CN108179129A - 一种沼泽红假单胞菌菌剂在防控稻曲病中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种沼泽红假单胞菌菌剂在防控稻曲病中的应用，病害对象为水稻稻曲病，所述沼泽红假单胞菌菌剂在防控稻曲病中的应用方法为：将所述沼泽红假单胞菌菌剂喷施于分蘖期和破口期的水稻上，与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：沼泽红假单胞菌菌剂中含有外泌蛋白和代谢产物，可有效防治稻曲病；具有环境友好、对人畜无毒、对作物无药害、施用简单方便等特点。

Description

一种沼泽红假单胞菌菌剂在防控稻曲病中的应用
技术领域
本发明涉及生物农药技术领域，尤其涉及一种新型微生物菌剂(沼泽红假单胞菌剂)在防控稻曲病中的应用。
背景技术
近年来，随着高产杂交稻特别是超级稻的推广种植以及水肥水平的提高，稻曲病已成为我国水稻主产区最为严重的病害之一。稻曲病是由稻曲病菌(Villosiclavavirens)侵染水稻颖花造成的。稻曲病不但造成水稻严重减产，更为重要的是稻曲球中含有高浓度的毒素，可以抑制动物细胞微管蛋白的组装和细胞的有丝分裂，对人畜有剧毒。对于稻曲病的防治，目前还是以化学防治为主，虽然取得了一定效果，但也带来药物残留、环境污染、病原菌产生抗药性等突出问题。因此，如何减少农药用量以及绿色综合防控稻曲病仍然是当前我国水稻生产上面临的重要问题。
生物防治以其无毒、无害、无污染、不易产生抗药性和高效等优点，在植物病虫害防治中越来越受到人们的重视。光合细菌(Photosynthetic Bacteria，PSB)是能在厌氧条件下进行不放氧气的光合作用的一类细菌的总称，是地球上最早出现的具有原始光能合成体系的原核生物。其种类繁多、分布广泛，普遍存在于海洋、江河、湖泊、水田、活性污泥和土壤中，已知的光合细菌共有绿硫细菌科(Chlorobiaceae)、红硫细菌科(Chromatiaceae)、红螺菌科(Rhodospirillaceae)3个科。光合细菌复杂的代谢功能和独特的生理生态特性使其在农畜业、饲料、环保、食品加工、生物能源和医药保健等领域得到广泛应用。在农业生产方面，运用光合细菌进行种子种苗的处理、作物品质改良、土壤修复与增肥、病虫害防治、废水处理以及保障农产品安全是目前的研究热点。光合细菌本身无毒，具有固氮、固碳、促进硫循环作用，且富含B族维生素、泛酸、叶酸、类胡萝卜素、辅酶Q、脯氨酸、尿嘧啶、胞嘧啶等生理活性物质对提高土壤肥力、刺激植物细胞活性、促进根系发育、提高作物光合效率和生殖生长能力具有很强的促进功能。光合细菌在农业领域的应用研究得到深入展开，并为农产品的优质、安全、卫生提供了有力保证。
目前在稻曲病的生物防治研究方面已经取得了一定的进展。在生物农药中，井冈霉素和枯草芽孢杆菌对稻曲病的防治都有一定的效果。但是，光合细菌-沼泽红假单胞菌菌剂在稻曲病的防控上还未曾见报道。
发明内容
针对现有技术存在的不足，本发明目的是提供一种沼泽红假单胞菌菌剂在防控稻曲病中的应用，以解决上述背景技术中提出的问题。
为了实现上述目的，本发明是通过如下的技术方案来实现：一种沼泽红假单胞菌菌剂在防控稻曲病中的应用，所述沼泽红假单胞菌生防菌剂由沼泽红假单胞菌LY-6培养得到。
进一步地，病害对象为水稻稻曲病，所述沼泽红假单胞菌菌剂在防控稻曲病中的应用方法为：将所述沼泽红假单胞菌菌剂喷施于分蘖期和破口期的水稻上。
进一步地，所述沼泽红假单胞菌菌剂的菌浓度为5×109cfu/mL，喷施量为每亩120ml，兑水稀释500倍，于分蘖期和破口期各喷施一次。
本发明的有益效果：本发明的一种沼泽红假单胞菌菌剂在防控稻曲病中的应用，沼泽红假单胞菌菌剂中含有外泌蛋白和代谢产物，可有效防治稻曲病；具有环境友好、对人畜无毒、对作物无药害、施用简单方便等特点。
附图说明
通过阅读参照以下附图对非限制性实施例所作的详细描述，本发明的其它特征、目的和优点将会变得更明显：
图1为本发明实例中沼泽红假单胞菌菌剂在大田对水稻稻曲病的防治效果对比图；
具体实施方式
为使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。
本发明提供一种技术方案：一种沼泽红假单胞菌菌剂在防控稻曲病中的应用，所述沼泽红假单胞菌生防菌剂由沼泽红假单胞菌LY-6培养得到。
病害对象为水稻稻曲病，所述沼泽红假单胞菌菌剂在防控稻曲病中的应用方法为：将所述沼泽红假单胞菌菌剂喷施于分蘖期和破口期的水稻上。
沼泽红假单胞菌菌剂的菌浓度为5×109cfu/mL，喷施量为每亩120ml，兑水稀释500倍，于分蘖期和破口期各喷施一次。
作为本发明的一个实施例：所述沼泽红假单胞菌生防菌剂由沼泽红假单胞菌LY-6(Rhodopseudomonas palustris LY-6)培养得到。本申请所采用的沼泽红假单胞菌LY-6(Rhodopseudomonas palustris LY-6)，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO∶M 2014525，保藏单位地址位于中国武汉大学，保藏日期为2014年11月5日，该菌株被命名为沼泽红假单胞菌LY-6(Rhodopseudomonas palustris LY-6)。
所述沼泽红假单胞菌菌株LY-6，具有以下主要特征：革兰氏阴性，经生理生化鉴定和分子生物学鉴定为沼泽红假单胞菌，主要生物学特征有：双层固体平板培养基上培养4d～8d，形成红色的圆形菌落，菌落边缘整齐光滑、菌落直径0.2mm～0.60mm；液体培养基中培养7d呈深红色；在厌氧和微氧条件下生长良好；生理化特性为V-P反应与甲基红反应阴性、H2S反应、明胶液化、脲酶试验、吲哚试验均阳性，最适生长温度30℃～32℃，pH＝7。
上述的应用，优选的，所述沼泽红假单胞菌菌剂的制备方法具体包括以下步骤：
(1)活化：将沼泽红假单胞菌LY-6的菌株按双层平板培养法培养至红色单菌落出现；
(2)种子培养：将步骤(1)培养的红色单菌落接入至接入至血清瓶中，用光合细菌液体培养基培养至对数生长期得到菌液；
(3)生产培养：将步骤(2)种子培养后得到的菌液接种到生产瓶中，用光合细菌生产培养基进行生产培养至对数生长期，即为生防菌剂。
步骤(2)中，种子培养在温度为30℃～32℃、光照条件为2500Lx～4000Lx、pH为7.0条件下进行。
步骤(3)中，生产培养在温度为30℃～32℃、光照条件为2500Lx～4000Lx、pH＝7.0条件下进行。
步骤(3)中所述菌液的接种量为所述光合细菌菌株生产培养基总体积的5％～10％。
沼泽红假单胞菌菌剂在防控水稻稻曲病中的应用方法为：将所述菌浓度为5×109cfu/mL的沼泽红假单胞菌菌剂，每亩120mL，兑水60L，在水稻分蘖期和破口期喷施于水稻上。
作为本发明的一个实施例：一种本发明的沼泽红假单胞菌LY-6生防菌剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)活化：将沼泽红假单胞菌LY-6菌株的保存种按双层平板培养法进行培养，培养至红色单菌落出现；采用的培养基为光合细菌固体培养基，配方为：(NH4)2SO40.1wt％、MgSO40.02wt％、NaHCO30.5wt％、K2HPO40.05wt％、NaCl 0.02wt％、酵母膏0.15wt％和琼脂1.5wt％，pH＝7.0。
(2)种子培养：将步骤(1)培养出得红色单菌落接入至120mL血清瓶中，在温度为30℃～32℃、光照条件为2500Lx～4000Lx、pH＝7.0条件下，用光合细菌液体培养基培养至对数生长期；采用的培养基为光合细菌液体培养基，配方为：(NH4)2SO40.1wt％、MgSO40.02wt％、NaHCO30.5wt％、K2HPO40.05wt％、NaCl 0.02wt％、酵母膏0.15wt％(均为质量分数)，pH＝7.0。
(3)生产培养：将步骤(2)种子培养后得到的菌液接种到生产瓶中，用光合细菌生产培养基(培养基成分与上述光合细菌液体培养基一致)进行生产培养，菌液的接种量为所述光合细菌菌株生产培养基总体积的5％，在温度为30℃～32℃、光照条件为2500Lx～4000Lx、pH＝7.0条件下，培养至对数生长期，即制得生防菌剂。
作为本发明的一个实施例：沼泽红假单胞菌剂田间对稻曲病的防控
试验地设在长沙县春华镇，分别将实施例1制得的生防菌剂(浓度5×109cfu/mL，每亩120mL，兑水稀释500倍)、对照药剂井冈霉素(20％水溶粉剂，30g/亩)、春雷霉素(6％可溶性粉剂，30g/亩)、化学农药(爱苗，20mL/亩)在水稻分蘖期和破口期喷施于水稻上，每个处理6亩，设3个重复，共施用2次。在水稻成熟期按5点法取样计算水稻穗粒病情指数，并计算各自的防治效果。
图1为实施例2的生防菌剂以及对照药剂井冈霉素、春雷霉素和化学农药对水稻稻曲病的防治效果对比图。从图1中可知：与空白对照相比，施用沼泽红假单胞菌菌剂、井冈霉素、春雷霉素以及农药各自的防治效果为83.68％、76.43％、86.46％和82.65％，统计分析发现，喷施沼泽红假单胞菌菌剂与井冈霉素、春雷霉素以及化学农药的防治效果没有显著性差异(P<0.01)，表明光合细菌沼泽红假单胞菌菌剂做为一种新型微生物菌剂，对稻曲病有非常好的防治效果。
以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点,对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (3)

1.一种沼泽红假单胞菌菌剂在防控稻曲病中的应用，其特征在于：所述沼泽红假单胞菌生防菌剂由沼泽红假单胞菌LY-6培养得到。
2.根据权利要求1所述的一种沼泽红假单胞菌菌剂在防控稻曲病中的应用，其特征在于：病害对象为水稻稻曲病，所述沼泽红假单胞菌菌剂在防控稻曲病中的应用方法为：将所述沼泽红假单胞菌菌剂喷施于分蘖期和破口期的水稻上。
3.根据权利要求1或2所述的一种沼泽红假单胞菌菌剂在防控稻曲病中的应用，其特征在于：所述沼泽红假单胞菌菌剂的菌浓度为5×109cfu/mL，喷施量为每亩120ml，兑水稀释500倍，于分蘖期和破口期各喷施一次。
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