CN111153950A - 一种采用模拟移动床色谱提取高纯甜菊糖苷的方法 - Google Patents

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Abstract

一种采用模拟移动床色谱提取高纯甜菊糖苷的方法，包括如下步骤：原料提取、絮凝工序、吸附分离、浓缩、结晶、离心分离、用模拟移动床色谱分离甜菊糖苷浓缩液中的甜菊糖苷、将萃取液和萃余液分别用薄膜旋转蒸发器浓缩至无醇味，用乙醇洗出后在真空干燥箱烘干至恒重。本发明的利用模拟移动床提取甜菊糖苷的方法，使得总苷含量高于99％，甜菊糖苷A含量高于98％，提纯效果显著。

Description

一种采用模拟移动床色谱提取高纯甜菊糖苷的方法
技术领域
本发明涉及天然植物有效组分的提纯方法，尤其涉及一种采用模拟移动床色谱提取高纯甜菊糖苷的方法。
背景技术
甜叶菊(stevia rebaudiana)别名甜菊、糖草，属菊科(Compositae),斯台维亚属，原产地在南美亚热带地区。我国自1976年开始由南京中山植物园、中国农业科学院等科研单位先后从日本引进甜叶菊试种成功。甜叶菊含有14种微量元素、32种营养成分，在体内不代谢、不蓄积、不致癌、无毒性，其安全性已得到国际FAO和WHO以及美国FAD等组织的认可，因此它既是极好的糖源，又是良好的营养来源。
甜叶菊糖苷，简称甜菊苷，是从干燥后的甜叶菊叶片中提取出来的一类具甜味的萜烯类配糖体，主要包含8种具有不同甜度的糖苷。甜菊苷具有高甜度(为蔗糖的200-300倍)﹑低热量(仅为蔗糖的1/300)的特性，长期食用不会使人发胖，特别适宜肥胖病、糖尿病、高血压、动脉硬化、龋齿病患者使用，而且物理、化学性能稳定、无发酵性，可延长甜叶菊糖苷制品的保质期。因而日益引起人们的关注和重视，被广泛应用在食品和药物行业中，被誉为继蔗糖、甜菜糖之后的第三种天然糖源，是最有发展前途的新糖源。
目前从甜叶菊中提取甜菊糖苷的一般工艺包括：甜叶菊水浸提取、粗滤、絮凝剂除杂、精滤、柱层析纯化、浓缩干燥和结晶等过程。在这些过程中，水浸泡提取时耗水量大，需要蒸水浓缩，能耗高；絮凝剂除杂时，在浸出液中加入絮凝剂后产生大量沉淀，虽然能除去大部分杂质，但也会吸附一部分甜菊糖苷，降低产品收率，同时又产生大量盐；柱层析纯化为该工艺的关键步骤，除了去除甜菊糖苷提取液中残留的少量色素、鞣质和其它糖类，还能脱盐等杂质，但树脂和流动相用量大，树脂利用率低，而且树脂需要再生，脱盐、脱色树脂再生周期一般很长，而且产生大量废水。
因此，有必要对甜菊糖苷的提取方法进行改进。
发明内容
基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种采用模拟移动床色谱提取高纯甜菊糖苷的方法，其过程简单，条件温和，提取率高，纯度高。
本发明的目的是通过如下的方案实现的：
一种采用模拟移动床色谱提取高纯甜菊糖苷的方法，包括如下步骤：
(1)原料提取：通过筛选选取优质甜叶菊干叶在水温70-90℃下进行2级逆流提取，提取液进入下一工序；
(2)絮凝工序：将提取液放置到40-50℃的水浴中进行恒温搅拌10-20min，搅拌速度为30-60rpm，然后加絮凝剂，调节pH至8-10，静置20-50min，过滤得到甜叶菊澄清水提液；所述絮凝剂原料按重量份包括：壳聚糖5-9份，木质素15-25份，过硫酸铵10-18份，聚合硫酸铝铁20-25份，柠檬酸铝22-24份，硫酸镁2-7份，氯化钙1-4份，聚硅酸铁15-25份，羧甲基纤维素钠3-6份，活性炭5-7份，膨润土1-2份，粉煤灰2-4份；
(3)吸附分离：将提取滤液用大孔吸附树脂吸附饱和后，停止上料，先水洗，再用50-85％乙醇解吸，收集解吸液；
(4)浓缩、结晶：将解吸液减压浓缩至投料量的2-3倍，加入95％乙醇结晶5-12小时；
(5)离心分离：将结晶料用离心机离心，95％乙醇淋洗，得初步结晶体；
(6)将步骤(5)的初步结晶体用水溶解形成甜菊糖苷浓缩液，用模拟移动床色谱分离甜菊糖苷浓缩液中的甜菊糖苷，模拟移动床色谱的固定相采用C18硅胶，流动相采用乙醇与水、甲酸、异丙醇的混合溶液，混合溶液中按体积百分计：乙醇：30-60％，甲酸：0-2％，异丙醇：0-3.5％，余量为水；上述的模拟移动床由4～8根色谱柱组成，色谱柱分四个区域，每区由1～2支相同的色谱柱串联；进样液流速UP为15-20ml/min；洗脱液流速UE为20-35ml/min；萃余液流速UR为15-20ml/min；萃取液流速UX为20-35ml/min；切换时间Ts为0.5～60min；
(7)将萃取液和萃余液分别用薄膜旋转蒸发器浓缩至无醇味，用乙醇洗出后在真空干燥箱烘干至恒重。
进一步地，所述步骤(2)中的壳聚糖为改性壳聚糖，改性壳聚糖的制备方法为：将壳聚糖用95％乙醇浸泡2-5h后移入反应器内，按香兰素与壳聚糖2-5∶1-4的质量比加入香兰素，以水为溶剂在水浴上搅拌回流，再加入浓度为10％的稀氢氧化钠溶液过滤清洗，再用丙酮萃取，然后去除未反应的香兰素等杂质，干燥得香兰素改性壳聚糖。
进一步地，所述聚合硫酸铝铁的制备具体步骤如下：(1)将50-60g七水硫酸亚铁置于烧杯中，边加入蒸馏水边搅拌成均匀的稀糊状硫酸亚铁混合液；然后在搅拌下缓慢加入3-4mL98％的浓H2SO4进行酸化，调节混合液的pH在0.6～1.0；(2)在步骤(1)制成的液体中，边搅拌边加入3.5-4.3g氯酸钠进行氧化；同时，慢速搅拌，当形成均匀的液体，不出现任何气泡时即可；(3)按AL/Fe摩尔比为1:11～1:9称取硫酸铝，加入蒸馏水溶解，待溶解以后加入到步骤(2)中的硫酸亚铁混合液中，同时，慢速搅拌均匀；(4)将硫酸亚铁混合液放入水浴锅中，控制水浴温度为60℃～80℃；启动搅拌器，慢速搅拌30-60min；聚合反应过程中，按P/Fe摩尔比为0.1～0.3的比例加入H3PO4作为稳定剂；(5)搅拌20-45min，待液体均匀后，加入少量Na2CO3调整碱化度至0.3；(6)待搅拌完成以后，取出产品静置24小时即得产品,然后将水蒸发后烘干得到聚合硫酸铝铁。
进一步地，步骤(2)中絮凝工序：将提取液放置到48℃的水浴中进行恒温搅拌16min，搅拌速度为50rpm，然后加絮凝剂，调节pH至9，静置35min，过滤得到甜叶菊澄清水提液；所述絮凝剂原料按重量份包括：壳聚糖5.2-6.3份，木质素15.1-18.9份，过硫酸铵11-15.2份，聚合硫酸铝铁21.3-23.2份，柠檬酸铝22.4-23份，硫酸镁3.1-5.2份，氯化钙1.5-2.4份，聚硅酸铁16.4-19.5份，羧甲基纤维素钠3.5-4.4份，活性炭5.8-6.5份，膨润土1.1-1.5份，粉煤灰2.3-2.9份。
进一步地，步骤(3)中，混合溶液中按体积百分计：乙醇：55％，甲酸：1％，异丙醇：2％，水：42％。
进一步地，模拟移动床色谱系统的操作温度为20～80℃。
进一步地，模拟移动床色谱系统的操作温度为65～75℃。
进一步地，进样液流速Up为16-18ml/min；洗脱液流速UE为22-30ml/min；萃余液流速UR为16-18ml/min；萃取液流速UX为23-33ml/min；切换时间Ts为5～15min。
进一步地，絮凝剂原料按重量份包括：壳聚糖7.2-8.9份，木质素21.2-24.7份，过硫酸铵15.3-17.5份，聚合硫酸铝铁23.5-24.6份，柠檬酸铝23.1-23.5份，硫酸镁3.4-6份，氯化钙3-3.5份，聚硅酸铁22-23.8份，羧甲基纤维素钠4.4-5.6份，活性炭6.1-6.5份，膨润土1.3-1.85份，粉煤灰3-3.7份。
进一步地，提供一种采上述方法制得的甜菊糖苷。
本发明絮凝剂的制备方法为：将壳聚糖，木质素，过硫酸铵，聚合硫酸铝铁，柠檬酸铝，硫酸镁，氯化钙，聚硅酸铁，羧甲基纤维素钠，活性炭，膨润土，粉煤灰混合均匀得到。
本发明与现有技术相比，其显著的有益效果体现在：
本发明的絮凝剂结合模拟移动床色谱提取工艺，通过对絮凝剂成分和含量的优化，获得的絮凝剂大大提高了絮凝效果，同时易于分离，损失总苷少。
采用壳聚糖，木质素，聚合硫酸铝铁作为大分子絮凝剂，使甜叶菊水提液中大量的非糖苷有机、无机杂质快速连接形成絮凝体，然后发生沉降，柠檬酸铝在碱性条件下形成沉淀，和活性炭、膨润土、粉煤灰配合作用，不仅增大了絮凝体体积，还能提高絮凝体沉降速度，活性炭、膨润土、粉煤灰在沉降的过程中还能吸附大量甜叶菊水提液中的叶绿素、色素、无机盐等杂质，起到脱色脱盐的效果，大大提高了甜菊糖苷除杂工艺的效率，缩短除杂工艺的生产周期。
利用SMB分离技术能够规模化、稳健、连续、自动、高效地从甜菊糖苷粗提液中提纯甜菊糖苷，固定相和流动相能反复利用，降低了提纯成本，属于绿色环保分离过程。本发明层所用固定相在洗脱目标物时重复使用无需专门再生过程，减少废水排放量。本发明的利用絮凝结合模拟移动床提取甜菊糖苷的方法，使得总苷含量高于99％，甜菊糖苷A含量高于98％，提纯效果显著。
具体实施方式
下面，通过具体实施例对本发明的技术方案进行详细说明。
实施例1
一种采用模拟移动床色谱提取高纯甜菊糖苷的方法，包括如下步骤：
(1)原料提取：通过筛选选取优质甜叶菊干叶在水温80℃下进行2级逆流提取，提取液进入下一工序；
(2)絮凝工序：将提取液放置到42℃的水浴中进行恒温搅拌16min，搅拌速度为35rpm，然后加絮凝剂，调节pH至9，静置35min，过滤得到甜叶菊澄清水提液；
所述絮凝剂，其原料按重量份包括：壳聚糖6.6份，木质素18.5份，过硫酸铵15.8份，聚合硫酸铝铁23份，柠檬酸铝23.5份，硫酸镁4.2份，氯化钙3.3份，聚硅酸铁18.2份，羧甲基纤维素钠3.6份，活性炭5.5份，膨润土1.45份，粉煤灰2.8份。
所述聚合硫酸铝铁的制备具体步骤如下：(1)将55g七水硫酸亚铁置于烧杯中，边加入蒸馏水边搅拌成均匀的稀糊状硫酸亚铁混合液；然后在搅拌下缓慢加入3mL 98％的浓H2SO4进行酸化，调节混合液的pH在1.0；(2)在步骤(1)制成的液体中，边搅拌边加入3.8g氯酸钠进行氧化；同时，慢速搅拌，当形成均匀的液体，不出现任何气泡时即可；(3)按AL/Fe摩尔比为1:11称取硫酸铝，加入蒸馏水溶解，待溶解以后加入到步骤(2)中的硫酸亚铁混合液中，同时，慢速搅拌均匀；(4)将硫酸亚铁混合液放入水浴锅中，控制水浴温度为75℃；启动搅拌器，慢速搅拌45min；聚合反应过程中，按P/Fe摩尔比为0.2的比例加入H3PO4作为稳定剂；(5)搅拌28min，待液体均匀后，加入少量Na2CO3调整碱化度至0.3；(6)待搅拌完成以后，取出产品静置24小时即得产品,，然后将水蒸发后烘干得到聚合硫酸铝铁。
(3)吸附分离：将提取滤液用大孔吸附树脂吸附饱和后，停止上料，先水洗，再用50-85％乙醇解吸，收集解吸液；
(4)浓缩、结晶：将解吸液减压浓缩至投料量的2.5倍，加入95％乙醇结晶8小时；
(5)离心分离：将结晶料用离心机离心，95％乙醇淋洗，得初步结晶体；
(6)将步骤(5)的初步结晶体用水溶解形成甜菊糖苷浓缩液，用模拟移动床色谱分离甜菊糖苷浓缩液中的甜菊糖苷，模拟移动床色谱的固定相采用C18硅胶，流动相采用乙醇与水、甲酸、异丙醇的混合溶液，混合溶液中按体积百分计：乙醇：35％，甲酸：1.8％，异丙醇：1.2％，水：62％；上述的模拟移动床由8根色谱柱组成，色谱柱分四个区域，每区由2支相同的色谱柱串联；用匀浆法填装8根色谱柱(10mm×100mm)，填料为反相C18硅胶，粒径8μm，孔径
Figure BDA0002215683260000081
模拟移动床色谱系统(SMBC)，SMBC系统包括进样泵、洗脱液泵、萃取泵、萃余泵和循环泵、旋转阀和色谱柱。样品溶液和洗脱液分别从样品液入口与洗脱液入口注入色谱系统。每隔一定时间，样品液和洗脱液入口、萃取液和萃余液出口同时沿流动相方向切换至下一根色谱柱出口。经过SMBC的分离，从萃取液出口可获得高纯度的甜菊糖苷萃取液，从萃余液出口则可获得较高纯度的甜菊糖苷萃取液。
模拟移动床色谱参数：本发明方法中的模拟移动床由8支色谱柱组成4个区域，经电磁阀切换改变进料口、出料口位置。进样液流速Up为17ml/min；洗脱液流速UE为25ml/min；萃余液流速UR为17ml/min；萃取液流速UX为26ml/min；切换时间Ts为10min。
(7)将萃取液和萃余液分别用薄膜旋转蒸发器浓缩至无醇味，用乙醇洗出后在真空干燥箱烘干至恒重。
按照此方法使得总苷含量达到99％，甜菊糖苷A含量高于98％。
实施例2
一种采用模拟移动床色谱提取高纯甜菊糖苷的方法，包括如下步骤：
(1)原料提取：通过筛选选取优质甜叶菊干叶在水温75℃下进行2级逆流提取，提取液进入下一工序；
(2)絮凝工序：将提取液放置到46℃的水浴中进行恒温搅拌16min，搅拌速度为55rpm，然后加絮凝剂，调节pH至9，静置35min，过滤得到甜叶菊澄清水提液；
所述絮凝剂，其原料按重量份包括：壳聚糖7.3份，木质素18.4份，过硫酸铵16.6份，聚合硫酸铝铁23.5份，柠檬酸铝23份，硫酸镁3.5份，氯化钙2.6份，聚硅酸铁19.6份，羧甲基纤维素钠3.9份，活性炭6.6份，膨润土1.25份，粉煤灰3.4份。
所述壳聚糖为改性壳聚糖，改性壳聚糖的制备方法为：将壳聚糖用95％乙醇浸泡3h后移入反应器内，按香兰素与壳聚糖2∶3的质量比加入香兰素，以水为溶剂在水浴上搅拌回流，再加入浓度为10％的稀氢氧化钠溶液过滤清洗，再用丙酮萃取，然后去除未反应的香兰素等杂质，干燥得香兰素改性壳聚糖，所述水浴温度为70℃，反应器内反应的时间为16h，反应溶液的pH为5。
所述聚合硫酸铝铁的制备具体步骤如下：(1)将54g七水硫酸亚铁置于烧杯中，边加入蒸馏水边搅拌成均匀的稀糊状硫酸亚铁混合液；然后在搅拌下缓慢加入3.6mL98％的浓H2SO4进行酸化，调节混合液的pH在0.8；(2)在步骤(1)制成的液体中，边搅拌边加入3.8g氯酸钠进行氧化；同时，慢速搅拌，当形成均匀的液体，不出现任何气泡时即可；(3)按AL/Fe摩尔比为1:10称取硫酸铝，加入蒸馏水溶解，待溶解以后加入到步骤(2)中的硫酸亚铁混合液中，同时，慢速搅拌均匀；(4)将硫酸亚铁混合液放入水浴锅中，控制水浴温度为75℃；启动搅拌器，慢速搅拌40min；聚合反应过程中，按P/Fe摩尔比为0.2的比例加入H3PO4作为稳定剂；(5)搅拌30min，待液体均匀后，加入少量Na2CO3调整碱化度至0.3；(6)待搅拌完成以后，取出产品静置24小时即得产品,，然后将水蒸发后烘干得到聚合硫酸铝铁。
(3)吸附分离：将提取滤液用大孔吸附树脂吸附饱和后，停止上料，先水洗，再用55％乙醇解吸，收集解吸液；
(4)浓缩、结晶：将解吸液减压浓缩至投料量的2.7倍，加入95％乙醇结晶8小时；
(5)离心分离：将结晶料用离心机离心，95％乙醇淋洗，得初步结晶体；
(6)将步骤(5)的初步结晶体用水溶解形成甜菊糖苷浓缩液，用模拟移动床色谱分离甜菊糖苷浓缩液中的甜菊糖苷，模拟移动床色谱的固定相采用C18硅胶，流动相采用乙醇与水、甲酸、异丙醇的混合溶液，混合溶液中按体积百分计：乙醇：40％，甲酸：0.5％，异丙醇：1％，水：58.5％；上述的模拟移动床由8根色谱柱组成，色谱柱分四个区域，每区由2支相同的色谱柱串联；用匀浆法填装8根色谱柱(10mm×100mm)，填料为反相C18硅胶，粒径10μm，孔径
Figure BDA0002215683260000111
模拟移动床色谱系统(SMBC)，SMBC系统包括进样泵、洗脱液泵、萃取泵、萃余泵和循环泵、旋转阀和色谱柱。样品溶液和洗脱液分别从样品液入口与洗脱液入口注入色谱系统。每隔一定时间，样品液和洗脱液入口、萃取液和萃余液出口同时沿流动相方向切换至下一根色谱柱出口。经过SMBC的分离，从萃取液出口可获得高纯度的甜菊糖苷萃取液，从萃余液出口则可获得较高纯度的甜菊糖苷萃取液。
模拟移动床色谱参数：本发明方法中的模拟移动床由8支色谱柱组成4个区域，经电磁阀切换改变进料口、出料口位置。进样液流速Up为16ml/min；洗脱液流速UE为28ml/min；萃余液流速UR为18ml/min；萃取液流速UX为30ml/min；切换时间Ts为20min。
(7)将萃取液和萃余液分别用薄膜旋转蒸发器浓缩至无醇味，用乙醇洗出后在真空干燥箱烘干至恒重。
按照此方法使得总苷含量达到99％，甜菊糖苷A含量高于98％。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种采用模拟移动床色谱提取高纯甜菊糖苷的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)原料提取：通过筛选选取优质甜叶菊干叶在水温70-90℃下进行2级逆流提取，提取液进入下一工序；
(2)絮凝工序：将提取液放置到40-50℃的水浴中进行恒温搅拌10-20min，搅拌速度为30-60rpm，然后加絮凝剂，调节pH至8-10，静置20-50min，过滤得到甜叶菊澄清水提液；所述絮凝剂原料按重量份包括：壳聚糖5-9份，木质素15-25份，过硫酸铵10-18份，聚合硫酸铝铁20-25份，柠檬酸铝22-24份，硫酸镁2-7份，氯化钙1-4份，聚硅酸铁15-25份，羧甲基纤维素钠3-6份，活性炭5-7份，膨润土1-2份，粉煤灰2-4份；
(3)吸附分离：将提取滤液用大孔吸附树脂吸附饱和后，停止上料，先水洗，再用50-85％乙醇解吸，收集解吸液；
(4)浓缩、结晶：将解吸液减压浓缩至投料量的2-3倍，加入95％乙醇结晶5-12小时；
(5)离心分离：将结晶料用离心机离心，95％乙醇淋洗，得初步结晶体；
(6)将步骤(5)的初步结晶体用水溶解形成甜菊糖苷浓缩液，用模拟移动床色谱分离甜菊糖苷浓缩液中的甜菊糖苷，模拟移动床色谱的固定相采用C18硅胶，流动相采用乙醇与水、甲酸、异丙醇的混合溶液，混合溶液中按体积百分计：乙醇：30-60％，甲酸：0-2％，异丙醇：0-3.5％，余量为水；上述的模拟移动床由4～8根色谱柱组成，色谱柱分四个区域，每区由1～2支相同的色谱柱串联；进样液流速Up为15-20ml/min；洗脱液流速UE为20-35ml/min；萃余液流速UR为15-20ml/min；萃取液流速UX为20-35ml/min；切换时间Ts为0.5～60min；
(7)将萃取液和萃余液分别用薄膜旋转蒸发器浓缩至无醇味，用乙醇洗出后在真空干燥箱烘干至恒重。
2.如权利要求1所述的采用模拟移动床色谱提取高纯甜菊糖苷的方法，其特征在于，所述步骤(2)中的壳聚糖为改性壳聚糖，改性壳聚糖的制备方法为：将壳聚糖用95％乙醇浸泡2-5h后移入反应器内，按香兰素与壳聚糖2-5∶1-4的质量比加入香兰素，以水为溶剂在水浴上搅拌回流，再加入浓度为10％的稀氢氧化钠溶液过滤清洗，再用丙酮萃取，然后去除未反应的香兰素等杂质，干燥得香兰素改性壳聚糖。
3.如权利要求1所述的采用模拟移动床色谱提取高纯甜菊糖苷的方法，其特征在于，所述聚合硫酸铝铁的制备具体步骤如下：(1)将50-60g七水硫酸亚铁置于烧杯中，边加入蒸馏水边搅拌成均匀的稀糊状硫酸亚铁混合液；然后在搅拌下缓慢加入3-4mL98％的浓H2SO4进行酸化，调节混合液的pH在0.6～1.0；(2)在步骤(1)制成的液体中，边搅拌边加入3.5-4.3g氯酸钠进行氧化；同时，慢速搅拌，当形成均匀的液体，不出现任何气泡时即可；(3)按AL/Fe摩尔比为1:11～1:9称取硫酸铝，加入蒸馏水溶解，待溶解以后加入到步骤(2)中的硫酸亚铁混合液中，同时，慢速搅拌均匀；(4)将硫酸亚铁混合液放入水浴锅中，控制水浴温度为60℃～80℃；启动搅拌器，慢速搅拌30-60min；聚合反应过程中，按P/Fe摩尔比为0.1～0.3的比例加入H3PO4作为稳定剂；(5)搅拌20-45min，待液体均匀后，加入少量Na2CO3调整碱化度至0.3；(6)待搅拌完成以后，取出产品静置24小时即得产品,然后将水蒸发后烘干得到聚合硫酸铝铁。
4.如权利要求1所述的采用模拟移动床色谱提取高纯甜菊糖苷的方法，其特征在于，步骤(2)中絮凝工序：将提取液放置到48℃的水浴中进行恒温搅拌16min，搅拌速度为50rpm，然后加絮凝剂，调节pH至9，静置35min，过滤得到甜叶菊澄清水提液；所述絮凝剂原料按重量份包括：壳聚糖5.2-6.3份，木质素15.1-18.9份，过硫酸铵11-15.2份，聚合硫酸铝铁21.3-23.2份，柠檬酸铝22.4-23份，硫酸镁3.1-5.2份，氯化钙1.5-2.4份，聚硅酸铁16.4-19.5份，羧甲基纤维素钠3.5-4.4份，活性炭5.8-6.5份，膨润土1.1-1.5份，粉煤灰2.3-2.9份。
5.如权利要求1所述的采用模拟移动床色谱提取高纯甜菊糖苷的方法，其特征在于，步骤(3)中，混合溶液中按体积百分计：乙醇：55％，甲酸：1％，异丙醇：2％，水：42％。
6.如权利要求1所述的采用模拟移动床色谱技术提取甜菊糖苷的方法，其特征在于，模拟移动床色谱系统的操作温度为20～80℃。
7.如权利要求1所述的采用模拟移动床色谱技术提取甜菊糖苷的方法，其特征在于，模拟移动床色谱系统的操作温度为65～75℃。
8.如权利要求1所述的采用模拟移动床色谱技术提取甜菊糖苷的方法，其特征在于，进样液流速Up为16-18ml/min；洗脱液流速UE为22-30ml/min；萃余液流速UR为16-18ml/min；萃取液流速UX为23-33ml/min；切换时间Ts为5～15min。
9.如权利要求1所述的采用模拟移动床色谱技术提取甜菊糖苷的方法，其特征在于，絮凝剂原料按重量份包括：壳聚糖7.2-8.9份，木质素21.2-24.7份，过硫酸铵15.3-17.5份，聚合硫酸铝铁23.5-24.6份，柠檬酸铝23.1-23.5份，硫酸镁3.4-6份，氯化钙3-3.5份，聚硅酸铁22-23.8份，羧甲基纤维素钠4.4-5.6份，活性炭6.1-6.5份，膨润土1.3-1.85份，粉煤灰3-3.7份。
10.一种采用权利要求1-9所述的方法制得的甜菊糖苷。
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