CN110881409B - 一种罗布麻的组织培养高效快速繁殖方法 - Google Patents

一种罗布麻的组织培养高效快速繁殖方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110881409B
CN110881409B CN201911387578.6A CN201911387578A CN110881409B CN 110881409 B CN110881409 B CN 110881409B CN 201911387578 A CN201911387578 A CN 201911387578A CN 110881409 B CN110881409 B CN 110881409B
Authority
CN
China
Prior art keywords
apocynum venetum
stem
culture
apocynum
venetum
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201911387578.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110881409A (zh
Inventor
宋志忠
梁美霞
张洪霞
贺奥
李权龙
宋潘晖
王翊昊
岳红丽
毕萌萌
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Ruimin Fruit and Vegetable Professional Cooperative in Laishan District, Yantai City
Original Assignee
Ludong University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ludong University filed Critical Ludong University
Priority to CN201911387578.6A priority Critical patent/CN110881409B/zh
Publication of CN110881409A publication Critical patent/CN110881409A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110881409B publication Critical patent/CN110881409B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/008—Methods for regeneration to complete plants

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

本发明公开了一种罗布麻的组织培养高效快速繁殖方法，包括罗布麻茎段外植体的获得、罗布麻茎段外植体的消毒灭菌、罗布麻茎段增殖培养基的筛选、罗布麻生根培养等步骤。本发明极大地提高了罗布麻植株的繁殖系数，可以高达8.6；同时有利于保持罗布麻植株的优良特性，可以短时间内获得大量罗布麻材料，不受时间季节限制，达到周年供应罗布麻种苗，为罗布麻优良株系的规模化生产提供了有力的技术保障和支持，可满足我国市场对优质罗布麻种苗的大量需求，经济效益与社会效益显著。

Description

一种罗布麻的组织培养高效快速繁殖方法
技术领域
本发明涉及一种罗布麻的组织培养繁殖方法。
背景技术
罗布麻(Apocynum venetum L.) 是一种抗逆性强、适应性广、耐盐碱的野生优良水土保持植物，具有很高的药用价值、纤维价值和生态价值，是干旱、盐碱、沙漠地区最具开发潜力和利用价值的植物品种之一。
近年来，我国罗布麻纺织和罗布麻茶发展迅猛，但面临原料短缺的困境。人工种植是解决罗布麻原料短缺问题的有效措施，但必须首先解决繁殖方法和育苗移栽效率等问题。罗布麻常规的繁殖方法有种子播种育苗、繁殖分株、切根等，但存在种苗质量不一致、繁殖系数低、繁殖周期长等缺点。
发明内容
本发明的目的在于提供一种可加快罗布麻的繁殖速度、提高繁殖系数、缩短繁殖周期的罗布麻的组织培养高效快速繁殖方法。
本发明的技术解决方案是：
一种罗布麻的组织培养高效快速繁殖方法，其特征是：包括下列步骤：
（1）罗布麻茎段外植体的获得
在晴朗无风天气的上午9：00-10：00点，剪取带有叶子的罗布麻茎段，去除叶子后将其剪成2~3cm长度的茎段，然后放到盛有无菌水的小烧杯中，带回实验室备用；
（2）罗布麻茎段外植体的消毒灭菌
在超净工作台上，将罗布麻茎段放入已灭菌的三角瓶中，先用75%的酒精浸泡消毒30秒，不断晃动三角瓶，接着用无菌水冲洗1-2次，然后用0.1%的升汞消毒9min，再用无菌水冲洗4-5次；然后将其接种在初代培养基MS + 6-BA 0.6mg/L + NAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L +琼脂7.5g/L上，放置于温度26℃、光照强度为2000lux、每天光照时间为16h的培养室内进行培养；
（3）罗布麻茎段增殖培养基的筛选
设计不同浓度的6-BA和NAA进行组合，选取初代培养20天后生长健壮的新梢，剪取2cm大小的茎尖将其接种在不同种类的培养基上进行增殖，培养20d后观察罗布麻茎尖的生长状态和统计其增殖系数，最终确定最佳的增殖培养基为MS + 6-BA 3mg/L +TDZ0.1mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L + 琼脂7.5g/L；
（4）罗布麻生根培养
待罗布麻增殖幼芽长到2-3cm时，在超净工作台上切下幼芽，将其转入生根培养基1/2MS+NAA0.5mg/L上进行培养，培养20天后可获得大量生根的试管苗。
步骤（1）中去除叶子后将其剪成2cm长度的茎段。
本发明极大地提高了罗布麻植株的繁殖系数，可以高达8.6；同时有利于保持罗布麻植株的优良特性，可以短时间内获得大量罗布麻材料，不受时间季节限制，达到周年供应罗布麻种苗，为罗布麻优良株系的规模化生产提供了有力的技术保障和支持，可满足我国市场对优质罗布麻种苗的大量需求，经济效益与社会效益显著。
附图说明
下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明。
图1是罗布麻茎段离体快繁体系的建立示意图。
A：大田取回的罗布麻茎段 ；B：去掉叶子的罗布麻茎段；
C：茎段初代培养基上生长20天后；D-E：在不同培养基上罗布麻无菌苗茎尖增殖生长状况；G：生根的罗布麻试管苗。
具体实施方式
一种罗布麻的组织培养高效快速繁殖方法，包括下列步骤：
（1）罗布麻茎段外植体的获得
在晴朗无风天气的上午9：00-10：00点，剪取带有叶子的罗布麻茎段，去除叶子后将其剪成2cm长度的茎段，然后放到盛有无菌水的小烧杯中，带回实验室备用；
（2）罗布麻茎段外植体的消毒灭菌
在超净工作台上，将罗布麻茎段放入已灭菌的三角瓶中，先用75%的酒精浸泡消毒30秒，不断轻微晃动三角瓶，接着用无菌水冲洗1-2次，然后用0.1%的升汞消毒9min，再用无菌水冲洗4-5次；然后将其接种在初代培养基MS + 6-BA 0.6mg/L + NAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L + 琼脂7.5g/L上，放置于温度26℃、光照强度为2000lux、每天光照时间为16h的培养室内进行培养；
（3）罗布麻茎段增殖培养基的筛选
罗布麻茎段增殖培养基的筛选至关重要，直接决定着罗布麻茎段组织培养的增殖系数。设计不同浓度的6-BA和NAA进行组合，选取初代培养20天后生长健壮的新梢，剪取2cm大小的茎尖将其接种在不同种类的培养基上进行增殖，培养20d后观察罗布麻茎尖的生长状态和统计其增殖系数，最终确定最佳的增殖培养基为MS + 6-BA 3mg/L +TDZ0.1mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L + 琼脂7.5g/L；主要原因是在该培养基上，罗布麻增殖获得的芽生长健壮，无玻璃化现象，叶片肥大，茎粗壮，分枝多，增殖系数≥8.6。
（4）罗布麻生根培养
待罗布麻增殖幼芽长到2-3cm时，在超净工作台上切下幼芽，将其转入生根培养基1/2MS+NAA0.5mg/L上进行培养，培养20天后可获得大量生根的试管苗，平均每个单株产生根的数量为5条，根平均长度1.5cm，试管苗平均高度4.89 cm，生根率为85.3%。

Claims (2)

1.一种罗布麻的组织培养高效快速繁殖方法，其特征是：包括下列步骤：
（1）罗布麻茎段外植体的获得
在晴朗无风天气的上午9：00-10：00点，剪取带有叶子的罗布麻茎段，去除叶子后将其剪成2~3cm长度的茎段，然后放到盛有无菌水的小烧杯中，带回实验室备用；
（2）罗布麻茎段外植体的消毒灭菌
在超净工作台上，将罗布麻茎段放入已灭菌的三角瓶中，先用75%的酒精浸泡消毒30秒，不断晃动三角瓶，接着用无菌水冲洗1-2次，然后用0.1%的升汞消毒9min，再用无菌水冲洗4-5次；然后将其接种在初代培养基MS + 6-BA 0.6mg/L + NAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L +琼脂7.5g/L上，放置于温度26℃、光照强度为2000lux、每天光照时间为16h的培养室内进行培养；
（3）罗布麻茎段的增殖培养
选取初代培养20天后生长健壮的新梢，剪取2cm大小的茎尖将其接种在增殖培养基上进行增殖培养，增殖培养基为MS + 6-BA 3mg/L +TDZ0.1mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L +琼脂7.5g/L；
（4）罗布麻生根培养
待罗布麻增殖幼芽长到2-3cm时，在超净工作台上切下幼芽，将其转入生根培养基1/2MS+NAA0.5mg/L上进行培养，培养20天后可获得大量生根的试管苗。
2.根据权利要求1所述的一种罗布麻的组织培养高效快速繁殖方法，其特征是：步骤（1）中去除叶子后将其剪成2cm长度的茎段。
CN201911387578.6A 2019-12-30 2019-12-30 一种罗布麻的组织培养高效快速繁殖方法 Active CN110881409B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911387578.6A CN110881409B (zh) 2019-12-30 2019-12-30 一种罗布麻的组织培养高效快速繁殖方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911387578.6A CN110881409B (zh) 2019-12-30 2019-12-30 一种罗布麻的组织培养高效快速繁殖方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110881409A CN110881409A (zh) 2020-03-17
CN110881409B true CN110881409B (zh) 2020-09-29

Family

ID=69753411

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201911387578.6A Active CN110881409B (zh) 2019-12-30 2019-12-30 一种罗布麻的组织培养高效快速繁殖方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110881409B (zh)

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Micropropagation of two species of Rauvolfia (Apocynaceae);Vishwanath M.Patil和M.Jayanthi;《Current Science》;19970625;第72卷(第12期);961-965 *
罗布麻的组织培养及快速繁殖技术;寇凤仙等;《林业实用技术》;20091231(第3期);25 *
罗布麻组织培养快繁技术体系研究;高金秋;《安徽农业科学》;20121231;第40卷(第23期);11577-11580 *
花叶络石离体快繁技术研究;王福银等;《江苏林业科技》;20081231;第35卷(第3期);26-29 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN110881409A (zh) 2020-03-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101258835B (zh) 铁皮石斛优质种苗快速繁殖方法
CN102301951B (zh) 一种广豆根组织培养快速繁殖方法
CN109220791B (zh) 一种利用鳞茎繁育朱顶红的组培方法
CN103931497B (zh) 一种提高火龙果组培苗成苗率的方法
CN108157180B (zh) 一种马铃薯脱毒苗开放式工厂化快繁的方法
CN103931492A (zh) 苹果砧木m9的组培快速育苗方法
CN101507415B (zh) 一种棉毛鹿茸草的离体培养法
CN102948367B (zh) 厚叶岩白菜离体培养和快速繁殖的方法
CN104604677B (zh) 一种降低俄罗斯橡胶草组织培养褐化率的组培繁殖方法
CN109757373A (zh) 一种荆半夏组织培养快速繁殖方法
CN111280056A (zh) 一种无刺花椒组培苗的继代繁育方法
CN103733995B (zh) 一种芍药愈伤组织诱导方法
CN108029559B (zh) 一种快速培育落叶冬青组培苗的方法
CN104206280B (zh) 一种绿色球状体途径的泽泻蕨种苗组培快繁方法
CN101711504B (zh) 荻的快速繁殖方法
CN105379624A (zh) 一种粗皮桉的组培快繁方法
CN104488723A (zh) 一种朝鲜淫羊藿组培快速繁殖方法
CN105475129A (zh) 一种竹叶兰组培快繁的方法
CN102860257B (zh) 一种鱼腥草地上茎组织培养快速繁殖的方法
CN100484393C (zh) 何首乌的组织培养快繁方法
CN112715367B (zh) 一种利用硝酸镧进行毛梾组培继代增殖的方法
CN112425506A (zh) 一种黄金艾草的组织培养快速繁殖方法
CN109526745B (zh) 一种以七叶一枝花叶片繁殖种苗的方法
CN103609444A (zh) 常绿萱草的组织培养法
CN102124953B (zh) 通过芽孢快速繁殖老鹰茶树试管苗的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
PE01 Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right

Denomination of invention: A tissue culture and efficient rapid propagation method of Apocynum venetum

Effective date of registration: 20211216

Granted publication date: 20200929

Pledgee: Yantai financing guarantee Group Co.,Ltd.

Pledgor: LUDONG University

Registration number: Y2021980015152

PE01 Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right
PC01 Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right

Date of cancellation: 20220317

Granted publication date: 20200929

Pledgee: Yantai financing guarantee Group Co.,Ltd.

Pledgor: LUDONG University

Registration number: Y2021980015152

PC01 Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20220819

Address after: Zhengjiazhuang Village, Yingezhuang Sub-district Office, Laishan District, Yantai City, Shandong Province 264003

Patentee after: Ruimin Fruit and Vegetable Professional Cooperative in Laishan District, Yantai City

Address before: 264025 No. 186 Hongqi Middle Road, Zhifu District, Shandong, Yantai

Patentee before: LUDONG University

TR01 Transfer of patent right