图2中的“Blank”标注代表对照组;“NSC”代表实施例一制备的N-琥珀酰壳聚糖抑菌膜;“Cin-NSC”代表实施例2~5制备的N-琥珀酰壳聚糖固载肉桂醛抑菌膜,百分制数字代表肉桂醛含量。
由图2可以看出,草莓的L值(亮/暗)均呈现随着贮藏时间的延长而下降的趋势,处理过的草莓其色泽、明亮度在一定程度上有减缓作用,其中试验组6的草莓亮度值下降最为缓慢。
图2中以第八天为例,从上至下依次为试验组5、试验组6、试验组4、试验组3、试验组2、对照组的数据,每一组数据曲线对应相应的对照组或试验组。
二、硬度测定
使用质构仪对草莓果实进行测定,采用TPA质构分析,选取探头型号为TA44。
图3中的“Blank”标注代表对照组;“NSC”代表实施例一制备的N-琥珀酰壳聚糖抑菌膜;“Cin-NSC”代表实施例2~5制备的N-琥珀酰壳聚糖固载肉桂醛抑菌膜,百分制数字代表肉桂醛含量。
由图3可以看出,对照组草莓硬度下降趋势最大,而NSC固载肉桂醛抑菌膜与NSC抑菌膜相比较,可以发现NSC固载肉桂醛抑菌膜对草莓的硬度有较好的保持效果,其中试验组5的草莓果实硬度下降最为缓慢。
图3中以第六天为例,从上至下依次为试验组5、试验组6、试验组4、试验组3、试验组2、对照组的数据,每一组数据曲线对应相应的对照组或试验组。
三、失重率
失重率的测定方法采用称重法。
失重率=(贮藏前果实重量-测定时果实重量)/贮藏前果实重量*100%
图4中的“Blank”标注代表对照组;“NSC”代表实施例一制备的N-琥珀酰壳聚糖抑菌膜;“Cin-NSC”代表实施例2~5制备的N-琥珀酰壳聚糖固载肉桂醛抑菌膜,百分制数字代表肉桂醛含量。
由图4可以看出,草莓的失重率均呈现随着贮藏时间的延长而增加的趋势,处理过的草莓其失重率在一定程度上有减缓作用,其中试验组3的草莓效果最好。
图4中以第八天为例,从上至下依次为对照组、试验组2、试验组6、试验组4、试验组5、试验组3的数据,每一组数据曲线对应相应的对照组或试验组。
以上感官评价结合附图数据显示,试验组1作为对照组,到第4天,草莓已经出现霉变、腐烂,其感官评价、硬度、失重率、L值均有跳跃式的下降变化,而试验组3~6的草莓经过抑菌膜处理后,都可以延长草莓的贮藏期,特别是试验组5和试验组6经过本发明的壳聚糖抑菌薄膜(肉桂醛体积分数分别为1.5%和2%)处理后,第8天,草莓也未出现霉变腐烂,失重率、硬度、L值变化均小于其他四组,因此,本发明的N-琥珀酰壳聚糖固载肉桂醛抑菌膜能够有效避免草莓发生霉变、腐烂、发酵、软化、氧化等,可提高草莓的贮藏期和保鲜效果,新鲜的草莓,在室温下可保鲜7~8d,很好的延长了草莓的贮藏期。
Claims (6)
1.一种草莓保鲜壳聚糖基抑菌膜的制备方法:其特征在于:肉桂醛作为抑菌剂,通过流延法制成壳聚糖基抑菌薄膜;将新鲜草莓放置于无菌的保鲜盒中,在无菌环境下将壳聚糖基抑菌薄膜封盖住保鲜盒口,进行食品保鲜。
2.根据权利要求1所述的一种草莓保鲜壳聚糖基抑菌膜的制备方法,其特征在于:有以下步骤:
(1)制备N-琥珀酰壳聚糖(NSC):壳聚糖粉末按照1:18~1:22mg/mL的质量体积比溶解在DMSO中,缓慢加入琥珀酸酐,使得壳聚糖与琥珀酸酐的质量比为1~3,在50~70℃加热6~8h,过滤,将沉淀物溶解在乙醇中,用1MNaOH溶液调节溶液pH为9~12,过滤后将沉淀物按照1:50~1:55mg/mL的质量体积比溶解在蒸馏水中,再加入丙酮,丙酮与蒸馏水的质量比为3~5,用乙醇和丙酮冲洗沉淀,将获得的产物在50℃真空条件下干燥;
(2)NSC固载肉桂醛:取1g NSC溶解在20mLpH为6的柠檬酸缓冲液/磷酸缓冲液中,加入EDC、NHS、肉桂醛、吐温-80制得所需溶液;
(3)涂膜液的制备:向上述制得溶液中加入5%~10%的甘油,搅拌均匀分散均匀后,超声处理15min,除去气泡后制得N-琥珀酰壳聚糖肉桂醛复合涂膜液;
(4)抑菌膜的制备:将上述制得的液体采用流延法制膜,在40℃条件下干燥10h;
(5)食品保鲜:将新鲜草莓用抑菌膜封盖在保鲜盒中,于室温下放置。
3.根据权利要求2所述的一种草莓保鲜壳聚糖基抑菌膜的制备方法,其特征在于,(2)中所述NSC与缓冲液的比例为1:20mg/ml;NSC与EDC的质量比为1:0.03;EDC与NHS的质量比为1:1;NSC与缓冲液的比例为1:7.5mg/ml。
4.根据权利要求2所述的一种草莓保鲜壳聚糖基抑菌膜的制备方法,其特征在于,(2)中所述肉桂醛通过吐温-80来增加在N-琥珀酰壳聚糖溶液中的溶解。
5.根据权利要求2所述的一种草莓保鲜壳聚糖基抑菌膜的制备方法,其特征在于,(3)中所述搅拌速度为10000±1000r/min;搅拌时间为1min。
6.根据权利要求2所述的一种草莓保鲜壳聚糖基抑菌膜的制备方法,其特征在于,(3)中所述超声处理为40KHz/500W,时间为15min。
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