CN111281958B - 一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络、冠心病及心绞痛的中药组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及药物提取技术领域,特别涉及一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络、冠心病及心绞痛的中药组合物及其制备方法。本发明基于麝香心脑通片配伍基础上,对各味药材进行有效部位的富集、分离、纯化,进行组分筛选,以不同提取部位进行重新配伍组成新处方,开发出物质基础基本明确、作用机制比较清楚、临床适应症更加准确的中成药。通过药效学对比研究,确定本发明的中药组合物作用效果明显优于对照组,本发明的中药组合物能增加冠脉血流量,保护缺血心肌损伤、调节脂质过氧化反应,提高脑组织血流量,神经营养,抑制脑组织凋亡,对于治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛等方面具有明确的药理作用,并且效果显著。
Description
技术领域
本发明涉及药物提取技术领域,特别涉及一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络、冠心病及心绞痛的中药组合物及其制备方法。
背景技术
随着人们生活水平的提高,各种严重威胁人类生命的疾病患病率逐年攀升,其中中风及心血管疾病发病率呈明显的上升趋势。中风病具有发病率高、致残率高、病死率高和复发率高的特点,是中老年人致死和致残的主要疾病之一。我国每年新增中风患者150万~180万,其中缺血性中风患者约占 43%~65%,甚至有报告高达80%。心血管疾病更是达到“谈虎色变”的程度,据2017年美国心脏协会发布的对心脏病和流行病学统计数据显示,在全球范围内31%的死亡是由心血管疾病引起,其中冠心病心绞痛是目前心血管疾病患者致残、致死的重要原因之一,严重威胁人体健康,现市场治疗中风、中经络及冠心病、心绞痛的药物种类繁多,但大多是化学合成,副作用很大,因此,从传统中医药中寻求一种疗效确切、安全、无毒、服用方便的新型中药制剂,受到国内外医学界的广泛关注。其中麝香心脑通系列药物是治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛的经典名方。在治疗中风、中经络及冠心病、心绞痛方面具有显著的临床疗效。
麝香心脑通系列药物,由丹参、三七、红花、人工麝香等12味中药组成,包括麝香心脑通片和麝香心脑通胶囊、麝香心脑通滴丸、麝香心脑通分散片等,市面上常见主要为麝香心脑通片与麝香心脑通胶囊,其具有活血化瘀、开窍止痛之功效,临床用于治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛,证见;胸闷刺痛、口眼歪斜、半身不遂。麝香心脑通片与麝香心脑通胶囊是相同配方相同的提取工艺。现有的麝香心脑通片三七、水蛭、冰片、麝香、人参茎叶总皂苷分别粉碎成细粉,备用;其余红花等七味加水煎煮三次,第一、二次各2小时,第三次1小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩至相对密度为1.35(50℃)的稠膏;将上述稠膏与三七、水蛭细粉混匀,干燥,粉碎成细粉,制成颗粒,干燥后用配研法加入冰片、麝香、人参茎叶总皂苷粉,混匀,压制成片。以上提取方法为比较传统的中药制备方法,工艺较落后,有效成分含量低,起效慢,服用量大,麝香心脑通片每次服用3-4片,一日3 次。麝香心脑通胶囊每次服用3-4粒,一日3次。顺应性差,针对性不强,适应症不够明确。因此利用新技术开发新的对症胸腹刺痛、口眼歪斜,特别是治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛的中药是广大医药工作者努力的目标。
发明内容
有鉴于此,本发明提供了一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络、冠心病及心绞痛的中药组合物及其制备方法。本发明以现代科学手段对各味药材进行有效部位的富集、分离、纯化,进行组分筛选,组成新处方,获得疗效更为确切、显著的新组方。
为了实现上述发明目的,本发明提供以下技术方案:
本发明提供了一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络、冠心病及心绞痛的中药组合物,以重量份计,该中药组合物由中药提取物A2~20份、中药提取物B 2~15份、中药提取物C 2~12份、中药提取物D1~8份组成;
中药提取物A的制备方法为:
步骤A-1:取丹参8~12份、三七0.3~0.7份、川芎1.5~2.5份、粉葛6~10 份、郁金4~6份、桃仁8~12份,回流提取,所得醇提液回收乙醇,浓缩至清膏,减压干燥,粉碎,得到药粉a;
步骤A-2:取淫羊藿6~10份,采用乙醇水溶液提取,回收乙醇,减压浓缩至稠膏,冻干,得到药粉b;
步骤A-3:将药粉a与药粉b混匀,得到中药提取物A;
中药提取物B的制备方法为:
步骤B-1:取水蛭1~3份,加入胃蛋白酶酶解,收集酶解液,离心,取上清液,经过大孔树脂,乙醇洗脱部位经离子交换树脂,用含有氯化钠的乙醇水溶液洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,浓缩液冻干,得到药粉c;
步骤B-2:取丹参8~12份、桃仁8~12份、红花1~3份,加水回流提取,合并煎液,滤过,减压浓缩,浓缩液冻干,得到药粉d;
步骤B-3:将药粉c与药粉d混匀,得到中药提取物B;
中药提取物C的制备方法为:
取红花加水进行闪式提取,所得提取液中加入乙醇或乙醇水溶液,调节药液pH值至4.5~5.5,静置,回收乙醇,减压浓缩,浓缩液冻干,得到中药提取物C;
中药提取物D的制备方法为:
取水蛭0.5~1.5份、人工麝香0.5~1.5份、冰片0.5~1.5份、人参茎叶总皂苷0.5~1.5份、三七0.2~0.8份,粉碎,混匀,得到中药提取物D。
中风、中经络及冠心病、心绞痛症,我国中医理论认为病机为本虚标实,下虚上实,以肝、脾、肾虚为本,风火痰瘀为标,主要为内风动越、五志化火、痰阻经络、气机失调、瘀血阻滞所致。祖国医学通过长期的医疗实践,对中风病及引发的冠心病、心绞痛的治疗具有独特的理论和特色,遵循辨证施治的原则,抓住风、火、痰、瘀、虚等病机要点。本发明就其病机所致中风、中经络及冠心病、心绞痛提供一种中药组合物。中药组方配伍规律是中医药理论的精华之一,开展组方配伍研究对继承和发展中医药理论有着重要理论意义,本发明基于祖国医学治疗中风、中经络及冠心病、心绞痛治疗原则,以开窍醒神、活血化瘀的麝香、水蛭为君药,以清热息风、温阳化痰、开窍醒脑的三七、淫羊藿、粉葛、郁金、桃仁、川芎和益气回阳、固脱醒脑人参为臣药,辅以针对冠心病、心绞痛的丹参、红花和冰片为佐使进行配伍。遵循祖国医药学配伍基础上,以现代科学手段对各味药材进行有效部位的富集、分离、纯化,进行组分筛选,组成新处方,获得疗效更为确切、显著的新组方。
本发明提供了一种用于治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛的中药组合物及其制备方法,通过对处方中丹参、三七、红花、淫羊藿等十二味药材中有效部位的提取精制及药效学筛选,将原有剂型改造成由提取的有效部味组成的一种中药组合物,本发明制备的中药组合物经药效学实验证实其药效显著,生物利用度高,质量稳定可靠,该中药组合物针对患者需要可制备不同剂型,携带方便,易服用。
作为优选,中药提取物A的制备方法为:
取丹参8~12份、三七0.3~0.7份、川芎1.5~2.5份、粉葛6~10份、郁金4~6份、桃仁8~12份,回流提取2~4次,每次采用6~10倍重量的50%~70%乙醇水溶液提取1~3小时,合并醇提液,回收乙醇,浓缩至1.10~1.30的清膏,减压干燥,粉碎,得到药粉a;
取淫羊藿6~10份,加8~12倍重量的40%~60%乙醇水溶液50~70℃提取 1.5~2.5小时,回收乙醇,减压浓缩至相对密度1.20~1.30的稠膏,冻干,得到药粉b;
将药粉a与药粉b混匀,得到中药提取物A。
在本发明提供的具体实施例中,中药提取物A的制备方法为:
取丹参10份、三七0.5份、川芎2份、粉葛8份、郁金5份、桃仁10份,回流提取3次,第一次采用10倍重量的60%乙醇提取3小时,第二次8倍重量的60%乙醇提取2小时,第三次6倍量的60%乙醇提取1小时,合并醇提液,回收乙醇,浓缩至1.20的清膏,减压干燥,粉碎,得到药粉a;
取淫羊藿8份,加10倍重量的50%乙醇60℃提取2小时,回收乙醇,减压浓缩至相对密度1.25~1.30的稠膏,冻干,得到药粉b;
将药粉a与药粉b混匀,得到中药提取物A。
作为优选,中药提取物B的制备方法为:
取水蛭1~3份,加入胃蛋白酶,胃蛋白酶加入量为280~320U/g,控制温度40~45℃,调节pH值至1.4~1.6,酶解3~5小时,收集酶解液,离心,取上清液,以0.8~1.2BV·h-1的速度经过DA201-C大孔树脂,依次用20%~30%乙醇水溶液、45%~55%乙醇水溶液、70%~80%乙醇水溶液洗脱,以上各洗脱部位经D201离子交换树脂,pH3.8~4.2,上样肽浓度28~32mg·mL-1,流速2.8~3.2 BV·h-1,分别用含有2.0%~3.0%氯化钠的20%~30%乙醇水溶液和含有 2.0%~3.0%氯化钠的40%~60%乙醇水溶液洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,浓缩液冻干,得到药粉c;
取丹参8~12份、桃仁8~12份、红花1~3份,加水回流提取2~3次,每次6~10倍重量的水,提取2~3小时,合并煎液,滤过,减压浓缩,浓缩液冻干,得到药粉d;
将药粉c与药粉d混匀,得到中药提取物B。
在本发明提供的具体实施例中,中药提取物B的制备方法为:
取水蛭2份,加入胃蛋白酶,胃蛋白酶加入量为300U/g,控制温度42℃,调节pH值至1.5,酶解4小时,收集酶解液,离心,取上清液,以1BV·h-1的速度经过DA201-C大孔树脂,依次用25%乙醇水溶液、50%乙醇水溶液、75%乙醇水溶液洗脱,以上各洗脱部位经D201离子交换树脂,pH4.0,上样肽浓度30mg·mL-1,流速3.0BV·h-1,分别用含有2.5%氯化钠的25%乙醇水溶液和含有2.5%氯化钠的50%乙醇水溶液洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,浓缩液冻干,得到药粉c;
取丹参10份、桃仁10份、红花2份,加水回流提取两次,第一次10倍重量的水,提取3小时,第二次6倍重量的水,提取2小时,合并煎液,滤过,减压浓缩,浓缩液冻干,得到药粉d;
将药粉c与药粉d混匀,得到中药提取物B。
作为优选,中药提取物C的制备方法为:
取红花2~4份,加35~45倍重量的水,控制电压为90~110V,闪式提取 1~3min,所得提取液中加入乙醇或乙醇水溶液,使乙醇的浓度达到40%~60%,调节药液pH值至4.5~5.5,静置20~28小时,回收乙醇,减压浓缩,浓缩液冻干,得到中药提取物C。
中药提取物C的制备方法为:
取红花3份,加40倍重量的水,控制电压为100V,闪式提取2min,所得提取液中加入乙醇或乙醇水溶液,使乙醇的浓度达到50%,调节药液pH值至5.0,静置24小时,回收乙醇,减压浓缩,浓缩液冻干,得到中药提取物C。
作为优选,中药提取物D的制备方法为:
取水蛭1份、人工麝香1份、冰片1份、人参茎叶总皂苷1份、三七0.5 份,粉碎,混匀,得到中药提取物D。
作为优选,以重量份计,该中药组合物由中药提取物A14份、中药提取物B 6份、中药提取物C 2份、中药提取物D 5份组成。
本发明还提供了一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络、冠心病及心绞痛的中药组合物的制备方法,包括如下步骤:
步骤A:中药提取物A的制备方法为:
步骤A-1:以重量份计,取丹参8~12份、三七0.3~0.7份、川芎1.5~2.5 份、粉葛6~10份、郁金4~6份、桃仁8~12份,回流提取,所得醇提液回收乙醇,浓缩至清膏,减压干燥,粉碎,得到药粉a;
步骤A-2:取淫羊藿6~10份,采用乙醇水溶液提取,回收乙醇,减压浓缩至稠膏,冻干,得到药粉b;
步骤A-3:将药粉a与药粉b混匀,得到中药提取物A;
步骤B:中药提取物B的制备方法为:
步骤B-1:取水蛭1~3份,加入胃蛋白酶酶解,收集酶解液,离心,取上清液,经过大孔树脂,乙醇洗脱部位经离子交换树脂,用含有氯化钠的乙醇水溶液洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,浓缩液冻干,得到药粉c;
步骤B-2:取丹参8~12份、桃仁8~12份、红花1~3份,加水回流提取,合并煎液,滤过,减压浓缩,浓缩液冻干,得到药粉d;
步骤B-3:将药粉c与药粉d混匀,得到中药提取物B;
步骤C:中药提取物C的制备方法为:
取红花加水进行闪式提取,所得提取液中加入乙醇或乙醇水溶液,调节药液pH值至4.5~5.5,静置,回收乙醇,减压浓缩,浓缩液冻干,得到中药提取物C;
步骤D:中药提取物D的制备方法为:
取水蛭0.5~1.5份、人工麝香0.5~1.5份、冰片0.5~1.5份、人参茎叶总皂苷0.5~1.5份、三七0.2~0.8份,粉碎,混匀,得到中药提取物D;
步骤E:将中药提取物A2~20份、中药提取物B 2~15份、中药提取物 C 2~12份、中药提取物D1~8份混合。
作为优选,中药提取物A的制备方法为:
取丹参8~12份、三七0.3~0.7份、川芎1.5~2.5份、粉葛6~10份、郁金 4~6份、桃仁8~12份,回流提取2~4次,每次采用6~10倍重量的50%~70%乙醇水溶液提取1~3小时,合并醇提液,回收乙醇,浓缩至1.10~1.30的清膏,减压干燥,粉碎,得到药粉a;
取淫羊藿6~10份,加8~12倍重量的40%~60%乙醇水溶液50~70℃提取 1.5~2.5小时,回收乙醇,减压浓缩至相对密度1.20~1.30的稠膏,冻干,得到药粉b;
将药粉a与药粉b混匀,得到中药提取物A。
在本发明提供的具体实施例中,中药提取物A的制备方法为:
取丹参10份、三七0.5份、川芎2份、粉葛8份、郁金5份、桃仁10份,回流提取3次,第一次采用10倍重量的60%乙醇提取3小时,第二次8倍重量的60%乙醇提取2小时,第三次6倍量的60%乙醇提取1小时,合并醇提液,回收乙醇,浓缩至1.20的清膏,减压干燥,粉碎,得到药粉a;
取淫羊藿8份,加10倍重量的50%乙醇60℃提取2小时,回收乙醇,减压浓缩至相对密度1.25~1.30的稠膏,冻干,得到药粉b;
将药粉a与药粉b混匀,得到中药提取物A。
作为优选,中药提取物B的制备方法为:
取水蛭1~3份,加入胃蛋白酶,胃蛋白酶加入量为280~320U/g,控制温度40~45℃,调节pH值至1.4~1.6,酶解3~5小时,收集酶解液,离心,取上清液,以0.8~1.2BV·h-1的速度经过DA201-C大孔树脂,依次用20%~30%乙醇水溶液、45%~55%乙醇水溶液、70%~80%乙醇水溶液洗脱,以上各洗脱部位经D201离子交换树脂,pH3.8~4.2,上样肽浓度28~32mg·mL-1,流速2.8~3.2 BV·h-1,分别用含有2.0%~3.0%氯化钠的20%~30%乙醇水溶液和含有 2.0%~3.0%氯化钠的40%~60%乙醇水溶液洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,浓缩液冻干,得到药粉c;
取丹参8~12份、桃仁8~12份、红花1~3份,加水回流提取2~3次,每次6~10倍重量的水,提取2~3小时,合并煎液,滤过,减压浓缩,浓缩液冻干,得到药粉d;
将药粉c与药粉d混匀,得到中药提取物B。
在本发明提供的具体实施例中,中药提取物B的制备方法为:
取水蛭2份,加入胃蛋白酶,胃蛋白酶加入量为300U/g,控制温度42℃,调节pH值至1.5,酶解4小时,收集酶解液,离心,取上清液,以1BV·h-1的速度经过DA201-C大孔树脂,依次用25%乙醇水溶液、50%乙醇水溶液、75%乙醇水溶液洗脱,以上各洗脱部位经D201离子交换树脂,pH4.0,上样肽浓度30mg·mL-1,流速3.0BV·h-1,分别用含有2.5%氯化钠的25%乙醇水溶液和含有2.5%氯化钠的50%乙醇水溶液洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,浓缩液冻干,得到药粉c;
取丹参10份、桃仁10份、红花2份,加水回流提取两次,第一次10倍重量的水,提取3小时,第二次6倍重量的水,提取2小时,合并煎液,滤过,减压浓缩,浓缩液冻干,得到药粉d;
将药粉c与药粉d混匀,得到中药提取物B。
作为优选,中药提取物C的制备方法为:
取红花2~4份,加35~45倍重量的水,控制电压为90~110V,闪式提取 1~3min,所得提取液中加入乙醇或乙醇水溶液,使乙醇的浓度达到40%~60%,调节药液pH值至4.5~5.5,静置20~28小时,回收乙醇,减压浓缩,浓缩液冻干,得到中药提取物C。
中药提取物C的制备方法为:
取红花3份,加40倍重量的水,控制电压为100V,闪式提取2min,所得提取液中加入乙醇或乙醇水溶液,使乙醇的浓度达到50%,调节药液pH值至5.0,静置24小时,回收乙醇,减压浓缩,浓缩液冻干,得到中药提取物C。
作为优选,中药提取物D的制备方法为:
取水蛭1份、人工麝香1份、冰片1份、人参茎叶总皂苷1份、三七0.5 份,粉碎,混匀,得到中药提取物D。
作为优选,步骤E为:将中药提取物A 14份、中药提取物B 6份、中药提取物C 2份、中药提取物D 5份混合。
本发明提供了一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络、冠心病及心绞痛的中药组合物及其制备方法。以重量份计,该中药组合物由中药提取物A 2~20 份、中药提取物B 2~15份、中药提取物C 2~12份、中药提取物D 1~8份组成;制备方法包括:取丹参8~12份、三七0.3~0.7份、川芎1.5~2.5份、粉葛6~10份、郁金4~6份、桃仁8~12份,回流提取,所得醇提液回收乙醇,浓缩至清膏,减压干燥,粉碎,得到药粉a;取淫羊藿6~10份,采用乙醇水溶液提取,回收乙醇,减压浓缩至稠膏,冻干,得到药粉b;将药粉a与药粉 b混匀,得到中药提取物A;取水蛭1~3份,加入胃蛋白酶酶解,收集酶解液,离心,取上清液,经过大孔树脂,乙醇洗脱部位经离子交换树脂,用含有氯化钠的乙醇水溶液洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,浓缩液冻干,得到药粉c;取丹参8~12份、桃仁8~12份、红花1~3份,加水回流提取,合并煎液,滤过,减压浓缩,浓缩液冻干,得到药粉d;将药粉c与药粉d混匀,得到中药提取物B;取红花加水进行闪式提取,所得提取液中加入乙醇或乙醇水溶液,调节药液pH值至4.5~5.5,静置,回收乙醇,减压浓缩,浓缩液冻干,得到中药提取物C;取水蛭0.5~1.5份、人工麝香0.5~1.5份、冰片0.5~1.5份、人参茎叶总皂苷0.5~1.5份、三七0.2~0.8份,粉碎,混匀,得到中药提取物D。
本发明具有的技术效果为:
本发明基于麝香心脑通片配伍基础上,对各味药材进行有效部位的富集、分离、纯化,进行组分筛选,以不同提取部位进行重新配伍组成新处方,开发出物质基础基本明确、作用机制比较清楚、临床适应症更加准确的中成药。
本发明通过药效学对比研究,确定本发明的中药组合物作用效果明显优于对照组,本发明的中药组合物能增加冠脉血流量,保护缺血心肌损伤、调节脂质过氧化反应,提高脑组织血流量,神经营养,抑制脑组织凋亡,对于治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛等方面具有明确的药理作用,并且效果显著。
附图说明
图1-14分别示空白对照组、模型对照组、脑心通胶囊组、原中药组合物1 组、原中药组合物2组、本发明中药组合物Ⅰ、Ⅱ、III、IV、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ组的心肌细胞组织形态图;
图15-28分别示空白对照组、模型对照组、脑心通胶囊组、原中药组合物1 组、原中药组合物2组、本发明中药组合物Ⅰ、Ⅱ、III、IV、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ组的脑梗死面积;
图29-42分别示空白对照组、模型对照组、脑心通胶囊组、原中药组合物1 组、原中药组合物2组、本发明中药组合物Ⅰ、Ⅱ、III、IV、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ组的脑组织形态图。
具体实施方式
本发明公开了一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络、冠心病及心绞痛的中药组合物及其制备方法,本领域技术人员可以借鉴本文内容,适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是,所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的,它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述,相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合,来实现和应用本发明技术。
本发明提供了一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛的中药组合物,由一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物A2~20份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物B2~15份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物C 2~12份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物D1~8份组成。
一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药组合物,最佳配比为:一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物A14份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物B 6份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物C 2份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物D 5份组成。
1.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物A 的制备方法:
取丹参10份、三七0.5份、川芎2份、粉葛8份、郁金5份、桃仁10份,回流提取3次,第一次10倍量60%乙醇提取3小时,第二次8倍量的60%乙醇提取2小时,第三次6倍量的60%乙醇提取1小时,合并醇提液,回收乙醇,浓缩至1.20的清膏,减压干燥,干膏粉碎,药粉a。
取淫羊藿8份,加10倍量的50%乙醇60℃提取2小时,回收乙醇,减压浓缩至相对密度1.25-1.30的稠膏,浓缩液冻干,药粉b。
取药粉a与药粉b混匀,即得提取物A。
2.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物B 的制备方法:
取水蛭2份,加入胃蛋白酶,控制温度42℃,调节pH值1.5,酶解4小时,胃蛋白酶加入量为300U/g,收集酶解液,离心,取上清液,以1BV·h-1的速度经过DA201-C大孔树脂,依次用25%乙醇、50%乙醇和75%乙醇溶液洗脱,以上各洗脱部位经D201离子交换树脂,pH4.0,上样肽浓度30mg·mL-1, 流速3.0BV·h-1,分别用2.5%氯化钠的25%乙醇和2.5%氯化钠的50%乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,浓缩液冻干,即得药粉c。
取丹参10份,桃仁10份,红花2份,加水回流提取两次,第一次10倍量的水,提取3小时,第二次6倍量的水,提取2小时,合并煎液,滤过,减压浓缩,浓缩液冻干,得药粉d。
取药粉c与药粉d混合均匀,得提取物B。
3.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物C 的制备方法:
取红花3份,加40倍水,控制电压为100V,闪式提取2min,提取液加入乙醇,使乙醇的浓度为50%,调节药液使药液pH5.0,静置24小时,回收乙醇,减压浓缩,浓缩液冻干,即得提取物C。
4.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物D 的制备方法:
取水蛭1份,人工麝香1份,冰片1份,人参茎叶总皂苷1份,三七0.5 份,粉碎成细粉,混合均匀,即得提取物D。
5.将一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物 A、中药提取物B、中药提取物C、中药提取物混匀,即得。
本发明提供的治疗瘀血阻络所致中风、中经络、冠心病及心绞痛的中药组合物及其制备方法中所用原料或辅料均可由市场购得。
下面结合实施例,进一步阐述本发明:
本发明工艺筛选:
取一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物A、中药提取物B、中药提取物C、中药提取物D,以A、B、C、D份数为因素,每个因素确定三个水平,设计正交试验表。按上述配比混合各中药提取物,制备成Ⅰ、Ⅱ、III、IV、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ九组提取物进行药效学研究,综合评价其改善心脑血管作用,筛选出最佳一组提取物。
表1正交试验表
具体实施例1
1.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物A 的制备方法:
取丹参10份、三七0.5份、川芎2份、粉葛8份、郁金5份、桃仁10份,回流提取3次,第一次10倍量60%乙醇提取3小时,第二次8倍量的60%乙醇提取2小时,第三次6倍量的60%乙醇提取1小时,合并醇提液,回收乙醇,浓缩至1.20的清膏,减压干燥,干膏粉碎,药粉a。
取淫羊藿8份,加10倍量的50%乙醇60℃提取2小时,回收乙醇,减压浓缩至相对密度1.25-1.30的稠膏,浓缩液冻干,药粉b。
取药粉a与药粉b混匀,即得提取物A。
2.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物B 的制备方法:
取水蛭2份,加入胃蛋白酶,控制温度42℃,调节pH值1.5,酶解4小时,胃蛋白酶加入量为300U/g,收集酶解液,离心,取上清液,以1BV·h-1的速度经过DA201-C大孔树脂,依次用25%乙醇、50%乙醇和75%乙醇溶液洗脱,以上各洗脱部位经D201离子交换树脂,pH4.0,上样肽浓度30mg·mL-1, 流速3.0BV·h-1,分别用2.5%氯化钠的25%乙醇和2.5%氯化钠的50%乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,浓缩液冻干,即得药粉c。
取丹参10份,桃仁10份,红花2份,加水回流提取两次,第一次10倍量的水,提取3小时,第二次6倍量的水,提取2小时,合并煎液,滤过,减压浓缩,浓缩液冻干,得药粉d。
取药粉c与药粉d混合均匀,得提取物B。
3.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物C 的制备方法:
取红花3份,加40倍水,控制电压为100V,闪式提取2min,提取液加入乙醇,使乙醇的浓度为50%,调节药液使药液pH5.0,静置24小时,回收乙醇,减压浓缩,浓缩液冻干,即得提取物C。
4.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物D 的制备方法:
取水蛭1份,人工麝香1份,冰片1份,人参茎叶总皂苷1份,三七0.5 份,粉碎成细粉,混合均匀,即得提取物D。
5.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物组合物制备:
取一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药组合物A 2 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物B 2 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物C 2 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物D1 份,混合均匀,加乳糖适量,制成1000片。
具体实施例2
1.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物A 的制备方法:
取丹参10份、三七0.5份、川芎2份、粉葛8份、郁金5份、桃仁10份,回流提取3次,第一次10倍量60%乙醇提取3小时,第二次8倍量的60%乙醇提取2小时,第三次6倍量的60%乙醇提取1小时,合并醇提液,回收乙醇,浓缩至1.20的清膏,减压干燥,干膏粉碎,药粉a。
取淫羊藿8份,加10倍量的50%乙醇60℃提取2小时,回收乙醇,减压浓缩至相对密度1.25-1.30的稠膏,浓缩液冻干,药粉b。
取药粉a与药粉b混匀,即得提取物A。
2.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物B 的制备方法:
取水蛭2份,加入胃蛋白酶,控制温度42℃,调节pH值1.5,酶解4小时,胃蛋白酶加入量为300U/g,收集酶解液,离心,取上清液,以1BV·h-1的速度经过DA201-C大孔树脂,依次用25%乙醇、50%乙醇和75%乙醇溶液洗脱,以上各洗脱部位经D201离子交换树脂,pH4.0,上样肽浓度30 mg·mL-1,流速3.0BV·h-1,分别用2.5%氯化钠的25%乙醇和2.5%氯化钠的50%乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,浓缩液冻干,即得药粉c。
取丹参10份,桃仁10份,红花2份,加水回流提取两次,第一次10倍量的水,提取3小时,第二次6倍量的水,提取2小时,合并煎液,滤过,减压浓缩,浓缩液冻干,得药粉d。
取药粉c与药粉d混合均匀,得提取物B。
3.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物C 的制备方法:
取红花3份,加40倍水,控制电压为100V,闪式提取2min,提取液加入乙醇,使乙醇的浓度为50%,调节药液使药液pH5.0,静置24小时,回收乙醇,减压浓缩,浓缩液冻干,即得提取物C。
4.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物D 的制备方法:
取水蛭1份,人工麝香1份,冰片1份,人参茎叶总皂苷1份,三七0.5 份,粉碎成细粉,混合均匀,即得提取物D。
5.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物组合物制备:
取一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药组合物A2 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物B 6 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物C 4 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物D 3 份,混合均匀,加乳糖适量,制成1000片。
具体实施例3
1.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物A 的制备方法:
取丹参10份、三七0.5份、川芎2份、粉葛8份、郁金5份、桃仁10份,回流提取3次,第一次10倍量60%乙醇提取3小时,第二次8倍量的60%乙醇提取2小时,第三次6倍量的60%乙醇提取1小时,合并醇提液,回收乙醇,浓缩至1.20的清膏,减压干燥,干膏粉碎,药粉a。
取淫羊藿8份,加10倍量的50%乙醇60℃提取2小时,回收乙醇,减压浓缩至相对密度1.25-1.30的稠膏,浓缩液冻干,药粉b。
取药粉a与药粉b混匀,即得提取物A。
2.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物B 的制备方法:
取水蛭2份,加入胃蛋白酶,控制温度42℃,调节pH值1.5,酶解4小时,胃蛋白酶加入量为300U/g,收集酶解液,离心,取上清液,以1BV·h-1的速度经过DA201-C大孔树脂,依次用25%乙醇、50%乙醇和75%乙醇溶液洗脱,以上各洗脱部位经D201离子交换树脂,pH4.0,上样肽浓度30 mg·mL-1,流速3.0BV·h-1,分别用2.5%氯化钠的25%乙醇和2.5%氯化钠的50%乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,浓缩液冻干,即得药粉c。
取丹参10份,桃仁10份,红花2份,加水回流提取两次,第一次10倍量的水,提取3小时,第二次6倍量的水,提取2小时,合并煎液,滤过,减压浓缩,浓缩液冻干,得药粉d。
取药粉c与药粉d混合均匀,得提取物B。
3.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物C 的制备方法:
取红花3份,加40倍水,控制电压为100V,闪式提取2min,提取液加入乙醇,使乙醇的浓度为50%,调节药液使药液pH5.0,静置24小时,回收乙醇,减压浓缩,浓缩液冻干,即得提取物C。
4.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物D 的制备方法:
取水蛭1份,人工麝香1份,冰片1份,人参茎叶总皂苷1份,三七0.5 份,粉碎成细粉,混合均匀,即得提取物D。
5.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物组合物制备:
取一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药组合物A2 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物B10 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物C 6 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物D 5 份,混合均匀,加乳糖适量,制成1000片。
具体实施例4
1.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物A 的制备方法:
取丹参10份、三七0.5份、川芎2份、粉葛8份、郁金5份、桃仁10份,回流提取3次,第一次10倍量60%乙醇提取3小时,第二次8倍量的60%乙醇提取2小时,第三次6倍量的60%乙醇提取1小时,合并醇提液,回收乙醇,浓缩至1.20的清膏,减压干燥,干膏粉碎,药粉a。
取淫羊藿8份,加10倍量的50%乙醇60℃提取2小时,回收乙醇,减压浓缩至相对密度1.25-1.30的稠膏,浓缩液冻干,药粉b。
取药粉a与药粉b混匀,即得提取物A。
2.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物B 的制备方法:
取水蛭2份,加入胃蛋白酶,控制温度42℃,调节pH值1.5,酶解4小时,胃蛋白酶加入量为300U/g,收集酶解液,离心,取上清液,以1BV·h-1的速度经过DA201-C大孔树脂,依次用25%乙醇、50%乙醇和75%乙醇溶液洗脱,以上各洗脱部位经D201离子交换树脂,pH4.0,上样肽浓度30mg·mL-1, 流速3.0BV·h-1,分别用2.5%氯化钠的25%乙醇和2.5%氯化钠的50%乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,浓缩液冻干,即得药粉c。
取丹参10份,桃仁10份,红花2份,加水回流提取两次,第一次10倍量的水,提取3小时,第二次6倍量的水,提取2小时,合并煎液,滤过,减压浓缩,浓缩液冻干,得药粉d。
取药粉c与药粉d混合均匀,得提取物B。
3.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物C 的制备方法:
取红花3份,加40倍水,控制电压为100V,闪式提取2min,提取液加入乙醇,使乙醇的浓度为50%,调节药液使药液pH5.0,静置24小时,回收乙醇,减压浓缩,浓缩液冻干,即得提取物C。
4.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物D 的制备方法:
取水蛭1份,人工麝香1份,冰片1份,人参茎叶总皂苷1份,三七0.5 份,粉碎成细粉,混合均匀,即得提取物D。
5.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物组合物制备:
取一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药组合物A 8 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物B 2 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物C 4 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物D 5 份,混合均匀,加乳糖适量,制成1000片。
具体实施例5
1.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物A 的制备方法:
取丹参10份、三七0.5份、川芎2份、粉葛8份、郁金5份、桃仁10份,回流提取3次,第一次10倍量60%乙醇提取3小时,第二次8倍量的60%乙醇提取2小时,第三次6倍量的60%乙醇提取1小时,合并醇提液,回收乙醇,浓缩至1.20的清膏,减压干燥,干膏粉碎,药粉a。
取淫羊藿8份,加10倍量的50%乙醇60℃提取2小时,回收乙醇,减压浓缩至相对密度1.25-1.30的稠膏,浓缩液冻干,药粉b。
取药粉a与药粉b混匀,即得提取物A。
2.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物B 的制备方法:
取水蛭2份,加入胃蛋白酶,控制温度42℃,调节pH值1.5,酶解4小时,胃蛋白酶加入量为300U/g,收集酶解液,离心,取上清液,以1BV·h-1的速度经过DA201-C大孔树脂,依次用25%乙醇、50%乙醇和75%乙醇溶液洗脱,以上各洗脱部位经D201离子交换树脂,pH4.0,上样肽浓度30mg·mL-1, 流速3.0BV·h-1,分别用2.5%氯化钠的25%乙醇和2.5%氯化钠的50%乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,浓缩液冻干,即得药粉c。
取丹参10份,桃仁10份,红花2份,加水回流提取两次,第一次10倍量的水,提取3小时,第二次6倍量的水,提取2小时,合并煎液,滤过,减压浓缩,浓缩液冻干,得药粉d。
取药粉c与药粉d混合均匀,得提取物B。
3.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物C 的制备方法:
取红花3份,加40倍水,控制电压为100V,闪式提取2min,提取液加入乙醇,使乙醇的浓度为50%,调节药液使药液pH5.0,静置24小时,回收乙醇,减压浓缩,浓缩液冻干,即得提取物C。
4.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物D 的制备方法:
取水蛭1份,人工麝香1份,冰片1份,人参茎叶总皂苷1份,三七0.5 份,粉碎成细粉,混合均匀,即得提取物D。
5.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物组合物制备:
取一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药组合物A 8 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物B 8 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物C 8 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物D 1 份,混合均匀,加乳糖适量,制成1000片。
具体实施例6
1.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物A 的制备方法:
取丹参10份、三七0.5份、川芎2份、粉葛8份、郁金5份、桃仁10份,回流提取3次,第一次10倍量60%乙醇提取3小时,第二次8倍量的60%乙醇提取2小时,第三次6倍量的60%乙醇提取1小时,合并醇提液,回收乙醇,浓缩至1.20的清膏,减压干燥,干膏粉碎,药粉a。
取淫羊藿8份,加10倍量的50%乙醇60℃提取2小时,回收乙醇,减压浓缩至相对密度1.25-1.30的稠膏,浓缩液冻干,药粉b。
取药粉a与药粉b混匀,即得提取物A。
2.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物B 的制备方法:
取水蛭2份,加入胃蛋白酶,控制温度42℃,调节pH值1.5,酶解4小时,胃蛋白酶加入量为300U/g,收集酶解液,离心,取上清液,以1BV·h-1的速度经过DA201-C大孔树脂,依次用25%乙醇、50%乙醇和75%乙醇溶液洗脱,以上各洗脱部位经D201离子交换树脂,pH4.0,上样肽浓度30mg·mL-1, 流速3.0BV·h-1,分别用2.5%氯化钠的25%乙醇和2.5%氯化钠的50%乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,浓缩液冻干,即得药粉c。
取丹参10份,桃仁10份,红花2份,加水回流提取两次,第一次10倍量的水,提取3小时,第二次6倍量的水,提取2小时,合并煎液,滤过,减压浓缩,浓缩液冻干,得药粉d。
取药粉c与药粉d混合均匀,得提取物B。
3.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物C 的制备方法:
取红花3份,加40倍水,控制电压为100V,闪式提取2min,提取液加入乙醇,使乙醇的浓度为50%,调节药液使药液pH5.0,静置24小时,回收乙醇,减压浓缩,浓缩液冻干,即得提取物C。
4.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物D 的制备方法:
取水蛭1份,人工麝香1份,冰片1份,人参茎叶总皂苷1份,三七0.5 份,粉碎成细粉,混合均匀,即得提取物D。
5.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物组合物制备:
取一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药组合物A 8 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物B 10 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物C 2 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物D 3 份,混合均匀,加乳糖适量,制成1000片。
具体实施例7
1.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物A 的制备方法:
取丹参10份、三七0.5份、川芎2份、粉葛8份、郁金5份、桃仁10份,回流提取3次,第一次10倍量60%乙醇提取3小时,第二次8倍量的60%乙醇提取2小时,第三次6倍量的60%乙醇提取1小时,合并醇提液,回收乙醇,浓缩至1.20的清膏,减压干燥,干膏粉碎,药粉a。
取淫羊藿8份,加10倍量的50%乙醇60℃提取2小时,回收乙醇,减压浓缩至相对密度1.25-1.30的稠膏,浓缩液冻干,药粉b。
取药粉a与药粉b混匀,即得提取物A。
2.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物B 的制备方法:
取水蛭2份,加入胃蛋白酶,控制温度42℃,调节pH值1.5,酶解4小时,胃蛋白酶加入量为300U/g,收集酶解液,离心,取上清液,以1BV·h-1的速度经过DA201-C大孔树脂,依次用25%乙醇、50%乙醇和75%乙醇溶液洗脱,以上各洗脱部位经D201离子交换树脂,pH4.0,上样肽浓度30mg·mL-1, 流速3.0BV·h-1,分别用2.5%氯化钠的25%乙醇和2.5%氯化钠的50%乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,浓缩液冻干,即得药粉c。
取丹参10份,桃仁10份,红花2份,加水回流提取两次,第一次10倍量的水,提取3小时,第二次6倍量的水,提取2小时,合并煎液,滤过,减压浓缩,浓缩液冻干,得药粉d。
取药粉c与药粉d混合均匀,得提取物B。
3.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物C 的制备方法:
取红花3份,加40倍水,控制电压为100V,闪式提取2min,提取液加入乙醇,使乙醇的浓度为50%,调节药液使药液pH5.0,静置24小时,回收乙醇,减压浓缩,浓缩液冻干,即得提取物C。
4.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物D 的制备方法:
取水蛭1份,人工麝香1份,冰片1份,人参茎叶总皂苷1份,三七0.5 份,粉碎成细粉,混合均匀,即得提取物D。
5.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物组合物制备:
取一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药组合物A 14份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物B 2 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物C 6 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物D 3 份,混合均匀,加乳糖适量,制成1000片。
具体实施例8
1.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物A 的制备方法:
取丹参10份、三七0.5份、川芎2份、粉葛8份、郁金5份、桃仁10份,回流提取3次,第一次10倍量60%乙醇提取3小时,第二次8倍量的60%乙醇提取2小时,第三次6倍量的60%乙醇提取1小时,合并醇提液,回收乙醇,浓缩至1.20的清膏,减压干燥,干膏粉碎,药粉a。
取淫羊藿8份,加10倍量的50%乙醇60℃提取2小时,回收乙醇,减压浓缩至相对密度1.25-1.30的稠膏,浓缩液冻干,药粉b。
取药粉a与药粉b混匀,即得提取物A。
2.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物B 的制备方法:
取水蛭2份,加入胃蛋白酶,控制温度42℃,调节pH值1.5,酶解4小时,胃蛋白酶加入量为300U/g,收集酶解液,离心,取上清液,以1BV·h-1的速度经过DA201-C大孔树脂,依次用25%乙醇、50%乙醇和75%乙醇溶液洗脱,以上各洗脱部位经D201离子交换树脂,pH4.0,上样肽浓度30mg·mL-1, 流速3.0BV·h-1,分别用2.5%氯化钠的25%乙醇和2.5%氯化钠的50%乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,浓缩液冻干,即得药粉c。
取丹参10份,桃仁10份,红花2份,加水回流提取两次,第一次10倍量的水,提取3小时,第二次6倍量的水,提取2小时,合并煎液,滤过,减压浓缩,浓缩液冻干,得药粉d。
取药粉c与药粉d混合均匀,得提取物B。
3.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物C 的制备方法:
取红花3份,加40倍水,控制电压为100V,闪式提取2min,提取液加入乙醇,使乙醇的浓度为50%,调节药液使药液pH5.0,静置24小时,回收乙醇,减压浓缩,浓缩液冻干,即得提取物C。
4.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物D 的制备方法:
取水蛭1份,人工麝香1份,冰片1份,人参茎叶总皂苷1份,三七0.5 份,粉碎成细粉,混合均匀,即得提取物D。
5.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物组合物制备:
取一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药组合物A 14份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物B 6 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物C 2 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物D 5 份,混合均匀,加乳糖适量,制成1000片。
具体实施例9
1.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物A 的制备方法:
取丹参10份、三七0.5份、川芎2份、粉葛8份、郁金5份、桃仁10份,回流提取3次,第一次10倍量60%乙醇提取3小时,第二次8倍量的60%乙醇提取2小时,第三次6倍量的60%乙醇提取1小时,合并醇提液,回收乙醇,浓缩至1.20的清膏,减压干燥,干膏粉碎,药粉a。
取淫羊藿8份,加10倍量的50%乙醇60℃提取2小时,回收乙醇,减压浓缩至相对密度1.25-1.30的稠膏,浓缩液冻干,药粉b。
取药粉a与药粉b混匀,即得提取物A。
2.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物B 的制备方法:
取水蛭2份,加入胃蛋白酶,控制温度42℃,调节pH值1.5,酶解4小时,胃蛋白酶加入量为300U/g,收集酶解液,离心,取上清液,以1BV·h-1的速度经过DA201-C大孔树脂,依次用25%乙醇、50%乙醇和75%乙醇溶液洗脱,以上各洗脱部位经D201离子交换树脂,pH4.0,上样肽浓度30mg·mL-1, 流速3.0BV·h-1,分别用2.5%氯化钠的25%乙醇和2.5%氯化钠的50%乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,浓缩液冻干,即得药粉c。
取丹参10份,桃仁10份,红花2份,加水回流提取两次,第一次10倍量的水,提取3小时,第二次6倍量的水,提取2小时,合并煎液,滤过,减压浓缩,浓缩液冻干,得药粉d。
取药粉c与药粉d混合均匀,得提取物B。
3.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物C 的制备方法:
取红花3份,加40倍水,控制电压为100V,闪式提取2min,提取液加入乙醇,使乙醇的浓度为50%,调节药液使药液pH5.0,静置24小时,回收乙醇,减压浓缩,浓缩液冻干,即得提取物C。
4.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物D 的制备方法:
取水蛭1份,人工麝香1份,冰片1份,人参茎叶总皂苷1份,三七0.5 份,粉碎成细粉,混合均匀,即得提取物D。
5.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物组合物制备:
取一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药组合物A 14份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物B 10 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物C 4 份、一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络及冠心病、心绞痛中药提取物D 1 份,混合均匀,加乳糖适量,制成1000片。
试验例 九组提取物药效学对比实验研究
1.实验材料
麝香心脑通片(原中药组合物1):通化新东日药业股份有限公司(批号 180102)(购于亮健大药房);麝香心脑通胶囊(原中药组合物2):吉林益民堂制药有限公司(批号180501)(购于云医惠药大药房);脑心通胶囊:陕西步长制药有限公司(批号190614)(购于永和大药房)。
2.实验动物:
ICR小鼠,雌雄各半,6-8周龄,体重18-22g;Wistar大鼠,雌雄各半,体重240-260g,均购自长春亿斯实验动物科学技术有限公司。
3.仪器:
SMP500-18272-LSIO酶标仪;Langendorff离体心脏灌流系统;Motic ImagesAdvanced 3.2图像分析仪;LD5-2A型低速离心机;动物呼吸机; BL-420E生物机能实验系统。
一、对急性缺血性冠心病模型的影响
Wistar雄性大鼠,腹腔注射3%的戊巴比妥钠(1mL/kg)麻醉动物,将动物仰卧位固定在手术台上,颈部去毛,75%酒精消毒,沿胸骨上窝上正中切开皮肤约0.5cm,钝性分离推开下颌下腺,分离气管前肌肉,使气管充分暴露。于第2~3气管环间行气管横行切开,切口长度不超过气管周径的1/3,清理气管内容物,迅速插入气管插管,深度为0.5~1cm。连接小动物呼吸机,呼吸频率90次/min,潮气量10~12mL,呼吸比为1:1。左前胸去毛,75%酒精消毒,胸骨左缘切开皮肤,长约2cm,逐层钝性分离皮下组织、肌肉,在第4~5肋间开胸,拉钩扩胸,钝性去除心包膜,暴露心脏,在肺动脉圆锥与左心耳下2~ 3mm处结扎左冠状动脉前降支,迅速把心脏放回胸腔,挤出胸腔内的气体,缝合胸壁。假手术组实验操作基本相同,只是在冠状动脉左前降支处穿线而不结扎。将大鼠分组,分别是假手术组、模型对照组、脑心通胶囊组(0.9g/kg)、原中药组合物1组(0.7g/kg)、原中药组合物2组(0.7g/kg)、本发明中药组合物Ⅰ、Ⅱ、III、IV、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ组(0.7g/kg)。灌胃给药,10mL/kg,连续给药14日,末次给药后禁食不禁水12h进行手术。观查指标,心外膜电图监测、血清中肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH),血浆一氧化氮(NO)、血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素Flα(6-Keto-PGF1α),心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),心肌梗死面积测定,组织形态学检查。
1、对大鼠心电图ST段的影响
模型组大鼠心电图ST段明显升高,其他各给药组明显抑制ST段位移升高变化,与模型对照组比较有统计学差异(p<0.05,p<0.01,p<0.001),其中本发明中药组合物Ⅷ组可明显抑制心电图ST段位移升高,与原中药组合物1 组、原中药组合物2组、脑心通胶囊组比较有明显优势(p<0.05),结果见表2。
与模型组比较#p<0.05,##p<0.01,###p<0.001;与原中药组合物1组比较Δp<0.05;与原中药组合物2组比较□p<0.05;与脑心通胶囊组比较▲p<0.05。
2、对大鼠血清CK、CK-MB、LDH的影响
模型对照组大鼠血清CK、CK-MB、LDH释放量明显增加,与假手术组比较具有统计学差异(p<0.01,p<0.001),其他给药组可有效抑制大鼠血清CK、 CK-MB、LDH释放量,其中本发明中药组合物Ⅷ组与原中药组合物1组、原中药组合物2组、脑心通胶囊组比较有明显优势(p<0.05,p<0.01),见表3。
与假手术组比较**p<0.01,***p<0.001;与模型组比较#p<0.05,##p<0.01,###p<0.001;与原中药组合物1组比较Δp<0.05;与原中药组合物2组比较□p<0.05;与脑心通胶囊组比较▲p<0.05。
3、对大鼠血浆TXB2、NO、6-Keto-PGF1α的影响
模型对照组大鼠血浆TXB2释放量明显增加、NO、6-Keto-PGF1α活性明显降低,与假手术组比较具有显著差异(p<0.01,p<0.001),其他给药组明显抑制TXB2释放量明显减少,NO、6-Keto-PGF1α活性增加,与模型组比较具有差异(p<0.05,p<0.01),其中本发明中药组合物Ⅷ组与原中药组合物1 组、原中药组合物2组、脑心通胶囊组比较有明显优势(p<0.05)见表4。
与假手术组比较**p<0.01,***p<0.001;与模型组比较#p<0.05,##p<0.01,###p<0.001;;与原中药组合物1组比较Δp<0.05;与原中药组合物2组比较□p<0.05;与脑心通胶囊组比较▲p<0.05。
4.对大鼠心肌组织匀浆SOD、MDA的影响
模型对照组大鼠心肌组织匀浆中SOD活力明显降低、MDA释放量明显增加,与假手术组比较有显著差异(p<0.001),各给药组组可以提高组织匀浆中SOD活力,抑制MDA含量释放,与模型对照组比较有差异(p<0.05,p<0.01,p<0.001),与原中药组合物1组、原中药组合物2组、脑心通胶囊组比较有明显优势(p<0.05),结果见表5。
组别 | 剂量(g/kg) | SOD(ng/mL) | MDA(nmol/mL) |
假手术组 | —— | 8.96±1.49 | 1.58±0.65 |
模型组 | —— | 3.28±0.77*** | 4.52±0.63*** |
原中药组合物1组 | 0.7 | 5.09±0.96<sup>#</sup> | 2.07±0.77<sup>#</sup> |
原中药组合物2组 | 0.7 | 4.73±0.88 | 3.19±0.86 |
脑心通胶囊组 | 0.9 | 5.47±1.54<sup>#</sup> | 2.98±0.92 |
中药组合物Ⅰ组 | 0.7 | 5.58±0.96<sup>#</sup> | 2.84±0.82<sup>#</sup> |
中药组合物Ⅱ组 | 0.7 | 5.66±0.99<sup>#</sup> | 3.14±0.78 |
中药组合物III组 | 0.7 | 5.78±1.27<sup>#</sup> | 2.75±0.99<sup>#</sup> |
中药组合物IV组 | 0.7 | 6.09±1.68<sup>##▲</sup> | 2.90±0.79<sup>#</sup> |
中药组合物Ⅴ组 | 0.7 | 6.13±1.79<sup>##▲</sup> | 3.41±1.03 |
中药组合物Ⅵ组 | 0.7 | 5.81±1.54<sup>#</sup> | 2.74±0.85<sup>#</sup> |
中药组合物Ⅶ组 | 0.7 | 5.84±1.02<sup>#</sup> | 2.86±1.12<sup>#</sup> |
中药组合物Ⅷ组 | 0.7 | 6.96±1.42<sup>###□</sup> | 1.97±0.65<sup>##□▲</sup> |
中药组合物Ⅸ组 | 0.7 | 5.72±1.15<sup>#</sup> | 3.07±1.01 |
与假手术组比较**p<0.01,***p<0.001;与模型组比较#p<0.05,##p<0.01,###p<0.001;与原中药组合物1组比较Δp<0.05;与原中药组合物2组比较□p<0.05;与脑心通胶囊组比较▲p<0.05。
5、对大鼠心肌梗死面积的影响
染色后将心肌组织照相,采用Motic Images Advanced 3.2图像分析仪测量心肌缺血面积,计算缺血面积百分比,结果可见模型组心肌缺血面积明显增加,其他给药组可明显抑制心肌梗死面积,且本发明中药组合物III、IV、Ⅷ组梗死面积明显小于原中药组合物1组、原中药组合物2组、脑心通胶囊组,具有统计学差异(P<0.05,P<0.01,P<0.001),其结果见表6。
表6各组大鼠心肌梗死面积百分比
与假手术组比较***p<0.001;与模型组比较#p<0.05,##p<0.01,###p<0.01;与原中药组合物1组比较Δp<0.05;与原中药组合物2组比较□p<0.05;与脑心通胶囊组比较▲p<0.05。
6、组织形态学
假手术组:心肌细胞排列整齐、紧密、胞质染色均匀,心肌纤维间可见毛细血管;模型组:心肌细胞排列严重紊乱、稀疏、胞质染色明显不均匀,心肌细胞水肿,心肌细胞间质中可见大量的血细胞沉积及炎细胞浸润;各给药组:心肌细胞排列较为整齐、紧密,少部分心肌细胞胞质染色不均匀及心肌细胞水肿,心肌细胞间质中可见较少的血细胞沉积及炎细胞浸润,与模型对照组比较有较好改善,见附图1~附图14。
二、大鼠脑缺血再灌注实验
SD大鼠随机分组,分别是假手术组、模型对照组、脑心通胶囊组(0.9g/kg)、原中药组合物1(0.7g/kg)、原中药组合物2组(0.7g/kg)、本发明中药组合物Ⅰ、Ⅱ、III、IV、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ组(0.7g/kg),灌胃给药, 10mL·kg-1,连续14d,动物术前禁食12h,自由饮水,于末次给药1h后,采用经颈内动脉尼龙线线栓法制备大鼠脑缺血模型:用1戊巴比妥钠麻醉大鼠,分离左侧颈总动脉,结扎近心端,用动脉夹暂时阻断颈总动脉的远心端,并在颈总动脉远心端剪开一小切口,将一根预先用酒精灯将两端烧成圆头的尼龙线4/0外科单股尼龙线通过切口经颈总动脉颅内段,线栓插入深度由颈动脉起始算起约18-22mm,直到有轻微阻力感为止,结扎入口处,留线,缝合伤口。2小时后轻轻提拉所留线头致略有阻力,实现大脑中动脉再灌注,造模完成。假手术组仅找到颈总动脉就缝合伤口,不作线栓。模型成功标志为:动物清醒后出现以右前肢为主的偏瘫。术后未出现神经功能缺失体征或24h内死亡者剔除。动物神经行为学评分:将苏醒后的动物放回笼内,使其自由饮食。脑缺血24h后,按Longa评分法随机评估并记录神经功能缺损评分:0 分为无功能障碍;1分为不能伸展右侧前肢;2分为向右侧旋转;3分为向右侧倾倒;4分为无自主活动伴意识障碍;5分为死亡。级别越高,表示动物神经功能损伤越大。满足1分、2分和3分的动物为造模成功。1%TTC溶液染色37℃避光孵育染色检测脑梗死面积。检测脑组织匀浆中MDA,SOD、LDH 含量。脑组织用10%甲醛溶液固定,石蜡包埋,切片,HE染色,光学显微镜下观察病理改变。
1.对大鼠神经功能缺损评分及脑梗死面积比较
假手术组大鼠无功能障碍,模型对照组大鼠手术后多数有明显的向右侧旋转及向右侧倾倒,给药组多数为不能伸展右侧前肢,评分结果与模型组比较有统计学差异(p<0.01、p<0.05)。模型对照组大鼠脑缺血梗死面积明显,给药组可明显降低脑缺血梗死面积,与模型对照组组比较有统计学差异 (p<0.05),本发明中药组合物Ⅷ组抑制脑梗死面积作用与原中药组合物2组合脑心通胶囊组比较有明显优势(p<0.05),结果见表7,见附图15-附图28。
组别 | 剂量(g/kg) | 评分 | 梗死面积百分比(%) |
假手术组 | —— | 0 | 0 |
模型组 | —— | 2.1±0.8*** | 39.3±6.39*** |
原中药组合物1组 | 0.7 | 1.4±0.5<sup>##</sup> | 24.6±9.14<sup>##</sup> |
原中药组合物2组 | 0.7 | 1.5±0.3<sup>#</sup> | 27.8±3.74<sup>#</sup> |
脑心通胶囊组 | 0.9 | 1.3±0.4<sup>##</sup> | 25.7±7.52<sup>##</sup> |
中药组合物Ⅰ组 | 0.7 | 1.8±0.7<sup>#</sup> | 28.7±4.69<sup>#</sup> |
中药组合物Ⅱ组 | 0.7 | 1.4±0.5<sup>##</sup> | 24.9±7.32<sup>##</sup> |
中药组合物III组 | 0.7 | 1.6±0.4<sup>##</sup> | 27.6±5.77<sup>#</sup> |
中药组合物IV组 | 0.7 | 1.7±0.5<sup>#</sup> | 29.3±8.45 |
中药组合物Ⅴ组 | 0.7 | 1.3±0.4<sup>##</sup> | 30.7±6.66 |
中药组合物Ⅵ组 | 0.7 | 1.4±0.5<sup>##</sup> | 31.1±10.23 |
中药组合物Ⅶ组 | 0.7 | 1.5±0.3<sup>##</sup> | 32.6±7.39 |
中药组合物Ⅷ组 | 0.7 | 1.2±0.4<sup>###</sup> | 20.6±5.92<sup>###□▲</sup> |
中药组合物Ⅸ组 | 0.7 | 1.6±0.3<sup>#</sup> | 28.9±6.81<sup>#</sup> |
与假手术组比较*p<0.05**p<0.01;与模型组比较#p<0.05,##p<0.01,###p<0.001;与原中药组合物2组比较□p<0.05;与脑心通胶囊组比较▲p<0.05。
2.对大鼠脑组织匀浆中SOD、MDA、LDH的影响
模型对照组大鼠脑组织匀浆中SOD活力明显降低,LDH和MDA含量释放明显增加,与假手术组比较有统计学差异(p<0.01、p<0.001)。其他给药组可明显提高脑组织匀浆中SOD活力,抑制LDH和MDA含量释放。本发明中药组合物Ⅷ组与原中药组合物1组、原中药组合物2组、脑心通胶囊组比较作用有明显优势,具有有统计学差异(p<0.05,p<0.01),其结果见表8。
与假手术组比较*p<0.05**p<0.01;与模型组比较#p<0.05,##p<0.01,###p<0.001;与原中药组合物1组比较Δp<0.05;与原中药组合物2组比较□p<0.05;与脑心通胶囊组比较▲p<0.05。
3.组织形态学影响
相对于空白对照组,模型对照组观察到大脑皮层可见大量神经元细胞皱缩,可见卫星现象和噬神经现象,可见血管扩张。可见大量神经元细胞皱缩,体积缩小,颜色加深,证实脑缺血再灌注对脑组织有损伤,造模成功。其他给药组,依然可见大脑皮层可见少量神经元细胞皱缩,血管扩张,可见卫星现象和噬神经现象,较模型组有改善,见附图29~附图42。
三、对小鼠脑缺血后存活时间的影响
ICR小鼠随机分组,分别为空白对照组、脑心通胶囊组(1.8g/kg)、原中药组合物1(1.4g/kg)、原中药组合物2组(1.4g/kg)、本发明中药组合物Ⅰ、Ⅱ、III、IV、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ组(1.4g/kg),灌胃给药(10mL·kg-1),连续14d。于末次给药后1h用剪刀在小鼠耳后2mm处快速断头,使头落到预热至37℃的水浴箱上,然后记录小鼠断头后的呼吸次数及呼吸维持时间(以小鼠张口喘息为判断标准)。脑组织含水量及脑指数测定:于碎冰中快速断头开颅取脑,以-4℃生理盐水洗净血渍用吸水纸吸干,用眼科镊和手术刀片分离嗅球、小脑及低位脑干,留取大脑,称湿重并依照公式计算脑指数。立即将脑分别置于电子天平(1/10000)称重后放于烤箱中恒温100℃,持续24h,取出称干重,依照公式计算脑含水量。脑含水量=(脑湿重一脑干重)/脑湿重×100%;脑指数=脑湿重/体重×100%。
1.对急性脑缺血小鼠的作用
各给药组可以明显延长小鼠存活时间及断头后的喘息次数,并能降低脑指数及脑含水量的增加,与空白对照组比较有统计学差异(p<0.05,p<0.01, p<0.001),本发明中药组合物Ⅷ组与原中药组合物1组、原中药组合物2组、脑心通胶囊组比较有明显优势作用,具有统计学差异(p<0.05,p<0.01, p<0.001),结果见表9。
与空白对照组比较*p<0.05**p<0.01;与原中药组合物1组比较Δp<0.05;与原中药组合物2 组比较□p<0.05;与脑心通胶囊组比较▲p<0.05。
上述研究表明本发明中药组合物可改善心肌缺血大鼠血清心电图变化,抑制血清心肌酶异常,抑制脂质过氧化损伤,减少氧自由基生成,降低梗死面积。同时抑制大鼠脑组织缺血、缺氧,保护脑组织损伤程度,促进神经营养,抑制脑细胞凋亡有明显的作用。说明本发明中药组合物心脑同治,对心脑缺血、缺氧有积极的预防和治疗作用。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络、冠心病及心绞痛的中药组合物,其特征在于,以重量份计,所述中药组合物由中药提取物A 2~14份、中药提取物B 2~10份、中药提取物C 2~6份、中药提取物D 1~5份组成;
所述中药提取物A的制备方法为:
步骤A-1:取丹参8~12份、三七0.3~0.7份、川芎1.5~2.5份、粉葛6~10份、郁金4~6份、桃仁8~12份,采用50%~70%乙醇水溶液回流提取,所得醇提液回收乙醇,浓缩至清膏,减压干燥,粉碎,得到药粉a;
步骤A-2:取淫羊藿6~10份,采用40%~60%乙醇水溶液提取,回收乙醇,减压浓缩至稠膏,冻干,得到药粉b;
步骤A-3:将药粉a与药粉b混匀,得到中药提取物A;
所述中药提取物B的制备方法为:
步骤B-1:取水蛭1~3份,加入胃蛋白酶酶解,收集酶解液,离心,取上清液,经过DA201-C大孔树脂,乙醇洗脱部位经D201离子交换树脂,用含有氯化钠的乙醇水溶液洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,浓缩液冻干,得到药粉c;
步骤B-2:取丹参8~12份、桃仁8~12份、红花1~3份,加水回流提取,合并煎液,滤过,减压浓缩,浓缩液冻干,得到药粉d;
步骤B-3:将药粉c与药粉d混匀,得到中药提取物B;
所述中药提取物C的制备方法为:
取红花加水进行闪式提取,所得提取液中加入乙醇或乙醇水溶液,使乙醇的浓度达到40%~60%,调节药液pH值至4.5~5.5,静置,回收乙醇,减压浓缩,浓缩液冻干,得到中药提取物C;
所述中药提取物D的制备方法为:
取水蛭0.5~1.5份、人工麝香0.5~1.5份、冰片0.5~1.5份、人参茎叶总皂苷0.5~1.5份、三七0.2~0.8份,粉碎,混匀,得到中药提取物D。
2.根据权利要求1所述的中药组合物,其特征在于,所述中药提取物A的制备方法为:
取丹参8~12份、三七0.3~0.7份、川芎1.5~2.5份、粉葛6~10份、郁金4~6份、桃仁8~12份,回流提取2~4次,每次采用6~10倍重量的50%~70%乙醇水溶液提取1~3小时,合并醇提液,回收乙醇,浓缩至1.10~1.30的清膏,减压干燥,粉碎,得到药粉a;
取淫羊藿6~10份,加8~12倍重量的40%~60%乙醇水溶液50~70℃提取1.5~2.5小时,回收乙醇,减压浓缩至相对密度1.20~1.30的稠膏,冻干,得到药粉b;
将药粉a与药粉b混匀,得到中药提取物A。
3.根据权利要求1所述的中药组合物,其特征在于,所述中药提取物B的制备方法为:
取水蛭1~3份,加入胃蛋白酶,胃蛋白酶加入量为280~320U/g,控制温度40~45℃,调节pH值至1.4~1.6,酶解3~5小时,收集酶解液,离心,取上清液,以0.8~1.2BV·h-1的速度经过DA201-C大孔树脂,依次用20%~30%乙醇水溶液、45%~55%乙醇水溶液、70%~80%乙醇水溶液洗脱,以上各洗脱部位经D201离子交换树脂,pH3.8~4.2,上样浓度28~32mg·mL-1,流速2.8~3.2BV·h-1,分别用含有2.0%~3.0%氯化钠的20%~30%乙醇水溶液和含有2.0%~3.0%氯化钠的40%~60%乙醇水溶液洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,浓缩液冻干,得到药粉c;
取丹参8~12份、桃仁8~12份、红花1~3份,加水回流提取2~3次,每次6~10倍重量的水,提取2~3小时,合并煎液,滤过,减压浓缩,浓缩液冻干,得到药粉d;
将药粉c与药粉d混匀,得到中药提取物B。
4.根据权利要求1所述的中药组合物,其特征在于,所述中药提取物C的制备方法为:
取红花2~4份,加35~45倍重量的水,控制电压为90~110V,闪式提取1~3min,所得提取液中加入乙醇或乙醇水溶液,使乙醇的浓度达到40%~60%,调节药液pH值至4.5~5.5,静置20~28小时,回收乙醇,减压浓缩,浓缩液冻干,得到中药提取物C。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的中药组合物,其特征在于,以重量份计,所述中药组合物由中药提取物A 14份、中药提取物B 6份、中药提取物C 2份、中药提取物D 5份组成。
6.一种治疗瘀血阻络所致中风、中经络、冠心病及心绞痛的中药组合物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤A:中药提取物A的制备方法为:
步骤A-1:以重量份计,取丹参8~12份、三七0.3~0.7份、川芎1.5~2.5份、粉葛6~10份、郁金4~6份、桃仁8~12份,采用50%~70%乙醇水溶液回流提取,所得醇提液回收乙醇,浓缩至清膏,减压干燥,粉碎,得到药粉a;
步骤A-2:取淫羊藿6~10份,采用40%~60%乙醇水溶液提取,回收乙醇,减压浓缩至稠膏,冻干,得到药粉b;
步骤A-3:将药粉a与药粉b混匀,得到中药提取物A;
步骤B:中药提取物B的制备方法为:
步骤B-1:取水蛭1~3份,加入胃蛋白酶酶解,收集酶解液,离心,取上清液,经过DA201-C大孔树脂,乙醇洗脱部位经D201离子交换树脂,用含有氯化钠的乙醇水溶液洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,浓缩液冻干,得到药粉c;
步骤B-2:取丹参8~12份、桃仁8~12份、红花1~3份,加水回流提取,合并煎液,滤过,减压浓缩,浓缩液冻干,得到药粉d;
步骤B-3:将药粉c与药粉d混匀,得到中药提取物B;
步骤C:中药提取物C的制备方法为:
取红花加水进行闪式提取,所得提取液中加入乙醇或乙醇水溶液,使乙醇的浓度达到40%~60%,调节药液pH值至4.5~5.5,静置,回收乙醇,减压浓缩,浓缩液冻干,得到中药提取物C;
步骤D:中药提取物D的制备方法为:
取水蛭0.5~1.5份、人工麝香0.5~1.5份、冰片0.5~1.5份、人参茎叶总皂苷0.5~1.5份、三七0.2~0.8份,粉碎,混匀,得到中药提取物D;
步骤E:将中药提取物A 2~14份、中药提取物B 2~10份、中药提取物C 2~6份、中药提取物D 1~5份混合。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述中药提取物A的制备方法为:
取丹参8~12份、三七0.3~0.7份、川芎1.5~2.5份、粉葛6~10份、郁金4~6份、桃仁8~12份,回流提取2~4次,每次采用6~10倍重量的50%~70%乙醇水溶液提取1~3小时,合并醇提液,回收乙醇,浓缩至1.10~1.30的清膏,减压干燥,粉碎,得到药粉a;
取淫羊藿6~10份,加8~12倍重量的40%~60%乙醇水溶液50~70℃提取1.5~2.5小时,回收乙醇,减压浓缩至相对密度1.20~1.30的稠膏,冻干,得到药粉b;
将药粉a与药粉b混匀,得到中药提取物A。
8.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述中药提取物B的制备方法为:
取水蛭1~3份,加入胃蛋白酶,胃蛋白酶加入量为280~320U/g,控制温度40~45℃,调节pH值至1.4~1.6,酶解3~5小时,收集酶解液,离心,取上清液,以0.8~1.2BV·h-1的速度经过DA201-C大孔树脂,依次用20%~30%乙醇水溶液、45%~55%乙醇水溶液、70%~80%乙醇水溶液洗脱,以上各洗脱部位经D201离子交换树脂,pH3.8~4.2,上样浓度28~32mg·mL-1,流速2.8~3.2BV·h-1,分别用含有2.0%~3.0%氯化钠的20%~30%乙醇水溶液和含有2.0%~3.0%氯化钠的40%~60%乙醇水溶液洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,浓缩液冻干,得到药粉c;
取丹参8~12份、桃仁8~12份、红花1~3份,加水回流提取2~3次,每次6~10倍重量的水,提取2~3小时,合并煎液,滤过,减压浓缩,浓缩液冻干,得到药粉d;
将药粉c与药粉d混匀,得到中药提取物B。
9.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述中药提取物C的制备方法为:
取红花2~4份,加35~45倍重量的水,控制电压为90~110V,闪式提取1~3min,所得提取液中加入乙醇或乙醇水溶液,使乙醇的浓度达到40%~60%,调节药液pH值至4.5~5.5,静置20~28小时,回收乙醇,减压浓缩,浓缩液冻干,得到中药提取物C。
10.根据权利要求6至9中任一项所述的制备方法,其特征在于,所述步骤E为:将中药提取物A 14份、中药提取物B 6份、中药提取物C 2份、中药提取物D 5份混合。
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麝香心脑通片生产工艺的研究;张炳吉;《中国实用医药》;20100131;第5卷(第2期);第153-154页 * |
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