CN111201244A - 特异性结合到水通道蛋白3(aqp3)的细胞外域的抗aqp3单克隆抗体及其用途 - Google Patents

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Abstract

本发明的一个主题在于提供一种特异性识别水通道蛋白3(AQP3)的细胞外域的抗AQP3抗体，所述水通道蛋白3(AQP3)是一种水通道蛋白。通过选择特异性结合到做为AQP3细胞外域中一种的环C中包含的寡肽的单克隆抗体，提供了本发明中期望的抗AQP3抗体。本发明的抗AQP3单克隆抗体可以从细胞外部直接结合到细胞膜中存在的AQP3。此外，由于本发明的抗AQP3单克隆抗体可以具有抑制活性，因此可以遏制AQP3所携带的渗透低分子量分子等的功能。

Description

特异性结合到水通道蛋白3(AQP3)的细胞外域的抗AQP3单克 隆抗体及其用途
技术领域
本发明涉及一种特异性识别水通道蛋白3(AQP3)的细胞外域的抗AQP3抗体，该水通道蛋白3是一种水通道蛋白。本发明还涉及含有本发明的抗AQP3抗体的组合物以及用于检测AQP3的试剂、用于鉴别和分离AQP3表达细胞的试剂和用于测量AQP3的试剂，这些物质各自含有本发明的抗AQP3抗体。本发明还涉及一种抗AQP3单克隆抗体(抑制性抗AQP3mAb)，该抗AQP3单克隆抗体特异性结合到AQP3的细胞外域，并且对AQP3的通道功能等具有抑制活性。本发明还涉及含有本发明的抑制性抗AQP3 mAb的组合物、含有本发明的抑制性抗AQP3 mAb的AQP3抑制剂以及含有本发明的抑制性抗AQP3 mAb的药物组合物。本发明还涉及一种通过使用本发明的抗AQP3抗体或用于检测AQP3的试剂来检测AQP3的方法，通过使用本发明的抗AQP3抗体或用于鉴别和分离AQP3的试剂来分离和纯化AQP3表达细胞的方法以及通过使用本发明的抗AQP3抗体或用于检测AQP3的试剂来测量AQP3的方法。本发明还涉及通过使用本发明的抑制性抗AQP3 mAb、含有抑制性抗AQP3 mAb的组合物或AQP3抑制剂来抑制AQP3的功能(通道功能等)的方法，和通过使用本发明的抑制性抗AQP3 mAb、含有抑制性抗AQP3 mAb的组合物或AQP3抑制剂来抑制低分子量物质(水、甘油、过氧化氢等)跨生物膜运输的方法。本发明仍还涉及通过使用本发明的抑制性抗AQP3 mAb、含有抑制性抗AQP3mAb的组合物或含有抑制性抗AQP3 mAb的药物组合物来预防/治疗AQP3相关病症的方法。
背景技术
生物膜对水分子具有低渗透性，因为其由脂质双层构成。由于此原因，当期望快速且大量地跨生物膜运输(渗透)水分子时，需要由膜蛋白组成的水通道。做为水通道的水通道蛋白(AQP)是一种膜蛋白，该膜蛋白具有仅允许水分子通过的细孔(小孔)，并且由PeterAgre团队在1992年从红血球膜中发现。从那时起，已经在各种细菌、动物和植物中发现水通道蛋白，并且已知水通道蛋白是生物系统中普遍存在的水通道。还证实，甚至在一种生物物种中存在多种AQP分子类型(同种型)。例如，在人中证实了从AQP0至AQP12的13种水通道蛋白分子类型。另外，识别出了分子类型之间的功能区分，如允许水分子选择性通过的分子类型(AQP1等)和允许低分子量物质诸如水分子、甘油或过氧化氢通过的分子类型(AQP3等)。清晰地显示的是，13种AQP分子类型在多个器官中表现出各种表达模式，并且在如经常发生水运输的肾脏的器官中，识别出了多种分子类型的水通道蛋白在一个器官中的表达。
已经逐渐显而易见的是，水通道蛋白的表达和/或功能异常与某些病症有关。例如，已知AQP0缺乏可能引起先天性白内障。已知AQP2的表达/功能降低与尿崩症有关，并且另一方面，提出AQP2的过度活性与怀孕相关的浮肿、高血压和充血性心脏衰竭有关。在做为脱髓鞘病症的视神经脊髓炎的情况下，已知抗AQP4自身抗体参与病理学疾患的发生。还报道，AQP5的突变与掌跖角化症之间存在关系(非专利文献1)。
水通道蛋白是一种穿越细胞膜六次的膜蛋白，并且具有六个跨膜域和五个连接跨膜域的环(环A至环E)。在细胞膜中存在的AQP中的AQP多肽中，N末端区、环B、环D和C末端区中的每一个均存在于细胞质侧，而环A、环C和环E中的每一个均存在于细胞外侧(图1)。在所有AQP分子类型中通常会发现此种六跨膜结构。
尽管水通道蛋白的一个分子具有一个通道途径，但是水通道蛋白做为多聚体(同源四聚体)存在于生物膜中。另外，水通道蛋白负责通过通道途径被动运输低分子量分子如水分子、甘油、过氧化氢、二氧化碳、氨和尿素的功能。
尽管已经对每种分子类型的水通道蛋白的表达特征或功能进行了各种分析，但尚未进行充分的阐明。做为没有充分阐明的一个原因，可以提及尚未获得具有鉴别每种分子类型的足够特性的抗水通道蛋白抗体。目前，有关于获得抗AQP抗体的若干报道，并且也有商业上提供的抗AQP抗体。然而，这些抗体中的大多数是多克隆抗体，并且它们具有做为表位的AQP的细胞内域。使用多克隆抗体存在如下许多情况，其中特异性鉴别特性不足，并且还存在不能以高精度进行检测或测量的局限。此外，使用多克隆抗体实际上不可能进行AQP表达细胞的分离和纯化。由于相关领域的大多数抗AQP抗体是识别细胞内存在的表位的抗体，因此在进行免疫组织学分析或使用活细胞的分析方面也存在局限。
尽管尚不清楚获得特异性识别水通道蛋白的细胞外域的抗体的实例非常有限的原因，但是难以将如水通道蛋白的膜蛋白做为免疫原处理，并且获得特异性识别膜蛋白的抗体通常并不容易。还考虑到，由于生物物种之间的序列保守性相对高，因此当通过使用水通道蛋白或其片段做为免疫原来免疫不同物种的动物时，难以产生所需的特异性抗体。
如其他分子类型的AQP，水通道蛋白3(AQP3)是一种位于生物膜中并且由六个各自由α螺旋构成的跨膜区(跨膜区I至VI)和五个连接这些跨膜区的环(环A至环E)形成的水通道蛋白，并且其具有N末端区和C末端区两者均存在于细胞质侧的结构。穿越生物膜的α螺旋形成细孔(小孔)，这些细孔允许水分子或其他低分子量组分(甘油和过氧化氢)通过。
已知AQP3在各种细胞中表达，这些细胞包括上皮细胞、免疫细胞和癌细胞。做为其中AQP3被大量表达的细胞之一，角化细胞是已知的。在皮肤中，AQP3被认为在皮肤的生理保湿和皮肤伤口的恢复中起重要作用，因为其促进水和甘油的运输(专利文献1)。同时，对于伴有异常角化细胞增殖的皮肤病，如牛皮癣、光化性角化病、鱼鳞病和脂溢性皮炎，提出了基于抑制AQP3产生的疗法，该疗法通过将做为调节角化细胞的细胞增殖的因子的AQP3做为标靶来进行(专利文献2)。也有涉及皮肤癌的报道。提出了如下机制，其中每种AQP3基于甘油运输活性表现出其用于保湿、肿瘤形成和皮肤屏障功能恢复的生理学活性，或基于水分子运输活性而表现出其用于恢复受伤皮肤的生理学活性(非专利文献2)。
关于AQP3与癌症之间的关系，已经报道了许多病例，而不限于皮肤癌。在结肠直肠癌、子宫颈癌、肝癌、肺癌、食道癌、肾癌、胃癌、舌癌等组织中证实了每种AQP3的表达水平均提高。此外，已提出在这些癌症中，AQP3功能与进展水平、预后、肿瘤血管生成、浸润、癌症的转移和癌组织的能量代谢等有关。由于此类原因，所以尽管已经提出AQP3(降低其表达水平)做为这些癌症的治疗标靶，但是尚未从实际试验中获得有利的结果(非专利文献1、非专利文献3和非专利文献4)。
已知大肠是其中AQP3被表达的其他主要组织之一，并且有报道指示了肠上皮中AQP3的表达水平与生理学状态之间的关系。按照该报道，显而易见的是若干轻泻剂降低了大肠中AQP3的表达水平。由吗啡引起的严重便秘与大肠中AQP3的表达水平升高相关(非专利文献5)。
为了AQP3的分析，报道了遏制渗透水分子或甘油的通道活性的化合物做为AQP3抑制剂(非专利文献6和7)。不限于AQP3抑制剂，大多数AQP抑制剂是含有如汞、铜或金的金属的金属化合物。为金属化合物意味着极有可能表现出细胞毒性。由于此类原因，尽管已认识到此AQP抑制剂的某些用处，但是其在使用培养的细胞进行的功能分析和进行测试动物施用的测试两者中的应用方面受到限制。此外，做为金属化合物的AQP抑制剂对AQP的分子类型特异性通常不高。例如，有报道指示一个问题：该AQP抑制剂不仅引起对AQP3的抑制，而且引起对其他AQP分子类型如AQP1和AQP4的功能抑制。因此，将该AQP3抑制剂做为临床应用施用于人在实践上是不可行的。
做为AQP3功能分析的另一种方法，已经报道了其中使用AQP3缺乏的细胞或AQP3敲低细胞的情况(非专利文献8)。发现在AQP3缺乏或敲低的细胞中，细胞增殖特性或细胞迁移减少，并且由炎症引起的反应(炎性反应)减少。还报道，当对AQP3敲除小鼠进行引起炎性病症如特应性皮炎、牛皮癣、哮喘等的治疗时，与其中使用野生型小鼠的对照相比，遏制了这些炎性病症的发生。还报道，在将来源于人的癌细胞移植至小鼠的实验中，可以根据通过AQP3的表达的敲低来遏制恶性肿瘤。对于敲低，报道了使用SiRNA、shRNA和miRNA的实例。然而，所有这些研究均仅处于基础阶段，并且尚未开发出用于调节AQP3表达的临床适用药剂。
为了在AQP3的分析中取得进展，以高精度检测AQP3的表达位点或表达水平是必要手段之一。基于通过使用特定探针或引物检测AQP3 mRNA的积累水平来广泛进行AQP3特异性检测。然而，根据核酸水平的分析，不可能知晓AQP3实际上以哪种分布以哪种量存在。同时，由于建立了抗AQP3抗体并且若干抗体可商购，因此还可以进行AQP3的表达分析。然而，所有可商购的抗AQP3抗体均是多克隆抗体，并且这些抗AQP3抗体不足以进行高精度分析。此外，由于所有可商购的抗AQP3抗体均是具有做为表位的AQP3的N末端部分或C末端部分存在的细胞内域的抗体，因此难通过使用活细胞的实验来检测AQP3。此外，做为多克隆抗体，这些抗AQP3抗体实际上不可能用于使用抗体来选择AQP3表达细胞。在这些情况下，非常需要用于AQP3的单克隆抗体，特别是特异性识别AQP3的细胞外域的单克隆抗体。
[引用清单]
[专利文献]
[PTL 1]
JP 2011-32191 A
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发明内容
[技术问题]
本发明的一个目的在于提供一种特异性识别水通道蛋白3(AQP3)的细胞外域的抗AQP3抗体，该水通道蛋白3(AQP3)一种水通道蛋白。
[问题的解决方案]
为了提供特异性识别AQP3的细胞外域的抗AQP3抗体，本发明的发明人对AQP3的结构，特别是构成细胞外域的环A、环C和环E的结构进行了深入研究，并且发现，根据通过使用构成环C(细胞外第二环)的一部分的片段(寡肽)做为免疫原以及使用AQP3过表达细胞进行的宿主动物免疫，可以获得特异性识别AQP3的所需抗体，可以获得来源于多个杂交瘤克隆的多种抗AQP3单克隆抗体(抗AQP3 mAb)，该抗AQP3 mAb特异性结合到AQP3多肽和上述片段，并且所述抗AQP3 mAb具有特异性抑制基于AQP3的通道功能的活性、AQP3表达细胞的增殖活性和/或AQP3表达细胞的迁移活性。根据这些发现，本发明人完成了本发明。
根据本发明，提供了特异性识别AQP3的细胞外域的抗AQP3抗体。此外，提供了含有本发明的抗AQP3抗体的组合物、用于检测AQP3的试剂、用于鉴别和分离AQP3表达细胞的试剂以及用于测量AQP3的试剂，这些物质各自含有本发明的抗AQP3抗体。此外，提供了包括这些试剂中的任一种的试剂盒。此外，提供了抗AQP3单克隆抗体(抑制性抗AQP3 mAb)，所述抗AQP3单克隆抗体特异性结合到AQP3的细胞外域，并且对AQP3的通道功能等具有抑制活性。此外，提供了含有本发明的抑制性抗AQP3 mAb的组合物、含有本发明的抑制性抗AQP3 mAb的AQP3抑制剂以及含有本发明的抑制性抗AQP3 mAb的药物组合物。此外，提供了包含本发明的抗AQP3抗体和细胞毒性剂的抗体药物缀合物(ADC)，以及包含ADC的药物组合物。此外，提供了通过使用本发明的抗AQP3抗体或用于检测AQP3的试剂来检测AQP3的方法，通过使用本发明的抗AQP3抗体或用于鉴别和分离AQP3的试剂来分离和纯化AQP3表达细胞的方法以及通过使用本发明的抗AQP3抗体或用于检测AQP3的试剂来测量AQP3的方法。此外，提供了通过使用本发明的抑制性抗AQP3 mAb、含有抑制性抗AQP3mAb的组合物或AQP3抑制剂来抑制AQP3的功能(通道功能等)的方法，和通过使用本发明的抑制性抗AQP3 mAb、含有抑制性抗AQP3 mAb的组合物或AQP3抑制剂来抑制低分子量物质(水、甘油、过氧化氢等)跨生物膜运输的方法。此外，提供了通过使用本发明的抑制性抗AQP3 mAb、含有抑制性抗AQP3 mAb的组合物或含有抑制性抗AQP3 mAb的药物组合物来预防/治疗AQP3相关病症的方法。
在一个方面，本发明提供了特异性结合到其氨基酸序列由ATYPSGHLDM(SEQ IDNO:1)组成的寡肽的抗AQP3抗体或其功能片段。
在另一个方面，本发明提供了抗AQP3抗体或其功能片段，所述抗AQP3抗体或其功能片段包含重链互补确定区1(HCDR1)、重链互补确定区2(HCRD2)、重链互补确定区3(HCDR3)、轻链互补确定区1(LCDR1)、轻链互补确定区2(LCDR2)以及轻链互补确定区3(LCDR3)，所述区域均包含选自表1A-5E中所阐述序列的氨基酸序列。表1A-5E中的CDR序列来源于实例中描述的抗体A、B、C、D、E、F、G、H、J和K的氨基酸序列。具有表1A-5E中所阐述的CDR序列的抗AQP3抗体或其功能片段的构架序列可以是例如鼠构架序列或人构架序列。
表1A-1J中所阐述的CDR序列包括由IMGT、Kabat和Chothia编号系统定义的CDR序列。参见Lefranc等人,2003,Dev Comparat Immunol 27:55-77(IMGT编号系统)；Kabat等人,1991,Sequences of Proteins of Immunological Interest,第5版,Public HealthService,National Institutes of Health,Bethesda,Md.(Kabat编号系统)；以及Al-Lazikani等人，1997,J.Mol.Biol 273:927-948(Chothia编号系统)。所述表格还包括做为IMGT、Kabat和Chothia CDR的重叠的共同区域的序列(“IMGT、Kabat和Chothia共同序列”)和做为IMGT、Kabat和Chothia CDR的重叠的组合区域的序列(“IMGT、Kabat和Chothia组合重叠序列”)。
表2A-5E中的序列是来源于表1A-1J中所阐述的CDR序列的共有序列。具体地，表2A-2E中的序列来源于抗体A、D、E和G的CDR(“组I”)；表3A-3F中的序列来源于抗体B和H的CDR(“组II”)；表4A-4E中的序列来源于抗体C和F的CDR(“组III”)；以及表5A-5E中的序列来源于抗体J和K的CDR(“组IV”)。
[表1]
Figure BDA0002443808520000101
[表2]
Figure BDA0002443808520000111
[表3]
Figure BDA0002443808520000121
[表4]
Figure BDA0002443808520000131
[表5]
Figure BDA0002443808520000141
Figure BDA0002443808520000142
[表6]
Figure BDA0002443808520000151
[表7]
Figure BDA0002443808520000161
Figure BDA0002443808520000162
[表8]
Figure BDA0002443808520000171
[表9]
Figure BDA0002443808520000181
[表10]
Figure BDA0002443808520000191
[表11]
Figure BDA0002443808520000201
[表12]
Figure BDA0002443808520000211
[表13]
Figure BDA0002443808520000221
[表14]
Figure BDA0002443808520000231
Figure BDA0002443808520000232
[表15]
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[表16]
Figure BDA0002443808520000251
Figure BDA0002443808520000252
[表17]
Figure BDA0002443808520000261
[表18]
Figure BDA0002443808520000271
Figure BDA0002443808520000272
[表19]
Figure BDA0002443808520000281
[表20]
Figure BDA0002443808520000291
[表21]
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[表22]
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[表23]
Figure BDA0002443808520000321
[表24]
Figure BDA0002443808520000331
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[表25]
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Figure BDA0002443808520000351
[表26]
Figure BDA0002443808520000352
Figure BDA0002443808520000353
[表27]
Figure BDA0002443808520000361
Figure BDA0002443808520000362
Figure BDA0002443808520000363
[表28]
Figure BDA0002443808520000371
Figure BDA0002443808520000372
Figure BDA0002443808520000373
[表29]
Figure BDA0002443808520000381
Figure BDA0002443808520000382
[表30]
Figure BDA0002443808520000391
Figure BDA0002443808520000392
[表31]
Figure BDA0002443808520000401
Figure BDA0002443808520000402
[表32]
Figure BDA0002443808520000411
Figure BDA0002443808520000412
[表33]
Figure BDA0002443808520000421
Figure BDA0002443808520000422
[表34]
Figure BDA0002443808520000431
Figure BDA0002443808520000432
[表35]
Figure BDA0002443808520000441
Figure BDA0002443808520000442
[表36]
Figure BDA0002443808520000451
在一些实施方案中，抗AQP3抗体或其功能片段包含选自表1A-1J中所阐述序列的可变重链(VH)序列和可变轻链(VL)序列。在一些实施方案中，抗AQP3抗体或功能片段包含抗体A的VH和VL。在其他实施方案中，抗AQP3抗体或功能片段包含抗体B的VH和VL。在其他实施方案中，抗AQP3抗体或功能片段包含抗体C的VH和VL。在其他实施方案中，抗AQP3抗体或功能片段包含抗体D的VH和VL。在其他实施方案中，抗AQP3抗体或功能片段包含抗体E的VH和VL。在其他实施方案中，抗AQP3抗体或功能片段包含抗体F的VH和VL。在其他实施方案中，抗AQP3抗体或功能片段包含抗体G的VH和VL。在其他实施方案中，抗AQP3抗体或功能片段包含抗体H的VH和VL。在其他实施方案中，抗AQP3抗体或功能片段包含抗体J的VH和VL。在其他实施方案中，抗AQP3抗体或功能片段包含抗体K的VH和VL。
在一些实施方案中，抗体或其功能片段可以与本发明的另一种抗AQP3抗体或其功能片段竞争用于结合到AQP3，该AQP3例如在HEK293细胞、HaCaT细胞或A431细胞表面上表达的人AQP3，或在HEK293细胞、PAM212细胞或小鼠巨噬细胞表面上表达的小鼠AQP3。可以用于测量竞争的测定包括ELISA和FACS测定。
在竞争测定的一个实例中，使其表面上表达AQP3的细胞(例如HEK293细胞)通过使微孔板与AQP3表达细胞的悬浮液接触(例如在4℃下过夜)而粘附于固体表面上，例如微孔板。洗涤该板(例如0.1％Tween 20的PBS)并封闭(例如，在伊利诺伊州罗克福德市大街区的赛默飞世尔科技公司(Thermo Scientific,Rockford,IL)的Superblock中)。将用ELISA缓冲液(例如1％BSA和0.1％Tween 20的PBS)连续稀释(例如，浓度为2.8μg/mL、8.3μg/mL或25μg/mL)的亚饱和量的生物素化第一抗体(80ng/mL)(“参考”抗体)或竞争性抗AQP3抗体(“测试”抗体)的混合物添加至孔中，并且在轻轻摇动下将板孵育1小时。参考抗体可以是本发明的抗体，例如抗体A、B、C、D、E、F、G、H、J或K。洗涤该板，将用ELISA缓冲液稀释的1μg/mL缀合有HRP的抗生蛋白链菌素添加至每个孔中，并将板孵育1小时。洗涤该板并通过添加底物(例如TMB，马里兰州奥因斯米尔斯市的Biofx Laboratories公司(Biofx Laboratories Inc.，Owings Mills，MD))来检测结合的抗体。通过添加终止缓冲液(例如Bio FX终止剂，马里兰州奥因斯米尔斯市的Biofx Laboratories公司(Biofx Laboratories Inc.，OwingsMills，MD))终止反应，并使用微孔板读取仪(例如，VERSAmax，加利福尼亚州桑尼维尔市的分子装置公司(Molecular Devices,Sunnyvale,CA))在650nm下测量吸光度。此竞争测定的变化也可以用于测试本发明的第一抗AQP3抗体与本发明的第二AQP3抗体之间的竞争。本领域中已知并且可以使用用于竞争测定的其他形式。
在上述竞争测定的各种实施方案中，在以0.08μg/mL、0.4μg/mL、2μg/mL、10μg/mL、50μg/mL、100μg/mL的浓度或以在任何前述值之间的浓度(例如以在2μg/mL至10μg/mL范围内的浓度)使用本发明的测试抗AQP3抗体时，与本发明的参考AQP3抗体竞争的测试抗AQP3抗体使参考抗AQP3抗体的结合减少至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％、至少99％或在任何前述值之间的百分比(例如，本发明的测试抗AQP3抗体使本发明的标记的参考抗AQP3抗体的结合减少50％至70％)。
在上述竞争测定的其他实施方案中，在以0.4μg/mL、2μg/mL、10μg/mL、50μg/mL、250μg/mL的浓度或以在任何前述值之间的浓度(例如以在2μg/mL至10μg/mL范围内的浓度)使用本发明的测试抗AQP3抗体时，所述测试抗AQP3抗体使标记的参考抗AQP3抗体的结合减少至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％或在任何前述值之间的百分比(例如，本发明的测试抗AQP3抗体使本发明的标记的参考抗AQP3抗体的结合减少50％至70％)。
在一些方面，本发明涉及以下(1)至(71)。
(1)一种特异性识别水通道蛋白3(AQP3)的细胞外域的抗AQP3抗体或其功能片段。
(2)如以上1中所述的抗体或其功能片段，其中所述细胞外域是环C。
(3)如以上(1)或(2)中所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段特异性结合到由在环C的C末端侧与跨膜区IV的边界相邻的十个氨基酸残基构成的寡肽。
(4)如以上(3)中所述的抗体或其功能片段，其中由在环C的所述C末端侧与所述跨膜区IV的边界相邻的十个氨基酸残基构成的所述寡肽是ATYPSGHLDM(SEQ ID NO:1)。
(5)如以上(1)至(4)中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段为小鼠抗体、大鼠抗体、兔抗体、豚鼠抗体、绵羊抗体、山羊抗体、驴抗体、鸡抗体或骆驼抗体。
(6)如以上(1)至(5)中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段是小鼠抗体。
(7)如以上(1)至(6)中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段用报道物质标记。
(8)如以上(7)中所述的抗体或其功能片段，其中所述报道物质选自由以下组成的组：放射性同位素、金属微粒、酶、荧光物质以及发光物质。
(9)如以上(1)至(8)中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段被固定在固体支持物上。
(10)如以上(9)中所述的抗体或其功能片段，其中所述固体支持物选自由以下组成的组：微孔板、玻璃板、塑料板、注射器、小瓶、柱、磁性粒子、由树脂制成的微珠、多孔膜、多孔载体和微芯片。
(11)如以上(1)至(10)中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段特异性结合到来源于人和/或小鼠的AQP3。
(12)如以上(1)至(11)中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段特异性结合到来源于人的AQP3。
(13)如以上(1)至(12)中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述抗体是IgG或IgM的免疫球蛋白分子。
(14)如以上(1)至(13)中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述抗体是IgG的免疫球蛋白分子。
(15)如以上(1)至(14)中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段对AQP3的功能具有抑制活性。
(16)如以上(15)中所述的抗体或其功能性片段，其中AQP3的所述功能是至少一种选自由以下组成的组的活性：由AQP3运输(渗透)低分子量物质的活性、促进AQP3表达细胞的细胞增殖的活性、促进AQP3表达细胞的细胞迁移的活性以及诱导AQP3相关的炎性反应和病症反应的活性。
(17)如以上(1)至(16)中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述抗体是单克隆抗体。
(18)如以上(17)中所述的抗体或其功能片段，其中重链CDR1、CDR2和CDR3分别由用SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12表示的氨基酸序列组成，并且轻链CDR1、CDR2和CDR3分别由用SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14和SEQ ID NO:15表示的氨基酸序列组成。
(19)如以上(17)或(18)中所述的抗体或其功能片段，其中重链可变区由用SEQ IDNO:4表示的氨基酸序列组成，并且轻链可变区由用SEQ ID NO:5表示的氨基酸序列组成。
(20)如以上(17)中所述的抗体或其功能片段，其中重链CDR1、CDR2和CDR3分别由用SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18表示的氨基酸序列组成，并且轻链CDR1、CDR2和CDR3分别由用SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:20和SEQ ID NO:21表示的氨基酸序列组成。
(21)如以上(17)或(20)中所述的抗体或其功能片段，其中所述重链可变区由用SEQ ID NO:6表示的氨基酸序列构成，并且所述轻链可变区由用SEQ ID NO:7表示的氨基酸序列构成。
(22)如以上(17)中所述的抗体或其功能片段，其中重链CDR1、CDR2和CDR3分别由用SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:24表示的氨基酸序列组成，并且轻链CDR1、CDR2和CDR3分别由用SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26和SEQ ID NO:27表示的氨基酸序列组成。
(23)如以上(17)或(22)中所述的抗体或其功能片段，其中所述重链可变区由用SEQ ID NO:8表示的氨基酸序列构成，并且所述轻链可变区由用SEQ ID NO:9表示的氨基酸序列构成。
(24)如以上(1)、(7)、(18)、(20)和(22)中任一项所述的单克隆抗体，其中所述抗体是具有人抗体的恒定区的嵌合抗体或人源化抗体。。
(25)一种组合物，所述组合物包含如以上(1)至(24)中任一项所述的抗体或其片段。
(26)如以上(25)中所述的组合物，所述组合物为用于检测AQP3的试剂。
(27)如以上(25)中所述的组合物，所述组合物为用于鉴别、分离或纯化AQP3表达细胞的试剂。
(28)如以上(25)或(26)中所述的组合物，所述组合物为用于测量AQP3表达量的试剂。
(29)一种试剂盒，所述试剂盒包含如以上(25)至(28)中任一项所述的组合物。
(30)一种组合物，所述组合物包含如以上9或10中所述的单克隆抗体或其片段，其中所述单克隆抗体或其功能片段对AQP3的功能具有抑制活性。
(31)如以上(30)中所述的组合物，其中AQP3的所述功能是至少一种选自由以下组成的组的活性：由AQP3运输低分子量物质的活性、促进AQP3表达细胞的细胞增殖的活性以及促进AQP3表达细胞的细胞迁移的活性。
(32)如以上(30)或(31)中所述的组合物，所述组合物为还包括药学上可接受的载体的药物组合物。
(33)如以上(31)或(32)中所述的组合物，所述组合物用于治疗癌症。
(34)如以上(33)中所述的组合物，其中所述癌症为选自由以下组成的组的癌症：结肠直肠癌、子宫颈癌、肝癌、肺癌、食道癌、肾癌、胃癌、舌癌、皮肤癌和乳腺癌。
(35)如以上(33)或(34)中所述的组合物，其中所述治疗选自由以下组成的组：遏制癌症的进展(增殖)，遏制肿瘤血管生成，遏制浸润，遏制转移，遏制癌症组织中的能量代谢以及改进患者的预后。
(36)如以上(31)或(32)中所述的组合物，所述组合物用于预防和/或治疗皮肤病症。
(37)如以上(36)中所述的组合物，其中所述皮肤病症选自由以下组成的组：牛皮癣、光化性角化病、鱼鳞病和脂溢性皮炎。
(38)如以上(31)或(32)中所述的组合物，所述组合物用于预防和/或治疗炎性病症。
(39)如以上(38)中所述的组合物，其中所述炎性病症选自由以下组成的组：特应性皮炎、牛皮癣、哮喘、慢性阻塞性肺病以及肝炎(例如急性肝炎或急性肝病)。
(40)如以上(31)或(32)中所述的组合物，所述组合物用于治疗肠蠕动异常。
(41)如以上(40)中所述的组合物，其中所述肠蠕动异常是便秘。
(42)一种检测AQP3的方法，所述方法包括使样品与如以上(1)至(24)中任一项所述的抗体或其片段或与如以上(25)或(26)中所述的组合物接触的步骤。
(43)如以上(42)中所述的方法，其中所述方法通过使用如以上(29)中所述的试剂盒进行。
(44)如以上(42)或(43)中所述的方法，其中所述样品含有细胞、活体组织、器官或单个受试者。
(45)如以上(44)中所述的方法，其中所述样品含有细胞、活体组织或器官，并且所述方法在体外进行。
(46)如以上(44)中所述的方法，所述方法在体内进行(任选地，附带条件是排除以单个人或单个动物做为样品的情况)
(47)一种用于从包含AQP3表达细胞的样品分离和/或纯化AQP3表达细胞的方法，所述方法包括使该样品与如以上(1)至(24)中任一项所述的抗体或其功能片段或与如以上(25)或(27)中所述的组合物接触的步骤。
(48)如以上(47)中所述的方法，其中所述方法通过使用如以上(29)中所述的试剂盒进行。
(49)如以上(47)或(48)中所述的方法，其中所述样品是含有活细胞的样品。
(50)一种用于测量AQP3的方法，所述方法包括使样品与如以上(1)至(24)中任一项所述的抗体或其功能片段或与如以上(25)、(26)或(28)中所述的组合物接触的步骤。
(51)如以上(46)中所述的方法，其中所述方法通过使用如以上(29)中所述的试剂盒进行。
(52)如以上(50)或(51)中所述的方法，其中所述样品含有细胞或细胞提取物。
(53)一种用于抑制AQP3的至少一种功能的方法，所述方法包括使包括AQP3的样品与如以上(1)至(24)中任一项所述的抗体或其功能片段或与如以上(25)中所述的组合物接触的步骤。
(54)如以上(53)中所述的方法，其中所述含有AQP3的样品是含有重组AQP3的重组膜，或者含有AQP3表达细胞的细胞群、活体组织、器官或个体。
(55)如以上(53)或(54)中所述的方法，其中所述接触步骤是使所述样品与如以上(17)至(24)中任一项所述的单克隆抗体或其功能片段或与含有如以上(17)至(24)中任一项所述的单克隆抗体的组合物接触的步骤。
(56)如以上(55)中所述的方法，其中如以上(17)至(24)中任一项所述的单克隆抗体或其功能片段具有抑制AQP3的至少一种功能的活性。
(57)如以上(56)中所述的方法，其中AQP3的所述功能是至少一种选自由以下组成的组的活性：由AQP3运输低分子量物质的活性、促进AQP3表达细胞的细胞增殖的活性、促进AQP3表达细胞的细胞迁移的活性以及诱导AQP3相关的炎性反应和病症反应的活性。
(58)一种用于抑制低分子量物质跨膜运输的方法，所述方法包括使具有包括AQP3的膜的样品与如以上(1)至(24)中任一项所述的抗体或其功能片段或与如以上(25)中所述的组合物接触的步骤。
(59)如以上(58)中所述的方法，其中所述含有AQP3的膜是含有重组AQP3的重组膜或AQP3表达细胞的生物膜。
(60)如以上(58)或(59)中所述的方法，其中所述接触步骤是与如以上(17)至(24)中任一项所述的单克隆抗体或其功能片段或与含有如以上(17)至(24)中任一项所述的单克隆抗体的组合物接触的步骤。
(61)如以上(60)中所述的方法，其中如以上(17)至(24)中任一项所述的单克隆抗体或其功能片段具有抑制AQP3的功能的活性。
(62)如以上(61)中所述的方法，其中AQP3的所述功能是由AQP3运输低分子量物质的活性。
(63)如以上(58)至(62)中任一项所述的方法，其中所述低分子量物质选自由水分子、甘油和过氧化氢组成的组。
(64)一种用于预防和/或治疗AQP3相关病症的方法，所述方法包括向需要治疗的受试者施用如以上(30)至(39)中任一项所述的组合物的步骤。
(65)如以上(64)中所述的方法，其中与AQP3相关的病症与AQP3的表达水平升高相关。
(66)如以上(65)中所述的方法，其中与AQP3相关的病症选自由癌症、皮肤病和炎性病症组成的组。
(67)一种改善肠蠕动异常的方法，所述方法包括向患有肠蠕动异常的受试者施用如以上(30)至(32)、(40)或(41)中所述的组合物的步骤，其中所述肠蠕动异常是便秘。
(68)如以上(31)或(32)中所述的组合物，所述组合物用于治疗与AQP3相关的病症的方法中。
(69)如以上(17)至(24)中任一项所述的单克隆抗体或其功能片段，所述单克隆抗体或其功能片段用于治疗与AQP3相关的病症的方法中。
(70)一种如以上(31)或(32)中所述的组合物的用途，所述用途用于产生供预防和/或治疗与AQP3相关的病症的药物组合物。
(71)一种如以上(17)至(24)中任一项所述的单克隆抗体或其功能片段的用途，所述用途用于产生供预防和/或治疗与AQP3相关的病症的药物组合物。
[本发明的有利作用]
使用特异性识别AQP3的细胞外域的本发明的抗AQP3抗体或其功能片段，可以进行AQP3表达细胞的检测或AQP3表达水平的测量。此外，由于本发明的抗AQP3抗体或其功能片段可以特异性结合到活细胞的细胞膜中存在的AQP3，因此可以进行含有AQP3表达细胞的组织或器官的染色或者AQP3表达细胞的分离和纯化。此外，由于在一些实施方案中，本发明的抗AQP3抗体或其功能片段不仅可以特异性识别AQP3的环C中包括的肽，而且还可以特异性结合到AQP3，因此其可以抑制AQP3的一种或多种功能。通过抑制AQP3的一种或多种功能，可以预防和/或治疗与AQP3表达水平升高相关的与AQP3相关的病症。在与AQP3相关的病症是癌症的情况下，可以遏制癌症的进展(增殖)，遏制肿瘤血管生成，遏制浸润，遏制转移，遏制癌症组织中的能量代谢，改进癌症患者的预后或前述的组合。其还可以减轻与AQP3表达水平升高相关的肠蠕动异常。
附图说明
[图1]
图1是说明水通道蛋白的分子结构的示意图。所述水通道蛋白具有从N末端至C末端六次穿越膜的跨膜结构，并且在连接在跨膜域I至VI的六个跨膜域之间的五个区域中，包括五个环(环A至环E)。在这些环中，环A、环C和环E分别存在于细胞外侧，而环B和环D分别存在于细胞内侧。N末端区和C末端区均包括在细胞内域中。附图中所示的两个NPA指示由天冬酰胺-脯氨酸-丙氨酸的三个氨基酸残基组成的NPA盒。NPA盒存在于水通道蛋白分子内，并且已知其广泛保存在生物物种中。
[图2]
图2是显示测试本发明的抗AQP3抗体与具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列的肽的结合特性的结果的示意图。左图显示了抗体C、E、H、J和阴性对照IgG抗体(IgG)的结果。右图显示抗体B、G、K、A、D和F的结果。
[图3]
图3是显示测试本发明的抗AQP3抗体与过表达AQP3的HEK293T细胞的细胞裂解物(AQP3)的结合特性的结果的示意图。将来自未过表达AQP3的HEK293T细胞的细胞裂解物用作对照(N.C.)。
[图4]
图4是显示测试本发明的抗AQP3抗体与小鼠巨噬细胞的结合特性的结果的示意图。使用抗体J，该抗体是本发明的抗AQP3抗体中一种。
[图5A]
图5A是显示测试本发明的抗AQP3抗体与小鼠上皮细胞(PAM212细胞)的结合特性的结果的示意图。使用抗体J，该抗体是本发明的抗AQP3抗体中一种。
[图5B]
图5B是显示测试抗体A、B、C、D、E、F、G、H和J与小鼠上皮细胞(PAM212细胞)的结合特性的结果的示意图。
[图5C]
图5C是显示测试抗体A、B、C、D、E、F、G、H和J与人上皮细胞(HaCaT细胞)的结合特性的结果的示意图。
[图6A]
图6A是显示测试做为本发明的抗AQP3抗体中一种的抗体G与人上皮细胞(HaCaT细胞)的结合特性的结果的示意图。
[图6B]
图6B是显示测试做为本发明的抗AQP3抗体中一种的抗体G与人上皮细胞(HaCaT细胞)的结合特性的结果的图。
[图6C]
图6C是显示测试做为本发明的抗AQP3抗体中一种的抗体J与人上皮细胞(HaCaT细胞)的结合特性的结果的示意图。
[图6D]
图6D是显示测试抗体E与过表达小鼠AQP3的HEK293细胞的结合特性的结果的示意图。
[图6E]
图6E是显示测试抗体H与过表达小鼠AQP3的HEK293细胞的结合特性的结果的示意图。
[图6F]
图6F是显示测试抗体J与过表达小鼠AQP3的HEK293细胞的结合特性的结果的示意图。
[图6G]
图6G是显示测试抗体E与过表达小鼠AQP3的HEK293细胞的结合特性的结果的示意图。
[图6H]
图6H是显示测试抗体E与过表达人AQP3的HEK293细胞的结合特性的结果的示意图。
[图7A]
图7A是显示通过使用本发明的抗AQP3抗体对AQP3表达细胞(小鼠巨噬细胞)进行免疫染色的结果的示意图。做为本发明的抗AQP3抗体，使用抗体H和抗体J。
[图7B]
图7B是显示通过使用本发明的抗AQP3抗体对AQP3表达细胞(小鼠巨噬细胞)(上图)和AQP3敲除细胞进行免疫染色的结果的示意图。做为本发明的抗AQP3抗体，使用抗体J。
[图8A]
图8A是显示通过使用小鼠上皮细胞(PAM212细胞)测试本发明的抗AQP3抗体对细胞增殖的活性的结果的示意图。做为本发明的抗AQP3抗体，使用抗体G和抗体J。
[图8B]
图8B是显示通过使用小鼠上皮细胞(PAM212细胞)测试本发明的抗AQP3抗体对细胞增殖的活性的结果的示意图。本发明的抗AQP3抗体，使用抗体J。
[图8C]
图8C是显示通过使用小鼠上皮细胞(PAM212细胞)测试本发明的抗AQP3抗体对细胞增殖的活性的结果。做为本发明的抗AQP3抗体，使用抗体A、B、C、D、E、F、G、H和J。
[图9]
图9是显示通过使用人上皮细胞(HaCaT细胞)测试本发明的抗AQP3抗体对细胞增殖的活性的结果的示意图。做为本发明的抗AQP3抗体，使用抗体G、抗体H和抗体J。
[图10]
图10是显示通过使用人上皮样癌细胞(A431细胞)测试本发明的抗AQP3抗体对细胞增殖的活性的结果的示意图。做为本发明的抗AQP3抗体，使用抗体G、抗体H和抗体J。
[图11]
图11是显示测试本发明的抗AQP3抗体对做为AQP3表达细胞的小鼠巨噬细胞中过氧化氢渗透功能的功能抑制作用的结果的示意图。做为本发明的抗AQP3抗体，使用抗体J。
[图12]
图12是显示测试本发明的抗AQP3抗体对做为AQP3表达细胞的小鼠巨噬细胞中过氧化氢渗透功能的功能抑制作用的结果的示意图。做为本发明的抗AQP3抗体，使用抗体A、B、C、D、E、F、G、H和J。
[图13]
图13是显示测试本发明的抗AQP3抗体对做为AQP3表达细胞的小鼠巨噬细胞中LPS反应性p65活化(p65磷酸化)的功能抑制作用的结果的示意图。做为本发明的抗AQP3抗体，使用抗体J。
[图14A]
图14A是显示测试本发明的抗AQP3抗体对在小鼠中用四氯化碳处理引起的急性肝病(炎性反应和病症反应)的抑制作用的结果的示意图。该测试通过以血清中的AST水平做为指标来进行。做为本发明的抗AQP3抗体，使用抗体J。
[图14B]
图14B是显示测试本发明的抗AQP3抗体对在小鼠中用四氯化碳处理引起的急性肝病(炎性反应和病症反应)的抑制作用的结果的示意图。该测试通过以血清中的ALT水平做为指标来进行。做为本发明的抗AQP3抗体，使用抗体J。
[图15A]
图15A是显示测试本发明的抗AQP3抗体对在小鼠中用四氯化碳处理引起的急性肝病(炎性反应和病症反应)的抑制作用的结果的示意图。该测试通过以来源于肝脏的RNA样品中的TNF-αmRNA表达水平做为指标来进行。做为本发明的抗AQP3抗体，使用抗体J。
[图15B]
图15B是显示测试本发明的抗AQP3抗体对在小鼠中用四氯化碳处理引起的急性肝病(炎性反应和病症反应)的抑制作用的结果的示意图。该测试通过以来源于肝脏的RNA样品中的IL-6mRNA表达水平做为指标来进行。做为本发明的抗AQP3抗体，使用抗体J。
具体实施方式
(1)特异性识别AQP3的细胞外域的抗AQP3抗体的制备
由于在AQP3中存在三个细胞外域，诸如环A、环C和环E，因此通过将这些细胞外域的至少一个AQP3片段做为免疫原，可以对宿主动物进行免疫。在人AQP3的情况下，在由全长292个氨基酸残基组成的多肽中(UniProt登录号：Q92482)，位置50至53(环A)、位置131至157(环C)和位置210至244(环E；所有位置均代表从N末端侧开始的位置)形成细胞外域中的每一个。免疫原优选是具有环C的AQP3片段。特别优选地，使用由十个氨基酸残基构成的多肽做为免疫原，该多肽是环C的C末端部分并且与跨膜域IV的边界相邻。在人和小鼠两者中，与跨膜域IV的边界相邻的环C的C末端部分均具有氨基酸序列ATYPSGHLDM(SEQ ID NO:1)。
寡肽可以通过熟知的标准方法化学合成。此外，其可以使用可商购的定制合成服务简单地获得。
关于免疫原，寡肽本身可以用于免疫，或者还可以通过使用重组膜或向膜提供含有该寡肽的多肽的重组体细胞来进行免疫。当以含有寡肽部分的跨膜蛋白的形式制备免疫原时，优选通过杆状病毒呈现法进行制备。在此情况下，可以在杆状病毒的膜表面上表达含有寡肽的多肽，并且可以通过使用杆状病毒本身做为免疫原来对宿主动物进行免疫以诱导抗体。这些免疫原可以用于单独免疫，或者可以同时使用其组合来免疫。
在一些实施方案中，用其氨基酸序列由SEQ ID NO:1的氨基酸序列组成的肽以及AQP3过表达细胞对宿主动物进行免疫。例如，AQP3过表达细胞可以是过表达AQP3的HaCaT细胞、PAM212细胞、小鼠巨噬细胞或HEK293细胞或其组合。在另一个实施方案中，AQP3过表达细胞是过表达AQP3的CHO细胞，例如在CMV启动子的控制下表达小鼠或人AQP3的CHO细胞。可以使用的示例性载体包括pCMV6-AC(Origene sc322406)(人AQP3)和pCMV6-Entry-Myc-DDK(Origene MR203989)(小鼠AQP3)。在一些实施方案中，AQP3过表达细胞包含过表达小鼠AQP3的CHO细胞与过表达人AQP3的CHO细胞的组合。
待免疫的宿主动物的优选实施例包括但不特别限于动物，如小鼠、大鼠、兔子、豚鼠、绵羊、山羊、驴、鸡和骆驼。更优选地，宿主动物是小鼠或大鼠，并且特别优选是小鼠。例如，可以参考WO 2015/179360A中所述的方法。可以通过熟知的标准方法制备含有抗AQP3抗体的抗血清。抗AQP3抗体可以是五种免疫球蛋白分子(IgG、IgM、IgA、IgD和IgE)中的任何类别。抗AQP3抗体优选是IgG或IgM，并且更优选是IgG。在IgG亚类中，IgG2具有较低的ADCC活性，并且IgG4具有较低的CDC活性。因此，当需要使用具有低细胞破坏特性的抗体时，在IgG中，优选使用亚类IgG2或IgG4的抗体。
(2)抗AQP3单克隆抗体(抗AQP3 mAb)的制备
抗AQP3 mAb可以通过将如上在(1)中所述的制备过程期间获得的抗体产生细胞与骨髓瘤细胞融合之后克隆来制备为单克隆抗体。替代地，根据基因工程方法，可以通过在大肠杆菌等中表达化学合成的抗体基因来制备该抗AQP3 mAb。用于融合抗体产生细胞与骨髓瘤细胞的方法、用于从含有融合细胞的细胞群中筛选期望的细胞的方法、用于单克隆通过筛选所选择的细胞的方法以及用于从克隆中制备mAb的方法均可以根据熟知的标准方法进行。还可以根据熟知的标准方法基于序列信息进行期望mAb的合成。如在下文给出的实施例中详细描述的那样，是本发明的抗AQP3 mAb的代表性实施例的单克隆抗体具有特别公开的重链和轻链CDR的氨基酸序列或重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列。mAb还可以制成为非分泌型重组mAb，该非分泌型重组mAb由通过从重链和轻链的每个可变区中移除信号序列获得的氨基酸序列组成。具有移除的信号序列的重组mAb可以在宿主细胞中积累，而不会从表达重组mAb的宿主细胞分泌到培养上清液中。信号序列可以根据氨基酸序列信息来预测，并且例如其可以通过使用用于预测信号序列的软件来预测。用于预测信号序列的示例性软件包括Signal P、PRORT II等。
(3)抑制性抗AQP3 mAb的制备
在抗AQP3抗体中，对AQP3的功能具有抑制活性的抗体在本文中被称为抑制性抗AQP3抗体。在单克隆抗体的情况下，其被特别地称为抑制性抗AQP3mAb。在本文中，AQP3的功能指示至少一种选自由以下组成的组的活性：由AQP3运输(渗透)低分子量物质的活性、促进AQP3表达细胞的细胞增殖的活性以及促进AQP3表达细胞的细胞迁移的活性。在本文中，低分子量物质指示至少一种选自由水分子、甘油和过氧化氢组成的组的物质。与未添加的对照相比，通过将根据足量的抗AQP3抗体向组成性表达AQP3的细胞(PAM212细胞、HaCaT细胞、A431细胞等)的细胞外添加的细胞迁移活性和/或细胞增殖活性中的至少一种的10％或更多、20％或更多或30％或更多的降低做为指标来判定抗AQP3抗体的期望抑制活性是否存在。替代地，与未添加的对照相比，通过将根据足量的抗AQP3抗体向组成性表达AQP3的细胞(小鼠巨噬细胞等)的细胞外添加的细胞的过氧化氢渗透活性的10％或更多、20％或更多或30％或更多的降低做为指标来进行判定。
(4)抗体的功能片段
只要表现出对AQP3的足够特异性和亲和力，就不一定需要本发明的抗体来维持免疫球蛋白分子的整体结构，并且其可以是抗体的功能片段(抗原结合片段)。由于抗体的抗原结合特性取决于抗体的可变部分，因此免疫球蛋白分子的恒定区部分可能不一定存在。因此，本发明的抗体的功能片段的实施例包括Fab、Fab'、F(ab')2，它们为由免疫球蛋白分子的可变部分组成的片段、通过从Fab移除VL获得的Fd、单链Fv片段(scFv)及其二聚体，即双抗体。替代地，还可以使用通过从scFv移除VL等获得的单域抗体(sdAb)，但抗体的功能片段不限于它们。
抗体的功能片段可以通过已知技术制备。例如，可以通过免疫球蛋白分子的酶处理来进行片段化。通过用木瓜蛋白酶降解免疫球蛋白分子，获得Fab。通过用胃蛋白酶降解，获得F(ab')2，并且根据F(ab')2的还原处理，获得Fab'。此外，根据基因工程技术，还可以通过经由具有足够迁移性的接头肽来将抗体的重链可变部分(VH)连接到抗体的轻链可变部分(VL)而制备scFv。
(5)用报道物质标记的抗体
根据情况，本发明的抗AQP3抗体或其功能片段在用报道物质标记的状态下使用。报道物质可以是任何种类，只要其可以在抗AQP3抗体或其功能片段维持期望功能的同时对该抗AQP3抗体或其功能片段进行标记即可。能够产生用于定量测量AQP3的存在的信号的物质是更优选的。其实施例包括放射性同位素、金属微粒、酶、荧光物质和发光物质。当将放射性同位素、荧光物质或发光物质用作报道物质时，从其产生的放射性、荧光或发光可以做为信号定量地测量。当报道物质是酶时，在施加至合适的底物之后，最终产生的颜料、颜色、来源于荧光物质或发光物质的荧光或发光可以做为信号测量。放射性同位素的实施例包括3H和125I。荧光物质的实施例包括荧光素及其衍生物(例如，FITC)、四甲基罗丹明(TAMRA)及其衍生物(例如，TRITC)、Cy3、Cy5、德克萨斯红(Texas Red)、藻红蛋白(PE)和量子点。发光物质的实施例包括鲁米诺(luminol)衍生物、吖啶衍生物、水母发光蛋白以及钌络合物。金属微粒的实施例包括金纳米粒子和由金和铂的合金构成的纳米粒子。报道酶的实施例包括辣根过氧化酶(HRP)、β-半乳糖苷酶(β-GAL)、碱性磷酸酶(ALP)、葡萄糖氧化酶(GOD)、荧光素酶和水母发光蛋白。通过使用与合适的底物组合的每种酶，可以进行基于发光法、比色法或荧光法的分析。对于定量分析，优选使用用报道物质标记的本发明的抗体或其功能片段。
(6)固定在固体支持物上的抗体
根据情况，本发明的抗AQP3抗体或其功能片段可以在将其固定在固体支持物上的状态下使用。固体支持物可以是任何物质，只要其可以在抗体或其功能片段保持维持期望活性的状态的同时固定该抗体或其功能片段即可。其优选是由对使用抗体的生物分析没有任何影响的无活性物质构成的物质。固体支持物的实施例包括微孔板、玻璃板、塑料板、注射器、小瓶、柱、磁性颗粒、由树脂制成的微珠、多孔膜、多孔载体和微芯片。微孔板、注射器、小瓶、柱和微芯片优选均由惰性树脂制成。固体支持物还可以由玻璃制成。
(7)特异性结合到来源于人和/或小鼠的AQP3的抗体
本发明的抗AQP3抗体或其功能片段结合到AQP3的细胞外域，在一些实施方案中特别是环C(第二细胞外域)。环C的氨基酸序列在生物物种中表现出高度保守性。人环C的氨基酸序列和小鼠环C的氨基酸序列(对于人和小鼠两者，从N末端侧开始的位置131至157)两者均具有如下所述的高度同源性。
人：ADNQLFVSGPNGTAGIFATYPSGHLDM(SEQ ID NO:2)
小鼠：ANNELFVSGPNGTAGIFATYPSGHLDM(SEQ ID NO:3)
由于以上原因，结合到做为细胞外域的环C的本发明的抗AQP3抗体或其功能片段非常有可能特异性结合到人AQP3和小鼠AQP3。在一些方面，本发明涉及可以通过使用由在环C的C末端侧的十个氨基酸残基构成的多肽(寡肽)做为免疫原获得的抗体。由十个氨基酸残基构成的寡肽具有由ATYPSGHLDM(SEQ ID NO:1)组成的氨基酸序列，并且人序列和小鼠序列在该部分完全匹配。由于此原因，根据本发明的实施例获得的抗AQP3抗体或其功能片段很可能不仅特异性识别人AQP3，而且特异性识别小鼠AQP3。实际上，根据实施例中所述的对单个mAb进行的测试，似乎本公开的mAb通常可以识别它们两者。此外，在一些实施方案中，本发明的抑制性抗AQP mAb及其功能片段可以抑制人AQP3和小鼠AQP3两者的AQP3功能。
在一些实施方案中，抗AQP3抗体及其功能片段不特异性结合到除AQP3之外的一种或多种人水通道蛋白，例如以下中的一种或多种：AQP0(登录号NP_036196.1)、APQ1(登录号NP_932766.1)、AQP2(登录号NP_000477.1)、AQP4(登录号NP_001641.1)、AQP5(登录号NP_001642.1)、AQP6(登录号NP_001643.2)、AQP7(登录号NP_001161.1)、AQP8(登录号NP_001160.2)、AQP9(登录号NP_066190.2)、AQP10(登录号NP_536354.2)、AQP11(登录号NP_766627.1)和AQP12(登录号NP_945349.1)。
(8)抗体分子的可变区和可变区中的互补确定区
免疫球蛋白分子是基本上由两个重链多肽和两个轻链多肽构成的杂四聚体分子。重链和轻链中的每一个均含有可变区和恒定区。抗体的重链可变区和轻链可变区由三个CDR(互补确定区)和四个FR(构架区)组成，并且FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3和FR4从氨基末端至羧基末端以该顺序排列。当通过已知技术确定抗体分子的氨基酸序列信息时，可以基于该序列信息预测可变区或恒定区的位置。此外，还可以通过已知方法类似地预测可变区中CDR1、CDR2和CDR3的序列。
(9)抗体分子的制备
本发明的代表性抗AQP3 mAb是重链可变区由用SEQ ID NO:4表示的氨基酸序列组成并且轻链可变区由用SEQ ID NO:5表示的氨基酸序列组成的mAb、重链可变区由用SEQ IDNO:6表示的氨基酸序列组成并且轻链可变区由用SEQ ID NO:7表示的氨基酸序列组成的mAb或重链可变区由用SEQ ID NO:8表示的氨基酸序列组成并且轻链可变区由用SEQ IDNO:9表示的氨基酸序列组成的mAb。
在从杂交瘤克隆抗体基因或基于抗体多肽的氨基酸序列信息人工合成抗体基因之后，通过将抗体基因引入合适的表达载体中并通过使用基因重组技术将载体引入宿主中，可以制备做为单克隆抗体的本发明的抗AQP3抗体。
在此情况下，启动子、增强子、聚腺苷酸化信号等可以合适地排列在载体中。关于载体，可以使用任何载体，只要其使用可复制的宿主细胞如细菌、酵母和动物细胞即可，并且可以根据宿主合适地使用可商购载体。可以通过用于转化宿主细胞的已知方法将表达载体引入宿主细胞中。该方法的实施例包括电穿孔法、DEAE-葡聚糖法和磷酸钙法。
宿主细胞没有特别限制，但优选使用真核细胞。其实施例包括酵母和来源于动物的培养细胞(HEK293细胞、CHO细胞、COS细胞和MEF等)。
可以通过使用通常用于蛋白质的分离和纯化方法来进行所产生抗体的纯化。例如，可以通过将亲和色谱法、其他色谱法、过滤、超滤、盐析、透析等合适地组合来合适地进行该纯化。
(10)抗体的经修饰产物
本发明的抗AQP3 mAb可以是具有以上章节或表1或表6中所述的氨基酸序列的抗体的序列修饰产物。例如，通过以重链可变区由用SEQ ID NO:4表示的氨基酸序列组成并且轻链可变区由用SEQ ID NO:5表示的氨基酸序列组成的抗体做为修饰的起始点，并且在基本上维持与AQP3的细胞外域的特异性结合特性的范围内(在维持与原始抗体的特异性结合特性基本上相等的特异性结合特性的范围内)，在重链和轻链的每个可变区内可以存在修饰。在上述每个氨基酸序列中，还可能缺失、取代、插入或添加一个或若干个，例如一个至十个，优选一个至五个，更优选一个或两个，并且甚至更优选一个氨基酸残基。此外，当通过使用如BLAST的工具进行计算时，修饰可以存在于其中存在至少85％或更多、优选90％或更多、更优选95％或更多并且特别优选97％或更多的序列同源性的范围内。然而，对于任何经修饰产物，优选未修饰CDR的氨基酸序列(使得每个CDR均具有与修饰前的抗体相同的氨基酸序列)。即，在一些实施方案中，关于具有由用SEQ ID NO:4表示的氨基酸序列组成的重链可变区的经修饰多肽，对于由SEQ ID NO:10的氨基酸序列组成的CDR1、由SEQ ID NO:11的氨基酸序列组成的CDR2和由SEQ ID NO:12的氨基酸序列组成的CDR3，不存在序列修饰。类似地，在一些实施方案中，关于具有由用SEQ ID NO:5表示的氨基酸序列组成的轻链可变区的经修饰多肽，对于由SEQ ID NO:13的氨基酸序列组成的CDR1、由SEQ ID NO:14的氨基酸序列组成的CDR2和由SEQ ID NO:15的氨基酸序列组成的CDR3，不存在序列修饰。这同样可以适用于由用SEQ ID NO:6表示的氨基酸序列组成的重链可变区的经修饰多肽、由用SEQID NO:7表示的氨基酸序列组成的轻链可变区的经修饰多肽、由用SEQ ID NO:8表示的氨基酸序列组成的重链可变区的经修饰多肽以及由用SEQ ID NO:9表示的氨基酸序列组成的轻链可变区的经修饰多肽。
众所周知，CDR序列是用于确定抗体表位的主要因子。即使对于上述序列修饰产物，本发明的抗AQP3 mAb也优选具有完全保留的CDR，当其包含在重链和轻链中时，这些CDR的存在总数为6个。因此，可以合理地预期对与修饰前的抗AQP3 mAb相同的表位具有特异性结合特性。此外，既然其结合到相同的表位，就还可以合理地预期，即使在抗AQP3 mAb是上述序列修饰产物时，其也具有抑制做为修饰前抗体的AQP3的功能的活性。
(11)嵌合抗体和人源化抗体
为了降低对人等的异源抗原性，本发明的抗AQP3 mAb可以是经人工修饰的基因重组型抗体。这些抗体的实施例包括嵌合抗体和人源化抗体。这些经修饰抗体可以通过已知方法制备。
嵌合抗体可以通过将编码本发明的抗AQP3 mAb的可变区(V)的DNA连接到编码人抗体的恒定区(C)的DNA、将所得构建体引入表达载体中并将载体引入宿主中来制备。
人源化抗体可以通过将除人之外的哺乳动物的抗体的CDR，诸如小鼠抗体的CDR移植至人受体抗体(CDR移植)来获得。其产生可以通过应用用于基因重组的常规技术合适地进行。例如，可以通过使用若干寡核苷酸做为引物，通过PCR法来合成设计来编码用于连接小鼠抗AQP3 mAb的每个CDR与人抗体的构架区的氨基酸序列的DNA序列，已经制备了这些寡核苷酸，使得它们在CDR和FR两者的末端区处具有重叠区。例如，可以通过WO 98/13388 A中所述的方法进行。人抗体的可变区的FR可以从公开的DNA数据库等获得。
关于嵌合抗体和人源化抗体的恒定区，可以使用人抗体的恒定区。例如，将Cγ1、Cγ2、Cγ3和Cγ4优选用于重链，而将Cκ和Cλ优选用于轻链。
由于嵌合抗体和人源化抗体在人体内的异源抗原性降低，因此它们在人的活体内具有长半衰期，并且可用作本发明的药物组合物(用于预防和/或治疗的药剂)的有效成分。抗体人源化的方法是本领域中已知的。参见例如Riechmann等人,1988,Nature 332:323-7；Queen等人的美国专利号：5,530,101、5,585,089、5,693,761、5,693,762和6,180,370；EP239400；PCT公布WO 91/09967；美国专利号5,225,539；EP592106；EP519596；Padlan,1991,Mol.Immunol.,28:489-498；Studnicka等人,1994,Prot.Eng.7:805-814；Roguska等人,1994,Proc.Natl.Acad.Sci.91:969-973；以及美国专利号5,565,332
在一些实施方案中，抗AQP3抗体及其功能片段可以是其序列已经修饰以相对于相应野生型序列改变至少一种恒定区介导的生物学效应子功能的抗体或抗体片段。
例如，在一些实施方案中，可以修饰本发明的抗AQP3抗体以相对于未修饰的抗体降低至少一种恒定区介导的生物学效应子功能，例如降低与Fc受体(FcγR)的结合。可以通过使在FcγR相互作用所需的特定区域处的抗体的免疫球蛋白恒定区区段突变来降低FcγR结合(参见例如Canffeld和Morrison，1991，J.Exp.Med.173:1483-1491；和Lund等人，1991，J.Immunol.147:2657-2662)。抗体的FcγR结合能力的降低还可降低依赖于FcγR相互作用的其他效应子功能，诸如调理作用、吞噬作用和抗原依赖性细胞毒性(“ADCC”)。
在其他实施方案中，可以修饰本发明的抗AQP3抗体以相对于未修饰的抗体获得或改进至少一种恒定区介导的生物学效应子功能，例如以便提高FcγR相互作用(参见例如US2006/0134709)。例如，本发明的抗AQP3抗体可以具有以比相应野生型恒定区大的亲和力结合FcγRIIA、FcγRJIB和/或FcγRIIIA的恒定区。
因此，本发明的抗体可以具有引起调理作用、吞噬作用或ADCC增加或减少的生物学活性的变化。此类变化在本领域中是已知的。例如，美国专利号5,834,597中描述了降低ADCC活性的抗体中的修饰。示例性的ADCC降低变体对应于美国专利号5,834,597的图4中所示的“突变体3”，其中残基236缺失并且残基234、235和237(使用EU编号)被丙氨酸取代。
(12)用于检测AQP3的试剂
从本发明的抗AQP3抗体或其功能片段具有特异性结合到AQP3的能力的观点来看，可以提供含有该抗体或其功能片段的组合物。此组合物可以做为用于检测AQP3的试剂提供。在本文中，待被包含在试剂中的抗AQP3抗体或其功能片段还可以是如以上(5)中所述的用报道物质标记的抗体或其功能片段。当用报道物质标记时，无需使用二级抗体即可进行检测。做为另一个实施方案，待被包含在试剂中的抗体或其功能片段可以结合或吸附在固体支持物诸如磁性微粒上。在本发明的抗AQP3抗体或其功能片段做为溶液包含在试剂中的情况下，其浓度可以根据试剂的目的或使用方式合适地设定。例如，可以将其设定在1ng/mL至10mg/mL、100ng/mL至1mg/mL或1μg/mL至300μg/mL范围内。此外，尽管试剂本身可以用作储备溶液，但是根据目的，其还可以以稀释状态(10倍至10,000倍)使用。关于溶剂，可以合适地使用水或缓冲溶液。
(13)用于鉴别、分离和纯化AQP3表达细胞的试剂
本发明的抗AQP3抗体或其功能片段特异性识别并结合到AQP3的细胞外域，在一些实施方案中更具体地为环C内的表位。从该抗体或其功能片段可以结合到AQP3分子的细胞外域的观点来看，其还可以用于其中将活细胞用作样品的系统。即使对于进行免疫组织学染色的情况，也不需要进行组织或细胞的固定或透析。因此，不管待做为样品的细胞的状态如何，本发明的抗AQP3抗体或其功能片段均可以用于鉴别AQP3表达细胞。特别地，当将分离的活细胞如血球细胞用作样品时，本发明的抗AQP3抗体或其功能片段可以根据与合适的仪器如流式细胞仪组合而用于分离或纯化AQP3表达细胞。当其用于AQP3表达细胞的分离或纯化时，合适地使用如以上(5)中所述的用报道物质标记的抗AQP3抗体或其功能片段。关于报道物质，荧光颜料是更优选的。其实施例包括FITC、PE/RD1、ECD、PC5、PC7和APC/Cy3。替代地，为了分离或纯化AQP3表达细胞，还可以使用固定在固相诸如磁性微粒上的抗AQP3抗体或其功能片段。在结合到固定在固相上的抗AQP3抗体或其功能片段之后，AQP3表达细胞可以利用磁力等被特异性地分离。分离之后，可以基于盐浓度等的调节来将抗体或其功能片段与细胞解离。因此，通过此顺序，可以完成AQP3表达细胞的分离或纯化。为了鉴别、分离或纯化AQP3表达细胞，提供了含有本发明的抗AQP3抗体或其功能片段的组合物做为用于检测AQP3的试剂。该试剂可以如以上(12)中所述的来制备和使用。
(14)用于测量AQP3表达量的试剂
本发明的抗AQP3抗体或其功能片段可以用作如以上(12)中所述的用于检测AQP3的试剂的组分。在本文中，如果使用如以上(5)中所述用报道物质来标记抗AQP3抗体或其功能片段，并且该报道物质产生允许定量测量的信号，则不仅可以定量地测量作为标靶的AQP3是否存在，而且可以定量地测量AQP3的表达量。此外，即使在不使用用报道物质标记的抗AQP3抗体或其功能片段的情况下，也可以通过组合地使用用产生允许定量测量的信号的报道物质标记的二级抗体，本发明的抗AQP3抗体或其功能片段用来测量AQP3的表达量。出于此目的，提供了含有本发明的抗AQP3抗体或其功能片段的组合物做为用于测量AQP3表达量的试剂。该试剂可以如以上(12)的实施例中所述的那样合适地制备和使用。
(15)抗体药物缀合物
本发明提供抗体药物缀合物(ADC)，所述抗体药物缀合物包含与细胞毒性剂缀合的本发明的抗AQP3抗体或其功能片段。用于制备ADC的接头和方法是本领域中已知的，并且可以用于制备本发明的ADC。参见例如Tsuchikama和An,2018,Protein&Cell,9(1):33-46；Deonarain等人,2015,Expert Opin Drug Discov.10(5):463-81；Singh等人,2015,PharmRes.2015年11月；32(11):3541-71。本公开的ADC可以包括在药物组合物中以用于治疗癌症。
示例性细胞毒性剂包括例如澳瑞他汀(auristatin)、喜树碱(camptothecin)、卡奇车霉素(calicheamicin)、杜卡霉素(duocarmycin)、依托泊苷(etoposide)、美登木素生物碱(maytansinoid)(例如DM1、DM2、DM3、DM4)、紫杉烷(taxane)、苯二氮卓(例如吡咯并[l，4]苯二氮卓、吲哚啉并苯二氮卓和噁唑烷并苯二氮卓，该噁唑烷并苯二氮卓包括吡咯并[l,4]苯二氮卓二聚体、
吲哚啉并苯二氮卓二聚体和噁唑烷并苯二氮卓二聚体)以及长春花生物碱。
使治疗剂与蛋白质，并且特别是与抗体缀合的技术是熟知的。(参见例如Alley等人,2010,Current Opinion in Chemical Biology 14:1-9；Senter，2008，Cancer J.,14(3):154-169。)。通常地，治疗剂经由接头单元与抗体缀合。接头单元可以是可裂解的或不可裂解的。例如，治疗剂可以用可裂解接头与抗体附接，所述可裂解接头对表达癌细胞的AQP3的细胞内环境中的裂解敏感但对细胞外环境基本上不敏感，使得在缀合物被表达癌细胞的AQP3内化时(例如在内体、溶酶体环境或胞膜窖环境中)，该缀合物从抗体裂解。在另一个实施例中，治疗剂可以经由不可裂解的接头与抗体缀合，并且药物释放通过由表达癌细胞的AQP3内化之后的总抗体降解来进行。
通常地，ADC包含在细胞毒性剂与抗AQP3抗体之间的接头区。如上所述，通常地，接头可以在细胞内条件下裂解，使得接头的裂解在细胞内环境中(例如在溶酶体或内体或胞膜窖内)从抗体释放治疗剂。接头可以是例如用细胞内肽酶或蛋白酶(包括溶酶体或内体蛋白酶)裂解的肽基接头。裂解剂可以包括组织蛋白酶B和D以及纤溶酶(参见例如Dubowchik和Walker,1999,Pharm.Therapeutics 83:67-123)。最典型的是可被AQP3表达细胞中存在的酶裂解的肽基接头。例如，可以使用可被癌组织中高表达的硫醇依赖性蛋白酶组织蛋白酶B裂解的肽基接头(例如，包含Phe-Leu或Val-Cit肽的接头)。接头还可以是碳水化合物接头，包括被细胞内糖苷酶裂解的糖接头(例如，可被葡萄糖醛酸酶裂解的葡糖苷酸接头)。
接头还可以是不可裂解接头，诸如直接附接于治疗剂并通过抗体的蛋白水解降解释放的顺丁烯二酰亚胺基-亚烷基-或顺丁烯二酰亚胺-芳基接头。
抗AQP3抗体可以经由抗体的杂原子与接头缀合。这些杂原子可以其天然状态存在于抗体上或可以引入抗体中。在一些方面，抗AQP3抗体经由赖氨酸残基的氮原子与接头缀合。在其他方面，抗AQP3抗体经由半胱氨酸残基的硫原子与接头缀合。半胱氨酸残基可以是天然存在的，或工程化至抗体中的残基。经由赖氨酸和半胱氨酸残基将接头和药物-接头与抗体缀合的方法是本领域中已知的。
示例性抗体-药物缀合物包括基于澳瑞他汀的抗体-药物缀合物(即药物组分是澳瑞他汀药物)。澳瑞他汀结合微管蛋白，已经显示干扰微管动力学以及核和细胞分裂，并具有抗癌活性。通常地，基于澳瑞他汀的抗体-药物缀合物包含在澳瑞他汀药物与抗AQP3抗体之间的接头。接头可以是例如可裂解接头(例如肽基接头、碳水化合物接头)或不可裂解接头(例如通过抗体降解释放的接头)。澳瑞他汀包括MMAF和MMAE。示例性澳瑞他汀的合成和结构描述于美国公布号7,659,241、7,498,298、2009-0111756、2009-0018086和7,968、687中。
其他示例性抗体-药物缀合物包括美登醇抗体-药物缀合物(即药物组分是美登醇药物)和苯二氮卓抗体药物缀合物(即药物组分是苯二氮卓(例如吡咯并[1,4]苯二氮卓二聚体(PBD二聚体)、吲哚啉并苯二氮卓二聚体和噁唑烷并苯二氮卓二聚体))。
(16)通过包含含有抗AQP3抗体或其功能片段的组合物获得的试剂盒
如以上(12)至(14)中所述，通过使用本发明的抗AQP3抗体或其功能片段，可以制备用于检测AQP3的试剂，用于鉴别、分离或纯化AQP3表达细胞的试剂以及用于测量AQP3表达量的试剂。根据各自的目的，可以使用这些试剂与其他组分一起形成试剂盒。该试剂盒适合与做为阳性对照的诸如AQP3或其片段的构成单元组合，与做为标准物质的诸如已知浓度的AQP3组合，与做为阴性对照的诸如二级抗体、酶底物、辅因子、辅助组分、非特异性蛋白样品组合，与诸如缓冲溶液、防腐剂、稀释剂、用户指南等组合。还可以添加用于封闭或洗涤的缓冲溶液做为试剂盒的合适构成单元。
(17)含有抑制性抗AQP3 mAb或其功能片段的组合物和做为AQP3抑制剂的组合物
本发明的抗AQP3抗体或其功能片段或ADC特异性识别并结合到AQP3的细胞外域，在一些实施方案中特别是环C中的表位。如在以下给出的实施例中具体描述的那样，结合到表位的本发明的抗AQP3 mAb可以抑制AQP3的至少一种功能，诸如AQP3的通道功能(例如，过氧化氢渗透特性)或在AQP3表达细胞中促进AQP3的细胞增殖的功能。即，本发明的抗AQP3抗体可以被认为是抑制性抗AQP3抗体。因此，可以提供含有本发明的抑制性抗AQP3 mAb或其功能片段的组合物。此外，此组合物可以用作AQP3抑制剂。
(18)用于治疗癌症的组合物
在皮肤癌、结肠直肠癌、子宫颈癌、肝癌、肺癌、食道癌、肾癌、胃癌、舌癌等中的每一个中均证实了AQP3的表达水平升高。此外，如以下实施例中所述，可以抑制其中AQP3被表达的人癌细胞系的增殖。因此，含有本发明的抑制性抗AQP3 mAb或其功能片段的组合物、本发明的ADC或AQP3抑制剂可以用作用于治疗以上癌症中的任一种的组合物。此外，如已经提出的，AQP3的功能与癌症的进展水平、肿瘤血管生成、浸润特性、转移和癌组织的能量代谢等有关，还可以将用于治疗癌症的组合物视为用于抑制癌症增殖的组合物、用于抑制癌症中的血管生成的组合物、用于抑制癌症浸润的组合物和/或用于抑制/预防癌症转移的组合物。
本发明的用于治疗癌症的组合物可以制备成制剂，诸如注射用溶液等。基本上，此种用于治疗癌症的组合物可以通过注射或逐滴添加全身施用。然而，在将其用于治疗癌症或预防转移等的情况下，还可以进行局部施用。这些制剂可以通过已知方法制备。当其以注射用制剂的形式制备时，例如，可以通过将已经无菌保存的本发明的抑制性抗AQP3 mAb或其功能片段或本发明的ADC溶解或稀释在注射用的水、生理盐水或缓冲溶液中来进行产生。
成为本发明的治疗组合物的有效成分的本发明的抑制性抗AQP3 mAb或其功能片段或本发明的ADC的有效剂量根据各种状况合适地变化，这些状况包括患者的状态、症状等。通常，单次剂量确定在每千克体重0.1至10mg抗AQP3 mAb范围内，并且其通过皮下注射、静脉内注射、腹膜内注射等施用。施用间隔也根据各种状况合适地变化，这些状况包括患者的状态、症状等。通常，每1至4周进行一次施用，但也可以在每周若干次施用之后，在某个时间段内不进行施用，或在一次至若干次初始施用之后，可以以相同的速度继续施用但将剂量减半等。
(19)用于预防和/或治疗皮肤病症的组合物
基于抑制皮肤组织细胞如角化细胞中的AQP3功能的机制，含有本发明的抑制性抗AQP3 mAb或其功能片段的组合物或AQP3抑制剂可以用作用于预防和/或治疗皮肤病的组合物。皮肤病的特定实施例包括牛皮癣、光化性角化病、鱼鳞病和脂溢性皮炎。除此之外，为了治愈或改善角化细胞增殖性皮肤异常，可以使用含有本发明的抑制性抗AQP3 mAb或其功能片段的组合物或通过含有AQP3抑制剂而获得的本发明的用于治疗的组合物。
(20)用于预防和/或治疗炎性病症的组合物
基于根据AQP3功能的抑制降低炎性反应的机制，含有本发明的抑制性抗AQP3 mAb或其功能片段的组合物或AQP3抑制剂可以用作用于预防和/或治疗炎性病症的组合物。炎性病症的特定实施例包括特应性皮炎、牛皮癣、哮喘和慢性阻塞性肺病以及肝炎。肝炎的实施例包括急性肝炎和急性肝病。除此之外，为了预防、治愈或改善伴随AQP3表达升高的炎性疾病，可以使用含有本发明的抑制性抗AQP3 mAb或其功能片段的组合物或通过含有AQP3抑制剂而获得的用于预防和/或治疗炎性病症的组合物。
(21)用于缓解肠蠕动异常的组合物
众所周知，AQP3在肠上皮细胞中表达，并且已提出AQP3的表达水平对肠内和肠外的水分的运输量具有影响。具体地，已提出AQP3的降低的表达水平可能通过增加肠内的水分而引起腹泻，而AQP3的提高的表达水平可能通过减少肠内的水分而引起便秘。因此，基于抑制AQP3功能的机制，含有本发明的抑制性抗AQP3 mAb或其功能片段的组合物或AQP3抑制剂可以用作用于缓解肠蠕动异常的组合物，特别是用作用于缓解便秘的组合物。该组合物可以例如以肠溶片剂或栓剂的形式制备和使用。肠溶片剂或栓剂可以通过已知方法合适地制备。不必连续或周期性地进行施用，并且可以根据症状等的变化以合适的间隔进行施用。
(22)本发明的用于预防和/或治疗皮肤病或炎性病症的组合物的制备
可以提供本发明的抑制性抗AQP mAb或其功能片段与药学上可接受的载体一起做为用于预防和/或治疗的组合物。此外，对于皮肤病或炎性病症为对象的情况，其可以基本上并且合适地制备为药物组合物(用于预防和/或治疗的组合物)，如以上(18)中所述的用于治疗癌症的组合物。药物组合物可以具有制剂如注射溶液等。其还可以具有如水溶液、悬浮液或乳液的形式。药物组合物可以含有药学上可接受的稀释剂、助剂、载体等，包括盐、缓冲剂、佐剂等。这些制剂可以通过已知方法制备。当其以注射用制剂的形式制备时，可以通过将已经无菌保存的抑制性抗AQP mAb或其功能片段的干燥产物或保存溶液用用于皮下注射或静脉内注射的生理盐水或缓冲溶液溶解或稀释来进行制备。替代地，还可以通过用环糊精包封抑制性抗AQP mAb或其功能性片段来提高水溶性。
(23)本发明的用于预防和/或治疗皮肤病或炎性病症的组合物的辅助组分
正如当产生其他抗体制剂同时该制剂为液体制剂并且有效成分的浓度较高等情况时，其通常是一个问题，含有本发明的抑制性AQP3 mAb或其功能片段的组合物或含有抑制性AQP3 mAb的用于预防或治疗的组合物可能会产生抗AQP3 mAb或其功能片段的聚集或沉淀。为了防止聚集或沉淀，组合物中可以包含一种或超过一种辅助组分。辅助组分的实施例包括糖，诸如单糖、二糖或寡糖；糖醇；盐；以及表面活性剂。其更特定实施例包括蔗糖、氯化钠和聚氧乙烯脱水山梨糖醇单月桂酸酯。
(24)本发明的用于预防和/或治疗皮肤病或炎性病症的组合物的施用形式
成为本发明的用于预防和/或治疗的组合物的有效成分的抑制性抗AQP mAb或其功能片段的有效剂量根据各种状况合适地变化，这些状况包括患者的状态、症状等。施用剂量根据各种状况合适地变化，这些状况包括患者的状态、症状等。然而，例如，可以设定如以上(18)中例示的剂量。也可以类似于以上(18)的实施例设定施用间隔，但是不必连续或周期性地进行施用，并且可以根据症状等的变化以合适的间隔进行施用。不用说，如果通过单次施用实现治愈或缓和，则无需多次施用。当症状复发或恶化时，可以再次开始施用。
可以根据患者的疾病状况合适地调节施用时间。尽管可以合适地调节施用期间的施用剂量，但是优选连续施用恒定量，或优选具有如下施用形式，其中仅在初始施用阶段施用相对高剂量之后转变为较少量的恒定施用以进行维持。
[实施例]
在下文中，通过实施例更具体地说明本发明，但是本发明完全不受这些实施例的限制。
[实施例1]
用作免疫原的寡肽的序列确定
为了获得特异性识别AQP3的细胞外域的抗AQP3抗体，本发明的发明人对AQP3的结构，特别是构成细胞外域的环A、环C和环E的结构进行了多种计算机模拟研究，并因此选择了由SEQ ID NO:1的氨基酸序列组成的片段(寡肽)做为免疫原，该片段构成环C(细胞外第二环)的一部分。SEQ ID NO:1的氨基酸序列是对应于人AQP3多肽的位置148至157的序列，并且该氨基酸序列由在环C的C末端侧与跨膜域IV的边界相邻的十个氨基酸残基构成。
[实施例2]
抗体的免疫和选择将由SEQ ID NO:1的氨基酸序列组成的寡肽制备为合成肽。此外，分别制备了过表达包含该氨基酸序列的AQP3多肽的细胞(AQP3过表达细胞)。然后，将合成肽与AQP3过表达细胞组合，并用作免疫原。
使以上免疫原的悬浮液与佐剂一起进入C57BL/6品系的小鼠的腹腔中进行免疫。之后，从免疫的小鼠收集免疫细胞，并构建抗体基因噬菌体文库。将噬菌体文库引入CHO-K1细胞中，并使重组抗体呈现在转化的CHO-K1细胞的细胞膜中。还通过使用转化的细胞和合成肽进行了初始模式化，随后使用AQP3增溶蛋白进行模式化。使用若干次筛选，选择了AQP3结合菌落。最后，对具有AQP3特异性结合活性的克隆进行免疫球蛋白化(IgG)，以获得十个克隆和十个抗AQP3 mAb(抗体A、B、C、D、E、F、G、H、J和K)，这些抗AQP3mAb来自这10个克隆。
同时，当将来源于环E的寡肽用作免疫原时，未获得对AQP3表现出显著结合活性的克隆。
[实施例3]
抗AQP3抗体与AQP3的结合特性
A.结合到免疫原肽的抗体
在ELISA测定中测试了抗体A、B、C、D、E、F、G、H、J和K与用于免疫的肽(SEQ ID NO:1)的结合。结果如图2中所示。观察到抗体B、C、E、G、H、J和K与该肽结合。在此测定中，与其他抗体相比，抗体A、D和F没有与该肽牢固地结合。因此，抗体A、D和F可以在不同表位结合到AQP3。
B.通过ELISA测量的结合到含有细胞裂解物的AQP3的抗体
将来自过表达小鼠AQP3和myc生物素化标记的HEK293T细胞的细胞裂解物用于ELISA测定中，来测量抗体A、B、C、D、E、F、G、H、J和K与AQP3的结合。将来自过表达myc生物素化标记的HEK293T细胞的细胞裂解物而非AQP3用作对照。结果如图3中所示。抗体A、B、C、D、E、F、G、H、J和K中的每一种均显示到AQP3的结合。
C.结合到AQP3表达细胞的抗体
通过使用小鼠上皮细胞(PAM212)、小鼠巨噬细胞、人上皮细胞(HaCaT)和HEK293细胞做为AQP3表达细胞，测量了抗AQP3抗体A、B、C、D、E、F、G、H、J和K与细胞的结合特性。
使PAM212和巨噬细胞与每种抗AQP3抗体(0.1、1或10μg/mL)在4℃下反应1小时。在洗涤细胞之后，添加荧光标记的抗小鼠二级抗体，并使反应再进行1小时(在4℃下)。通过测量荧光强度，获得了每种抗AQP3抗体与细胞的结合特性。
通过使用小鼠巨噬细胞和抗体J获得的结果如图4所示。
还使用溶剂(Veh)或非特异性IgG(IgG)对照进行了该测试。在图4中，纵轴表示荧光强度，并且每个样品的平均荧光强度由条高以及标准误差一起表示。根据其中在0.1、1和10μg/mL的任何浓度下使用的抗体J的所有情况，与对照(Veh和IgG)相比，显著增加的荧光强度被识别(在附图中，**表示存在P<0.01的显著差异)。发现抗体J特异性识别细胞表面上的小鼠AQP3，使得抗体J和小鼠巨噬细胞结合到彼此。
通过使用做为小鼠上皮细胞的PAM212细胞和抗体J获得的结果如图5A所示。
还使用溶剂(Veh)或非特异性IgG(IgG)对照进行了该测试。在图5A中，纵轴表示荧光强度，并且每个样品的平均荧光强度由条高以及标准误差一起表示。根据其中在0.1、1和10μg/mL的任何浓度下使用抗体J的所有情况，与对照(Veh和IgG)相比，显著增加的荧光强度被识别(在图中，**表示存在P<0.01的显著差异)。发现抗体J特异性识别细胞表面上的小鼠AQP3，使得抗体J和PAM212细胞结合到彼此。
还使用PAM212细胞和10μg/mL的浓度的抗体A、B、C、D、E、F、G、H和J进行了该测定。结果如图5B所示。抗体C、D、E、G和J与PAM212细胞的结合是统计学上显著的。
还使用HaCaT细胞和10μg/mL的浓度的抗体A、B、C、D、E、F、G、H和J进行测定。结果如图5C中所示。抗体C、D、E、H和J与HaCaT细胞的结合是统计学上显著的。
通过使用做为人上皮细胞的HaCaT和抗体G、抗体H或抗体J进行FACS测定而获得的结果分别如图6A-6C所示。
在37℃下用细胞解离缓冲液处理HaCaT细胞30分钟，然后取出并收集。然后，使细胞与10μg/mL抗AQP3抗体在4℃下反应1小时。在洗涤细胞之后，添加荧光标记的抗小鼠二级抗体，并使反应再进行1小时(在4℃下)。然后，通过使用流式细胞仪来测量荧光强度(图6A至图6C)。图6A表示其中使用抗体G的情况的结果，图6B表示其中使用抗体H的情况的结果，并且图6C表示其中使用抗体J的情况的结果。每张图均显示一个直方图，其中当模式值设定为100时，横轴表示荧光强度，并且纵轴表示细胞数分布。以粗线表示的直方图表示其中使用抗AQP3抗体的情况，而以细灰线表示的直方图表示其中不使用抗AQP3抗体(添加非特异性IgG)的做为对照的情况。在附图中，由水平条表示的范围指示由AQP3抗体阳性细胞组表现出的荧光强度。附图中还显示了此范围中包括的细胞(＝显示由抗AQP3抗体所进行的阳性染色的细胞)的比率(％)。
根据其中使用抗体G、抗体H和抗体J中的任一种的所有情况，与对照相比，荧光强度明显增加被识别，因此发现抗AQP3抗体对细胞表面上的人AQP3具有结合活性。
FACS测定还使用稳定过表达小鼠AQP3的HEK293细胞进行。将细胞与10μg/mL的浓度的抗体E、H、J或阴性对照IgG孵育一小时，然后通过FACS分选。分别地，将稳定过表达人AQP3的HEK293细胞与10μg/mL的浓度的抗体E孵育一小时，然后通过FACS分选。结果如图6D-6H中所示。发现抗体E、H和J中的每一种结合到HEK293细胞表面上过表达的AQP3。
由上可发现，本发明的若干抗AQP3抗体结合到小鼠巨噬细胞、小鼠上皮细胞(PAM212细胞)和人上皮细胞(HaCaT细胞)。
[实施例4]
免疫染色
通过使用小鼠巨噬细胞做为AQP3表达细胞，进行免疫组织化学分析来查看抗AQP3抗体是否可以用于免疫染色。
对粘附有小鼠巨噬细胞的板进行封闭，然后在4℃下进行与10μg/mL抗AQP3抗体的反应1小时。在洗涤细胞之后，添加荧光标记的抗小鼠二级抗体，并使反应再进行1小时(4℃)。做为对照，还进行了不使用抗AQP3抗体的测试。此外，为了具有明确的细胞核位置，还使用DAPI进行了染色。用共聚焦荧光显微镜进行荧光染色的观察。通过使用抗体H和抗体J获得的结果以及没有抗体的对照的结果一起如图7A所示。在图7A中，左图显示了其中不存在抗体的情况的观察图像(不存在抗AQP3抗体，仅存在二级抗体)，中图显示了其中使用抗体H的情况的观察图像，并且右图显示了其中使用抗体J的情况的观察图像。根据所有图，识别出了来源于DAPI的信号，其中点样形状显示了细胞核的位置。同时，当使用抗体H或抗体J时，还识别出了通过包围由DAPI染色产生的点样形状信号而显示为包裹在细胞形状边缘周围的信号。但是，当不存在抗体时，完全不识别显示为包围由DAPI染色引起的点样形状信号的信号。
当使用抗体J和来自AQP3敲除小鼠的小鼠巨噬细胞进行免疫染色时，仅观察到微弱的信号(Ma等人,2000,PNAS,97(8):4386-4391)，显示抗体J特异性结合到表达巨噬细胞的AQP3(图7B)。
由上可显示，所测试的本发明的抗AQP3抗体是可以用于免疫组织化学分析的抗体。
[实施例5]
抑制细胞增殖的活性
通过使用小鼠上皮细胞(PAM212)、做为小鼠AQP3表达细胞的小鼠巨噬细胞、人上皮细胞(HaCaT)或人上皮样癌细胞(A431)，测量了通过抗AQP3抗体抑制细胞增殖的活性。
将PAM212、HaCaT和A431中的每一种均悬浮在含有1％FBS的DMEM培养基中，并接种在96孔板上(5,000个细胞/孔)。在接种后的第一天，添加含有抗AQP3抗体(0.1、1或10μg/mL)的DMEM培养基，并继续再培养2天。通过使用用于测量活细胞的试剂(半井公司(NacalaiTesque Inc.))并测量在450nm下的吸光度来比较细胞数。
图8A和图8B表示了从其中使用PAM212 AQP3表达细胞的情况获得的结果。通过使用抗体G或抗体J获得的结果与测试做为对照的非特异性IgG(添加10μg/mL非特异性IgG；对照)的结果一起如图8A中所示。在图8A中，纵轴显示在450nm下的吸光度，并且吸光度水平由条高与标准误差一起表示(图8B、图9和图10相同)。图中的星号(*)指示与对照相比，存在P<0.01的显著差异。当使用抗体G或抗体J(10μg/mL)时，观察到对PAM212细胞增殖的显著抑制活性。
分析了抗AQP3抗体J对PAM212细胞增殖的抑制活性的浓度依赖性作用，并且如图8B所示。在使用0.1、1或10μg/mL的抗体J时的活细胞数与做为对照的非特异性IgG(添加10μg/mL非特异性IgG；Ct)的结果一起如图8B中所示。抗体J以浓度依赖性方式增加了对细胞增殖的抑制活性。在图8B中，与对照相比，对于其中使用1和10μg/mL的抗体J的情况所述的星号(*)指示存在P<0.01的显著差异。
图8C显示10μg/mL浓度的抗体A、B、C、D、E、F、G、H、J和阴性对照IgG抗体对PAM212细胞生长的作用。在测试浓度下，抗体B、C、E和J显著抑制了细胞生长。
图9表示了其中从将HaCaT细胞用作人AQP3表达细胞的物质的情况获得的结果。通过使用抗体G、抗体H或抗体J获得的结果与测试做为对照的非特异性IgG(添加10μg/mL的非特异性IgG；对照)的结果一起如图9中所示。在图9中，与对照相比，星号(*)和(**)分别指示存在P<0.05或P<0.01的显著差异。当使用抗体G、抗体H或抗体J(10μg/mL)时，显示了对HaCaT细胞增殖的显著抑制活性。
图10表示了从其中将A431细胞用作人AQP3表达细胞的物质的情况获得的结果。通过使用抗体G、抗体H或抗体J获得的结果与测试做为对照的非特异性IgG(添加10μg/mL的非特异性IgG；对照)的结果一起如图10中所示。在图10中，与对照相比，星号(*)指示存在P<0.05的显著差异。当使用抗体G、抗体H或抗体J(10μg/mL)时，观察到对A431细胞增殖的显著抑制活性。由于A431细胞是人鳞状上皮癌细胞系，因此表现出通过抗AQP3抗体抑制AQP3表达癌细胞的增殖的作用。
由上可清楚地显示，在本发明的抗AQP3抗体中，至少对于抗体G、抗体H和抗体J，当进行抗AQP3抗体与AQP3表达细胞的共培养时，表现出对AQP3表达细胞中细胞增殖的显著抑制活性。
[实施例6]
抑制过氧化氢渗透的活性
通过使用小鼠巨噬细胞做为小鼠AQP3表达细胞，测量了通过抗AQP3抗体抑制过氧化氢渗透特性(结合特性)的活性。
将小鼠巨噬细胞悬浮在含有1％FBS的DMEM培养基中，并接种在96孔板上(10,000个细胞/孔)。接种后的第一天，添加含有做为抗AQP3抗体的抗体J(10μg/mL)或10μg/mL对照IgG抗体(Ct-IgG：对AQP3不具有特异性结合特性的IgG抗体)的DMEM培养基，并继续再共培养过夜。向培养物中添加过氧化氢(100μM)或脂多糖(LPS)(300ng/mL)，并测量细胞中活性氧类(ROS)的量。在通过添加CM-H2DCFDA试剂(英杰公司(Invitrogen)，50μM，20分钟)对细胞染色之后，通过在添加之前和之后测量来源于CM2DCF的荧光强度来评价细胞中的ROS量。如果做为一种ROS的过氧化氢渗透到细胞中，则可以进行如下测量，其中将增加的荧光强度做为细胞中增加的ROS量的指标。添加LPS具有人工增加细胞中ROS量的功能。
图11显示了对于其中向共培养系统添加过氧化氢(H2O2)的情况，其中添加脂多糖(LPS)的情况或其中不添加H2O2和LPS两者的情况(Ct)，在将抗体J添加到共培养系统(Ab)时或将溶剂添加到共培养系统(Veh)时，来源于CM2DCF的荧光强度。纵轴表示荧光强度的相对值。将向已经添加了Ct-IgG抗体的细胞中施加溶剂的情况(图中的左侧条)设定为100％，并且每种条件下的相对荧光强度由条高与标准误差一起表示。在附图中，星号(**)指示比较中存在P<0.01的显著差异，并且清楚地显示，当添加过氧化氢或添加LPS时，与添加溶剂的Veh组相比，细胞中的ROS量显著增加，并且在添加过氧化氢或添加LPS的任何条件下，如果在共培养期间存在抗体J，则与其中不存在抗体J的情况相比，细胞中的ROS量显著减少。
图12显示了使用抗体A、B、C、D、E、F、G、H和J进行的H202运输测定的结果。
抗体C、D、E、H和J具有显著遏制过氧化氢掺入AQP3表达细胞内部的活性。
[实施例7]
细胞信号抑制活性
已知在小鼠巨噬细胞中，p65/NFκB根据LPS刺激而被磷酸化和活化。为了判定在做为小鼠AQP3表达细胞的小鼠巨噬细胞中对LPS作出反应的细胞信号是否被抗AQP3抗体抑制，进行了测试。
将小鼠巨噬细胞悬浮在含有1％FBS的DMEM培养基中，并接种在60mm皿上(2×106个细胞/皿)。接种后的第一天，添加含有做为抗AQP3抗体的抗体J(10μg/mL)或10μg/mL对照IgG抗体(非特异性IgG抗体)的DMEM培养基，并继续再共培养过夜(在显示结果的图13中，前一个条件称为“抗AQP3+”，而后一个条件称为“抗AQP3-”)。在两种条件下对每种培养产物进行LPS处理(100ng/mL，1小时)或不进行LPS处理(在显示结果的图13中，前一个条件称为“LPS+”，而后一个条件称为“LPS-”)。根据抗AQP3抗体的添加/不添加和有/无LPS处理，用小鼠巨噬细胞做为样品产生了四个处理组。从四个处理组的每个细胞中提取蛋白质，并通过免疫印迹确定每个组的p65/NFκB的磷酸化状态。
图13显示了通过使用特异于非磷酸化的p65(p65)和磷酸化p65(P-p65)中的每一种的抗体进行免疫印迹的结果。
在“抗AQP3-”的条件下，LPS处理强烈诱导了磷酸化p65(比较最左侧列与右侧第二列的上图信号)，而在其中存在抗AQP3抗体的“抗AQP3+”的条件下，通过LPS处理对磷酸化p65(P-p65)的诱导被抑制(比较左侧第二列与最右侧列的上图信号，并且为了在关于LPS添加的条件之间进行比较，比较了右侧两列的上图信号)。
对于其中LPS诱导的p65/NFκB参与AQP3表达细胞中的磷酸化和活化的细胞内信号，抗体J具有抑制活性。
[实施例8]
对肝病(急性肝炎和急性肝病)的抑制活性
进行测试以确定在动物受试者中本发明的抗AQP3抗体的抗炎活性(炎症抑制活性和病症抑制活性)。
使用小鼠做为测试材料。向小鼠静脉内施用抗AQP3抗体(抗体J)(每克体重5μg)。施用后的第一天，施用四氯化碳(CCl4)(每克体重0.5μL)，四氯化碳是诱导肝病(急性肝炎和急性肝病)的化学物质。施用四氯化碳之后24小时，收集血清和肝RNA样品。评价了做为肝病程度指标的血清AST值、血清ALT值、肝TNF-αmRNA的积累水平和肝IL-6mRNA的积累水平。使用血液样品的分析结果和使用肝RNA样品的分析分别如图14和图15所示。
图14A显示了血清AST水平的分析结果。在附图中，纵轴表示AST水平[IU/L]，用“○”表示的每个点显示单个测量值，并且水平条表示中值。Ct意指未经受四氯化碳处理的对照。在四氯化碳处理组(CCl4)中，Ab表示已预先用抗AQP3抗体(抗体J)处理过的组，并且Veh表示未用抗AQP3抗体处理过的组。在附图中，星号(*)指示四氯化碳处理组(Veh组和Ab组两者)与对照组(Ct)之间存在p<0.01的显著差异，并且在四氯化碳处理组内的Veh组与Ab组之间也存在p<0.01的显著差异。
图14B显示了血清ALT水平的分析结果。在附图中，纵轴表示ALT水平[IU/L]，用“○”表示的每个点显示单个测量值，并且水平条表示中值。Ct意指未经受四氯化碳处理的对照。在四氯化碳处理组(CCl4)中，Ab表示已预先用抗AQP3抗体(抗体J)处理过的组，并且Veh表示未用抗AQP3抗体处理过的组。在图中，星号(*)指示四氯化碳处理组(Veh组和Ab组两者)与对照组(Ct)之间存在p<0.01的显著差异，并且在四氯化碳处理组内的Veh组与Ab组之间也存在p<0.01的显著差异。
众所周知，血清AST值和血清ALT值均可以是肝病(急性肝炎和急性肝病)的指标。由以上测试结果可以理解，在已经预先用本发明的抗AQP3抗体处理的小鼠中，可以预防或抑制随后由四氯化碳引起的肝病和/或肝炎反应。
图15A显示了肝匀浆中TNF-αmRNA积累水平的分析结果。在附图中，纵轴表示TNF-α表达水平，其通过将TNF-αmRNA的积累水平除以做为对照的18s rRNA水平而获得。在附图中，TNF-α表达水平由条高与标准误差一起显示。Ct意指未经受四氯化碳处理的对照。在四氯化碳处理组(CCl4)中，Ab表示已预先用抗AQP3抗体(抗体J)处理过的组，并且Veh表示未用抗AQP3抗体处理过的组。在图中，星号(*)指示Veh组与对照组(Ct)之间以及Veh组与Ab组之间存在p<0.01的显著差异。
图15B显示了肝匀浆中IL-6mRNA积累水平的分析结果。在附图中，纵轴表示IL-6表达水平，其通过将IL-6mRNA的积累水平除以做为对照的18s rRNA水平而获得。在1图中，IL-6表达水平由柱高与标准误差一起显示。Ct意指未经受四氯化碳处理的对照。在四氯化碳处理组(CCl4)中，Ab表示已预先用抗AQP3抗体(抗体J)处理过的组，并且Veh表示未用抗AQP3抗体处理过的组。在图中，星号(*)指示Veh组与对照组(Ct)之间以及Veh组与Ab组之间存在p<0.01的显著差异。
众所周知，肝中TNF-α或IL-6的表达是肝病(急性肝炎和急性肝病)的指标。由以上测试结果可以理解，在已经预先用本发明的抗AQP3抗体处理的小鼠中，可以预防或抑制随后由四氯化碳引起的肝病和/或肝炎反应。
对于可能患有肝病(急性肝炎和急性肝病)的单个动物的情况，可以通过本发明的抗AQP3抗体预防或抑制肝病或炎性反应的发生。
[实施例9]
抗AQP3抗体的序列分析
在本发明的实施例中获得的来源于10个克隆的十种抗AQP3抗体(抗体A、B、C、D、E、F、G、H、J和K)中，确定了每种抗体的重链和轻链的氨基酸序列。重链序列和轻链序列(没有预测的信号序列，所述信号序列对于抗体A、B、C、D、E、F、G、H、J和K是相同，并且下文将关于抗体F、H和J对所述信号序列进行讨论)如表6所示。
[表37]
Figure BDA0002443808520000861
[表38]
Figure BDA0002443808520000871
[表39]
Figure BDA0002443808520000881
[表40]
Figure BDA0002443808520000891
[表41]
Figure BDA0002443808520000901
此外，通过将确定的氨基酸序列信息与已知的分析技术组合，确定了免疫球蛋白分子的每条链中包含的可变区、CDR和信号肽的序列。
(1)抗体F
抗体F的重链可变区具有用SEQ ID NO:4表示的氨基酸序列。
当从N末端侧进行计数时，由氨基酸序列中的从位置6的甲硫氨酸残基开始到位置24的丝氨酸残基的19个氨基酸残基构成的区被认为是信号肽。
在此重链可变区中，分别地，CDR1(IMGT定义)具有GYTFTDYY(SEQ ID NO:10)的氨基酸序列()，CDR2(IMGT定义)具有IFPGSGST(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列()并且CDR3(IMGT定义)具有ADYGSSYRYFDV(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列()。
抗体F的轻链可变区具有用SEQ ID NO:5表示的氨基酸序列。
当从N末端侧进行计数时，由氨基酸序列中的从位置6的甲硫氨酸残基开始到位置25的甘氨酸残基的20个氨基酸残基构成的区被认为是信号肽。
在此轻链可变区中，分别地，CDR1(IMGT定义)具有SSVSY(SEQ ID NO:13)的氨基酸序列()，CDR2(IMGT定义)具有ATS(SEQ ID NO:14)的氨基酸序列并且CDR3(IMGT定义)具有QQWSSNPLT(SEQ ID NO:15)的氨基酸序列。
(2)抗体H
抗体H的重链可变区具有用SEQ ID NO:6表示的氨基酸序列。
当从N末端侧进行计数时，由氨基酸序列中的从位置6的甲硫氨酸残基开始到位置24的丝氨酸残基的19个氨基酸残基构成的区被认为是信号肽。
在此重链可变区中，分别地，CDR1(IMGT定义)具有GFTYSSYG(SEQ ID NO:16)的氨基酸序列，CDR2(IMGT定义)具有ISRRSIYT(SEQ ID NO:17)的氨基酸序列并且CDR3(IMGT定义)具有ARLSLYDYDGARYTMDY(SEQ ID NO:18)的氨基酸序列。
抗体H的轻链可变区具有用SEQ ID NO:7表示的氨基酸序列。
当从N末端侧进行计数时，由氨基酸序列中的从位置6的甲硫氨酸残基开始到位置25的甘氨酸残基的20个氨基酸残基构成的区被认为是信号肽。
在此轻链可变区中，分别地，CDR1(IMGT定义)具有QDVGTA(SEQ ID NO:19)的氨基酸序列，CDR2(IMGT定义)具有WAS(SEQ ID NO:20)的氨基酸序列并且CDR3(IMGT定义)具有QQYSSYHT(SEQ ID NO:21)的氨基酸序列。
(3)抗体J
抗体J的重链可变区具有用SEQ ID NO:8表示的氨基酸序列。
当从N末端侧进行计数时，由氨基酸序列中的从位置6的甲硫氨酸残基开始到位置24的丝氨酸残基的19个氨基酸残基构成的区被认为是信号肽。
在此重链可变区中，分别地，CDR1(IMGT定义)具有GYTFTSYW(SEQ ID NO:22)的氨基酸序列，CDR2(IMGT定义)具有INPSNGGT(SEQ ID NO:23)的氨基酸序列并且CDR3(IMGT定义)具有ARGGIYYGNYDYYAMDY(SEQ ID NO:24)的氨基酸序列。
抗体J的轻链可变区具有用SEQ ID NO:9表示的氨基酸序列。
当从N末端侧进行计数时，由氨基酸序列中的从位置6的甲硫氨酸残基开始到位置25的甘氨酸残基的20个氨基酸残基构成的区被认为是信号肽。
在此轻链可变区中，分别地，CDR1(IMGT定义)具有KSLLHSNGNTY(SEQ ID NO:25)的氨基酸序列，CDR2(IMGT定义)具有RVS(SEQ ID NO:26)的氨基酸序列并且CDR3(IMGT定义)具有MQHLEYPFT(SEQ ID NO:27)的氨基酸序列。
(4)结果的总结和讨论
从序列信息显而易见的是，抗体A、B、C、D、E、F、G、H、J和K是不同的抗体，其各自来源于独立的克隆。
已显示若干种抗体特异性结合到做为抗原的小鼠AQP3和人AQP3(特别地，它们可以结合到由SEQ ID NO:1的氨基酸序列组成的肽片段，该肽片段包括在环C中)。另外，已显示若干种抗体为抑制性抗AQP3 mAb。本发明的抑制性抗AQP3抗体具有选自以下的至少一种遏制活性：遏制由AQP3负责的渗透低分子量分子的功能(例如渗透过氧化氢的功能)，遏制AQP3表达细胞的细胞功能(例如细胞增殖的功能)以及遏制与AQP3相关的炎性反应或病症反应。
成功获得来源于独立克隆的多种抑制性抗体意指，用做为AQP3的细胞外域之一的环C中包括的由SEQ ID NO:1组成的区构成的表位很重要，并且，通过选择可以特异性识别该表位的抗AQP3抗体，可以选择甚至更独立的抑制性抗AQP3抗体。本发明提供了识别AQP3的细胞外域并且可以从细胞外部直接结合到AQP3的抗体，并且其还可以提供相关领域中未知的抗AQP3 mAb。另外，不受其限制地，本发明提供了抑制性抗AQP3抗体的多种分子，并且给出了关于包含在AQP3的细胞外域中的表位的明确信息，从而使得可新获得抑制性抗AQP3抗体。
[工业适用性]
特异性识别AQP3的细胞外域的本发明的抗AQP3单克隆抗体能够高度灵敏地检测AQP3，并且从其还可以用于鉴别、分离和纯化表达AQP3的活细胞的观点来看，其允许进行与AQP3相关的各种分析，因此具有工业适用性。此外，由于本发明的抗AQP3单克隆抗体可以对AQP3的至少一种功能具有抑制活性，如抑制由AQP3负责的渗透低分子量分子的功能，抑制AQP3表达细胞的细胞功能(细胞增殖等)和抑制肝中炎性反应的发生等，因此这些抗体可以用于预防或治疗各种病症，因此具有工业适用性。
具体实施方案
尽管已经说明和描述了各种具体实施方案，但是应理解，可以在不背离本公开的精神和范围的情况下进行各种改变。本公开通过下文阐述的编号实施方案示例。
1.一种抗AQP3抗体或其功能片段，所述抗AQP3抗体或其功能片段特异性结合到其氨基酸序列由ATYPSGHLDM(SEQ ID NO:1)组成的寡肽。
2.根据实施方案1所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段特异性结合到人AQP3。
3.根据实施方案1或实施方案2所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段特异性结合到小鼠AQP3。
4.一种抗AQP3抗体或其功能片段，所述抗AQP3抗体或其功能片段特异性结合到人AQP3的细胞外域和/或小鼠AQP3的细胞外域。
5.根据实施方案1至3中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段特异性结合到人AQP3的细胞外域和/或小鼠AQP3的细胞外域。
6.根据实施方案4或实施方案5所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段特异性结合到人AQP3的所述细胞外域。
7.根据实施方案4至6中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段特异性结合到小鼠AQP3的所述细胞外域。
8.根据实施方案4至7中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段特异性结合到在PAM212细胞的表面上表达的AQP3的细胞外域。
9.根据实施方案4至8中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段特异性结合到在小鼠巨噬细胞的表面上表达的AQP3的细胞外域。
10.根据实施方案3至9中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段特异性结合到在HEK293细胞的表面上表达的AQP3的细胞外域。
11.根据实施方案1至10中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段对人AQP3的至少一种功能具有抑制活性。
12.根据实施方案1至11中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段对小鼠AQP3的至少一种功能具有抑制活性。
13.根据实施方案1至12中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段抑制PAM212细胞、HaCaT细胞和A431细胞中的一种或多种的增殖。
14.根据实施方案13所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段抑制PAM212细胞的增殖。
15.根据实施方案13或实施方案14所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段抑制HaCaT细胞的增殖。
16.根据实施方案13至15中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段抑制A431细胞的增殖。
17.根据实施方案13至16中任一项所述的抗体或其功能片段，其中根据实施例5中所述的测定测量增殖。
18.根据实施方案13至17中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段相对于非特异性结合AQP3的IgG对照抗体抑制增殖至少10％。
19.根据实施方案18所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段相对于非特异性结合AQP3的IgG对照抗体抑制增殖至少20％。
20.根据实施方案19所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段相对于非特异性结合AQP3的IgG对照抗体抑制增殖至少30％。
21.根据实施方案18所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段相对于非特异性结合AQP3的IgG对照抗体抑制增殖约10％至约30％。
22.根据实施方案1至21中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段抑制H2O2运输。
23.根据实施方案22所述的抗体或其功能片段，其中根据实施例6中所述的测定测量对H2O2运输的抑制。
24.根据实施方案22或实施方案23所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段相对于非特异性结合AQP3的IgG对照抗体抑制H2O2运输至少10％。
25.根据实施方案24所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段相对于非特异性结合AQP3的IgG对照抗体抑制H2O2运输至少20％。
26.根据实施方案24所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段相对于非特异性结合AQP3的IgG对照抗体抑制H2O2运输至少30％。
27.根据实施方案24所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段相对于非特异性结合AQP3的IgG对照抗体抑制H2O2运输约10％至约30％。
28.根据实施方案1至27中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段抑制p65的磷酸化。
29.根据实施方案28所述的抗体或其功能片段，其中根据实例7中所述的测定测量对p65磷酸化的抑制。
30.根据实施方案1至29中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段抑制用四氯化碳处理的小鼠中的肝脏炎性反应。
31.根据实施方案30所述的抗体或其功能片段，其中根据实施例8中所述的测定测量用四氯化碳处理的小鼠中的肝脏炎性反应。
32.一种抗AQP3抗体或其功能片段，所述抗AQP3抗体或其功能片段包含重链互补确定区1(HCDR1)、重链互补确定区2(HCRD2)、重链互补确定区3(HCDR3)、轻链互补确定区1(LCDR1)、轻链互补确定区2(LCDR2)以及轻链互补确定区3(LCDR3)，所述区包含选自表2A-5E中的一表中所阐述序列的氨基酸序列。
33.根据实施方案32所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含如表2A中所阐述的HCDR1序列、HCDR2序列、HCDR3序列、LCDR1序列、LCDR2序列和LCDR3序列。
34.根据实施方案32所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含如表2B中所阐述的HCDR1序列、HCDR2序列、HCDR3序列、LCDR1序列、LCDR2序列和LCDR3序列。
35.根据实施方案32所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含如表2C中所阐述的HCDR1序列、HCDR2序列、HCDR3序列、LCDR1序列、LCDR2序列和LCDR3序列。
36.根据实施方案32所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含如表2D中所阐述的HCDR1序列、HCDR2序列、HCDR3序列、LCDR1序列、LCDR2序列和LCDR3序列。
37.根据实施方案32所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含如表2E中所阐述的HCDR1序列、HCDR2序列、HCDR3序列、LCDR1序列、LCDR2序列和LCDR3序列。
38.根据实施方案32所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含如表3A中所阐述的HCDR1序列、HCDR2序列、HCDR3序列、LCDR1序列、LCDR2序列和LCDR3序列。
39.根据实施方案32所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含如表3B中所阐述的HCDR1序列、HCDR2序列、HCDR3序列、LCDR1序列、LCDR2序列和LCDR3序列。
40.根据实施方案32所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含如表3C中所阐述的HCDR1序列、HCDR2序列、HCDR3序列、LCDR1序列、LCDR2序列和LCDR3序列。
41.根据实施方案32所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含如表3D中所阐述的HCDR1序列、HCDR2序列、HCDR3序列、LCDR1序列、LCDR2序列和LCDR3序列。
42.根据实施方案32所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含如表3E中所阐述的HCDR1序列、HCDR2序列、HCDR3序列、LCDR1序列、LCDR2序列和LCDR3序列。
43.根据实施方案32所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含如表4A中所阐述的HCDR1序列、HCDR2序列、HCDR3序列、LCDR1序列、LCDR2序列和LCDR3序列。
44.根据实施方案32所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含如表4B中所阐述的HCDR1序列、HCDR2序列、HCDR3序列、LCDR1序列、LCDR2序列和LCDR3序列。
45.根据实施方案32所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含如表4C中所阐述的HCDR1序列、HCDR2序列、HCDR3序列、LCDR1序列、LCDR2序列和LCDR3序列。
46.根据实施方案32所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含如表4D中所阐述的HCDR1序列、HCDR2序列、HCDR3序列、LCDR1序列、LCDR2序列和LCDR3序列。
47.根据实施方案32所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含如表4E中所阐述的HCDR1序列、HCDR2序列、HCDR3序列、LCDR1序列、LCDR2序列和LCDR3序列。
48.根据实施方案32所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含如表5A中所阐述的HCDR1序列、HCDR2序列、HCDR3序列、LCDR1序列、LCDR2序列和LCDR3序列。
49.根据实施方案32所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含如表5B中所阐述的HCDR1序列、HCDR2序列、HCDR3序列、LCDR1序列、LCDR2序列和LCDR3序列。
50.根据实施方案32所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含如表5C中所阐述的HCDR1序列、HCDR2序列、HCDR3序列、LCDR1序列、LCDR2序列和LCDR3序列。
51.根据实施方案32所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含如表5D中所阐述的HCDR1序列、HCDR2序列、HCDR3序列、LCDR1序列、LCDR2序列和LCDR3序列。
52.根据实施方案32所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含如表5E中所阐述的HCDR1序列、HCDR2序列、HCDR3序列、LCDR1序列、LCDR2序列和LCDR3序列。
53.根据实施方案32所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含抗体A、抗体B、抗体C、抗体D、抗体E、抗体F、抗体G、抗体H、抗体J或抗体K的互补确定区(CDR)序列。
54.根据实施方案53所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含抗体A的CDR序列。
55.根据实施方案53所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含抗体B的CDR序列。
56.根据实施方案53所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含抗体C的CDR序列。
57.根据实施方案53所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含抗体D的CDR序列。
58.根据实施方案53所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含抗体E的CDR序列。
59.根据实施方案53所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含抗体F的CDR序列。
60.根据实施方案53所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含抗体G的CDR序列。
61.根据实施方案53所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含抗体H的CDR序列。
62.根据实施方案53所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含抗体J的CDR序列。
63.根据实施方案53所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含抗体K的CDR序列。
64.根据实施方案53至63中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述CDR序列通过IMGT编号定义，如表1A-1J所阐述。
65.根据实施方案53至63中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述CDR序列通过Kabat编号定义，如表1A-1J所阐述。
66.根据实施方案53至63中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述CDR序列通过Chothia编号定义，如表1A-1J所阐述。
67.根据实施方案53至63中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述CDR序列通过IMGT共同序列、Kabat共同序列和Chothia共同序列定义，如表1A-1J所阐述。
68.根据实施方案53至63中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述CDR序列通过IMGT组合重叠序列、Kabat组合重叠序列和Chothia组合重叠序列定义，如表1A-1J所阐述。
69.根据实施方案32所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含抗体A、抗体B、抗体C、抗体D、抗体E、抗体F、抗体G、抗体H、抗体J或抗体K的可变重链(VH)序列和可变轻链(VH)序列。
70.根据实施方案69所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含抗体A的VH序列和VL序列，如表1A所阐述。
71.根据实施方案69所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含抗体B的VH序列和VL序列，如表1B所阐述。
72.根据实施方案69所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含抗体C的VH序列和VL序列，如表1C所阐述。
73.根据实施方案69所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含抗体D的VH序列和VL序列，如表1D所阐述。
74.根据实施方案69所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含抗体E的VH序列和VL序列，如表1E所阐述。
75.根据实施方案69所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含抗体F的VH序列和VL序列，如表1F所阐述。
76.根据实施方案69所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含抗体G的VH序列和VL序列，如表1G所阐述。
77.根据实施方案69所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含抗体H的VH序列和VL序列，如表1H所阐述。
78.根据实施方案69所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含抗体J的VH序列和VL序列，如表1I所阐述。
79.根据实施方案69所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段包含抗体K的VH序列和VL序列，如表1J所阐述。
80.一种抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段与根据实施方案1至79中任一个所述的抗体或其功能片段竞争用于结合到人AQP3。
81.根据实施方案80所述的抗体或其功能片段，其中所述竞争针对与细胞表面表达的人AQP3的结合。
82.根据实施方案80所述的抗体或其功能片段，其中所述竞争针对与HEK293细胞表面上表达的人AQP3的结合。
83.一种抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段与根据实施方案1至79中任一项所述的抗体或其功能片段竞争用于结合到小鼠AQP3。
84.根据实施方案83所述的抗体或其功能片段，其中所述竞争针对与细胞表面表达的小鼠AQP3的结合。
85.根据实施方案84所述的抗体或其功能片段，其中所述竞争针对与HEK293细胞的表面上表达的小鼠AQP3的结合。
86.根据实施方案84所述的抗体或其功能片段，其中所述竞争针对与PAM212细胞的表面上表达的小鼠AQP3的结合。
87.根据实施方案84所述的抗体或其功能片段，其中所述竞争针对与小鼠巨噬细胞的表面上表达的小鼠AQP3的结合。
88.根据实施方案1至87中任一个所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段非特异性结合除AQP3之外的一种或多种人水通道蛋白(“非AQP3水通道蛋白”)。
89.根据实施方案88所述的抗体或其功能片段，其中所述非AQP3水通道蛋白选自AQP0、APQ1、AQP2、AQP4、AQP5、AQP6、AQP7、AQP8、AQP9、AQP10、AQP11和AQP12。
90.根据实施方案89所述的抗体或其功能片段，其中所述一种或多种非AQP3水通道蛋白包含AQP0。
91.根据实施方案88至90中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述一种或多种非AQP3水通道蛋白包含AQP1。
92.根据实施方案88至91中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述一种或多种非AQP3水通道蛋白包含AQP2。
93.根据实施方案88至92中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述一种或多种非AQP3水通道蛋白包含AQP4。
94.根据实施方案88至93中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述一种或多种非AQP3水通道蛋白包含AQP5。
95.根据实施方案88至94中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述一种或多种非AQP3水通道蛋白包含AQP6。
96.根据实施方案88至95中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述一种或多种非AQP3水通道蛋白包含AQP7。
97.根据实施方案88至96中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述一种或多种非AQP3水通道蛋白包含AQP8。
98.根据实施方案88至97中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述一种或多种非AQP3水通道蛋白包含AQP9。
99.根据实施方案88至98中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述一种或多种非AQP3水通道蛋白包含AQP10。
100.根据实施方案88至99中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述一种或多种非AQP3水通道蛋白包含AQP11。
101.根据实施方案88至100中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述一种或多种非AQP3水通道蛋白包含AQP12。
102.根据实施方案1至101中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述抗体是IgG的免疫球蛋白分子。
103.根据实施方案1至102中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述抗体是单克隆抗体。
104.根据实施方案1至103中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述抗体或其功能片段是具有人抗体的恒定区的嵌合抗体或人源化抗体。
105.根据实施方案104所述的抗体或其功能片段，其中所述抗体或其功能片段是嵌合抗体。
106.根据实施方案104所述的抗体或其功能片段，其中所述抗体或其功能片段是具有人抗体恒定区的人源化抗体。
107.根据实施方案1至106中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段是抗体。
108.根据实施方案107所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段是单特异性抗体。
109.根据实施方案107所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段是多特异性抗体。
110.根据实施方案1至106中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段是抗体的功能片段。
111.根据实施方案110所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段是选自F(ab')2、Fab、Fab'和Fv的功能片段。
112.根据实施方案1至111中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段用报道物质标记。
113.根据实施方案1至112中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段被固定在固体支持物上。
114.一种抗体药物缀合物(ADC)，所述抗体药物缀合物包含与细胞毒性剂缀合的根据实施方案1至111中任一项所述的抗体或其功能片段。
115.根据实施方案114所述的ADC，其中所述细胞毒性剂包含烷基化剂。
116.根据实施方案115所述的ADC，其中所述烷基化剂包括顺铂(cisplatin)、卡铂(carboplatin)、奥沙利铂(oxaliplatin)、二氯甲基二乙胺(mechlorethamine)、环磷酰胺、左旋苯丙氨酸氮芥(melphalan)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、异环磷酰胺(ifosfamide)二甲磺酸丁酯(busulfan)、N-亚硝基-N-甲基脲(MNU)、亚硝脲氮芥(carmustine；BCNU)、环己亚硝脲(lomustine；CCNU)、甲基环己亚硝脲(semustine；MeCCNU)、福莫司汀(fotemustine)、链脲佐菌素(streptozotocin)、达卡巴嗪(dacarbazine)、米托唑胺(mitozolomide)、替莫唑胺(temozolomide)、三胺硫磷(thiotepa)、丝裂霉素(mytomycin)、地吖醌(AZQ)、丙卡巴肼(procarbazine)或六甲基三聚氰胺。
117.根据实施方案114所述的ADC，其中所述细胞毒性剂包含抗代谢物。
118.根据实施方案117所述的ADC，其中所述抗代谢物包括甲氨蝶呤(methotrexate)、培美曲塞(pemetrexed)、卡培他滨(capecitabine)、阿糖胞苷(cytarabine)、吉西他滨(gemcitabine)、地西他滨(decitabine)、阿扎胞苷(azacitidine)、氟达拉滨(fludarabine)、奈拉拉滨(nelarabine)、克拉屈滨(cladribine)、氯法拉滨(clofarabine)或喷司他汀(pentostatin)。
119.根据实施方案114所述的ADC，其中所述细胞毒性剂包含抗微管剂。
120.根据实施方案119所述的ADC，其中所述抗微管剂包含紫杉醇(paclitaxel)、多西紫杉醇(docetaxel)、长春新碱(vincristine)、长春瑞滨(vinorelbine)、长春花碱(vinblastine)、长春地辛(vindesine)、长春氟宁(vinflunine)、单甲基澳瑞他汀E或单甲基澳瑞他汀F。
121.根据实施方案114所述的ADC，其中所述细胞毒性剂包含拓扑异构酶抑制剂。
122.根据实施方案121所述的ADC，其中所述拓扑异构酶抑制剂包含伊立替康(irinotecan)、拓扑替康(topotecan)、依托泊苷、阿霉素(doxorubicin)、米托蒽醌(mitoxantrone)、替尼泊苷(teniposide)、新生霉素(novobiocin)、美巴龙(merbarone)或阿克拉霉素(aclarubicin)。
123.根据实施方案114所述的ADC，其中所述细胞毒性剂包含细胞毒性抗生素。
124.根据实施方案123所述的ADC，其中所述细胞毒性抗生素包含阿霉素(doxorubicin)、柔红霉素(daunorubicin)、表阿霉素(epirubicin)去甲氧基柔红霉素(idarubicin)、吡喃阿霉素(pirarubicin)、阿克拉霉素(aclarubicin)、二羟蒽二酮(mitoxantrone)或博来霉素(bleomycin)。
125.一种组合物，所述组合物包含根据实施方案1至113中任一项所述的抗体或其片段。
126.根据实施方案125所述的组合物，所述组合物为用于检测AQP3的试剂。
127.根据实施方案125所述的组合物，所述组合物为用于鉴别、分离或纯化AQP3表达细胞的试剂。
128.根据实施方案125或126所述的组合物，所述组合物为用于测量AQP3表达量的试剂。
129.一种试剂盒，所述试剂盒包含根据实施方案126至128中任一项所述的组合物。
130.一种组合物，所述组合物包含根据实施方案1至112中任一项所述的单克隆抗体或其片段，其中所述单克隆抗体或其功能片段对AQP3的至少一种功能具有抑制活性。
131.根据实施方案130所述的组合物，所述组合物为还包括药学上可接受的载体的药物组合物。
132.一种组合物，所述组合物包含根据实施方案114至124中任一项所述的ADC和药学上可接受的载体。
133.根据实施方案131或实施方案132所述的组合物，所述组合物用于治疗癌症。
134.根据实施方案133所述的组合物，其中所述癌症为选自由以下组成的组的癌症：结肠直肠癌、子宫颈癌、肝癌、肺癌、食道癌、肾癌、胃癌、舌癌、皮肤癌和乳腺癌。
135.根据实施方案131所述的组合物，所述组合物用于预防和/或治疗皮肤病。
136.根据实施方案135所述的组合物，其中所述皮肤病选自由以下组成的组：牛皮癣、光化性角化病、鱼鳞病和脂溢性皮炎。
137.根据实施方案131所述的组合物，所述组合物用于预防和/或治疗炎性病症。
138.根据实施方案137所述的组合物，其中所述炎性病症选自由以下组成的组：特应性皮炎、牛皮癣、哮喘、慢性阻塞性肺病和肝炎。
139.一种用于检测AQP3的方法，所述方法包括使样品与根据实施方案1至113中任一项所述的抗体或其片段或与根据实施方案125或126所述的组合物接触的步骤。
140.一种用于分离和/或纯化AQP3表达细胞的方法，所述方法包括使包括细胞的样品与根据实施方案1至113中任一项所述的抗体或其功能片段或与根据实施方案125至127中任一项所述的组合物接触的步骤。
141.一种用于测量AQP3的方法，所述方法包括使样品与根据实施方案1至113中任一项所述的抗体或其功能片段或与根据实施方案125、126或128所述的组合物接触的步骤。
142.一种用于抑制AQP3的至少一种功能的方法，所述方法包括使包括AQP3的样品与根据实施方案1至113中任一项所述的抗体或其功能片段或与根据实施方案130所述的组合物接触的步骤。
143.一种用于抑制低分子量物质跨膜运输的方法，所述方法包括使具有包括AQP3的膜的样品与根据实施方案1至113中任一项所述的抗体或其功能片段或与根据实施方案130所述的组合物接触的步骤。
144.一种治疗患有癌症的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的根据实施方案1至112中任一项所述的抗体或其功能片段、根据实施方案114至124中任一项所述的ADC或根据实施方案131或实施方案132所述的组合物。
145.根据实施方案144所述的方法，其中所述癌症为选自由以下组成的组的癌症：结肠直肠癌、子宫颈癌、肝癌、肺癌、食道癌、肾癌、胃癌、舌癌、皮肤癌和乳腺癌。
146.一种预防和/或治疗受试者的皮肤病的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的根据实施方案1至112中任一项所述的抗体或其功能片段或根据实施方案131所述的组合物。
147.根据实施方案146所述的方法，其中所述皮肤病选自由以下组成的组：牛皮癣、光化性角化病、鱼鳞病和脂溢性皮炎。
148.根据实施方案146或实施方案147所述的方法，所述方法是治疗皮肤病的方法。
149.一种预防和/或治疗受试者的炎性病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的根据实施方案1至112中任一项所述的抗体或其功能片段或根据实施方案131所述的组合物。
150.根据实施方案149所述的方法，其中所述炎性病症选自由以下组成的组：特应性皮炎、牛皮癣、哮喘、慢性阻塞性肺病和肝炎。
151.根据实施方案149或实施方案150所述的方法，所述方法是治疗炎性病症的方法。
152.一种用于产生抗AQP3抗体的方法，所述方法包括用(i)其氨基酸序列由SEQID NO:1的氨基酸序列组成的肽和(ii)AQP3过表达细胞的组合对非人哺乳动物进行免疫。
153.根据实施方案152所述的方法，其中所述哺乳动物是小鼠。
154.根据实施方案152或实施方案153所述的方法，其中所述AQP3过表达细胞包含过表达AQP3的HaCaT细胞、PAM212细胞、小鼠巨噬细胞或HEK293细胞或其组合。
155.根据实施方案152或实施方案153所述的方法，其中所述AQP3过表达细胞包含过表达AQP3的CHO细胞。
156.根据实施方案155所述的方法，其中所述过表达AQP3的CHO细胞包含过表达小鼠AQP3的CHO细胞。
157.根据实施方案156所述的方法，其中使用CMV启动子使小鼠AQP3在CHO细胞中表达。
158.根据实施方案155至157中任一项所述的方法，其中所述过表达AQP3的CHO细胞包含过表达人AQP3的CHO细胞。
159.根据实施方案158所述的方法，其中使用CMV启动子使人AQP3在CHO细胞中表达。
160.根据实施方案152至159中任一个所述的方法，所述方法还包括从经免疫的哺乳动物收集免疫细胞，使用来自免疫细胞的mRNA产生抗体文库，以及从抗体文库鉴别出一种或多种抗AQP3抗体。
本公开通过下文阐述的额外的编号实施方案进一步示例。
1'.一种特异性识别水通道蛋白3(AQP3)的细胞外域的抗AQP3抗体或其功能片段。
2'.根据实施方案1'所述的抗体或其功能片段，其中所述细胞外域是环C。
3'.根据实施方案1'或2'所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段特异性结合到由在环C的C末端侧与跨膜区IV的边界相邻的十个氨基酸残基构成的寡肽。
4'.根据实施方案1'至3'中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段用报道物质标记。
5'.根据实施方案1'至4'中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段被固定在固体支持物上。
6'.根据实施方案1'至5'中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段特异性结合到来源于人和/或小鼠的AQP3。
7'.根据实施方案1'至6'中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述抗体是IgG的免疫球蛋白分子。
8'.根据实施方案1'至7'中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其功能片段对AQP3的至少一种功能具有抑制活性。
9'.根据实施方案1'至8'中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述抗体是单克隆抗体。
10'.根据实施方案9'所述的单克隆抗体，其中所述抗体或其功能片段是具有人抗体的恒定区的嵌合抗体或人源化抗体。
11'.一种组合物，所述组合物包含根据实施方案1'至10'中任一个所述的抗体或其片段。
12'.根据实施方案11'所述的组合物，所述组合物为用于检测AQP3的试剂。
13'.根据实施方案11'所述的组合物，所述组合物为用于鉴别、分离或纯化AQP3表达细胞的试剂。
14'.根据实施方案11'或12'所述的组合物，所述组合物为用于测量AQP3表达量的试剂。
15'.一种试剂盒，所述试剂盒包含根据实施方案12'至14'中任一项所述的组合物。
16'.一种组合物，所述组合物包含根据实施方案9'或10'所述的单克隆抗体或其片段，其中所述单克隆抗体或其功能片段对AQP3的至少一种功能具有抑制活性。
17'.根据实施方案16'所述的组合物，所述组合物为还包括药学上可接受的载体的药物组合物。
18'.根据实施方案17'所述的组合物，所述组合物用于治疗癌症。
19'.根据实施方案18'所述的组合物，其中所述癌症为选自由以下组成的组的癌症：结肠直肠癌、子宫颈癌、肝癌、肺癌、食道癌、肾癌、胃癌、舌癌、皮肤癌和乳腺癌。
20'.根据实施方案16'所述的组合物，其中所述组合物用于预防和/或治疗皮肤病。
21'.根据实施方案20'所述的组合物，其中所述皮肤病选自由以下组成的组：牛皮癣、光化性角化病、鱼鳞病和脂溢性皮炎。
22'.根据实施方案16'所述的组合物，所述组合物用于预防和/或治疗炎性病症。
23'.根据实施方案22'所述的组合物，其中所述炎性病症选自由以下组成的组：特应性皮炎、牛皮癣、哮喘、慢性阻塞性肺病和肝炎。
24'.一种用于检测AQP3的方法，所述方法包括使样品与根据实施方案1'至10'中任一项所述的抗体或其片段或与根据实施方案11'或12'所述的组合物接触的步骤。
25'.一种用于分离和/或纯化AQP3表达细胞的方法，所述方法包括使包括细胞的样品与根据实施方案1'至10'中任一项所述的抗体或其功能片段或与根据实施方案11'或12'所述的组合物接触的步骤。
26'.一种用于测量AQP3的方法，所述方法包括使样品与根据实施方案1'至10'中任一项所述的抗体或其功能片段或与根据实施方案11'、12'或14'所述的组合物接触的步骤。
27'.一种用于抑制AQP3的至少一种功能的方法，所述方法包括使包括AQP3的样品与根据实施方案1'至10'中任一项所述的抗体或其功能片段或与根据实施方案16'所述的组合物接触的步骤。
28'.一种用于抑制低分子量物质跨膜运输的方法，所述方法包括使具有包括AQP3的膜的样品与根据实施方案1'至10'中任一项所述的抗体或其功能片段或与根据实施方案16'所述的组合物接触的步骤。
序列表
<110> 学校法人庆应义塾
<120> 特异性结合到水通道蛋白3(AQP3)的细胞外域的抗AQP3单克隆抗体及其用途
<130> NJU3770660WO
<150> 2017-198895
<151> 2017-10-12
<160> 469
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 免疫原
<400> 1
Ala Thr Tyr Pro Ser Gly His Leu Asp Met
1 5 10
<210> 2
<211> 27
<212> PRT
<213> 人类
<400> 2
Ala Asp Asn Gln Leu Phe Val Ser Gly Pro Asn Gly Thr Ala Gly Ile
1 5 10 15
Phe Ala Thr Tyr Pro Ser Gly His Leu Asp Met
20 25
<210> 3
<211> 27
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 3
Ala Asn Asn Glu Leu Phe Val Ser Gly Pro Asn Gly Thr Ala Gly Ile
1 5 10 15
Phe Ala Thr Tyr Pro Ser Gly His Leu Asp Met
20 25
<210> 4
<211> 139
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F H_链可变区
<400> 4
Lys Leu Ala Ala Thr Met Lys His Leu Trp Phe Phe Leu Leu Leu Val
1 5 10 15
Ala Ala Pro Arg Trp Val Leu Ser Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly
20 25 30
Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala
35 40 45
Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Tyr Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg
50 55 60
Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Trp Ile Phe Pro Gly Ser Gly
65 70 75 80
Ser Thr Tyr Tyr Asn Glu Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val
85 90 95
Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Leu Leu Ser Ser Leu Thr Ser
100 105 110
Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys Ala Asp Tyr Gly Ser Ser Tyr Arg
115 120 125
Tyr Phe Asp Val Trp Gly Ala Gly Thr Thr Val
130 135
<210> 5
<211> 130
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F L_链可变区
<400> 5
Lys Leu Ala Ala Thr Met Arg Leu Leu Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu
1 5 10 15
Met Leu Trp Val Pro Gly Ser Ser Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Ser
20 25 30
Pro Ala Ile Leu Ser Ala Ser Pro Gly Glu Lys Val Thr Met Thr Cys
35 40 45
Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
50 55 60
Gly Ser Ser Pro Lys Pro Trp Ile Tyr Ala Thr Ser Tyr Leu Ala Ser
65 70 75 80
Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser
85 90 95
Leu Thr Ile Gly Arg Val Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys
100 105 110
Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu
115 120 125
Glu Leu
130
<210> 6
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H H_链可变区
<400> 6
Lys Leu Ala Ala Thr Met Lys His Leu Trp Phe Phe Leu Leu Leu Val
1 5 10 15
Ala Ala Pro Arg Trp Val Leu Ser Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly
20 25 30
Gly Asp Leu Val Lys Pro Gly Gly Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala
35 40 45
Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr
50 55 60
Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val Ala Thr Ile Ser Arg Arg Ser Ile
65 70 75 80
Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Gln Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg
85 90 95
Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser
100 105 110
Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Arg Leu Ser Leu Tyr Asp Tyr
115 120 125
Asp Gly Ala Arg Tyr Thr Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val
130 135 140
<210> 7
<211> 130
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H L_链可变区
<400> 7
Lys Leu Ala Ala Thr Met Arg Leu Leu Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu
1 5 10 15
Met Leu Trp Val Pro Gly Ser Ser Gly Asp Ile Lys Met Thr Gln Ser
20 25 30
Pro Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys
35 40 45
Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys
50 55 60
Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His
65 70 75 80
Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
85 90 95
Thr Leu Thr Ile Ser Asn Val Gln Ser Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Phe
100 105 110
Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu
115 120 125
Glu Ile
130
<210> 8
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J H_链可变区
<400> 8
Lys Leu Ala Ala Thr Met Lys His Leu Trp Phe Phe Leu Leu Leu Val
1 5 10 15
Ala Ala Pro Arg Trp Val Leu Ser Gln Val His Leu Gln Gln Ser Gly
20 25 30
Thr Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Leu Ser Cys Glu Ala
35 40 45
Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg
50 55 60
Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Asn Ile Asn Pro Ser Asn Gly
65 70 75 80
Gly Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Val
85 90 95
Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser
100 105 110
Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Gly Ile Tyr Tyr Gly
115 120 125
Asn Tyr Asp Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val
130 135 140
<210> 9
<211> 136
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J L_链可变区
<400> 9
Lys Leu Ala Ala Thr Met Arg Leu Leu Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu
1 5 10 15
Met Leu Trp Val Pro Gly Ser Ser Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Ala
20 25 30
Ala Pro Ser Val Pro Val Thr Pro Gly Glu Ser Val Ser Ile Ser Cys
35 40 45
Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Tyr
50 55 60
Trp Phe Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg
65 70 75 80
Val Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly
85 90 95
Ser Gly Thr Ala Phe Thr Leu Arg Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp
100 105 110
Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln His Leu Glu Tyr Pro Phe Thr Phe
115 120 125
Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile
130 135
<210> 10
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F HCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 10
Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Tyr
1 5
<210> 11
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F丂HCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 11
Ile Phe Pro Gly Ser Gly Ser Thr
1 5
<210> 12
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F丂HCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 12
Ala Asp Tyr Gly Ser Ser Tyr Arg Tyr Phe Asp Val
1 5 10
<210> 13
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F丂LCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 13
Ser Ser Val Ser Tyr
1 5
<210> 14
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F丂LCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 14
Ala Thr Ser
1
<210> 15
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F丂LCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 15
Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr
1 5
<210> 16
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H HCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 16
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly
1 5
<210> 17
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H HCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 17
Ile Ser Arg Arg Ser Ile Tyr Thr
1 5
<210> 18
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H HCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 18
Ala Arg Leu Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Gly Ala Arg Tyr Thr Met Asp
1 5 10 15
Tyr
<210> 19
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H LCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 19
Gln Asp Val Gly Thr Ala
1 5
<210> 20
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H LCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 20
Trp Ala Ser
1
<210> 21
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H LCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 21
Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr His Thr
1 5
<210> 22
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J HCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 22
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Trp
1 5
<210> 23
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J HCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 23
Ile Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr
1 5
<210> 24
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J HCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 24
Ala Arg Gly Gly Ile Tyr Tyr Gly Asn Tyr Asp Tyr Tyr Ala Met Asp
1 5 10 15
Tyr
<210> 25
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J LCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 25
Lys Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr
1 5 10
<210> 26
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J LCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 26
Arg Val Ser
1
<210> 27
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J LCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 27
Met Gln His Leu Glu Tyr Pro Phe Thr
1 5
<210> 28
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A HCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 28
Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Glu
1 5
<210> 29
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A HCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 29
Val Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr
1 5
<210> 30
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A HCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 30
Ala Arg His Gly Gly Ser Phe Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 31
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A LCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 31
Gln Asp Val Ser Thr Ala
1 5
<210> 32
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A LCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 32
Trp Ala Ser
1
<210> 33
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A LCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 33
Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Pro Thr
1 5
<210> 34
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A HCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 34
Asp Tyr Glu Met His
1 5
<210> 35
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A HCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 35
Gly Val Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Gly Tyr Asn Gln Lys Phe Arg
1 5 10 15
Gly
<210> 36
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A HCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 36
His Gly Gly Ser Phe Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 37
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A LCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 37
Lys Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala Val Ala
1 5 10
<210> 38
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A LCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 38
Trp Ala Ser Thr Arg His Thr
1 5
<210> 39
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A LCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 39
Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Pro Thr
1 5
<210> 40
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A HCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 40
Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
1 5
<210> 41
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A HCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 41
Asp Pro Glu Thr Gly Gly
1 5
<210> 42
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A HCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 42
His Gly Gly Ser Phe Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 43
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A LCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 43
Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala
1 5
<210> 44
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A LCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 44
Trp Ala Ser
1
<210> 45
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A LCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 45
His Tyr Ser Thr Pro Pro Thr
1 5
<210> 46
<211> 2
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A HCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 46
Asp Tyr
1
<210> 47
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A HCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 47
Asp Pro Glu Thr Gly Gly
1 5
<210> 48
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A HCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列定义)
<400> 48
His Gly Gly Ser Phe Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 49
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A LCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 49
Gln Asp Val Ser Thr Ala
1 5
<210> 50
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A LCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 50
Trp Ala Ser
1
<210> 51
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A LCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 51
His Tyr Ser Thr Pro Pro Thr
1 5
<210> 52
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A HCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 52
Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Glu Met His
1 5 10
<210> 53
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A HCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 53
Gly Val Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Gly Tyr Asn Gln Lys Phe Arg
1 5 10 15
Gly
<210> 54
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A HCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 54
Ala Arg His Gly Gly Ser Phe Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 55
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A LCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 55
Lys Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala Val Ala
1 5 10
<210> 56
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A LCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 56
Trp Ala Ser Thr Arg His Thr
1 5
<210> 57
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A LCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 57
Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Pro Thr
1 5
<210> 58
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B HCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 58
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly
1 5
<210> 59
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B HCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 59
Ile Ser Arg Gly Ser Ile Tyr Thr
1 5
<210> 60
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B HCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 60
Ala Arg Leu Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Gly Ala Arg Tyr Thr Met Asp
1 5 10 15
Tyr
<210> 61
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B LCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 61
Gln Asp Val Gly Thr Ala
1 5
<210> 62
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B LCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 62
Trp Ala Ser
1
<210> 63
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B LCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 63
Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr His Thr
1 5
<210> 64
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B HCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 64
Ser Tyr Gly Met Ser
1 5
<210> 65
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B HCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 65
Thr Ile Ser Arg Gly Ser Ile Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 66
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B HCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 66
Leu Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Gly Ala Arg Tyr Thr Met Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 67
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B LCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 67
Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala Val Ala
1 5 10
<210> 68
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B LCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 68
Trp Ala Ser Thr Arg His Thr
1 5
<210> 69
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B LCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 69
Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr His Thr
1 5
<210> 70
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B HCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 70
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
1 5
<210> 71
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B HCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 71
Ser Arg Gly Ser Ile Tyr
1 5
<210> 72
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B HCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 72
Leu Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Gly Ala Arg Tyr Thr Met Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 73
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B LCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 73
Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
1 5
<210> 74
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B LCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 74
Trp Ala Ser
1
<210> 75
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B LCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 75
Tyr Ser Ser Tyr His Thr
1 5
<210> 76
<211> 2
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B HCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 76
Ser Tyr
1
<210> 77
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B HCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 77
Ser Arg Gly Ser Ile Tyr
1 5
<210> 78
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B HCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列定义)
<400> 78
Leu Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Gly Ala Arg Tyr Thr Met Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 79
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B LCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 79
Gln Asp Val Gly Thr Ala
1 5
<210> 80
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B LCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 80
Trp Ala Ser
1
<210> 81
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B LCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 81
Tyr Ser Ser Tyr His Thr
1 5
<210> 82
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B HCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 82
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met Ser
1 5 10
<210> 83
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B HCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 83
Thr Ile Ser Arg Gly Ser Ile Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 84
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B HCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 84
Ala Arg Leu Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Gly Ala Arg Tyr Thr Met Asp
1 5 10 15
Tyr
<210> 85
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B LCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 85
Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala Val Ala
1 5 10
<210> 86
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B LCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 86
Trp Ala Ser Thr Arg His Thr
1 5
<210> 87
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B LCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 87
Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr His Thr
1 5
<210> 88
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C HCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 88
Gly Tyr Asn Phe Lys Ser Tyr Gly
1 5
<210> 89
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C HCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 89
Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asn Thr
1 5
<210> 90
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C HCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 90
Ala Arg Thr Tyr Gly Tyr Asp Ser Phe Pro Trp Phe Ala Tyr
1 5 10
<210> 91
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C LCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 91
Lys Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr
1 5 10
<210> 92
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C LCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 92
Arg Val Ser
1
<210> 93
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C LCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 93
Met Gln His Leu Glu Tyr Pro Phe Thr
1 5
<210> 94
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C HCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 94
Ser Tyr Gly Ile Ser
1 5
<210> 95
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C HCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 95
Glu Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asn Thr Tyr Tyr Asn Glu Lys Leu Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 96
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C HCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 96
Thr Tyr Gly Tyr Asp Ser Phe Pro Trp Phe Ala Tyr
1 5 10
<210> 97
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C LCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 97
Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Tyr
1 5 10 15
<210> 98
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C LCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 98
Arg Val Ser Asn Leu Ala Ser
1 5
<210> 99
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C LCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 99
Met Gln His Leu Glu Tyr Pro Phe Thr
1 5
<210> 100
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C HCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 100
Gly Tyr Asn Phe Lys Ser Tyr
1 5
<210> 101
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C HCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 101
Tyr Pro Gly Ser Gly Asn
1 5
<210> 102
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C HCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 102
Thr Tyr Gly Tyr Asp Ser Phe Pro Trp Phe Ala Tyr
1 5 10
<210> 103
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C LCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 103
Ser Lys Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr
1 5 10
<210> 104
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C LCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 104
Arg Val Ser
1
<210> 105
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C LCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 105
His Leu Glu Tyr Pro Phe Thr
1 5
<210> 106
<211> 2
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C HCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 106
Ser Tyr
1
<210> 107
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C HCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 107
Tyr Pro Gly Ser Gly Asn
1 5
<210> 108
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C HCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列定义)
<400> 108
Thr Tyr Gly Tyr Asp Ser Phe Pro Trp Phe Ala Tyr
1 5 10
<210> 109
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C LCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 109
Lys Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr
1 5 10
<210> 110
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C LCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 110
Trp Ala Ser
1
<210> 111
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C HCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 111
Gly Tyr Asn Phe Lys Ser Tyr Gly Ile Ser
1 5 10
<210> 112
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C HCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 112
Glu Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asn Thr Tyr Tyr Asn Glu Lys Leu Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 113
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C HCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 113
Ala Arg Thr Tyr Gly Tyr Asp Ser Phe Pro Trp Phe Ala Tyr
1 5 10
<210> 114
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C LCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 114
Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Tyr
1 5 10 15
<210> 115
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C LCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 115
Arg Val Ser Asn Leu Ala Ser
1 5
<210> 116
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C LCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 116
Met Gln His Leu Glu Tyr Pro Phe Thr
1 5
<210> 117
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D HCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 117
Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Glu
1 5
<210> 118
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D HCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 118
Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr
1 5
<210> 119
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D HCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 119
Thr Arg His Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 120
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D LCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 120
Gln Asp Val Ser Thr Ala
1 5
<210> 121
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D LCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 121
Trp Ala Ser
1
<210> 122
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D LCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 122
Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Pro Thr
1 5
<210> 123
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D HCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 123
Asp Tyr Glu Met His
1 5
<210> 124
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D HCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 124
Gly Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Gly Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 125
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D HCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 125
His Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5
<210> 126
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D LCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 126
Lys Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala Val Ala
1 5 10
<210> 127
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D LCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 127
Trp Ala Ser Thr Arg His Thr
1 5
<210> 128
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D LCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 128
Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Pro Thr
1 5
<210> 129
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D HCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 129
Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
1 5
<210> 130
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D HCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 130
Asp Pro Glu Thr Gly Gly
1 5
<210> 131
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D HCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 131
His Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5
<210> 132
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D LCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 132
Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala
1 5
<210> 133
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D LCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 133
Trp Ala Ser
1
<210> 134
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D LCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 134
His Tyr Ser Thr Pro Pro Thr
1 5
<210> 135
<211> 2
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D HCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 135
Asp Tyr
1
<210> 136
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D HCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 136
Asp Pro Glu Thr Gly Gly
1 5
<210> 137
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D HCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列定义)
<400> 137
His Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5
<210> 138
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D LCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 138
Gln Asp Val Ser Thr Ala
1 5
<210> 139
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D LCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 139
Trp Ala Ser
1
<210> 140
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D LCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 140
His Tyr Ser Thr Pro Pro Thr
1 5
<210> 141
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D HCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 141
Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Glu Met His
1 5 10
<210> 142
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D HCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 142
Gly Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Gly Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 143
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D HCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 143
Thr Arg His Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 144
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D LCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 144
Lys Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala Val Ala
1 5 10
<210> 145
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D LCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 145
Trp Ala Ser Thr Arg His Thr
1 5
<210> 146
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D LCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 146
Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Pro Thr
1 5
<210> 147
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E HCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 147
Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Glu
1 5
<210> 148
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E HCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 148
Ile Asp Pro Glu Ser Gly Gly Thr
1 5
<210> 149
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E HCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 149
Thr Arg Ser Gly Tyr Tyr Gly Ser Pro Leu Leu Asp Tyr
1 5 10
<210> 150
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E LCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 150
Ser Ser Val Ser Ser Ser Tyr
1 5
<210> 151
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E LCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 151
Ser Thr Ser
1
<210> 152
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E LCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 152
His Gln Tyr His Arg Ser Pro Pro Thr
1 5
<210> 153
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E HCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 153
Asp Tyr Glu Met His
1 5
<210> 154
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E HCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 154
Gly Ile Asp Pro Glu Ser Gly Gly Thr Gly Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 155
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E HCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 155
Ser Gly Tyr Tyr Gly Ser Pro Leu Leu Asp Tyr
1 5 10
<210> 156
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E LCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 156
Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser Tyr Leu His
1 5 10
<210> 157
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E LCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 157
Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser
1 5
<210> 158
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E LCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 158
His Gln Tyr His Arg Ser Pro Pro Thr
1 5
<210> 159
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E HCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 159
Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
1 5
<210> 160
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E HCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 160
Asp Pro Glu Ser Gly Gly
1 5
<210> 161
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E HCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 161
Ser Gly Tyr Tyr Gly Ser Pro Leu Leu Asp Tyr
1 5 10
<210> 162
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E LCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 162
Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser Tyr
1 5
<210> 163
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E LCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 163
Ser Thr Ser
1
<210> 164
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E LCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 164
Tyr His Arg Ser Pro Pro Thr
1 5
<210> 165
<211> 2
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E HCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 165
Asp Tyr
1
<210> 166
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E HCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 166
Asp Pro Glu Ser Gly Gly
1 5
<210> 167
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E HCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列定义)
<400> 167
Ser Gly Tyr Tyr Gly Ser Pro Leu Leu Asp Tyr
1 5 10
<210> 168
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E LCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 168
Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser Tyr
1 5
<210> 169
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E LCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 169
Ser Thr Ser
1
<210> 170
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E LCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 170
Tyr His Arg Ser Pro Pro Thr
1 5
<210> 171
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E HCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 171
Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Glu Met His
1 5 10
<210> 172
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E HCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 172
Gly Ile Asp Pro Glu Ser Gly Gly Thr Gly Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 173
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E HCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 173
Thr Arg Ser Gly Tyr Tyr Gly Ser Pro Leu Leu Asp Tyr
1 5 10
<210> 174
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E LCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 174
Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser Tyr Leu His
1 5 10
<210> 175
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E LCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 175
Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser
1 5
<210> 176
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E LCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 176
His Gln Tyr His Arg Ser Pro Pro Thr
1 5
<210> 177
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G HCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 177
Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Glu
1 5
<210> 178
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G HCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 178
Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr
1 5
<210> 179
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G HCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 179
Thr Arg Trp Gly Ala Ile Thr Ser Phe Val Ala Leu Arg Gly Phe Ala
1 5 10 15
Tyr
<210> 180
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G LCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 180
Gln Ser Leu Leu Asn Ser Gly Asn Gln Lys Asn Tyr
1 5 10
<210> 181
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G LCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 181
Gly Ala Ser
1
<210> 182
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G LCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 182
Gln Asn Asp His Ser Tyr Pro Pro Thr
1 5
<210> 183
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G HCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 183
Asp Tyr Glu Met His
1 5
<210> 184
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G HCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 184
Gly Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 185
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G HCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 185
Trp Gly Ala Ile Thr Ser Phe Val Ala Leu Arg Gly Phe Ala Tyr
1 5 10 15
<210> 186
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G LCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 186
Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu
1 5 10 15
Ala
<210> 187
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G LCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 187
Gly Ala Ser Thr Arg Glu Ser
1 5
<210> 188
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G LCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 188
Gln Asn Asp His Ser Tyr Pro Pro Thr
1 5
<210> 189
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G HCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 189
Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
1 5
<210> 190
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G HCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 190
Asp Pro Glu Thr Gly Gly
1 5
<210> 191
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G HCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 191
Trp Gly Ala Ile Thr Ser Phe Val Ala Leu Arg Gly Phe Ala Tyr
1 5 10 15
<210> 192
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G LCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 192
Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser Gly Asn Gln Lys Asn Tyr
1 5 10
<210> 193
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G LCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 193
Gly Ala Ser
1
<210> 194
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G LCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 194
Asp His Ser Tyr Pro Pro Thr
1 5
<210> 195
<211> 2
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G HCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 195
Asp Tyr
1
<210> 196
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G HCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 196
Asp Pro Glu Thr Gly Gly
1 5
<210> 197
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G HCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列定义)
<400> 197
Trp Gly Ala Ile Thr Ser Phe Val Ala Leu Arg Gly Phe Ala Tyr
1 5 10 15
<210> 198
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G LCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 198
Gln Ser Leu Leu Asn Ser Gly Asn Gln Lys Asn Tyr
1 5 10
<210> 199
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G LCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 199
Gly Ala Ser
1
<210> 200
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G LCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 200
Asp His Ser Tyr Pro Pro Thr
1 5
<210> 201
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G HCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 201
Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Glu Met His
1 5 10
<210> 202
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G HCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 202
Gly Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 203
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G HCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 203
Thr Arg Trp Gly Ala Ile Thr Ser Phe Val Ala Leu Arg Gly Phe Ala
1 5 10 15
Tyr
<210> 204
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G LCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 204
Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu
1 5 10 15
Ala
<210> 205
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G LCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 205
Gly Ala Ser Thr Arg Glu Ser
1 5
<210> 206
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G LCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 206
Gln Asn Asp His Ser Tyr Pro Pro Thr
1 5
<210> 207
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F HCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 207
Asp Tyr Tyr Ile Asn
1 5
<210> 208
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F HCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 208
Trp Ile Phe Pro Gly Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Glu Lys Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 209
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F HCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 209
Tyr Gly Ser Ser Tyr Arg Tyr Phe Asp Val
1 5 10
<210> 210
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F LCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 210
Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met His
1 5 10
<210> 211
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F LCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 211
Ala Thr Ser Tyr Leu Ala Ser
1 5
<210> 212
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F LCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 212
Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr
1 5
<210> 213
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F HCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 213
Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
1 5
<210> 214
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F HCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 214
Phe Pro Gly Ser Gly Ser
1 5
<210> 215
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F HCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 215
Tyr Gly Ser Ser Tyr Arg Tyr Phe Asp Val
1 5 10
<210> 216
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F LCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 216
Ser Ser Ser Val Ser Tyr
1 5
<210> 217
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F LCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 217
Ala Thr Ser
1
<210> 218
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F LCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 218
Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr
1 5
<210> 219
<211> 2
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F HCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 219
Asp Tyr
1
<210> 220
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F HCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 220
Phe Pro Gly Ser Gly Ser
1 5
<210> 221
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F HCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列定义)
<400> 221
Tyr Gly Ser Ser Tyr Arg Tyr Phe Asp Val
1 5 10
<210> 222
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F HCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列定义)
<400> 222
Ser Ser Val Ser Tyr
1 5
<210> 223
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F LCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 223
Ala Thr Ser
1
<210> 224
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F LCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 224
Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr
1 5
<210> 225
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F HCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 225
Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Tyr Ile Asn
1 5 10
<210> 226
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F HCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 226
Trp Ile Phe Pro Gly Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Glu Lys Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 227
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F HCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列
<400> 227
Ala Asp Tyr Gly Ser Ser Tyr Arg Tyr Phe Asp Val
1 5 10
<210> 228
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F LCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 228
Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met His
1 5 10
<210> 229
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F LCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 229
Ala Thr Ser Tyr Leu Ala Ser
1 5
<210> 230
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F LCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 230
Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr
1 5
<210> 231
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H HCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 231
Ser Tyr Gly Met Ser
1 5
<210> 232
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H HCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 232
Thr Ile Ser Arg Arg Ser Ile Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 233
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H HCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 233
Leu Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Gly Ala Arg Tyr Thr Met Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 234
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H LCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 234
Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala Val Ala
1 5 10
<210> 235
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H LCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 235
Trp Ala Ser Thr Arg His Thr
1 5
<210> 236
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H LCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 236
Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr His Thr
1 5
<210> 237
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H HCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 237
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
1 5
<210> 238
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H HCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 238
Ser Arg Arg Ser Ile Tyr
1 5
<210> 239
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H HCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 239
Leu Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Gly Ala Arg Tyr Thr Met Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 240
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H LCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 240
Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
1 5
<210> 241
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H LCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 241
Trp Ala Ser
1
<210> 242
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H LCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 242
Tyr Ser Ser Tyr His Thr
1 5
<210> 243
<211> 2
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H HCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 243
Ser Tyr
1
<210> 244
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H HCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 244
Ser Arg Arg Ser Ile Tyr
1 5
<210> 245
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H HCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列定义)
<400> 245
Leu Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Gly Ala Arg Tyr Thr Met Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 246
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H LCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 246
Gln Asp Val Gly Thr Ala
1 5
<210> 247
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H LCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 247
Trp Ala Ser
1
<210> 248
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H LCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 248
Tyr Ser Ser Tyr His Thr
1 5
<210> 249
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H HCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 249
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met Ser
1 5 10
<210> 250
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H HCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 250
Thr Ile Ser Arg Arg Ser Ile Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 251
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H HCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 251
Ala Arg Leu Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Gly Ala Arg Tyr Thr Met Asp
1 5 10 15
Tyr
<210> 252
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H LCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 252
Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala Val Ala
1 5 10
<210> 253
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H LCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 253
Trp Ala Ser Thr Arg His Thr
1 5
<210> 254
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H LCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 254
Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr His Thr
1 5
<210> 255
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J HCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 255
Ser Tyr Trp Met His
1 5
<210> 256
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J HCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 256
Asn Ile Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Lys
1 5 10 15
Ser
<210> 257
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J HCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 257
Gly Gly Ile Tyr Tyr Gly Asn Tyr Asp Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 258
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J LCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 258
Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Tyr
1 5 10 15
<210> 259
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J LCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 259
Arg Val Ser Asn Leu Ala Ser
1 5
<210> 260
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J LCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 260
Met Gln His Leu Glu Tyr Pro Phe Thr
1 5
<210> 261
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J HCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 261
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
1 5
<210> 262
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J HCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 262
Asn Pro Ser Asn Gly Gly
1 5
<210> 263
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J HCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 263
Gly Gly Ile Tyr Tyr Gly Asn Tyr Asp Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 264
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J LCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 264
Ser Lys Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr
1 5 10
<210> 265
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J LCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 265
Arg Val Ser
1
<210> 266
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J LCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 266
His Leu Glu Tyr Pro Phe Thr
1 5
<210> 267
<211> 2
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J HCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 267
Ser Tyr
1
<210> 268
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J HCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 268
Asn Pro Ser Asn Gly Gly
1 5
<210> 269
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J HCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列定义)
<400> 269
Gly Gly Ile Tyr Tyr Gly Asn Tyr Asp Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 270
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J LCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 270
Lys Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr
1 5 10
<210> 271
<211> 3
<212> PRT
<213> mAb_J 人工序列
<220>
<223> mAb_J LCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 271
Arg Val Ser
1
<210> 272
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J LCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 272
His Leu Glu Tyr Pro Phe Thr
1 5
<210> 273
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J HCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 273
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Trp Met His
1 5 10
<210> 274
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J HCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 274
Asn Ile Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Lys
1 5 10 15
Ser
<210> 275
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J HCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 275
Ala Arg Gly Gly Ile Tyr Tyr Gly Asn Tyr Asp Tyr Tyr Ala Met Asp
1 5 10 15
Tyr
<210> 276
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J LCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 276
Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Tyr
1 5 10 15
<210> 277
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J LCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 277
Arg Val Ser Asn Leu Ala Ser
1 5
<210> 278
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J LCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 278
Met Gln His Leu Glu Tyr Pro Phe Thr
1 5
<210> 279
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K HCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 279
Gly Tyr Ala Phe Thr Asn Tyr Leu
1 5
<210> 280
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K HCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 280
Ile Asn Pro Gly Ser Gly Gly Thr
1 5
<210> 281
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K HCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 281
Ala Arg Trp Gly Phe Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 282
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K LCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 282
Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
1 5
<210> 283
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K LCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 283
Ala Ala Ser
1
<210> 284
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K LCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 284
Leu Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Leu Thr
1 5
<210> 285
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K HCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 285
Asn Tyr Leu Ile Glu
1 5
<210> 286
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K HCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 286
Val Ile Asn Pro Gly Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 287
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K HCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 287
Trp Gly Phe Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5
<210> 288
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K LCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 288
Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr Leu Ser
1 5 10
<210> 289
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K LCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 289
Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser
1 5
<210> 290
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K LCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 290
Leu Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Leu Thr
1 5
<210> 291
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K HCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 291
Gly Tyr Ala Phe Thr Asn Tyr
1 5
<210> 292
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K HCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 292
Ile Asn Pro Gly Ser Gly Gly
1 5
<210> 293
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K HCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 293
Trp Gly Phe Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5
<210> 294
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K LCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 294
Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
1 5
<210> 295
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K LCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 295
Ala Ala Ser
1
<210> 296
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K LCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 296
Tyr Ala Ser Tyr Pro Leu Thr
1 5
<210> 297
<211> 2
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K HCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 297
Asn Tyr
1
<210> 298
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K HCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 298
Ile Asn Pro Gly Ser Gly Gly
1 5
<210> 299
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K HCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列定义)
<400> 299
Trp Gly Phe Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5
<210> 300
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K LCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 300
Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
1 5
<210> 301
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K LCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 301
Ala Ala Ser
1
<210> 302
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K LCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 302
Tyr Ala Ser Tyr Pro Leu Thr
1 5
<210> 303
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K HCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 303
Gly Tyr Ala Phe Thr Asn Tyr Leu Ile Glu
1 5 10
<210> 304
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K HCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 304
Val Ile Asn Pro Gly Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 305
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K HCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 305
Ala Arg Trp Gly Phe Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 306
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K LCDR1 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 306
Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr Leu Ser
1 5 10
<210> 307
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K LCDR2 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 307
Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser
1 5
<210> 308
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K LCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
组合重叠序列)
<400> 308
Leu Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Leu Thr
1 5
<210> 309
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A VH 氨基酸序列 (预测成熟)
<400> 309
Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Glu Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Gly Val Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Gly Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Arg Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Gly Ser Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 310
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_A VL 氨基酸序列 (预测成熟)
<400> 310
Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Glu Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Gly Val Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Gly Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Arg Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Gly Ser Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 311
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B VH 氨基酸序列 (预测成熟)
<400> 311
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Thr Ile Ser Arg Gly Ser Ile Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Leu Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Gly Ala Arg Tyr Thr Met Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 312
<211> 106
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_B VL 氨基酸序列 (预测成熟)
<400> 312
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Val Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr His Thr
85 90 95
Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105
<210> 313
<211> 121
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C VH 氨基酸序列 (预测成熟)
<400> 313
Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Asn Phe Lys Ser Tyr
20 25 30
Gly Ile Ser Trp Val Lys Gln Arg Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asn Thr Tyr Tyr Asn Glu Lys Leu
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Thr Tyr Gly Tyr Asp Ser Phe Pro Trp Phe Ala Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 314
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C VL 氨基酸序列 (预测成熟)
<400> 314
Asp Ile Val Met Thr Gln Ala Ala Pro Ser Val Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Ser Val Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Tyr Trp Phe Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Val Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ala Phe Thr Leu Arg Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Glu Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln His
85 90 95
Leu Glu Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 315
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D VH 氨基酸序列 (预测成熟)
<400> 315
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Glu Met His Trp Val Gln Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Gly Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Gly Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Thr Arg His Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 316
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_D VL 氨基酸序列 (预测成熟)
<400> 316
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Leu Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 317
<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E VH 氨基酸序列 (预测成熟)
<400> 317
Glu Val Lys Leu Leu Glu Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Glu Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Gly Ile Asp Pro Glu Ser Gly Gly Thr Gly Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Thr Arg Ser Gly Tyr Tyr Gly Ser Pro Leu Leu Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 318
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_E VL 氨基酸序列 (预测成熟)
<400> 318
Gln Ile Val Leu Ser Gln Ser Pro Ala Ile Met Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Val Thr Met Thr Cys Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser
20 25 30
Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Ser Ser Pro Lys Leu Trp
35 40 45
Ile Tyr Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Met Glu
65 70 75 80
Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys His Gln Tyr His Arg Ser Pro
85 90 95
Pro Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 319
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G VH 氨基酸序列 (预测成熟)
<400> 319
Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Glu Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Gly Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Trp Gly Ala Ile Thr Ser Phe Val Ala Leu Arg Gly Phe Ala
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 320
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_G VL 氨基酸序列 (预测成熟)
<400> 320
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Val Ser Ala Gly
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser
20 25 30
Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn
85 90 95
Asp His Ser Tyr Pro Pro Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu
100 105 110
Lys
<210> 321
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F VH 氨基酸序列 (预测成熟)
<400> 321
Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Tyr Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Trp Ile Phe Pro Gly Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Leu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Asp Tyr Gly Ser Ser Tyr Arg Tyr Phe Asp Val Trp Gly Ala Gly
100 105 110
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 322
<211> 106
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_F VL 氨基酸序列 (预测成熟)
<400> 322
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Ile Leu Ser Ala Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Ser Ser Pro Lys Pro Trp Ile Tyr
35 40 45
Ala Thr Ser Tyr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Gly Arg Val Glu Ala Glu
65 70 75 80
Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr
85 90 95
Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105
<210> 323
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H VH 氨基酸序列 (预测成熟)
<400> 323
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Thr Ile Ser Arg Arg Ser Ile Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60
Gln Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Leu Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Gly Ala Arg Tyr Thr Met Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 324
<211> 106
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_H L 氨基酸序列 (预测成熟)
<400> 324
Asp Ile Lys Met Thr Gln Ser Pro Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Val Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr His Thr
85 90 95
Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 325
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J VH 氨基酸序列 (预测成熟)
<400> 325
Gln Val His Leu Gln Gln Ser Gly Thr Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Glu Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Asn Ile Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Ile Tyr Tyr Gly Asn Tyr Asp Tyr Tyr Ala Met Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 326
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_J VL 氨基酸序列 (预测成熟)
<400> 326
Asp Ile Val Met Thr Gln Ala Ala Pro Ser Val Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Ser Val Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Tyr Trp Phe Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Val Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ala Phe Thr Leu Arg Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln His
85 90 95
Leu Glu Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 327
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K VH 氨基酸序列 (预测成熟)
<400> 327
Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Thr
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Leu Ile Glu Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Val Ile Asn Pro Gly Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Trp Gly Phe Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Ser Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 328
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_K VL 氨基酸序列 (预测成熟)
<400> 328
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Val Ser Leu Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro Lys Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Ser Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Asp Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 329
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab HCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 329
Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Glu
1 5
<210> 330
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab HCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Val或Ile
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Thr或Ser
<400> 330
Xaa Asp Pro Glu Xaa Gly Gly Thr
1 5
<210> 331
<211> 1
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab HCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 331
Tyr
1
<210> 332
<211> 1
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab LCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 332
Ser
1
<210> 333
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab LCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Trp, Ser或Gly
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Ala或Thr
<400> 333
Xaa Xaa Ser
1
<210> 334
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab LCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Gln或His
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Gln或Asn
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = His, Tyr或Asp
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Tyr或His
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Ser或Arg
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Thr, Ser或Tyr
<400> 334
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Pro Thr
1 5
<210> 335
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab HCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 335
Asp Tyr Glu Met His
1 5
<210> 336
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab HCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Val或Ile
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Thr或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (10)..(10)
<223> Xaa = Gly或Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(16)
<223> Xaa = Arg或Lys
<400> 336
Gly Xaa Asp Pro Glu Xaa Gly Gly Thr Xaa Tyr Asn Gln Lys Phe Xaa
1 5 10 15
Gly
<210> 337
<211> 1
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab HCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 337
Tyr
1
<210> 338
<211> 1
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab LCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 338
Ser
1
<210> 339
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab LCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Trp, Ser或Gly
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Ala或Thr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Thr或Asn
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Arg或Leu
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = His, Ala或Glu
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (7)..(7)
<223> Xaa = Thr或Ser
<400> 339
Xaa Xaa Ser Xaa Xaa Xaa Xaa
1 5
<210> 340
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab LCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Gln或His
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Gln或Asn
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = His, Tyr或Asp
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Tyr或His
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Ser或Arg
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Thr, Ser或Tyr
<400> 340
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Pro Thr
1 5
<210> 341
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab HCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 341
Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
1 5
<210> 342
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab HCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Thr或Ser
<400> 342
Asp Pro Glu Xaa Gly Gly
1 5
<210> 343
<211> 1
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab HCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 343
Tyr
1
<210> 344
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab LCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Gln或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Asp或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Val或Leu
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Ser或Leu
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Thr, Ser或Asn
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (7)..(7)
<223> Xaa = Ala或Ser
<400> 344
Ser Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
1 5
<210> 345
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab LCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Trp, Ser或Gly
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Ala或Thr
<400> 345
Xaa Xaa Ser
1
<210> 346
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab LCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = His, Tyr,或Asp
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Tyr或His
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Ser或Arg
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Thr, Ser或Tyr
<400> 346
Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Pro Thr
1 5
<210> 347
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab HCDR1 氨基酸序列 (组合重叠)
<400> 347
Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Glu Met His
1 5 10
<210> 348
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab HCDR2 氨基酸序列 (组合重叠)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Val或Ile
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Thr或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (10)..(10)
<223> Xaa = Gly或Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(16)
<223> Xaa = Arg或Lys
<400> 348
Gly Xaa Asp Pro Glu Xaa Gly Gly Thr Xaa Tyr Asn Gln Lys Phe Xaa
1 5 10 15
Gly
<210> 349
<211> 1
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab HCDR3 氨基酸序列 (组合重叠)
<400> 349
Tyr
1
<210> 350
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab LCDR1 氨基酸序列 (组合重叠)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Lys或Thr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Ala或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Gln或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Asp或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Val或Leu
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (7)..(7)
<223> Xaa = Ser或Leu
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (8)..(8)
<223> Xaa = Thr, Ser或Asn
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (9)..(9)
<223> Xaa = Ala或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (10)..(10)
<223> Xaa = Val, Tyr或Gly
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (11)..(11)
<223> Xaa = Ala, Leu,或Asn
<400> 350
Xaa Xaa Ser Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
1 5 10
<210> 351
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab LCDR2 氨基酸序列 (组合重叠)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Trp, Ser或Gly
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Ala或Thr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Thr或Asn
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Arg或Leu
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = His, Ala或Glu
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (7)..(7)
<223> Xaa = Thr或Ser
<400> 351
Xaa Xaa Ser Xaa Xaa Xaa Xaa
1 5
<210> 352
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab LCDR3 氨基酸序列 (组合重叠)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Gln或His
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Gln或Asn
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = His, Tyr或Asp
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Tyr或His
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Ser或Arg
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Thr, Ser或Tyr
<400> 352
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Pro Thr
1 5
<210> 353
<211> 2
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab HCDR1 氨基酸序列 (common sequence)
<400> 353
Asp Tyr
1
<210> 354
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab HCDR2 氨基酸序列 (common sequence)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Thr或Ser
<400> 354
Asp Pro Glu Xaa Gly Gly
1 5
<210> 355
<211> 1
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab HCDR3 氨基酸序列 (common sequence)
<400> 355
Tyr
1
<210> 356
<211> 1
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab LCDR1 氨基酸序列 (common sequence)
<400> 356
Ser
1
<210> 357
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab LCDR2 氨基酸序列 (common sequence)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Trp, Ser或Gly
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Ala或Thr
<400> 357
Xaa Xaa Ser
1
<210> 358
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group I_Ab LCDR3 氨基酸序列 (共有序列)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = His, Tyr,或Asp
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Tyr或His
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Ser或Arg
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Thr, Ser或Tyr
<400> 358
Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Pro Thr
1 5
<210> 359
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab HCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 359
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly
1 5
<210> 360
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab HCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Gly或Arg
<400> 360
Ile Ser Arg Xaa Ser Ile Tyr Thr
1 5
<210> 361
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab HCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 361
Ala Arg Leu Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Gly Ala Arg Tyr Thr Met Asp
1 5 10 15
Tyr
<210> 362
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab LCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 362
Gln Asp Val Gly Thr Ala
1 5
<210> 363
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab LCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 363
Trp Ala Ser
1
<210> 364
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab LCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 364
Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr His Thr
1 5
<210> 365
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab HCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 365
Ser Tyr Gly Met Ser
1 5
<210> 366
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab HCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Gly或Arg
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(16)
<223> Xaa = Lys或Gln
<400> 366
Thr Ile Ser Arg Xaa Ser Ile Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Xaa
1 5 10 15
Gly
<210> 367
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab HCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 367
Leu Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Gly Ala Arg Tyr Thr Met Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 368
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab LCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 368
Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala Val Ala
1 5 10
<210> 369
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab LCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 369
Trp Ala Ser Thr Arg His Thr
1 5
<210> 370
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab LCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 370
Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr His Thr
1 5
<210> 371
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab HCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 371
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
1 5
<210> 372
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab HCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Gly或Arg
<400> 372
Ser Arg Xaa Ser Ile Tyr
1 5
<210> 373
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab HCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 373
Leu Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Gly Ala Arg Tyr Thr Met Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 374
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab LCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 374
Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
1 5
<210> 375
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab LCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 375
Trp Ala Ser
1
<210> 376
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab LCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 376
Tyr Ser Ser Tyr His Thr
1 5
<210> 377
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab HCDR1 氨基酸序列 (组合重叠)
<400> 377
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met Ser
1 5 10
<210> 378
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab HCDR2 氨基酸序列 (组合重叠)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Gly或Arg
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(16)
<223> Xaa = Lys或Gln
<400> 378
Thr Ile Ser Arg Xaa Ser Ile Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Xaa
1 5 10 15
Gly
<210> 379
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab HCDR3 氨基酸序列 (组合重叠)
<400> 379
Ala Arg Leu Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Gly Ala Arg Tyr Thr Met Asp
1 5 10 15
Tyr
<210> 380
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab LCDR1 氨基酸序列 (组合重叠)
<400> 380
Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala Val Ala
1 5 10
<210> 381
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab LCDR2 氨基酸序列 (组合重叠)
<400> 381
Trp Ala Ser Thr Arg His Thr
1 5
<210> 382
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab LCDR3 氨基酸序列 (组合重叠)
<400> 382
Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr His Thr
1 5
<210> 383
<211> 2
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab HCDR1 氨基酸序列 (共有序列)
<400> 383
Ser Tyr
1
<210> 384
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab HCDR2 氨基酸序列 (共有序列)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Gly或Arg
<400> 384
Ser Arg Xaa Ser Ile Tyr
1 5
<210> 385
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab HCDR3 氨基酸序列 (共有序列)
<400> 385
Leu Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Gly Ala Arg Tyr Thr Met Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 386
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab LCDR1 氨基酸序列 (共有序列)
<400> 386
Gln Asp Val Gly Thr Ala
1 5
<210> 387
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab LCDR2 氨基酸序列 (共有序列)
<400> 387
Trp Ala Ser
1
<210> 388
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group II_Ab LCDR3 氨基酸序列 (共有序列)
<400> 388
Tyr Ser Ser Tyr His Thr
1 5
<210> 389
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab HCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Asn或Thr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Lys或Thr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Ser或Asp
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (8)..(8)
<223> Xaa = Gly或Tyr
<400> 389
Gly Tyr Xaa Phe Xaa Xaa Tyr Xaa
1 5
<210> 390
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab HCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Tyr或Phe
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (7)..(7)
<223> Xaa = Asn或Ser
<400> 390
Ile Xaa Pro Gly Ser Gly Xaa Thr
1 5
<210> 391
<211> 2
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab HCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 391
Tyr Gly
1
<210> 392
<211> 1
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab LCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 392
Ser
1
<210> 393
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab LCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Arg或Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Val或Thr
<400> 393
Xaa Xaa Ser
1
<210> 394
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab LCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Met或Gln
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = His或Trp
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Leu或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Glu或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Tyr或Asn
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (8)..(8)
<223> Xaa = Phe或Leu
<400> 394
Xaa Gln Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Xaa Thr
1 5
<210> 395
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab HCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Ser或Asp
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Gly或Tyr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Ser或Asn
<400> 395
Xaa Tyr Xaa Ile Xaa
1 5
<210> 396
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab HCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Glu或Trp
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Tyr或Phe
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (8)..(8)
<223> Xaa = Asn或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (15)..(15)
<223> Xaa = Leu或Phe
<400> 396
Xaa Ile Xaa Pro Gly Ser Gly Xaa Thr Tyr Tyr Asn Glu Lys Xaa Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 397
<211> 2
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab HCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 397
Tyr Gly
1
<210> 398
<211> 2
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab LCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<400> 398
Ser Ser
1
<210> 399
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab LCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Arg或Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Val或Thr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Asn或Tyr
<400> 399
Xaa Xaa Ser Xaa Leu Ala Ser
1 5
<210> 400
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab LCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Met或Gln
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = His或Trp
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Leu或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Glu或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Tyr或Asn
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (8)..(8)
<223> Xaa = Phe或Leu
<400> 400
Xaa Gln Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Xaa Thr
1 5
<210> 401
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab HCDR1 氨基酸序列 (Chothia
定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Asn或Thr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Lys或Thr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Ser或Asp
<400> 401
Gly Tyr Xaa Phe Xaa Xaa Tyr
1 5
<210> 402
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab HCDR2 氨基酸序列 (Chothia
定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Tyr或Phe
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Asn或Ser
<400> 402
Xaa Pro Gly Ser Gly Xaa
1 5
<210> 403
<211> 2
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab HCDR3 氨基酸序列 (Chothia
定义)
<400> 403
Tyr Gly
1
<210> 404
<211> 1
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab LCDR1 氨基酸序列 (Chothia
定义)
<400> 404
Ser
1
<210> 405
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab LCDR2 氨基酸序列 (Chothia
定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Arg或Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Val或Thr
<400> 405
Xaa Xaa Ser
1
<210> 406
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab LCDR3 氨基酸序列 (Chothia
定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = His或Trp
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Leu或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Glu或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Tyr或Asn
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Phe或Leu
<400> 406
Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Xaa Thr
1 5
<210> 407
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab HCDR1 氨基酸序列 (组合重叠)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Asn或Thr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Lys或Thr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Ser或Asp
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (8)..(8)
<223> Xaa = Gly或Tyr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (10)..(10)
<223> Xaa = Ser或Asn
<400> 407
Gly Tyr Xaa Phe Xaa Xaa Tyr Xaa Ile Xaa
1 5 10
<210> 408
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab HCDR2 氨基酸序列 (组合重叠)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Glu或Trp
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Tyr或Phe
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (8)..(8)
<223> Xaa = Asn或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (15)..(15)
<223> Xaa = Leu或Phe
<400> 408
Xaa Ile Xaa Pro Gly Ser Gly Xaa Thr Tyr Tyr Asn Glu Lys Xaa Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 409
<211> 2
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab HCDR3 氨基酸序列 (组合重叠)
<400> 409
Tyr Gly
1
<210> 410
<211> 2
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab LCDR1 氨基酸序列 (组合重叠)
<400> 410
Ser Ser
1
<210> 411
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab LCDR2 氨基酸序列 (组合重叠)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Arg或Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Val或Thr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Asn或Tyr
<400> 411
Xaa Xaa Ser Xaa Leu Ala Ser
1 5
<210> 412
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab LCDR3 氨基酸序列 (组合重叠)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Met或Gln
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = His或Trp
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Leu或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Glu或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Tyr或Asn
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (8)..(8)
<223> Xaa = Phe或Leu
<400> 412
Xaa Gln Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Xaa Thr
1 5
<210> 413
<211> 2
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab HCDR1 氨基酸序列 (共有序列)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Ser或Asp
<400> 413
Xaa Tyr
1
<210> 414
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab HCDR2 氨基酸序列 (共有序列)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Tyr或Phe
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Asn或Ser
<400> 414
Xaa Pro Gly Ser Gly Xaa
1 5
<210> 415
<211> 2
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab HCDR3 氨基酸序列 (共有序列)
<400> 415
Tyr Gly
1
<210> 416
<211> 1
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab LCDR1 氨基酸序列 (共有序列)
<400> 416
Ser
1
<210> 417
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab LCDR2 氨基酸序列 (共有序列)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Trp或Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Ala或Thr
<400> 417
Xaa Xaa Ser
1
<210> 418
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group III_Ab LCDR3 氨基酸序列 (共有序列)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = His或Trp
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Leu或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Glu或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Tyr或Asn
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Phe或Leu
<400> 418
Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Xaa Thr
1 5
<210> 419
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab HCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Thr或Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Ser或Asn
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (8)..(8)
<223> Xaa = Trp或Leu
<400> 419
Gly Tyr Xaa Phe Thr Xaa Tyr Xaa
1 5
<210> 420
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab HCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Ser或Gly
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Asn或Ser
<400> 420
Ile Asn Pro Xaa Xaa Gly Gly Thr
1 5
<210> 421
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab HCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Gly或Trp
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Ile或Phe
<400> 421
Ala Arg Xaa Gly Xaa Tyr Tyr
1 5
<210> 422
<211> 1
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab LCDR1 氨基酸序列 (IMGT定义)
<400> 422
Ser
1
<210> 423
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab LCDR2 氨基酸序列 (IMGT定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Arg或Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Val或Ala
<400> 423
Xaa Xaa Ser
1
<210> 424
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab LCDR3 氨基酸序列 (IMGT定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Met或Leu
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = His或Tyr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Leu或Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Glu或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (8)..(8)
<223> Xaa = Phe或Leu
<400> 424
Xaa Gln Xaa Xaa Xaa Tyr Pro Xaa Thr
1 5
<210> 425
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab HCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Ser或Asn
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Trp或Leu
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Met或Ile
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = His或Glu
<400> 425
Xaa Tyr Xaa Xaa Xaa
1 5
<210> 426
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab HCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Asn或Val
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Ser或Gly
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Asn或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (17)..(17)
<223> Xaa = Ser或Gly
<400> 426
Xaa Ile Asn Pro Xaa Xaa Gly Gly Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Lys
1 5 10 15
Xaa
<210> 427
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab HCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Ile或Phe
<400> 427
Gly Xaa Tyr Tyr
1
<210> 428
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab LCDR1 氨基酸序列 (Kabat定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Ser或Ala
<400> 428
Arg Xaa Ser
1
<210> 429
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab LCDR2 氨基酸序列 (Kabat定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Arg或Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Val或Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Asn或Thr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Ala或Asp
<400> 429
Xaa Xaa Ser Xaa Leu Xaa Ser
1 5
<210> 430
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab LCDR3 氨基酸序列 (Kabat定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Met或Leu
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = His或Tyr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Leu或Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Glu或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (8)..(8)
<223> Xaa = Phe或Leu
<400> 430
Xaa Gln Xaa Xaa Xaa Tyr Pro Xaa Thr
1 5
<210> 431
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab HCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Thr或Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Ser或Asn
<400> 431
Gly Tyr Xaa Phe Thr Xaa Tyr
1 5
<210> 432
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab HCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Ser或Gly
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Asn或Ser
<400> 432
Asn Pro Xaa Xaa Gly Gly
1 5
<210> 433
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab HCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Ile或Phe
<400> 433
Gly Xaa Tyr Tyr
1
<210> 434
<211> 1
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab LCDR1 氨基酸序列 (Chothia定义)
<400> 434
Ser
1
<210> 435
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab LCDR2 氨基酸序列 (Chothia定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Arg或Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Val或Ala
<400> 435
Xaa Xaa Ser
1
<210> 436
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab LCDR3 氨基酸序列 (Chothia定义)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = His或Tyr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Leu或Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Glu或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Phe或Leu
<400> 436
Xaa Xaa Xaa Tyr Pro Xaa Thr
1 5
<210> 437
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab HCDR1 氨基酸序列 (组合重叠)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Thr或Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Ser或Asn
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (8)..(8)
<223> Xaa = Trp或Leu
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (9)..(9)
<223> Xaa = Met或Ile
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (10)..(10)
<223> Xaa = His或Glu
<400> 437
Gly Tyr Xaa Phe Thr Xaa Tyr Xaa Xaa Xaa
1 5 10
<210> 438
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab HCDR2 氨基酸序列 (组合重叠)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Asn或Val
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Ser或Gly
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Asn或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (17)..(17)
<223> Xaa = Ser或Gly
<400> 438
Xaa Ile Asn Pro Xaa Xaa Gly Gly Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Lys
1 5 10 15
Xaa
<210> 439
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab HCDR3 氨基酸序列 (组合重叠)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Gly或Trp
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Ile或Phe
<400> 439
Ala Arg Xaa Gly Xaa Tyr Tyr
1 5
<210> 440
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab LCDR1 氨基酸序列 (组合重叠)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Ser或Ala
<400> 440
Arg Xaa Ser
1
<210> 441
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab LCDR2 氨基酸序列 (组合重叠)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Arg或Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Val或Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Asn或Thr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Ala或Asp
<400> 441
Xaa Xaa Ser Xaa Leu Xaa Ser
1 5
<210> 442
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab LCDR3 氨基酸序列 (组合重叠)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Met或Leu
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = His或Tyr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Leu或Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Glu或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (8)..(8)
<223> Xaa = Phe或Leu
<400> 442
Xaa Gln Xaa Xaa Xaa Tyr Pro Xaa Thr
1 5
<210> 443
<211> 2
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab HCDR1 氨基酸序列 (共有序列)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Ser或Asn
<400> 443
Xaa Tyr
1
<210> 444
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab HCDR2 氨基酸序列 (共有序列)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Ser或Gly
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = Asn或Ser
<400> 444
Asn Pro Xaa Xaa Gly Gly
1 5
<210> 445
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab HCDR3 氨基酸序列 (共有序列)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Ile或Phe
<400> 445
Gly Xaa Tyr Tyr
1
<210> 446
<211> 1
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab LCDR1 氨基酸序列 (共有序列)
<400> 446
Ser
1
<210> 447
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab LCDR2 氨基酸序列 (共有序列)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Arg或Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Val或Ala
<400> 447
Xaa Xaa Ser
1
<210> 448
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Group IV_Ab LCDR3 氨基酸序列 (共有序列)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = His或Tyr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Leu或Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = Glu或Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> Xaa = Phe或Leu
<400> 448
Xaa Xaa Xaa Tyr Pro Xaa Thr
1 5
<210> 449
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体 A HC
<400> 449
Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Glu Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Gly Val Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Gly Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Arg Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Gly Ser Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr Ala Pro Ser Val Tyr
115 120 125
Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp Thr Thr Gly Ser Ser Val Thr Leu
130 135 140
Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Leu Thr Trp
145 150 155 160
Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
165 170 175
Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Thr Ser Ser
180 185 190
Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser
195 200 205
Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Glu Pro Arg Gly Pro Thr Ile Lys
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro Ala Pro Asn Leu Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser
245 250 255
Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp
260 265 270
Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn Asn Val Glu Val His Thr
275 280 285
Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp Tyr Asn Ser Thr Leu Arg Val
290 295 300
Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu
305 310 315 320
Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu Pro Ala Pro Ile Glu Arg
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser Val Arg Ala Pro Gln Val Tyr Val
340 345 350
Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr Lys Lys Gln Val Thr Leu Thr
355 360 365
Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro Glu Asp Ile Tyr Val Glu Trp Thr
370 375 380
Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr Lys Asn Thr Glu Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr Ser Lys Leu Arg Val Glu Lys
405 410 415
Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser Cys Ser Val Val His Glu
420 425 430
Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly
435 440 445
Lys
<210> 450
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体 A LC
<400> 450
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Leu Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Pro
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Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Ala Asp Ala Ala
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Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly
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Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile
130 135 140
Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu
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Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr
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Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys Ser
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210
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<220>
<223> 抗体 B HC
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1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
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Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val
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50 55 60
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65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Leu Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Gly Ala Arg Tyr Thr Met Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr
115 120 125
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130 135 140
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Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val Asp
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Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn Asn
275 280 285
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Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys Ser Phe
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Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
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Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr Ser Lys Leu Arg Val
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450
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体 C LC
<400> 454
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Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Glu Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln His
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<213> 人工序列
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<223> 抗体 D HC
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115 120 125
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130 135 140
Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175
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Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Ser
245 250 255
Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp
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Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala Gln
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Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys
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Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu Pro Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile
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Ser Lys Pro Lys Gly Ser Val Arg Ala Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro
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Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr Lys Lys Gln Val Thr Leu Thr Cys Met
355 360 365
Val Thr Asp Phe Met Pro Glu Asp Ile Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn
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Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr Lys Asn Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser
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His Asn His His Thr Thr Lys Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys
435 440 445
<210> 456
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体 D LC
<400> 456
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala
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Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
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Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile
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Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu
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Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser
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Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys Ser
195 200 205
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210
<210> 457
<211> 450
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体 E HC
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Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
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Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr Ala Pro Ser Val
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Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala
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Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Glu Pro Arg Gly Pro Thr Ile
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Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro Ala Pro Asn Leu Leu Gly Gly
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Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys Asp Val Leu Met Ile
245 250 255
Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp
260 265 270
Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn Asn Val Glu Val His
275 280 285
Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp Tyr Asn Ser Thr Leu Arg
290 295 300
Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp Met Ser Gly Lys
305 310 315 320
Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
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340 345 350
Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr Lys Lys Gln Val Thr Leu
355 360 365
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Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr Lys Asn Thr Glu Pro Val
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Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr Ser Lys Leu Arg Val Glu
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Gly Lys
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<212> PRT
<213> 人工序列
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<223> 抗体 E LC
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Glu Arg Val Thr Met Thr Cys Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser
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Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Ser Ser Pro Lys Leu Trp
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Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
210 215
<210> 459
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体 F HC
<400> 459
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Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser
245 250 255
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Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn Asn Val Glu Val His Thr
275 280 285
Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp Tyr Asn Ser Thr Leu Arg Val
290 295 300
Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu
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Lys
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体 G HC
<400> 461
Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala
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50 55 60
Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Trp Gly Ala Ile Thr Ser Phe Val Ala Leu Arg Gly Phe Ala
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr
115 120 125
Ala Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp Thr Thr Gly
130 135 140
Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro
145 150 155 160
Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr
165 170 175
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val
180 185 190
Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr Cys Asn Val
195 200 205
Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Glu Pro Arg
210 215 220
Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro Ala Pro Asn
225 230 235 240
Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys Asp
245 250 255
Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val Asp
260 265 270
Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn Asn
275 280 285
Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp Tyr Asn
290 295 300
Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp
305 310 315 320
Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu Pro
325 330 335
Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser Val Arg Ala
340 345 350
Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr Lys Lys
355 360 365
Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro Glu Asp Ile
370 375 380
Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr Lys Asn
385 390 395 400
Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr Ser Lys
405 410 415
Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser Cys
420 425 430
Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys Ser Phe
435 440 445
Ser Arg Thr Pro Gly Lys
450
<210> 462
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体 G LC
<400> 462
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Val Ser Ala Gly
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser
20 25 30
Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn
85 90 95
Asp His Ser Tyr Pro Pro Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu
100 105 110
Lys Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser
115 120 125
Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn
130 135 140
Phe Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu
145 150 155 160
Arg Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp
165 170 175
Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr
180 185 190
Glu Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr
195 200 205
Ser Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
210 215 220
<210> 463
<211> 454
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体 H HC
<400> 463
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Thr Ile Ser Arg Arg Ser Ile Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60
Gln Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Leu Ser Leu Tyr Asp Tyr Asp Gly Ala Arg Tyr Thr Met Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr
115 120 125
Ala Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp Thr Thr Gly
130 135 140
Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro
145 150 155 160
Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr
165 170 175
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val
180 185 190
Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr Cys Asn Val
195 200 205
Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Glu Pro Arg
210 215 220
Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro Ala Pro Asn
225 230 235 240
Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys Asp
245 250 255
Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val Asp
260 265 270
Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn Asn
275 280 285
Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp Tyr Asn
290 295 300
Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp
305 310 315 320
Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu Pro
325 330 335
Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser Val Arg Ala
340 345 350
Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr Lys Lys
355 360 365
Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro Glu Asp Ile
370 375 380
Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr Lys Asn
385 390 395 400
Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr Ser Lys
405 410 415
Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser Cys
420 425 430
Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys Ser Phe
435 440 445
Ser Arg Thr Pro Gly Lys
450
<210> 464
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体 H LC
<400> 464
Asp Ile Lys Met Thr Gln Ser Pro Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Val Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr His Thr
85 90 95
Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Ala Asp Ala Ala Pro
100 105 110
Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly
115 120 125
Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile Asn
130 135 140
Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu Asn
145 150 155 160
Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr Thr
180 185 190
Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys Ser Phe
195 200 205
Asn Arg Asn Glu Cys
210
<210> 465
<211> 454
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体 J HC
<400> 465
Gln Val His Leu Gln Gln Ser Gly Thr Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Glu Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Asn Ile Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Ile Tyr Tyr Gly Asn Tyr Asp Tyr Tyr Ala Met Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr
115 120 125
Ala Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp Thr Thr Gly
130 135 140
Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro
145 150 155 160
Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr
165 170 175
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val
180 185 190
Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr Cys Asn Val
195 200 205
Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Glu Pro Arg
210 215 220
Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro Ala Pro Asn
225 230 235 240
Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys Asp
245 250 255
Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val Asp
260 265 270
Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn Asn
275 280 285
Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp Tyr Asn
290 295 300
Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp
305 310 315 320
Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu Pro
325 330 335
Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser Val Arg Ala
340 345 350
Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr Lys Lys
355 360 365
Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro Glu Asp Ile
370 375 380
Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr Lys Asn
385 390 395 400
Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr Ser Lys
405 410 415
Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser Cys
420 425 430
Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys Ser Phe
435 440 445
Ser Arg Thr Pro Gly Lys
450
<210> 466
<211> 219
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体 J LC
<400> 466
Asp Ile Val Met Thr Gln Ala Ala Pro Ser Val Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Ser Val Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Tyr Trp Phe Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Val Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ala Phe Thr Leu Arg Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln His
85 90 95
Leu Glu Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu
115 120 125
Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe
130 135 140
Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg
145 150 155 160
Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser
165 170 175
Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu
180 185 190
Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser
195 200 205
Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
210 215
<210> 467
<211> 448
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体 K HC
<400> 467
Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Thr
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Leu Ile Glu Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Val Ile Asn Pro Gly Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Trp Gly Phe Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr Ala Pro Ser Val Tyr Pro
115 120 125
Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp Thr Thr Gly Ser Ser Val Thr Leu Gly
130 135 140
Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Leu Thr Trp Asn
145 150 155 160
Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
165 170 175
Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Thr Ser Ser Thr
180 185 190
Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Glu Pro Arg Gly Pro Thr Ile Lys Pro
210 215 220
Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro Ala Pro Asn Leu Leu Gly Gly Pro Ser
225 230 235 240
Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser Leu
245 250 255
Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro
260 265 270
Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala
275 280 285
Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp Tyr Asn Ser Thr Leu Arg Val Val
290 295 300
Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe
305 310 315 320
Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu Pro Ala Pro Ile Glu Arg Thr
325 330 335
Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser Val Arg Ala Pro Gln Val Tyr Val Leu
340 345 350
Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr Lys Lys Gln Val Thr Leu Thr Cys
355 360 365
Met Val Thr Asp Phe Met Pro Glu Asp Ile Tyr Val Glu Trp Thr Asn
370 375 380
Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr Lys Asn Thr Glu Pro Val Leu Asp
385 390 395 400
Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr Ser Lys Leu Arg Val Glu Lys Lys
405 410 415
Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser Cys Ser Val Val His Glu Gly
420 425 430
Leu His Asn His His Thr Thr Lys Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys
435 440 445
<210> 468
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体 K LC
<400> 468
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Val Ser Leu Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Ile Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro Lys Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Ser Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Asp Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Ala Asp Ala Ala
100 105 110
Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly
115 120 125
Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile
130 135 140
Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu
145 150 155 160
Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr
180 185 190
Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Asn Glu Cys
210
<210> 469
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb_C LCDR3 氨基酸序列 (IMGT, Kabat, 和Chothia
共有序列)
<400> 469
His Leu Glu Tyr Pro Phe Thr
1 5

Claims (55)

1.一种抗AQP3抗体或其功能片段，所述抗AQP3抗体或其所述功能片段特异性结合到其氨基酸序列由ATYPSGHLDM(SEQ ID NO:1)组成的寡肽。
2.根据权利要求1所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其所述功能片段特异性结合到人AQP3和/或小鼠AQP3。
3.一种抗AQP3抗体或其功能片段，所述抗AQP3抗体或其所述功能片段特异性结合到人AQP3的细胞外域和/或小鼠AQP3的细胞外域。
4.根据权利要求1或权利要求2所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其所述功能片段特异性结合到人AQP3的细胞外域和/或小鼠AQP3的细胞外域。
5.根据权利要求3或权利要求4所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其所述功能片段特异性结合到在PAM212细胞的表面上、在小鼠巨噬细胞的表面上或在HEK293细胞的表面上表达的AQP3的细胞外域。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其所述功能片段对人和/或小鼠AQP3的至少一种功能具有抑制活性。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其所述功能片段抑制PAM212细胞、HaCaT细胞和A431细胞中的一种或多种的增殖。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其所述功能片段抑制H2O2运输。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其所述功能片段抑制p65的磷酸化。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其所述功能片段抑制用四氯化碳处理的小鼠中的肝脏炎性反应。
11.一种抗AQP3抗体或其功能片段，所述抗AQP3抗体或其所述功能片段包含重链互补确定区1(HCDR1)、重链互补确定区2(HCRD2)、重链互补确定区3(HCDR3)、轻链互补确定区1(LCDR1)、轻链互补确定区2(LCDR2)以及轻链互补确定区3(LCDR3)，所述区包含选自表2A-5E中一个表中所阐述序列的氨基酸序列。
12.根据权利要求11所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其所述功能片段包含抗体A、抗体B、抗体C、抗体D、抗体E、抗体F、抗体G、抗体H、抗体J或抗体K的互补确定区(CDR)序列。
13.根据权利要求12所述的抗体或其功能片段，其中所述CDR序列通过IMGT编号定义，如表1A-1J所阐述。
14.根据权利要求12所述的抗体或其功能片段，其中所述CDR序列通过Kabat编号定义，如表1A-1J所阐述。
15.根据权利要求12所述的抗体或其功能片段，其中所述CDR序列通过Chothia编号定义，如表1A-1J所阐述。
16.根据权利要求12所述的抗体或其功能片段，其中所述CDR序列通过IMGT、Kabat和Chothia共同序列定义，如表1A-1J所阐述。
17.根据权利要求12所述的抗体或其功能片段，其中所述CDR序列通过IMGT、Kabat和Chothia组合重叠序列定义，如表1A-1J所阐述。
18.根据权利要求11所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其所述功能片段包含抗体A、抗体B、抗体C、抗体D、抗体E、抗体F、抗体G、抗体H、抗体J或抗体K的可变重链(VH)序列和可变轻链(VH)序列。
19.一种抗体或其功能片段，所述抗体或其所述功能片段与根据权利要求1至18中任一项所述的抗体或其功能片段竞争用于结合人AQP3和/或小鼠AQP3。
20.根据权利要求1至19中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其所述功能片段非特异性结合到除AQP3之外的一种或多种人水通道蛋白(“非AQP3水通道蛋白”)。
21.根据权利要求1至20中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述抗体是IgG的免疫球蛋白分子。
22.根据权利要求1至21中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述抗体是单克隆抗体。
23.根据权利要求1至22中任一项所述的抗体或其功能片段，其中所述抗体或其所述功能片段是具有人抗体的恒定区的嵌合抗体或人源化抗体。
24.根据权利要求1至23中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其所述功能片段是抗体。
25.根据权利要求24所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其所述功能片段是单特异性抗体。
26.根据权利要求24所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其所述功能片段是多特异性抗体。
27.根据权利要求1至23中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其所述功能片段是抗体的功能片段。
28.根据权利要求27所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其所述功能片段是选自F(ab')2、Fab、Fab'和Fv的功能片段。
29.根据权利要求1至28中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其所述功能片段用报道物质标记。
30.根据权利要求1至29中任一项所述的抗体或其功能片段，所述抗体或其所述功能片段被固定在固体支持物上。
31.一种抗体药物缀合物(ADC)，所述抗体药物缀合物包含与细胞毒性剂缀合的根据权利要求1至28中任一项所述的抗体或其功能片段。
32.根据权利要求31所述的ADC，其中所述细胞毒性剂包含烷基化剂、抗代谢物、抗微管剂、拓扑异构酶抑制剂或细胞毒性抗生素。
33.一种组合物，所述组合物包含根据权利要求1至30中任一项所述的抗体或其片段。
34.根据权利要求33所述的组合物，所述组合物为用于检测AQP3的试剂。
35.根据权利要求33所述的组合物，所述组合物为用于鉴别、分离或纯化AQP3表达细胞的试剂。
36.根据权利要求33或34所述的组合物，所述组合物为用于测量AQP3的表达量的试剂。
37.一种试剂盒，所述试剂盒包括根据权利要求34至36中任一项所述的组合物。
38.一种组合物，所述组合物包含根据权利要求1至29中任一项所述的单克隆抗体或其片段，其中所述单克隆抗体或其所述功能片段对AQP3的至少一种功能具有抑制活性。
39.根据权利要求38所述的组合物，所述组合物为还包含药学上可接受的载体的药物组合物。
40.一种组合物，所述组合物包含根据权利要求31或权利要求32所述的ADC和药学上可接受的载体。
41.根据权利要求39或权利要求40所述的组合物，所述组合物用于治疗癌症。
42.根据权利要求41所述的组合物，其中所述癌症为选自由以下组成的组的癌症：结肠直肠癌、子宫颈癌、肝癌、肺癌、食道癌、肾癌、胃癌、舌癌、皮肤癌和乳腺癌。
43.根据权利要求39所述的组合物，所述组合物用于预防和/或治疗皮肤病。
44.根据权利要求43所述的组合物，其中所述皮肤病选自由以下组成的组：牛皮癣、光化性角化病、鱼鳞病和脂溢性皮炎。
45.根据权利要求39所述的组合物，所述组合物用于预防和/或治疗炎性病症。
46.根据权利要求45所述的组合物，其中所述炎性病症选自由以下组成的组：特应性皮炎、牛皮癣、哮喘、慢性阻塞性肺病和肝炎。
47.一种用于检测AQP3的方法，所述方法包括使样品与根据权利要求1至30中任一项所述的抗体或其片段或与根据权利要求33或34所述的组合物接触的步骤。
48.一种用于分离和/或纯化AQP3表达细胞的方法，所述方法包括使包括细胞的样品与根据权利要求1至30中任一项所述的抗体或其功能片段或与根据权利要求33至35中任一项所述的组合物接触的步骤。
49.一种用于测量AQP3的方法，所述方法包括使样品与根据权利要求1至30中任一项所述的抗体或其功能片段或与根据权利要求33、34或36所述的组合物接触的步骤。
50.一种用于抑制AQP3的至少一种功能的方法，所述方法包括使包括AQP3的样品与根据权利要求1至30中任一项所述的抗体或其功能片段或与根据权利要求38所述的组合物接触的步骤。
51.一种用于抑制低分子量物质跨膜运输的方法，所述方法包括使具有包括AQP3的膜的样品与根据权利要求1至30中任一项所述的抗体或其功能片段，或与根据权利要求38所述的组合物接触的步骤。
52.一种用于产生抗AQP3抗体的方法，所述方法包括用(i)其氨基酸序列由SEQ ID NO:1的氨基酸序列组成的肽和(ii)AQP3过表达细胞的组合对非人哺乳动物进行免疫。
53.根据权利要求52所述的方法，其中所述哺乳动物是小鼠。
54.根据权利要求52或权利要求53所述的方法，其中所述AQP3过表达细胞包含过表达AQP3的CHO细胞和/或过表达小鼠AQP3的CHO细胞。
55.根据权利要求52至54中任一项所述的方法，所述方法还包括从所述经免疫的哺乳动物收集免疫细胞，使用来自所述免疫细胞的mRNA产生抗体文库，以及从所述抗体文库鉴别出一种或多种抗AQP3抗体。
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