CN110179836A - CuS矿化仙台病毒的肿瘤联合治疗纳米制剂的合成方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于肿瘤联合治疗纳米制剂的制备技术领域,具体涉及一种通过CuS矿化仙台病毒的策略仿生模拟合成肿瘤联合治疗纳米制剂的方法，其具体步骤如下：1)准确称取8.5mg的二水合氯化铜(CuCl2·2H2O)粉末，加入5mL超纯水后超声溶解，得到浓度为0.01M的CuCl2·2H2O水溶液；2)利用一锅法合成SEV@CuS纳米颗粒的方法。本发明的产品在近红外激光照射下光热转换效率较高。
Description
技术领域
本发明属于肿瘤联合治疗纳米制剂的制备技术领域,具体涉及一种通过CuS矿化仙台病毒的策略仿生模拟合成肿瘤联合治疗纳米制剂的方法。
背景技术
目前，肿瘤是世界上对人类威胁最大的疾病之一。免疫治疗通过激活人体免疫系统，依靠自身免疫机能杀灭癌细胞和肿瘤组织，从而达到治疗癌症的作用。因此，免疫治疗是治疗肿瘤最有效的方法之一。鉴于仙台病毒结构复杂，含有包膜、基质蛋白、核蛋白和ss-RNA等成分，所以其作为异物在体内可以激发全身免疫系统产生细胞因子风暴(如干扰素、肿瘤坏死因子和各种白细胞介素等)，并使在抗肿瘤治疗过程中具有重要作用的树突状细胞(DC细胞，提呈肿瘤抗原)，巨噬细胞(细胞，吞噬肿瘤细胞)和自然杀伤细胞(NK细胞，杀伤肿瘤细胞)等被大量激活，随后大幅提高T细胞的增值效率。这种基于仙台病毒的复合纳米制剂可全身性激活机体免疫功能，给肿瘤造成全方位的杀伤和清除，相对于传统肿瘤治疗方法，该策略使肿瘤治疗更加高效。
光热治疗(photothermal therapy，PTT)是一种新型肿瘤治疗方法，在外部近红外光的照射下，肿瘤部位的光热剂吸收近红外光并将其转化为热，使肿瘤部位温度迅速升高到48℃以上，几分钟内可杀死癌细胞。光热治疗过程产生的副作用较小，全身系统毒性低，不会对正常组织造成损伤，具有很大的临床应用潜力。如果将光热治疗与肿瘤免疫治疗相结合，将极大地增强肿瘤治疗的效果，使肿瘤治疗更加彻底。
仿生合成作为近几年兴起的一种制备纳米颗粒的有效策略，该方法有以下几大优点：1)反应条件温和，全程无有机溶剂参与，可以称为绿色合成。2)产物性质可以精准调控。3)生物相性好。4)原料来源广泛，成本相对较低，重复性好。解决了传统合成方法过程过于繁琐，环境要求苛刻，而且具有一定的污染性的问题。
发明内容
本发明为克服现有技术的不足,提供一种通过CuS矿化仙台病毒(SEV@CuS)的策略仿生模拟成功合成肿瘤联合治疗纳米制剂的方法。
本发明的CuS矿化仙台病毒(SEV@CuS)的肿瘤联合治疗纳米制剂的合成方法，其具体步骤如下：
1)准确称取8.5mg的二水合氯化铜(CuCl2·2H2O)粉末，加入5mL超纯水后超声溶解，得到浓度为0.01M的CuCl2·2H2O水溶液。
2)利用一锅法合成SEV@CuS纳米颗粒的方法如下：
(1)将盛有5ml浓度为0.01mg/ml仙台病毒溶液的单口瓶置于37℃的水浴磁力搅拌器上，随后在搅拌条件下，用一次性滴管滴加上述配置的CuCl2·2H2O，滴加完毕继续搅拌三分钟；
(2)配置好浓度为1M的氢氧化钠(NaOH)溶液，取0.5mL加入上述反应体系中，调节溶液的最终pH值为8-10，此时溶液变为澄清透明的深蓝色；
(3)配置浓度为242.16mg/mL的硫化钠九水合物(Na2S·9H2O)溶液，并取0.4mL加入到反应体系中，此时溶液变为棕色；
(4)在37℃水浴环境下，搅拌反应4h后，取出反应液倒入截留分子量为8000-14000的透析袋中，在超纯水中透析24h，以除去未反应的离子；
(5)将透析完后的溶液至于-80℃冰箱过夜后，转移至冷冻干燥机中进行冻干，得到浅绿色棉絮状的SEV@CuS纳米颗粒。
本发明的优势在于：1)仙台病毒可以激活细胞免疫用于抗肿瘤治疗。2)产品在近红外激光照射下光热转换效率较高。3)产品可以高效的引导后续的肿瘤光热治疗。
附图说明
图1：CuS矿化的仙台病毒纳米颗粒刺激NF-κB产生
具体实施方式
实施例1：
SEV@CuS肿瘤联合免疫治疗纳米制剂的合成方法，具体步骤如下：
(1)称取4.25mg的二水合氯化铜(CuCl2·2H2O)粉末，加入5mL超纯水后超声溶解，得到浓度为0.005M的CuCl2·2H2O水溶液。
(2)利用一锅法合成SEV@CuS纳米颗粒的方法：将盛有2.5ml浓度为0.005mg/ml仙台病毒溶液的单口瓶置于37℃的水浴磁力搅拌器上，随后在搅拌条件下，用一次性滴管滴加上述配置的CuCl2·2H2O，滴加完毕继续搅拌三分钟；
(3)配置好浓度为1M的氢氧化钠(NaOH)溶液，取0.25mL加入上述反应体系中，调节溶液的最终pH值为8，此时溶液变为澄清透明的深蓝色；配置浓度为121.08mg/mL的硫化钠九水合物(Na2S·9H2O)溶液，并取0.4mL加入到反应体系中，此时溶液变为棕色；
(4)在37℃水浴环境下，搅拌反应2h后，取出反应液倒入截留分子量为8000-14000的透析袋中，在超纯水中透析24h，以除去未反应的离子；
(5)将透析完后的溶液至于-80℃冰箱过夜后，转移至冷冻干燥机中进行冻干，得到浅绿色棉絮状的SEV@CuS纳米颗粒。
实施例2：
SEV@CuS肿瘤联合免疫治疗纳米制剂的合成方法，具体步骤如下：
(1)称取8.5mg的二水合氯化铜(CuCl2·2H2O)粉末，加入5mL超纯水后超声溶解，得到浓度为0.01M的CuCl2·2H2O水溶液。
(2)利用一锅法合成SEV@CuS纳米颗粒的方法：将盛有5ml浓度为0.01mg/ml仙台病毒溶液的单口瓶置于37℃的水浴磁力搅拌器上，随后在搅拌条件下，用一次性滴管滴加上述配置的CuCl2·2H2O，滴加完毕继续搅拌三分钟；
(3)配置好浓度为1M的氢氧化钠(NaOH)溶液，取0.5mL加入上述反应体系中，调节溶液的最终pH值为9，此时溶液变为澄清透明的深蓝色；配置浓度为242.16mg/mL的硫化钠九水合物(Na2S·9H2O)溶液，并取0.4mL加入到反应体系中，此时溶液变为棕色；
(4)在37℃水浴环境下，搅拌反应4h后，取出反应液倒入截留分子量为8000-14000的透析袋中，在超纯水中透析24h，以除去未反应的离子；
(5)将透析完后的溶液至于-80℃冰箱过夜后，转移至冷冻干燥机中进行冻干，得到浅绿色棉絮状的SEV@CuS纳米颗粒。
实施例3：
SEV@CuS肿瘤联合免疫治疗纳米制剂的合成方法，具体步骤如下：
(1)称取17mg的二水合氯化铜(CuCl2·2H2O)粉末，加入5mL超纯水后超声溶解，得到浓度为0.02M的CuCl2·2H2O水溶液。
(2)利用一锅法合成SEV@CuS纳米颗粒的方法：将盛有10ml浓度为0.02mg/ml仙台病毒溶液的单口瓶置于37℃的水浴磁力搅拌器上，随后在搅拌条件下，用一次性滴管滴加上述配置的CuCl2·2H2O，滴加完毕继续搅拌三分钟；
(3)配置好浓度为1M的氢氧化钠(NaOH)溶液，取1mL加入上述反应体系中，调节溶液的最终pH值为10，此时溶液变为澄清透明的深蓝色；配置浓度为484.32mg/mL的硫化钠九水合物(Na2S·9H2O)溶液，并取0.4mL加入到反应体系中，此时溶液变为棕色；
(4)在37℃水浴环境下，搅拌反应8h后，取出反应液倒入截留分子量为8000-14000的透析袋中，在超纯水中透析24h，以除去未反应的离子；
(5)将透析完后的溶液至于-80℃冰箱过夜后，转移至冷冻干燥机中进行冻干，得到浅绿色棉絮状的SEV@CuS纳米颗粒。
Claims (2)
1.CuS矿化仙台病毒的肿瘤联合治疗纳米制剂的合成方法，其特征是具体步骤如下：
1)准确称取8.5mg的二水合氯化铜(CuCl2·2H2O)粉末，加入5mL超纯水后超声溶解，得到浓度为0.01M的CuCl2·2H2O水溶液；
2)利用一锅法合成SEV@CuS纳米颗粒。
2.根据权利要求1所述的CuS矿化仙台病毒的肿瘤联合治疗纳米制剂的合成方法，其特征是所述步骤2)具体如下：
(1)将盛有5ml浓度为0.01mg/ml仙台病毒溶液的单口瓶置于37℃的水浴磁力搅拌器上，随后在搅拌条件下，用一次性滴管滴加上述配置的CuCl2·2H2O，滴加完毕继续搅拌三分钟；
(2)配置好浓度为1M的氢氧化钠(NaOH)溶液，取0.5mL加入上述反应体系中，调节溶液的最终pH值为8-10，此时溶液变为澄清透明的深蓝色；
(3)配置浓度为242.16mg/mL的硫化钠九水合物(Na2S·9H2O)溶液，并取0.4mL加入到反应体系中，此时溶液变为棕色；
(4)在37℃水浴环境下，搅拌反应4h后，取出反应液倒入截留分子量为8000-14000的透析袋中，在超纯水中透析24h，以除去未反应的离子；
(5)将透析完后的溶液至于-80℃冰箱过夜后，转移至冷冻干燥机中进行冻干，得到浅绿色棉絮状的SEV@CuS纳米颗粒。
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| CN110833566A (zh) * | 2019-10-31 | 2020-02-25 | 天津大学 | 基于矿化仙台病毒的肿瘤联合治疗纳米制剂的合成方法 |
| CN110917346A (zh) * | 2019-11-30 | 2020-03-27 | 天津大学 | 仿生模拟合成光热肿瘤联合治疗纳米制剂的方法 |
| CN110917346B (zh) * | 2019-11-30 | 2023-03-28 | 天津大学 | 仿生模拟合成光热肿瘤联合治疗纳米制剂的方法 |
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