CN111220805A - 一种细菌性阴道炎多指标快速检测复合试纸及其制作方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及医用检测试纸，具体来说是一种细菌性阴道炎多指标快速检测复合试纸及其制作方法，其中复合试纸包括胺试纸条、pH试纸条，还包括加德纳菌胶体金试纸条，所述胺试纸条、pH试纸条复合在所述加德纳菌胶体金试纸条的基板上。本发明根据BV检测标准，构建了阴道加德纳菌的检测试纸、PH试纸、胺试验试纸三位一体的复合试纸，病人利用该复合试纸和自己的阴道分泌物样本进行检测，并且直接快速地得出是否为细菌性阴道炎的结论，从而直接到医生处开药或者自行购买药物治疗，节省了大量的时间和金钱，大大提高了阴道炎检验效率。
Description
技术领域
本发明涉及医用检测试纸，具体说是一种细菌性阴道炎检测试纸及其制作方法。
背景技术
细菌性阴道炎（bacterial vaginosis，BV）是一种由阴道加特纳菌等厌氧菌的混合感染引起的生殖道疾病，其导致阴道内微生态平衡失调，引起阴道分泌物增多，白带有鱼腥臭味合并外阴瘙痒灼热，是临床育龄妇女常见生殖道感染疾病，常导致患者早产、分娩低重儿、感染性传播疾病等的风险增加。目前，生殖道炎症的患者占妇科门诊就诊的大多数。因妇科门诊就诊人数多，阴道炎临床检测需求量大、镜检效率低，患者常需要花费大量时间等待，不仅浪费了患者宝贵的时间，而且严重占用医疗资源。
发明内容
针对上述技术问题，本发明提供一种可减少患者时间及医疗资源浪费的细菌性阴道炎多指标快速检测复合试纸。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种细菌性阴道炎多指标快速检测复合试纸，包括胺试纸条、pH试纸条，还包括加德纳菌胶体金试纸条，所述胺试纸条、pH试纸条复合在所述加德纳菌胶体金试纸条的基板上。
作为优选，所述加德纳菌胶体金试纸条从上向下依次由样本层、胶体金层、显色层、吸水层和所述基板组成。
作为优选，所述显色层为硝酸纤维素膜。
作为优选，所述基板为聚氯乙烯板。
作为优选，所述聚氯乙烯板的截面呈蜂巢状网眼结构。
作为优选，所述胶体金层采用加德纳菌表面抗原的单克隆抗体和胶体金免疫层析方法。
本发明还提供一种细菌性阴道炎多指标快速检测复合试纸的制作方法，其包括以下步骤：
（1）取胺试纸条和pH试纸条；
（2）制作加德纳菌胶体金试纸条；
（3）将上述胺试纸条和pH试纸条复合在所述加德纳菌胶体金试纸条的基板上。
作为优选，制作加德纳菌胶体金试纸条的步骤如下：
（2.1）制备加德纳菌表面抗原的单克隆抗体；
（2.2）将上述抗体应用于胶体金免疫层析方法；
（2.3）根据上述层析方法制作胶体金层；
（2.4）取样本层、显色层、吸水层和基板，并将其与上述胶体金层组装在一起。
从以上技术方案可知，本发明根据BV检测标准，构建了阴道加德纳菌的检测试纸、PH试纸、胺试验试纸三位一体的复合试纸，病人利用该复合试纸和自己的阴道分泌物样本进行检测，并且直接快速地得出是否为细菌性阴道炎的结论，从而直接到医生处开药或者自行购买药物治疗，节省了大量的时间和金钱，大大提高了阴道炎检验效率。
附图说明
图1是本发明复合试纸的结构示意图。
具体实施方式
下面结合图1详细介绍本发明，在此本发明的示意性实施例以及说明用来解释本发明，但并不作为对本发明的限定。
如图1，本发明提供了一种细菌性阴道炎多指标快速检测复合试纸，其包括胺试纸条1、pH试纸条2，还包括加德纳菌胶体金试纸条3，所述胺试纸条、pH试纸条复合在所述加德纳菌胶体金试纸条的基板31上，从而构建了阴道加德纳菌的检测试纸、pH试纸、胺试验试纸三位一体的复合试纸，大大提高了阴道炎检验效率。
本发明的所述加德纳菌胶体金试纸条从上向下依次由样本层35、胶体金层34、显色层33、吸水层32和所述基板31组成；其中基板为聚氯乙烯板，可支撑整个复合试纸，且所述聚氯乙烯板的截面呈蜂巢状网眼结构，其质量轻、韧性好，使用方便、保存时间长。吸水层可采用吸水纸或吸水棉，在其吸附力的作用下保证样本液体快速透过上层结构，实现快速检测的目的。所述显色层为硝酸纤维素膜，该膜的厚度、材质、预处理工艺、孔径（爬速）、背景色纯度、显色程度会对试纸条的灵敏性、特异性产生影响，应筛选合适的。由于样本层需要和样本直接接触并释放抗原，胶体金层需要承载并均匀释放免疫金，所以在组装前需要进行预处理以符合要求。
具体来说，胶体金层采用加德纳菌表面抗原的单克隆抗体和胶体金免疫层析方法。单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，其高特异性和单一生物学功能适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法。细菌性阴道病的特征性感染菌是阴道加德纳菌，可制备加德纳菌表面抗原的单克隆抗体并将其应用于相关免疫学分析方法；胶体金免疫层析技术基于抗原抗体的特异性结合，可快速检测分析物。胶体金在适当条件下形成几乎完美的球形颗粒，能与抗体牢固结合，达到标记抗体目的。
本发明还提供一种细菌性阴道炎多指标快速检测复合试纸的制作方法，其包括取现有的胺试纸条和pH试纸条，制作加德纳菌胶体金试纸条，将上述胺试纸条和pH试纸条复合在所述加德纳菌胶体金试纸条的基板上，从而组装成复合试纸。其中，可先制备加德纳菌表面抗原的单克隆抗体，然后将上述抗体应用于胶体金免疫层析方法，再根据上述层析方法制作胶体金层，最后取样本层、显色层、吸水层和基板，并将其与上述胶体金层组装在一起，从而获得加德纳菌胶体金试纸条。具体实施例如下：
（1）对若干动物进行动物免疫，检测血清抗体效价，选择能够产生效价最高的抗加德纳菌血清抗体的动物，以期用于下一步细胞融合。
（2）进行细胞融合，成功后再通过两次筛选步骤获得能够产生目标抗体的杂交瘤细胞。
（3）从原始孔中得到的阳性杂交细胞，可能来源于二个或多个杂交细胞，因此它们所分泌的抗体是不同质的。另一方面，杂交细胞培养的初期是不稳定的，有的细胞丢失部分染色体，可能丧失产生抗体的能力。通过杂交细胞克隆化除去这部分已不再分泌抗体的细胞，得到稳定分泌同质单克隆抗体的单克隆杂交细胞系。
（4）获得能够稳定分泌同质单克隆抗体的单克隆杂交细胞系后，对其分泌的抗体进行单克隆性、单抗理化特性和与相应抗原的反应性鉴定。
（5）对获得的单克隆抗体进行纯化步骤，在合适的条件下保存或者进行下一步实验。
（6）利用合适的方法制备胶体金溶液，获得形状、大小及分布均匀程度均合适的胶体金颗粒。
（7）在最适条件下用胶体金标记单克隆抗体，获得胶体金—抗体复合物，用于胶体金试纸条的组装。
（8）组装好胶体金试纸条后，利用若干BV患者阴道白带样本及非BV患者样本进行特异性、敏感性的检测。
（9）构建加德纳菌试纸、胺试纸、PH试纸复合检测，利用若干BV患者阴道白带样本及非BV患者样本进行特异性、敏感性的检测，即可获得合格的三合一复合试纸。
Claims (8)
1.一种细菌性阴道炎多指标快速检测复合试纸，包括胺试纸条、pH试纸条，其特征在于：还包括加德纳菌胶体金试纸条，所述胺试纸条、pH试纸条复合在所述加德纳菌胶体金试纸条的基板上。
2.根据权利要求1所述细菌性阴道炎多指标快速检测复合试纸，其特征在于：所述加德纳菌胶体金试纸条从上向下依次由样本层、胶体金层、显色层、吸水层和所述基板组成。
3.根据权利要求2所述细菌性阴道炎多指标快速检测复合试纸，其特征在于：所述显色层为硝酸纤维素膜。
4.根据权利要求2所述细菌性阴道炎多指标快速检测复合试纸，其特征在于：所述基板为聚氯乙烯板。
5.根据权利要求4所述细菌性阴道炎多指标快速检测复合试纸，其特征在于：所述聚氯乙烯板的截面呈蜂巢状网眼结构。
6.根据权利要求2所述细菌性阴道炎多指标快速检测复合试纸，其特征在于：所述胶体金层采用加德纳菌表面抗原的单克隆抗体和胶体金免疫层析方法。
7.一种权利要求1至6中任意一项所述细菌性阴道炎多指标快速检测复合试纸的制作方法，其特征包括以下步骤：
（1）取胺试纸条和pH试纸条；
（2）制作加德纳菌胶体金试纸条；
（3）将上述胺试纸条和pH试纸条复合在所述加德纳菌胶体金试纸条的基板上。
8.根据权利要求7所述细菌性阴道炎多指标快速检测复合试纸的制作方法，其特征在于制作加德纳菌胶体金试纸条的步骤如下：
（2.1）制备加德纳菌表面抗原的单克隆抗体；
（2.2）将上述抗体应用于胶体金免疫层析方法；
（2.3）根据上述层析方法制作胶体金层；
（2.4）取样本层、显色层、吸水层和基板，并将其与上述胶体金层组装在一起。
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