CN110903268A - 沃卡帕烷型二萜衍生物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于医药技术领域，涉及沃卡帕烷(voucapane)型二萜衍生物及其制备方法和应用。所述的衍生物的结构如下：其中，A/B环反式骈合；C环为苯环；R1，R2，R3，R7和R8为H、OH、OAc、＝O中的任何1个或多个，以及由相应位置的‑OH衍生的酯类的一个或多个；R6为H或OH；R4，R5和R9为‑CH3、‑CH2OH、‑COOH、‑CHO中的任何1个或多个，以及由相应位置的‑CH2OH及‑COOH衍生的酯类中的一个或多个。所述的沃卡帕烷型二萜及其药学上可接受的盐、异构体或其药物组合物具有免疫调节和抗炎作用，可以用于制备免疫调节剂或抗炎药物，尤其是抗溃疡性结肠炎药物。

Description

沃卡帕烷型二萜衍生物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于医药技术领域，涉及沃卡帕烷(voucapane)型二萜衍生物及其制备方法和应用。
背景技术
刺果苏木(Caesalpinia Bonduc(Linn)Roxb.)为豆科云实属植物，又名大托叶云实，在热带和亚热带地区均有分布，在我国主要分布于广东、广西和台湾等地。其主要药用部位为种子，具有抗疟、退热、解痉、祛风湿、祛痰、止咳等功效，多用于治疗痢疾、头痛、发热、肠胃不适、哮喘等症。研究表明，从刺果苏木及同属(云实属)植物中分离得到的二萜类化合物具有很好的抗疟(Kalauni S K,Awale S,Tezuka Y,et al.Antimalarial Activityof Cassane-and Norcassane-Type Diterpenes from Caesalpinia crista and TheirStructure-Activity Relationship[J].Biological&Pharmaceutical Bulletin,2006,29(5):1050-1052.)、细胞毒(Ma G,Yuan J,Wu H,et al.Caesalpins A-H,bioactivecassane-type diterpenes from the seeds of Caesalpinia minax.[J].Journal ofNatural Products,2013,76(6):1025-1031.)、抗菌(Dickson R A,Houghton P J,HylandsP J.Antibacterial and antioxidant cassane diterpenoids from Caesalpiniabenthamiana[J].Phytochemistry,2007,68(10):1436-1441.)和抗炎(O.Yodsaoue,C.Karalai,C.Ponglimanont,et al.Pulcherrins D-R,potential anti-inflammatoryditerpenoids from the roots of Caesalpinia pulcherrima,Tetrahedron 67(2011)6838–6846.)等活性。
溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)是炎症性肠病(Inflammatory BowelDisease,IBD)的一种，其病程漫长，常反复发作，给患者的工作和生活带来很大的痛苦，并且长期的UC极易导致癌变。目前治疗UC的药物主要包括氨基水杨酸类药物、肾上腺糖皮质激素类药物和免疫抑制剂三类。其中氨基水杨酸类药物为治疗轻、中度UC的主要药物，但是毒副作用较大；肾上腺糖皮质激素是抑制急性活动性炎症的药物，但长期使用无维持作用；免疫抑制剂起效慢，且具有骨髓抑制的严重副作用。因此，寻找新的治疗UC且副作用小的药物迫在眉睫(王鹏程,赵珊,冯健,等.基于NF-κB信号通路的中药抗溃疡性结肠炎研究进展[J].中草药,2015,46(10).)。
发明内容
本发明的目的是提供沃卡帕烷型二萜衍生物、制备方法及其在制备抗炎药物尤其是抗溃疡性结肠炎药物的应用。
本发明提供了沃卡帕烷型二萜衍生物及其药学上可接受的盐、异构体：
Figure BDA0002326116100000021
其中，A/B环反式骈合；C环为苯环；R1，R2，R3，R7和R8为H、OH、OAc、＝O中的任何1个或多个，以及由相应位置的-OH衍生的酯类的一个或多个；R6为H或OH；R4，R5和R9为-CH3、-CH2OH、-COOH、-CHO中的任何1个或多个，以及由相应位置的-CH2OH及-COOH衍生的酯类中的一个或多个。
本发明优选具有以下结构的沃卡帕烷型二萜及其药学上可接受的盐、异构体：
其中，C环为苯环。
本发明优选具有以下结构的沃卡帕烷型二萜及其药学上可接受的盐、异构体：
其中，C5位有羟基取代。
本发明优选具有以下结构的沃卡帕烷型二萜及其药学上可接受的盐、异构体：
其中，R1为OAc，或R1、R2同时为OAc，或R1、R2、R3同时为OAc。
本发明提供了7种沃卡帕烷型二萜衍生物，其结构和名称如下：
化合物1-7分别为neocaesalpin AH(1)；6-acetoxy-3-deacetoxycaesaldekarine(2)；caesaldekarin e(3)；caesalpinin MD(4)；2-acetoxycaesaldekarin e(5)；caesallK/L(6/7)。
Figure BDA0002326116100000031
化合物1-7谱学数据如下：
化合物1 neocaesalpin AH
白色粉末(甲醇)，1H-NMR(400MHz,CDCl3)δH：1.19(3H,s,H-18)，1.24(3H,s,H-19)，1.46(3H,s,H-20)，1.96(3H,s,2-OAc)，2.04(3H,s,1-OAc)，2.37(3H,s,H-17)，5.51(1H,ddd,J＝13.1Hz,4.6Hz,2.8Hz,H-2)，6.00(1H,d,J＝2.7Hz,H-1)，6.71(1H,d,J＝2.2Hz,H-15)，7.08(1H,s,H-17)，7.51(1H,d,J＝2.2Hz,H-16)。13C-NMR(100MHz,CDCl3)δ：74.5(C-1)，67.9(C-2)，35.9(C-3)，40.0(C-4)，75.6(C-5)，23.9(C-6)，23.8(C-7)，128.7(C-8)，139.4(C-9)，48.5(C-10)，104.3(C-11)，153.4(C-12)，125.8(C-13)，128.0(C-14)，104.9(C-15)，144.5(C-16)，16.0(C-17)，28.0(C-18)，25.7(C-19)，30.4(C-20)，21.1(1-OAc)，169.6(1-OAc)，21.1(2-OAc)，170.6(2-OAc).
化合物2 6-acetoxy-3-deacetoxycaesaldekarin e
白色粉末(甲醇)，1H-NMR(400MHz,CDCl3)δH：1.18(3H,s,H-18)，1.32(3H,s,H-19)，1.41(3H,s,H-20)，1.95(3H,s,1-OAc)，2.20(3H,s,6-OAc)，2.36(3H,s,H-17)，3.06(1H,brs,5-OH)，5.66(1H,t,J＝3.2Hz,H-1)，5.73(1H,t,J＝8.3Hz,H-6),6.72(1H,d,J＝2.2Hz,H-15)，7.03(1H,s,H-11)，7.53(1H,d,J＝2.2Hz,H-16)。13C-NMR(100MHz,CDCl3)δ：72.7(C-1)，30.1(C-2)，31.7(C-3)，38.5(C-4)，75.7(C-5)，76.9(C-6)，32.8(C-7)，126.9(C-8)，138.5(C-9)，49.3(C-10)，104.1(C-11)，153.7(C-12)，126.0(C-13)，128.5(C-14)，104.9(C-15)，144.6(C-16)，15.9(C-17)，22.6(C-18)，24.8(C-19)，31.7(C-20)，21.3(1-OAc)，169.5(1-OAc)，21.9(6-OAc)，170.6(6-OAc).
化合物3 caesaldekarin e
白色粉末(甲醇)，1H-NMR(400MHz,CDCl3)δH：1.10(6H,s,H-18,19)，1.40(3H,s,H-20)，1.92(3H,s,1-OAc)，2.01(3H,s,3-OAc)，2.39(3H,s,H-17)，5.05(1H,t,J＝3.1Hz,H-1)，5.75(1H,t,J＝3.1Hz,H-3)，6.72(1H,d,J＝2.0Hz,H-15)，7.00(1H,s,H-11)，7.51(1H,d,J＝2.0Hz,H-16)。13C-NMR(400MHz,CDCl3)δ：73.6(C-1)，27.0(C-2)，76.7(C-3)，41.7(C-4)，75.7(C-5)，24.5(C-6)，23.5(C-7)，127.7(C-8)，140.1(C-9)，46.8(C-10)，104.0(C-11)，153.5(C-12)，125.5(C-13)，128.4(C-14)，105.0(C-15)，144.2(C-16)，15.9(C-17)，23.1(C-18)，25.3(C-19)，31.2(C-20)，21.1(1-OAc)，169.5(1-OAc)，21.4(3-OAc)，169.8(3-OAc).
化合物4 caesalpinin MD
白色粉末(甲醇)，1H-NMR(400MHz,CDCl3)δH：1.26(3H,s,H-18)，1.39(3H,s,H-19)，1.52(3H,s,H-20)，1.97(3H,s,1-OAc)，2.05(3H,s,2-OAc)，2.20(3H,s,6-OAc)，2.35(3H,s,H-17)，3.03(1H,br s,5-OH)，5.70(1H,t,J＝8.2Hz,H-6)，5.45(1H,ddd,J＝13.1,4.4,2.6Hz,H-2)，5.97(1H,d,J＝1.6Hz,H-1)，6.72(1H,d,J＝2.2Hz,H-15)，7.10(1H,s,H-11)，7.54(1H,d,J＝2.2Hz,H-16)。13C-NMR(100MHz,CDCl3)δ：74.5(C-1)，67.5(C-2)，37.8(C-3)，40.3(C-4)，76.4(C-5)，72.5(C-6)，31.8(C-7)，126.5(C-8)，137.8(C-9)，51.1(C-10)，104.2(C-11)，153.6(C-12)，126.3(C-13)，128.8(C-14)，104.8(C-15)，144.9(C-16)，16.0(C-17)，30.7(C-18)，25.5(C-19)，29.9(C-20)，21.0(1-OAc)，169.4(1-OAc)，21.0(2-OAc)，170.4(2-OAc)，21.8(6-OAc)，170.6(6-OAc).
化合物5 2-acetoxycaesaldekarin e
白色粉末(甲醇)，1H-NMR(400MHz,CDCl3)δH：1.23(3H,s,H-18)，1.31(3H,s,H-19)，1.51(3H,s,H-20)，1.95(3H,s,1-OAc)，2.04(3H,s,2-OAc)，2.08(3H,s,3-OAc)，2.38(3H,s,H-17)，5.26(1H,d,J＝3.6Hz,H-3)，5.72(1H,t,J＝3.5Hz,H-2)，6.05(1H,d,J＝3.2Hz,H-1)，6.71(1H,d,J＝2.2Hz,H-15)，7.04(1H,s,H-17)，7.51(1H,d,J＝2.2Hz,H-16)。13C-NMR(100MHz,CDCl3)δ：73.7(C-1)，66.4(C-2)，77.2(C-3)，43.0(C-4)，75.6(C-5)，24.4(C-6)，23.5(C-7)，127.4(C-8)，139.8(C-9)，48.6(C-10)，104.1(C-11)，153.4(C-12)，125.7(C-13)，128.6(C-14)，104.9(C-15)，144.4(C-16)，16.0(C-17)，23.1(C-18)，25.2(C-19)，31.2(C-20)，20.8(1-OAc)，169.7(1-OAc)，21.0(2-OAc)，169.6(2-OAc)，20.8(3-OAc)，170.0(3-OAc)。
化合物6 caesall K
白色粉末(甲醇)，1H-NMR(400MHz,CDCl3)δH：1.17(3H,s,H-18)，1.20(3H,s,H-19)，1.41(3H,s,H-20)，2.12(3H,s,H-17)，1.99(3H,s,1-OAc)，2.02(3H,s,2-OAc)，5.47(1H,dd,J＝13.1,2.8Hz,H-2)，5.87(1H,d,J＝2.7Hz,H-1)，6.03(1H,dd,J＝6.5,2.1Hz,H-16)，6.44(1H,s,H-11)。13C-NMR(100MHz,CDCl3)δ：74.5(C-1)，68.0(C-2)，36.1(C-3)，40.0(C-4)，75.6(C-5)，24.0(C-6)，23.7(C-7)，126.8(C-8)，142.5(C-9)，48.4(C-10)，102.9(C-11)，156.0(C-12)，122.3(C-13)，133.4(C-14)，37.4(C-15)，100.7(C-16)，16.5(C-17)，28.0(C-18)，25.8(C-19)，30.3(C-20)，21.2(1-OAc)，169.6(1-OAc)，21.3(2-OAc)，170.7(2-OAc)。
化合物7 caesall L
白色粉末(甲醇)，1H-NMR(400MHz,CDCl3)δH：1.17(3H,s,H-18)，1.20(3H,s,H-19)，1.41(3H,s,H-20)，2.12(3H,s,H-17)，1.98(3H,s,1-OAc)，2.02(3H,s,2-OAc)，5.46(1H,dd,J＝13.1,2.8Hz,H-2)，5.86(1H,d,J＝2.7Hz,H-1)，5.99(1H,dd,J＝6.5,2.0Hz,H-16)，6.43(1H,s,H-11)。13C-NMR(100MHz,CDCl3)δ：74.5(C-1)，68.0(C-2)，36.1(C-3)，40.0(C-4)，75.6(C-5)，23.9(C-6)，23.6(C-7)，126.8(C-8)，142.4(C-9)，48.4(C-10)，102.8(C-11)，156.0(C-12)，122.2(C-13)，133.3(C-14)，37.4(C-15)，100.6(C-16)，16.5(C-17)，28.0(C-18)，25.7(C-19)，30.2(C-20)，21.2(1-OAc)，169.7(1-OAc)，21.2(2-OAc)，170.7(2-OAc)。
本发明还提供了所述的沃卡帕烷型二萜衍生物的制备方法，可以通过以下三种方法中任意一种制备。
方法一：
(1)粉碎药材，采用超声或溶剂加热提取法，以3～15倍量的30％～100％乙醇或甲醇回流提取，减压回收醇溶剂，用水混悬；
(2)混悬液依次用氯仿/二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，萃取次数1-5次，萃取溶剂与混悬液体积比1:1-3:1，回收溶剂，得到氯仿/二氯甲烷层浸膏、乙酸乙酯层浸膏和正丁醇层浸膏；
(3)氯仿/二氯甲烷层浸膏经硅胶柱色谱进行分离，采用石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、丙酮、甲醇等组成的不同溶剂系统进行洗脱；
(4)上述步骤(3)中含有二萜类成分的流份再次经硅胶柱色谱分离后，用制备型或半制备型HPLC色谱分离，以甲醇/水或乙腈/水为流动相进行洗脱，得到二萜类化合物；
方法二：
(1)粉碎药材，采用溶剂加热提取法，以3～10倍量的氯仿/二氯甲烷回流提取，减压回收溶剂得浸膏；
(2)浸膏经硅胶柱色谱进行分离，采用石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、丙酮、甲醇等组成的不同溶剂系统进行洗脱；
(3)上述步骤(2)中含有二萜类化合物的流份再次经硅胶柱色谱分离后，用制备型或半制备型HPLC色谱分离，以甲醇/水或乙腈/水为流动相进行洗脱，得到二萜类化合物；
方法三：
(1)粉碎药材，采用超声或溶剂加热提取法，以3～15倍量的30％～100％乙醇或甲醇回流提取，减压回收醇溶剂，用水混悬后离心取上清液；
(2)上清液用大孔树脂处理，以水-醇溶液梯度洗脱，收集30％～90％醇洗脱部分，得到二萜粗提物；
(3)上述步骤(2)中粗提物经硅胶柱色谱进行分离，采用石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、丙酮、甲醇等组成的不同溶剂系统进行洗脱；
(4)上述步骤(3)中所得含有二萜类化合物的流份再次用硅胶柱色谱分离后，用制备型或半制备型HPLC色谱分离，以甲醇/水或乙腈/水为流动相进行洗脱，得到二萜类化合物。
本发明提供的沃卡帕烷型二萜衍生物的制备方法(三)中，所提到的大孔树脂包括极性、非极性D-101、DM-301等。
本发明提供的用硅胶柱色谱分离方法(一)中氯仿(或二氯甲烷)萃取物浸膏，方法(二)中氯仿(或二氯甲烷)提取物浸膏和方法(三)中二萜粗提物，所提到的有机溶剂为石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、丙酮、甲醇中的一种或二种混合溶剂，溶剂组成比例均为(100：0-1:1)，优选二氯甲烷-甲醇(100:0-1:1)和石油醚-乙酸乙酯(20:1-1:1)体系。
本发明提供的用制备型和半制备型HPLC制备二萜衍生物的方法，流动相为甲醇-水或乙腈-水，混合比例为90:10-10:90，优选甲醇-水(70:30-45:55)体系。
本发明提供了一种药物组合物，包含所述的沃卡帕烷型二萜及其药学上可接受的盐、异构体中的一种或几种和药学上可接受的载体或赋形剂。
本发明所述的沃卡帕烷型二萜及其药学上可接受的盐、异构体或其药物组合物具有免疫调节和抗炎作用，可以用于制备免疫调节剂或抗炎药物，尤其是抗溃疡性结肠炎药物。
具体实施方式
下面的实施例将对本发明进行进一步详细说明，并不用于限定本发明。
实施例1
刺果苏木种子20.0kg，去皮得种仁9.0kg，用75％乙醇回流提取3次，料液比为1:8，每次2h，减压回收溶剂，浸膏用蒸馏水分散，依次用等体积的氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取3次，得氯仿层萃取物214.0g。
所得的氯仿层浸膏214.0g，采用硅胶开放柱色谱进行分离，流动相选用二氯甲烷：甲醇(100:0-1:1)梯度洗脱，所得流份经过硅胶薄层色谱分析，合并相同流份后得到10份洗脱物。
对二氯甲烷：甲醇＝100:2流份18.8g进行分离。采用硅胶柱色谱法，用石油醚：乙酸乙酯梯度洗脱，在15:1处，对黄色固体采用制备型HPLC分离，得化合物1，2；在5:1处，对黄色固体进行HPLC分离，得化合物3，4。对二氯甲烷：甲醇＝100:4流份38.2g进行分离，采用硅胶柱色谱法，用石油醚：乙酸乙酯梯度洗脱，在5:1处，对黄色固体采用HPLC分离，得化合物5，6，7。
实施例2
沃卡帕烷型二萜衍生物体外抗炎活性筛选
(1)细胞培养
RAW264.7细胞，在DMEM培养基，5％FBS，37℃，5％CO2条件下培养。
(2)活性测试
为检测受试药物的体外抗炎活性，将终浓度为10μM的化合物与LPS刺激的RAW264.7细胞共孵6h，然后用q-PCR检测炎性细胞因子IL-1β，IL-6和TNF-α的mRNA水平。
实验结果如表1-3所示。
表1沃卡帕烷型二萜衍生物对LPS诱导的RAW264.7细胞致炎因子IL-1βmRNA表达的影响
Figure BDA0002326116100000081
表2沃卡帕烷型二萜衍生物对LPS诱导的RAW264.7细胞致炎因子IL-6 mRNA表达的影响
Figure BDA0002326116100000082
表3沃卡帕烷型二萜衍生物对LPS诱导的RAW264.7细胞致炎因子TNF-αmRNA表达的影响
Figure BDA0002326116100000083
结果表明，化合物1和3可显著降低炎症因子IL-1β,IL-6和TNF-αmRNA水平，且化合物3的抑制活性更强。
实施例3
测试化合物3对葡聚糖硫酸钠(dextra sulfate sodium,DSS)诱导的溃疡性结肠炎小鼠的影响。
(1)模型的建立
首先将6-8周的C57BL/6小鼠(20±2g)随机分为5组，每组5只，分别为：Normal组、DSS组、化合物3组(10mg/kg)和地塞米松组(Dex)(1mg/kg)。以蒸馏水配制浓度为3％的DSS，模型组及各给药组自由饮用7天，然后将模型组及各给药组换成蒸馏水自由饮用3天，Normal组给予蒸馏水自由饮用10天，第10天处死小鼠。从造模第一天开始至第十天处死为止，化合物3溶液(化合物3先溶解于DMSO中，然后悬浮于PBS中，其中DMSO:PBS＝1：100)进行腹腔注射给药。DSS组用DMSO:PBS＝1:100溶液进行腹腔注射，以排除溶剂的影响。地塞米松磷酸钠注射液溶解于PBS中进行肌肉注射给药。
(2)结肠长度及形态
造模结束后摘眼球取血处死小鼠，取出结肠(肛门至盲肠)，测量长度，拍照。
结果表明，DSS组(6.5±0.5cm)结肠长度明显比Normal组(8.1±0.3cm)短，化合物3给药组(7.7±0.3cm)可以有效地改善结肠长度的变短，而地塞米松(Dex)(6.0±0.2cm)没有改善结肠长度的变短。
(3)化合物3对结肠组织炎性细胞因子IL-1β，IL-6和TNF-α表达的影响
qPCR检测结肠组织中炎性细胞因子mRNA水平，实验结果如表4所示。
表4化合物3对结肠组织炎性细胞因子IL-1β，IL-6和TNF-αmRNA表达的影响
Figure BDA0002326116100000091
注：将DSS组炎性细胞因子表达量定位为100％。
结果表明，化合物3能够显著抑制结肠组织炎性细胞因子IL-1β，IL-6和TNF-αmRNA的表达，提示化合物3在动物体内没有明显的副作用，且具有较强的抗炎活性，在治疗溃疡性结肠炎方面具有很大的开发价值。

Claims (10)

1.通式1或2所示的沃卡帕烷型二萜衍生物及其药学上可接受的盐、异构体：
Figure FDA0002326116090000011
其中，A/B环反式骈合；C环为苯环；R1，R2，R3，R7和R8为H、OH、OAc、＝O中的任何1个或多个，以及由相应位置的-OH衍生的酯类的一个或多个；R6为H或OH；R4，R5和R9为-CH3、-CH2OH、-COOH、-CHO中的任何1个或多个，以及由相应位置的-CH2OH及-COOH衍生的酯类中的一个或多个。
2.权利要求1的沃卡帕烷型二萜衍生物及其药学上可接受的盐、异构体：
其中，A/B环反式骈合；C环为苯环；R1，R2，R3，R7和R8为H、OH、OAc中的任何1个或多个；R6为H或OH；R4，R5和R9为-CH3、-CH2OH、-COOH、-CHO中的任何1个或多个。
3.权利要求1的沃卡帕烷型二萜衍生物及其药学上可接受的盐、异构体：
其中，R1为OAc，或R1、R2同时为OAc，或R1、R2、R3同时为OAc。
4.权利要求1-3中任何一项所述的沃卡帕烷型二萜衍生物及其药学上可接受的盐、异构体，选自：
Figure FDA0002326116090000012
5.如权利要求1所述的沃卡帕烷型二萜衍生物及其药学上可接受的盐、异构体的制备方法，其特征在于，
方法一：
(1)粉碎药材，采用超声或溶剂加热提取法，以3～15倍量的30％～100％乙醇或甲醇回流提取，减压回收醇溶剂，用水混悬；
(2)混悬液依次用氯仿/二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，萃取次数1～5次，萃取溶剂与混悬液体积比1:1-3:1，回收溶剂，得到氯仿/二氯甲烷层浸膏、乙酸乙酯层浸膏和正丁醇层浸膏；
(3)氯仿/二氯甲烷层浸膏经硅胶柱色谱进行分离，采用石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、丙酮、甲醇等组成的不同溶剂系统进行洗脱；
(4)上述步骤(3)中含有二萜类成分的流份再次经硅胶柱色谱分离后，用制备型或半制备型HPLC色谱分离，以甲醇/水或乙腈/水为流动相进行洗脱，得到二萜类化合物；
方法二：
(1)粉碎药材，采用溶剂加热提取法，以3～10倍量的氯仿或二氯甲烷回流提取，减压回收溶剂得浸膏；
(2)浸膏经硅胶柱色谱进行分离，采用石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、丙酮、甲醇等组成的不同溶剂系统进行洗脱；
(3)上述步骤(2)中含有二萜类化合物的流份再次经硅胶柱色谱分离后，用制备型或半制备型HPLC色谱分离，以甲醇/水或乙腈/水为流动相进行洗脱，得到二萜类化合物；
方法三：
(1)粉碎药材，采用超声或溶剂加热提取法，以3～15倍量的30％～100％乙醇或甲醇回流提取，减压回收醇溶剂，用水混悬后离心取上清液；
(2)上清液用大孔树脂处理，以水-醇溶液梯度洗脱，收集30％～90％醇洗脱部分，得到二萜粗提物；
(3)上述步骤(2)中粗提物经硅胶柱色谱进行分离，采用石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、丙酮、甲醇等组成的不同溶剂系统进行洗脱；
(4)上述步骤(3)中所得含有二萜类化合物的流份再次经硅胶柱色谱分离后，用制备型或半制备型HPLC色谱分离，以甲醇/水或乙腈/水为流动相进行洗脱，得到二萜类化合物。
6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，
所述的方法一、二的步骤(2)或方法三的步骤(3)中的溶剂为石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、丙酮、甲醇中的一种或二种，溶剂组成比例为100：0-1:1，优选二氯甲烷-甲醇100:0-1:1和石油醚-乙酸乙酯20:1-1:1体系。
7.如权利5所述的制备方法，其特征在于，
所述方法一、三中的步骤(3)的流动相为甲醇-水或乙腈-水，混合比例为90:10-10:90，优选甲醇-水70:30-45:55。
8.一种药物组合物，包含权利要求1-4中任何一项所述的沃卡帕烷型二萜衍生物及其药学上可接受的盐、异构体。
9.权利要求1-4中任何一项所述的沃卡帕烷型二萜衍生物及其药学上可接受的盐、异构体或权利要求8所述的药物组合物在制备免疫调节剂中的应用。
10.权利要求1-4中任何一项所述的沃卡帕烷型二萜衍生物及其药学上可接受的盐、异构体或权利要求8所述的药物组合物在制备抗炎药物中的应用。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111973603A (zh) * 2020-09-11 2020-11-24 兰州大学 neocaesalpin AH在制备治疗帕金森病的药物中的应用
CN112843067A (zh) * 2019-11-26 2021-05-28 兰州大学 人源lrrk2蛋白小分子抑制剂及其应用

Non-Patent Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HU, HAI-JUN: ""Abietane Diterpenoids from the Roots of Clerodendrum trichotomum and Their Nitric Oxide Inhibitory Activities"", 《JOURNAL OF NATURAL PRODUCTS》 *
ISAO KITAGAWA: ""Indonesian Medicinal Plants. XI. Chemical Structures of Caesaldekarins a and b, Two New Cassane-Type Furanoditerpenes from the Roots of Caesalpinia major (Fabaceae)"", 《CHEM. PHARM. BULL.》 *
ISAO KITAGAWA: ""Indonesian Medicinal Plants. XIII. Chemical Structures of Caesaldekarins c, d, and e, Three Additional Cassane-Type Furanoditerpenes from the Roots of Caesalpinia major (Fabaceae). Several Interesting Reaction Products…"", 《CHEMICAL AND PHARMACEUTICAL BULLETIN》 *
KALAUNI, SK: ""Methyl migrated cassane-type furanoditerpenes of Caesalpinia crista from Myanmar"", 《CHEMICAL & PHARMACEUTICAL BULLETIN》 *
KEITH O. PASCOE: ""Caesalpin F: A New Furanoditerpene from Caesalpinia bonducella"", 《JOURNAL OF NATURAL PRODUCTS》 *
LIN WU: ""New Cassane-Type Diterpenoids from Caesalpinia bonduc"", 《CHEM. PHARM. BULL.》 *
ORAPUN YODSAOUE: ""Potential anti-inflammatory diterpenoids from the roots of Caesalpinia mimosoides Lamk"", 《PHYTOCHEMISTRY》 *
PHU HOANG DANG: ""Three new cassane-type furanoditerpenes from the seed of Vietnamese Caesalpinia bonducella"", 《PHYTOCHEMISTRY LETTERS》 *
SURYA K. KALAUNI: ""Cassane- and Norcassane-Type Diterpenes of Caesalpinia crista from Myanmar"", 《J. NAT. PROD.》 *
SURYA KANT KALAUNI: ""Antimalarial Activity of Cassane- and Norcassane-Type Diterpenes from Caesalpinia crista and Their Structure–Activity Relationship"", 《BIOL. PHARM. BULL.》 *
李昌勤: ""云实属植物化学成分及药理作用研究进展"", 《中国中药杂志》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112843067A (zh) * 2019-11-26 2021-05-28 兰州大学 人源lrrk2蛋白小分子抑制剂及其应用
CN112843067B (zh) * 2019-11-26 2023-01-06 兰州大学 人源lrrk2蛋白小分子抑制剂及其应用
CN111973603A (zh) * 2020-09-11 2020-11-24 兰州大学 neocaesalpin AH在制备治疗帕金森病的药物中的应用

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