CN110865160B - 一种丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定方法 - Google Patents

一种丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定方法，属于医药技术领域。本发明提供的丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定方法利用一定浓度乙醇作为释放介质，增大了丙泊酚在释放介质中的溶解度，从而令体外释放实验更易达到漏槽条件，加快释放过程，节约测定时间和成本；本发明提供的测定方法能够区分不同大豆油配方的丙泊酚脂肪乳体外释放度的差异，可用作丙泊酚脂肪乳的质量评估标准。

Description

一种丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定方法
技术领域
本发明涉及一种丙泊酚脂肪乳体释放度的测定方法，属于医药技术领域。
背景技术
丙泊酚是一种具有镇静和麻醉作用的酚类衍生物药物，具有高度脂溶性，可以快速穿过血脑屏障，从而迅速起到麻醉、镇静效果，具有易于控制、清醒快和不良反应少等优势，被广泛用于患者全麻诱导，硬膜外辅助麻醉，无痛分娩，无痛胃肠镜检查等方面。
载药脂肪乳是一种将药物溶于大豆油，中链油等甘油三酯后经过乳化以小液滴状分散在水中形成非均相的水包油型(o/w)乳剂，能够明显提高疏水药物在水溶液中的溶解度，从而增加了药物的生物利用度；并将难溶性药物进行静脉给药。同时脂肪乳还可降低亲脂药物对塑料输液器的吸附，降低不稳定药物的水解或氧化，并降低药物毒性。
体外释放实验是仿制药一致性评价中的一个必不可少的环节，可以预估药物制剂在体内释放和代谢过程，有助于人们对药物制剂潜在的威胁进行评估。通过调节释放介质、搅拌速率以及温度来模拟体外制剂体内释放环境，测定药物体外释放数据来区分比较原研药和仿制药的质量和性能。
发明内容
本发明的目的是为了克服丙泊酚溶解度低的缺陷，保障丙泊酚脂肪乳体外完全释放，而提供一种丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定方法。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定方法，包括如下步骤：
(1)将丙泊酚脂肪乳和释放介质加入透析袋中，然后将透析袋放入90ml-1000ml释放介质中，用搅拌释放仪器搅拌，水浴加热，进行丙泊酚脂肪乳的体外释放；
(2)在不同时间点取出释放介质，并补充等量空白释放介质，测定所述取出释放介质中的丙泊酚浓度，计算丙泊酚脂肪乳体外释放度。
优选地，步骤(1)中，所述透析袋经纯水浸泡，并加热沸腾10-15min之后用纯化水冲洗三次，再用溶出介质冲洗三次；所述透析袋的截留分子量为3000-30000Dalton。
优选地，所述的透析袋截留分子量为8000-14000Dalton。
优选地，所述溶出介质为体积浓度10％-60％乙醇。
优选地，加入所述透析袋的所述丙泊酚脂肪乳体积为0.5-2ml，所述释放介质体积浓度为10％-60％乙醇。
优选地，所述的释放介质为体积浓度40％-50％的乙醇。
利用一定浓度乙醇作为释放介质，增大了丙泊酚在释放介质中的溶解度，从而令体外释放实验更易达到漏槽条件，加快释放过程，节约测定时间和成本。
优选地，步骤(1)中，所述丙泊酚脂肪乳包括丙泊酚长链脂肪乳或丙泊酚中/长链脂肪乳。
优选地，步骤(1)中，所述丙泊酚脂肪乳中丙泊酚的重量百分含量为0.5-2％。
优选地，步骤(1)中，所述搅拌释放仪器包括震荡仪、磁力搅拌仪和溶出仪，所述搅拌的速率为50-200rpm。
优选地，所述搅拌的速率为100-150rpm。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明提供的丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定方法不需要复杂的分离过程，利用一定浓度乙醇作为释放介质，增大了丙泊酚在释放介质中的溶解度，从而令体外释放实验更易达到漏槽条件，加快释放过程，节约测定时间和成本；本发明提供的测定方法能够区分不同大豆油配方的丙泊酚脂肪乳体外释放度的差异，用作丙泊酚脂肪乳的质量评估标准。
附图说明
图1为本发明实施例7的丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定结果图
具体实施方式
为更好地说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
本实施例为本发明的一种丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定方法，包括如下步骤：
(1)取10cm截留分子量为14000Dalton的透析袋，浸泡于纯化水中，于沸水加热10min之后，依次用纯化水、体积浓度为50％乙醇冲洗三次，活化备用，将1ml丙泊酚中/长链脂肪乳(含1％丙泊酚)加入处理后的透析袋中，由另一端加入，夹紧透析袋，置于150ml广口瓶中，然后往广口瓶中加入99ml 50％乙醇作为释放介质，再用橡胶塞封口，以震荡仪50rpm的速率进行搅拌，并37℃水浴加热，即可进行丙泊酚脂肪乳的体外释放；
(2)在步骤(1)所述的丙泊酚脂肪乳的体外释放进行0.5、1、2、3、4、6、8、24h时，分别将透析袋外99ml释放介质全部取出，并补充加入空白的等体积50％乙醇，然后测定所述取出释放介质中的丙泊酚浓度，计算丙泊酚脂肪乳体外释放度。
丙泊酚脂肪乳释放量的计算公式如下所示，
Figure GDA0002354645110000031
Er：药物累计释放量；Ve：溶出介质的置换体积(99ml)；V0：释放介质总体积(100ml)；Ci：第i次置换取样时释放液的浓度；mdrug：所载药物总质量(m样品量/1g*10mg)；n：置换溶出介质的次数。
实施例1的丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定结果如表1所示。
表1实施例1的丙泊酚脂肪乳体外释放的测定结果
Figure GDA0002354645110000041
由表1可知，丙泊酚中/长链脂肪乳采用透析法，在50％乙醇的溶出介质中8小时的时候可以释放达到70.8％，24小时释放基本完全释放。
实施例2
本实施例为本发明的一种丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定方法，包括如下步骤：
(1)取10cm截留分子量为8000Dalton的透析袋，浸泡于纯化水中，于沸水加热15min之后依次用纯化水、体积浓度为60％的乙醇冲洗三次，活化备用；将1ml丙泊酚长链脂肪乳(含1％丙泊酚)加入处理后的透析袋中，由另一端加入，夹紧透析袋，置于150ml广口瓶中，然后往广口瓶中加入99ml 60％乙醇，再用橡胶塞封口，磁力搅拌仪90rpm的速率进行搅拌，并37.5℃水浴加热，即可进行丙泊酚脂肪乳的体外释放；
(2)在步骤(1)所述的丙泊酚脂肪乳的体外释放进行0.5、1.5、2.5、4.5、6.5、24、28h时，分别用99ml 60％乙醇置换广口瓶中透析袋外的99ml溶液，然后测定所述取出释放介质中的丙泊酚浓度，计算丙泊酚长链脂肪乳体外释放度。
按照实施例2的测定方法，进行三批次丙泊酚长链脂肪乳体外释放度的测定，其结果如表2所示。
实施例2的丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定结果如表2所示。
丙泊酚脂肪乳释放量的计算公式同实施例1。
表2实施例2的丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定结果
Figure GDA0002354645110000051
由表2可知，在相同的时间点，三个批次丙泊酚脂肪乳释放度的释放度无明显差异，说明丙泊酚脂肪乳释放度一致性较好；丙泊酚长链脂肪乳在60％乙醇中释放6.5h时，丙泊酚长链脂肪乳释放度超过80％，24小时基本释放完全。
实施例3
本实施例为本发明的一种丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定方法，包括如下步骤：
(1)取10cm截留分子量为3000Dalton的透析袋，浸泡于纯化水中，于沸水加热12min之后依次用纯化水，体积浓度为40％的乙醇冲洗三次，活化备用；将1ml以中链油和大豆油作为油相的丙泊酚中/长链脂肪乳(含0.5％丙泊酚)加入处理后的透析袋中，由另一端加入，夹紧透析袋，置于150ml广口瓶中，然后往广口瓶中加入99ml 40％乙醇，再用橡胶塞封口，以震荡仪50rpm的速率进行搅拌，并37℃水浴加热，即可进行丙泊酚脂肪乳的体外释放度；
(2)在步骤(1)所述的丙泊酚脂肪乳的释放进行0.33、0.67、1、4.5、2、3、4、8、24、26、28h时，分别将透析袋外99ml释放介质全部取出，并补充加入空白的等体积40％乙醇，然后测定所述取出释放介质中的丙泊酚浓度，计算丙泊酚长链脂肪乳体外释放度。
按照实施例3的测定方法，进行三批丙泊酚中/长链脂肪乳体外释放度的测定，其结果如表3所示。
丙泊酚中/长链脂肪乳释放量的计算公式同实施例1。
表3实施例3的丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定结果
Figure GDA0002354645110000061
由表3可知，以中链油和大豆油作为油相的丙泊酚中/长链脂肪乳(0.5％丙泊酚)采用透析袋法在40％乙醇中进行释放，其丙泊酚中/长链脂肪乳释放量与实施例1不含有油相的丙泊酚中/长链脂肪乳释放量在相同的时间点相比，本实施例3的释放量较实例1偏低，24小时释放可以超过60％，由此说明，本实施例3的丙泊酚中/长链脂肪乳体外释放度较实施例1偏慢。在相同的时间点，三个批次丙泊酚脂肪乳释放度的释放度无明显差异，说明丙泊酚脂肪乳释放度一致性较好
实施例4
本实施例为本发明的一种丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定方法，包括如下步骤：
(1)：取10cm截留分子量为30000Dalton的透析袋，浸泡于纯化水中，于沸水加热10min之后用依次用纯化水、体积浓度为10％的乙醇冲洗三次，活化备用；将1ml丙泊酚中/长链脂肪乳(含1％丙泊酚)加入预处理后的透析袋中，由另一端加入，夹紧透析袋，置于150ml广口瓶中，然后往广口瓶中加入99ml 10％乙醇，再用橡胶塞封口，以震荡仪20rpm的速率进行搅拌，并37℃水浴加热，即可进行丙泊酚脂肪乳的体外释放；
(2)分别在步骤(1)所述的丙泊酚脂肪乳的体外释放进行0.5、1、2、3、4、6、8、24h时，将透析袋外99ml释放介质全部取出，并补充加入空白的等体积10％乙醇，然后测定所述取出释放介质中的丙泊酚浓度，计算丙泊酚脂肪乳体外释放度。
实施例4的丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定结果如表4所示。
丙泊酚中/长链脂肪乳释放量的计算公式同实施例1。
表4实施例4的丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定结果
Figure GDA0002354645110000071
由表4可知，10％乙醇为释放介质时，丙泊酚中/长链脂肪乳的释放速度较为缓慢，24小时释放不超过30％。
实施例5
本实施例为本发明的一种丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定方法，包括如下步骤：
(1)取10cm截留分子量为8000Dalton的透析袋，浸泡于纯化水中，于沸水加热10min之后依次用纯化水、体积浓度为50％的乙醇冲洗三次，活化备用；将2ml丙泊酚长链脂肪乳(1％丙泊酚)加入预处理后的透析袋中，将透析袋置于溶出仪(RC806D)溶出小篮中，加入1000ml 50％乙醇，篮法100rpm，并37℃水浴加热，即可进行丙泊酚脂肪乳的体外释放
(2)分别在步骤(1)所述的丙泊酚脂肪乳的体外释放进行0.5、1、2、3、4、6、8、24h时，取5ml释放介质，并补充加入空白的等体积释放介质，然后测定所述取出释放介质中的丙泊酚浓度，计算丙泊酚脂肪乳体外释放度。
实施例5的丙泊酚脂肪乳体释放度的测定结果如表5所示。
丙泊酚长链脂肪乳释放量的计算公式同实施例1。
表5实施例5的丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定结果
Figure GDA0002354645110000081
由表5可知，丙泊酚长链脂肪乳采用截留分子量8000Dalton的透析袋，在50％乙醇的溶出介质中8小时的时候可以释放量达到72.32％，24小时释放基本完全释放。
实施例6
本实施例为本发明的一种丙泊酚脂肪乳体释放度的测定方法，包括如下步骤：
(1)取10cm截留分子量为15000Dalton的透析袋，浸泡于纯化水中，于沸水加热10min之后依次用纯化水、体积浓度为50％的乙醇冲洗三次，活化备用将1ml丙泊酚长链脂肪乳(含1％丙泊酚)加入预处理后的透析袋中，将透析袋置于250ml烧杯中，然后往烧杯中加入200ml 50％乙醇，再用橡胶塞封口，以震荡仪1000rpm的速率进行搅拌，并37℃水浴加热，即可进行丙泊酚脂肪乳的体外释放；
(2)在步骤(1)所述的丙泊酚脂肪乳的体外释放进行0.5、1、2、3、4、6、8、24h时，将透析袋外5ml 50％乙醇全部取出，并补充加入空白的等体积50％乙醇，然后测定所述取出释放介质中的丙泊酚浓度，计算丙泊酚脂肪乳体外释放度。
实施例6的丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定结果如表6所示。
丙泊酚释放量的计算公式同实施例1。
表6实施例6的丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定结果
Figure GDA0002354645110000091
由表6可知，丙泊酚长链脂肪乳采用截留分子量15000Dalton的透析袋在50％乙醇的释放介质的条件下，震荡仪测定的溶出结果基本和实例5中溶出仪测定结果大体相当。
实施例7
本实施例为本发明的一种丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定方法，包括如下步骤：
(1)取10cm截留分子量为15000Dalton的透析袋，浸泡于纯化水中，于沸水加热10min之后用依次用纯化水、体积浓度为50％乙醇冲洗三次，活化备用；将批号D035-X180707-01-3、D035-X180707-02-3、D035-X180707-03-3、D035-X180707-04-3的样品(4个批号样品依次分别含5％，10％，15％，20％的大豆油)分别加入预处理后的不同透析袋中，由另一端加入，夹紧透析袋，置于150ml广口瓶中，然后往广口瓶中加入99ml 50％乙醇，再用橡胶塞封口，以震荡仪50rpm的速率进行搅拌，并37℃水浴加热，即可进行丙泊酚脂肪乳的体外释放度；
(2)在步骤(1)所述的丙泊酚脂肪乳的体外释放进行0.5、1、2、3、4、6、8、24、28h，将透析袋外99ml释放介质全部取出，并补充加入空白的等体积50％乙醇，然后测定所述取出释放介质中的丙泊酚浓度，计算丙泊酚脂肪乳体外释放度。
实施例7的丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定结果如表7和图1所示。
丙泊酚脂肪乳释放量的计算公式同实施例1。
表7实施例7的丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定结果
Figure GDA0002354645110000101
由表7和图1可知，丙泊酚长链脂肪乳制剂的释放随着处方中大豆油的增加而降低，显示采用透析袋法进行溶出测定具有良好的处方区分性，可以用于处方筛选以及产品的质量控制。
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

Claims (8)

1.一种丙泊酚脂肪乳体外释放度的测定方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将丙泊酚脂肪乳和释放介质加入透析袋中，然后将透析袋放入90ml-1000ml释放介质中，用搅拌释放仪器搅拌，水浴加热，进行丙泊酚脂肪乳的体外释放；
(2)在不同时间点取出释放介质，并补充等量空白释放介质，测定所述取出释放介质中的丙泊酚浓度，计算丙泊酚脂肪乳体外释放度；
所述透析袋经纯水浸泡，并加热沸腾10-15min之后用纯化水冲洗三次，再用溶出介质冲洗三次；所述透析袋的截留分子量为3000-30000Dalton；
所述释放介质为体积浓度10％-60％乙醇；
所述丙泊酚脂肪乳包括丙泊酚长链脂肪乳或丙泊酚中/长链脂肪乳。
2.如权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述的透析袋截留分子量为8000-14000Dalton。
3.如权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述溶出介质为体积浓度10％-60％乙醇。
4.如权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤(1)中，加入所述透析袋的所述丙泊酚脂肪乳体积为0.5-2ml。
5.如权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述的释放介质为体积浓度40％-50％的乙醇。
6.如权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤(1)中，所述丙泊酚脂肪乳中丙泊酚的重量百分含量为0.5-2％。
7.如权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤(1)中，所述搅拌释放仪器包括震荡仪、磁力搅拌仪和溶出仪，所述搅拌的速率为50-200rpm。
8.如权利要求7所述的测定方法，其特征在于，所述搅拌的速率为100-150rpm。
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