CN111171111B - 一种从文冠果鲜果壳中连续提取粗蛋白质、多糖、纤维素的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种从文冠果鲜果壳中连续提取粗蛋白质、多糖、纤维素的方法，具体而言，本发明提供了一种从文冠果鲜果壳中提取粗蛋白质、多糖、纤维素中的两种或三种成分的方法，涉及农林固体废物资源化利用和农业生态环境技术领域。所述的提取方法包括果壳预处理、提取粗蛋白质、提取多糖和任选地提取纤维素几个连续的提取工艺，统筹了粗蛋白质、多糖、纤维素各成分提取的流程顺序，且兼顾了各成分提取工艺之间的匹配性和兼容性，提高了文冠果鲜果壳综合利用率。

Description

一种从文冠果鲜果壳中连续提取粗蛋白质、多糖、纤维素的 方法

技术领域

本发明涉及农林固体废物资源化利用和农业生态环境技术领域。

名词界定

(1)鲜果壳：文冠果成熟后，果壳颜色变成棕褐色之前为黄绿色，为了有别于干果壳，故称为新鲜果壳，简称鲜果壳。

(2)主要有效成分：所谓有效成分是指对人体有益或可作为医药、食品、工业原料的化合物成分，主要有效成分是指文冠果鲜果壳中含量相对较多的成分，包括色素、皂苷、黄酮、游离氨基酸、粗蛋白质、多糖、纤维素等，可溶性糖微量，无提取价值，列入其他成分中。

(3)粗蛋白质

本项专利利用开氏法(J·Kjeldahl)测定全氮含量，乘上系数换算为蛋白质含量，尚含有多肽等，所以称为粗蛋白质；如果蛋白质用重金属等沉淀分离以后，进行全氮测定，由氮换算而成的蛋白质含量，则称为“纯蛋白质”。

(4)深锥真空过滤器：深锥过滤和深锥洗涤设备是冶金行业的常用设备，本专利发明人将深锥过滤与真空过滤设备相结合，从而提高了过滤效率。该设备由三部分组成：深锥过滤设备(分两层，上层为滤渣，下层盛放滤液)、缓冲罐、真空泵，抽真空管的接口在过滤滤板下方滤液罐的侧壁上。

背景技术

文冠果(Xanthoceras Sorbifolia Bunge)系无患子科文冠果属植物，是我国特有的珍稀木本油料植物，它耐寒耐旱耐瘠薄，可在河北、辽宁、内蒙、甘肃、青海、新疆等荒山丘陵地带广泛种植。开发文冠果资源既可以绿化荒山防风固沙又可以创造经济价值。目前，文冠果的主要用途是通过传统压榨法和浸提法制取植物油。但文冠果果壳占文冠果总质量的50％-55％，成为生物垃圾，污染环境。文冠果果壳中含有丰富的有益成分，例如蛋白质、多糖、纤维素等主要有效成分，具有极高的利用价值。

但是现有的文冠果果壳的利用通常仅仅提取单一的或两个有益成分后，仍然会产生很多的生物垃圾，对环境造成不利影响。例如CN103821021A(专利申请人：中科院金属研究所)仅仅涉及从文冠果果壳中提取纳米纤维素；CN103821021A涉及纤维素的提取工艺，其涉及干燥果壳的过程，且过程复杂等；CN106810599A涉及从文冠果饼粕中提取蛋白质的方法，主要涉及先碱性处理，后酸性沉淀等步骤。

上述专利共同特点是：其一，所选择的原材料均为干燥的文冠果果壳，而大部分有效成分分布于细胞液中，果壳干燥后，许多有效成分将随着细胞液的消失转化为其他化合物，或者消失。其二，研究者们仅提取文冠果果壳中的一种或二种化合物成分，剩下90％以上的果壳残渣未被利用，作为固体废物丢弃，不仅会造成原料资源的极大浪费，也会给环境带来巨大的压力。

发明内容

文冠果鲜果壳的收集和检测

2017年7月20日在河北省张家口市林科院采摘文冠果果实。对鲜果壳检测结果，含水量12.3±1.63％，粗蛋白质5.4±0.47％，多糖11.3±0.38％，纤维素16.4±0.57％，其他成分5.0±0.23％(灰分+微量可溶性糖+微量核酸等)。

本发明致力于提供一种从文冠果鲜果壳中连续提取粗蛋白质、多糖、纤维素的方法，包括以下步骤：

(a)果壳预处理：鲜果壳与第一溶剂共混后破碎，固液分离得到第一滤渣；

(b)提取粗蛋白质：步骤(a)得到的第一滤渣用第二溶剂溶解后浸提，固液分离得到第二滤液和第二滤渣，第二滤液采用蛋白质等电点沉淀法得到粗蛋白质；

(c)提取多糖：步骤(b)得到第二滤渣用第三溶剂溶解，固液分离后得到第三滤液和第三滤渣，第三滤液脱水以分离多糖(优选脱水至多糖含量1.5-2.0wt％后分离多糖)；

(d)任选地，提取纤维素：第三滤渣用第四溶剂溶解反应后，固液分离得到第四滤渣，第四滤渣经洗涤和干燥后得到纤维素。

需要说明的是，文中“第一溶剂”、“第二溶剂”、“第三溶剂”等中的第一、第二、第三等标记仅是为了区分每个处理步骤中使用的溶剂，对于溶剂的具体种类没有实质限定，其中顺序不同的溶剂的种类可以相同，也可以不同。其它的关于滤液、滤渣、洗涤液、混合液等的标记限定也是相同的意义。

步骤(a)果壳预处理

将鲜果壳与第一溶剂共混后破碎，使果壳中所有细胞壁均被打破，粗蛋白质、多糖、纤维素等不溶于第一溶剂，保留在滤渣中，称为第一滤渣，对第一滤渣进行后续的加工提取有效成分。

在本发明的一种实施方式中，第一溶剂优选为C1-C4低碳醇，其中包括甲醇、乙醇、丙醇或正丁醇。选用低碳醇可以使游离氨基酸、黄酮、皂苷、色素更好地溶解于其中，减少上述四种有效成分在第一滤渣中的残留，便于后期对第一滤渣进行加工提取粗蛋白质、多糖、纤维素。

进一步，鲜果壳(干基计)与乙醇的质量比为1:8-12。果壳与乙醇的质量比典型但非限定性的为1:8、1:9、1:10、1:11或1:12。优选果壳与乙醇的质量比，既能提高果壳中游离氨基酸、黄酮、皂苷、色素的溶解量，又能减少乙醇的使用，节约成本。

在本发明的一种实施方式中，所述步骤(a)包括以下步骤：

(i)鲜果壳与70％-75％(V/V)乙醇共混后，高剪切破碎，剪切速度18000-25000r/min，温度20-30℃，时间3-5min；

(ii)高剪切完成后，真空抽滤得到第一滤渣，第一滤渣用50％-55％(V/V)乙醇和去离子水分别洗涤2-3次。

上述果壳预处理限定的具体工艺和工艺条件，通过高剪切破碎果壳，使果壳中的游离氨基酸、黄酮、皂苷、色素溶解于乙醇溶液中，而粗蛋白质、多糖、纤维素存在于第一滤渣中；用乙醇溶液洗涤第一滤渣可以减少其所吸附的游离氨基酸、黄酮、皂苷、色素等有效成分，减小对后续提取粗蛋白质、多糖、纤维素的影响。上述工艺操作简单、处理果壳的效率高、安全环保。

步骤(b)提取粗蛋白质

碱性溶液提取蛋白质的原理是，碱性蛋白含大量的二硫键和疏水基团使其溶解性较差，而碱性溶液对蛋白质分子的次级键特别是氢键具有破坏作用，还可使某些极性基团发生解离，使蛋白质分子表面具有相同的电荷，增加蛋白质分子溶解度，提高蛋白质提取率。

在本发明的一种实施方式中，所述步骤(b)中第二溶剂为pH 9-12的碱性溶液。

对碱性溶液的种类不进行限定，但限定其pH值，避免pH值高的碱性溶液使蛋白质变性和水解，加速梅德拉反应产生黑褐色物质，以及使第二滤液中的非蛋白物质含量增加，分离效果降低等。

进一步，所述碱性溶液为氨水、氢氧化钠、氢氧化钡、碳酸钠、碳酸氢钠中的一种或几种；优选为氨水。优选碱性溶液为弱碱性氨水溶液，方便使用完成后回收氨气循环利用。

进一步，第一滤渣与氨水的质量比为1:9-12。第一滤渣与氨水的质量比典型但非限定性的为1:9、1:10、1:11或1:12；优选该质量比，既能使粗蛋白更好地溶解于氨水溶液中，又减少氨水的使用量，降低生产成本。

在本发明的一种实施方式中，所述步骤(b)包括以下步骤：

(i)步骤(a)得到的第一滤渣与氨水溶液混合后，在温度55℃-65℃、搅拌速度70-100r/min条件下浸提1-3h，真空过滤后得到第二滤液和第二滤渣，第二滤渣用氨水溶液和去离子水分别洗涤3-4次，汇总得到第一洗涤液，合并第二滤液和第一洗涤液，得到第一混合液；

(ii)第一混合液在55℃-65℃减压蒸发至含水量30％-40％，搅拌条件下加入酸性溶液调节pH值至文冠果蛋白质等电点4.6，在-4℃～-6℃静置沉淀7-10h，得到粗蛋白质胶体；

(iii)粗蛋白质胶体用45℃-55℃去离子水洗涤3-4次，-35℃～-45℃冷冻干燥后得到粗蛋白质。

所提取的粗蛋白质为多种蛋白的混合体，营养价值较高，可以进一步制作为营养食品、保健食品或蛋白饮料。该蛋白质还具有降低胆固醇、降血压、促进新陈代谢、抗疲劳、增强人体免疫力、调节人体生理机能等功效，可作为乳化剂、食品添加剂开发，在食品工业、化妆品、医药领域具有广阔的应用前景。

上述提取粗蛋白的工艺采用碱性溶液溶解后，再用酸性溶液调节pH值至粗蛋白质的等电点后静置沉淀，粗蛋白质胶体水洗后去除残留的酸性溶液和杂质，提高粗蛋白质的纯度，粗蛋白质胶体很难烘干，采用冷冻干燥。

进一步，所述步骤(ii)中的调节pH值与静置沉淀之间还包括加入沉淀晶种的步骤；优选沉淀晶种为固体硫酸铵；优选酸性溶液为1.0％H₂SO₄溶液。

所述步骤(ii)中第一混合液调节pH值至等电点后，如果蛋白质还未沉淀，可缓慢加入固体硫酸铵，作为沉淀晶种，同时增加饱和度，促进粗蛋白质沉淀的速度，进而提高粗蛋白质提取工艺的效率。

步骤(c)提取多糖

植物多糖是近年来中药研究的热点领域，多糖的多种生物活性不断被发现，有抗癌、降血糖、调节免疫和保护肝脏等多种功能。文冠果鲜果壳富含多糖，其为酸性多糖类，又称粘多糖，分子中含有糖醛酸等酸性基团。

脱水至多糖含量1.5％-2.0％；多糖含量可以为但不限于1.5％、1.6％、1.7％、1.8％、1.9％、2.0％。

限定脱水后的多糖浓度，可以避免多糖浓度过大时，多糖沉淀与溶剂一起包含杂质后形成大块胶状沉淀，影响提取多糖的纯度；反之避免多糖浓度过小时，多糖沉淀呈乳状，分离困难。

在本发明的一种实施方式中，所述步骤(c)中第三溶剂选用水；优选为去离子水，进一步优选去离子水的温度为80℃-85℃。

进一步，第二滤渣和去离子水的质量比为1:8-12。第二滤渣和去离子水的质量比典型但非限定性的为1:8、1:9、1:10、1:11或1:12。

在本发明的一种实施方式中，所述步骤(c)包括以下步骤：

(i)第二滤渣和去离子水混合，在80℃-85℃、搅拌速度70-100r/min条件下提取0.5-1.0h，冷却至常温真空过滤，得到第三滤液和第三滤渣，第三滤渣用45℃-55℃去离子水洗涤3-4次后得到第二洗涤液，合并第三滤液和第二洗涤液，得到第二混合液；

(ii)第二混合液减压脱水至多糖含量1.5％-2.0％，加入无水乙醇沉淀多糖，真空过滤后得到多糖初品；

(iii)多糖初品用去离子水洗涤3-4次，75℃-85℃减压脱水干燥，得到多糖。

进一步，在步骤(i)中，将0.5-1.0ml最后一次去离子水洗涤后的洗涤液放入白色瓷板孔穴中，再滴加α-萘酚乙醇溶液2滴和浓硫酸2滴在白色瓷板孔穴中，检验多糖是否洗净，以此确保第三滤渣中残留的多糖被洗涤干净。

进一步，在所述步骤(ii)中减压脱水与加入无水乙醇之间，还包括加入盐类使其浓度至5.0-6.0wt％的步骤。

在热水提取多糖之后、无水乙醇沉淀多糖之前加入盐类，主要利用了盐析法原理，使多糖与金属离子成盐后在水溶液中的特异性沉淀作用，使盐析与醇沉配合使用，促进多糖沉淀，进而提高多糖沉淀分离的效果。

进一步，所述盐类包括氯化钾、乙酸钾、氯化钠或硫酸铵中的一种或多种。优选盐的种类，可以使多糖与金属离子成盐后的沉淀效果更好。优选为氯化钾。

进一步，所述多糖与盐类的质量总和与无水乙醇的质量比为1:5-10。

步骤(d)提取纤维素

本发明一种实施方式中，所述步骤(d)中第四溶剂选用酸性溶液，优选为H₂SO₄溶液。

纤维素由于含有较长的葡萄糖链和大量的羟基，使纤维素在水和其它有机溶剂中都难以溶解，果壳的纤维素主要存在于第三滤渣中。选用H₂SO₄溶液，不易挥发，价格低廉，可以使第三滤渣中的半纤维素和核酸等组分水解，提高纤维素的纯度。

优选地，所述第三滤渣与H₂SO₄溶液的质量比为1:40-50；第三滤渣与H₂SO₄溶液的质量比可以为但不限于1:40、1:41、1:42、1:43、1:44、1:45、1:46、1:47、1:48、1:49或1:50；优选该质量比，可以使第三滤渣中的杂质在酸性溶液中水解更加充分，进一步提高提取纤维素的纯度。

在本发明的一种实施方式中，所述步骤(d)包括以下步骤：

(i)第三滤渣与0.5mol/L的H₂SO₄溶液混合，在95℃-100℃、搅拌速度70-90r/min条件下反应1h，冷却至40℃以下，固液分离后得到纤维素初品；

(ii)纤维素初品用去离子水洗涤3-4次至pH7.0，-40℃～-45℃冷冻干燥，得到纤维素。

上述提取工艺，先将第三滤渣用硫酸溶液充分溶解去除杂质(半纤维素和核酸等水解物)，再经过水洗去除硫酸和杂质，进而干燥得到纤维素。

进一步，将步骤(b)提取蛋白质所使用回收的氨气引入步骤(d)中含有H₂SO₄的洗涤液中，生成(NH₄)₂SO₄，减压浓缩，回收(NH₄)₂SO₄。充分利用整个提取工艺中的原料，减少资源浪费，安全环保。

文冠果果壳的有效成分，采用所述的方法提取得到；所述有效成分包括蛋白质、多糖、纤维素中的两种或三种。

本发明采用上述技术方案具有以下有益效果：

1、本发明的提取方法，统筹了粗蛋白质、多糖、纤维素各成分的提取流程顺序，且兼顾了各成分提取工艺之间的匹配性和兼容性，达到了综合利用文冠果果壳，将文冠果鲜果壳中的主要有效成分提取出来，成为食品、医药和工业原料，提高了文冠果鲜果壳综合利用率；

2、本发明的提取方法，所有溶剂均回收，水经过处理后循环使用，沉淀和过滤的剩余物用于生态修复功能材料原料，殆尽消纳，环境友好；

3、本发明是在生产性试验基础上形成，确定了产业化所需要的主要设备和工艺参数，为文冠果鲜果壳产业化利用提供了技术支撑。

附图说明

图1所示为文冠果鲜果壳中粗蛋白质、多糖、纤维素提取工艺流程图。

具体实施方式

实施例一

一种从文冠果果壳中提取粗蛋白质、多糖、纤维素三种成分的方法，包括以下步骤：

1、果壳预处理

(1.1)称取文冠果鲜果壳20.0Kg，和70％(V/V)乙醇200Kg，放入高剪切设备中进行剪切破碎，剪切速度20000r/min，温度25℃，剪切时间5min；

(1.2)剪切完成后，真空抽滤得到第一滤液和第一滤渣，第一滤渣用50％(V/V)乙醇洗涤2次，每次40Kg；再用去离子水洗涤2次，每次40Kg。

2、提取粗蛋白质

(2.1)步骤(a)得到的第一滤渣与pH9-12的氨水溶液按质量比1:10混合后加入提取罐中，在温度60℃、搅拌速度80r/min条件下浸提2h，真空过滤后得到第二滤液和第二滤渣；第二滤渣用氨水溶液和去离子水分别洗涤3次，汇总得到第一洗涤液，合并第二滤液和第一洗涤液，得到第一混合液；

(2.2)第一混合液放入抽真空蒸发罐中，温度60℃，搅拌速度80r/min，开启真空泵，减压蒸发回收NH₃，减压蒸发至含水量35％停止脱水；冷却后加入致冷沉淀罐，80r/min搅拌条件下加入1.0wt％H₂SO₄溶液调节pH值至4.6；

(2.3)缓慢加入固体硫酸铵，观察有絮状沉淀时，停止加硫酸铵和搅拌，打开液氨阀门，氨气进入沉淀罐夹层冷却，罐内温度降至-5℃，关闭液氨阀门，在-5℃静置沉淀8h，得到粗蛋白质胶体；

(2.4)粗蛋白质胶体加入真空过滤机中，用50℃去离子水洗涤3次，-40℃冷冻干燥后得到粗蛋白质1.06Kg，回收率98.15％，纯度99.24％。硫酸铵溶液减压蒸发水分、干燥循环使用。

3、提取多糖

(3.1)第二滤渣和去离子水按质量比1:10混合后加入提取罐中，在80℃-85℃、搅拌速度80r/min条件下提取1.0h，冷却至常温真空过滤，得到第三滤液和第三滤渣；第三滤渣用50℃去离子水洗涤3次后得到第二洗涤液；

(3.2)取第二洗涤液0.5-1.0ml放入白色瓷板孔穴中，再滴加α-萘酚乙醇溶液2滴和浓硫酸2滴，检测第三滤渣中残留的多糖被洗涤干净后，合并第三滤液和第二洗涤液，得到第二混合液；

(3.3)第二混合液减压脱水至多糖含量1.5-2.0％，加入氯化钾使其浓度至5.0-6.0wt％，氯化钾全部溶解后，再加入总溶质质量10倍的无水乙醇沉淀多糖，真空过滤后得到多糖初品；

(3.4)多糖初品用去离子水洗涤3次，75℃减压脱水干燥，得到多糖2.24Kg，回收率99.12％，纯度99.67％。

4、提取纤维素

(4.1)第三滤渣与0.5mol/L的H₂SO₄溶液按质量比1:50混合后加入反应釜，在95℃-100℃、搅拌速度80r/min条件下反应1h，冷却至40℃以下，放入深锥真空过滤器中，分离后得到纤维素初品；

(4.2)纤维素初品用去离子水洗涤3次至pH7.0，在-40℃～-45℃下冷冻干燥，得到纤维素3.24Kg，回收率98.78％，纯度99.15％。

(4.3)将回收蛋白质所使用的致冷沉淀罐夹层中的氨引入含H₂SO₄的洗涤液中，生成(NH₄)₂SO₄，减压浓缩，回收(NH₄)₂SO₄。

实施例二

一种从文冠果果壳中提取粗蛋白质、多糖、纤维素三种成分的方法，与实施例一的区别在于，加入70％(V/V)乙醇140Kg，使果壳与乙醇的质量比为1:7。

实施例三

一种从文冠果果壳中提取粗蛋白质、多糖、纤维素三种成分的方法，与实施例一的区别在于，加入70％(V/V)乙醇280Kg，使果壳与乙醇的质量比为1:14。

实施例四

一种从文冠果果壳中提取粗蛋白质、多糖、纤维素三种成分的方法，与实施例一的区别在于，步骤(1.2)第一滤渣去除用乙醇洗涤的步骤。

实施例五

一种从文冠果果壳中提取粗蛋白质、多糖、纤维素三种成分的方法，与实施例一的区别在于，步骤(1.2)第一滤渣去除用水洗涤的步骤。

对实施例一至实施例五提取得到的粗蛋白质、多糖、纤维素三种成分进行检测，检测结果如表1所示：

表1

由表1的结果可以看出，实施例一至五中提取得到的粗蛋白质回收率均在96％以上，纯度均在95％以上；多糖的回收率均在98％以上，纯度均在99％以上；纤维素的回收率均在97％以上，纯度均在98％以上。

实施例二和三减少和增加70％乙醇用量仅对提取游离氨基酸、黄酮、皂苷、色素有影响，对滤渣中蛋白质、多糖和纤维素的提取无影响。实施例四和五虽然增加了滤渣中的杂质，但由于选择了最佳提取工艺路线，对粗蛋白质、多糖和纤维素的提取率影响不大。

Claims (9)

1.一种从文冠果鲜果壳中连续提取粗蛋白质、多糖、纤维素的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(a)果壳预处理：鲜果壳与第一溶剂共混后破碎，固液分离得到第一滤渣；

(b)提取粗蛋白质：步骤(a)得到的第一滤渣用第二溶剂溶解后浸提，固液分离得到第二滤液和第二滤渣，第二滤液采用蛋白质等电点沉淀法得到粗蛋白质；

(c)提取多糖：步骤(b)得到第二滤渣用第三溶剂溶解，固液分离后得到第三滤液和第三滤渣，第三滤液脱水以分离多糖；

(d)提取纤维素：第三滤渣用第四溶剂溶解反应后，固液分离得到第四滤渣，第四滤渣经洗涤和干燥后得到纤维素；

所述步骤(a)包括以下步骤：(i)鲜果壳与第一溶剂共混后，剪切破碎，剪切速度18000-25000r/min，温度20℃-30℃，时间3-5min；其中所述第一溶剂为70％-75％(V/V)乙醇；(ii)剪切完成后，真空抽滤得到第一滤渣，第一滤渣用50％-55％(V/V)乙醇和去离子水分别洗涤2-3次；

所述步骤(b)包括以下步骤：(i)步骤(a)得到的第一滤渣与第二溶剂混合后，在温度55℃-65℃、搅拌速度70-100r/min条件下浸提1-3h，真空过滤后得到第二滤液和第二滤渣，第二滤渣用氨水溶液和去离子水分别洗涤3-4次，汇总得到第一洗涤液，合并第二滤液和第一洗涤液，得到第一混合液；其中所述第二溶剂为pH 9-12的氨水溶液；(ii)第一混合液在55℃-65℃减压蒸发至含水量30-40％，搅拌条件下加入酸性溶液，调节pH值至4.6，加入沉淀晶种固体硫酸铵，在-4℃～-6℃静置沉淀7-10h，得到粗蛋白质胶体；(iii)粗蛋白质胶体用45℃-55℃去离子水洗涤3-4次，-35℃～-45℃冷冻干燥后得到粗蛋白质；

所述步骤(c)包括以下步骤：(i)第二滤渣和第三溶剂混合，在80℃-85℃、搅拌速度70-100r/min条件下提取0.5-1.0h，冷却至常温真空过滤，得到第三滤液和第三滤渣，第三滤渣用45℃-55℃去离子水洗涤3-4次后得到第二洗涤液，合并第三滤液和第二洗涤液，得到第二混合液；其中所述第三溶剂为去离子水；(ii)第二混合液减压脱水至多糖含量1.5-2.0％，加入盐类使其浓度至5.0-6.0wt％，加入无水乙醇沉淀多糖，真空过滤后得到多糖初品；(iii)多糖初品用去离子水洗涤3-4次，75-85℃减压脱水干燥，得到多糖；

所述步骤(d)包括以下步骤：(i)第三滤渣与第四溶剂混合，在95℃-100℃、搅拌速度70-90r/min条件下反应1h，冷却至40℃以下，固液分离后得到纤维素初品；其中所述第四溶剂为0.5mol/L的H₂SO₄溶液；(ii)纤维素初品用去离子水洗涤3-4次至pH7.0，-40℃～-45℃冷冻干燥，得到纤维素。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，鲜果壳与70％-75％乙醇溶液的质量比为1:8-12。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，第一滤渣与氨水的质量比为1:9-12。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，第二滤渣和去离子水的质量比为1:8-12。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(c)的步骤(ii)中，所述盐类包括氯化钾、乙酸钾、氯化钠或硫酸铵中的一种或多种。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述盐类为氯化钾。

7.根据权利要求1、5和6中任意一项所述的方法，其特征在于，在步骤(c)的步骤(ii)中，所述多糖与盐类的质量总和与无水乙醇的质量比为1:5-10。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第三滤渣与0.5mol/L H₂SO₄溶液的质量比为1:40-50。

9.文冠果果壳的有效成分，其特征在于，采用权利要求1-8任一项所述的方法提取得到；所述有效成分包括蛋白质、多糖、纤维素。

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