CN110839455B - 一种防治水稻稻曲病的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种防治水稻稻曲病的方法，分别在水稻分蘖期和破口期喷施生物药剂两次，所述的生物药剂由沼泽红假单胞菌LY‑6菌剂和井冈霉素组成；其中沼泽红假单胞菌LY‑6，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2014525，该方法可以有效防治水稻稻曲病的发生。

Description

一种防治水稻稻曲病的方法
技术领域
本发明属于农业病害防治领域，具体涉及一种防治水稻稻曲病的方法。
背景技术
我国是农业大国，水稻更是我国重要的粮食来源，因此水稻的质量和病害防治一直以来都是人们所关注的重点问题。稻曲病是当前阶段影响水稻质量的重要病害之一。当稻曲病病发后，不仅会给水稻的产量和质量造成影响，更重要的是会使稻谷上出现病原体，给水稻造成品质影响。
稻曲病是由稻曲病菌引起的一种真菌病害。病菌以菌核在地面越冬，也可以厚垣孢子在被害的谷粒内及健谷颖壳上越冬。水稻主要在抽穗扬花期感染稻曲病，病菌为害穗上部分谷粒。初见颖谷合缝处露出淡黄绿色块状物，后逐渐膨大；最后包裹全部颖壳。对水稻的稻曲病防治，应从多方面来进行分析，并根据实际情况来进行针对性的防治，从而减少病害的出现。
申请人前期研究发现(专利公开号CN108179129 A)沼泽红假单胞菌LY-6菌剂中含有外泌蛋白和代谢产物，可有效防治稻曲病；具有环境友好、对人畜无毒、对作物无药害、施用简单方便等特点。但是单独施用药效较低。
化学药剂防治水稻稻曲病，虽然可以短时间内有效抑制稻曲病的发生，但是长期使用容易使得病原菌对药剂产生抗性，其次化学药剂容易对环境产生影响。现阶段生物防治水稻稻曲病是研究热点，然而一般情况下，与化学药剂相比，生物药剂的防效较低，因此亟需开发一种采用高效的生物药剂防治水稻稻曲病的方法。
发明内容
本发明提供一种防治水稻稻曲病的方法，可以有效防治水稻稻曲病的发生，有效克服现有技术中的不足。
为解决现有技术中存在的问题，本发明提供的如下技术方案：
一种防治水稻稻曲病的方法，其特征在于，分别在水稻分蘖期和破口期喷施生物药剂两次，所述的生物药剂由沼泽红假单胞菌LY-6 菌剂和井冈霉素组成；其中沼泽红假单胞菌LY-6，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2014525。
本发明所述的一种防治水稻稻曲病的方法，其特征在于，沼泽红假单胞菌LY-6菌剂中菌浓度为1-9×109cfu/mL；稀释倍数为 1000-3000倍。
本发明所述的一种防治水稻稻曲病的方法，其特征在于，泽红假单胞菌LY-6菌剂中菌浓度为5×109cfu/mL。
本发明所述的一种防治水稻稻曲病的方法，其特征在于，井冈霉素为10％井冈霉素水剂，稀释倍数为1000-3000倍。
一种防治水稻稻曲病的生物药剂，由沼泽红假单胞菌LY-6菌剂和井冈霉素组成，其中泽红假单胞菌LY-6菌剂中菌浓度为5× 109cfu/mL；井冈霉素为10％井冈霉素水剂。
本申请所采用的沼泽红假单胞菌LY-6(Rhodopseudomonas palustris LY-6)，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为 CCTCC NO：M 2014525，保藏单位地址位于中国武汉大学，保藏日期为2014年10月29日，该菌株被命名为沼泽红假单胞菌 LY-6(Rhodopseudomonas palustris LY-6)。
所述沼泽红假单胞菌菌剂的制备方法参照CN108179129A的方法进行制备：
(1)活化：将沼泽红假单胞菌LY-6的菌株按双层平板培养法培养至红色单菌落出现；(2)种子培养：将步骤(1)培养的红色单菌落接入至接入至血清瓶中，用光合细菌液体培养基培养至对数生长期得到菌液；(3)生产培养：将步骤(2)种子培养后得到的菌液接种到生产瓶中，用光合细菌生产培养基进行生产培养至对数生长期，即为生防菌剂。
步骤(2)中，种子培养在温度为30℃～32℃、光照条件为 2500Lx～4000Lx、pH为7.0条件下进行。步骤(3)中，生产培养在温度为30℃～32℃、光照条件为2500Lx～4000Lx、pH＝7.0条件下进行。步骤(3)中所述菌液的接种量为所述光合细菌菌株生产培养基总体积的5％～10％。
沼泽红假单胞菌菌剂中所述菌浓度为1-9×109cfu/mL。优选的所述菌浓度为5×109cfu/mL
一种本发明的沼泽红假单胞菌LY-6生防菌剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)活化：将沼泽红假单胞菌LY-6菌株的保存种按双层平板培养法进行培养，培养至红色单菌落出现；采用的培养基为光合细菌固体培养基，配方为：(NH4)2SO40.1wt％、MgSO40.02wt％、NaHCO30.5wt％、 K2HPO40.05wt％、NaCl 0.02wt％、酵母膏0.15wt％和琼脂1.5wt％，pH＝7.0。
(2)种子培养：将步骤(1)培养出得红色单菌落接入至120mL血清瓶中，在温度为30℃～32℃、光照条件为2500Lx～4000Lx、pH＝7.0 条件下，用光合细菌液体培养基培养至对数生长期；采用的培养基为光合细菌液体培养基，配方为：(NH4)2SO40.1wt％、MgSO40.02wt％、 NaHCO30.5wt％、K2HPO40.05wt％、NaCl 0.02wt％、酵母膏0.15wt％(均为质量分数)，pH＝7.0。
(3)生产培养：将步骤(2)种子培养后得到的菌液接种到生产瓶中，用光合细菌生产培养基(培养基成分与上述光合细菌液体培养基一致)进行生产培养，菌液的接种量为所述光合细菌菌株生产培养基总体积的5％，在温度为30℃～32℃、光照条件为2500Lx～4000Lx、 pH＝7.0条件下，培养至对数生长期，即制得生防菌剂。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明提供的防治水稻稻曲病的方法中，将沼泽红假单胞菌剂和井冈霉素组合施用，对水稻稻曲病产生明显的协同增效作用，可以有效防治水稻稻曲病的发生。
本发明提供的防治水稻稻曲病的方法属于生物防治方法，在有效防治稻曲病的同时，不会对环境产生影响。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的具体实施方式进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。
田间药效试验
试验对象：水稻稻曲病
试验方法：试验药剂、空白对照的小区处理采用随机区组排列，每小区之间设置小埂，以防药剂间相互干扰。小区面积25m2，重复四次。在水稻分蘖期和破口期喷施于水稻，共施药两次。
调查方法：在水稻黄熟期稻曲病病情稳定时调查药效。每小区按照对角线五点取样，每点调查相连的10丛水稻，每小区共调查50丛，记录总穗数、记录每穗上病粒数，按照以下病穗分级标准进行统计：
0级：单穗健康，无稻曲球病粒；1级：单穗稻曲球病粒数1个； 3级：单穗稻曲球病粒数2个；5级：单穗稻曲球病粒数3-5个；7 级：单穗稻曲球病粒数6-9个；9级：单穗稻曲球病粒数10个及以上；
Figure RE-GDA0002346275710000061
计算方法：
Figure RE-GDA0002346275710000062
表1：不同处理对水稻稻曲病药效试验
Figure RE-GDA0002346275710000063
由表1可知，在水稻分蘖期和破口期单独使用沼泽红假单胞菌剂(5×109cfu/mL)、以及10％井冈霉素水剂，稀释1500倍，对水稻稻曲病的防治效果较差，防治效果低于55％左右。将两种生物药剂混合施用，稀释1500倍，对水稻稻曲病的防效将到达94.38％；即便稀释至3000倍，对水稻稻曲病的防效也在75％以上。由上述数据通过 colby法可以计算出，沼泽红假单胞菌剂和井冈霉素组合施用，对水稻稻曲病产生明显的协同增效作用，可以有效防治水稻稻曲病的发生。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，对于本领域技术人员来说，在不脱离本发明原料的前提下，可以做适当的改进，这些改进也在本发明的保护范围之内。

Claims (2)

1.一种防治水稻稻曲病的方法，其特征在于，分别在水稻分蘖期和破口期喷施生物药剂两次，所述的生物药剂由沼泽红假单胞菌LY-6菌剂和井冈霉素组成；其中沼泽红假单胞菌LY-6，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC N0：M 2014525;
沼泽红假单胞菌LY-6菌剂中菌浓度为1-9×109cfu/mL；稀释倍数为1000-3000倍; 井冈霉素为10％井冈霉素水剂，稀释倍数为1000-3000倍。
2.根据权利要求1所述的一种防治水稻稻曲病的方法，其特征在于，沼泽红假单胞菌LY-6菌剂中菌浓度为5×109cfu/mL。
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