CN110917422B - 一种超纯血液透析浓缩液及制备工艺 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种超纯血液透析浓缩液，同时还提供了该超纯血液透析浓缩液的制备工艺，对浓缩液工艺的改进，使浓缩液达到超纯标准，并且可始终生产出符合质量标准的产品，稳定性好。本发明生产的产品与现有同类产品相比，具有微生物限度及内毒素限度低，标准高，微生物限度标准高于现有产品约1100倍，内毒素限度标准高于现有产品16.6倍；产品储存有效期长，用于临床风险低，对维持性透析患者风险小。从而提高维持性透析患者的生活质量，长期使用超纯透析浓缩液，避免体内有害物质的蓄积，从而延长维持性透析患者的生命年限。

Description

一种超纯血液透析浓缩液及制备工艺

技术领域

本发明公开一种超纯血液透析浓缩液，同时还提供了该超纯血液透析浓缩液的制备工艺，属于医药生产技术领域。

背景技术

血液透析起源于欧洲，于1954年，血液透析机批量生产开始得到广泛应用。1955年，美国人工器官协会宣布人工肾正式应用于临床。血液透析适用于急、慢性肾功能衰竭及药物中毒患者进行血液透析治疗。

透析液分为三种，一种是普通透析液，一种是超纯透析液，另一种是无菌透析液，一般用于血滤，市面上的透析浓缩液多为按照行标YY 0598-2015标准要求的普通透析液。此种透析浓缩液需氧菌总数不大于100CFU/mL，霉菌和酵母菌总数不大于10CFU/mL，大肠埃希菌不得检出。微生物负荷较高，易于在贮存及使用过程中造成微生物快速滋生，微生物在透析管路中形成菌膜，对透析设备造成损坏，同时对透析患者造成极大的风险。易于造成微生物感染，造成机体的热原反应，影响透析患者的生活质量。并且此种情况日积月累对血液透析维持性患者造成难以估量的损害，以致缩短患者生命年限。

现市场其他公司产品微生物及内毒素指标为：含碳酸氢盐的浓缩液的需氧菌总数应不大于100CFU/mL，霉菌和酵母菌总数应不大于10CFU/mL，大肠埃希菌不得检出；浓缩液以细菌内毒素用水配制成透析液后，透析液的内毒素限量应不大于0.5EU/mL。

造成其微生物及内毒素达不到超纯标准的主要原因为生产工艺的设计，无法解决灌装桶消毒的问题，同时无法解决浓缩液配制、灌装过程中微生物去除的问题，造成产品达不到超纯标准。现有的透析浓缩液产品的灌装桶均为购买，购买后对灌装桶进行透析用水清洗，然后用次氯酸消毒剂或其他溶液型消毒剂进行冲洗消毒；因桶把手为中空，同时桶口位置位于桶体的非最低点（桶倒置后），所以透析用水清洗及溶液型消毒剂消毒，造成桶内消毒剂或透析用水的残留，出现透析浓缩液颜色变化，产品质量不符合要求。如用含氯消毒剂造成氯超标，溶液颜色出现发黄的现象。并且B浓缩液因其成份为碳酸氢钠，而碳酸氢钠不稳定，易分解产生二氧化碳，造成产品内部气体增多，出现包装物膨胀，造成外观变形，同时包装桶内部压力增大，易造成泄漏，影响其产品质量。

传统工艺过程设备无SIP，并且执行国标为普通透析液。过滤系统选择0.45微米滤器预过滤，选择两道0.22微米除菌级滤器串联过滤，去除浓缩液中的微生物，使浓缩液达到无菌要求，传统工艺选择1微米滤器进行过滤，达不到除菌目的。

发明内容

本发明公开的一种超纯血液透析浓缩液及其制备工艺，解决了现有技术产品微生物负荷较高，易于在贮存及使用过程中造成微生物快速滋生，微生物在透析管路中形成菌膜，对透析设备造成损坏，同时对透析患者造成极大的风险。

本发明所述的一种超纯血液透析浓缩液，其特征在于：

A浓缩液成份及含量为：氯化钠210.7g/L，氯化钾5.22g/L，氯化钙7.72g/L，氯化镁3.56g/L，冰醋酸9.45g/L；

B浓缩液成份及含量为：碳酸氢钠84.0g/L；

浓缩液的配比为：A浓缩液：B浓缩液：透析用水=1:1.225:32.775；

其中，含碳酸氢钠的浓缩液的需氧菌总数小于0.09CFU/mL，霉菌和酵母菌总数小于0.01CFU/mL，大肠埃希菌不得检出；

浓缩液以细菌内毒素用水配制成透析液后，透析液的内毒素限量小于0.03EU/mL。

本发明所述的一种超纯血液透析浓缩液的制备工艺，其特征在于：包括灌装桶的制备和透析浓缩液的制备两部分：

1）灌装桶的制备

灌装桶吹塑生产：进行10L灌装桶及7L灌装桶的吹塑生产；吹塑成型设备三级加热设定温度分别为100℃~105℃，160℃~165℃，185~190℃，单模循环周期20秒~25秒，二次冷却时间10秒~15秒；供料加热，挤料，吹塑然后冷却成型；

灌装桶消毒、封口：臭氧消毒工位下降，将输送管道插入10L或7L桶内，通臭氧30秒；然后经压内塞封口工位压内塞封口；封口后作用时间不少于120min，储存待用；

2）透析浓缩液的制备

浓缩液配制：

A浓缩液的配制：A浓缩液配制量为2000L；

A浓缩液成份及含量如下：氯化钠210.7g/L，氯化钾5.22g/L，氯化钙7.72g/L，氯化镁3.56g/L，冰醋酸9.45g/L；先将配制罐内加入配制总体积60%的透析用水即1200L，开启搅拌，然后将称量后的物料氯化钠421.4Kg，氯化钾10.44Kg，氯化钙15.44Kg，氯化镁7.12Kg，冰醋酸18.9Kg，在搅拌的情况下依次加入配制罐内；转速90rpm，搅拌5min，同时喷淋加入配制总体积10%的透析用水即200L，使沾罐壁的物料冲入溶液内；停止搅拌，加透析用水定容至2000L；开启搅拌，转速90rpm，搅拌10min；

B浓缩液的配制：B浓缩液配制量为2000L；

B浓缩液成份及含量如下：碳酸氢钠84.0g/L；先将配制罐内加入配制总体积60%的透析用水即1200L，开启搅拌，然后将称量后的物料碳酸氢钠168.00Kg，在搅拌的情况下加入配制罐内；转速90rpm，搅拌5min，同时喷淋加入配制总体积10%的透析用水即200L，使沾罐壁的物料冲入溶液内；停止搅拌，加透析用水定容至2000L；开启搅拌，转速90rpm，搅拌10min；

除菌过滤：浓缩液（A浓缩液和B浓缩液）由卫生级输送泵经管道通过3微米钛棒，0.45微米滤器预过滤，然后经过两道串联的0.22微米除菌级过滤器进行除菌过滤，输送至灌装间进行灌装；

灌装、封口：经消毒后的灌装桶由存桶间输送至灌装间；除菌过滤的浓缩液经配制间输送至灌装料槽；

3）除菌过滤的浓缩液灌装进经消毒的灌装桶内；A浓缩液灌装量大于等于10L，B浓缩液灌装量大于等于7L，B浓缩液封内塞前通洁净医用二氧化碳3秒~5秒做保护气；然后经压内塞工位进行压内塞，经旋盖机进行旋外盖封口；其中，10L灌装桶用于盛装A浓缩液，7L灌装桶用于盛装B浓缩液。

本发明的积极效果在于：

本发明对浓缩液工艺的改进，使浓缩液达到超纯标准，并且可始终生产出符合质量标准的产品，稳定性好。本发明生产的产品与现有同类产品相比，具有微生物限度及内毒素限度低，标准高，微生物限度标准高于现有产品约1100倍，内毒素限度标准高于现有产品16.6倍；产品储存有效期长，用于临床风险低，对维持性透析患者风险小。从而提高维持性透析患者的生活质量，长期使用超纯透析浓缩液，避免体内有害物质的蓄积，从而延长维持性透析患者的生命年限。

针对盛装浓缩液的灌装桶工艺的改进：透析液灌装桶在十万级洁净区内进行吹塑，保证产品微生物及内毒素限量要求；然后改变传统的透析用水清洗及溶液型消毒剂的消毒或吹塑后无法消毒的情况，改为符合法规允许的绿色洁净消毒剂臭氧对在洁净区内吹塑的灌装桶进行消毒；防止透析用水或消毒剂的引入，不存在液体残留；同时也弥补了少数吹塑桶透析液企业对灌装桶无消毒方法的空白。从而达到消毒效果又能保证无消毒剂残留，提高产品质量。

针对于浓缩液配制、灌装过程中微生物及内毒素无法去除的问题，对浓缩液配制、灌装工艺进行改进；配制系统选择具有在线清洗CIP，在线灭菌SIP的配制系统，可实现在线的碱洗，纯化水清洗，在线的纯蒸汽灭菌，包括滤器，灭菌温度和时间为121℃，30min，设备完全达到无菌要求；过滤系统选择0.45微米滤器预过滤，选择两道0.22微米除菌级滤器串联过滤，去除浓缩液中的微生物，使浓缩液达到无菌要求。传统工艺选择1微米滤器进行过滤，达不到除菌目的。灌装系统在万级洁净区内，灌装工位及压内塞工位具有局部百级保护。灌装系统可实现纯蒸汽灭菌，灭菌后达无菌要求。经除菌过滤的浓缩液由管道输送至灌装系统，灌装在百级保护下完成，然后经输送带输送至压内塞工位，进行压内塞。传统工艺在十万级洁净环境下灌装。然后输送至旋盖工位，进行旋外盖。改进设备的清洗、灭菌方法，设备具有在线的灭菌功能，使其保证浓缩液输送系统为无菌系统。同时经两道灭菌后除菌级过滤器过滤使浓缩液达到无菌要求，从而保证配制、灌装的浓缩液符合超纯要求。

具体实施方式：

通过以下实施例进一步举例描述本发明，并不以任何方式限制本发明，在不背离本发明的技术解决方案的前提下，对本发明所作的本领域普通技术人员容易实现的任何改动或改变都将落入本发明的权利要求范围之内。

灌装桶吹塑、消毒具体工艺如下：

一、高密度聚乙烯桶的吹塑

1. 灌装桶的吹塑

卫生级高密度聚乙烯原料，经三级加热，加热温度设定分别为100℃~105℃，160℃~165℃，185℃~190℃，经加热后处于熔融状态，原料经螺杆推动挤出熔融状态的料，模具内将挤出料切割；吹针吹塑成型，经过首次冷却18~20秒，第二次定型冷却8~15秒，即为成品；成品储存待用；上料/破碎间及吹塑间洁净级别为十万级洁净区；

2.臭氧消毒，封口保护

在存桶间完成臭氧消毒及封口保护工作，存桶间的洁净级别为万级洁净区，消毒、封口工位具有局部百级保护。吹塑成型的桶输送至存桶间，进行臭氧消毒。红外感应灯感应到桶，臭氧消毒工位下降，臭氧消毒口插入灌装桶内，设定通臭氧时间30秒钟，设备控制臭氧发生器工作，通臭氧30秒钟，然后停止，工位上升；消毒后灌装桶经下一道封口工序进行内盖封口，作用至少120min后，待用；

对于灌装桶消毒方法的选择、消毒效果及相应残留安全性进行了研究及验证，相关内容如下：

1）灌装桶消毒方式的确定及验证

对于灌装桶微生物及内毒素的控制传统工艺均采用液体消毒工艺，因灌装桶形状特殊，桶口未位于最低点，并且内部有中空的把手，液体消毒工艺消毒后必会造成消毒剂及清洗水的残留，势必会影响产品质量，危害人体健康。寻找新的绿色消毒方式是解决灌装桶微生物及内毒素控制的根本目标；

①消毒方式的初步选定

A浓缩液包装桶为10L，B浓缩液包装桶为7L，其材质均为高密度聚乙烯。标准WS/T367-2012《医疗机构消毒技术规范》附录C中所推荐的消毒方法中，高压，干热方法因高密度聚乙烯材质不耐高温而不适用，液体消毒剂势必会造成消毒剂的残留，易对产品质量造成影响，所以重点考虑气体消毒方法。气体消毒剂中既有效又经济的方法中臭氧消毒较为适宜，并且高密度聚乙烯与臭氧不发生反应，不产生有害物质；

②消毒方法及效果的验证

标准WS/T 367-2012《医疗机构消毒技术规范》C.7.2.2“物体表面消毒”及GB28232-2011《臭氧发生器安全与卫生标准》6.4.3“对物体表面消毒”中臭氧可用于表面消毒。卫生部《臭氧消毒技术规范》中也对其效果予以肯定并且推荐优先选择其消毒方式。臭氧为广谱杀菌剂，可直接与细菌，病毒发生作用，破环其细胞器和核糖核酸；可渗透胞膜组织，侵入细胞膜内作用于外膜脂蛋白和内部脂多糖。无菌技术对微生物作用的原理可分为抑菌，杀菌和溶菌三种。应用臭氧做灭菌、消毒是属于溶菌。所谓溶菌即可达到“彻底/永久地消灭空气及物体表面所有微生物”的效果。根据WS/T 367-2012《医疗机构消毒技术规范》及卫生部《臭氧消毒技术规范》，采用高密度聚乙烯桶内通入臭氧的方式对高密度聚乙烯桶内壁进行消毒，然后用臭氧对其外表面及封盖进行消毒，达到微生物限度控制的目的；

③消毒方法

包装桶初始微生物限度为需氧菌总数不超过100CFU/件，霉菌及酵母菌总数不超过100CFU/件；根据工艺流程在十万级洁净区内吹塑生产桶，减少了购买桶运输过程，降低风险。在万级洁净区内对包装桶进行臭氧消毒，通过设备自动进行桶内通臭氧消毒；当红外感应灯感应到有桶经输送带输送到位，臭氧消毒工位，喷头下降，通臭氧30秒，然后停止，工位上升，经压内塞工位压内塞封口；

④消毒效果

对臭氧的消毒进行验证，确认其消毒可以达到预期要求，对消毒方法进行验证，确保按照确定的消毒方法可达到消毒效果。根据最差条件选择10L灌装桶，每个桶通臭氧30秒，封口，存放120min，臭氧发生器为20g/小时的臭氧产能，每次两个灌装桶，进行三次试验，然后对消毒后灌装桶进行无菌检测。同时对消毒后存放效期进行验证，分别在存放第3天及第4天对桶进行无菌检查均合格，确定按照此方法对灌装桶进行消毒，可以保证产品的微生物限度符合标准要求；

⑤安全性验证

臭氧可自行分解，分解产物为氧气，不会对制品造成污染。在灌装桶消毒后，灌装制品，检测溶液中臭氧残留，确保其在安全范围内。YY0598-2015 附录C.4.3.1当混合系统的生产商推荐化学消毒时，应提供将系统残留消毒剂安全性回复到批次制备浓缩液前的方法…，当使用臭氧时，残留量应低于0.1mg/L，此浓度为安全浓度。因A浓缩液中含有大量的氯离子影响碘量法检测结果，B浓缩液为偏碱性溶液，同样对碘量法检测结果有影响。经过分析排除影响因素用透析用水代替A/B浓缩液进行液体中臭氧残留的检测。虽然同样分压下两种气体平衡时，臭氧在水中溶解度比氧高约13倍，但实际应用过程所观察到的水中臭氧浓度水平难得超过每升几毫克，而且根据设计往往维持在1.0mg/L以下。随着水温的升高，臭氧在水中的半衰期快速降低，水温0℃臭氧的半衰期为40min，水温40℃时半衰期仅为3min；

按照参考文献及风险分析进行试验的设计，试验方法为模拟生产工艺，每次取10L灌装桶2个进行通臭氧消30秒，封口作用时间120min，然后灌装桶内分别装入10L纯化水，用力晃动使桶内残留臭氧充分溶解，对桶内水溶液进行臭氧残留检测，此时桶内水溶液臭氧含量最高，然后放置24小时后再次进行检测。检测设备为由上海海争电子科技有限公司生产的便携式臭氧测试仪CY-1A型设备，采用碘量法，应用微电脑光电子比色检测原理取代传统的目视比色法进行检测。设备分辨率0.001mg/L，测量范围0-12mg/L。试验进行三次每次两个10L灌装桶；

首次检测及放置24小时后检测结果均未超过0.04mg/L，首次检测最高值0.046mg/L，最低值0.015mg/L，远远低于允许值0.1mg/L，并且透析浓缩液在使用过程中要进行约15.7倍的稀释，所以溶液中臭氧残留远远低于允许值，可忽略不计。综上所述按照此方法对灌装桶进行臭氧消毒，溶液中残留量是安全可靠的；

⑥安全范围内臭氧的抑菌或杀菌作用

经过验证在首次检测时臭氧浓度在0.03mg/L左右，24小时后臭氧浓度约0.01mg/L，其浓缩对人体是绝对安全的。并且剩余的臭氧浓度在血液透析浓缩液成品中同样具有抑菌甚至杀菌的作用，有效的保证了成品不受微生物的污染或有效的抑制微生物的繁殖，达到保护产品的目的；

3.臭氧消毒、封口设备的工作原理及特点

本发明根据工艺需要设计定制设备，臭氧消毒、封口保护系统关键组成系统为臭氧发生器，压内塞机；设备通过PLC控制，实现百级层流保护下桶内通臭氧消毒，然后压内塞封口；保证了由中空吹塑机吹塑的灌装桶吹塑后到灌装生产时微生物的控制；

生产过程中浓缩液灌装桶为吹塑而成，生产车间洁净级别为十万级，灌装桶吹出成型后经输送带输送至万级洁净区的存桶间。由自动检漏机进行桶的检漏，检测到灌装桶后，臭氧消毒工位运动进行臭氧消毒，然后压内塞工位取内塞压内塞封口；

1）臭氧消毒、封口工位的设计原理

臭氧消毒工位位于桶检漏后，压内塞封口前；由继电器控制臭氧发生器进行启停，由机械运动工位控制臭氧输送管的上下运动，输送管管口阀控制臭氧输送管口的开、关。设备的工作流程为：臭氧消毒工位通过红外感应器感应到有灌装桶来，控制输送管出口打开，同时下降插入桶内，然后通过继电器控制臭氧发生器开启，进行灌装桶臭氧消毒，消毒时间可调，消毒完毕，通过继电器控制臭氧发生器关闭，关闭输送管口，同时上升，输送管出桶口，通臭氧消毒结束。如此重复此动作，完成消毒。封口工位通过红外感应器感应到消毒后的灌装桶，封口工位通过吸盘吸取内塞，然后将内塞压入桶内进行封口；

2）设备联动运行

通过设备联动运行，臭氧消毒、封口设备运行顺畅，与吹塑设备整体运行速度相适应，满足自动化批量生产的需要（产能可达800桶/小时）。

浓缩液配制、灌装具体工艺如下：

二、浓缩液的生产流程

1.原料的称量

1）操作流程

原料在相对负压的称量间进行称量，称量操作在负压称量台内进行，防止产尘污染造成交叉污染；

2）所用设备

此工序中关键设备为负压称量台，600Kg地磅及60Kg台秤；大批量物料在地磅中整车称量，零头在负压称量台内用60Kg台秤称量；大大提高人员操作便利性；

2.溶液的配制

1）操作流程

按照标准操作规程先加配制罐内配制总体积60%的透析用水，开启搅拌，然后将称量后的物料按照顺序依次加入配制罐中；A浓缩液成份及含量为：氯化钠210.7g/L，氯化钾5.22g/L，氯化钙7.72g/L，氯化镁3.56g/L，冰醋酸9.45g/L；B浓缩液成份及含量为：碳酸氢钠84.0g/L；转速90rpm，搅拌5min。同时开启喷淋，通过喷淋加入配制总体积10%的透析用水。然后停止搅拌，定容；定容后开启搅拌，转速90rpm，搅拌10min，搅拌混匀；混匀后浓缩液由卫生级输送泵经3微米钛棒及0.45微米滤器进行预过滤，经两道0.22微米滤芯进行除菌过滤，打入灌装间；

2）所用设备

5000L配制罐2个，钛棒预过滤器，9芯20英寸，0.45微米预过滤器9芯20英寸，0.22微米除菌级过滤器9芯20英寸；其中配制系统具有在线CIP，在线SIP功能；可实现系统的在线蒸汽121℃，30min灭菌，保证系统无菌，从而控制微生物污染；

3.产品的灌装/封口

1）操作流程

浓缩液配制后由配制间经管道输送至灌装间，经第2道0.22微米滤器除菌过滤进入120L缓冲罐，然后进入灌装料槽，经灌装机进行灌装；灌装采用自流式灌装方式，A浓缩液灌装量大于等于10L，B浓缩液灌装量大于等于7L；灌装后产品经输送带到达压内塞机，由压内塞机取内塞压塞，然后经旋盖机旋外盖，产品封口完成；从灌装到压内塞工位均在万级背景下的百级层流下完成，保证产品不受污染；

2）所用设备

灌封联动生产线主要有灌装机，压内塞机及旋外盖机组成；灌装间还安装有第二道除菌过滤滤器，0.22微米20英寸9芯，120L缓冲罐及150L的料槽；缓冲罐及150L料槽均能实现在线蒸汽灭菌，从而控制微生物污染；灌装产能为600-800桶/小时，设备具有无盖报警，无盖剔除功能，确保每桶产品均具有内塞密封；

按照以上浓缩液生产工艺流程，配制系统，包括滤器，缓冲罐在生产前进行纯蒸汽121℃，30min灭菌，末端的灌装机进行流通蒸汽消毒，有效去除系统中微生物；配制后的溶液经0.45μm及双级0.22μm除菌级滤器进行过滤，去除浓缩液中的微生物，有效控制微生物及内毒素，内毒素主要来源于微生物死亡后的片段；

三.改进成品灌装桶变形工艺的研究

对于B浓缩液其成份为碳酸氢钠，浓度为8.4%，其浓度基本饱和，并且其在溶液中不稳定，其反应式为：HCO₃ ^-+H⁺ ⇌H₂O+CO₂

根据《血液透析浓缩B液的抑菌方法探索》（中国血液净化2011年6月第10卷第6期Chin J Blood Purif,June,2011.Vol.10,No.6血液净化相关产品与技术）研究结果“使B浓缩液中的含氧量降低，就能使B浓缩液的稳定性提高；”研究结论：“氮气不能抑菌但可驱除溶液中的氧，二氧化碳气体既可驱氧又能抑菌；”根据其研究结果及结论，二氧化碳具有抑制B浓缩液细菌增殖的作用；而同时根据其溶液中反应方程式，B浓缩液中通入二氧化碳可抑制其碳酸氢根的分解；达到控制产品质量，同时灌装桶内不产生气体，不造成包装桶变形，不对产品质量造成风险；

研究数据如下：B液生产时调节医用级二氧化碳出口压力为5MPa~5.5MPa，然后调节每个桶充医用级二氧化碳时间0秒，3秒，5秒，7秒，生产产品；每个充气时间内产品中随机抽取12桶，随机分为三组，将三组分别放置在10℃±2℃，20℃±2℃及30℃±2℃环境中。每天进行观察记录，观察时间为5天。

实验结果：1.充入洁净医用级二氧化碳气体的产品经检测均符合要求；

2.经试验观察，未充气的三组在三个温度环境中均出现涨桶现象，尤其在30℃±2℃的环境中存放的产品涨桶现象最明显；充气3秒的三组产品桶型几乎无变化；充气5秒的三组产品桶型保持几乎无变化；充气7秒的三组产品出现瘪桶现象，二氧化碳量多，造成反应左移；

实验结论：在B浓缩液的生产过程中充洁净医用二氧化碳经检测产品质量均合格；在医用级二氧化碳出口压力为5MPa~5.5MPa的情况下，充医用级二氧化碳3~5秒可有效的防止涨桶现象的出现。

实施例1：

第一批次A浓缩液及第一批次B浓缩液的生产

1）灌装桶的生产、消毒、封口

灌装桶吹塑生产：进行10L灌装桶及7L灌装桶的吹塑生产；吹塑成型设备三级加热设定温度分别为100℃，160℃，185℃，单模循环周期20秒，二次冷却时间10秒；供料加热，挤料，吹塑然后冷却成型；成型的灌装桶经检漏工位进行检漏，检漏合格的灌装桶输送至消毒工位进行消毒；

灌装桶消毒、封口：臭氧消毒工位下降，将输送管道插入桶内，通臭氧30秒；然后经压内塞工位压内塞封口；封口后作用时间不少于120min，储存待用；10L灌装桶与7L灌装桶生产、消毒、封口工艺相同；10L灌装桶生产200个，7L灌装桶生产300个；

2）透析浓缩液的配制、除菌、灌装、封口

浓缩液配制：溶液配制前对配制系统进行在线清洗CIP，透析用水预冲洗5min，碱洗30min，然后透析用水冲洗直至在线电导率合格。在线清洗包括配制罐，输送管路，过滤器，缓冲罐。在线清洗合格后，进行纯蒸汽在线灭菌SIP，灭菌温度121℃，灭菌时间30min，确保整个配制系统达到无菌要求；

A浓缩液的配制：A浓缩液配制量为2000L；A浓缩液成份及含量如下：氯化钠210.7g/L，氯化钾5.22g/L，氯化钙7.72g/L，氯化镁3.56g/L，冰醋酸9.45g/L；先将配制罐内加入配制总体积60%的透析用水即1200L，开启搅拌，然后将称量后的物料氯化钠421.4Kg，氯化钾10.44Kg，氯化钙15.44Kg，氯化镁7.12Kg，冰醋酸18.9Kg，在搅拌的情况下依次加入配制罐内；转速90rpm，搅拌5min，同时喷淋加入配制总体积10%的透析用水即200L，使沾罐壁的物料冲入溶液内；停止搅拌，加透析用水定容至2000L；开启搅拌，转速90rpm，搅拌10min；

B浓缩液的配制：B浓缩液配制量为2000L；B浓缩液成份及含量如下：碳酸氢钠84.0g/L；先将配制罐内加入配制总体积60%的透析用水即1200L，开启搅拌，然后将称量后的物料碳酸氢钠168.00Kg在搅拌的情况下加入配制罐内；转速90rpm，搅拌5min，同时喷淋加入配制总体积10%的透析用水即200L，使沾罐壁的物料冲入溶液内；停止搅拌，加透析用水定容至2000L；开启搅拌，转速90rpm，搅拌10min；

除菌过滤：混匀的浓缩液由卫生级输送泵经管道通过3微米钛棒，0.45微米滤器预过滤，然后经过两道串联的0.22微米除菌级过滤器进行除菌过滤，输送至灌装间；

灌装、封口：经消毒后的灌装桶由存桶间输送至灌装间。除菌过滤的浓缩液经配制间输送至灌装料槽。然后除菌过滤的浓缩液灌装进经消毒的灌装桶内；A浓缩液灌装量大于等于10L，B浓缩液灌装量大于等于7L，B浓缩液封内塞前通洁净医用二氧化碳3秒做保护气；然后经压内塞工位进行压内塞，经旋盖工位进行旋外盖封口。

第一批A浓缩液产成品192桶，第一批B浓缩液产成品273桶；经检测离子浓度，pH值，性状，装量，微粒均符合规定，微生物限度：需氧菌总数0CFU/mL（标准＜0.09CFU/mL），霉菌和酵母菌总数0CFU/mL（标准＜0.01CFU/mL），大肠埃希菌未检出（标准为不得检出），内毒素：符合规定（标准＜0.03EU/mL）；所有检项均符合要求，完全达到超纯标准；同时B浓缩液内通入洁净医用级二氧化碳做保护，储存过程中未出现桶变形现象。

实施例2：

第二批次A浓缩液及第二批次B浓缩液的生产

1）灌装桶的生产、消毒、封口

灌装桶吹塑生产：进行10L灌装桶及7L灌装桶的吹塑生产。吹塑成型设备三级加热设定温度分别为103℃，162℃，188℃，单模循环周期23秒，二次冷却时间12秒。供料加热，挤料，吹塑然后冷却成型。成型的灌装桶经检漏工位进行检漏，检漏合格的灌装桶输送至消毒工位进行消毒；

灌装桶消毒、封口：臭氧消毒工位下降，将输送管道插入桶内，通臭氧30秒。然后经压内塞工位压内塞封口。封口后作用时间不少于120min，储存待用。10L灌装桶与7L灌装桶生产、消毒、封口工艺相同。10L灌装桶生产200个，7L灌装桶生产300个；

2）透析浓缩液的配制、除菌、灌装、封口

浓缩液配制：溶液配制前对配制系统进行在线清洗CIP，透析用水预冲洗5min，碱洗30min，然后透析用水冲洗直至在线电导率合格。在线清洗包括配制罐，输送管路，过滤器，缓冲罐。在线清洗合格后，进行纯蒸汽在线灭菌SIP，灭菌温度121℃，灭菌时间30min，确保整个配制系统达到无菌要求；

A浓缩液的配制：A浓缩液配制量为2000L；A浓缩液成份及含量如下：氯化钠210.7g/L，氯化钾5.22g/L，氯化钙7.72g/L，氯化镁3.56g/L，冰醋酸9.45g/L。先将配制罐内加入配制总体积60%的透析用水即1200L，开启搅拌，然后将称量后的物料氯化钠421.4Kg，氯化钾10.44Kg，氯化钙15.44Kg，氯化镁7.12Kg，冰醋酸18.9Kg，在搅拌的情况下依次加入配制罐内。转速90rpm，搅拌5min，同时喷淋加入配制总体积10%的透析用水即200L，使沾罐壁的物料冲入溶液内。停止搅拌，加透析用水定容至2000L。开启搅拌，转速90rpm，搅拌10min；

B浓缩液的配制：B浓缩液配制量为2000L；B浓缩液成份及含量如下：碳酸氢钠84.0g/L。先将配制罐内加入配制总体积60%的透析用水即1200L，开启搅拌，然后将称量后的物料碳酸氢钠168.00Kg在搅拌的情况下加入配制罐内。转速90rpm，搅拌5min，同时喷淋加入配制总体积10%的透析用水即200L，使沾罐壁的物料冲入溶液内。停止搅拌，加透析用水定容至2000L。开启搅拌，转速90rpm，搅拌10min；

除菌过滤：混匀的浓缩液由卫生级输送泵经管道通过3微米钛棒，0.45微米滤器预过滤，然后经过两道串联的0.22微米除菌级过滤器进行除菌过滤，输送至灌装间；

灌装、封口：经消毒后的灌装桶由存桶间输送至灌装间；除菌过滤的浓缩液经配制间输送至灌装料槽。然后除菌过滤的浓缩液灌装进经消毒的灌装桶内；A浓缩液灌装量大于等于10L，B浓缩液灌装量大于等于7L，B浓缩液封内塞前通洁净医用二氧化碳4秒做保护气。然后经压内塞工位进行压内塞，经旋盖工位进行旋外盖封口。

第二批A浓缩液产成品193桶，第二批B浓缩液产成品274桶。经检测离子浓度，pH值，性状，装量，微粒均符合规定，微生物限度：需氧菌总数0CFU/mL（标准＜0.09CFU/mL），霉菌和酵母菌总数0CFU/mL（标准＜0.01CFU/mL），大肠埃希菌未检出（标准为不得检出），内毒素：符合规定（标准＜0.03EU/mL）。所有检项均符合要求，完全达到超纯标准。同时B浓缩液内通入洁净医用级二氧化碳做保护，储存过程中未出现桶变形现象。

实施例3：

第三批次A浓缩液及第三批次B浓缩液的生产

1）灌装桶的生产、消毒、封口

灌装桶吹塑生产：进行10L灌装桶及7L灌装桶的吹塑生产。吹塑成型设备三级加热设定温度分别为105℃，165℃，190℃，单模循环周期25秒，二次冷却时间15秒。供料加热，挤料，吹塑然后冷却成型。成型的灌装桶经检漏工位进行检漏，检漏合格的灌装桶输送至消毒工位进行消毒。

灌装桶消毒、封口：臭氧消毒工位下降，将输送管道插入桶内，通臭氧30秒。然后经压内塞工位进行压内塞封口。封口后作用时间不少于120min，储存待用。10L灌装桶与7L灌装桶生产、消毒、封口工艺相同；10L灌装桶生产200个，7L灌装桶生产300个；

2）透析浓缩液的配制、除菌、灌装、封口

浓缩液配制：溶液配制前对配制系统进行在线清洗CIP，透析用水预冲洗5min，碱洗30min，然后透析用水冲洗直至在线电导率合格。在线清洗包括配制罐，输送管路，过滤器，缓冲罐。在线清洗合格后，进行纯蒸汽在线灭菌SIP，灭菌温度121℃，灭菌时间30min，确保整个配制系统达到无菌要求；

A浓缩液的配制：A浓缩液配制量为2000L；A浓缩液成份及含量如下：氯化钠210.7g/L，氯化钾5.22g/L，氯化钙7.72g/L，氯化镁3.56g/L，冰醋酸9.45g/L。先将配制罐内加入配制总体积60%的透析用水即1200L，开启搅拌，然后将称量后的物料氯化钠421.4Kg，氯化钾10.44Kg，氯化钙15.44Kg，氯化镁7.12Kg，冰醋酸18.9Kg，在搅拌的情况下依次加入配制罐内。转速90rpm，搅拌5min，同时喷淋加入配制总体积10%的透析用水即200L，使沾罐壁的物料冲入溶液内；停止搅拌，加透析用水定容至2000L。开启搅拌，转速90rpm，搅拌10min；

B浓缩液的配制：B浓缩液配制量为2000L；B浓缩液成份及含量如下：碳酸氢钠84.0g/L；先将配制罐内加入配制总体积60%的透析用水即1200L，开启搅拌，然后将称量后的物料碳酸氢钠168.00Kg在搅拌的情况下加入配制罐内；转速90rpm，搅拌5min，同时喷淋加入10%的透析用水即200L，使沾罐壁的物料冲入溶液内。停止搅拌，加透析用水定容至2000L。开启搅拌，转速90rpm，搅拌10min；

除菌过滤：混匀的浓缩液由卫生级输送泵经管道通过3微米钛棒，0.45微米滤器预过滤，然后经过两道串联的0.22微米除菌级过滤器进行除菌过滤，输送至灌装间；

灌装、封口：经消毒后的灌装桶由存桶间输送至灌装间。除菌过滤的浓缩液经配制间输送至灌装料槽。然后除菌过滤的浓缩液灌装进经消毒的灌装桶内。A浓缩液灌装量大于等于10L，B浓缩液灌装量大于等于7L，B浓缩液封内塞前通洁净医用二氧化碳5秒做保护气。然后经压内塞工位进行压内塞，经旋盖工位进行旋外盖封口。

第三批A浓缩液产成品192桶，第三批B浓缩液产成品274桶。经检测离子浓度，pH值，性状，装量，微粒均符合规定，微生物限度：需氧菌总数0CFU/mL（标准＜0.09CFU/mL），霉菌和酵母菌总数0CFU/mL（标准＜0.01CFU/mL），大肠埃希菌未检出（标准为不得检出），内毒素：符合规定（标准＜0.03EU/mL）。所有检项均符合要求，完全达到超纯标准。同时B浓缩液内通入洁净医用级二氧化碳做保护，储存过程中未出现桶变形现象。

结论：综上所述，灌装桶的制备工艺可有效的对桶内进行在线自动消毒、封口保护，并且桶内残余臭氧在安全水平内也可有效的抑菌或杀菌，有效的保证产品质量。溶液的配制过程中，配制系统及灌装系统有效进行灭菌，并且溶液经过双级0.22微米除菌级过滤器。有效的保证了溶液中微生物及内毒素的限量。一般企业过滤器采用1微米孔径达不到除菌目的。同时对产品B浓缩液成品灌装桶变形的情况进行技术改进，通过适当的方式合理的运用医用级二氧化碳，对产品进行保护的情况下，作为可逆化学反应中的一成份，有效的将化学反应推向另一端，防止碳酸氢钠的分解，从而达到控制桶变形的目的。通过吹塑桶工艺，溶液生产工艺及桶变形问题的研究，有效的控制产品微生物，内毒素限量，同时利用二氧化碳自身性质及参与反应的作用，改变产品外观变形问题，使产品质量及外观得到了有效的控制。

根据超纯血液透析浓缩液改进的工艺对其进行A浓缩液，B浓缩液各三个批次的生产，以验证根据现改进的工艺进行生产，经检测三批产品均符合质量标准要求，完全达到超纯标准。并且对三批产品进行自检的同时进行第三方检测，进行稳定性考察。

根据改进工艺生产的三个批次的产品，产品经过自检及具有注册检资质的第三方检测机构检测，质量均符合超纯标准要求，并且产品用于临床试验，临床试验效果符合要求。同时的稳定性时限也远超同行其他企业。

自检及第三方检测：

运用此工艺分别通过浓缩液和灌装桶控制产品的微生物及内毒素，是产品达到技术要求及超纯标准。产品经自检及具有注册检验资质的第三方检测机构全项目检测合格。可用于临床试验。

产品临床试验效果：

进行临床试验，临床试验采用“前瞻性、随机、阳性平行对照、单盲、多中心、非劣效性临床试验评价HEBER-FRE型血液透析浓缩液临床应用的有效性和安全性”。 临床试验在4家临床机构进行，试验共筛选307例受试者，实际随机入组300例，受试者300例（试验组150例，对照组150例）。最终纳入FAS分析集共287例（试验组145例，对照组142例）；纳入PPS分析集共285例（试验组144例，对照组141例）；纳入SS分析集共295例（试验组150例，对照组145例）；临床试验对照品为山东某企业生产的血液透析浓缩液；临床试验过程中试验产品未出现因器械质量原因造成的不良事件。

有效性分析结果显示试验器械血液透析浓缩液用于慢性肾功能衰竭患者血液透析治疗时，可调节水电解质平衡，改善内环境，缓解病情，效果与对照器械血液透析浓缩液相当。

综合器械安全性分析结果，表明试验器械安全较好，与上市的对照器械相似。

临床试验结论：“综合有效性、安全性评价结果，本发明生产的血液透析浓缩液（HEBER-FRE型）用于慢性肾功能衰竭患者进行血液透析治疗，可调节水电解质平衡，改善内环境，缓解病情，效果与对照器械山东某公司生产的血液透析浓缩液相当；并且安全性好。可以认为试验产品的使用性能够满足临床血液透析的需要。”

稳定性的研究：

经对产品稳定性研究，本发明产品长期稳定性试验已达28个月（28个月产品仍合格），长期稳定性继续进行中。同行业产品稳定性一般为6个月，最长不超过12个月。

本发明对浓缩液工艺的改进，使浓缩液达到超纯标准，并且可始终生产出符合质量标准的产品，稳定好。本工艺生产的产品与现有同类产品相比，具有微生物限度及内毒素限度低，标准高。产品储存有效期长，用于临床风险低，对维持性透析患者风险小。从而提高维持性透析患者的生活质量，长期使用超纯透析浓缩液，避免体内有害物质的蓄积，从而延长维持性透析患者的生命年限。

Claims (1)

1.一种超纯血液透析浓缩液的制备方法，其特征在于：

超纯血液透析浓缩液包括A浓缩液和B浓缩液，

A浓缩液成分及含量为：氯化钠210.7g/L，氯化钾5.22g/L，氯化钙7.72g/L，氯化镁3.56g/L，冰醋酸9.45g/L；

B浓缩液成分及含量为：碳酸氢钠84.0g/L；

浓缩液的配比为A浓缩液：B浓缩液：透析用水=1:1.225:32.775；

其中，含碳酸氢钠的浓缩液的需氧菌总数小于0.09CFU/mL，霉菌和酵母菌总数小于0.01CFU/mL，大肠埃希菌不得检出；

所述超纯血液透析浓缩液以细菌内毒素用水配制成透析液后，透析液的内毒素限量小于0.03EU/mL；

上述超纯血液透析浓缩液的制备方法具体为：

1）灌装桶的制备

灌装桶吹塑生产：进行10L灌装桶及7L灌装桶的吹塑生产；吹塑成型设备三级加热设定温度分别为100℃ ~ 105℃，160℃ ~ 165℃，185 ~ 190℃，单模循环周期20秒 ~ 25秒，二次冷却时间10秒 ~ 15秒；供料加热，挤料，吹塑然后冷却成型；

灌装桶吹塑成型后经输送带输送至万级洁净区的存桶间，臭氧消毒工位通过红外感应器感应到有灌装桶来，控制输送管道出口打开，同时臭氧消毒工位下降，将输送管道插入10L或7L桶内，通臭氧30秒；然后经压内塞封口工位压内塞封口；封口后作用时间不少于120min，灌装桶储存待用；

2）透析浓缩液的制备

配制前对配制系统进行在线清洗，使用透析用水预冲洗5min，碱洗30min，然后透析用水冲洗直至在线电导率合格，再进行纯蒸汽在线灭菌，灭菌温度121℃，灭菌时间30min，确保整个配制系统达到无菌要求；

浓缩液配制：

A浓缩液的配制：A浓缩液配制量为2000L；

A浓缩液成分及含量如下：氯化钠210.7g/L，氯化钾5.22g/L，氯化钙7.72g/L，氯化镁

3.56g/L，冰醋酸9.45g/L；先将配制罐内加入配制总体积60%的透析用水即1200L，开启搅拌，然后将称量后的物料氯化钠421.4Kg，氯化钾10.44Kg，氯化钙15.44Kg，氯化镁7.12Kg，冰醋酸18.9Kg，在搅拌的情况下依次加入配制罐内；转速90rpm，搅拌5min，同时喷淋加入配制总体积10%的透析用水即200L，使沾罐壁的物料冲入溶液内；停止搅拌，加透析用水定容至2000L；开启搅拌，转速90rpm，搅拌10min；

B浓缩液的配制：B浓缩液配制量为2000L；

B浓缩液成分及含量如下：碳酸氢钠84.0g/L；先将配制罐内加入配制总体积60%的透析用水即1200L，开启搅拌，然后将称量后的物料碳酸氢钠168.00Kg，在搅拌的情况下加入配制罐内；转速90rpm，搅拌5min，同时喷淋加入配制总体积10%的透析用水即200L，使沾罐壁的物料冲入溶液内；停止搅拌，加透析用水定容至2000L；开启搅拌，转速90rpm，搅拌10min；除菌过滤： A浓缩液和B浓缩液由卫生级输送泵经管道通过3微米钛棒，0.45微米滤器预过滤，然后经过两道串联的0.22微米除菌级过滤器进行除菌过滤，输送至灌装间进行灌装；

灌装、封口：经臭氧消毒后的灌装桶由存桶间输送至灌装间；除菌过滤后的浓缩液经配制间输送至灌装料槽；

3）改进成品灌装桶变形工艺，将除菌过滤后的浓缩液灌装进经臭氧消毒的灌装桶内

A浓缩液灌装量大于等于10L；B浓缩液灌装量大于等于7L；

B浓缩液封内塞前以5MPa~5.5MPa的压力通洁净医用二氧化碳3秒~ 5秒作保护气，防止成品灌装桶变形，然后经压内塞工位进行压内塞，经旋盖机进行旋外盖封口；其中，10L灌装桶用于盛装A浓缩液，7L灌装桶用于盛装B浓缩液。