CN111011599A - 一种清除动物机体内毒素的添加剂的制备方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及动物养殖技术领域,且公开了一种清除动物机体内毒素的添加剂的制备方法,1)高含量的葡萄糖氧化酶发酵液获取;2)发酵液离心浓缩处理;3)葡萄糖氧化酶的提纯及脱盐;4)形成葡萄糖氧化酶冻干成品。该清除动物机体内毒素的添加剂的制备方法,具有解毒效率高、特异性强、对饲料和环境没有污染等特点和优势,并且通过清除体内各种毒素,提高动物机体的整体免疫力和抗体水平,降低发病率和死亡率,促进免疫功能,减轻霉菌毒素造成的免疫抑制,破坏毒素中的特定功能团,将毒素转化成为无毒产物排出体外,减少动物的拉稀腹泻,减少呼吸道病的发生,保护动物胚胎正常发育,减少流产的发生。
Description
技术领域
本发明涉及动物养殖技术领域,具体为一种清除动物机体内毒素的添加剂的制备方法及应用。
背景技术
目前,在我国的养殖生产中,随着集约化和规模化的程度不断提高,养殖过程也面临了很多问题需要解决,比如抗生素和疫苗的滥用,饲料中重金属的超量添加,饲料原料霉菌毒素的大量存在,养殖环境硫化氢和氨气浓度的超标,给动物机体造成了大量的内毒素,使动物长期处于亚健康状态。
目前市场上常见到的大多都是清除饲料中的霉菌毒素,针对性并不强,只针对霉菌毒素的某一种或两三种作用强,霉菌毒素存在多种,并且霉菌毒素对畜牧产业造成显著的经济损失外,部分霉菌毒素还具有致癌性或致畸胎性,可经由食用肉或乳汁传至人类,而且目前饲料工业和养殖业的着重点是抑霉、杀霉,饲料及其饲料原料无肉眼可见的霉变即可,然而霉菌毒素是肉眼看不见的,它的产生至今仍是畜禽的生产性能下降、易感性提高、疾病频频发生的原因,故而提出一种清除动物机体内毒素的添加剂的制备方法及应用解决上述的问题。
发明内容
(一)解决的技术问题
针对现有技术的不足,本发明提供了一种清除动物机体内毒素的添加剂的制备方法及应用,具备针对性强等优点,解决了目前市场上常见到的大多都是清除饲料中的霉菌毒素,针对性并不强,只针对霉菌毒素的某一种或两三种作用强,霉菌毒素存在多种,并且霉菌毒素对畜牧产业造成显著的经济损失外,部分霉菌毒素还具有致癌性或致畸胎性,可经由食用肉或乳汁传至人类,而且目前饲料工业和养殖业的着重点是抑霉、杀霉,饲料及其饲料原料无肉眼可见的霉变即可,然而霉菌毒素是肉眼看不见的,它的产生至今仍是畜禽的生产性能下降、易感性提高、疾病频频发生的问题。
(二)技术方案
为实现上述针对性强的目的,本发明提供如下技术方案:一种清除动物机体内毒素的添加剂的制备方法,包括以下步骤:
1)高含量的葡萄糖氧化酶发酵液获取:挑取长满可产葡萄糖氧化酶点的青霉菌菌苔,在一级培养基中30~32℃振荡培养24h;然后以2~3%接种量接种于二级培养基中,30~32℃振荡培养24h;最后以2~3%接种量接种于内有三级培养基的发酵罐中,控制溶氧为60%以上,pH保持在6.0~7.0之间,发酵36~48h即可得到酶活为7.0U以上的葡萄糖氧化酶发酵液;
2)发酵液离心浓缩处理:对发酵液进行离心处理,8000rpm,20min,收取上清液,微滤去除残留的微小颗粒及菌体,超滤浓缩,直至酶活达到20U以上的葡萄糖氧化酶发酵液;
3)葡萄糖氧化酶的提纯及脱盐:4℃条件下,向超滤浓缩酶液体中缓缓加入硫酸铵固体颗粒,直至形成90%硫酸铵溶液,盐析4~6h,12000r/min离心得沉淀,用pH7.0的Tris-HCl缓冲溶液收取沉淀蛋白,加去离子水稀释8~10倍,超滤脱盐浓缩处理;
4)形成葡萄糖氧化酶冻干成品:加入保护剂于-20℃条件下冷冻真空干燥48小时,即得到葡萄糖氧化酶冻干品;
5)然后将人参、干姜、藿香、白术、厚朴、茯苓按质量1:2:6:3:2:1.5混合粉碎,然后过筛子,得中草药粉;将得到的中草药粉置于鼓风干燥箱内烘干,使其含水量低于10%,烘干温度为60-65℃,即得复方中草药;
6)最后将步骤四中制得的葡萄糖氧化酶冻干品和步骤五中制得的复方中草药与N-乙酰葡糖胺转移酶和双极性硅铝酸盐进行充分混合即可制得添加剂。
优选的,所述步骤四中的原料配比为人参10份、干姜20份、藿香60份、白术30份、厚朴20份和茯苓15份。
优选的,所述步骤五中的原料配比为N-乙酰葡糖胺转移酶3份、葡萄糖氧化酶10份、双极性硅铝酸盐20份和复方中草药1份。
优选的,所述步骤五中的筛子为两百目。
本发明要解决的另一技术问题是提供一种清除动物机体内毒素的添加剂的应用,将该清除动物机体内毒素的添加剂应用在养殖业中,将N-乙酰葡糖胺转移酶、葡萄糖氧化酶和双极性硅铝酸盐、复方中药植物精华结合,体内体外吸附、解毒、提高免疫力、促生长、保肝利胆、改变圈舍环境。
(三)有益效果
与现有技术相比,本发明提供了一种清除动物机体内毒素的添加剂的制备方法,具备以下有益效果:
1、该清除动物机体内毒素的添加剂的制备方法,通过设置N-乙酰葡糖胺转移酶、葡萄糖氧化酶、双极性硅铝酸盐和复方中草药,通过生物转化脱毒,迅速清除动物体内积累毒素,解除动物体内抗生素与重金属中毒,能在血液和肠道中针对性地高效处理各种霉菌毒素,破坏毒素中的特定功能团,将其转化成为无毒产物排出体外,同时竞争性排斥病原菌在肠道内定植,改变肠道生理结构,改善饲料养分的吸收利用,促进动物生长,提高生产性能,能够通过保护鸡肠道上皮细胞的完整性和功能,缓解霉菌毒素对肠道上皮细胞的氧化损伤,还具有解毒效率高、特异性强、对饲料和环境没有污染等特点和优势,并且通过清除体内各种毒素,提高动物机体的整体免疫力和抗体水平,降低发病率和死亡率,促进免疫功能,减轻霉菌毒素造成的免疫抑制,破坏毒素中的特定功能团,将毒素转化成为无毒产物排出体外,减少动物的拉稀腹泻,减少呼吸道病的发生,保护动物胚胎正常发育,减少流产的发生。
2、该清除动物机体内毒素的添加剂的制备方法,通过设置N-乙酰葡糖胺转移酶、葡萄糖氧化酶、双极性硅铝酸盐和复方中草药,通过设置N-乙酰葡糖胺转移酶能迅速清除消化道、血液、肝肾组织中细菌毒素、病毒毒素、霉菌毒素,激活免疫功能,调节肠道微生物区系平衡,净化饲料和畜禽躯体,将毒素吸附、杀灭并排出体外,解毒、脱毒、排毒,彻底提高动物机体免疫力,葡萄糖氧化酶、双极性硅铝酸盐和中草药植物精华结合,能够消除由霉菌毒素和其他肝毒素对动物的损害,使肝脏表面受体细胞充满黄酮醇,阻止毒素侵入细胞膜,从而起到保护肝脏的作用。对病菌和真菌毒素的吸附力强,对营养和活性成分不吸附和破坏,可直接到达小肠末端及大肠,加强了肠粘膜的屏障功能,直接减少了感染,同时将吸附并失活的病原体运至非特异性免疫系统的吞噬细胞(巨嗜细胞、粒性白细胞和自然杀伤细胞),消灭(吞噬)病原体并发多层免疫反应,促进免疫球蛋白和巨嗜细胞生成,增强机体的非特异性免疫力即动物的抗病能力。利用中药开胃健脾、改善胃肠功能、促生长、提高免疫力的功能,可明显提升采食量,促进营养吸收、提高生长速度。
具体实施方式
下面将结合本发明的实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例一:一种清除动物机体内毒素的添加剂的制备方法,包括以下步骤:
1)高含量的葡萄糖氧化酶发酵液获取:挑取长满可产葡萄糖氧化酶点的青霉菌菌苔,在一级培养基中30~32℃振荡培养24h;然后以2~3%接种量接种于二级培养基中,30~32℃振荡培养24h;最后以2~3%接种量接种于内有三级培养基的发酵罐中,控制溶氧为60%以上,pH保持在6.0~7.0之间,发酵36~48h即可得到酶活为7.0U以上的葡萄糖氧化酶发酵液;
2)发酵液离心浓缩处理:对发酵液进行离心处理,8000rpm,20min,收取上清液,微滤去除残留的微小颗粒及菌体,超滤浓缩,直至酶活达到20U以上的葡萄糖氧化酶发酵液;
3)葡萄糖氧化酶的提纯及脱盐:4℃条件下,向超滤浓缩酶液体中缓缓加入硫酸铵固体颗粒,直至形成90%硫酸铵溶液,盐析4~6h,12000r/min离心得沉淀,用pH7.0的Tris-HCl缓冲溶液收取沉淀蛋白,加去离子水稀释8~10倍,超滤脱盐浓缩处理;
4)形成葡萄糖氧化酶冻干成品:加入保护剂于-20℃条件下冷冻真空干燥48小时,即得到葡萄糖氧化酶冻干品;
5)然后将人参、干姜、藿香、白术、厚朴、茯苓按质量1:2:6:3:2:1.5混合粉碎,然后过筛子,得中草药粉;将得到的中草药粉置于鼓风干燥箱内烘干,使其含水量低于10%,烘干温度为60-65℃,即得复方中草药;
6)最后将步骤四中制得的葡萄糖氧化酶冻干品和步骤五中制得的复方中草药与N-乙酰葡糖胺转移酶和双极性硅铝酸盐进行充分混合即可制得添加剂。
步骤四中的原料配比为人参10份、干姜20份、藿香60份、白术30份、厚朴20份和茯苓15份。
步骤五中的原料配比为N-乙酰葡糖胺转移酶3份、葡萄糖氧化酶10份、双极性硅铝酸盐20份和复方中草药1份。
步骤五中的筛子为两百目。
一种清除动物机体内毒素的添加剂的应用,将该清除动物机体内毒素的添加剂应用在养殖业中,将N-乙酰葡糖胺转移酶、葡萄糖氧化酶和双极性硅铝酸盐、复方中药植物精华结合,体内体外吸附、解毒、提高免疫力、促生长、保肝利胆、改变圈舍环境。
本发明的有益效果是:该清除动物机体内毒素的添加剂的制备方法,通过设置N-乙酰葡糖胺转移酶、葡萄糖氧化酶、双极性硅铝酸盐和复方中草药,通过生物转化脱毒,迅速清除动物体内积累毒素,解除动物体内抗生素与重金属中毒,能在血液和肠道中针对性地高效处理各种霉菌毒素,破坏毒素中的特定功能团,将其转化成为无毒产物排出体外,同时竞争性排斥病原菌在肠道内定植,改变肠道生理结构,改善饲料养分的吸收利用,促进动物生长,提高生产性能,能够通过保护鸡肠道上皮细胞的完整性和功能,缓解霉菌毒素对肠道上皮细胞的氧化损伤,还具有解毒效率高、特异性强、对饲料和环境没有污染等特点和优势,并且通过清除体内各种毒素,提高动物机体的整体免疫力和抗体水平,降低发病率和死亡率,促进免疫功能,减轻霉菌毒素造成的免疫抑制,破坏毒素中的特定功能团,将毒素转化成为无毒产物排出体外,减少动物的拉稀腹泻,减少呼吸道病的发生,保护动物胚胎正常发育,减少流产的发生,通过设置N-乙酰葡糖胺转移酶、葡萄糖氧化酶、双极性硅铝酸盐和复方中草药,通过设置N-乙酰葡糖胺转移酶能迅速清除消化道、血液、肝肾组织中细菌毒素、病毒毒素、霉菌毒素,激活免疫功能,调节肠道微生物区系平衡,净化饲料和畜禽躯体,将毒素吸附、杀灭并排出体外,解毒、脱毒、排毒,彻底提高动物机体免疫力,葡萄糖氧化酶、双极性硅铝酸盐和中草药植物精华结合,能够消除由霉菌毒素和其他肝毒素对动物的损害,使肝脏表面受体细胞充满黄酮醇,阻止毒素侵入细胞膜,从而起到保护肝脏的作用。对病菌和真菌毒素的吸附力强,对营养和活性成分不吸附和破坏,可直接到达小肠末端及大肠,加强了肠粘膜的屏障功能,直接减少了感染,同时将吸附并失活的病原体运至非特异性免疫系统的吞噬细胞(巨嗜细胞、粒性白细胞和自然杀伤细胞),消灭(吞噬)病原体并发多层免疫反应,促进免疫球蛋白和巨嗜细胞生成,增强机体的非特异性免疫力即动物的抗病能力。利用中药开胃健脾、改善胃肠功能、促生长、提高免疫力的功能,可明显提升采食量,促进营养吸收、提高生长速度。
典型案例:本次试验选取55周龄蛋鸡270只,试验为期42天,我们将试验蛋鸡随机分为3个试验组,每个试验组三个重复,每组30只蛋鸡,对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂受黄曲霉毒素污染的基础日粮,黄曲霉毒素含量为130ppb。试验组Ⅰ添加1㎏/吨的国外进口的霉菌吸附剂,试验组Ⅱ添加1㎏/吨的本添加剂。每日自由饮水和采食,试验记录每天的产蛋率、平均蛋重、平均采食量、料蛋比。
饲喂3周后对蛋鸡生产性能的影响
试验组Ⅰ和试验组Ⅱ与对照组相比:平均蛋重差异不显著,产蛋率、平均采食量和料蛋比差异均显著,试验组Ⅰ和试验组Ⅱ相比,平均蛋重差异不显著,产蛋率、平均采食量和料蛋比差异显著,试验组Ⅱ比试验组Ⅰ产蛋率增长17.6%,平均采食量降低36.2%,料蛋比降低35.2%,说明:添加本添加剂和霉菌吸附剂均能明显提高生产性能(p<0.05);试验组Ⅱ和试验组Ⅰ差异显著,本添加剂在抑制黄曲霉毒素对蛋鸡生产性能的影响比试验组Ⅰ效果更明显。
饲喂3周后检测蛋鸡空肠和结肠食糜pH值及黄曲霉毒素残留量试验结束时,每个处理试验组取6只鸡,屠宰,无菌回肠和结肠食糜,测定食糜pH值及黄曲霉毒素残留量。
从本试验结果可以得出:受黄曲霉毒素污染的蛋鸡日粮中添加霉菌毒素吸附剂和本添加剂,均能不同程度的降低黄曲霉毒素的残留量,本添加剂试验组Ⅱ比试验组Ⅰ在蛋鸡空肠和结肠食糜黄曲霉毒素残留量分别降低了36.2%和36.6%,,同时均有不同程度降低肠道pH值,有利于改善肠道微生态平衡,促进蛋鸡肠道健康。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例,对于本领域的普通技术人员而言,可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型,本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (5)
1.一种清除动物机体内毒素的添加剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)高含量的葡萄糖氧化酶发酵液获取:挑取长满可产葡萄糖氧化酶点的青霉菌菌苔,在一级培养基中30~32℃振荡培养24h,然后以2~3%接种量接种于二级培养基中,30~32℃振荡培养24h,最后以2~3%接种量接种于内有三级培养基的发酵罐中,控制溶氧为60%以上,pH保持在6.0~7.0之间,发酵36~48h即可得到酶活为7.0U以上的葡萄糖氧化酶发酵液;
2)发酵液离心浓缩处理:对发酵液进行离心处理,8000rpm,20min,收取上清液,微滤去除残留的微小颗粒及菌体,超滤浓缩,直至酶活达到20U以上的葡萄糖氧化酶发酵液;
3)葡萄糖氧化酶的提纯及脱盐:4℃条件下,向超滤浓缩酶液体中缓缓加入硫酸铵固体颗粒,直至形成90%硫酸铵溶液,盐析4~6h,12000r/min离心得沉淀,用pH7.0的Tris-HCl缓冲溶液收取沉淀蛋白,加去离子水稀释8~10倍,超滤脱盐浓缩处理;
4)形成葡萄糖氧化酶冻干成品:加入保护剂于-20℃条件下冷冻真空干燥48小时,即得到葡萄糖氧化酶冻干品;
5)然后将人参、干姜、藿香、白术、厚朴、茯苓按质量1:2:6:3:2:1.5混合粉碎,然后过筛子,得中草药粉;将得到的中草药粉置于鼓风干燥箱内烘干,使其含水量低于10%,烘干温度为60-65℃,即得复方中草药;
6)最后将步骤四中制得的葡萄糖氧化酶冻干品和步骤五中制得的复方中草药与N-乙酰葡糖胺转移酶和双极性硅铝酸盐进行充分混合即可制得添加剂。
2.根据权利要求1所述的一种清除动物机体内毒素的添加剂的制备方法,其特征在于,所述步骤四中的原料配比为人参10份、干姜20份、藿香60份、白术30份、厚朴20份和茯苓15份。
3.根据权利要求1所述的一种清除动物机体内毒素的添加剂的制备方法,其特征在于,所述步骤五中的原料配比为N-乙酰葡糖胺转移酶3份、葡萄糖氧化酶10份、双极性硅铝酸盐20份和复方中草药1份。
4.根据权利要求1所述的一种清除动物机体内毒素的添加剂的制备方法,其特征在于,所述步骤五中的筛子为两百目。
5.一种清除动物机体内毒素的添加剂的应用,将该清除动物机体内毒素的添加剂应用在养殖业中,将N-乙酰葡糖胺转移酶、葡萄糖氧化酶和双极性硅铝酸盐、复方中药植物精华结合,体内体外吸附、解毒、提高免疫力、促生长、保肝利胆、改变圈舍环境。
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Application publication date: 20200417 |