CN110878074B - 一种2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺类似物及其制备方法和用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种含有2‑胺基‑3，4‑二氢吡喃‑3‑甲酰胺结构化合物的制备方法，其包括如下步骤：1)将双乙烯酮与R2NH2在溶剂中搅拌反应至完全，得到
Figure DDA0001789308390000011
2)加入R3NH2，R1CHO和式a化合物，并加入单质碘反应至反应液完全固化，过滤后将滤饼洗涤干燥得到含有2‑胺基‑3，4‑二氢吡喃‑3‑甲酰胺结构化合物。本发明还涉及以上述方法制备得到的化合物，其单晶结构及其用途。本发明的制备方法简单，不需要分离中间体。

Description

一种2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺类似物及其制备方法和 用途
技术领域
本发明提供了涉及药物领域，具体涉及一种2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺类似物及其制备方法和用途。
背景技术
多组分组份反应因为其高收敛性、高原子经济性、高选择性等特性，而被广泛应用到医药小分子化合物的制备中。在绿色化学的大背景下，多组分组份合成不仅提高了整个药化、生化研究效率，更是因为反应步骤的减少，反应试剂消耗的降低而减小了化学合成的环保压力((1).C.Hulme,M.Ayaz,G.Martinez-Ariza,F.Medda and A.Shaw,in SmallMolecule Medicinal Chemistry,John Wiley&Sons,Inc,2015,pp.145-187.(2).D.
Figure BDA0001789308370000011
and J.Swatschek,in Multicomponent Reactions,John Wiley&Sons,Inc,2015,pp.416-495.(3).M.A.Mironov,QSAR&Comb.Sci.2006,25,423-431.(4).T.Newhouse,P.S.Baran and R.W.Hoffmann,Chem.Soc.Rev.2009,38,3010-3021.(5).L.F.Tietze andF.Haunert,in Stimulating Concepts in Chemistry,Wiley-VCH Verlag GmbH&Co.KGaA,2005,pp.39-64.(6).B.Trost,Sci.1991,254,1471-1477.(7).Y.Huang,A.Yazbak and A.
Figure BDA0001789308370000012
in Green Techniques for Organic Synthesis and Medicinal Chemistry,John Wiley&Sons,Ltd,2012,pp.497-522.)。而本发明所涉及的制备方法是一种高效的五组分组份顺次反应，所有的化学原料均先后投入到反应中，生成的中间体无需分离提纯，最终得到一个产物，产率高达95％。反应结束后无需柱层析分离，直接减压过滤，即可得到高纯度产物。因此该制备方法的可操作性强，易于工业化大量生产。
3,4-二氢吡喃结构广泛存在于生物活性小分子中，针对含有3，4-二氢吡喃核的化合物的合成一直备受关注。但2-胺基-3，4-二氢吡喃类结构的合成鲜有报导，目前为止，只有两篇文献涉及了其衍生物的制备方法，先后在2011年和2012年发表((8).J.Sun,E.-Y.Xia,Q.Wu and C.-G.Yan,ACS Comb.Sci.2011,13,421-426.(9).B.Devi Bala,S.Michael Rajesh and S.Perumal,Green Chem.2012,14,2484-2490.)。文献所提供的方法虽然也是多组分合成，但得到的产物均是2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酯，无法一锅法反应完成2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺类化合物的制备。2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺的合成至今无人报导。因此，对于2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺类化合物的制备，如果用文献所报导的方法，具有以下几个缺点：1)文献方法提供的是2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酯类衍生物的制备，需要后续酰胺化反应步骤以制备2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺化合物，进而增加了制备难度和成本；2)文献所述的方法涉及到了微波反应器的应用，提高了反应成本，限制了制备方法的工业应用；3)文献所述方法用到了炔类化合物作为反应原料，炔类化合物毒性大且各种取代的炔类化合物类别有限，不易获得，一定程度上限制了产物类似物的拓展；4)文献方法反应时间长，而本发明所提供的方法，中间体的生成2小时，而后续反应时间可缩短至5分钟，耗时短；5)文献报导的方法，其产物的提纯有涉及到了柱层析分离，不利于工业化大量生产；6)更重要的是，文献所报导的2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酯类化合物均无明确的应用价值。而本发明所制备的2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺化合物具有潜在的抗炎活性。
众所周知，适度的炎症反应对机体具有保护作用，但长期或过度的炎症反应会对机体造成损伤，导致疾病发生。一些经典的炎性相关疾病，如(类)风湿性关节炎、动脉粥样硬化、哮喘、炎性肠道疾病、胃炎、肾炎、全身性炎症反应综合征等，其发生和致病过程，均与核转录因子κB(NF-κB)的过度或者持续激活相关。一些外源性因素或者内源性物质通过识别包括Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)在内的跨膜性蛋白，进入细胞内，经一系列的信号传递，从而激活NF-κB。
Toll样受体(TLR)通过识别病原相关分子模式(PAMP)或有害的内源性物质诱发天然免疫反应，抵抗病原体感染或组织损伤。TLR家族的TLR2和TLR4在天然免疫和炎症反应中起到重要作用。其中TLR2为家族中识别最多PAMPs分子的成员，得到广泛关注。TLR2通过识别PAMPs，致使下游一系列目的基因活化，进而指导目的基因转录和炎性介质的释放。本发明通过定量检测报告基因分泌型胎盘碱性磷酸酶SEAP(secreted alkaline phosphatase)信号的表达量，来检测TLR2的活化程度，从而反应机体炎症情况。
NF-κB作为各种炎症反应的共同通路，几乎存在于所有细胞中。NF-κB参与了多种细胞因子基因的转录，是细胞核内炎性递质基因转录的开关，在免疫应答、应激反应及细胞凋亡中起着主导作用。通过抑制NF-κB的激活，可对细胞因子的释放进行宏观调控，从而减轻炎症反应造成的脏器损伤。因此，NF-κB成为最具潜力的抗炎药物靶点。((10).A.SamuelMawuli,Y.Michael Bright,A.Seth,D.Samuel.Curr.Drug Discov Technol,2018,15,1-11.(11).V.Pande,,&M.Ramos,J.Curr Med Chem,2005,12(3),357-374.(12).H.Li,W.Han,V.Polosukhin,F.E.Yull,B.H.Segal,C.-M Xie,T.S.Blackwell.Mediat Inflamm,2013,503,213.(13).D.Vyas,S.Samsophear,P.Castro,L.Chaturvedi,L.Azevedo,J.Tepe,A.Vyas.J.Surg.Res.,2013,179(2),201.)过度激活的NF-κB形成复合物，从细胞浆内易位进入细胞核诱导趋化因子、粘附分子、免疫识别受体和细胞因子TNF-α,IL-6等的转录与表达，最终造成炎症反应。因此通过检测细胞因子的表达量，可以一定程度上检测NF-κB的激活程度，从而判断机体炎症程度。
因此本发明的目的是制备2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺类化合物，并提供一种简便高效的合成方法。此外，本发明提供2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺化合物在抗炎活性上的数据，以证明本发明所制备的新型化合物的应用价值，更进一步证明本发明所提供的合成方法的价值。
发明内容
本发明一个方面提供了一种制备含有2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺结构化合物的制备方法，其包括如下步骤：
1)将双乙烯酮与R2NH2在溶剂中搅拌反应至完全，得到
Figure BDA0001789308370000031
2)加入R3NH2，R1CHO和式a化合物，并加入单质碘反应至反应液完全固化，过滤后将滤饼洗涤干燥得到含有2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺结构化合物；
其中式a化合物如下所示，
Figure BDA0001789308370000032
所得的含有2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺结构化合物如式I所示，
Figure BDA0001789308370000033
X选自C或O；
R1选自氢，C1-C6的烷基，苯基，杂芳基，环烷基，氰基，甲氧基；苯基、杂芳基、环烷基、氰基、甲氧基、萘基、羟基、卤素取代的C1-C6的烷基；C1-C3烷基、苯基、环烷基、氰基、C1-C3烷氧基、卤素、硝基、羟基取代的苯基或萘基；烷基、苯基、杂芳基、环烷基、氰基、甲氧基、卤素取代的杂芳基；或烷基、苯基、杂芳基、环烷基、氰基、甲氧基、卤素取代的环烷基；C1-C3取代的芳基、C1-C3取代的杂芳基或C1-C3取代的环烷基；
R2选自氢，C1-C6的烷基，苯基，苄基，杂芳基，环烷基，氰基，甲氧基；苯基、杂芳基、环烷基、氰基、甲氧基、卤素取代的C1-C6的烷基；C1-C6烷基、苯基、杂芳基、环烷基、氰基、甲氧基、卤素、羟基取代的苯基或苄基；烷基、苯基、杂芳基、环烷基、氰基、甲氧基、卤素取代的杂芳基；或烷基、苯基、杂芳基、环烷基、氰基、甲氧基、卤素取代的环烷基；C1-C3取代的芳基、C1-C3取代的杂芳基或C1-C3取代的环烷基；
R3选自氢，C1-C6的烷基，苯基，苄基，杂芳基，环烷基，氰基，甲氧基；苯基、杂芳基、环烷基、氰基、甲氧基、卤素取代的C1-C6的烷基；C1-C6烷基、苯基、杂芳基、环烷基、氰基、甲氧基、卤素、羟基取代的芳基或苄基；烷基、苯基、杂芳基、环烷基、氰基、甲氧基、卤素取代的杂芳基；或烷基、苯基、杂芳基、环烷基、氰基、甲氧基、卤素取代的环烷基；C1-C3取代的芳基、C1-C3取代的杂芳基或C1-C3取代的环烷基；
R4选自氢，C1-C6的烷基或与R7形成烯键；
R5选自氢，C1-C6的烷基或者和R6形成苯环；
R6选自氢，C1-C6的烷基或者和R5形成苯环；
R7选自氢，C1-C6的烷基或与R4形成烯键。
优选地，本发明中间体在制备过程中不需要分离。
在本发明的技术方案中，制备方法中所用的溶剂选自二氯甲烷，无水乙醇，乙腈。
在本发明的技术方案中，催化剂碘的用量为原料R3NH2用量的5％-30mol％，优选为8-12％。
本发明反应流程如下：
Figure BDA0001789308370000051
在本发明的技术方案中，所述的式I化合物选自式II，式III或式IV所示化合物，
Figure BDA0001789308370000052
本发明另一个方面提供了一种含有2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺结构化合物，其具有如式I所示结构，
Figure BDA0001789308370000053
X选自C或O；
R1选自氢，C1-C6的烷基，苯基，杂芳基，环烷基，氰基，甲氧基；苯基、杂芳基、环烷基、氰基、甲氧基、萘基、羟基、卤素取代的C1-C6的烷基；C1-C3烷基、苯基、环烷基、氰基、C1-C3烷氧基、卤素、硝基、羟基取代的苯基或萘基；烷基、苯基、杂芳基、环烷基、氰基、甲氧基、卤素取代的杂芳基；或烷基、苯基、杂芳基、环烷基、氰基、甲氧基、卤素取代的环烷基；C1-C3取代的芳基、C1-C3取代的杂芳基或C1-C3取代的环烷基；
R2选自氢，C1-C6的烷基，苯基，苄基，杂芳基，环烷基，氰基，甲氧基；苯基、杂芳基、环烷基、氰基、甲氧基、卤素取代的C1-C6的烷基；C1-C6烷基、苯基、杂芳基、环烷基、氰基、甲氧基、卤素、羟基取代的苯基或苄基；烷基、苯基、杂芳基、环烷基、氰基、甲氧基、卤素取代的杂芳基；或烷基、苯基、杂芳基、环烷基、氰基、甲氧基、卤素取代的环烷基；C1-C3取代的芳基、C1-C3取代的杂芳基或C1-C3取代的环烷基；
R3选自氢，C1-C6的烷基，苯基，苄基，杂芳基，环烷基，氰基，甲氧基；苯基、杂芳基、环烷基、氰基、甲氧基、卤素取代的C1-C6的烷基；C1-C6烷基、苯基、杂芳基、环烷基、氰基、甲氧基、卤素、羟基取代的芳基或苄基；烷基、苯基、杂芳基、环烷基、氰基、甲氧基、卤素取代的杂芳基；或烷基、苯基、杂芳基、环烷基、氰基、甲氧基、卤素取代的环烷基；C1-C3取代的芳基、C1-C3取代的杂芳基或C1-C3取代的环烷基；
R4选自氢，C1-C6的烷基或与R7形成烯键；
R5选自氢，C1-C6的烷基或者和R6形成苯环；
R6选自氢，C1-C6的烷基或者和R5形成苯环；
R7选自氢，C1-C6的烷基或与R4形成烯键。
在本发明的技术方案中，所述的式I化合物选自式II，式III或式IV所示化合物，
Figure BDA0001789308370000061
本发明还涉及一些具体的化合物，化合物的结构如下所示：
Figure BDA0001789308370000071
Figure BDA0001789308370000081
本发明另一个方面提供了前述式I化合物的单晶；式I化合物为
Figure BDA0001789308370000082
所述单晶的空间群为P2/n，晶胞参数值为
Figure BDA0001789308370000083
α＝90°，
Figure BDA0001789308370000084
β＝96.495(4)°，
Figure BDA0001789308370000085
γ＝90°。
本发明另一各方面提供了前述单晶的制备方法，包括以下步骤：
1)将化合物用乙醇重结晶，过滤后得到的纯品，取纯品化合物，加入四氢呋喃，溶解后过滤，滤液收集；
2)取滤液置于透明样品瓶中，薄膜封口，薄膜上戳小洞静置3-5天后，带有点状颗粒出现，立刻封口，静置1-2周，有块状晶体长成。
本发明另一个方面提供了前述化合物在制备抗炎药物的用途。
附图说明
图1为化合物6aaca二维核磁谱图-1H NMR图谱。
图2为化合物6aaca一维核磁谱图-13C NMR图谱。
图3为化合物6aaca二维核磁谱图-HSQC图谱。
图4为化合物6aaca一维核磁谱图-13C DEPT 135图谱。
图5为化合物6aaca二维核磁谱图-COSY图谱。
图6为化合物6aaca二维核磁谱图-HMBC图谱。
图7为代表产物6aaca的XRD单晶结构。
图8为化合物Z20(6gcaa)在细胞水平上的抗炎活性评价。
具体实施方式
实施例1制备(2S,3R,4S)-2-(4-甲基苯胺)-N-苄基-4-(4-氯苯基)-3,4,5,6,7,8-六氢-2,7,7-三甲基-5-氧-二氢色烯-3-甲酰胺6aaaa:
Figure BDA0001789308370000091
在25mL的圆底单口烧瓶中，加入苄胺2.0mmol)，低温下搅拌，缓慢滴入化合物双乙烯酮IV(2.0mmol)，搅拌中回温到室温，继续搅拌2小时，TLC检测跟踪，待原料苄胺反应完全，中间体生成后，加入双甲酮(2.0mmol)，对甲基苯胺(2.0mmol)和对氯苯甲醛(2.0mmol)，以及单质碘(0.2mmol)，室温下持续搅拌，5分钟后，有大量固体生成并迅速固化，终止反应，加入2mL的乙腈，减压抽滤，滤饼依次用饱和硫代硫酸纳溶液和水洗涤，然后干燥，得到白色固体。白色固体(产率95％)；熔点166-168℃；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.62-8.65(m,NH,1H),7.28-7.30(d,aromatic,2H),7.17-7.19(m,aromatic,3H),7.05-7.08(d,aromatic,2H),6.95-6.98(d,aromatic,2H),6.73-6.76(m,aromatic,4H),5.75(s,NH,1H),4.41-4.48(m,CH,1H),3.92-3.99(m,CH2,2H),2.80-2.84(d,CH,1H),2.29-2.48(m,CH2,2H),2.17(d,CH3,3H),1.95-2.13(m,CH2,2H),1.50(s,CH3,3H),1.06(s,CH3,3H),0.93(s,CH3,3H)；13CNMR(125MHz,DMSO-d6)δ170.8,167.2,160.1,142.7,142.3,138.8,130.9,130.0,129.8,128.6,127.5,127.3,122.1,117.9,114.9,113.7,88.5,57.0,50.8,42.4,42.0,38.2,31.9,29.3,27.4,23.0,20.6；MS(ESI+)m/z 543(M+H)；Anal.Calcd for C33H35ClN2O3:C,72.98；H,6.50；N,5.16.Found:C,72.91；H,6.59；N,5.02.
实施例2制备(2S,3R,4S)-2-(4-氯苯胺)-N-苄基-4-(4-氯苯基)-3,4,5,6,7,8-六氢-2,7,7-三甲基-5-氧-二氢色烯-3-甲酰胺6aaca:
Figure BDA0001789308370000101
在25mL的圆底单口烧瓶中，加入苄胺(2.0mmol)，低温下搅拌，缓慢滴入化合物双乙烯酮(2.0mmol)，搅拌中回温到室温，继续搅拌2小时，TLC检测跟踪，待原料苄胺反应完全，中间体生成后，加入双甲酮(2.0mmol)，对氯苯胺(2.0mmol)和对氯苯甲醛(2.0mmol)，以及单质碘(0.2mmol)，室温下持续搅拌，10分钟后，有大量固体生成，反应混合液逐渐固化，终止反应，加入2mL的乙腈，减压抽滤，滤饼依次用饱和硫代硫酸纳溶液和水洗涤，然后干燥，得到白色固体。白色固体(产率71％)；熔点168-171℃；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.63-8.65(m,NH,1H),7.27-7.31(m,aromatic,2H),7.21(m,aromatic,5H),7.07-7.08(d,aromatic,2H),6.88-6.90(d,aromatic,2H),6.78-6.79(d,aromatic,2H),6.06(s,NH,1H),4.43-4.47(m,CH2,1H),3.96-4.02(m,CH+CH2,2H),2.84-2.86(d,CH,1H),2.30-2.48(m,CH2,2H),1.99-2.12(m,CH2,2H),1.56(s,CH3,3H),1.07(s,CH3,3H),0.92(s,CH3,3H)；13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ195.5,170.6,166.9,143.7,142.4,138.7,130.9,129.8,129.2,18.5,128.4,127.3,127.1,123.2,118.8,113.7,88.0,56.9,50.7,42.5,41.8,39.5,38.1,32.0,29.0,27.5,26.8,22.8；MS(ESI+)m/z 563(M+H)；Anal.Calcdfor C32H32Cl2N2O3:C,68.20；H,5.72；N,4.97.Found:C,68.24；H,5.76；N,4.90.
实施例3.(2S,3R,4S)-2-(对甲苯胺)-N-苄基-3,4,5,6,7,8-六氢-2,7,7-三甲基-4-(4-硝基苯基)-5-氧-二氢-色烯-3-甲酰胺6aaae:
Figure BDA0001789308370000102
在25mL的圆底单口烧瓶中，加入苄胺(2.0mmol)，低温下搅拌，缓慢滴入化合物双乙烯酮(2.0mmol)，搅拌中回温到室温，继续搅拌2小时，TLC检测跟踪，待原料苄胺反应完全，中间体生成后，加入双甲酮(2.0mmol)，对甲基苯胺(2.0mmol)和对硝基苯甲醛(2.0mmol)，以及单质碘(0.2mmol)，室温下持续搅拌，10分钟后，有大量固体生成，反应混合液逐渐固化，终止反应，加入2mL的乙腈，减压抽滤，滤饼依次用饱和硫代硫酸纳溶液和水洗涤，然后干燥，得到白色固体。白色固体(产率81％)；熔点180-182℃；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.63-8.65(m,NH,1H),8.01-8.11(m,aromatic,2H),7.30-7.31(m,aromatic,2H),6.99-7.14(m,aromatic,5H),6.77(m,aromatic,5H),5.77(s,NH,1H),4.37-4.42(m,CH2,1H),3.92-4.13(m,CH+CH2,2H),2.81-2.87(m,CH,1H),2.19(d,CH3,3H),1.98-2.13(m,2CH2,4H),1.53(s,CH3,3H),1.08(s,CH3,3H),0.96(s,CH3,3H)；13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ195.1,169.8,151.7,145.7,141.4,138.3,129.4,129.1,128.2,128.1,127.9,127.0,126.8,123.2,117.6,72.3,68.8,56.0,50.1,42.5,41.9,41.6,41.4,41.3,38.3,31.4,28.6,27.0,22.5,20.1；MS(ESI+)m/z 554(M+H)；Anal.Calcd for C33H35N3O5:C,71.59；H,6.37；N,7.59.Found:C,71.63；H,6.31；N,7.48.
实例4.(2S,3R,4S)-2-(对甲苯胺)-N-苄基-4-(4-氰基苯基)-3,4,5,6,7,8-六氢-2,7,7-三甲基-5-氧-二氢-色烯-3-甲酰胺6aaaf:
Figure BDA0001789308370000111
在25mL的圆底单口烧瓶中，加入苄胺(2.0mmol)，低温下搅拌，缓慢滴入化合物双乙烯酮(2.0mmol)，搅拌中回温到室温，继续搅拌2小时，TLC检测跟踪，待原料苄胺反应完全，中间体生成后，加入双甲酮(2.0mmol)，对甲基苯胺(2.0mmol)和对氰基苯甲醛(2.0mmol)，以及单质碘(0.2mmol)，室温下持续搅拌，15分钟后，有大量固体生成，反应混合液逐渐固化，终止反应，加入2mL的乙腈，减压抽滤，滤饼依次用饱和硫代硫酸纳溶液和水洗涤，然后干燥，得到白色固体。白色固体(产率81％)；熔点160-162℃；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.48(d,J＝8.2,aromatic,2H),7.30(d,J＝2.0,aromatic,3H),7.25(d,J＝8.1,aromatic,2H),7.04(d,J＝8.1,aromatic,2H),6.88(t,J＝7.4,aromatic,4H),5.74(s,NH,1H),5.50(s,NH,1H),4.45(dd,J＝14.6,6.7,CH2,1H),4.22(d,J＝11.4,CH,1H),4.11(dd,J＝14.6,4.6,CH2,1H),2.48–2.38(m,CH3,3H),2.29(s,CH3,3H),2.14(dd,J＝34.9,16.6,CH2,2H),1.64(s,CH3,3H),1.15(s,CH3,3H),1.05(s,CH3,3H).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ196.09,170.28,168.10,149.14,141.49,137.01,132.23,129.62,129.34,128.61,128.07,127.74,127.55,118.92,117.82,113.00,109.85,88.56,58.52,50.41,43.45,42.32,39.35,31.56,29.52,27.16,22.76,20.48.HRMS:calcd for C34H35N3O3 533.2678,found534.2742[M+H].
实例5.(2S,3R,4S)-2-(对甲苯胺)-N-苄基-3,4,5,6,7,8-六氢-4-(2，4-二氯苯基)-2,7,7-三甲基-5-氧-二氢-色烯-3-甲酰胺6aaah:
Figure BDA0001789308370000121
在25mL的圆底单口烧瓶中，加入苄胺(2.0mmol)，低温下搅拌，缓慢滴入化合物双乙烯酮(2.0mmol)，搅拌中回温到室温，继续搅拌2小时，TLC检测跟踪，待原料苄胺反应完全，中间体生成后，加入双甲酮(2.0mmol)，对甲基苯胺(2.0mmol)和2，4-二氯苯甲醛(2.0mmol)，以及单质碘(0.2mmol)，室温下持续搅拌，24小时后，有大量固体生成，反应混合液逐渐固化，终止反应，加入2mL的乙腈，减压抽滤，滤饼依次用饱和硫代硫酸纳溶液和水洗涤，然后干燥，得到白色固体。白色固体(产率47％)；熔点160.3-161.9℃；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.33(d,J＝2.1,aromatic,1H),7.25(s,aromatic,1H),7.24(d,J＝3.6,aromatic,1H),7.04(d,J＝8.1,aromatic,4H),6.94(d,J＝8.4,aromatic,1H),6.88(d,J＝8.1,aromatic,4H),6.09–5.88(m,2NH,2H),4.75(d,J＝11.5,CH,1H),4.52–4.45(m,CH2,1H),4.05(dd,J＝14.8,4.4,CH2,1H),2.54(d,J＝11.5,CH,1H),2.28(d,J＝12.5,CH3+CH2,5H),1.96(d,J＝21.0,CH2,2H),1.62(s,CH3,3H),1.08(s,CH3,3H)；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ＝196.50,195.94,170.79,170.08,167.67,167.36,141.78,141.72,139.87,137.06,136.95,136.09,135.17,132.97,132.17,131.49,130.20,129.54,129.42,129.22,129.03,128.60,127.59,127.54,127.46,127.35,127.27,127.22,118.06,117.70,114.15,112.29,88.99,88.19,77.31,77.00,76.68,57.98,52.53,50.47,50.31,43.62,43.35,42.41,42.28,39.91,34.39,31.53,31.40,29.58,29.26,27.84,27.01,22.99,22.43,20.49；LC-Ms/MS(ESI+)m/z 599.243(M+Na).
实施例6.(2S,3R,4S)-2-(对甲苯胺)-N-苄基-3,4,5,6,7,8-六氢-4-(4-羟基苯基)-2,7,7-三甲基-5-氧-二氢-色烯-3-甲酰胺6aaai:
Figure BDA0001789308370000131
在25mL的圆底单口烧瓶中，加入苄胺(2.0mmol)，低温下搅拌，缓慢滴入化合物双乙烯酮(2.0mmol)，搅拌中回温到室温，继续搅拌2小时，TLC检测跟踪，待原料苄胺反应完全，中间体生成后，加入双甲酮(2.0mmol)，对甲基苯胺(2.0mmol)和对羟基苯甲醛(2.0mmol)，以及单质碘(0.2mmol)，室温下持续搅拌，50分钟后，有大量固体生成，反应混合液逐渐固化，终止反应，加入2mL的乙腈，减压抽滤，滤饼依次用饱和硫代硫酸纳溶液和水洗涤，然后干燥，得到白色固体。白色固体(产率72％)；熔点162-164℃；1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.15(s,OH,1H),8.69–8.51(m,NH,1H),7.20(d,J＝6.9,aromatic,3H),6.98(d,J＝8.0,aromatic,2H),6.88(d,J＝8.1,aromatic,2H),6.80(d,J＝6.6,aromatic,2H),6.74(d,J＝8.0,aromatic,2H),6.65(d,J＝8.2,aromatic,2H),5.74(s,NH,1H),4.44(dd,J＝15.4,7.0,CH2,1H),4.04–3.95(m,CH,1H),3.89(d,J＝11.0,CH2,1H),2.84(d,J＝11.2,CH,1H),2.48–2.25(m,CH2,2H),2.19(s,CH3,3H),2.05(dd,J＝35.8,9.8,CH2,2H),1.51(s,CH3,3H),1.08(s,CH3,3H),0.95(s,CH3,3H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ195.38,171.19,166.12,155.94,155.43,142.32,138.75,133.44,129.85,128.80,128.47,128.23,127.29,127.07,117.62,115.25,114.58,88.35,57.52,50.79,42.27,41.89,37.78,31.70,29.26,27.20,22.95,20.53.Anal.Calcd for C33H36N2O4:C,75.55；H,6.92；N,5.34.Found:C,75.59；H,6.84；N,5.41.
实施例7.(2S,3R,4S)-2-(对甲苯胺)-N-苄基-3,4,5,6,7,8-六氢-2,7,7-三甲基-4-(2-萘基)-5-氧-二氢-色烯-3-甲酰胺6aaaj:
Figure BDA0001789308370000132
在25mL的圆底单口烧瓶中，加入苄胺(2.0mmol)，低温下搅拌，缓慢滴入化合物双乙烯酮(2.0mmol)，搅拌中回温到室温，继续搅拌2小时，TLC检测跟踪，待原料苄胺反应完全，中间体生成后，加入双甲酮(2.0mmol)，对甲基苯胺(2.0mmol)和乙萘醛(2.0mmol)，以及单质碘(0.2mmol)，室温下持续搅拌，5分钟后，有大量固体生成，反应混合液逐渐固化，终止反应，加入2mL的乙腈，减压抽滤，滤饼依次用饱和硫代硫酸纳溶液和水洗涤，然后干燥，得到白色固体。白色固体(产率68％)；熔点157-159℃；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.82–7.71(m,aromatic,4H),7.46(dd,J＝5.9,3.3,aromatic,2H),7.27-7.31(m,aromatic,1H),7.05(d,J＝7.0,aromatic,3H),6.95–6.81(m,aromatic,4H),6.51(d,J＝7.6,aromatic,2H),5.91(s,NH,1H),5.41(s,NH,1H),4.34(dd,J＝14.5,7.8,CH2+CH,2H),4.09–3.98(m,CH2,1H),2.63(d,J＝11.4,CH,1H),2.50(d,J＝19.2,CH2,2H),2.30(s,CH3,3H),2.09(dd,J＝33.8,16.2,CH2,2H),1.19(s,CH3,3H),1.05(d,J＝8.6,CH3,3H).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ195.93,170.67,166.86,142.88,141.37,136.66,132.17,128.90,128.80,128.68,128.50,127.74,127.49,124.44,118.39,113.73,87.91,59.26,50.56,43.62,42.21,38.71,31.60,29.37,27.22,22.59.HRMS:calcd for C37H38N2O3 558.2882,found 559.2945[M+H].
实施例8.(2S,3R,4S)-N-(2-氟苯基)-2-(对甲苯胺)-4-(4-氯苯基)-3,4,5,6,7,8-六氢-2,7,7-三甲基-5-氧-二氢-色烯-3-甲酰胺6daaa:
Figure BDA0001789308370000141
在25mL的圆底单口烧瓶中，加入2-氟苄胺(2.0mmol)，低温下搅拌，缓慢滴入化合物双乙烯酮(2.0mmol)，搅拌中回温到室温，继续搅拌2小时，TLC检测跟踪，待原料2-氟苄胺反应完全，中间体生成后，加入双甲酮(2.0mmol)，对甲基苯胺(2.0mmol)和对氯苯甲醛(2.0mmol)，以及单质碘(0.2mmol)，室温下持续搅拌，120分钟后，有大量固体生成，反应混合液逐渐固化，终止反应，加入2mL的乙腈，减压抽滤，滤饼依次用饱和硫代硫酸纳溶液和水洗涤，然后干燥，得到白色固体。白色固体(产率76％)；熔点166-168℃；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.65(m,NH,1H),7.24-7.29(m,aromatic,3H),6.98-7.12(m,aromatic,6H),6.74-6.76(d,aromatic,2H),6.60-6.63(m,aromatic,1H),5.72(s,NH,1H),4.36-4.40(m,CH2,1H),3.95-4.11(m,CH+CH2,2H),2.82-2.84(d,CH,1H),2.31-2.47(m,CH2,2H),2.19(s,CH3,3H),1.99-2.16(m,CH2,2H),1.51(s,CH3,3H),1.07(s,CH3,3H),0.95(s,CH3,3H)；13CNMR(126MHz,DMSO)δ195.51,170.95,167.19,161.29,159.35,142.52,130.81,130.18,129.91,129.84,129.66,129.47,129.40,128.44,125.49,125.38,124.40,121.50,117.89,115.50,115.33,113.62,88.49,56.96,50.72,41.99,38.16,36.25,36.22,31.87,29.18,28.41,27.38,22.91,20.59；MS(ESI+)m/z 561(M+H)；Anal.Calcd forC33H34ClFN2O3:C,70.64；H,6.11；N,4.99.Found:C,70.72；H,6.10；N,4.95.
实施例.(2S,3R,4S)-2-(对甲苯胺)-4-(4-氯苯基)-3,4,5,6,7,8-六氢-2,7,7-三甲基-5-氧-N-对甲苯基-二氢-色烯-3-甲酰胺6eaaa:
Figure BDA0001789308370000151
在25mL的圆底单口烧瓶中，加入对甲苯胺(2.0mmol)，低温下搅拌，缓慢滴入化合物双乙烯酮(2.0mmol)，搅拌中回温到室温，继续搅拌2小时，TLC检测跟踪，待原料苄胺反应完全，中间体生成后，加入双甲酮(2.0mmol)，对甲基苯胺(2.0mmol)和对氯苯甲醛(2.0mmol)，以及单质碘(0.2mmol)，室温下持续搅拌，8小时后，有大量固体生成，反应混合液逐渐固化，终止反应，加入2mL的乙腈，减压抽滤，滤饼依次用饱和硫代硫酸纳溶液和水洗涤，然后干燥，得到白色固体。白色固体(产率83％)；熔点185-187℃；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.95(m,NH,1H),7.26-7.47(m,aromatic,4H),6.98-7.19(m,aromatic,6H),6.78-6.79(d,aromatic,2H),5.73(s,OH,1H),4.05-4.07(m,CH,1H),2.91-2.93(d,CH,1H),2.28-2.36(m,CH2,2H),2.19(s,CH3,3H),2.15(s,CH3,3H),1.99-2.12(m,CH2,2H),1.58(s,CH3,3H),1.04(s,CH3,3H),0.96(s,CH3,3H)；13C NMR(126MHz,DMSO)δ195.30,169.64,167.54,142.72,142.18,135.42,133.15,129.90,129.58,128.50,127.23,123.54,123.37,120.59,118.01,113.56,88.29,57.83,50.69,42.02,38.30,31.94,29.11,27.51,23.01,20.90,20.60.MS(ESI+)m/z 543(M+H)；Anal.Calcd for C33H35ClN2O3:C,72.98；H,6.50；N,5.16.Found:C,72.93；H,6.58；N,6.63.
实施例10制备(2S,3R,4S)-(对甲苯胺)-N-丁基-4-(4-氯苯基)-3,4,5,6,7,8-六氢-2,7,7-三甲基-5-氧-二氢色烯-3-甲酰胺6faaa:
Figure BDA0001789308370000161
在25mL的圆底单口烧瓶中，加入正丁胺(2.0mmol)，低温下搅拌，缓慢滴入化合物双乙烯酮(2.0mmol)，搅拌中回温到室温，继续搅拌2小时，TLC检测跟踪，待原料正丁胺反应完全，中间体生成后，加入双甲酮(2.0mmol)，对甲基苯胺(2.0mmol)和对氯苯甲醛(2.0mmol)，以及单质碘(0.2mmol)，室温下持续搅拌，20分钟后，有大量固体生成，逐渐固化，终止反应，加入2mL的乙腈，减压抽滤，滤饼依次用饱和硫代硫酸纳溶液和水洗涤，然后干燥，得到白色固体，白色固体用无水乙醇重结晶。白色固体(产率71％)；熔点146-148℃；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.05(m,NH,1H),7.27-7.29(d,aromatic,2H),6.97-7.04(m,aromatic,4H),6.74-6.75(d,aromatic,2H),5.83(s,NH,1H),3.91-3.93(d,CH,1H),3.07-3.08(d,CH,1H),2.68-2.83(m,CH2,2H),2.31-2.47(m,CH2,2H),2.19(s,CH3,3H),1.99-2.13(m,CH2,2H),1.49(s,CH3,3H),1.11-1.16(m,CH2,2H),1.08(s,CH3,3H),0.88-0.95(m,CH2+CH3,5H),0.73-0.76(m,CH3,3H)；13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ195.5,170.6,167.3,142.7,142.4,30.7,130.4,19.9,129.5,128.3,117.8,113.6,88.5,57.0,50.7,42.0,38.6,38.2,31.9,31.2,29.2,27.4,22.9,20.6,19.6,14.0；MS(ESI+)m/z 509(M+H)；Anal.Calcd forC30H37ClN2O3:C,70.78；H,7.33；N,5.50.Found:C,70.71；H,7.39；N,5.57.
实施例11制备(2S,3R,4S)-2-(对甲苯胺)-N-苄基-3,4,5,6,7,8-六氢-4-(4-甲氧基苯基)-2-甲基-5-氧-二氢色烯-3-甲酰胺6abad:
Figure BDA0001789308370000162
在25mL的圆底单口烧瓶中，加入苄胺(2.0mmol)，低温下搅拌，缓慢滴入化合物双乙烯酮(2.0mmol)，搅拌中回温到室温，继续搅拌2小时，TLC检测跟踪，待原料苄胺反应完全，中间体生成后，加入1，3-环己二酮(2.0mmol)，对甲基苯胺(2.0mmol)和对甲氧基苯甲醛(2.0mmol)，以及单质碘(0.2mmol)，室温下持续搅拌，3分钟后，有大量固体生成，逐渐固化，终止反应，加入2mL的乙腈，减压抽滤，滤饼依次用饱和硫代硫酸纳溶液和水洗涤，然后干燥，得到白色固体，白色固体用无水乙醇重结晶。白色固体(产率41％)；熔点161.9-163.1℃；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.27–7.20(m,aromatic,3H),7.11(d,J＝8.3,aromatic,2H),7.03(d,J＝8.0,aromatic,2H),6.88(d,J＝8.2,aromatic,4H),6.79(d,J＝8.3,aromatic,2H),5.84(s,NH,1H),5.44(d,J＝5.2,NH,1H),4.41(dd,J＝14.7,6.3,CH2,1H),4.20–4.10(m,CH+CH2,2H),3.78(d,J＝7.2,CH3,3H),2.64–2.40(m,CH3,3H),2.33–2.15(m,CH3+CH2,5H),1.97(dd,J＝12.4,9.1,CH2,2H),1.63(s,CH3,3H)；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ＝196.13,171.19,168.30,158.09,141.91,137.05,134.91,129.48,128.84,128.51,128.07,127.58,117.72,115.73,113.99,88.23,59.83,55.09,43.54,38.36,36.84,28.70,22.77,20.44,20.02；HRMS:calcd for C32H34N2O4510.2519,found 511.2578[M+H].
实施例12制备(2S,3R,4S)-4-(4-氯苯)-2-甲基-5-氧-N-(对甲苯基)-2-(对甲苯胺)-2,3,4,5-四氢吡喃[3,2-c]色烯-3-甲酰胺,6ecaa:
Figure BDA0001789308370000171
在5mL的反应瓶中，加入对甲苯胺(2.0mmol)，低温下搅拌，缓慢滴入化合物双乙烯酮(2.0mmol)，搅拌中回温到室温，继续搅拌2小时，TLC检测跟踪，待原料对甲苯胺反应完全，中间体生成后，加入4-羟基香豆素(2.0mmol)，对甲基苯胺(2.0mmol)和对氯苯甲醛(2.0mmol)，以及单质碘(0.2mmol)，室温下持续搅拌，15分钟后，有大量固体生成，逐渐固化，终止反应，加入2mL的乙腈，减压抽滤，滤饼依次用饱和硫代硫酸纳溶液和水洗涤，然后干燥，得到白色固体，白色固体用无水乙醇重结晶。白色固体(产率85％)；熔点172.9-176.8℃；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.01(d,J＝7.7Hz,aromatic,1H),7.50(t,J＝7.7Hz,aromatic,1H),7.36(t,J＝7.4Hz,aromatic,1H),7.17(d,J＝7.9Hz,aromatic,3H),7.10(d,J＝12.9Hz,aromatic,6H),6.97(d,J＝7.4Hz,aromatic,3H),6.86(d,J＝7.7Hz,aromatic,2H),5.92(s,NH,1H),4.48(d,J＝11.4Hz,CH,1H),2.82(d,J＝11.4Hz,CH,1H),2.31(s,CH3,3H),2.21(s,CH3,3H),1.83(s,CH3,3H)；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ168.88,162.47,160.76,153.00,140.86,139.81,135.34,133.59,132.77,131.81,129.96,129.56,129.47,128.96,128.49,128.46,124.04,122.64,121.07,118.68,116.73,115.68,104.45,90.07,59.43,53.52,39.75,22.76,20.84,20.43；HRMS:calcd for C34H29ClN2O4564.1816,found565.1876[M+H].
实施例13制备(2S,3R,4S)-4-(4-氯苯)-2-甲基-5-氧-N-(苯基)-2-(对甲苯胺)-2,3,4,5-四氢吡喃[3,2-c]色烯-3-甲酰胺,6gcaa:
Figure BDA0001789308370000181
在5mL的反应瓶中，加入苯胺(2.0mmol)，低温下搅拌，缓慢滴入化合物双乙烯酮(2.0mmol)，搅拌中回温到室温，继续搅拌2小时，TLC检测跟踪，待原料对甲苯胺反应完全，中间体生成后，加入4-羟基香豆素(2.0mmol)，对甲基苯胺(2.0mmol)和对氯苯甲醛IX(2.0mmol)，以及单质碘(0.2mmol)，室温下持续搅拌，1分钟后，有大量固体生成，逐渐固化，终止反应，加入2mL的乙腈，减压抽滤，滤饼依次用饱和硫代硫酸纳溶液和水洗涤，然后干燥，得到白色固体，白色固体用无水乙醇重结晶。白色固体(产率91％)；熔点191.8-193.6℃；1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.19(s,NH,1H),8.08(d,J＝7.7,aromatic,1H),7.67(t,J＝7.5,aromatic,1H),7.48(d,J＝7.6,aromatic,1H),7.42(t,J＝8.9,aromatic,3H),7.31(d,J＝8.3,aromatic,4H),7.24(d,J＝8.1,aromatic,2H),7.10(t,J＝7.2,aromatic,1H),7.02–6.81(m,aromatic,4H),6.02(s,NH,1H),4.50(d,J＝11.4,CH,1H),3.24(d,J＝11.4,CH,1H),2.14(s,CH3,3H),1.83(s,CH3,3H)；13C NMR(101MHz,DMSO)δ168.88,160.18,158.08,152.79,141.16,140.83,138.04,132.64,131.47,129.79,129.69,129.25,129.00,128.70,124.85,123.20,120.47,118.44,116.81,115.64,104.65,90.28,57.57,38.93,22.89,20.48；HRMS:calcd for C33H27ClN2O4550.1659,found 549.1587[M-H].
实施例14制备(2S,3R,4S)-N-苯基-4-(4-氯苯基)-2,7-二甲基-5-氧-2-(对甲苯胺)-2,3,4,5-四氢吡喃[4,3-b]吡喃-3-甲酰胺,6adaa:
Figure BDA0001789308370000191
在5mL的反应瓶中，加入苄胺(2.0mmol)，低温下搅拌，缓慢滴入化合物双乙烯酮(2.0mmol)，搅拌中回温到室温，继续搅拌2小时，TLC检测跟踪，待原料苄胺反应完全，中间体生成后，加入4-羟基-6-甲基吡喃酮(2.0mmol)，对甲基苯胺(2.0mmol)和对氯苯甲醛(2.0mmol)，以及单质碘(0.2mmol)，室温下持续搅拌，30分钟后，有大量固体生成，逐渐固化，终止反应，加入2mL的乙腈，减压抽滤，滤饼依次用饱和硫代硫酸纳溶液和水洗涤，然后干燥，得到白色固体，白色固体用无水乙醇重结晶。白色固体(产率78％)；熔点180.5-182.1℃；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.24(d,J＝1.7Hz,aromatic,3H),7.17(d,J＝8.4Hz,aromatic,2H),7.07(d,J＝8.3Hz,aromatic,2H),7.01(d,J＝8.1Hz,aromatic,2H),6.83(d,J＝8.2Hz,aromatic,4H),5.90(s,aromatic,1H),5.82(s,2NH,2H),4.43(dd,J＝14.8,6.7Hz,CH2,1H),4.27(d,J＝11.5Hz,CH,1H),4.08(dd,J＝14.8,4.5Hz,CH2,1H),2.53(d,J＝11.5Hz,CH2,1H),2.25(s,CH3,3H),2.14(s,CH3,3H),1.62(s,CH3,3H)；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ170.26,162.89,162.48,161.63,141.28,139.79,136.78,132.56,129.57,128.85,128.64,127.64,127.44,118.02,101.41,100.26,89.12,58.85,43.57,38.93,22.65,20.47,19.80；HRMS:calcd forC31H29ClN2O4528.1816,found 529.1883[M+H].
含有2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺结构的新型化合物I,II和III的抗炎活性评价(活性数据见实例15和实例16)
实施例15 TLR2介导的SEAP信号抑制活性评价：
a.QUANTI-Blu碱性磷酸酶活性检测：
HEK-Blue hTLR2细胞首先在加有10％胎牛血清和1％青霉素-链霉素双抗的DMEM培养基中培养。随后接种到96孔板中(每孔200μl培养基，接种量为4X104细胞)在37℃恒温过夜。第二天换液，然后依次加入100μl药物溶液，50μl含有10ng/ml终浓度的Pam3CSK4，在37℃恒温培养24h，并设立空白和阳性对照。第三天取50μl培养基上清至新的96孔板中并加入50μl QUANTI-Blue(InvivoGen)缓冲液。静置15分钟，最后在620nm波长下下测定吸光值。
b.MTT细胞活性检测：
第一天接种HEK-Blue hTLR2细胞如96孔板(40,000/孔，200μl含10％胎牛血清和1％青霉素-链霉素双抗的DMEM培养基)，37℃,5％CO2培养24小时。第二天换液并加入待测化合物和10ng/ml终浓度的Pam3CSK4，在37℃,5％CO2培养24小时。第三天每孔加入15μlMTT溶液(PBS溶解)，在37℃培养3小时，随后弃去培养基并干燥过夜。最后每孔加入100μlDMSO并摇晃混匀30分钟，在570nm波长下测定吸光值。
经过活性筛选，100μM的6ecaa和6gcaa对SEAP信号的抑制率达到90％以上(表1)，虽然用量偏大，但该剂量下并没有明显的细胞毒性。将化合物6ecaa和6gcaa分别命名为Z19和Z20，进一步测试得到其IC50，其结果见表1。因此，可以明确化合物Z19和Z20具有潜在的抗炎活性。
表1.靶向NF-κB的TLR2介导的SEAP信号抑制活性结果[a]
Figure BDA0001789308370000201
a 10ng/ml Pam3CSK4作为阳性对照.b三次独立操作后的平均值.
为进一步明确其抗炎活性，我们在此基础上，对化合物Z19和Z20在细胞水平上评价其对NF-κB激活后导致的炎症因子表达量的影响。初步评价结果显示，Z19和Z20均能够有效抑制激活后的炎症因子TNF-α和IL-6的表达，而同时Z20的效果更好。因此单独针对Z20，扩大样本量，评价其对被激活的炎症因子TNF-α和IL-6的表达水平的影响，具体见实例16。
实施例16脂多糖LPS(lipopolysaccharide)激活NF-κB后导致炎症因子TNF-α和白介-6(IL-6)的表达抑制率检测
两组成熟RAW264.7细胞株同时给予LPS刺激，LPS组采用含有DMSO的DMEM培养细胞，LPS+Z20组用含有新型抗炎药物的DMEM培养细胞。LPS和吡喃衍生物Z20的工作浓度分别为100ng/ml、100μmol/L。两组刺激维持6h后，弃细胞培养上清，用2mlDPBS清洗细胞两遍，每孔加入500μl TRIon裂解液反复吹打收集细胞，提取细胞RNA。
q-PCR检测RAW264.7细胞中炎症因子mRNA的表达：分别提取LPS组和LPS+Z20组的RNA，经逆转录转为cDNA，而后经q-PCR扩增，根据CT值对两组细胞进行炎症因子mRNA水平检测。
在LPS刺激RAW264.7巨噬细胞系后，用阴性对照物DMSO(二甲亚枫)和Z20共处理被LPS刺激后的细胞，6小时后，通过实时荧光定量PCR实验检测两组炎症因子的mRNA表达水平。
结果显示LPS+新型抗炎药Z20组相比于LPS组，TNF-α的mRNA表达水平可以降低0.59倍，IL-6的表达水平可以降低0.43倍(图8)。由此我们得到初步结论：Z20能够有效抑制LPS导致的炎症因子释放，明确表现出抗炎效果。
实施例17单晶培养
对代表化合物6aaca进行单晶培养：将产物用乙醇重结晶，得到的纯品，取纯品化合物6aaca 10mg，加入四氢呋喃(THF)，溶解后过滤，滤液收集。取3mL滤液置于5mL的透明样品瓶中，薄膜封口，毛细管在薄膜上戳3-5个小洞。静置3-5天后，带有点状颗粒出现，立刻封口(旋紧样品瓶盖子)，静置1-2周，有块状晶体长成。凡士林包裹取出的晶体待测。将晶体进行XRD单晶衍射检测，解析单晶数据，确定产物结构(单晶数据见下面数据)XRD单晶结构见图7.
化合物6aaca的晶体数据和结构精修.
Figure BDA0001789308370000211
Figure BDA0001789308370000221

Claims (8)

1.一种含有2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺结构化合物的制备方法，其包括如下步骤：
1)将双乙烯酮与R2NH2在溶剂中搅拌反应至完全，得到
Figure FDA0003200281840000011
2)加入R3NH2，R1CHO和式a化合物，并加入单质碘反应至反应液完全固化，过滤后将滤饼洗涤干燥得到含有2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺结构化合物；
其中式a化合物如下所示，
Figure FDA0003200281840000012
所得的含有2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺结构化合物如式I所示，
Figure FDA0003200281840000013
其中，R2NH2为苄胺、R3NH2为对甲基苯胺、R1CHO为对氯苯甲醛、式a化合物为双甲酮，所得的含有2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺结构化合物结构式为
Figure FDA0003200281840000014
或者R2NH2为苄胺、R3NH2为对氯苯胺、R1CHO为对氯苯甲醛、式a化合物为双甲酮，所得的含有2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺结构化合物结构为
Figure FDA0003200281840000021
或者R2NH2为苄胺、R3NH2为对甲基苯胺、R1CHO为对硝基苯甲醛、式a化合物为双甲酮，所得的含有2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺结构化合物结构式为
Figure FDA0003200281840000022
或者R2NH2为苄胺、R3NH2为对甲基苯胺、R1CHO为对氰基苯甲醛、式a化合物为双甲酮，所得的含有2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺结构化合物结构式为
Figure FDA0003200281840000023
或者R2NH2为苄胺、R3NH2为对甲基苯胺、R1CHO为2,4-二氯苯甲醛、式a化合物为双甲酮，所得的含有2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺结构化合物结构式为
Figure FDA0003200281840000031
或者R2NH2为苄胺、R3NH2为对甲基苯胺、R1CHO为对羟基苯甲醛、式a化合物为双甲酮，所得的含有2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺结构化合物结构式为
Figure FDA0003200281840000032
或者R2NH2为苄胺、R3NH2为对甲基苯胺、R1CHO为乙萘醛、式a化合物为双甲酮，所得的含有2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺结构化合物结构式为
Figure FDA0003200281840000033
或者R2NH2为2-氟苄胺、R3NH2为对甲基苯胺、R1CHO为对氯苯甲醛、式a化合物为双甲酮，所得的含有2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺结构化合物结构式为
Figure FDA0003200281840000041
或者R2NH2为对甲基苯胺、R3NH2为对甲基苯胺、R1CHO为对氯苯甲醛、式a化合物为双甲酮，所得的含有2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺结构化合物结构式为
Figure FDA0003200281840000042
或者R2NH2为正丁胺、R3NH2为对甲基苯胺、R1CHO为对氯苯甲醛、式a化合物为双甲酮，所得的含有2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺结构化合物结构式为
Figure FDA0003200281840000043
或者R2NH2为苄胺、R3NH2为对甲基苯胺、R1CHO为对甲氧基苯甲醛、式a化合物为1,3-环己二酮，所得的含有2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺结构化合物结构式为
Figure FDA0003200281840000051
或者R2NH2为对甲基苯胺、R3NH2为对甲基苯胺、R1CHO为对氯苯甲醛、式a化合物为4-羟基香豆素，所得的含有2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺结构化合物结构式为
Figure FDA0003200281840000052
或者R2NH2为苯胺、R3NH2为对甲基苯胺、R1CHO为对氯苯甲醛、式a化合物为4-羟基香豆素，所得的含有2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺结构化合物结构式为
Figure FDA0003200281840000053
或者R2NH2为苄胺、R3NH2为对甲基苯胺、R1CHO为对氯苯甲醛、式a化合物为4-羟基-6-甲基吡喃酮，所得的含有2-胺基-3，4-二氢吡喃-3-甲酰胺结构化合物结构式为
Figure FDA0003200281840000061
2.根据权利要求1所述制备方法，其中所用的溶剂选自二氯甲烷，无水乙醇，乙腈。
3.根据权利要求1所述制备方法，催化剂碘的用量为原料R3NH2用量5-30mol％。
4.根据权利要求1所述的制备方法，反应过程中的中间体不用分离纯化。
5.一种化合物，其结构式如下式所述：
Figure FDA0003200281840000062
6.一种式I化合物单晶，所述式I化合物具有如下结构
Figure FDA0003200281840000071
所述单晶的空间群为P2/n，晶胞参数值为
Figure FDA0003200281840000072
Figure FDA0003200281840000073
Figure FDA0003200281840000074
7.根据权利要求6所述的单晶的制备方法，包括以下步骤：
1)将化合物用乙醇重结晶，过滤后得到的纯品，取纯品化合物，加入四氢呋喃，溶解后过滤，滤液收集；
2)取滤液置于透明样品瓶中，薄膜封口，薄膜上戳小洞静置3-5天后，待有点状颗粒出现，立刻封口，静置1-2周，有块状晶体长成。
8.根据权利要求5所述的化合物在制备抗炎药物的用途。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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Mehdi Ghandi，et al.Efficient access to novel tetra‑and pentacyclic dihydroquinolin‑2‑ones by catalyst‑free domino Knöevenagel hetero‑Diels–Alder reactions from N‑(2‑formylphenyl)‑N‑methylcinnamamides and cyclic 1,3‑dicarbonyls in water.《J IRAN CHEM SOC》.2016,第14卷第177-187页. *
Metal-Free Oxidative Spirocyclization of Hydroxymethylacrylamide with 1,3-Dicarbonyl Compounds: A New Route to Spirooxindoles;Hua Wang,et al;《Org. Lett.》;20130927;第15卷(第20期);第5254-5257页 *
Suppressive effects of acetone extract from the stem bark of three Acacia species on nitric oxide production in lipopolysaccharide-stimulated RAW 264.7 macrophage cells;Kandhasamy Sowndhararajan，et al;《Asian Pac J Trop Biomed》;20160611;第6卷(第8期);第658-664页 *

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