CN110818774A

CN110818774A - 一种40000倍二肽类高倍甜味剂的合成方法

Info

Publication number: CN110818774A
Application number: CN201911151937.8A
Authority: CN
Inventors: 晏日安; 胡南; 邱云
Original assignee: Jinan University
Current assignee: Jinan University; University of Jinan
Priority date: 2019-11-21
Filing date: 2019-11-21
Publication date: 2020-02-21

Abstract

本发明属于食品添加剂领域，公开了一种40000倍二肽类高倍甜味剂的成方法。该甜味剂名称为N‑{N‑[3‑(3‑羟基‑4‑甲氧基苯基)丙基]‑L‑α‑天冬氨酰}‑S‑叔丁基‑L‑半胱氨酸‑1‑甲酯。本发明通过构建多步反应如酯化反应、Wittig反应、还原反应、缩合反应等制得3‑(3‑羟基‑4‑甲氧基苯基)丙醛和N‑(L‑α‑天冬氨酰)‑S‑叔丁基‑L‑半胱氨酸‑1‑甲酯；然后将两者反应合成甜度约为蔗糖的40000倍的二肽类甜味剂，解决了目前甜味剂的合成中普遍采用高压氢化还原的方法，合成工艺过程简单，操作方便，生产过程绿色环保，成本相对低廉，符合绿色发展，易于实现工业化。

Description

一种40000倍二肽类高倍甜味剂的合成方法

技术领域

本发明属于食品添加剂领域，特别涉及一种40000倍二肽类高倍甜味剂的合成方法。

背景技术

城市的快速化发展，不健康的饮食习惯，不合理的生活方式，饮食中能量的过量摄入等，导致现在肥胖、超重、糖尿病的人群数量正在以前所未有的速率增加。而饮食中甜食的过量摄入是导致肥胖、超重、糖尿病的最主要原因，如何开发出低热量、高甜度的甜味化合物也越来越重要。

推广健康的生活理念，倡导健康的生活的方式。《国民营养计划(2017-2013年)》指出广泛开展“三减三健”(减盐、减糖、减油，健康口腔、健康骨骼、健康体重)行动，其中减糖和健康体重成为控制能量摄入的关键内容。高倍二肽甜味剂，一种由两种氨基酸和三碳化合物组成的甜味化合物，不参与人体的新陈代谢，只提供甜味的口感。它既可以很好的满足人们对于甜味化合物的需求，又可以很好的避免能量过剩而带来的一系列的诸如肥胖糖尿病等问题。1965年化学家James Schlatter在合成一种四肽化合物时偶然发现了阿斯巴甜，化学名为N-L-α-天冬氨酰-L-苯丙氨酸-1-甲酯，是第一代二肽甜味剂，甜度约为蔗糖的200倍。1979年美国辉瑞公司成功研制出阿力甜，化学名为L-天门冬酰-N-(2,2,4,4-四甲基-3-硫杂环丁基)-D-丙氨酰胺，是继阿斯巴甜之后研究和开发出来的第二代二肽类甜味剂，甜度约为蔗糖的2000倍。1991年科学家Claude,Jean-Marie和Indra成功研制出纽甜，化学名为N-[N-(3,3-二甲基丁基)-L-α-天冬氨酰]-1-苯丙氨酸-1-甲酯，属于第三代二肽甜味剂，甜度约为蔗糖的8,000倍。2008年日本味之素公司研发出爱德万甜，化学名为N-{N-[3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙基]-L-α-天冬氨酰}-L-苯丙氨酸-1-甲酯，被称为第四代二肽甜味剂，甜度约为蔗糖20000倍。日本专利公开文本JP 2001322996中公开了一种40000倍二肽类高倍甜味剂，其名称为N-{N-[3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙基]-L-α-天冬氨酰}-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯，但其并没有公开该甜味剂完整的合成路线。

为了满足未来食品工业更高的发展需求，为了开发更符合人类生理要求，使人类获得热量更低、甜度更高、性能更加优越的绿色安全高倍甜味剂，在行业需要易于产业化，生产成本相对廉价，终产物的产率较可观的可行性方案的背景下，本发明提供了一种40000倍二肽类高倍甜味剂的合成方法。

发明内容

为了克服上述现有技术的缺点与不足，本发明的首要目的在于提供一种40000倍二肽类高倍甜味剂的制备方法。

本发明的目的通过下述方案实现：

一种40000倍二肽类高倍甜味剂，其名称为N-{N-[3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙基]-L-α-天冬氨酰}-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯，呈白色晶体状，水溶液呈弱酸性，当外界环境呈中性或者弱酸性时热稳定性较好，在高温、强酸、强碱条件下容易水解。

所述的40000倍二肽类高倍甜味剂的结构式如下所示：

一种上述的40000倍二肽类高倍甜味剂的合成方法，包括酯化反应、Wittig反应、还原反应、缩合反应，具体包括以下步骤：

(1)以3-羟基-4-甲氧基苯甲醛(化合物5)和甲氧甲酰基亚甲基三苯基膦为原料，在溶剂中加热并冷凝回流反应，得到(E/Z)-3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙烯酸甲酯(化合物6)；

(2)(E/Z)-3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙烯酸甲酯(化合物6)在钯碳催化下加氢还原得到3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯；

(3)氮气保护条件下，3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯经二异丁基氢化铝还原得到3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙醛(化合物10)；

(4)以S-叔丁基-L-半胱氨酸盐酸盐(化合物8)、甲醇、二氯亚砜为原料，加热并冷凝回流反应，得到S-叔丁基-L-半胱氨酸甲酯(化合物9)；

(5)S-叔丁基-L-半胱氨酸甲酯(化合物9)和N-叔丁氧羰基-L-天冬氨酸-4-叔丁酯二环己胺盐经EDCI(1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐)和HOBt(1-羟基苯并三唑)缩合，制得N-(N-叔丁氧羰基-4-叔丁酯-L-α-天冬氨酰)-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯(化合物11)；N-(N-叔丁氧羰基-4-叔丁酯-L-α-天冬氨酰)-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯(化合物11)在盐酸-二氧六环溶液中脱除保护基制得N-(L-α-天冬氨酰)-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯(化合物12)；

(6)N-(L-α-天冬氨酰)-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯(化合物12)与3-羟基-4-甲氧基苯基丙醛(化合物10)在甲醇中经钯碳催化加氢还原制得40,000倍甜味剂N-[N-[3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙基]-L-α-天冬氨酰]-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯(化合物13)。

步骤(1)中所述的3-羟基-4-甲氧基苯甲醛和甲氧甲酰基亚甲基三苯基膦的摩尔比为1：1～1.5，优选为1:1.2；步骤(1)中所述的回流反应的时间为4～24h，优选为18h；步骤(1)中所述的溶剂为四氢呋喃、苯、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、二氯甲烷中的至少一种，优选为二氯甲烷；

步骤(2)中所述的(E/Z)-3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙烯酸甲酯和钯碳催化剂的摩尔比为1.5～3:1，优选为2.6:1，,其中钯碳催化剂的摩尔量以有效成分计；步骤(2)中所述的加氢还原是指在溶剂存在条件下10～30℃反应16～48h，优选为在溶剂存在条件下25℃反应16h，其中溶剂为甲醇、乙醇、乙酸中的至少一种。

步骤(3)中所述的3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯和二异丁基氢化铝的摩尔比为1～3:1，优选为2.5:1；步骤(3)中所述的还原是指在-78℃反应30～120min，优选为在-78℃反应60min；步骤(3)中所述的反应优选在溶剂存在条件下进行，其中的溶剂优选为二氯甲烷、四氢呋喃、乙醚中的至少一种；

步骤(4)中所述的原料的加料顺序为：在冰浴条件下将甲醇和二氯亚砜混合并搅拌30min～2h后再加入S-叔丁基-L-半胱氨酸盐酸盐进行加热冷凝回流反应；步骤(4)中所述的加热冷凝回流反应的时间为8～24h；步骤(4)中所述的S-叔丁基-L-半胱氨酸盐酸盐和二氯亚砜的摩尔比为1:0.8～1:2，优选为1:0.85；步骤(4)中所述的甲醇即作为溶剂又作为反应原料，所述的甲醇的用量为溶剂量；

步骤(5)中所述的S-叔丁基-L-半胱氨酸甲酯、N-叔丁氧羰基-L-天冬氨酸-4-叔丁酯二环己胺盐、EDCI和HOBt的摩尔比为1：1：1：1～1：2：2：2，优选为1:1:1.1:1.1；步骤(5)中所述的缩合是指在-20℃～25℃反应12～48h，优选先在0℃反应1h后再在常温下反应过夜；

步骤(5)中所述的N-(N-叔丁氧羰基-4-叔丁酯-L-α-天冬氨酰)-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯和盐酸-二氧六环溶液中溶质氯化氢的摩尔比为1：10～30，优选为1:18；步骤(5)中所述的脱除保护基是指在-20℃～30℃反应30min～4h以脱除保护基(叔丁基、叔丁氧羰基)，优选在25℃反应2h以脱除保护基；为避免反应过于剧烈，优选以滴加的形式将盐酸-二氧六环溶液加入到N-(N-叔丁氧羰基-4-叔丁酯-L-α-天冬氨酰)-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯中进行反应。

步骤(6)中所述的3-羟基-4-甲氧基苯基丙醛、N-(L-α-天冬氨酰)-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯和钯碳的摩尔比为1:1:2～5，优选为3:3:10，其中钯碳催化剂的摩尔量以有效成分计；步骤(6)中所述的钯碳催化加氢还原是指在-20℃～50℃反应16～48h，优选在25℃反应24h；步骤(6)中在加入钯碳催化反应之前，优选为将3-羟基-4-甲氧基苯基丙醛、N-(L-α-天冬氨酰)-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯在氮气或惰性气氛下常温搅拌2h以便薛夫碱的形成再加入钯碳进行催化反应。

合成路线优选如下所示：

本发明中未指明温度和压力的，均指在室温常压下进行。

本发明通过合成与逆合成分析，对已知的纽甜类似物的结构进行结构分析，设计出第一条全合成路线，并以有机合成理论为基础，通过构建多步反应，如酯化反应、Wittig反应、还原反应、缩合反应等，寻找合适的合成反应条件，如无水无氧、温度精确、反应时长等，最终合成出目标甜味剂，经采用红外光谱(IR)、质谱(MS)以及核磁共振(NMR)对终产物进行结构鉴定和表征，结果确定其为目标终产物。

本发明相对于现有技术，具有如下的优点及有益效果：

1、本发明采用了全新的技术路线和技术手段合成的终产物N-[N-[3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙基]-L-α-天冬氨酰]-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯，其甜度约为蔗糖的40000倍。

2、经对本发明合成的甜味剂的物理和化学性质研究表明：其热稳定好，结晶状形态，溶液呈弱酸性，在弱酸和中性条件下稳定，有利于在食品加工业应用，能更好地满足当前食品工业发展的需求。

3、本发明实现了向绿色健康发展的甜味剂工业迈进的关键一步，解决了目前甜味剂的合成中普遍采用高压氢化还原的方法，而且改善了目前甜味剂的合成中主要通过阿斯巴甜进行甜味的甜度改善的方法。经过本发明优化的合成方法工艺过程简单，操作方便，易于上手，同时对反应过程没有特别严格的要求，只需无水无氧操作，整个过程中对环境影响小，具有工业化的潜质。

4、本发明合成方法中原料廉价易得，生产过程绿色环保，不含高危高毒的原料和产物，生产成本相对低廉，产率可观，符合绿色发展，易于实现工业化。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例中所用试剂如无特殊说明均可从市场常规购得。

实施例中所述的室温或常温均指25℃。

实施例1

一种二肽类高倍甜味剂的合成方法，包括以下步骤：

(1)在250mL圆底烧瓶中依次加入异香兰素(10.0g,66.5mmol)、无水二氯甲烷(125mL)、甲氧甲酰基亚甲基三苯基膦(26.6g,79.8mmol)，加热冷凝回流，磁力搅拌18h后，薄层层析监测(TLC)。待反应结束并冷却至室温，减压除去溶剂，柱层析纯化，得到白色固体化合物(E/Z)-3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙烯酸甲酯(13.4g,64.5mmol)，产率97％；

(2)在250mL圆底烧瓶中依次加入(E/Z)-3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙烯酸甲酯(13.2g,63.4mmol)、无水甲醇(150mL)、10％钯碳(2.6g,24.4mmol)，通入氢气。常温搅拌反应16h后，TLC监测。反应结束，减压除去溶剂，柱层析进一步纯化，得到白色颗粒化合物3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯；

(3)在250mL圆底烧瓶中依次加入3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯(11.0g,52.4mmol)，无水二氯甲烷(140mL)，-78℃向反应瓶缓慢滴加二异丁基氢化铝(DIBAL-H，溶解在四氢呋喃中，浓度为1.0M,20.6mL,20.6mmol)进行反应，TLC监测。待反应结束(60min)后向反应液中缓慢滴加甲醇，淬灭反应。然后向已经淬灭的反应中加入酒石酸钾钠溶液(1.2M,250mL)稀释反应液，接着用二氯甲烷(250mL×3)萃取稀释液。用饱和食盐水(500mL)洗涤有机层，无水硫酸钠除水，减压除去溶剂，柱层析进一步纯化，得到白色固体(9.9g,47.1mmol)，即为3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙醛；

(4)在500ml圆底烧瓶中加入无水甲醇(200mL,4.9mol)，然后向圆底烧瓶中加入二氯亚砜(2.13mL，0.03mol)，并控制滴加的速度使反应温度不能超过0℃。滴加完毕后在0℃反应1h，等温度升至常温之后，向圆底烧瓶中加入S-叔丁基-L-半胱氨酸盐酸盐(6.3g,35.3mmol)，反应回流过夜，TLC监测，待反应结束，减压蒸馏除去溶剂，柱层析进一步纯化(二氯甲烷：甲醇＝100:0-100:15)，得到黄色固体化合物(6.5g,34mmol)，即为S-叔丁基-L-半胱氨酸甲酯，产率为95％；

(5)在圆底烧瓶中依次加入二氯甲烷(200mL)，S-叔丁基-L-半胱氨酸甲酯(5.6g,29.0mmol)，N-叔丁氧羰基-L-天冬氨酸-4-叔丁酯二环己胺盐(13.7g,29.04mmol)。然后依次加入EDCI(6.1g，31.9mmol),HOBt(4.3g，31.9mmol),0℃下搅拌1h防止反应过于剧烈，然后常温下反应过夜。反应完成后，减压除去溶剂，向残余物中加入水(600mL)，用乙酸乙酯(200mL×3)萃取。用5％的柠檬酸(300mL×3)萃取合并有机层，接着用饱和食盐水洗涤(200mL×2)。用5％碳酸氢钠溶液萃取(300mL×3)，最后用饱和食盐水萃取(200mL×2)，然后用无水硫酸钠进行除水、过滤，减压除去溶液，柱层析进一步纯化，得到白色固体化合物N-(N-叔丁氧羰基-4-叔丁酯-L-α-天冬氨酰)-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯(10.8g,23.3mmol)，产率80％；接着在圆底烧瓶中依次加入N-(N-叔丁氧羰基-4-叔丁酯-L-α-天冬氨酰)-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯(2.1g,4.5mmol)，然后在0℃下缓慢加入氯化氢-二氧六环溶液(4.0mol/L,20mL)，滴加完毕常温下反应2h，TLC监测。待反应完毕，减压除去溶剂得到白色固体，再用甲醇溶解(20×3)并减压除去溶剂，得到白色固体化合物12(1.2g,4.1mmol)，即N-(L-α-天冬氨酰)-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯，产率91％；

(6)在150mL圆底烧瓶中依次加入甲醇水溶液(60％,V/V,75mL),N-(L-α-天冬氨酰)-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯(100.0mg,0.3mmol)，3-羟基-4-甲氧基苯基丙醛(58.0mg,0.3mmol)，氮气保护下常温搅拌2h。向反应液中加入5％钯碳(100.0mg,1.0mmol)，氢气氛围下常温反应24h，TLC监测。待反应结束，过滤，柱层析进一步纯化，碱性高锰酸钾显色，得到白色固体化合物(295.0mg,0.6mmol)，即40000倍甜味剂N-[N-[3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙基]-L-α-天冬氨酰]-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯，产率66％，终产物呈白色晶体。

实施例1制备的化合物通式为N-{N-[3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙基]-L-α-天冬氨酰}-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯，其表征数据如下所示：

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.55(d,J＝29.8Hz,1H),6.79(s,1H),6.71(d,J＝7.8Hz,1H),6.57(d,J＝7.8Hz,1H),4.70(q,J＝7.3Hz,1H),4.11(s,1H),3.81(s,3H),3.69(s,3H),3.06-2.47(m,8H),1.98(q,J＝14.8Hz,2H),1.28(s,J＝2.8Hz,9H)，0.92-0.82(m,1H)；

¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ174.77,170.43,168.17,145.70,145.37,133.20,119.42,114.85,111.22,63.40,57.84,55.78,52.51,46.15,44.65,42.51,30.61,29.90,29.47,29.43；

IR(KBr,cm^-1)3423,3199,2959,2925,1590,1512,1744,1689,1398,1365,1028,761,596；

MS(ESI)m/z 471.1[(M+H)⁺],493.1[(M+Na)⁺]。

经采用红外光谱(IR)、质谱(MS)以及核磁共振(NMR)对终产物进行结构鉴定和表征，证明本实施例确实合成了40000倍二肽类高倍甜味剂N-{N-[3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙基]-L-α-天冬氨酰}-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种40000倍二肽类高倍甜味剂的合成方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)以3-羟基-4-甲氧基苯甲醛和甲氧甲酰基亚甲基三苯基膦为原料，在溶剂中加热并冷凝回流反应，得到(E/Z)-3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙烯酸甲酯；

(2)(E/Z)-3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙烯酸甲酯在钯碳催化下加氢还原得到3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯；

(3)氮气保护条件下，3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯经二异丁基氢化铝还原得到3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙醛；

(4)以S-叔丁基-L-半胱氨酸盐酸盐、甲醇、二氯亚砜为原料，加热并冷凝回流反应，得到S-叔丁基-L-半胱氨酸甲酯；

(5)S-叔丁基-L-半胱氨酸甲酯和N-叔丁氧羰基-L-天冬氨酸-4-叔丁酯二环己胺盐经EDCI和HOBt缩合，制得N-(N-叔丁氧羰基-4-叔丁酯-L-α-天冬氨酰)-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯；N-(N-叔丁氧羰基-4-叔丁酯-L-α-天冬氨酰)-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯在盐酸-二氧六环溶液中脱除保护基制得N-(L-α-天冬氨酰)-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯；

(6)N-(L-α-天冬氨酰)-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯与3-羟基-4-甲氧基苯基丙醛在甲醇中经钯碳催化加氢还原制得40,000倍甜味剂N-[N-[3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙基]-L-α-天冬氨酰]-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯；

其中40,000倍二肽类高倍甜味剂的名称为N-{N-[3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙基]-L-α-天冬氨酰}-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯，结构式如下所示：

2.根据权利要求1所述的40000倍二肽类高倍甜味剂的合成方法，其特征在于：

步骤(1)中所述的3-羟基-4-甲氧基苯甲醛和甲氧甲酰基亚甲基三苯基膦的摩尔比为1：1～1.5；步骤(1)中所述的回流反应的时间为4～24h；步骤(1)中所述的溶剂为四氢呋喃、苯、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、二氯甲烷中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的40000倍二肽类高倍甜味剂的合成方法，其特征在于：

步骤(2)中所述的(E/Z)-3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙烯酸甲酯和钯碳催化剂的摩尔比为1.5～3:1；步骤(2)中所述的加氢还原是指在溶剂存在条件下10～30℃反应16～48h，其中溶剂为甲醇、乙醇、乙酸中的至少一种。

4.根据权利要求1所述的40000倍二肽类高倍甜味剂的合成方法，其特征在于：

步骤(3)中所述的3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯和二异丁基氢化铝的摩尔比为1～3:1；步骤(3)中所述的还原是指在-78℃反应30～120min；步骤(3)中所述的反应在溶剂存在条件下进行，其中的溶剂为二氯甲烷、四氢呋喃、乙醚中的至少一种。

5.根据权利要求1所述的40000倍二肽类高倍甜味剂的合成方法，其特征在于：

步骤(4)中所述的原料的加料顺序为：在冰浴条件下将甲醇和二氯亚砜混合并搅拌30min～2h后再加入S-叔丁基-L-半胱氨酸盐酸盐进行加热冷凝回流反应；步骤(4)中所述的加热冷凝回流反应的时间为8～24h；

步骤(4)中所述的S-叔丁基-L-半胱氨酸盐酸盐和二氯亚砜的摩尔比为1:0.8～2；步骤(4)中所述的甲醇的量为溶剂量。

6.根据权利要求1所述的40000倍二肽类高倍甜味剂的合成方法，其特征在于：

步骤(5)中所述的S-叔丁基-L-半胱氨酸甲酯、N-叔丁氧羰基-L-天冬氨酸-4-叔丁酯二环己胺盐、EDCI和HOBt的摩尔比为1：1：1：1～1：2：2：2；步骤(5)中所述的缩合是指在-20℃～25℃反应12～48h。

7.根据权利要求1所述的40000倍二肽类高倍甜味剂的合成方法，其特征在于：

步骤(5)中所述的N-(N-叔丁氧羰基-4-叔丁酯-L-α-天冬氨酰)-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯和盐酸-二氧六环溶液中溶质氯化氢的摩尔比为1：10～30；步骤(5)中所述的脱除保护基是指在-20℃～30℃反应30min～4h以脱除保护基。

8.根据权利要求1所述的40000倍二肽类高倍甜味剂的合成方法，其特征在于：

步骤(6)中所述的3-羟基-4-甲氧基苯基丙醛、N-(L-α-天冬氨酰)-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯和钯碳的摩尔比为1：1：2～5；步骤(6)中所述的钯碳催化加氢还原是指在-20℃～50℃反应16～48h。

9.根据权利要求1所述的40000倍二肽类高倍甜味剂的合成方法，其特征在于：

步骤(1)中所述的3-羟基-4-甲氧基苯甲醛和甲氧甲酰基亚甲基三苯基膦的摩尔比为1:1.2；步骤(1)中所述的回流反应的时间为18h；步骤(1)中所述的溶剂为二氯甲烷；

步骤(2)中所述的(E/Z)-3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙烯酸甲酯和钯碳催化剂的摩尔比为2.6:1；步骤(2)中所述的加氢还原是指在溶剂甲醇存在条件下25℃反应16h；

步骤(3)中所述的3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯和二异丁基氢化铝的摩尔比为2.5:1；步骤(3)中所述的还原是指在-78℃反应60min；步骤(3)中所述的反应在溶剂二氯甲烷存在条件下进行；

步骤(4)中所述的原料的加料顺序为：在冰浴条件下将无水甲醇和二氯亚砜混合并搅拌1h后再加入S-叔丁基-L-半胱氨酸盐酸盐进行加热冷凝回流反应；步骤(4)中所述的加热冷凝回流反应时间为8～24h；步骤(4)中所述的S-叔丁基-L-半胱氨酸盐酸盐和二氯亚砜的摩尔比为1:0.85；

步骤(5)中所述的S-叔丁基-L-半胱氨酸甲酯、N-叔丁氧羰基-L-天冬氨酸-4-叔丁酯二环己胺盐、EDCI和HOBt的摩尔比为1:1:1.1:1.1；步骤(5)中所述的缩合是指先在0℃反应1h后再在常温下反应过夜；

步骤(5)中所述的N-(N-叔丁氧羰基-4-叔丁酯-L-α-天冬氨酰)-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯和盐酸-二氧六环溶液中溶质氯化氢的摩尔比为1:18；步骤(5)中所述的脱除保护基是指在25℃反应2h以脱除保护基；

步骤(6)中所述的3-羟基-4-甲氧基苯基丙醛、N-(L-α-天冬氨酰)-S-叔丁基-L-半胱氨酸-1-甲酯和钯碳的摩尔比为3:3:10；步骤(2)中所述的钯碳催化加氢还原是指在25℃反应24h。