CN110927266A - 一种对凤香型白酒中乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯碳稳定同位素检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明一种对凤香型白酒中乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯的碳稳定同位素检测方法,不需要对样品前处理,直接进样,利用气相色谱的毛细管色谱柱对白酒中的酯类和其它组分进行分离,再借助气相色谱‑燃烧‑稳定同位素比值质谱仪(GC‑C‑IRMS)特有的Backflush功能,有选择的仅将酯类进入IRMS中进行测定凤香型白酒中酯类的碳稳定同位素δ13C比值,通过测定标准物质的δ13C值,重新校准计算凤香型白酒中酯类的碳稳定同位素δ13C比值。本发明建立了一种快速、准确、稳定的检测白酒中乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯碳稳定同位素的方法,并将酯类物质的δ13C值应用于凤香型白酒的产地溯源和真伪鉴别中。
Description
技术领域
本发明属于稳定同位素分析技术领域,涉及一种对凤香型白酒中乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯的碳稳定同位素检测方法。
背景技术
近几年,我国在白酒质量追溯方面相继实施了从原粮、生产到流通等环节的标识化管理,将物联网、二维码、RFID等信息产业技术应用于原产地认证和生产、加工、流通、检测、物流等各个环节,建立了从“田地”到餐桌的全程可追溯的白酒质量安全检测系统,在白酒质量溯源技术和溯源平台建设方面已经取得了从无到有的巨大进步。但这些技术尚有一定缺陷,仅从白酒体表或产品外包装标志上做“表面文章”,长此以往,随着不法分子造假技术的提高,这些“表面文章”迟早会被攻破。因此,需从白酒的内在出发,寻找一种人为无法更改的方法来进行产品溯源。而稳定性同位素技术具有无法人为更改的特点,是产品本身固有的属性,被认为目前最有效的一种产地判别的技术手段。
中国白酒和威士忌、白兰地、金酒、朗姆酒、伏特加并称为世界六大蒸馏酒,它是由含有丰富淀粉的粮谷类为原料,以酒曲作为糖化发酵剂,采用固态、半固态或液态发酵,经蒸煮、糖化、发酵、蒸馏、陈酿和勾调而成。凤香型白酒具有3000年的历史,是中国白酒的典型代表。而凤香型白酒与其它香型白酒的区别,主要体现在白酒中的1%~2%的微量成分,虽然这些微量成分的含量非常低,但这些成分的种类及量比关系决定了白酒香型与风格。其中的酯类物质是形成白酒口味的主要成分,对白酒风味的形成具有重要的作用。
白酒中酯类物质的种类和含量极易受原粮、生产工艺、生产环境、气候等影响,因此口味各异。对白酒的碳同位素溯源来说,理想的溯源目标应该是白酒的微量成分,并且这些成分应该在白酒中普遍存在,且其碳同位素组成应存在差异或在酿造中会因微生物作用发生同位素分馏。白酒中的酯类物质符合上述条件,因此,酯类物质应是最适合白酒碳同位素溯源的目标化合物,其酯类物质上δ13C的标识有望将同一白酒品牌不同批次的产品区分开来。同时气相色谱-燃烧-同位素比值质谱(GC-C-IRMS)也为这种溯源研究提供了技术基础。
发明内容
本发明针对凤香型白酒中酯类物质的稳定碳同位素检测问题,建立一种快速、准确、稳定的检测白酒中乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯碳稳定同位素的方法,并将酯类物质的δ13C值应用于凤香型白酒的产地溯源和真伪鉴别中,以促进酯类物质的δ13C值在白酒领域的应用,为凤香型白酒的品牌保护和防伪中提供了酯类物质的δ13C值的碳同位素指纹标签。
一种对凤香型白酒中乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯的碳稳定同位素检测方法,此种方法不需要对凤香型白酒进行样品前处理,直接进样,利用气相色谱的毛细管色谱柱对白酒中的酯类和其它组分进行分离,再借助气相色谱-燃烧-稳定同位素比值质谱仪(GC-C-IRMS)特有的Backflush功能(Backflush功能可以有选着性的让目标物质进入稳定同位素比值质谱仪,其它非目标物质被吹出GC-C-IRMS中),有选择的仅将酯类进入IRMS中进行测定凤香型白酒中酯类的碳稳定同位素δ13C比值,通过测定标准物质的δ13C值,重新校准计算凤香型白酒中酯类的碳稳定同位素δ13C比值。
具体步骤如下:
4)仪器准备:对气相色谱-燃烧-同位素比值质谱仪的工作状态进行调试,保证仪器的真空度、电压、电流等处于正常工作状态,仪器所使用的CO2气体、氦气、氧气等压力正常,气路畅通,氧化管氧气充足;
5)对标准品和样品进行测定;
6)对样品中乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯的δ13C值进行校准计算;
优选地,步骤中对仪器参数的调整为:色谱柱为CP-Wax 57白酒专用色谱柱(50m×0.25mm×0.20um),色谱柱的升温程序为:起始温度40℃保持5min,以5℃/min的升温速度升至125℃保持2min,分流比为1:25,进样量为1uL,进样口温度为:230℃。
优选地,同位素比值质谱仪的条件为离子源真空度为7.4×10-7mBar,电压为3.06KV,电流0.75mA。
本发明根据凤香型白酒的特点与同位素质谱技术相结合,实现凤香型白酒中酯类的δ13C值测定,且检测方法具有操作简洁、准确、快速、用量少等特点。本发明针对凤香型白酒在市场流通过程中难以溯源的问题,开发出一种有效溯源凤香型白酒脂类物质的检测方法,从而为凤香型白酒的品质提供技术支持,为消费者和白酒生产企业的合法权利提供了有利保证,促进凤香型白酒的健康有序发展。
附图说明:
图1:酯类物质(改为乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯)标准品的混合溶液的GC-C-IEMS图谱。
图2:凤香型白酒中乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯的GC-C-IEMS图谱。
具体实施方式
以下通过实施例形式,对本发明涉及的对凤香型白酒中酯类的碳稳定同位素检测方法作进一步的详细说明,但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例,凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
实施例一:
1.主要仪器、试剂
试剂:无水乙醇(HPLC级)购买于OCEANPAK,乳酸乙酯(≥99.0%,GC级),购买于阿拉丁,印第安纳大学稳定同位素标准品:Ethanol C4δ13CVPDB=(-10.98±0.02)‰,购买于北京瑞利君利科技发展有限公司,保护气氦气(纯度≥99.999%),参考气二氧化碳(纯度≥99.995%),均购于北京氦谱北分气体工业有限公司。
气相色谱-燃烧-稳定同位素比值质谱仪(GC-C-IRMS):美国Thermo Fisher公司的Delta V Advantage同位素质谱仪,配备IsoLink接口与ThermoFisher公司的Ultra TraceGC气相色谱(配Triplus自动进样器)。
2.实验方法
(1)样品前处理
配制55vol%、2g/L的乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯的乙醇混合溶液。
(2)色谱条件
色谱柱为CP-Wax 57白酒专用色谱柱(50m×0.25mm×0.20um),色谱柱的升温程序为:起始温度40℃保持5min,以5℃/min的升温速度升至125℃保持2min。分流比为1:25。进样量为1uL,进样口温度为:230℃。
(3)质谱条件
离子源真空度为7.4×10-7mBar,电压为3.06KV,电流0.75mA。
3.结果分析
本发明利用气相色谱的毛细管色谱柱可以对白酒中的乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯和其它组分进行分离,再借助气相色谱-燃烧-稳定同位素比值质谱仪特有的Backflush功能,有选择的将乙醇等物质吹出,仅将乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯进入IRMS中进行测定,可以得出乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯的44、45、46的离子图谱,见图1。通过对样品进行重复性检测,结果如表1所示。
表1乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯重复测定结果(n=8)
由表1可以看出,本发明中GC-C-IRMS测定酒样中的乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯的δ13C值的标准偏差均小于0.07‰,远符合国际碳同位素测定要求(σ≤0.20‰)。
实施例二、
1.主要试剂、仪器
试剂:无水乙醇(HPLC级)购买于OCEANPAK,乳酸乙酯(≥99.0%,GC级),购买于阿拉丁,印第安纳大学稳定同位素标准品:Ethanol C4δ13CVPDB=(-10.98±0.02)‰,购买于北京瑞利君利科技发展有限公司,保护气氦气(纯度≥99.999%),参考气二氧化碳(纯度≥99.995%),均购于北京氦谱北分气体工业有限公司。
气相色谱-燃烧-稳定同位素比值质谱仪(GC-C-IRMS):美国Thermo Fisher公司的Delta V Advantage同位素质谱仪,配备IsoLink接口与ThermoFisher公司的Ultra TraceGC气相色谱(配Triplus自动进样器)。
2.实验方法
(1)样品前处理
凤香型基酒样品直接进样。
(2)色谱条件
色谱柱为CP-Wax 57白酒专用色谱柱(50m×0.25mm×0.20um),色谱柱的升温程序为:起始温度40℃保持5min,以5℃/min的升温速度升至125℃保持2min。分流比为1:25。进样量为1uL,进样口温度为:230℃。
(3)质谱条件
离子源真空度为7.4×10-7mBar,电压为3.06KV,电流0.75mA。
3.结果分析
本方法利用气相色谱的毛细管色谱柱可以对白酒中的酯类和其它组分进行分离,再借助气相色谱-燃烧-稳定同位素比值质谱仪特有的Backflush功能,有选择的将乙醇等物质吹出,仅将乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯进入IRMS中进行测定,可以得出乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯的44、45、46的离子图谱,见图2。通过对样品进行重复性检测,结果如表2所示。
表2乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯重复测定结果(n=8)
从表2可以看出,凤香型白酒中含有乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯,且乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯通过GC-C-IRMS测定的信号在2V~10V的测定线性范围内。乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯的δ13C值的标准偏差满足(σ≤0.20‰)的国际碳同位素测定要求,这说明虽然白酒中含有的微量成分十分复杂,但该方法可以有效的去除其它微量物质对乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯的δ13C值测定的干扰,这说明该方法对测定凤香型白酒的乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯的δ13C值测定的精密度符合国际碳同位素测定要求。因此,本发明建立的测定方法可有效的测定凤香型白酒中的乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯的δ13C值,且该方法操作步骤简单,不需复杂的前处理,直接进样,样品消耗少,结果稳定,准确性高,便于推广应用,促进了凤香型白酒中酯类物质碳稳定同位素测定技术进步,也为今后凤香型白酒产品真伪鉴别和产地溯源及品牌保护提供技术基础。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和优点。本行业的技术人员应该了解,本发明不受上述实施例的限制,上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理,在不脱离本发明精神和范围的前提下,本发明还会有各种变化和改进,这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其效物界定。
Claims (3)
1.一种对凤香型白酒中乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯的碳稳定同位素检测方法,其特征在于:凤香型白酒直接进样,利用气相色谱的毛细管柱对白酒中的乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯和其它组分进行分离,再借助气相色谱-燃烧-稳定同位素比值质谱仪特有的Backflush功能,有选择的仅将乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯进入IRMS中进行测定凤香型白酒中乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯的碳稳定同位素δ13C比值,通过测定标准物质的δ13C值,重新校准计算凤香型白酒中乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯的碳稳定同位素δ13C比值,具体步骤包括:
1)仪器准备:对气相色谱-燃烧-同位素比值质谱仪的工作状态进行调试,保证仪器的真空度、电压、电流等处于正常工作状态,仪器所使用的CO2气体、氦气、氧气等压力正常,气路畅通,氧化管氧气充足;
2)对标准品和样品进行测定;
3)对样品中乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯的δ13C值进行校准计算。
2.根据权利要求1所述的一种对凤香型白酒中乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯的碳稳定同位素检测方法,其特征在于,所述气相色谱-燃烧-稳定同位素比值质谱仪的离子源真空度为7.4×10-7mBar,电压为3.06KV,电流0.75mA。
3.根据权利要求1所述的一种对凤香型白酒中乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯的碳稳定同位素检测方法,其特征在于,所述步骤中的气相色谱的使用要求为:
(1)色谱柱为CP-Wax 57白酒专用色谱柱(50m×0.25mm×0.20um),或功能相当的色谱柱;
(2)色谱柱的升温程序为:起始温度40℃保持5min,以5℃/min的升温速度升至125℃保持2min;
(3)分流比为1:25;
(4)进样量为1uL,进样口温度为:230℃;
(5)载气为高纯度氦气,纯度为99.999%;
(6)参考气为高纯度二氧化碳,纯度为≥99.995%;
(7)氧化炉温度:1000℃。
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Date | Code | Title | Description |
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PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Liu Lili Inventor after: Yan Zongke Inventor after: Hu Jin Inventor after: Ma Yifei Inventor after: Ren Lu Inventor before: Liu Lili Inventor before: Yan Zongke Inventor before: Hu Jin Inventor before: Ma Yifei Inventor before: Ren Lu |
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CB03 | Change of inventor or designer information | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20200327 |
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RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |