CN110833566A - 基于矿化仙台病毒的肿瘤联合治疗纳米制剂的合成方法 - Google Patents

基于矿化仙台病毒的肿瘤联合治疗纳米制剂的合成方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110833566A
CN110833566A CN201911050470.8A CN201911050470A CN110833566A CN 110833566 A CN110833566 A CN 110833566A CN 201911050470 A CN201911050470 A CN 201911050470A CN 110833566 A CN110833566 A CN 110833566A
Authority
CN
China
Prior art keywords
icg
tumor
sev
cahpo
sendai virus
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201911050470.8A
Other languages
English (en)
Inventor
王涛
徐亚楠
郑斌
王志云
黄梦倩
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Tianjin University
Original Assignee
Tianjin University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Tianjin University filed Critical Tianjin University
Priority to CN201911050470.8A priority Critical patent/CN110833566A/zh
Publication of CN110833566A publication Critical patent/CN110833566A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
    • A61K35/768—Oncolytic viruses not provided for in groups A61K35/761 - A61K35/766
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
    • A61K41/0052—Thermotherapy; Hyperthermia; Magnetic induction; Induction heating therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/5115—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开一种基于矿化仙台病毒的肿瘤联合治疗纳米制剂的合成方法，通过CaHPO4矿化仙台病毒和ICG((ICG+SEV)@CaHPO4)的策略仿生模拟合成光热肿瘤联合治疗纳米制剂的方法。具体步骤包括：1)吲哚菁绿水溶液的制备；2)一锅法合成(ICG+SEV)@CaHPO4纳米颗粒。仙台病毒(SEV)可全身性激活机体免疫功能，给肿瘤造成全方位的杀伤和清除。ICG在近红外激光照射下具有较高的光热转换效率，可以高效的引导肿瘤光热治疗。钙离子信号与肿瘤细胞凋亡形成的通路中，存在相互促进、互为因果的促凋亡蛋白酶，加速了肿瘤细胞凋亡。这种集合病毒免疫治疗和光热治疗的复合纳米颗粒可提高肿瘤治疗的效果。

Description

基于矿化仙台病毒的肿瘤联合治疗纳米制剂的合成方法
技术领域
本发明属于纳米制剂制备领域，具体涉及一种基于矿化仙台病毒的肿瘤联合治疗纳米制剂的合成方法，CaHPO4矿化仙台病毒和ICG的策略仿生模拟合成光热肿瘤联合治疗纳米制剂的方法。
背景技术
目前，肿瘤是世界上对人类威胁最大的疾病之一。免疫治疗通过激活人体免疫系统，依靠自身免疫机能杀灭癌细胞和肿瘤组织，从而达到治疗癌症的作用。因此，免疫治疗是治疗肿瘤最有效的方法之一。鉴于灭活的仙台病毒(SEV)可以作为异物在体内可以激发全身免疫系统产生细胞因子风暴(如干扰素、肿瘤坏死因子和各种白细胞介素等)，并使在抗肿瘤治疗过程中具有重要作用的树突状细胞(DC细胞，提呈肿瘤抗原)，巨噬细胞(细胞，吞噬肿瘤细胞) 和自然杀伤细胞(NK细胞，杀伤肿瘤细胞)等被大量激活，随后大幅提高T细胞的增值效率。这种基于仙台病毒的复合纳米制剂可全身性激活机体免疫功能，给肿瘤造成全方位的杀伤和清除，相对于传统肿瘤治疗方法，该策略使肿瘤治疗更加高效。
光热治疗(photothermal therapy，PTT)是一种新型肿瘤治疗方法，在外部近红外光的照射下，肿瘤部位的光热剂吸收近红外光并将其转化为热，使肿瘤部位温度迅速升高到48℃以上，几分钟内可杀死癌细胞。光热治疗过程产生的副作用较小，全身系统毒性低，不会对正常组织造成损伤，具有很大的临床应用潜力。如果将光热治疗与肿瘤免疫治疗相结合，将极大地增强肿瘤治疗的效果，使肿瘤治疗更加彻底。吲哚青绿(ICG)作为以重良好的光热转换剂，光能与热能的转换效率高，同时对人体的副作用小，最重要的是可实现实时成像，引导光热治疗的过程，因此具有广泛的应用前景。
钙离子能够有效的诱导细胞凋亡。在杂交瘤和腹膜渗出物的淋巴细胞中证实，Fas介导的细胞溶解属Ca2+依赖性的，Fas抗原可激活细胞中的蛋白酪氨酸激酶，使钙库内Ca2+释放以及Ca2+进入细胞浆，引起核和细胞的损害，Fas触发的凋亡机制是通过升高Ca2+浓度来实现的。在钙离子信号与肿瘤细胞凋亡形成的三条通路中，存在相互促进、互为因果的促凋亡蛋白酶，加速了肿瘤细胞凋亡。
仿生合成作为近几年兴起的一种制备纳米颗粒的有效策略，该方法有以下几大优点：1) 反应条件温和，全程无有机溶剂参与，可以称为绿色合成。2)产物性质可以精准调控。3)生物相性好。4)原料来源广泛，成本相对较低，重复性好。解决了传统合成方法过程过于繁琐，环境要求苛刻，而且具有一定的污染性的问题。
发明内容
本发明为克服现有技术的不足，提供一种通过CaHPO4矿化仙台病毒和ICG((ICG+SEV) @CaHPO4)的策略仿生模拟合成光热肿瘤联合治疗纳米制剂的方法。
本发明的技术方案是基于矿化仙台病毒的肿瘤联合治疗纳米制剂的合成方法，具体是 CaHPO4矿化仙台病毒和ICG((ICG+SEV)@CaHPO4)的肿瘤联合治疗纳米制剂的合成方法，具体步骤如下：
1)称取吲哚菁绿(ICG)粉末，加入超纯水后超声溶解，得到浓度为5-10mg/ml的ICG水溶液；
2)利用一锅法合成(ICG+SEV)@CaHPO4纳米颗粒。
所述步骤2)具体如下：
(1)将盛有1-500ml SEV溶液的单口瓶置于磁力搅拌器上，随后在搅拌条件下，滴加上述配置的ICG 25ul，滴加完毕继续搅拌；
(2)配置好浓度为50-200mM的CaCl2溶液，逐滴加入上述反应体系中，滴加完毕继续搅拌；
(3)配置浓度为50-200mM的Na2HPO4溶液，逐滴加入到反应体系中，滴加完毕继续搅拌；
(4)搅拌完成后离心，后用双蒸水清洗一遍，继续离心，用双蒸水重悬，最终得到绿色的 (ICG+SEV)@CaHPO4纳米颗粒。
本发明的优势在于：
1)仙台病毒SEV可以激活细胞免疫用于抗肿瘤治疗。
2)ICG在近红外激光照射下光热转换效率较高，进行肿瘤的光热治疗，实现可视化。
3)CaHPO4可以有效诱导细胞凋亡。
4)CaHPO4矿化仙台病毒和ICG((ICG+SEV)@CaHPO4)的肿瘤联合治疗纳米制剂将肿瘤的光热治疗和免疫治疗联合，作用效果显著。
附图说明
图1：(ICG+SEV)@CaHPO4纳米颗粒刺激干扰素产生；
图2：(ICG+SEV)@CaHPO4纳米颗粒的光热转化性能。
具体实施方式
实施例1：
1)准确称取5mg的吲哚菁绿(ICG)粉末，加入1mL超纯水后超声溶解，得到浓度为5mg/ml 的ICG水溶液。
2)合成(ICG+SEV)@CaHPO4纳米颗粒的方法如下：
(1)将盛有500ml SEV溶液的单口瓶置于磁力搅拌器上，随后在搅拌条件下，滴加上述配置的 ICG 25ul，滴加完毕继续搅拌；
(2)配置好浓度为50mM的CaCl2溶液，取125ul逐滴加入上述反应体系中，滴加完毕继续搅拌15min；
(3)配置浓度为50mM的Na2HPO4溶液，并取25ul逐滴加入到反应体系中，滴加完毕继续搅拌10min；
(4)搅拌完成后10000rpm离心3min，后用1ml双蒸水清洗一遍，继续离心3min，用1ml双蒸水重悬，最终得到绿色的(ICG+SEV)@CaHPO4纳米颗粒。
实施例2：
1)准确称取10mg的吲哚菁绿(ICG)粉末，加入1mL超纯水后超声溶解，得到浓度为10mg/ml 的ICG水溶液。
2)合成(ICG+SEV)@CaHPO4纳米颗粒的方法如下：
(1)将盛有1ml SEV溶液的单口瓶置于磁力搅拌器上，随后在搅拌条件下，滴加上述配置的ICG 25ul，滴加完毕继续搅拌；
(2)配置好浓度为100mM的CaCl2溶液，取125ul逐滴加入上述反应体系中，滴加完毕继续搅拌15min；
(3)配置浓度为100mM的Na2HPO4溶液，并取25ul逐滴加入到反应体系中，滴加完毕继续搅拌10min；
(4)搅拌完成后10000rpm离心3min，后用1ml双蒸水清洗一遍，继续离心3min，用1ml双蒸水重悬，最终得到绿色的(ICG+SEV)@CaHPO4纳米颗粒。
实施例3：
1)准确称取20mg的吲哚菁绿(ICG)粉末，加入1mL超纯水后超声溶解，得到浓度为20mg/ml 的ICG水溶液。
2)合成(ICG+SEV)@CaHPO4纳米颗粒的方法如下：
(1)将盛有2ml SEV溶液的单口瓶置于磁力搅拌器上，随后在搅拌条件下，滴加上述配置的ICG 25ul，滴加完毕继续搅拌；
(2)配置好浓度为200mM的CaCl2溶液，取125ul逐滴加入上述反应体系中，滴加完毕继续搅拌15min；
(3)配置浓度为200mM的Na2HPO4溶液，并取25ul逐滴加入到反应体系中，滴加完毕继续搅拌10min；
(4)搅拌完成后10000rpm离心3min，后用1ml双蒸水清洗一遍，继续离心3min，用1ml双蒸水重悬，最终得到绿色的(ICG+SEV)@CaHPO4纳米颗粒。
实施例4
ELASA检测刺激干扰素产生
取对数期生长的树突细胞DC，调整细胞悬液浓度，在6孔板上铺板。置37℃、5％CO2培养箱使细胞贴壁，培养24小时。
分别加入含(ICG+SEV)@CaHPO4的新鲜培养基，继续培养48h。
收集培养基上清液检测细胞因子，离心10min去除上清沉淀。
先用稀释好的抗体孵育细胞1.5h，洗板后继续用辣根过氧化物酶孵育30min。
洗板后添加显色液进行显色，显色结束加入终止液，在酶标仪450nm检测吸光度。
实施例5
取200uL的(ICG+SEV)@CaHPO4纳米材料溶液，将温度计的探头插入到液体中。
打开808发射光照射纳米材料溶液，每隔半分钟记录一次温度，共记录10min。观察材料的最高温度及温度变化曲线。
图1中我们测试了包含干扰素-β(IFN-β)启动子的双报告基因分别驱动萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶的活性。结果表明，SEV在被CaHPO4包被到纳米粒子后仍能强烈激活干扰素的表达。
图2具有相同ICG浓度的纯ICG溶液和(SEV+ICG)@CaHPO4溶液在相同照射条件下表现出相似的荧光强度，表明(SEV+ICG)@CaHPO4纳米复合物保留了ICG的光热效应，具有良好的光热性能。

Claims (2)

1.基于矿化仙台病毒的肿瘤联合治疗纳米制剂的合成方法，其特征是，步骤如下：
1)称取吲哚菁绿(ICG)粉末，加入超纯水后超声溶解，得到浓度为5-20mg/ml的ICG水溶液；
2)利用一锅法合成(ICG+SEV)@CaHPO4纳米颗粒。
2.根据权利要求1所述的基于矿化仙台病毒的肿瘤联合治疗纳米制剂的合成方法，其特征是，所述步骤2)具体如下：
(1)将盛有1-500ml SEV溶液的单口瓶置于磁力搅拌器上，随后在搅拌条件下，滴加上述配置的ICG 25ul，滴加完毕继续搅拌；
(2)配置好浓度为50-200mM的CaCl2溶液，逐滴加入上述反应体系中，滴加完毕继续搅拌；
(3)配置浓度为50-200mM的Na2HPO4溶液，逐滴加入到反应体系中，滴加完毕继续搅拌；
(4)搅拌完成后离心，后用双蒸水清洗一遍，继续离心，用双蒸水重悬，最终得到绿色的(ICG+SEV)@CaHPO4纳米颗粒。
CN201911050470.8A 2019-10-31 2019-10-31 基于矿化仙台病毒的肿瘤联合治疗纳米制剂的合成方法 Pending CN110833566A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911050470.8A CN110833566A (zh) 2019-10-31 2019-10-31 基于矿化仙台病毒的肿瘤联合治疗纳米制剂的合成方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911050470.8A CN110833566A (zh) 2019-10-31 2019-10-31 基于矿化仙台病毒的肿瘤联合治疗纳米制剂的合成方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN110833566A true CN110833566A (zh) 2020-02-25

Family

ID=69575902

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201911050470.8A Pending CN110833566A (zh) 2019-10-31 2019-10-31 基于矿化仙台病毒的肿瘤联合治疗纳米制剂的合成方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110833566A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111450047A (zh) * 2020-03-25 2020-07-28 天津大学 一种mers病毒免疫凝胶制剂的合成方法
CN111450046A (zh) * 2020-03-25 2020-07-28 天津大学 一种新冠病毒免疫凝胶制剂的合成方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103160538A (zh) * 2011-12-16 2013-06-19 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 表面进行磷酸钙修饰的病毒及其制备方法
CN109620816A (zh) * 2018-11-16 2019-04-16 天津大学 一种纳米免疫制剂及其制备方法与应用
CN110179836A (zh) * 2019-05-08 2019-08-30 天津大学 CuS矿化仙台病毒的肿瘤联合治疗纳米制剂的合成方法
CN110201005A (zh) * 2019-05-08 2019-09-06 天津大学 Gd:CuS矿化仙台病毒的可视化引导肿瘤联合免疫治疗纳米制剂的合成方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103160538A (zh) * 2011-12-16 2013-06-19 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 表面进行磷酸钙修饰的病毒及其制备方法
CN109620816A (zh) * 2018-11-16 2019-04-16 天津大学 一种纳米免疫制剂及其制备方法与应用
CN110179836A (zh) * 2019-05-08 2019-08-30 天津大学 CuS矿化仙台病毒的肿瘤联合治疗纳米制剂的合成方法
CN110201005A (zh) * 2019-05-08 2019-09-06 天津大学 Gd:CuS矿化仙台病毒的可视化引导肿瘤联合免疫治疗纳米制剂的合成方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
徐亚楠: "基于超级病毒复合纳米材料的肿瘤联合免疫治疗", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111450047A (zh) * 2020-03-25 2020-07-28 天津大学 一种mers病毒免疫凝胶制剂的合成方法
CN111450046A (zh) * 2020-03-25 2020-07-28 天津大学 一种新冠病毒免疫凝胶制剂的合成方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108030919B (zh) 人血清白蛋白修饰黑磷量子点的制备及作为增敏剂的应用
Wang et al. Precise cell behaviors manipulation through light-responsive nano-regulators: recent advance and perspective
CN109620956B (zh) 一种智能巨噬细胞肿瘤靶向治疗系统及其制备方法和应用
AU2005251499A1 (en) Activatable particles, preparations and uses.
CN103305549B (zh) 具有多重氧化还原刺激响应的纳米粒子基因载体系统及其制备方法和应用
CN110833566A (zh) 基于矿化仙台病毒的肿瘤联合治疗纳米制剂的合成方法
CN107638568B (zh) 一种可生物降解的黑磷基放疗增敏剂及其制备方法与应用
CN107469079B (zh) 一种t1-mri成像引导下的光动治疗剂制备方法
CN112007170B (zh) 免疫佐剂功能化金属有机框架材料及其制备方法与应用
Ding et al. An enhanced chemotherapeutic effect facilitated by sonication of MSN
CN111615402A (zh) 用于医学或美容应用的依次暴露于低强度声波的纳米颗粒
CN113350505B (zh) 一种光敏材料和制备方法及其在肿瘤光热联合免疫治疗中的应用
Ning et al. Platelet-derived exosomes hybrid liposomes facilitate uninterrupted singlet oxygen generation to enhance breast cancer immunotherapy
Wu et al. Multi‐responsive mesoporous polydopamine composite nanorods cooperate with nano‐enzyme and photosensitiser for intensive immunotherapy of bladder cancer
Su et al. A carbon dot-doped Cu-MOF-based smart nanoplatform for enhanced immune checkpoint blockade therapy and synergistic multimodal cancer therapy
CN103725713B (zh) 聚乙二醇化壳聚糖在作为核酸载体中的应用
CN107715110A (zh) 可生物降解的黑磷基x射线光动力治疗光敏剂及其制备方法与应用
CN104353076B (zh) 低氧依赖型x光动力学纳米光敏剂及其制备方法与应用
Pan et al. Self-assembled quercetin-Fe3+ nanoparticles for synergetic near-infrared light-triggered low-temperature photothermal/glutathione-activated chemodynamic therapy
CN113289014B (zh) 超小粒径的两性离子聚肽/没食子酸/铁配位纳米粒子及其制备方法与应用
CN113274499B (zh) 一种仿生型铋纳米花及其制备方法和应用
Bing-Shuai et al. Recent progress of upconversion nanoparticles in the treatment and detection of various diseases
CN113230419A (zh) 一种基于藻蓝胆素的新型靶向纳米颗粒及其制备方法
Hu et al. Multifunctional photothermal hydrogels: Design principles, various functions, and promising biological applications
CN114010784B (zh) 多尖端金纳米棒在制备近红外二区光热治疗药物方面的应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20200225