CN110903983A - 一株高产糖化酶和酯化酶的红曲红曲霉及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一株高产糖化酶和酯化酶的红曲红曲霉及其应用。本发明的红曲红曲霉JC‑SM12的保藏编号为CCTCC No:M2014420。菌株JC‑SM12具有高产糖化酶、酯化酶和蛋白酶的优良特性,由其制得的红曲具有高糖化酶和高酯化酶活性,其糖化力可高达6000u/g,酯化力可高达170mg/g·100h。本工艺生产周期短,成本低,见效快。
Description
技术领域
本发明涉及食品发酵技术领域,具体地说,涉及一株高产糖化酶和酯化酶的红曲红曲霉及其应用。
背景技术
红曲霉属(Monascus spp.)是重要的药食两用微生物菌属,该菌属下的微生物能够产生多种酶系,包括酯化酶、糖化酶及酸性蛋白酶等,在发酵食品中具有非常重要的意义。其中,酯化酶可催化多种有机酸与乙醇生成己酸乙酯、乙酸乙酯、乳酸乙酯、丁酸乙酯等酯类物质,使浓香型白酒的香气更加丰满协调。红曲发酵产生的糖化酶可以将淀粉完全水解成葡萄糖,糖化力是衡量红曲糖化酶作用强弱的一个重要指标。高糖化力的红曲可以在酿酒过程中提高培养基的利用率和提高出酒率。1.现有技术存在的缺陷与不足
目前市场上在售的红曲产品,多是单种酶较强的菌制剂,酯化酶和糖化酶活性都强的产品及文献报道较少。导致酿酒过程中添加的红曲制品效果单一,无法最大化产出优质白酒。
发明内容
本发明的目的是提供一株高产糖化酶和酯化酶的红曲红曲霉及其应用。
为了实现本发明目的,第一方面,本发明提供一株高产糖化酶和酯化酶的红曲红曲霉(Monascus anka)JC-SM12,其保藏号为CCTCC No:M2014420。
本发明提供的红曲红曲霉是一种高产糖化酶和酯化酶的红曲红曲霉(Monascusanka)JC-SM12,该菌株可以提高红曲霉菌发酵产品中的糖化酶和酯化酶的活性,增强其糖化力和酯化力。
本发明提供的红曲红曲霉JC-SM12(Monascus anka JC-SM12)现已保藏于中国典型培养物保藏中心,地址:中国武汉,武汉大学,邮编430072,保藏编号CCTCC No:M2014420,保藏日期2014年9月17日。
红曲红曲霉(Monascus anka)JC-SM12通过培养特征、显微形态特征、生理生化特征和遗传特征,确定该菌株符合红曲红曲霉的特征。
红曲红曲霉JC-SM12属于真菌界(Fungi),子囊菌门(Ascomycota),真子囊菌纲(Ascomycetes),散子囊菌目(Eurotiales),红曲霉菌科(Monascaceae),红曲霉菌属(Monascus)。JC-SM12是腐生真菌,生长的最适pH为3.5~5,能耐受pH3.5。生长温度范围26~42℃,最适温度范围32℃~35℃。菌丝体初期白色,渐变为红色,老熟之后紫红色。菌丝体大量分枝,多核,分生孢子着生在菌丝及其分枝的顶端,孢子单生或成链,闭囊壳为球形、有柄,闭囊壳内散生十多个子囊,子囊呈球形,含8个子囊孢子,成熟子囊壁解体后,孢子留在薄壁的闭囊壳内。
第二方面,本发明提供含有所述红曲红曲霉JC-SM12的菌剂。
第三方面,本发明提供由所述安卡红曲霉JC-SM12制备的红曲。第四方面,本发明提供由所述红曲红曲霉JC-SM12分泌产生的糖化酶、酯化酶。
第五方面,本发明提供所述红曲的制备方法,所述方法包括:将红曲红曲霉JC-SM12接种于经灭菌后的禾本科谷类作物种仁和麸皮混合培养基(固体培养基)上经发酵形成菌丝而制成。
优选地,所述禾本科谷类作物为稻属植物,包括但不限于籼稻、粳稻。
其中,所述混合培养基是将籼稻种仁和麸皮按质量比20:80~40:60混合,然后向混合物中按100g:30-40mL的量加入水,混匀后经高温灭菌制得。
优选地,籼稻种仁(大米)和麸皮按质量比40:60混合,料液比为100g:30mL。
在本发明的一个具体实施方式中,所述方法包括:向1000ml三角烧瓶内装入籼稻种仁40g和麸皮60g,然后加入水30ml,121℃灭菌30min,然后接入所述红曲红曲霉JC-SM12,培养温度31-33℃,每天翻料一次,培养5-7天;收集菌丝,烘干。
烘干条件:温度<60℃,烘干至水分<12%。
第六方面,本发明提供所述红曲红曲霉JC-SM12、含有JC-SM12的菌剂、由JC-SM12制备的红曲、或由JC-SM12分泌产生的糖化酶、酯化酶的以下任一应用:
1)用于制备发酵剂;
2)用于酿酒。
借由上述技术方案,本发明至少具有下列优点及有益效果:
本发明提供的红曲红曲霉JC-SM12具有高产糖化酶、酯化酶的优良特性,由其制得的红曲具有高糖化酶和高酯化酶活性,其糖化力可高达6000u/g,酯化力可高达170mg/g·100h。本工艺生产周期短,成本低,见效快。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明,但不用来限制本发明的范围。若未特别指明,实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段,所用原料均为市售商品。
实施例1红曲菌剂的制备工艺
红曲红曲霉JC-SM12(Monascus anka JC-SM12)按如下工艺得到的红曲菌剂:斜面种子→三角烧瓶液体种子→三角烧瓶固体培养→收料→烘干→产品。
具体工艺如下:
斜面培养基及培养条件:PDA培养基,pH自然,121℃灭菌30min,培养温度30℃,接种一环甘油管孢子液,培养7-10天。
液体种子培养基及培养条件:500ml三角烧瓶,装液量300ml,葡萄糖5.00%,牛肉膏2.35%,蛋白胨0.32%,NaNO3 0.84%,MgSO4 0.52%,pH6.0,121℃灭菌30min,接种量8%斜面种子,培养温度30℃,摇床转速220rmp,培养时间40h,得到种子液。
固体培养基及培养条件:1000ml三角烧瓶,加入大米20–40g,麸皮80-60g,加入自来水30ml,121℃灭菌30min,按接种量10%-15%接入种子液,培养温度31-33℃,每天摇动瓶子翻料一次,培养5-7天。
烘干条件:温度<60℃,烘干至水分<12%。
实施例2红曲菌剂的制备实例1
根据具体工艺制取斜面种子和液体种子,然后进行固体培养,具体方案为:1000ml三角烧瓶,加入大米20g,麸皮80g,自来水30ml,121℃灭菌30min,按接种量15%接入种子液,培养温度31℃,每天摇动瓶子翻料一次,培养7天。收料,烘干,产品糖化力5122u/g,酯化力161.41mg/g·100h。糖化力和酯化力的检测参考中华人民共和国轻工行业标准《QB/T5188-2017酿造红曲》。
实施例3红曲菌剂的制备实例2
根据具体工艺制取斜面种子和液体种子,然后进行固体培养,具体方案为:1000ml三角烧瓶,加入大米30g,麸皮70g,自来水30ml,121℃灭菌30min,按接种量12%接入种子液,培养温度33℃,每天摇动瓶子翻料一次和加水一次,培养5天。收料,烘干,产品糖化力5517u/g,酯化力143.25mg/g·100h。
实施例4红曲菌剂的制备实例3
根据具体工艺制取斜面种子和液体种子,然后进行固体培养,具体方案为:1000ml三角烧瓶,加入大米40g,麸皮60g,自来水30ml,121℃灭菌30min,按接种量10%接入种子液,培养温度32℃,每天摇动瓶子翻料一次,培养6天。收料,烘干,产品糖化力5898u/g,酯化力170.11mg/g·100h。
实施例5红曲菌剂的制备实例4
根据具体工艺制取斜面种子和液体种子,然后进行固体培养,具体方案为:1000ml三角烧瓶,加入大米40g,麸皮60g,自来水30ml,121℃灭菌30min,按接种量13%接入种子液,培养温度32℃,每天摇动瓶子翻料一次,培养7天。收料,烘干,产品糖化力6000u/g,酯化力169.78mg/g·100h。
为进一步证明菌株JC-SM12在本发明的培养工艺条件下,同时高产糖化酶和酯化酶的优越性,基于实施例5进行如下对比试验:
对比例1
选用菌株JC-SM12,根据具体工艺制取斜面种子和液体种子,然后进行固体培养,具体方案为:1000ml三角烧瓶,加入大米100g,麸皮0g,自来水30ml,121℃灭菌30min,按接种量13%接入种子液,培养温度32℃,每天摇动瓶子翻料一次,培养7天。收料,烘干,产品糖化力5105u/g,酯化力3.01mg/g·100h。通过比较,可以看出在相同的培养工艺下,培养基中只有大米,产品的糖化力略低于实施例5,但酯化力非常低,仅为3.01mg/g·100h。
对比例2
选用菌株JC-SM12,根据具体工艺制取斜面种子和液体种子,然后进行固体培养,具体方案为:1000ml三角烧瓶,加入大米0g,麸皮100g,自来水30ml,121℃灭菌30min,按接种量13%接入种子液,培养温度32℃,每天摇动瓶子翻料一次,培养7天。收料,烘干,产品糖化力135u/g,酯化力35.02mg/g·100h。通过比较,可以看出在相同的培养工艺下,培养基中只有麸皮,产品的糖化力仅为135u/g,酯化力为35.02mg/g·100h,均低于实施例5。
对比例3
取紫红曲霉DX(Monascus purpureus DX CCTCC M2016780)菌株,根据具体工艺制取斜面种子和液体种子,然后进行固体培养,具体方案为:1000ml三角烧瓶,加入大米40g,麸皮60g,自来水30ml,121℃灭菌30min,接种液体种子13%,培养温度32℃,每天摇动瓶子翻料一次,培养7天。收料,烘干,产品糖化力2531u/g,酯化力19.56mg/g·100h。通过比较,可以看出在相同的培养基和培养工艺条件下,红曲红曲霉JC-SM12(Monascus anka JC-SM12)的糖化力和酯化力都明显高于紫红曲霉DX(Monascus purpureus DX)。
虽然,上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述,但在本发明基础上,可以对之做一些修改或改进,这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此,在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进,均属于本发明要求保护的范围。
Claims (9)
1.一株高产糖化酶和酯化酶的红曲红曲霉(Monascus anka)JC-SM12,保藏编号为CCTCC No:M2014420。
2.含有权利要求1所述红曲红曲霉JC-SM12的菌剂。
3.由权利要求1所述红曲红曲霉JC-SM12制备的红曲。
4.由权利要求1所述红曲红曲霉JC-SM12分泌产生的糖化酶、酯化酶。
5.权利要求3所述红曲的制备方法,其特征在于,所述方法包括:将红曲红曲霉JC-SM12接种于经灭菌后的禾本科谷类作物种仁和麸皮混合培养基上经发酵形成菌丝而制成。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述禾本科谷类作物为稻属植物,包括籼稻、粳稻。
7.根据权利要求5或6所述的方法,其特征在于,所述混合培养基是将籼稻种仁和麸皮按质量比20:80~40:60混合,然后向混合物中按100g:30-40mL的量加入水,混匀后经高温灭菌制得。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述方法包括:向1000ml三角烧瓶内装入籼稻种仁40g和麸皮60g,然后加入水30ml,121℃灭菌30min,然后接入所述红曲红曲霉JC-SM12,培养温度31-33℃,每天翻料一次,培养5-7天;收集菌丝,烘干。
9.权利要求1所述红曲红曲霉JC-SM12、权利要求2所述菌剂、权利要求3所述红曲、或权利要求4所述糖化酶、酯化酶的以下任一应用:
1)用于制备发酵剂;
2)用于酿酒。
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