CN105017201B - 一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法 - Google Patents

一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN105017201B
CN105017201B CN201510412024.2A CN201510412024A CN105017201B CN 105017201 B CN105017201 B CN 105017201B CN 201510412024 A CN201510412024 A CN 201510412024A CN 105017201 B CN105017201 B CN 105017201B
Authority
CN
China
Prior art keywords
anthocyanidin
fruit
ligustrum quihoui
preparation
quihoui
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201510412024.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105017201A (zh
Inventor
刘静波
陈晶晶
王二雷
赵颂宁
赵叶辉
黄延军
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jilin University
Original Assignee
Jilin University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jilin University filed Critical Jilin University
Priority to CN201510412024.2A priority Critical patent/CN105017201B/zh
Publication of CN105017201A publication Critical patent/CN105017201A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105017201B publication Critical patent/CN105017201B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
    • C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D311/04—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
    • C07D311/58—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4
    • C07D311/60—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4 with aryl radicals attached in position 2
    • C07D311/62—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4 with aryl radicals attached in position 2 with oxygen atoms directly attached in position 3, e.g. anthocyanidins

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法，属于食品资源的精深加工技术领域。本发明涉及一种利用溶剂萃取、柱层析联用技术来纯化制备高纯度的花青素。该方法的特点是：成本低廉、制备工艺简单、生产周期短、所用试剂安全无毒、提取纯度高、易于工业化生产等优点，对开发高附加值小叶女贞果产品具有重要意义。本发明制备出的花青素纯度为30％～35％的小叶女贞果花青素，营养安全、稳定、易于存储，在食品、医药、生化等领域有着广泛的应用前景。通过对小叶女贞果实中花青素产品的制备，提高对小叶女贞果实的充分利用，引起对小叶女贞果实纯化花青素技术的重视，从而促使变废置小叶女贞果实为宝，为实现其经济价值提供有力保障。

Description

一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法
技术领域
本发明属于食品资源的精深加工技术领域，具体涉及一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法。
背景技术
随着人们生活水平不断提高，也提高了对天然有机物质的追求。保护人体健康、防病治病的天然植物性来源的无毒无害的物质，越来越受人们的青睐。然而人工合成花青素，毒副作用较大，世界卫生组织已经禁止使用该物质。因此纯天然制备高纯度小叶女贞果花青素的方法迫在眉睫。
小叶女贞(拉丁学名L.quihoui)又叫小白蜡，是被子植物门，双子叶植物纲，木犀科女贞属的植物，是一种庭院中经常栽植的重要的观赏性的园艺灌木，主要生长在沟边，路旁，山坡和河边灌丛中，在全国各地都有广泛的分布，资源丰富。
小叶女贞的果实，呈椭圆形，黑色，性凉，味苦，果实入药后可以治疗肝炎。其花白色，叶薄革质。根叶也都可以入药，具有清热解毒的功效，可治疗外伤、烫伤等症。它叶小、常绿，且耐修剪，生长迅速，是制作盆景的优良树种。且能够吸收多种有毒气体，是具有优良的抗污染能力的树种。
到目前为止，花青素的纯化方法主要有溶剂萃取法、铅盐沉淀法、柱层析法、膜分离法、高速逆流色谱法等方法。其中溶剂取法简单快速、但选择性不高，得到的花青素纯度比较低；铅盐沉淀法制得的花青素纯度较高，但铅离子的引入导致花青素产品的安全性较差，使其应用受到极大限制；柱层析法应用过程中，常用甲醇或丙酮为洗脱剂，且含有较多的有毒溶剂残留；高速逆流色谱法多用于花青素纯品的制备，其应用过程中多用正丁醇、异丙酮等有毒有机溶剂。
随着科研领域对绿色、纯天然花青素产品制备技术的不断改进，目前国内外对小叶女贞果实花青素纯化研究的相关专利或论文文献，几乎没有。
发明内容
本发明采用了溶剂萃取法及层析法联用技术，在简化操作工艺及节约成本的基础上，制得了高纯度的花青素产品，且产品安全可靠，填补了小叶女贞果纯化花青素的技术空白。通过本发明，能够推动对小叶女贞果实的系统研究，能够深入的探索其潜在的药用价值，实现对小叶女贞果实的最大化的合理运用。
本发明的目的在于提供一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法，本发明所述的纯天然小叶女贞果花青素的制备方法，具体步骤如下：
(1)原料预处理：将新鲜或冷冻的小叶女贞果皮和果肉打浆，制得果浆；
(2)浸提液制备：向果浆中加入质量分数60％～80％的酸化的乙醇溶液，果浆与酸化的乙醇溶液的质量比为1：5～8，进行提取，提取后将浸提液与果渣分离；再向所得的果渣中加入质量分数60％～80％的酸化的乙醇溶液，果渣与酸化的乙醇溶液的质量比为1：5～8，进行提取，提取后将浸提液与果渣分离；合并两次浸提液；每次提取的温度为25～40℃，提取时间的为10～15小时；
(3)粗提液制备：将步骤(2)得到的浸提液在温度45～55℃、真空度在-0.08～-0.1MPa条件下进行减压浓缩，减压浓缩比为5～10，回收乙醇，得小叶女贞果花青素粗提液；
(4)花青素萃取液制备：将步骤(3)得到的小叶女贞果花青素粗提液与乙酸乙脂按体积比1：1～3混合，充分振荡混匀后进行第一次萃取，收集下层水溶液；再将下层水溶液与乙酸乙脂按体积比1：1～3混合，充分振荡混匀后进行第二次萃取，收集下层水溶液；每次萃取时间为2～4小时，萃取温度为25～30℃，萃取次数为2～4次，最后得花青素萃取液；通过萃取除去黄酮类、脂溶性的蛋白、多糖、色素等杂质；
(5)大孔树脂柱纯化：将步骤(4)中制得的小叶女贞果花青素萃取液加入到预处理后的大孔树脂柱内，除去糖类、蛋白类、弱极性的黄酮类，上样量为树脂体积的1/6～1/8；再用含0.001wt％～0.01wt％HCl的去离子水以0.5～1BV/h的流速洗脱柱子，用Molish反应不断检测流出液，直至还原糖全部洗脱出去为止；然后用酸化的质量分数25％～35％乙醇溶液以2～3BV/h的流速洗脱柱子，柱温保持在15～20℃，收集洗脱液，将洗脱液在温度45～55℃、真空度在-0.08～-0.1MPa条件下减压浓缩，减压浓缩比是5～10，回收乙醇，真空冷冻干燥，制得纯度在30％～40％的小叶女贞果花青素。
其中，步骤(2)所述的酸化的乙醇溶液为含有0.01wt％～0.1wt％盐酸或乙酸的乙醇溶液，步骤(5)所述的酸化的乙醇溶液为含有0.001％～0.01％盐酸或乙酸的乙醇溶液。
优选地，步骤(2)中的分离可采用板框过滤器或浆渣分离机；
优选地，步骤(3)中可采用浓缩罐或旋转蒸发仪进行减压。
进一步地，大孔树脂柱的预处理是用质量分数95％乙醇浸泡10-24h，再用质量分数95％乙醇洗至洗脱液加入水中不显浑浊，然后用水洗至无醇，上样。
更进一步地，步骤(5)中所述的大孔树脂柱为Amberlite XAD-7HP或AB-8，所用柱子的径高比为1:10～1:15。
与现有的技术相比，本发明具有如下优点：
(1)本发明属女贞果资源的精深加工技术，采用废置女贞果实为原料，变废为宝，成本低廉，能促进小叶女贞果实高附加值成分的综合开发利用，提高经济价值，从而提高产品的竞争力。
(2)本发明运用了萃取及柱层析联用技术，操作工艺简单，参数条件温和，生产周期短，易于工业化生产。
(3)操作过程中采用的有机溶剂安全无毒、均可回收再利用，从而节约生产成本。
(4)制备出的小叶女贞果花青素产品中的花青素种类简单，易于开展深度纯化及功能活性研究。
(5)制备出的小叶女贞果花青素产品为纯天然绿色产品，保持了果实中原有花青素的种类及特性，能够满足生产保健食品如眼保健食品、预防心脑血管疾病食品等生产的原料需求，又能为高端药品、化妆品的生产提供优等的原材料。
附图说明
图1为本发明制得的纯度为35％的小叶女贞果花青素产品超高效液相色谱图。
图中：1.矢车菊素-3-O-半乳糖苷、2.牵牛花素、3-O-半乳糖苷
从图中可以看出，矢车菊素-3-O-半乳糖苷的出峰时间在19.2min左右，牵牛花素、3-O-半乳糖苷的出峰时间在23.5min左右，说明女贞果花青素种类简单，易于分离单体，开展深度纯化及功能活性研究。
具体实施方式
实施例1
(1)取校园内小叶女贞鲜果100g，将小叶女贞鲜果打浆，制得果浆，匀浆后与500mL
含0.1wt％HCl的质量分数60％的乙醇溶液混合，25℃下闭光提取12小时后，提取后将浸提液与果渣分离；再向所得的果渣中加入500mL含0.1wt％HCl的质量分数60％的乙醇溶液混合，30℃下提取10小时，过滤，合并两次滤液，后在温度45℃、真空度在-0.08MPa条件下利用浓缩罐进行减压浓缩至50mL，回收乙醇，得女贞果花青浸提液；
(2)将上述小叶女贞果花青素粗提液与100mL的乙酸乙脂混合，充分振荡混匀后进行第一次萃取，收集下层水溶液；再将下层水溶液与乙酸乙脂按等体积混合，充分振荡混匀后进行第二次萃取，收集下层水溶液；每次萃取时间为2小时，萃取温度为25℃，萃取次数为3次，最后得花青素萃取液；通过萃取除去黄酮类、脂溶性的蛋白、多糖、色素等杂质；
(3)将15mL的花青素萃取液加入到径高比为1：15的Amberlite XAD-7HP树脂柱上，其中，大孔树脂柱是用质量分数95％乙醇浸泡10h，再用质量分数95％乙醇洗至洗脱液加入水中不显浑浊，然后用水洗至无醇，上样；上样量与柱填料的体积比例为1：6，先用含0.005wt％HCl的去离子以0.5BV/h的流速冲洗，用Molish反应不断检测流出液，直至还原糖全部洗脱出去为止，再用含0.005wt％HCl的质量分数30％的乙醇以3BV/h的流速洗柱，柱温保持在15℃，收集洗脱液，将洗脱液在温度45℃、真空度在-0.08MPa条件下减压浓缩，冷冻干燥，制得纯度35％的小叶女贞果花青素75mg；
实施例2
(1)取栽培的小叶女贞冻果300g，将小叶女贞鲜果打浆，制得果浆，匀浆后与1500mL含0.05wt％HCl的质量分数70％的乙醇混合，30℃下闭光提取12小时后，提取后将浸提液与果渣分离；再向所得的果渣中加入500mL含0.1wt％HCl的质量分数60％的乙醇溶液混合，30℃下提取10小时，过滤，合并两次滤液，后在温度45℃、真空度在-0.08MPa条件下利用浓缩罐进行减压浓缩至200mL，回收乙醇，得女贞果花青素浸提液；
(2)将女贞果花青素粗提液与300mL的乙酸乙脂混合，萃取三次，每次的萃取时间为4小时，温度为25℃，回收乙酸乙脂，收集下层水溶液，得花青素萃取液；
(3)将15mL的花青素萃取液加入到径高比为1：10的AB-8大孔树脂柱上，其中，大孔树脂柱是用质量分数95％乙醇浸泡10h，再用质量分数95％乙醇洗至洗脱液加入水中不显浑浊，然后用水洗至无醇，上样；上样量与柱填料的比例为1：8，先用含0.005wt％HCl的去离子1BV/h的流速冲洗，用Molish反应不断检测流出液，直至还原糖全部洗脱出去为止，再用含0.005wt％HCl的质量分数25％的乙醇以2BV/h的流速洗柱，柱温保持在20℃，收集洗脱液，将洗脱液在温度45℃、真空度在-0.08MPa条件下减压浓缩，冷冻干燥，制得纯度35％的小叶女贞果花青素280mg。

Claims (7)

1.一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法，具体步骤如下：
(1)原料预处理：将新鲜或冷冻的小叶女贞果皮和果肉打浆，制得果浆；
(2)浸提液制备：向果浆中加入质量分数60％～80％的酸化的乙醇溶液，果浆与酸化的乙醇溶液的质量比为1：5～8，进行提取，提取后将浸提液与果渣分离；再向所得的果渣中加入质量分数60％～80％的酸化的乙醇溶液，果渣与酸化的乙醇溶液的质量比为1：5～8，进行提取，提取后将浸提液与果渣分离；合并两次浸提液；每次提取的温度为25～40℃，提取时间的为10～15小时；
(3)粗提液制备：将步骤(2)得到的浸提液在温度45～55℃、真空度在-0.08～-0.1MPa条件下进行减压浓缩，减压浓缩比为5～10，回收乙醇，得小叶女贞果花青素粗提液；
(4)花青素萃取液制备：将步骤(3)得到的小叶女贞果花青素粗提液与乙酸乙酯按体积比1：1～3混合，充分振荡混匀后进行第一次萃取，收集下层水溶液；再将下层水溶液与乙酸乙酯按体积比1：1～3混合，充分振荡混匀后进行第二次萃取，收集下层水溶液；每次萃取时间为2～4小时，萃取温度为25～30℃，萃取次数为2～4次，最后得花青素萃取液；通过萃取除去黄酮类、脂溶性的蛋白、多糖、色素杂质；
(5)大孔树脂柱纯化：将步骤(4)中制得的小叶女贞果花青素萃取液加入到预处理后的大孔树脂柱内，除去糖类、蛋白类、弱极性的黄酮类，上样量为树脂体积的1/6～1/8；再用含0.001wt％～0.01wt％HCl的去离子水以0.5～1BV/h的流速洗脱柱子，用Molish反应不断检测流出液，直至还原糖全部洗脱出去为止；然后用酸化的质量分数25％～35％乙醇溶液以2～3BV/h的流速洗脱柱子，柱温保持在15～20℃，收集洗脱液，将洗脱液在温度45～55℃、真空度在-0.08～-0.1MPa条件下减压浓缩，减压浓缩比是5～10，回收乙醇，真空冷冻干燥，制得纯度在30％～40％的小叶女贞果花青素。
2.如权利要求1所述的一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法，其特征在于：步骤(2)所述的酸化的乙醇溶液为含有0.01％～0.1％盐酸或乙酸的乙醇溶液。
3.如权利要求1所述的一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法，其特征在于：步骤(2)所述的分离可采用板框过滤器或浆渣分离机。
4.如权利要求1所述的一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法，其特征在于：步骤(2)所述的减压可采用浓缩罐或旋转蒸发仪。
5.如权利要求1所述的一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法，其特征在于：步骤(5)所述的酸化的乙醇溶液为含有0.001％～0.01％盐酸或乙酸的乙醇溶液。
6.如权利要求1所述的一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法，其特征在于：步骤(5)中所述大孔树脂柱的预处理是用95％乙醇浸泡10-24h，再用95％乙醇洗至洗脱液加入水中不显浑浊，然后用水洗至无醇，上样。
7.如权利要求1所述的一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法，其特征在于：步骤(5)中所述的大孔树脂柱为Amberlite XAD-7HP或AB-8，所用柱子的径高比为1:10～1:15。
CN201510412024.2A 2015-07-14 2015-07-14 一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法 Active CN105017201B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510412024.2A CN105017201B (zh) 2015-07-14 2015-07-14 一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510412024.2A CN105017201B (zh) 2015-07-14 2015-07-14 一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105017201A CN105017201A (zh) 2015-11-04
CN105017201B true CN105017201B (zh) 2017-03-01

Family

ID=54407551

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510412024.2A Active CN105017201B (zh) 2015-07-14 2015-07-14 一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105017201B (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107173802A (zh) * 2017-05-19 2017-09-19 上海属我食尚企业发展有限公司 一种野生蓝莓花青素片及其生产方法
CN111413332B (zh) * 2020-04-09 2021-07-23 吉林大学 一种基于天然色素花青素的糖类区分方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
中药女贞子化学成分及质量控制方法的研究进展;高素强等;《中南药学》;20121231;第10卷(第11期);835-838 *
大孔吸附树脂分离纯化女贞子原花青素的动力学和热力学研究;刘晓庚等;《中国粮油学报》;20090131;第24卷(第1期);124-128 *
小叶女贞果实花青素组分鉴定及色谱纯化技术;王二雷等;《农业工程学报》;20160228;第32卷(第4期);302-308 *
金叶女贞果实花青素的镇痛作用初探;王静等;《中国临床药理学与治疗学》;20150131;第20卷(第1期);38-42 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN105017201A (zh) 2015-11-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109942380B (zh) 一种利用高速逆流色谱分离纯化制备大麻二酚的方法
CN105949163B (zh) 一种黑果腺肋花楸果渣中花青素的提取纯化方法
CN102250195B (zh) 一种文冠果壳苷的生产方法
CN102229633A (zh) 一种从葡萄皮中分离制备五种高纯度花色苷单体的方法
CN109369820B (zh) 一种从巨藻中提取海藻多糖的方法
CN110003071A (zh) 一种快速高效地提取叶黄素和槲皮万寿菊素的工业化方法
CN105017201B (zh) 一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法
CN102327312A (zh) 一种从金银花叶茎藤中提取有效成份的方法
CN105384716A (zh) 富集纯化黑枸杞花青素的方法
CN103525557B (zh) 玉兰花香气物质提取前的生态养花方法
CN110613751A (zh) 一种分离纯化大麻黄素的方法
CN108117571B (zh) 一种龙胆苦苷单体的制备方法
CN107778276B (zh) 一种提取花青素的方法
CN101492350B (zh) 从植物刺槐中制备d-松醇的方法
CN101659793A (zh) 一种红凤菜紫色素的提取方法
CN103467262B (zh) 从樟树植株中制备9-oxonerolidol的方法
CN104163754A (zh) 一种从花生根中提取分离高纯度白藜芦醇的方法
CN109053833B (zh) 一种利用中压液相色谱从桑葚中制备矢车菊素-3-葡萄糖苷的方法
CN108997359A (zh) 一种从甜菊糖生产废渣中提取叶绿素的方法
CN105294395A (zh) 一种同步提取-组合柱层析-结晶纯化制备虫草酸、虫草素的方法
CN112500448B (zh) 从百合科葱属植物中提取拉肖皂苷元的方法
CN101445456A (zh) 从一枝黄花中提取分离绿原酸的方法
CN110092810B (zh) 一种茶皂素提取精制方法
CN104341472A (zh) 从火炬树果实提取花色苷的方法
CN102558269B (zh) 一种从筋骨草中提取蜕皮激素的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant