CN111202218B - 一种阿胶禽蛋及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种阿胶禽蛋及其制备方法,本发明阿胶禽蛋经过高压物理方式被禽蛋微孔吸收后,小分子肽状阿胶原液中的氨基酸与禽蛋本身含有的氨基酸及营养物质经过聚合、吸附、亲水性原理,构成完备的人体需要的二十种氨基酸与多种微量元素,并且阿胶原液以禽蛋做载体经禽蛋微孔吸收后均是200至1000DA的小肽肽段,食用后更易吸收,吸收率达到95%以上,同时还能够发挥药食同源的协同作用,并且本发明使用纯物理方法制作,未添加任何化学添加剂,属于纯绿色天然食品。
Description
技术领域
本发明属于食品技术领域,具体涉及一种阿胶禽蛋及其制备方法。
背景技术
气虚泛指身体虚弱、面色苍白、呼吸短促、四肢乏力、头晕、动则汗出、语声低微、稍微劳作便有疲劳之感等。它包括元气、宗气、卫气的虚损,以及气的推动、温煦、防御、固摄和气化功能的减退,从而导致机体的某些功能活动低下或衰退,抗病能力下降等衰弱的现象。人的生命活动从根本上讲就是元气升降出入的运动。气虚是一种多发症,多因先天不足、营养不良、年老虚弱、久病未愈、大手术后及疲劳过度。常见症状全身疲倦乏力、身体虚弱、面色苍白、呼吸短促、四肢乏力、声音低沉、动则气短、易出汗、头晕心悸、面色微黄、食欲不振、虚热、自汗、脱肛、子宫下垂、舌淡而胖、舌边有齿痕、脉弱等,是人体器官功能减退,不一定有病,气虚者需补气。
血虚是指血液亏虚、脏腑、经络、形体失养,血的濡养功能减退出现一些变化,若血虚不能充养机体,则出现面色无华,视物不明,四肢麻木,皮肤干燥等病理变化。临床常易表现为面色萎黄苍白、唇爪淡白、头晕乏力、眼花心悸、失眠多梦、大便干燥、妇女经水愆期、量少色淡、舌质淡、苔滑少津、脉细弱等,进补宜采用补血、养血、生血之法。血虚不能完全等同于现代医学所讲的贫血。
针对人体气血两虚,气血同根同源,可互相转化。气能生血、行血,血可以由气转化而来,并在气的推动下在血管中源源不断地正常运行,为身体提供充足的养分和动力。同时,气是无形的,需以有形之血为载体,存在于血液中,得到血液的滋养,气旺而生血。中医认为,血为气之母,气赖血以附,血载气以行,血虚而气无以附,故因之而虚,遂血虚常伴随气虚,病人一般不仅有血虚的症状,而且常常伴有气虚症状,气血两虚一般出现在疲劳过度、长期贫血、白细胞减少症、血小板减少症,女性生产大出血后、月经过多者。因此只补气或只补血,都达不到效果,而且单独食补操作复杂,不能随时进补。另外,补血药大多难吸收。中医常用当归、白芍药、阿胶、地黄、何首乌等药材来补血,但这些补血药质地黏腻,单纯服用并不能很好地被人体消化吸收,尤其是脾胃功能不好的人,如老人、肠胃不适的人,服用后不仅吸收困难,不能让珍贵的药材物尽其用,还容易给消化系统带来负担,出现腹胀、大便稀溏等不适症状。所以,贫血患者应遵守中医理论的血为气之母,气赖血以附,血载气以行,血虚而气无以附的原理,正确补足体内气血。产后大出血产妇、外伤出血患者、术中出血量多的患者,虽然在现代可以通过输血将血容量快速补上来,但人体的气是不能立刻补上来的,在古代没有输血的概念,就要用到大剂量的补气药物。“有形之血不能速生,无形之气所当急固”。也就是说,人在出血的同时气亦随血而脱,单用补血药物会面临吸收难题,而补气可促进血液凝固,控制出血,帮助稳定病情。还有一类慢性出血患者,如月经量多、月经淋漓不尽、慢性肾病有血尿的患者等,可用补气药物止住慢性出血,继而加以补血食物调理以纠正贫血,因此,需要气血双补才能达到最佳疗效。
禽蛋富含蛋白质,主要为卵白蛋白和卵球蛋白,其中含有人体必需的氨基酸,并与人体蛋白的组成极为近似,人体对蛋类蛋白质的吸收率可高达98%。蛋黄中含有丰富的卵磷脂、固醇类、蛋黄素以及钙、磷、铁、硒、维生素A、维生素D及B族维生素。具有补气益气、安胎滋阴、健脑益智、保护肝脏、润燥熄风、延缓衰老、收敛止痛、预防癌症、促进干细胞再生的功效。食用对象相当广泛,从婴儿一直到老人,都适宜食用禽蛋。
阿胶原液是驴皮经煎煮浓缩制成的不添加黄酒、豆油、冰糖等任何辅料的纯阿胶浆液,结构呈小分子肽状分布。富含明胶原、骨胶原、多种氨基酸、硫酸皮肤素、β-烟酰胺单核苷酸及Na、Mg、Cu、Al、Mn、Cr、Pb、Mo等微量元素。据临床观察,阿胶原液对血红蛋白和红细胞增长速度的疗效优于铁剂。特别是在治疗缺铁性、失血性、营养性、再生障碍性贫血等多种原因引起的贫血症治疗中更是疗效显著。适用于血症,可治便血、尿血、气血亏损、流鼻血、胃肠溃疡出血、血小板减少症,甚至吐血。除此之外阿胶原液还可以治疗月经紊乱、月经过多、月经过少、功能性子宫出血、经期腹痛、月经不调等妇科病症。因此,阿胶原液被称为“妇科圣药”。另一方面,人体受孕后,阴血聚以养胎,最易亏虚、胎元不固、胎动不安、甚至先兆流产、习惯性流产。阿胶原液自古以来就是保胎良药。孕妇产前产后服用阿胶原液有利于小儿的成长和产后身体的恢复。最后,阿胶原液能添精补肾,治疗因精血亏虚引起的阳痿早泄等性功能障碍和前列腺疾病,在祖国中医“精血同源”指导下治疗血精、少精、精不液化等病症引起的不育症,效果尤其显著。
现有阿胶,性滋腻,单方服用伤害脾胃功能,需搭配其他药物,利用药性的互补作用制约单方的副作用,获得长期服用不滋腻、不上火。但是,是药三分毒,无论阿胶与任何一味药品搭配都有一定的副作用。禽蛋虽然也具有一定的补气益气、安胎滋阴的功效,但是却不能过量服用,并且对于脾胃功能虚弱的人来讲,其营养成分不能很好的吸收利用。因此,对于阿胶与禽蛋两者来说,无论是哪一方单独对身体进行补益时都有不足之处,而两者通过聚合、吸附、亲水性原理的方法加工的阿胶禽蛋就能巧妙地解决以上问题,实现气血同补、气血双补、全面修复的功能,疗效更加全面。
阿胶禽蛋中富含小分子肽状氨基酸与营养物质,经过高压物理方式被禽蛋微孔吸收后,构成完备的人体需要的氨基酸与多种微量元素,并且小分子肽状阿胶原液以禽蛋做载体经禽蛋微孔吸收后均是200至1000DA的小肽肽段,食用后更易吸收,吸收率达到95%以上,同时还能够发挥药食同源的协同作用,且治疗组的总有效率和显效率明显高于对照组。
阿胶禽蛋对身体的预防、改善、修复功能的实现主要有以下六个方面:
1、对血液系统有促进凝血、改善贫血的作用,可有效改善失血性、缺血性、营养性贫血疾病。阿胶禽蛋凝血的主要原理是加快血液凝固的速度,而补血原理主要是增加血液中血小板的数量。对失血性贫血大鼠与营养性贫血大鼠,使用阿胶禽蛋可以有效提升外周血液血小板、白细胞以及红细胞数量。在研究中发现,一组采用阿胶禽蛋治疗,另一组则未使用,结果使用阿胶禽蛋一组中的外周血细胞数量上升幅度更大。阿胶禽蛋具有显著的补血和凝血作用,能够促进血液中血小板数量的上升,并对血液凝固的速度起到加速作用。因此,将阿胶禽蛋应用于失血性、缺血性、营养性贫血疾病的治疗,能够起到显著的治疗效果。确确实实能够对血液系统起到有效的改善、修复作用。
2、对心血管系统与造血系统有促进骨骼外造血的保护作用,阿胶禽蛋能够提升心血管疾病患者的总外周阻力,同时还能降低患者的血压值,使患者休克时产生的血液黏稠度增加症状得到抑制,进而改善患者的微循环障碍,促进动脉血压的迅速恢复。另外,阿胶禽蛋中的精氨酸与氧气结合生成瓜氨酸和一氧化氮,在人体需要血流多的时候就扩张血管让血流正常循环,在人体需要血流少的时候,促使人体分泌减少,血管就保持收缩的状态。因此,阿胶禽蛋可调节血管舒张功能,控制血流,舒张血管,使血管保持弹性,血管更加年轻,大大减少患心梗、脑梗的患病几率。以上对心血管的作用机制,使阿胶禽蛋能对心血管疾病患者的血管状况给予改善,促进疾病的治疗和愈后恢复。心血管系统疾病与造血系统疾病在临床上比较常见,并且表现出的具体疾病类型多样,且容易对患者的健康造成严重的威胁。通过对更年期综合症群体研究表明,阿胶禽蛋的应用,能够较大限度地改善心血管系统疾病患者的健康水平,促进心血管系统疾病患者的健康恢复。其具体机制为:改善毒素诱发的总外周阻力提升、降低血压、调节血管舒张功能等,抑制休克时血液粘滞度增加,改善微循环障碍后快速恢复动脉血压。
3、对免疫系统有正向调节作用,免疫系统不健康的一般表现有不明原因或排除疾病原因的体力疲劳、虚弱、周身不适、性功能下降和月经周期紊乱、不明原因的脑力疲劳、情感障碍、思维紊乱、恐慌、焦虑、自卑以及神经质、冷漠、孤独、轻率、自杀念头。不明原因的浑身无力、容易疲倦、头脑不清爽、思想涣散、头痛、面部疼痛、眼睛疲劳、视力下降、鼻塞眩晕、起立时眼前发黑、耳鸣、咽喉异物感、胸闷不适、颈肩僵硬、早晨起床有不快感。不明原因的睡眠不良、手足发凉、手掌发粘、便秘、心悸气短、手足麻木、容易晕倒、坐立不安、心烦意乱。腿腰酸软、阳痿早泄、虚热、多汗、大便干燥、苔滑少津、脉细弱、虚风内动、心烦不眠、血虚眩晕,在以上症状出现时,使用阿胶禽蛋作为改善手段,能够促进患者的外周血细胞数量增加,改善身体免疫系统有极佳的疗效。同时,在免疫系统优化作用方面,实验发现,阿胶禽蛋能够使机体单核吞噬细胞的功能得到提升,可对抗氢化可的松诱发的细胞免疫机制作用,同时对细胞的免疫机制起到改善作用。阿胶禽蛋能够使腹腔吞噬细胞功能得到改善,进而促进脑神经细胞的发育,增强机体的免疫能力。阿胶禽蛋在提升改善脾脏方面还有十分关键的作用,可以有效提升腹腔吞噬细胞的吞噬功能,从而提升脑神经细胞的发育速度,增强患者的免疫力。
4、对皮肤系统在美肤养颜、延缓衰老、固本安神、滋阴润燥等方面具有显著的功效。在临床治疗过程中,阿胶禽蛋能够对皮肤起到“外润内养”的作用,对皮肤提供内源性润养。阿胶禽蛋中含有的羟脯胺酸、硫酸皮肤素能够促进成纤维细胞的合成,并且能够改善毛细血管丛的血氧供应,为成纤维细胞的生长提供更多更好地营养,持续不断地为皮肤输送养分,填充肌肤老化缝隙,抚平衰老痕迹,减缓皮肤衰老速度,全面改善皮肤出油无光泽、松弛皱纹等问题,使皮肤整体年轻化。阿胶禽蛋中还含有的β-烟酰胺单核苷酸在人体细胞能量生成中扮演重要角色,它参与细胞内NAD(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸,细胞能量转化的重要辅酶)的合成,具有抗衰老、DNA修复、保护听力视力、增强耐力、解酒护肝以及治疗心血管、神经认知等方面病症的功效。
阿胶禽蛋含有大量的胶原蛋白和部分水解物,内含20种人体必需的小分子氨基酸,典型的“三螺旋”分子结构,能有效锁住并吸收皮肤水分,在皮肤表面形成皮膜,对皮肤具有良好的保湿性,而且其保湿作用不受环境(温度、湿度等)变化的影响。阿胶禽蛋还含有纯天然胶原蛋白,对皮肤的渗透性强,可透过角质层与皮肤上皮细胞结合,参与和改善皮肤细胞的代谢,使皮肤中的胶原蛋白活性加强,保持角质层水分及纤维结构的完整性,改善皮肤细胞生存环境和促进皮肤组织的新陈代谢,增强血液循环,达到滋润皮肤的目的。皱纹及小细纹的产生与胶原质自然流失有关,阿胶禽蛋中所含有的纯天然胶原蛋白可直接渗透到肌肤真皮中补充流失的胶原质,重整肌肤纤维组织结构,促进细胞新陈代谢,延缓细胞衰老,使皮肤柔润光滑,细小皱纹得到舒展。
阿胶禽蛋中所含有的纯天然胶原蛋白能使细胞变得丰满,抑制络氨酸酶的活性,促进黑色素的分解代谢,减少黑色素的生成,从而减少色斑的形成,抵抗由于紫外线引起的皮肤损伤以及光老化,减少色斑沉积,防止皮肤色斑的形成。有纯天然美白祛斑等作用,使用纯天然的胶原蛋白阿胶禽蛋后,它会使肌肤结构变得较为紧致,没有缝隙,所以血液便不会停留在缝隙中,导致黑眼圈的产生。
而作为最纯天然的胶原蛋白,阿胶禽蛋可以直接渗透到真皮层里面去补充水分,让肌肤的保湿度成倍增加,油脂分泌量自然就会减少,还原成比较健康的肤质。胶原蛋白本身具有消炎与更新肌肤的作用,而且它也可以使细胞具有再生能力,所以它可以让有痘疤的肌肤新陈代谢掉。
同时,阿胶禽蛋还能提高SOD(抗氧化自由基酶)等酶的活性,清除自由基对皮肤的损伤。对于女性来说,合理地服用阿胶禽蛋,能够起到清心火、美肤养颜、固本安神、滋阴润燥、延缓衰老等作用。
5、对预防流产、安胎保胎、产后补血与恢复、提高母乳质量、孕后阴血亏虚有滋养气血、气血双补、气血同补、顾护胎元的作用。孕产妇在怀孕、妊娠、生产、产后过程期间,易出现失眠多梦、易醒、醒后心中烦乱不安、面色萎黄、时有头晕、舌淡红、苔薄白、脉玄细、恶心欲吐、轻微呕吐、食欲减退、神倦乏力、轻度心悸气短、头晕、眼花、耳鸣、嗜睡、呼吸急促、心跳加速、腰腿酸软、记忆力下降、性功能衰退、眼睑内粘膜等变白。针对以上症状阿胶禽蛋的温补功效应用于安胎保胎中,能够起到滋养气血、顾护胎元的作用,对孕产妇身体调节能起到良好的作用。分娩是一项风险系数较大的过程,产妇的气血状况以及安胎保胎情况,均会对分娩过程和产妇健康产生重要的影响,尤其是近年来人们优生优育观念的提升,对生育质量的要求不断上升。针对气血较为虚弱的产妇,食用阿胶禽蛋后孕妇的气血状况能够得到显著的改善,对于预防流产、安胎保胎、产后补血与恢复、提高母乳质量等方面有巨大的疗效。
阿胶禽蛋特别有助于产后补血的治疗,女性食用阿胶禽蛋后,能养血、补血、止血、促进造血,明显提高红细胞及血红蛋白含量,对营养性贫血、缺铁性贫血和失血性贫血、咳血、吐血、便血、蛆血、尿血、功能性子宫出血、妊娠胎漏等出血症有很好的疗效,同时还能预防月子病、防治产后风、治疗妇科疾病。
6、阿胶禽蛋在其他方面应用。阿胶禽蛋能够对碱性磷酸酶活力起到抑制作用,使机体的骨质状况、疲劳状况得到显著改善,促进钙代谢优化,使患者的睡眠质量和记忆力水平得到显著的提升。并能提高免疫力对男性疾病,年老体弱,久病体虚易感冒,更年期综合症,亚健康人群等均能快速的起到生气血,有较好的预防、改善、修复作用。阿胶禽蛋还在抗寒、抗疲劳、耐缺氧、防辐射损伤方面也具有较为显著的功效,同时有辅助放疗、化疗以及抗癌的作用,有促进健康人群淋巴细胞转化作用,能提高肿瘤患者的淋巴细胞转化率。
发明内容
本发明的目的在于提供一种阿胶禽蛋,该方法是根据物质聚合、吸附、亲水性原理,将小分子肽状阿胶原液与普通食物禽蛋结合起来,提高人体对阿胶营养成分的吸收率,并且提高禽蛋内含有的营养价值。
为实现上述目的,本发明采取如下技术方案:
一种阿胶禽蛋,所述阿胶禽蛋是将禽蛋浸泡在阿胶原液中制备而成,所述阿胶原液的浓度(w/w)为15%-80%。
其所述阿胶原液的浓度(w/w)为15%-75%时效果最佳。
所述禽蛋是鸡蛋、鸭蛋、鹅蛋、鸽蛋、鹌鹑蛋等各种禽蛋的总称。
上述阿胶禽蛋的制备方法包括如下步骤:
1、把选取的新鲜禽蛋,清洗、蒸煮、去皮、风干之后,加水与稀释到15%-75%的阿胶原液以文火熬制2-3h,再浸渍2-3h,得到阿胶禽蛋A;
2、将得到的阿胶禽蛋A放入盛有被稀释到15%-75%浓度的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为20-45℃、压力100-180kPa,高压腌制5-20min后,恢复常压腌制5-20min;取出放到阴凉处,风干1-6h后,得到阿胶禽蛋B;
3、将得到的阿胶禽蛋B放到盛有被稀释到20%-80%的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为20-45℃、压力120-200kPa,高压腌制5-20min后,恢复常压腌制5-20min,取出放到阴凉处,风干1-6h后,得到阿胶禽蛋C;
4、将得到的阿胶禽蛋C放到盛有被稀释到30%-70%的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为30-45℃、压力140-200kPa,高压腌制5-20min后,恢复常压腌制5-20min,取出放到阴凉处,风干1-6h后,得到阿胶禽蛋D;
5、将得到的阿胶禽蛋D,放在高压灭菌釜中保持110-130℃灭菌40-60min,再真空包装即得。
本发明所采用的阿胶原液不包括豆油、黄酒、冰糖等辅料,既可以直接从生产厂家购买,也可以通过制备的方法获得。具体的制备方法如下:
1、将处理完毕以及洗净的驴皮,加入热水掇皮,掇皮结束后用温度为大于一百摄氏度的水,熬胶120h,当胶水浓度达到大于4%时放出第一道稀胶原液,然后再向锅内加入热水,继续在大于一百摄氏度的情况下提取120h,这样依次进行12次,直至将原料中的胶原物质全部提取干净为止,得提取液;
2、用离心分离法(采用叠片式离心机进行,所述叠片式离心机由能够高速旋转的不锈钢碟片组成,阿胶原液从中央加入,由碟片中几个圆孔流到每层碟片之间,受离心力的作用,油脂和沉淀物很快粘在碟片表面而与胶液分开,胶液则从转钵盖内四周向上从中心流出),对提取液进行初步澄清处理,然后转入夹层锅中继续浓缩至浓度为10%后,进行提沫除杂;然后再加热至沸腾,直至蒸发过程无法进行为止;得初道胶液。
3、把初道胶液置入浓缩锅内,通入蒸汽,徐徐蒸发,至浓度为50%后,向锅内加入胶液体积等同量的生水,再徐徐蒸发,待胶液表面上浮出的浮沫杂质聚于锅中心时,将浮沫提出;如此反复操作,提至胶液表面泛起黄细沫为止,得到阿胶原液。
具体的,所述驴皮处理和洗净的方法为:按照驴皮的质量标准,将皮料进行分类整理,并挑拣出其中的杂质;把挑拣合格的驴皮进行计量,称重,按投料量将准确称重的驴皮投入泡皮池内;向投有驴皮的泡皮池中加入水,每天换水1~2次,直到皮泡透;然后置于刮毛架上,用刮毛刀将驴皮上的毛刮掉;然后再将泡透去毛的驴皮置于切皮架上,将皮料切成边长均等的方块,然后放进洗皮池中,加水洗涤至将驴皮洗净为止,最后投入洁净的掇皮容器内,加入浓度为1%至10%的碱溶液中,通入蒸汽加热,至驴皮打卷时,放出碱溶液,继续加水,直至驴皮洁净为止,得到洁净的驴皮。
上述阿胶禽蛋不仅可以本身作为保健品,也可以作为原料做成其它的保健食品,这些均落入本发明的保护范围之内。
本发明具有如下优点:
1、经过实际试食试验,真实表现有哺乳期食用阿胶禽蛋,可以补充产妇体内所需的蛋白质、氨基酸、微量元素等,对产后恢复和提高母乳质量有很好的疗效。此外,阿胶禽蛋有助于产后补血的治疗,有助于调理气血,预防月子病。女性食用阿胶禽蛋的好处有养血、补血、止血、促进造血,明显提高红细胞及血红蛋白含量,对营养性贫血、缺铁性贫血和失血性贫血、咳血、吐血、便血、蛆血、尿血、功能性子宫出血、妊娠胎漏等出血症有很好的疗效,并能提高免疫力对年老体弱,久病体虚易感冒,更年期综合症,亚健康人群等有较好的预防、改善、修复作用。女性食用阿胶禽蛋的好处还有美容养颜、滋润皮肤,脸色红润,肌肤细嫩,有光泽的作用,这是阿胶禽蛋对皮肤的营养作用及促进钙的吸收、保养的共同结果。患者食用阿胶禽蛋的好处有抗癌作用,为放疗、化疗患者的辅助,有促进健康人淋巴细胞转化作用,同时也能提高肿瘤患者的淋巴细胞转化率。
2、本发明提纯出的小分子肽状阿胶原液富含多种氨基酸与矿物质,经过高压物理方式被禽蛋微孔吸收后,小分子肽状阿胶原液中的氨基酸与禽蛋本身含有的氨基酸与营养物质经过聚合、吸附、亲水性原理,构成完备的人体需要的二十种氨基酸与多种微量元素,并且小分子肽状阿胶原液以禽蛋做载体经禽蛋微孔吸收后均是200至1000DA的小肽肽段,食用后更易吸收,吸收率达到95%以上,同时还能够发挥药食同源的协同作用,对血液系统有促进凝血改善贫血作用,对造血系统有促进骨骼外造血的促进和保护作用,对免疫系统有正向调节作用,对皮肤系统有美肤养颜的作用,对孕前保胎孕后阴血亏虚有滋养气血顾护胎元的作用。且治疗组的总有效率和显效率明显高于对照组。
3、克服了现有阿胶性滋腻,单方服用伤害脾胃功能,需搭配其他药物,利用药性的互补作用制约单方的副作用,是药三分毒,无论阿胶与任何一味药品搭配都有一定的副作用。阿胶禽蛋采用的是纯物理方式制作,利用禽蛋在高温时本身具有的微孔吸附小分子阿胶原液的营养成分,没有任何药物参与,是安全的、平和的,具有全面修复的补益效果。克服了单方阿胶很难精确掌握每次服用剂量,且服用方法较复杂的问题,长期服用不滋腻、不上火。
4、将小分子肽状阿胶原液与普通食物禽蛋结合起来,能够在一日三餐中食用,既提高了食物的营养价值,又使美容保健效果在日常生活中实现,还能对诸如产科病症、妇科病症、循环病症、躯体病症、性功能病症等有很大的预防、改善疗效。同时,具有协同的药食同源作用,气血同补、气血双补、全面修复,功能疗效更加全面。
5、本发明的阿胶禽蛋是采用的不添加诸如豆油、黄酒、冰糖等任何辅料的小分子肽状纯阿胶原液制备而成,区别于以往人们食用的带有豆油、黄酒、冰糖等辅料的阿胶制品。人们食用这样的小分子阿胶禽蛋产品大大降低上火、便秘等症状,减少小分子阿胶原液在形成固体阿胶过程中的营养的流失。同时,本发明使用纯物理方法制作,未添加任何化学添加剂,属于纯绿色天然食品。
6、本方法所涉及的用料皆为药食两用,无毒副作用,本组方符合中医药原理和孕产妇身心特点。出差旅游携带服用方便,入口即化,不需用水,易于定量长期服用。工艺简单,生产效率高,能耗及损耗小。
7、本发明的阿胶禽蛋不但没有改变禽蛋的香味,而且增加了营养成分和保健成分。
8、长期食用本阿胶禽蛋具有气血双补、气血同补、健脾养胃、美容养颜、延年益寿和全面修复的功效。
附图说明
图1.模拟体系的初始和终态构型图;
图2.模拟构型中20种氨基酸与蛋白质相互作用图;
图3.阿胶禽蛋提取物对PITO自由基的清除活性图;
图4.阿胶禽蛋中活性小分子肽段分布状况;
图5.生物利用度比较。
具体实施方式
下面将通过具体实施例对本发明进行详细的描述。提供这些实施例是为了能够更透彻地理解本发明,并且能够将本发明的范围完整的传达给本领域的技术人员。
如在通篇说明书及权利要求当中所提及的“包含”或“包括”为一开放式用语,故应解释成“包含但不限定于”。说明书后续描述为实施本发明的较佳实施方式,然所述描述乃以说明书的一般原则为目的,并非用以限定本发明的范围。本发明的保护范围当视所附权利要求所界定者为准。
如无特别指明,本生产工艺采用的设备均为本领域常用的设备,所采用的原料均能是市场购买得到,如无特殊说明,所采用的试验方法均为常规的试验方法。
实施例1
阿胶原液的制备方法,具体如下:
1、驴皮处理和洗净:按照驴皮的质量标准,将皮料进行分类整理,并挑拣出其中的杂质;把挑拣合格的驴皮进行计量,称重,按投料量将准确称重的驴皮投入泡皮池内;向投有驴皮的泡皮池中加入水,每天换水1~2次,直到皮泡透;然后置于刮毛架上,用刮毛刀将驴皮上的毛刮掉;然后再将泡透去毛的驴皮置于切皮架上,将皮料切成边长均等的方块,然后放进洗皮池中,加水洗涤至将驴皮洗净为止,最后投入洁净的掇皮容器内,加入浓度为1%至10%的碱溶液中,通入蒸汽加热,至驴皮打卷时,放出碱溶液,继续加水,直至驴皮洁净为止,得到洁净的驴皮。
2、将处理完毕以及洗净的驴皮,加入热水掇皮,掇皮结束后用温度为大于一百摄氏度的水,熬胶120h,当胶水浓度达到大于4%时放出第一道稀胶原液,然后再向锅内加入热水,继续在大于一百摄氏度的情况下提取120h,这样依次进行12次,直至将原料中的胶原物质全部提取干净为止,得提取液;
3、用离心分离法(采用叠片式离心机进行,所述叠片式离心机由能够高速旋转的不锈钢碟片组成,阿胶原液从中央加入,由碟片中几个圆孔流到每层碟片之间,受离心力的作用,油脂和沉淀物很快粘在碟片表面而与胶液分开,胶液则从转钵盖内四周向上从中心流出),对提取液进行初步澄清处理,然后转入夹层锅中继续浓缩至浓度为10%后,进行提沫除杂;然后再加热至沸腾,直至蒸发过程无法进行为止;得初道胶液。
4、把初道胶液置入浓缩锅内,通入蒸汽,徐徐蒸发,至浓度为50%后,向锅内加入胶液体积等同量的生水,再徐徐蒸发,待胶液表面上浮出的浮沫杂质聚于锅中心时,将浮沫提出;如此反复操作,提至胶液表面泛起黄细沫为止,得到阿胶原液。
以下实施例2-8中的阿胶原液均可从厂家直接购买而得或者按照实施例1的方法制备而得,其中禽蛋可以是鸡蛋、鸭蛋、鹅蛋、鸽蛋、鹌鹑蛋等各种禽蛋的任意一种。
实施例2
一种阿胶禽蛋的制备方法,包括如下步骤:
1、把选取的新鲜禽蛋,清洗、蒸煮、去皮、风干之后,加水与稀释到15%的阿胶原液以文火熬制2h,再浸渍2h,得到阿胶禽蛋A;
2、将得到的阿胶禽蛋A放入盛有被稀释到15%浓度的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为20℃、压力100kPa,高压腌制20min后,恢复常压腌制20min;取出放到阴凉处,风干1h后,得到阿胶禽蛋B;
3、将得到的阿胶禽蛋B放到盛有被稀释到20%的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为20℃、压力120kPa,高压腌制20min后,恢复常压腌制20min,取出放到阴凉处,风干1h后,得到阿胶禽蛋C;
4、将得到的阿胶禽蛋C放到盛有被稀释到30%的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为30℃、压力140kPa,高压腌制20min后,恢复常压腌制20min,取出放到阴凉处,风干1h后,得到阿胶禽蛋D;
5、将得到的阿胶禽蛋D,放在高压灭菌釜中保持110℃灭菌60min,再真空包装即得。
实施例3
一种阿胶禽蛋的制备方法,包括如下步骤:
1、把选取的新鲜禽蛋,清洗、蒸煮、去皮、风干之后,加水与稀释到25%的阿胶原液以文火熬制2.5h,再浸渍2.5h,得到阿胶禽蛋A;
2、将得到的阿胶禽蛋A放入盛有被稀释到25%浓度的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为30℃、压力120kPa,高压腌制15min后,恢复常压腌制15min;取出放到阴凉处,风干2h后,得到阿胶禽蛋B;
3、将得到的阿胶禽蛋B放到盛有被稀释到30%的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为25℃、压力140kPa,高压腌制15min后,恢复常压腌制15min,取出放到阴凉处,风干2h后,得到阿胶禽蛋C;
4、将得到的阿胶禽蛋C放到盛有被稀释到40%的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为40℃、压力150kPa,高压腌制15min后,恢复常压腌制15min,取出放到阴凉处,风干2h后,得到阿胶禽蛋D;
5、将得到的阿胶禽蛋D,放在高压灭菌釜中保持120℃灭菌50min,再真空包装即得。
实施例4
一种阿胶禽蛋的制备方法,包括如下步骤:
1、把选取的新鲜禽蛋,清洗、蒸煮、去皮、风干之后,加水与稀释到35%的阿胶原液以文火熬制3h,再浸渍3h,得到阿胶禽蛋A;
2、将得到的阿胶禽蛋A放入盛有被稀释到35%浓度的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为40℃、压力140kPa,高压腌制10min后,恢复常压腌制10min;取出放到阴凉处,风干3h后,得到阿胶禽蛋B;
3、将得到的阿胶禽蛋B放到盛有被稀释到40%的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为30℃、压力160kPa,高压腌制10min后,恢复常压腌制10min,取出放到阴凉处,风干3h后,得到阿胶禽蛋C;
4、将得到的阿胶禽蛋C放到盛有被稀释到45%的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为45℃、压力160kPa,高压腌制10min后,恢复常压腌制10min,取出放到阴凉处,风干3h后,得到阿胶禽蛋D;
5、将得到的阿胶禽蛋D,放在高压灭菌釜中保持125℃灭菌45min,再真空包装即得。
实施例5
一种阿胶禽蛋的制备方法,包括如下步骤:
1、把选取的新鲜禽蛋,清洗、蒸煮、去皮、风干之后,加水与稀释到45%的阿胶原液以文火熬制2h,再浸渍3h,得到阿胶禽蛋A;
2、将得到的阿胶禽蛋A放入盛有被稀释到45%浓度的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为45℃、压力100kPa,高压腌制5min后,恢复常压腌制5min;取出放到阴凉处,风干4h后,得到阿胶禽蛋B;
3、将得到的阿胶禽蛋B放到盛有被稀释到50%的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为35℃、压力160kPa,高压腌制15min后,恢复常压腌制15min,取出放到阴凉处,风干4h后,得到阿胶禽蛋C;
4、将得到的阿胶禽蛋C放到盛有被稀释到50%的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为45℃、压力1400kPa,高压腌制50min后,恢复常压腌制50min,取出放到阴凉处,风干4h后,得到阿胶禽蛋D;
5、将得到的阿胶禽蛋D,放在高压灭菌釜中保持120℃灭菌50min,再真空包装即得。
实施例6
一种阿胶禽蛋的制备方法,包括如下步骤:
1、把选取的新鲜禽蛋,清洗、蒸煮、去皮、风干之后,加水与稀释到55%的阿胶原液以文火熬制2h,再浸渍3h,得到阿胶禽蛋A;
2、将得到的阿胶禽蛋A放入盛有被稀释到55%浓度的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为40℃、压力120kPa,高压腌制12min后,恢复常压腌制12min;取出放到阴凉处,风干5h后,得到阿胶禽蛋B;
3、将得到的阿胶禽蛋B放到盛有被稀释到60%的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为40℃、压力150kPa,高压腌制12min后,恢复常压腌制12min,取出放到阴凉处,风干5h后,得到阿胶禽蛋C;
4、将得到的阿胶禽蛋C放到盛有被稀释到60%的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为45℃、压力140kPa,高压腌制12min后,恢复常压腌制12min,取出放到阴凉处,风干5h后,得到阿胶禽蛋D;
5、将得到的阿胶禽蛋D,放在高压灭菌釜中保持125℃灭菌55min,再真空包装即得。
实施例7
一种阿胶禽蛋的制备方法,包括如下步骤:
1、把选取的新鲜禽蛋,清洗、蒸煮、去皮、风干之后,加水与稀释到65%的阿胶原液以文火熬制2-3h,再浸渍2-3h,得到阿胶禽蛋A;
2、将得到的阿胶禽蛋A放入盛有被稀释到65%浓度的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为45℃、压力100kPa,高压腌制8min后,恢复常压腌制8min;取出放到阴凉处,风干6h后,得到阿胶禽蛋B;
3、将得到的阿胶禽蛋B放到盛有被稀释到70%的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为25℃、压力160kPa,高压腌制20min后,恢复常压腌制20min,取出放到阴凉处,风干6h后,得到阿胶禽蛋C;
4、将得到的阿胶禽蛋C放到盛有被稀释到70%的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为45℃、压力140kPa,高压腌制8min后,恢复常压腌制8min,取出放到阴凉处,风干6h后,得到阿胶禽蛋D;
5、将得到的阿胶禽蛋D,放在高压灭菌釜中保持110℃灭菌60min,再真空包装即得。
实施例8
一种阿胶禽蛋的制备方法,包括如下步骤:
1、把选取的新鲜禽蛋,清洗、蒸煮、去皮、风干之后,加水与稀释到75%的阿胶原液以文火熬制3h,再浸渍2h,得到阿胶禽蛋A;
2、将得到的阿胶禽蛋A放入盛有被稀释到45%浓度的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为45℃、压力100kPa,高压腌制15min后,恢复常压腌制15min;取出放到阴凉处,风干3h后,得到阿胶禽蛋B;
3、将得到的阿胶禽蛋B放到盛有被稀释到80%的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为20℃、压力200kPa,高压腌制10min后,恢复常压腌制15min,取出放到阴凉处,风干3h后,得到阿胶禽蛋C;
4、将得到的阿胶禽蛋C放到盛有被稀释到70%的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为45℃、压力140kPa,高压腌制15min后,恢复常压腌制15min,取出放到阴凉处,风干3h后,得到阿胶禽蛋D;
5、将得到的阿胶禽蛋D,放在高压灭菌釜中保持130℃灭菌40min,再真空包装即得。
以下对制备得到的阿胶禽蛋通过试验进行进一步说明。
一、阿胶原液中的氨基酸与禽蛋蛋白的结合方式
首先,获取计算模拟所需要的蛋类的卵清蛋白和各种氨基酸的构型以及力场参数文件。在蛋白质数据库(RCSB Protein Data Bank:http://www.rcsb.org/)获取卵清蛋白的构型文件(PDB ID:3P9M),通过Gromacs软件自带力场数据库可获得卵清蛋白的力场参数拓扑文件;由于氨基酸的分子结构比较简单,我们可以直接在ATB网站(网址:http://atb.uq.edu.au/)搜索下载20种氨基酸的构型文件以及力场文件。
第二,构建模拟体系。首先围绕卵清蛋白结构构建一个11nm×11nm×11nm的周期性立方格子,然后将20种氨基酸每种3个随机加入到模拟格子蛋白周围的水相中。由于卵清蛋白与氨基酸带有不同电荷,为了使整个体系保证电中性,向体系中加入相应数量的Na+或者Cl离子。
第三,分子动力学模拟。分子动力学方法是通过经验势函数来表征分子间的相互作用,通过求解牛顿力学方程来模拟体系中分子的运动。模拟中势能函数选取GROMOS54A6联合原子力场形式,力场中的势能函数包括成键伸缩势、键角弯曲势、离平面势和非键相互作用势,其中非键相互作用包括Lennard-Jones势和库伦作用势,如下列公式所示:
初始构型建立完之后,对体系首先采用最速下降法进行能量最小化来消除可能的构象重叠,然后体系在298K,latm条件下运行5nsNVT系综下的分子动力学模拟,其中模拟步长为2fa。模拟过程中体系的温度采用Berendsen方法进行控制,体系中所有分子的键长均采用LINCS方法进行约束。短程非键作用势能的截断半径设置为1.2nm,对于长程静电作用则采用Particle-mesh Ewald(PME)方法来处理。使用VMD1.9.2软件来观察动力学模拟轨迹。
模拟的初始和最终构型如图1所示,图1a表示体系的初始构型和图1b表示体系的最终构型(在模拟中将蛋白质分子放置于模拟盒子的中央位置,既图中所示的卡通飘带模型;20种氨基酸分子随机摆放在蛋白质周围,既图中范德华半径球模型所示;模拟盒子中充满水来代表溶液环境,为了清晰显示蛋白与氨基酸之间的分布关系,将水分子设置为隐藏模式)。由初始构型可以看出,氨基酸分子起初随机分布于溶液相中,随着模拟的进行,氨基酸小分子逐渐靠近并最终吸附在了蛋白质的表面。氨基酸分子最终吸附在蛋白质表面必然是通过一些不同类型分子间的相互作用力,这些作用力细节通过图2中的二维作用力图逐个展示。从图中可以看到不同种类的氨基酸分子最终均由水相中自发地吸附到蛋白结构的表面。由于不同氨基酸分子中含有亲水或疏水性基团,一些氨基酸单体还含有带电基团,因此它们与蛋白之间作用力比较复杂。所以不同的氨基酸随机地排布在卵清蛋白周围,如图1b所示。由于蛋白质表面是不光滑的结构,蛋白残基可以构成缝隙或者结合口袋,氨基酸小分子则随机吸附在这些位点。总之,氨基酸小分子能够自发地吸附在蛋白表面,也就是说阿胶原液煮沸蛋的过程中,这20种氨基酸均可以吸附至蛋白的微孔缝隙中,增加蛋白的营养成份。
各类氨基酸分子之所以吸附或者结合到蛋白表面,这是由于它们能够和蛋白质结合位点的残基之间发生相互作用。我们按照氨基酸中的R基极性,或者中性条件下带电情况分类,从每种类型中挑选出具有代表性的氨基酸,截取其与卵清蛋白的构型结构,以此为代表来讨论氨基酸分子的吸附行为,如图2所示,可以看到,氨基酸可以通过疏水、亲水、氢键或者范德华作用吸附到蛋白质残基的周围。
通过具体分析氨基酸与蛋白质之间作用力,发现非极性R基氨基酸以及极性不带电荷的R基氨基酸主要通过氢键吸附在卵清蛋白周围,而极性带电的R基氨基酸则主要通过离子键与卵清蛋白相互作用。例如,丙氨酸通过羧基以及氨基上的氢与蛋白残基甘氨酸羧基上的氧形成氢键,从而稳定在蛋白残基缝隙中,与之类似的是缬氨酸与蛋白残基天冬氨酸通过氢键作用,亮氨酸与蛋白残基天冬氨酸及酪氨酸通过氢键作用,异亮氨酸与蛋白残基精氨酸及谷氨酸分别形成氢键,苯丙氨酸与蛋白残基脯氨酸及赖氨酸分别形成氢键,甲硫氨酸(蛋氨酸)与蛋白残基苏氨酸形成氢键,脯氨酸与蛋白残基谷氨酸通过氢键作用,色氨酸与蛋白残基谷氨酰胺及精氨酸分别形成氢键,甘氨酸通过与蛋白质残基酪氨酸形成氢键从而吸附在蛋白周围,丝氨酸通过与蛋白残基天冬氨酸及赖氨酸形成氢键,苏氨酸与蛋白残基谷氨酸及谷氨酰胺通过氢键作用,天冬酰胺与蛋白残基赖氨酸通过氢键作用,谷氨酰胺与蛋白残基谷氨酰胺及酪氨酸分别形成氢键,酪氨酸与蛋白残基酪氨酸及谷氨酸形成氢键,半胱氨酸与蛋白残基谷氨酸、丝氨酸及甘氨酸分别形成氢键,稳定在其空腔内;此外,带有电荷的极性氨基酸主要是通过与蛋白残基形成离子键来稳定与蛋白空腔及缝隙的,但是氢键的作用也不能忽视,天冬氨酸与蛋白残基组氨酸形成离子键,同时还与蛋白残基谷氨酰胺形成氢键,从而使天冬氨酸更容易吸附在卵清蛋白周围;与之类似的是,谷氨酸与蛋白接触时,被蛋白残基赖氨酸吸引,二者形成离子键。极性带正电荷的氨基酸组氨酸通过与蛋白残基丙氨酸、酪氨酸、半胱酰胺形成氢键稳定在蛋白周围,赖氨酸与蛋白残基天冬氨酸通过离子键作用,同时还与蛋白残基酪氨酸及谷氨酸形成氢键,精氨酸与蛋白残基酪氨酸及精氨酸形成氢键,稳定在卵清蛋白周围。
二、阿胶土鸡蛋中各氨基酸含量测定
1、仪器设备:
日立L一8900全自动氨基酸分析仪,电子天平,匀浆机,恒温干燥箱,均质器,酒精喷灯等。
2、实验方法:
称取样品2.5-3.0g至水解管中。在水解管中加入2.5mL浓盐酸,在均质器上混匀。向水解管中充入高纯氮气,在充满氮气情况下,用酒精喷灯将水解管烧软旋转至密封。将密封、冷却后的水解管放入(105±1)℃的恒温干燥箱内,水解21h后,取出冷却。打开水解管,用纯净水多次冲洗水解管,将水解液全部转移到20mL刻度试管中,定容。吸取滤液0.1mL至10mL容量瓶中,抽真空,并在40-50℃水浴中干燥。残留物用微量水溶解,再干燥,反复进行2次,最后蒸干。用0.02mol/L盐酸溶液定容至1OmL。将上述溶液过0.2μm的滤头,注入进样品中,待上机检测。分别对本发明的阿胶土鸡蛋(实验组)和土鸡蛋(对照组)进行检测,测得结果见表1。
表1氨基酸含量对比
从表1可以看出,阿胶禽蛋实验组中各类氨基酸含量均比土鸡蛋的对照组高,实验组总氨基酸含量与对照组相比,均有较大程度的提高,从这方面来说,本发明的阿胶土鸡蛋营养比普通土鸡蛋营养丰富。
三、阿胶土鸡蛋中对身体有益金属元素含量的测定
1、仪器、方法及试剂:
AFS-920双道原子荧光光度计。等离子体发射光谱(IRIS advantage(美国热电公司产品))。各元素标准储备液:浓度均为1.000mg/mL
2、实验方法:
将土鸡蛋(或阿胶土鸡蛋)可食部分打入烧杯中,用玻璃棒将其搅匀,然后称取已经混匀的样品约0.500g置于烧杯中,加入浓HNO35mL,HClO41.25mL,加盖,冷消化过夜。次日在电炉上加热消化至浓白烟冒尽,余液约为0.5mL,用蒸馏水定容,测定(上ICP测定)。同时称取0.100g样品与烧杯中,加入王水15mL,加盖表面皿,冷消化过夜。次日在电炉上消解至清,加入5mL硫脲溶液定容测定(上AFS测定)。
仪器测定分别用空白与标准溶液上机测定其标准曲线,测定8次空白溶液和标准曲线求其检出限、用一定浓度的标准溶液进行6次重复测定求其标准偏差。在此条件下进行4次样品测定和4次加入标准溶液的样品测定,测定每种元素的回收率,样品测定过程中,中间插入标准液校正。分别对本发明的阿胶土鸡蛋(实验组)和土鸡蛋(对照组)进行检测,结果见表2。
表2阿胶土鸡蛋中对身体有益金属元素含量测定(10-6mg/g)
元素 | Se | Cu | Ca | Fe | Mg | Mn | Zn |
波长(nm) | 196.0 | 324.7 | 317.9 | 259.9 | 279.1 | 257.6 | 213.8 |
对照组 | 0.0581 | 1.925 | 816.3 | 30.45 | 207.7 | 1.529 | 21.41 |
实验组 | 0.725 | 1.879 | 820.5 | 36.32 | 216.3 | 1.635 | 26.37 |
P值 | 0.005 | 0.168 | 0.524 | 0.003 | 0.426 | 0.184 | 0.0025 |
从表2中对比可知,常规元素Ca、Mg、Cu、Mn差异不显著;
微量元素Fe、Zn、Se实验组含量比对照组高,差异极其显著;也就是说本发明的阿胶土鸡蛋与对照组中的土鸡蛋相比,在有益金属元素方面,营养成分更高更加全面。
四、阿胶土鸡蛋中维生素含量测定
实验方法:采用国标(GB54139-2010)食品中维生素A、维生素C、维生素E、胡萝卜素、视黄醇、硫胺素、核黄素、硫酸皮肤素、玉米黄素、叶黄素、β-烟酰胺单核苷酸含量的测定方法。
测得结果见表3。
表3阿胶土鸡蛋中维生素含量(ug/mg)
对照组 | 实验组 | P值 | |
维生素A | 7.53±0.64 | 9.26±0.38 | 0.0285 |
维生素C | 1520±36.28 | 1538±38.52 | 2.587 |
维生素E | 2284±38.63 | 2863±42.59 | 0.0426 |
胡萝卜素 | 1462±41.57 | 1485±31.73 | 1.583 |
硫胺素 | 132.78±38.45 | 138.24±38.45 | 1.028 |
核黄素 | 324.45±29.53 | 329.86±26.42 | 1.255 |
硫酸皮肤素 | - | 216.42±27.25 | 0.004 |
玉米黄素 | 41.74±0.78 | 58.29±0.62 | 0.016 |
叶黄素 | 39.61±0.89 | 59.24±1.36 | 0.018 |
β-烟酰胺单核苷酸 | 28.53±0.53 | 37.82±0.48 | 0.029 |
由表3中的结果可知,与对照组中的土鸡蛋相比,本发明的阿胶土鸡蛋中维生素A,维生素E含量都有所增加,差异显著。并且营养元素中实验组数值均超过对照组数值,并且与对照组相比,对照组中土鸡蛋的硫酸皮肤素无法测定,而阿胶土鸡蛋的实验组中硫酸皮肤素含量剧增,差异极其显著,说明本发明的阿胶土鸡蛋的营养更高更加全面。
五、阿胶禽蛋提取物清除PTIO自由基的活性实验
1、实验仪器和试剂
UV-759紫外分光光度计、电子天平、色谱甲醇、阿胶禽蛋提取物、PITO自由基。
2、PITO自由基吸光度测定及浓度选择
称取7mg PTIO自由基溶于1mL甲醇中,分别配置成1.25,2.5,5,10,20,30μM的5个不同浓度的PITO自由基甲醇溶液(设置纯甲醇溶液作为空白对照,用以基线校准),在37℃条件下,用紫外可见分光光度计进行全谱扫描,确定其最大吸收峰为557nm,并选择吸收峰A值为0.8-1.2的浓度作为检测浓度。
3、阿胶禽蛋提取物对PITO自由基的清除活性测定
将PITO配置成吸收峰A值为0.8-1.2的浓度的溶液1待用;
将阿胶禽蛋提取物溶于甲醇溶液中,配置成浓度分别为50,100,500,1000mg/ml的溶液2,3,4,5待用;
实验步骤:
3.1往比色皿中加入1000μL甲醇溶液,在37℃条件下进行基线校准;
3.2往比色皿中加入990μL PITO的甲醇溶液1,再加入10μL阿胶禽蛋提取物甲醇溶液2(此时阿胶禽蛋提取物的最终溶度为0.5mg/ml),记为反应初始时刻,在37℃条件下,立即测定557nm处的PITO吸收峰,记录数据为A0;
3.3保持温度为37℃条件下,测定反应1h时557nm处的PITO吸收峰,记录数据为A1;
3.4再按照以上步骤(2)和(3)测定初始浓度分别为100,500,1000mg/ml的溶液3,4,5(最终浓度分别为1,5,10mg/ml的)对PITO自由基的清除活性;
3.5每个浓度的阿胶禽蛋提取物对PITO自由基的清除活性进行三次测定,以求平均值;
4、阿胶禽蛋提取物对PITO自由基的清除率的计算
按照公式:清除率(%)=(A0-A)*100%/A0进行计算可求出阿胶禽蛋提取物浓度分别为0.5,1,5和10mg/ml时对PITO自由基的清除活性。
5、阿胶禽蛋提取物对PITO自由基的清除活性作图
以阿胶禽蛋提取物的浓度为横坐标,PITO自由基的清除率为纵坐标,利用Origin软件做柱形图即可。结果见图3;从图3可以得出,不同浓度的阿胶禽蛋提取物溶液都有清除PITO自由基的效果,并呈现显著的浓度依赖关系。浓度为10mg/ml的阿胶禽蛋提取物对于PITO自由基的清除率接近于100%,说明本阿胶制品在抗氧化方面具有较大的作用。
六、阿胶禽蛋中活性小分子肽段分布的实验
1、实验仪器和试剂
ABSCIEX Triple Quad 6500+超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪、高效液相凝胶色谱柱(C18,250mm*4.0mm*5.0μm)、Eppendorf5424R低温高速离心机、Vortex-6涡旋振荡器、pH=7.2的磷酸缓冲液、色谱甲醇、色谱乙腈、驴特征肽、阿胶禽蛋样品、20μL进样器。
2、参考文献找出阿胶特征肽,并通过高分辨质谱结合蛋白质搜库技术对理论特征肽进行序列和结构验证。
3、色谱、质谱条件
液相色谱条件:色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18(100mm*2.1mm,1.7μm),流速0.3mL/min,流动相A为0.1%甲酸溶液,B为0.1%甲酸乙腈溶液,梯度洗脱程序:0-3min,4%B;3-8min,4%-8%B;8-15min,8%-50%B;15-16min,50%B;16-16.1min,4%B;16.1-25min,4%B;流速:0.3mL/min。
质谱条件:电喷雾离子源(ESI)正离子扫描模式,多反应监测;离子源温度:550℃。
4、标准溶液配制
称取阿胶禽蛋样品0.1g,置于50mL量瓶中,加入质量分数约为1%的NH4HCO3(1g固体,加入100mL水溶解)40mL,超声处理30min,使样品完全溶解并加1%NH4HCO3水溶液定容至刻度,摇匀,得阿胶禽蛋基质溶液。取驴特征肽适量,加阿胶禽蛋基质溶液制成各特征肽质量浓度为2μg/mL的溶液,作为标准储备溶液。
5、样品溶液配制
取胰蛋白酶适量,加1%NH4HCO3溶液溶解,制成质量浓度为1μg/μL的胰蛋白酶溶液。取阿胶禽蛋样品0.1g,置于50mL量瓶中,加1%NH4HC03溶液4mL,超声处理30min,使样品完全溶解并加入上述1%NH4HC03溶液定容至刻度,过0.22μm滤膜,取100μL滤液至300μL微量进样瓶中,同时加入上述1μg/μL的胰蛋白酶溶液10μL,摇匀,37℃恒温酶解12h,即得。
6、实验步骤
6.1特征肽的发现:将驴特征肽通过高分辨质谱对各特征肽进行验证,各特征肽碎片归属应与数据库中信息一致。
6.2质谱参数的优化:质谱的锥孔电压、碰撞能对待测物的裂解有重要的影响,配制1mg/mL的特征肽的单一标准溶液进行质谱条件优化:在电喷雾正离子模式下,通过蠕动泵直接进样方式,确定待测物母离子;逐渐改变碰撞能量,通过观察离子的丰度变化并与高分辨质谱碎片归属相结合确定定量离子、定性离子;最终通过优化质谱参数,确定碎裂电压及碰撞能量。
6.3专属性实验:以驴皮阿胶样品为阳性样品,以自制阿胶禽蛋样品为阴性样品,选择特征肽检测离子对其进行测定。在阳性样品中,各特征肽对照品相应的保留时间位置上呈现出相应驴皮特征肽离子流色谱峰。阿胶禽蛋样品的色谱图中,在与驴皮胶样品相应的位置上均无相应的色谱峰,因此认为所选各特征肽具有一定的代表性,且阿胶禽蛋样品对测定无干扰。
6.4标准溶液、线性范围的检测:
取系列标准溶液进样,按上述色谱条件测得峰面积。以峰面积为纵坐标,特征肽对照品质量浓度为横坐标,绘制标准曲线。
6.5重复性实验:取同一样品,按标准溶液和样品溶液配制方法平行制备2份溶液,以监测离子对进行测定,检测实验重复性。
检测结果如图4所示,从图中可以看到分子量在200-1000Da的小肽含量最高,达到了80%以上。分子量在1000-3000Da的肽段占大约12.91%,而游离氨基酸和分子量大于3000Da的肽段含量很低。由此可见,分子量在200-1000Da范围内的肽段的吸收和功效相比于其他大小的肽段和游离氨基酸效果要好,因此,本阿胶提取物相对于其他胶原蛋白肽产品有更好的吸收率和功效。
七、阿胶禽蛋生物利用度测试实验
1、实验仪器和试剂
UV-759紫外分光光度计、电子天平、100-150g健康小鼠、鼠笼、鼠粮、注射器、普通阿胶、仿生消化阿胶、阿胶禽蛋、羟脯氨酸、柠檬酸、氯胺T、对二甲基氨基苯甲醛、高氯酸。
2、试剂配制:
2.1柠檬酸缓冲液的配制:称取柠檬酸钠60g、柠檬酸23g、氢氧化钠17g、溶解于蒸馏水中,加入冰醋酸6mL,调整pH值至6.0,然后定容至500mL。
2.20.05mol/L氯胺T溶液的配制:称取氯胺T3.575g,溶解于50mL蒸馏水中,然后加入乙二醇独甲醚75mL,再加入125mL柠檬酸缓冲液混合均匀。
2.3对二甲基氨基苯甲醛溶液的配制:试剂A:取无水乙醇10mL,慢慢加入浓硫酸1.37mL;试剂B:取对二甲基氨基苯甲醛6g,慢慢加入无水乙醇20mL,水浴加热使其完全溶解并冷却至室温,然后将A液慢慢加入B,混合均匀。
2.43.5mol/L高氯酸溶液的配制:量取13.5mL高氯酸,以蒸馏水定容到50mL。
2.5羟脯氨酸标准储存液:准确称取L-羟基脯氨酸标准品100mg,加入0.01mol/L盐酸中溶解,稀释并定容到200mL,在冰箱中保存。
2.6羟脯氨酸标准工作液:量取羟脯氨酸标准储存液20mL到100mL容量瓶中,用蒸馏水定容到100mL(临用前配制),浓度为100μg/mL。
3、羟脯氨酸标准曲线的绘制
分别量取羟脯氨酸标准工作液1.0、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5mL,用蒸馏水定容到50mL容量瓶中。以蒸馏水为空白,分别吸取上述标准液1mL,加入1mL柠檬酸缓冲液和1mL0.05mol/L氯胺T溶液,室温(25℃)氧化10min后,加入高氯酸1mL(3.5mol/L),放置10min,加入对二甲基氨基苯甲醛试剂1mL,在65℃水浴显色10min,冷却后在560nm处测吸光度。以羟脯氨酸浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线,求出回归方程。
4、实验步骤:
4.1取体重100-150g的健康小鼠48只,雌雄各半,随机分为A、B和C三组。
4.2适应性饲养1周后,禁食12h,次日清晨按10mg/100g体重给A、B和C三组小鼠分别空腹灌胃进行普通阿胶、仿生消化阿胶、阿胶禽蛋,给药4h后统一进食。
4.3给药0、0.25、0.5、1、2、3、4、6、8、10、12、18、24h后,眼眶取血后,按照羟脯氨酸含量方法进行测定;
4.4根据羟脯氨酸标准曲线计算出样品中的羟脯氨酸的含量,并换算为样品生物利用度。计算公式为:
F(生物利用度)=A(进入体循环的药量)/D(服用剂量)*100%
对比结果见图5,由数据可知,相比普通阿胶和仿生消化阿胶,本发明的阿胶禽蛋中的生物利用度最高,是其他两种阿胶的2-3倍。证明了本发明的阿胶禽蛋中的活性小分子阿胶禽蛋具有分子小、高吸收的特点。
八、阿胶禽蛋改善、修复及治疗大鼠营养性贫血的实验研究
1、试验仪器和材料
实验动物:选用60只SPF级雌性SD大鼠,体重70-90g,标准饲料饲养。
实验仪器:72-1型分光光度计(上海医疗器械厂);MPF-4型荧光分光光度计(日本日立公司);7060全自动生化仪(日本日立公司);3700全自动血球计数仪(美国雅培公司)。
材料:本发明所述的阿胶禽蛋,按照实施例4的方法进行制备。
试剂:铁氤化钾,乙酸乙酯,硅藻土,氯化钠,乙酸肝素,血清铁蛋白和总铁结合力试剂盒,低铁饲料。
2、试验方法
2.1试验材料
将所有大鼠置于实验室环境适应5d后,10只给予正常大鼠基础饲料和正常饮用水,作为空白对照组,其余60只大鼠只给予低铁饲料及饮用去离子水,20d后采尾血检测血红蛋白(Hb),将Hb低于100g·L-1的大鼠作为营养性贫血模型动物。
2.2实验方法和观察指标
将选取的诊断为营养性贫血大鼠随机分成模型组(10只)、阳性对照组一(10只)、阳性对照组二(10只)、本发明低、高剂量组(各10只)。
试验期间模型组各组动物继续喂饲低铁饲料和饮用去离子水(灌胃给予10mL/kg的去离子水),阳性对照组一按照3g/kg/d的量喂食煮熟的新鲜禽蛋,阳性对照组二按照0.3g/kg/d喂食阿胶膏(本喂食量是根据人体临床效果显现设置的最佳起始安全量),本发明组低剂量组和高剂量组分别喂食1g/kg/d和3g/kg/d的阿胶禽蛋,均连续喂养30d,然后测定体重和Hb、红细胞数(RBC)、红细胞压积(HCT)。
2.3检验方法
用全自动血球计数仪测定RBC、HCT值;用全自动生化仪测定总铁结合力;用分光光度计测定Hb;用荧光分光光度计测定FEP。
2.4结果
(1)对营养性贫血大鼠Hb的影响
试验前,将模型组、阳性对照组一、阳性对照组二、本发明低剂量组、本发明高剂量组与空白对照组相比,从表中可以看出,均有显著性差异(P<0.01);可见,当只给予低铁饲料及饮用去离子水这些食材喂食一段时间后,大鼠出现了营养性贫血症状。
然后对这些动物分别采取不同的喂食方式后,出现了差异性,从表中可以看出,阳性对照组一与模型组相比,虽然Hb值有提高,但提高不明显,差异不显著,也就是说单纯喂食禽蛋对其Hb升高效果不显著;但是本发明2个剂量组和阳性对照组二的Hb值均高于模型组,有显著性差异(P<0.01),表明本发明可显著升高大鼠Hb值。并且本发明高剂量组与阳性对照组二在试验后差异不显著,可以得出本发明的阿胶禽蛋能够起到与阿胶膏相当的补血作用,详见表4。
表4对营养性贫血大鼠Hb的影响
组别 | <![CDATA[试验前(Hb/g·L<sup>-1</sup>)]]> | <![CDATA[试验后(Hb/g·L<sup>-1</sup>)]]> |
空白对照组 | 128.69±8.41 | 132.10±14.24 |
模型组 | 83.15±6.59# | 81.82±12.62 |
阳性对照组一 | 83.29±5.10# | 90.56±13.15 |
阳性对照组二 | 83.26±5.72# | 144.42±18.23* |
本发明低剂量组 | 83.23±5.99# | 135.62±20.13* |
本发明高剂量组 | 83.22±6.32# | 148.42±16.23* |
注:与模型组比较:*P<0.01;与空白对照组比较:#P<0.01。
(2)对营养性贫血大鼠RBC、HCT的影响
本发明2个剂量组和阳性对照组二的RBC升高,HCT升高,与模型组比较均有显著性差异(P<0.01)。阳性对照组一与模型组比较差异不显著,此外,本发明高剂量组RBC和HCT总数的升高均高于阳性对照组一,并且与阳性对照组二相当,说明阿胶禽蛋和仅使用禽蛋相比RBC和HCT总数的升高效果显著,并且效果与单纯服用阿胶效果相当,详见表5。
表5对营养性贫血大鼠RBC、HTC值的影响
注:与模型组比较:*P<0.01。
从以上可以得出,本发明的阿胶禽蛋可以有效的改善大鼠营养性贫血。
九、阿胶禽蛋改善、修复及治疗大鼠失血性贫血的实验研究
失血性贫血小鼠模型建立:取健康大鼠70只,10只大鼠作为正常对照,其余60只每隔2天用等长度毛细管由内眦静脉放血8滴,共4次。8天后由内眦静脉取血测血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC),大鼠Hb由正常小鼠的128.42±6.62g/L下降至89.61±12.11g/L左右,同时动物出现精神萎靡,皮毛蓬松,不活跃等症状,证明模型已建成。
将选取的诊断为失血性贫血大鼠随机分成模型组(10只)、阳性对照组一(10只)、阳性对照组二(10只)、本发明低、高剂量组(各10只)。
试验期间模型组大鼠继续按照正常大鼠的饲料继续饲喂,阳性对照组一按照3g/kg/d的量喂食煮熟的新鲜禽蛋,阳性对照组二按照0.3g/kg/d喂食阿胶膏(本喂食量是根据人体临床效果显现设置的最佳起始安全量),本发明组低剂量组和高剂量组分别喂食1g/kg/d和3g/kg/d的阿胶禽蛋,均连续喂养30d,然后测定Hb、红细胞数(RBC)、红细胞压积(HCT)。
试验前,将模型组、阳性对照组一、阳性对照组二、本发明低剂量组、本发明高剂量组与空白对照组相比,从表中可以看出,均有显著性差异(P<0.01);可见,当放血一段时间后,大鼠出现了失血性贫血症状。对这些大鼠分别采取不同的喂食方式后,出现了差异性,从表中可以看出,阳性对照组一与模型组相比,虽然Hb值有提高,但提高不明显,差异不显著,也就是说单纯喂食禽蛋对其失血大鼠的Hb升高效果不显著;但是本发明2个剂量组和阳性对照组二的Hb值均高于模型组,有显著性差异(P<0.01),表明本发明可显著升高失血大鼠Hb值。并且本发明高剂量组与阳性对照组二在试验后差异不显著,可以得出本发明的阿胶禽蛋能够起到与阿胶膏相当的补血作用,详见表6。
表6对失血性贫血大鼠Hb的影响
注:与空白对照组比较:*P<0.01;与模型组比较:#P<0.01。
由表6可以看出,缺铁性贫血症的临床综合疗效为97%。
(2)对失血性贫血大鼠RBC、HCT的影响
本发明2个剂量组和阳性对照组二的RBC升高,HCT升高,与模型组比较均有显著性差异(P<0.01)。阳性对照组一与模型组比较,差异不显著,此外,本发明高剂量组RBC和HCT总数的升高均高于阳性对照组一,并且与阳性对照组二相当,说明阿胶禽蛋和仅仅使用禽蛋相比RBC和HCT总数的升高效果显著,并且和单纯服用阿胶膏效果相当,详见表7。
表7对失血性贫血大鼠RBC、HTC值的影响
组别 | <![CDATA[RBC/10<sup>12</sup>·L<sup>-1</sup>]]> | HCT/% |
空白对照组 | 7.35±0.44 | 66.85±5.89 |
模型组 | 5.28±0.46 | 43.56±6.01 |
阳性对照组一 | 5.40±0.67 | 56.19±8.62 |
阳性对照组二 | 8.88±0.92* | 77.50±8.35* |
本发明低剂量组 | 8.02±0.46* | 70.65±6.12* |
本发明高剂量组 | 8.98±0.68* | 76.90±8.45* |
注:与模型组比较:*P<0.01。
从以上可以得出,本发明的阿胶禽蛋可以有效的改善大鼠失血性贫血。
十、阿胶禽蛋对缺铁性贫血症改善、修复及治疗的临床实例
在医院血液科选取缺铁性贫血症患者60例,进行试食验证。60名试食人群中年龄为1-65岁,平均年龄为32.6岁。诊断标准是根据1986年6月全国虚证及老年病学术研究会议制定的虚证辨证参考标准及卫生部药政局制定的妇产科药物临床研究指导原则和血液病药物临床研究指导原则进行。服用方法是每次60g,早中晚各服一次,20天为一阶段,连服三个阶段。试食前后按症状主诉、被动问出持续或间断出现及轻重不同程度按3、2、1、0四级记分法分别记录,最后计算出各项症状治疗前后的积分值进行对比分析,判断疗效,同时对每单项症状治疗前后改善情况进行个别分析,找出每项症状的疗效特点。其中实验室检查有血常规检测、血清铁检测、脑功能检测、闭目单腿站立时检测、拉力测试、握力测试等。试食期间,详细观察各项指标,认真填写观察表。症状变化的记录于试食前、试食20天和试食后各观察记录一次,共三次。其余各项客观指标于试食前后各检查一次,共两次。
缺铁性贫血症疗效诊断标准分别有;血常规检测,其中男性血红蛋白低于120g/L,女性血红蛋白低于110g/L;红细胞形态呈小细胞低血色素性贫血;血清铁检测标准是低于10.5mol/L以下;另排除其他原因引起的贫血。中医辨证有本试验中缺铁性贫血以气血虚为主,占86.6%。
缺铁性贫血临床疗效综合判定分别有:临床治愈、显效、有效及无效。临床治愈:临床症状及体征消失、实验室指标达正常范围,血红蛋白男性达120g/L以上,女性达110g/L以上。显效是治疗后症状消失或治疗后症状积分值≧2/3治疗前症状积分值,显效标准是血红蛋白增加30g/L以上;血清铁增加5mol/L以上,血红蛋白治疗后较治疗前增加30g/L以上。有效是治疗后症状积分值下降≥1/3但<2/3治疗前积分值,有效标准是血红蛋白增加不足30g/L,但达150g/L以上,血清铁增加2mol/L以上,血红蛋白治疗后较治疗前增15-29g/L。无效是治疗后症状积分值下降<1/3治疗前积分值或无变化,血红蛋白治疗后增加少于15g/L,试食两个疗程后,上述指标无改善或未达有效标准者。缺铁性贫血症试食后疗效见表8。
表8缺铁性贫血症试食后疗效
缺铁性贫血症患者试食后各单项症状疗效见表9。
表9缺铁性贫血症患者试食后各项症状疗效
从表9可以看出:与缺铁性贫血症状有关的主要症状如头晕、眼花、耳鸣、嗜睡、食欲减退、呼吸急促、心跳加速、疲倦乏力、腿腰酸软、眼花心悸、性功能衰退、眼睑内粘膜等变白的有效率均在95%以上。
随机选取缺铁性贫血症30例患者观察试食前后脑功能方面的变化见表10。
表10缺铁性贫血症30例患者试食前后脑功能的变化
n=30 | 提力kg | 复杂动作反应时间(秒) | 闭目单眼站立(秒) | 握力kg |
试食前 | 33.82±5.05 | 26.01±4.84 | 4.71±4.23 | 32.01±8.82 |
试食后 | 40.24±8.28 | 16.07±4.77 | 10.21±5.49 | 41.19±9.65 |
P | <0.001 | <0.001 | <0.001 | <0.001 |
由表10可以看出试食后脑功能变化差异显著(P<0.01-0.001),四项指标均有明显改善,提示有明显改善脑功能的作用。
随机选取缺铁性贫血症状患者50例,观察试食前后血红蛋白、红细胞检测变化见表11。
表11缺铁性贫血症状患者试食前后血红蛋白、红细胞检测变化
n=50 | 血红蛋白 | 红细胞检测 |
试食前 | 83.01±6.89 | 3.01±0.29 |
试食后 | 107.3±10.97 | 3.98±0.34 |
P | <0.001 | <0.001 |
由表11可知试食前后血清铁水平有明显升高,经统计学处理差异显著(P<0.001)。
缺铁性贫血症状60例患者试食后临床综合疗效见表12。
表12缺铁性贫血症状60例患者试食后临床综合疗效
综上试验结果,本发明阿胶禽蛋对缺铁性贫血具有良好的治疗作用,总有效率为97%;临床应用过程中未发现毒副作用。
十一、阿胶禽蛋对孕产妇多种病症改善、修复及治疗的临床实例
在妇幼保健医院的产科选取100名孕妇进行试食调研,总用时间为期1年,每名孕妇试食时间为1个月。试食孕妇的标准为妊娠期间出现失眠多梦、易醒、醒后心中烦乱不安、面色萎黄、时有头晕、舌淡红、苔薄白、脉玄细、恶心欲吐、轻微呕吐、食欲减退、神倦乏力、轻度心悸气短,不原意服用中药汤剂。试验时,对该人群进行连续观察,记录症状及变化。100名孕妇中年龄在20岁~40岁,平均年龄30.2岁,妊娠时间2~8个月。试验之前,对该人群随机分为两组,实验组及对照组,实验组服用阿胶禽蛋,对照组服用其它药品。使用方法为:每日服用3次,饭后服用,每次60g。每天用量为180g;以一个月为一疗程。疗效情况判定标准:治愈:服用本品一个疗程,血色素≥12,不适症状消失,夜眠安,心烦除,力气增,纳食可,精力及体力明显增强;有效:服用本品一个疗程,血色素含量≥12,不适症状减轻或部分消失,精力及体力增强;无效:服用本品一个疗程,不适症状无变化。结果如表13所示。
表13阿胶禽蛋对孕产妇人群治疗效果对照表
实验组 | 对照组 | |
例数 | 50 | 50 |
年龄(岁) | 20-40 | 20-40 |
临床治愈例数 | 40 | 30 |
有效例数 | 48 | 38 |
无效例数 | 2 | 12 |
总有效率 | 96% | 76% |
治疗效果:治愈40例(80%),有效48例(96%),无效2例(4%),总有效率96%。效果明显优于对照组。
十二、阿胶禽蛋对更年期综合症改善、修复及治疗的临床实例
在医院内分泌科与中医科选取更年期综合症60例,进行试食验证。60名试食人群中年龄为45-65岁,平均年龄为46岁。诊断标准是根据1986年6月全国虚证及老年病学术研究会议制定的虚证辨证参考标准及卫生部药政局制定的妇产科药物临床研究指导原则和血液病药物临床研究指导原则进行。服用方法是每次60g,早中晚各服一次,20天为一阶段,连服三个阶段。试食前后按症状主诉、被动问出持续或间断出现及轻重不同程度按3、2、1、0四级记分法分别记录,最后计算出各项症状治疗前后的积分值进行对比分析,判断疗效,同时对每单项症状治疗前后改善情况进行个别分析,找出每项症状的疗效特点。其中实验室检查有血常规检测、性激素检测、脑功能检测、闭目单腿站立时检测、拉力测试、握力测试等。试食期间,详细观察各项指标,认真填写观察表。症状变化的记录于试食前、试食20天和试食后各观察记录一次,共三次。其余各项客观指标于试食前后各检查一次,共两次。
更年期综合症症状疗效判断标准与方法分为显效、有效及无效。显效是治疗后症状消失或治疗后症状积分值≥2/3治疗前症状积分值。有效是治疗后症状积分值下降≧1/3但<2/3治疗前积分值。无效是治疗后症状积分值下降<1/3治疗前积分值或无变化。除此之外还有拉力、性激素变化、脑功能变化、握力以及其他如血常规、尿常规、肝功、心电图等症状疗效判断方法。
更年期综合症临床疗效综合判定标准与方法有临床治愈、显效、有效及无效。临床治愈是临床症状及体征消失、实验室指标达正常范围。显效是症状变化达到显效标准。有效是症状变化达到有效标准。无效是试食两个疗程后,上述指标无改善或未达有效标准者。更年期综合症试食后症状疗效见表14。
表14更年期综合症试食后症状疗效
更年期综合症患者试食后各单项症状疗效见表15。
表15更年期综合症患者试食后各项症状疗效
从表15可以看出:与更年期综合症有关的主要症状如疲倦乏力、腿腰酸软、目眩头晕、眼花心悸、阳痿早泄、性功能衰退、月经紊乱、虚热、多汗、大便干燥、苔滑少津、脉细弱、虚风内动、心烦不眠、血虚眩晕等的有效率均在95%以上。
随机选取更年期综合症30例患者,观察试食前后脑功能方面的变化见表16。
表16更年期综合症30例患者试食前后脑功能方面的变化
n=30 | 提力kg | 复杂动作反应时间(秒) | 闭目单眼站立(秒) | 握力kg |
试食前 | 32.82±5.01 | 25.1±4.93 | 4.66±3.16 | 32.00±8.99 |
试食后 | 39.17±8.36 | 15.8±4.88 | 9.41±4.61 | 40.00±7.90 |
P | <0.001 | <0.001 | <0.001 | <0.001 |
由表16可以看出试食后脑功能变化差异显著(P<0.01-0.001),四项指标均有明显改善,提示有明显改善脑功能的作用。
随机选取更年期综合症患者50例,观察试食前后性激素变化见表17。
表17更年期综合症50例患者试食前后性激素水平变化
n=50 | 雌二醇pg/mLE2 | 睾酮Tng/dL |
试食前 | 103.40±51.07 | 32.20±16.83 |
试食后 | 170.61±59.99 | 45.01±15.60 |
P | <0.001 | <0.05 |
由表17可以看出试食前与试食后性激素水平对比,经统计学处理,差异显著(P<0.01、<0.05)提示该阿胶禽蛋有调节性激素的功能。
更年期综合症60例患者试食后临床综合疗效见表18。
表18更年期综合症60例患者试食后临床综合疗效
由表18可以看出,更年期综合症的临床综合疗效为97%。
综上试验结果,本发明阿胶禽蛋对更年期综合症具有良好的治疗作用,总有效率为97%,在临床应用过程中未发现毒副作用。
十三、阿胶禽蛋对亚健康状态人群改善、修复及治疗的临床实例
在护理医院的康复科选取160名亚健康状态人进行试食调研,总用时间为期2年,每名患者试食时间为1个月。亚健康状态人群主要表现为不明原因或排除疾病原因的体力疲劳、虚弱、周身不适、性功能下降和月经周期紊乱、不明原因的脑力疲劳、情感障碍、思维紊乱、恐慌、焦虑、自卑以及神经质、冷漠、孤独、轻率、自杀念头。不明原因的浑身无力、容易疲倦、头脑不清爽、思想涣散、头痛、面部疼痛、眼睛疲劳、视力下降、鼻塞眩晕、起立时眼前发黑、耳鸣、咽喉异物感、胸闷不适、颈肩僵硬、早晨起床有不快感。不明原因的睡眠不良、手足发凉、手掌发粘、便秘、心悸气短、手足麻木、容易晕倒、坐立不安、心烦意乱。试食患者的标准为症状改善、精神状态好转、体力增强。试验时,对该人群进行连续观察,记录症状及变化。160名试食人群中年龄为16-90岁,平均年龄为48岁。试验之前,对该人群随机分为两组,实验组及对照组,实验组服用阿胶禽蛋,每日服用3次,饭中服用每次60g。每天用量为180g;以一个月为一疗程。对照组服用其它药品。实验以问诊方式进行,主要以人群的自述为准,问答认为有某方面的改善为有效,无改善为无效;以30天后的复诊结果为准,服用期间自感症状改善、精神状态好转及其体力增强变化如表19所示。
表19服用阿胶禽蛋亚健康状态人群治疗效果对照表
服用10天,30%以上的感到有所好转,不适症状改善或消失,精神、体力增强;服用20天,60%以上的感到有所好转,不适症状改善或消失,精神、体力增强;服用30天,97%以上的感到有所好转,不适症状改善或消失,精神、体力增强。效果明显优于对照组。
虽然,上文中已经用一般性说明及具体实施例对本发明作了详尽的描述,但在本发明基础上,可以对之作一些修改或改进,这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此,在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进,均属于本发明要求保护的范围。
Claims (5)
1.一种阿胶禽蛋的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括如下步骤:
(1)把选取的新鲜禽蛋,清洗、蒸煮、去皮、风干之后,加水与稀释到15%-75%的阿胶原液以文火熬制2-3h,再浸渍2-3h,得到阿胶禽蛋A;禽蛋包括鸡蛋、鸭蛋、鹅蛋、鸽蛋、鹌鹑蛋;
(2)将得到的阿胶禽蛋A放入盛有被稀释到15%-75%浓度的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为20-45℃、压力120-180kPa,高压腌制5-20min后,恢复常压腌制5-20min;取出放到阴凉处,风干1-6h后,得到阿胶禽蛋B;
所述阿胶原液的制备方法为:
①将处理完毕以及洗净的驴皮,加入热水掇皮,掇皮结束后用温度大于一百摄氏度的水,熬胶120h,当胶水浓度达到大于4%时放出第一道稀胶原液,然后再向锅内加入热水,继续在大于一百摄氏度的情况下提取120h,这样依次进行12次,直至将原料中的胶原物质全部提取干净为止,得提取液;
②用离心分离法对提取液进行初步澄清处理,然后转入夹层锅中继续浓缩至浓度10%后,进行提沫除杂;然后再加热至沸腾,直至蒸发过程无法进行为止;
③然后再置入浓缩锅内,通入蒸汽,徐徐蒸发,至浓度为50%后,向锅内加入胶液体积等同量的生水,再徐徐蒸发,待胶液表面上浮出的浮沫杂质聚于锅中心时,将浮沫提出;如此反复操作,提至胶液表面泛起黄细沫为止,得到阿胶原液;
其中,驴皮处理和洗净的方法为:按照驴皮的质量标准,将皮料进行分类整理,并挑拣出其中的杂质;把挑拣合格的驴皮进行计量,称重,按投料量将准确称重的驴皮投入泡皮池内;向投有驴皮的泡皮池中加入水,每天换水1~2次,直到皮泡透;然后置于刮毛架上,用刮毛刀将驴皮上的毛刮掉;再将泡透去毛的驴皮置于切皮架上,将皮料切成边长均等的方块,放进洗皮池中,加水洗涤至驴皮洗净为止,最后投入洁净的掇皮容器内,加入浓度为1%-10%的碱溶液中,通入蒸汽加热,至驴皮打卷时,放出碱溶液,继续加水,直至驴皮洁净为止,得到洁净的驴皮;
(3)将得到的阿胶禽蛋B放到盛有被稀释到20%-80%的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为20-45℃、压力120-200kPa,高压腌制5-20min后,恢复常压腌制5-20min,取出放到阴凉处,风干1-6h后,得到阿胶禽蛋C;
(4)将得到的阿胶禽蛋C放到盛有被稀释到30%-70%的阿胶原液的压力容器中腌制,密封压力容器,设置温度为30-45℃、压力140-200kPa,高压腌制5-20min后,恢复常压腌制5-20min,取出放到阴凉处,风干1-6h后,得到阿胶禽蛋D;
(5)将得到的阿胶禽蛋D,放在高压灭菌釜中保持110-130℃灭菌40-60min,再真空包装即得。
2.根据权利要求1所述的阿胶禽蛋的制备方法,其特征在于,所述离心分离法采用叠片式离心机进行。
3.根据权利要求2所述的阿胶禽蛋的制备方法,其特征在于,所述叠片式离心机由能够高速旋转的不锈钢碟片组成,阿胶原液从中央加入,由碟片中几个圆孔流到每层碟片之间,受离心力的作用,油脂和沉淀物很快粘在碟片表面而与胶液分开,胶液则从转钵盖内四周向上从中心流出。
4.采用权利要求1~3中任一项所述的方法制备获得的阿胶禽蛋。
5.权利要求4所述的阿胶禽蛋在制备保健食品中的应用。
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