CN110818648A - 一种具有三氮唑侧链的截短侧耳素衍生物及其制备方法和应用 - Google Patents

一种具有三氮唑侧链的截短侧耳素衍生物及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及药物化学技术领域，尤其涉及一种具有三氮唑侧链的截短侧耳素衍生物及其制备方法和应用。本发明的截短侧耳素衍生物具有三氮唑侧链和截短侧耳素母核结构，体外实验和动物实验结果表明，本发明的截短侧耳素衍生物对金黄色葡萄球菌具有良好的抗菌活性，特别适合作为新型抗菌药物用于动物或人全身系统感染。

Description

一种具有三氮唑侧链的截短侧耳素衍生物及其制备方法和 应用
技术领域
本发明涉及药物化学技术领域，尤其涉及一种具有三氮唑侧链的截短侧耳素衍生物及其制备方法和应用。
背景技术
20世纪90年代，随着抗菌药在兽医临床的大量使用甚至滥用，在保障畜禽养殖健康发展的同时，也导致兽医临床上出现越来越多的动物源耐药菌，动物源耐药菌的耐药性可能通过食物链传递给人，使人医临床出现无药可用的局面。发达国家在二十世纪采取疫苗接种和抗生素治疗两种措施并举的方式，使肺结核一类的疾病几乎灭绝，这种有效且简便的治疗方法导致了抗生素的滥用，尤其在畜禽养殖方面，这使得细菌的耐药性问题日益严重。1961年临床上首次分离出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)，是一种流行范围广、致病力强、发病率和死亡率高的病原菌。2003年荷兰的一篇调查显示屠宰猪中约39％含有ST398型MRSA，其他调查中27％的饲养人员也携带猪源MRSA。动物源MRSA ST398可以引起与动物接触的人类感染。近年来，我国畜牧业集约化和规模化养殖的程度逐渐提高，抗菌药物大量使用，使动物源细菌耐药性水平迅速提高。耐药细菌及其耐药性能通过食物链和移动性耐药遗传元件传递给人类，给人类健康和细菌性疾病的治疗带来不利影响。进行动物专用抗菌药的研发可为兽医临床上大规模出现的耐药菌问题提供新的解决方案。截短侧耳素类化合物具有异于临床常见抗菌药母核结构，与其它结构类抗菌药之间不易产生交叉耐药性，泰妙菌素和沃尼妙林是该类化合物作为动物专用抗菌药开发获得成功的典型事例。MRSA对所有β内酰胺类抗生素耐药，并对大环内酯类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类等抗菌药物多数耐药，导致该菌所致感染治疗困难，病死率高。截短侧耳素类药物具有独特的结构与抗菌机制，使其能相对较慢的产生耐药性，使截短侧耳素进入了研究人员的视野从而备受关注重。
截短侧耳素(结构如式1所示)由高等真菌Pleurotusmutiliz(Fr.)Sacc.和Pleurotus Passeckeranius Pilat产生，具有骈合(5-6-8)三环的一种三环二萜化合物。该类化合物与核糖体50S亚基相互作用抑制细菌蛋白质合成，对耐药革兰氏阳性菌、耐药性支原体及部分革兰氏阴性菌均有很强的抗菌活性。截短侧耳素类化合物具有异于临床常见抗菌药母核结构，与其它结构类抗菌药之间不易产生交叉耐药性。
Figure BDA0002304177010000021
葛兰素史克(Glaxo Smith Kline)公司开发了瑞他莫林(Retapamulin)于2007年在美国和欧洲获批上市。瑞他莫林是截短侧耳素类化合物的第一个人用药。其主要用于局部外用。瑞他莫林对金黄色葡萄球菌、酿脓链球菌、凝固酶葡萄球菌等革兰氏阳性或阴性菌均有较好的抑制作用，主要用于治疗皮肤感染和软组织感染。瑞他莫林对多种耐药菌均具有良好的抗菌活性，可以治疗耐苯唑西林、红霉素、莫匹罗星等药物的细菌感染疾病。与已有抗生素对比，瑞他莫林更不易引起金黄色葡萄球菌的耐药性。
由于截短侧耳素类化合物的作用机制与目前临床广泛应用的抗生素不同，故针对截短侧耳素类抗菌药的耐药菌尚不多见。与基于同一母核开发成功的药物，如青霉素、头孢菌素、沙星类抗菌药动辄数十种相比，基于截短侧耳素仅成功开发三种抗菌药，因此，开发更多截短侧耳素类抗菌药十分必要。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有三氮唑侧链的截短侧耳素衍生物及其制备方法和应用，本发明的截短侧耳素衍生物具有良好的抗菌活性，特别适合作为新型抗菌药物用于动物或人全身系统感染。
本发明提供了一种具有三氮唑侧链的截短侧耳素衍生物，为具有式2～式5任意一项所示结构的化合物或其药用盐；
Figure BDA0002304177010000031
其中，R1、R2和R3独立地为氢原子、羟基、氨基、巯基、羟甲基、胺甲基、硝基、卤素、三卤代甲基、甲基、天然氨基酸酰氨基和碳原子数为1～6的烷氧基中的一种；R4为仲胺基。本发明的截短侧耳素衍生物具有良好的抗菌活性，特别适合作为新型抗菌药物用于动物或人全身系统感染。
附图说明
图1为化合物1、4、8、10对MRSA的杀菌曲线；
图2为化合物25、32、37、39和泰妙菌素对MRSA的杀菌曲线；
图3为化合物4和10的小鼠大腿感染模型结果；
图4为化合物4的小鼠体内感染模型结果。
具体实施方式
本发明提供了一种具有三氮唑侧链的截短侧耳素衍生物，其特征在于，为具有式2～式5任意一项所示结构的化合物或其药用盐；
Figure BDA0002304177010000032
其中，R1、R2和R3独立地为氢原子、羟基、氨基、巯基、羟甲基、胺甲基、硝基、卤素、三卤代甲基、甲基、天然氨基酸酰氨基和碳原子数为1～6的烷氧基中的一种；
R4为仲胺基。
在本发明中，所述R1、R2和R3独立地优选为氢、羟基、氨基、羟甲基、胺甲基、氟、三氟甲基、硝基、甲氧基、乙氧基、脯氨酰氨基和缬氨酰氨基中的一种；更优选：R1为甲基，R2为氢原子，R3为氢原子；或R1为氢原子，R2为甲基，R3为氢原子；或R1为氢原子，R2为氢原子，R3为甲基；或R1为氟原子，R2为氢原子，R3为氢原子；或R1为氢原子，R2为氟原子，R3为氢原子；或R1为氢原子，R2为氢原子，R3为氟原子；或R1为氯原子，R2为氢原子，R3为氢原子；或R1为氢原子，R2为氯原子，R3为氢原子；或R1为氢原子，R2为氢原子，R3为氯原子；或R1为甲氧基，R2为氢原子，R3为氢原子；或R1为氢原子，R2为甲氧基，R3为氢原子；或R1为氢原子，R2为氢原子，R3为甲氧基；或R1为硝基，R2为氢原子，R3为氢原子；或R1为氢原子，R2为硝基，R3为氢原子；或R1为氢原子，R2为氢原子，R3为硝基；或R1为三氟甲基，R2为氢原子，R3为氢原子；或R1为氢原子，R2为三氟甲基，R3为氢原子；或R1为氢原子，R2为氢原子，R3为三氟甲基；或R1为羟基，R2为氢原子，R3为氢原子；或R1为氢原子，R2为羟基，R3为氢原子；或R1为氢原子，R2为氢原子，R3为羟基。在本发明中，所述R4优选为二甲胺基、二乙胺基、四氢吡咯基、六氢吡啶基、吗啉基、3-羟基吡咯烷基、4-羟基哌啶基、3-羟甲基哌啶基、4-哌啶乙醇基和二环己基中的一种，更优选为二乙胺基、二环己胺基、吗啉基、4-羟基哌啶基、3-羟甲基哌啶基或4-哌啶乙醇基。
上述最优选的方式以及对应本发明的化合物，以表格的形式表示，具体如表1和表2所示。
表1本发明代表性化合物1～18(具有式2结构)和25～42(具有式4结构)结构式
Figure BDA0002304177010000041
Figure BDA0002304177010000051
表2本发明代表性化合物19～24(具有式3结构)和43～48(具有式5结构)结构式
Figure BDA0002304177010000052
Figure BDA0002304177010000061
在本发明中，式2～式5任意一项所示结构的化合物的药用盐优选为式2～式5任意一项所示结构的化合物，与盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、醋酸、富马酸、马来酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、谷氨酸或天冬氨酸形成的盐。本发明的实施例具体给出了两种药用盐，具体的结构如表3所示。
表3部分化合物的可药用盐
Figure BDA0002304177010000062
本发明提供了上述方案所述截短侧耳素衍生物的制备方法，
(1)当所述截短侧耳素衍生物为具有式2所示结构的化合物时，包括以下步骤：将氨基硫脲与具有式6所示结构的苯甲酰氯衍生物混合，进行酰基化反应，得到具有式7所示结构的第一中间体；
Figure BDA0002304177010000071
将所述第一中间体在加热和碱性条件下发生自身缩合反应，得到具有式
Figure BDA0002304177010000072
将截短侧耳素与对甲苯磺酰氯混合，进行取代反应，得到具有式12所示结构的第三中间体；
Figure BDA0002304177010000073
将所述第二中间体与第三中间体混合，进行取代反应，得到具有式2所示结构的截短侧耳素衍生物；
(2)当所述截短侧耳素衍生物为具有式3所示结构的化合物时，包括以下步骤：将氨基硫脲与氯乙酰氯发生酰基化反应，得到具有式8所示结构的第四中间体；
Figure BDA0002304177010000074
将所述第四中间体与仲胺混合，进行取代反应，得到具有式9所示结构的第五中间体；
Figure BDA0002304177010000075
将所述第五中间体在加热和碱性条件下发生自身缩合反应，得到具有式11所示结构的第六中间体；
Figure BDA0002304177010000076
将所述第六中间体与所述第三中间体混合，进行取代反应，得到具有式3所示结构的截短侧耳素衍生物；
(3)当所述截短侧耳素衍生物为具有式4所示结构的化合物时，包括以下步骤：将溴丙炔与具有式13所示结构的苯基哌嗪衍生物混合，进行取代反应，得到具有式14所示结构的第七中间体；
Figure BDA0002304177010000081
将所述第三中间体与叠氮化钠混合，进行取代反应，得到具有式16所示结构的第八中间体；
Figure BDA0002304177010000082
将所述第八中间体与第七中间体混合，进行Click反应，得到具有式4所示结构的截短侧耳素衍生物；
(4)将溴丙炔与仲胺混合，进行取代反应，得到具有式15所示结构的第九中间体；
Figure BDA0002304177010000083
将所述第九中间体与所述第八中间体混合，进行Click反应，得到具有式5所示结构的截短侧耳素衍生物。
(1)当所述截短侧耳素衍生物为具有式2所示结构的化合物时，本发明将氨基硫脲与具有式6所示结构的苯甲酰氯衍生物混合，进行酰基化反应，得到具有式7所示结构的第一中间体(在本发明的实施例中对应化合物1a～18a)。
在本发明中，所述酰基化反应优选在有机溶剂和催化剂存在条件下进行，所述有机溶剂优选包括乙腈，所述催化剂优选包括吡啶，所述氨基硫脲、具有式6所示结构的苯甲酰氯衍生物和催化剂的摩尔比优选为1：(1.1～1.5)：(0.1～0.5),所述有机溶剂与氨基硫脲的用量比优选为(15～30)mL：1g，更优选为20mL：1g。
本发明优选将氨基硫脲加入到有机溶剂中，然后滴加催化剂，冰浴至0℃，滴加具有式6所示结构的苯甲酰氯衍生物，滴加完毕后进行酰基化反应。在本发明中，所述酰基化反应的温度优选为室温，时间优选为2～4h，更优选为2h。
反应结束后，有大量白色固体生成，本发明优选对反应产物进行减压抽滤，滤出物用乙醇进行重结晶，析出大量白色粉末，减压抽滤得白色粉末即为第一中间体(在本发明的实施例中对应化合物1a～18a)。
得到第一中间体后，本发明将所述第一中间体在加热和碱性条件下发生自身缩合反应，得到具有式10所示结构的第二中间体(在本发明的实施例中对应化合物1b～18b)。
在本发明中，所述加热的温度优选为90～100℃，更优选为100℃，时间优选为6～8h，更优选为6h；所述碱性条件优选由碱性水溶液提供，所述碱性水溶液优选为氢氧化钠水溶液、氢氧化钾水溶液、氢氧化铯水溶液或碳酸钠水溶液，所述碱性水溶液的浓度优选为50～70wt％；所述第一中间体与碱性水溶液中碱的摩尔比优选为1:(10～15)，更优选为1:10。
本发明优选将第一中间体加入到水中，然后加入碱，加热至90～100℃进行自身缩合反应。反应结束后，本发明优选将反应体系冷却至室温，用稀盐酸中和反应体系的pH值至5～6，析出大量白色粉末，过滤并真空干燥后即得第二中间体(在本发明的实施例中对应化合物1b～18b)。
本发明将截短侧耳素与对甲苯磺酰氯混合，进行取代反应，得到具有式12所示结构的第三中间体(在本发明的实施例中对应中间体Ⅱ)。
在本发明中，所述取代反应优选在溶剂存在条件下进行，所述溶剂优选包括吡啶，所述对甲苯磺酰氯和截短侧耳素的摩尔比优选为(2～4)：1，更优选为(2.5～3.5)：1，所述溶剂和截短侧耳素的用量比优选为(20～40)mL：5.4g，更优选为30mL：5.4g。
本发明优选将截短侧耳素溶于溶剂中，冰浴至0℃，然后加入对甲苯磺酰氯，加入完毕后进行取代反应。在本发明中，所述取代反应的温度优选为0～5℃，时间优选为3～5h，更优选为3h。在本发明中，所述取代反应优选在搅拌条件下进行。
到达反应时间后，本发明优选采用冰水淬灭反应，并将反应液倒入分液漏斗，加入氯仿分层，除去水相，后用浓度为2mol/L的硫酸溶液洗涤有机相2次，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤有机相2次，最后用去离子水洗涤有机相2次并用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发干有机相，往残余固体中加入异丙醇并加热溶解，冷却后析出大量白色粉末，减压抽滤，滤出物用异丙醇洗涤，产物白色粉末剩余液体自然挥发至干燥，得白色粉末即为式12所示结构的第三中间体(在本发明的实施例中对应中间体Ⅱ)。
得到第二中间体和第三中间体后，本发明将所述第二中间体与第三中间体混合，进行取代反应，得到具有式2所示结构的截短侧耳素衍生物(在本发明的实施例中具体包括化合物1～18)。
在本发明中，所述取代反应优选在极性非质子性溶剂、碱性试剂以及水存在条件下进行，所述极性非质子性溶剂优选为二氯甲烷、乙酸乙酯、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺或吡啶，所述碱性试剂优选为氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铯或碳酸钠，所述第三中间体、碱性试剂与第二中间体的摩尔比优选为1：(1.1～1.2)：(10～15)，所述极性非质子性溶剂与第三中间体的用量比优选为(20～40)mL：1g，更优选为30mL：1g。
本发明优选将第三中间体溶于极性非质子性溶剂中，得到第一混合液；将所述第二中间体与水混合，向所得水溶液中加入碱性试剂，得到第二混合液；将所述第二混合液加入到第一混合液中，进行取代反应。在本发明中，所述取代反应的温度优选为0～70℃，更优选为40～70℃，时间优选为1～36h，更优选为3～15h。在本发明中，所述取代反应优选在搅拌条件下进行。本发明对所述搅拌没有特殊的限定，选用本领域熟知的搅拌过程即可。
完成所述取代反应后，本发明优选将反应液倒入分液漏斗中，加入氯仿萃取，取有机相，所得有机相旋转蒸干得混合物经二氯甲烷复溶，加入100～200目硅胶充分混合，待溶剂挥发完后，将上述粗产物-硅胶粉混合物用柱层析过柱提纯(200～300目硅胶粉为固定相，石油醚：乙酸乙酯＝1：2为流动相)，得到具有式2所示结构的化合物的纯品(在本发明的实施例中具体包括化合物1～18)。
(2)当所述截短侧耳素衍生物为具有式3所示结构的化合物时，本发明将氨基硫脲与氯乙酰氯发生酰基化反应，得到具有式8所示结构的第四中间体(在本发明的实施例中对应中间体Ⅰ)。
在本发明中，所述酰基化反应优选在溶剂存在条件下进行，所述溶剂优选包括乙腈，所述氨基硫脲和氯乙酰氯的摩尔比优选为1:(1.1～1.5)；所述有机溶剂与氨基硫脲的用量比优选为(20～30)mL：1g。
本发明优选将氨基硫脲与溶剂混合，冰浴至0℃，然后滴加氯乙酰氯，滴加完毕后进行酰基化反应。在本发明中，所述酰基化反应的温度优选为室温，时间优选为2～3h，更优选为2h。
完成所述酰基化反应后，本发明将反应所得产物体系进行减压抽滤，滤出物用乙醇重结晶，析出大量白色粉末，再次减压抽滤得白色粉末即为第四中间体(在本发明的实施例中对应中间体Ⅰ)。
得到第四中间体后，本发明将所述第四中间体与仲胺混合，进行取代反应，得到具有式9所示结构的第五中间体(在本发明的实施例中对应化合物19a～24a)。
在本发明中，所述取代反应优选在溶剂和缚酸剂存在条件下进行，所述溶剂优选包括乙腈，所述缚酸剂优选包括碳酸钾和二乙胺，所述第四中间体、仲胺和缚酸剂的摩尔比优选为1:(1.1～1.2):(1.8～4)，所述溶剂与第四中间体的用量比优选为(20～30)mL：1g。
本发明优选将所述第四中间体溶于溶剂中，加入缚酸剂和仲胺，在回流条件下进行取代反应。在本发明中，所述取代反应的温度优选为70～80℃，更优选为80℃，时间优选为4～5h，更优选为4h。
完成所述取代反应后，本发明将反应所得反应液倒入分液漏斗，先加氯仿分层，除去水相，后用去离子水洗涤有机相2次并用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发干有机相，得白色粉末即为第五中间体(在本发明的实施例中对应化合物19a～24a)。
得到第五中间体后，本发明将所述第五中间体在加热和碱性条件下发生自身缩合反应，得到具有式11所示结构的第六中间体(在本发明的实施例中对应化合物19b～24b)。
制备第六中间体时，所述自身缩合反应的条件适用范围与制备第二中间体时的条件适用范围一致，这里不再赘述；不同之处在于原料由第一中间体变成了第五中间体。
得到第六中间体后，本发明将所述第六中间体与上述第三中间体混合，进行取代反应，得到具有式3所示结构的截短侧耳素衍生物(在本发明的实施例中具体包括化合物19～24)。
制备具有式3所示结构的截短侧耳素衍生物时，所述取代反应的条件适用范围与制备具有式2所示结构的截短侧耳素衍生物时取代反应的条件适用范围一致；不同之处在于原料由第二中间体变成了第六中间体。
(3)当所述截短侧耳素衍生物为具有式4所示结构的化合物时，本发明将溴丙炔与具有式13所示结构的苯基哌嗪衍生物混合，进行取代反应，得到具有式14所示结构的第七中间体(在本发明的实施例中对应25a～42a)。
在本发明中，所述取代反应优选在溶剂存在条件下进行，所述溶剂优选包括二氯甲烷，所述溴丙炔与具有式13所示结构的苯基哌嗪衍生物的摩尔比优选为(1.1～2)：1，所述溶剂与具有式13所示结构的苯基哌嗪衍生物的用量比优选为(10～20)mL：1g。
本发明优选将具有式13所示结构的苯基哌嗪衍生物和溶剂混合，然后加入溴丙炔进行取代反应。在本发明中，所述取代反应的温度优选为20～25℃，时间优选为2～24h，更优选为2～5h。
完成所述取代反应后，本发明优选将反应液旋干，得到第七中间体(在本发明的实施例中对应25a～42a)。
本发明将上述第三中间体与叠氮化钠混合，进行取代反应，得到具有式16所示结构的第八中间体(在本发明的实施例中对应中间体Ⅲ)。
在本发明中，所述取代反应优选在非质子性溶剂和水存在条件下进行，所述非质子性溶剂优选为二氯甲烷、乙酸乙酯、N,N-二甲基甲酰胺、丙酮或吡啶；所述非质子性溶剂、水和第三中间体的用量比优选为(10～20)mL：(10～20)mL：1g，所述叠氮化钠与第三中间体的摩尔比优选为(1～3):1。
本发明优选将第三中间体溶于非质子性溶剂中，叠氮化钠溶于水中，合并后进行取代反应。在本发明中，所述取代反应的温度优选为0～80℃，更优选为50～80℃，时间优选为1～12h，更优选为5～10h。
完成所述取代反应后，本发明优选将反应液中的溶剂旋干，加入氯仿萃取，用去离子水洗涤有机相2次并用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发干有机相，得到第八中间体(在本发明的实施例中对应中间体Ⅲ)。
得到第八中间体和第七中间体后，本发明将所述第八中间体与第七中间体混合，进行Click反应，得到具有式4所示结构的截短侧耳素衍生物(在本发明的实施例中具体包括化合物25～42)。
在本发明中，所述Click反应优选在溶剂和催化剂存在条件下进行，所述溶剂优选为叔丁醇/水溶剂，所述叔丁醇和水的体积比优选为1:(1～1.5)；所述催化剂优选包括碘化亚铜；所述第七中间体、第八中间体和催化剂的摩尔比优选为1:(1.1～1.5):(0.1～0.5)，所述溶剂与第七中间体的用量比为(15～25)mL：1g。
本发明优选将第七中间体溶于溶剂中，之后加入第八中间体和催化剂进行Click反应。在本发明中，所述Click反应的温度优选为0～80℃，更优选为20～40℃，时间优选为1～36h，更优选为5～15h。
完成所述Click反应后，本发明优选将反应液倒入分液漏斗中，加入氯仿萃取，用去离子水洗涤有机相2次并用无水硫酸钠干燥；所得有机相旋转蒸干得混合物经二氯甲烷复溶，加入100～200目硅胶充分混合，待溶剂挥发完后，将上述粗产物-硅胶粉混合物用柱层析过柱提纯(200～300目硅胶粉为固定相，石油醚：乙酸乙酯＝1：2为流动相)，得到具有式4所示结构的截短侧耳素衍生物(在本发明的实施例中具体包括化合物25～42)。
当所述截短侧耳素衍生物为具有式4所示结构的化合物时，本发明将溴丙炔与仲胺混合，进行取代反应，得到具有式15所示结构的第九中间体(在本发明的实施例中对应43a～48a)。
在本发明中，所述取代反应优选在溶剂存在条件下进行，所述溶剂优选包括四氢呋喃，所述溴丙炔和仲胺的摩尔比优选为(1.1～1.2)：1，所述溶剂与仲胺的用量比优选为(10～20)mL：1g。
本发明优选将仲胺溶于溶剂中，之后加入溴丙炔进行取代反应。在本发明中，所述取代反应的温度优选为25～30℃，时间优选为2～4h。
完成所述取代反应后，本发明优选将反应所得体系中的溶剂旋干，得到第九中间体(在本发明的实施例中对应43a～48a)。
得到第九中间体后，本发明将所述第九中间体与上述第八中间体混合，进行Click反应，得到具有式5所示结构的截短侧耳素衍生物(在本发明的实施例中具体包括化合物43～48)。
制备具有式5所示结构的截短侧耳素衍生物时，所述Click反应的条件适用范围与制备具有式4所示结构的截短侧耳素衍生物的Click反应适用条件相同，不同之处在于将原料由第七中间体变成第九中间，这里不再赘述。
在本发明中，所述具有式2和式3所示结构的化合物的制备流程如下：
Figure BDA0002304177010000141
所述具有式4和式5所示结构的化合物的制备流程如下：
Figure BDA0002304177010000151
当所述截短侧耳素衍生物为式2～式5任意一项所示结构的化合物的药用盐时，本发明对所述药用盐的制备方法没有特殊要求，在式2～式5化合物的基础上选用本领域熟知的制备过程即可。
本发明提供了上述方案所述截短侧耳素衍生物在制备治疗感染性疾病的药物中的应用。
在本发明中，所述药物优选包括截短侧耳素衍生物和药学上可接受的辅料。本发明对所述辅料的具体种类没有特殊要求，选用本领域熟知的辅料即可。本发明的截短侧耳素衍生物在药物中作为活性成分，本发明所述药物中截短侧耳素衍生物的含量没有特殊要求，本领域技术人员可根据实际需要进行调整。本发明对所述药物的剂型没有特殊要求，本领域熟知的剂型均可。
在本发明中，所述感染性疾病优选为人或动物经支原体或金黄色葡萄球菌感染引起的感染性疾病；本发明对所述金黄色葡萄球菌的具体种类没有特殊要求，具体可以为但不局限于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。
下面结合实施例对本发明提供的具有三氮唑侧链的截短侧耳素衍生物及其制备方法和应用进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
下述实施例所得化合物1～48如表1和表2所示。
实施例1(化合物1～18的制备)
步骤1：中间体1a～18a制备(第一中间体)
氨基硫脲1g(10.97mmol)置于20mL乙腈中，加入3滴吡啶催化剂(0.1mol)，冰浴至0℃左右，缓慢滴加2-甲基苯甲酰氯1.57mL(12.07mmol)，滴加结束后于室温反应2h，有大量白色固体生成。减压抽滤，滤出物用100mL乙醇重结晶，析出大量白色粉末，减压抽滤得白色粉末即中间体1a，产率：81.23％。
按照步骤1相同的方法，仅将式6所示化合物中的R按照表1所示进行替换，得到相应的式7所示产物，编号依次为1a～18a。
步骤2：中间体1b～18b制备(第二中间体)
中间体1a 1g(4.78mmol)置于20mL水中，加入氢氧化钠1.91g(47.8mmol)，100℃下加热搅拌反应6h。反应结束后冷却至室温，用稀盐酸中和pH至5～6，析出大量白色粉末。过滤并真空干燥得到中间体1b，产率：82.58％。
按照步骤2相同的方法，仅将化合物1a替换为化合物2a～18a，得到相应的式10所示产物，编号依次为1b～18b。
步骤3：中间体Ⅱ制备(第三中间体)
截短侧耳素5.4g(14.27mmol)溶于30mL吡啶，冰浴至0℃左右，加入对甲苯磺酰氯8.6g(45.11mmol)。冰浴搅拌反应3h后加入50mL冰水淬灭反应。将反应液倒入分液漏斗，先加50mL氯仿分层，除去水相，后用浓度为2mol/L的硫酸溶液100mL洗涤有机相2次，再用饱和碳酸氢钠溶液50mL洗涤有机相2次，最后用去离子水100mL洗涤有机相2次并用无水硫酸钠干燥。旋转蒸发干有机相，往残余固体中加入10mL异丙醇并加热溶解，冷却后析出大量白色粉末，减压抽滤，滤出物用异丙醇洗涤，产物白色粉末剩余液体自然挥发至干燥，得白色粉末即中间体Ⅱ6.0g，产率78.84％。
步骤4：化合物1～18的合成(具有式2结构)
中间体Ⅱ1g(1.88mmol)溶于30mL乙酸乙酯，取中间体1b 0.43g(2.25mmol)置于20mL水中，往水溶液中加入氢氧化钠0.9g(22.6mmol)，将上述水溶液加入反应体系中，70℃下搅拌反应3小时，即得目标产物。将反应液倒入分液漏斗中，加入30mL氯仿萃取，取有机相。所得有机相旋转蒸干得混合物经二氯甲烷复溶，加入100～200目硅胶1g充分混合，待溶剂挥发完后，将上述粗产物-硅胶粉混合物用柱层析过柱提纯(200～300目硅胶粉为固定相，石油醚：乙酸乙酯＝1：2为流动相)，得到化合物1的纯品。产率45.81％。
按照步骤4相同的方法，仅将化合物1b替换为化合物2b～18b，得到相应的式2所示产物，编号依次为1～18。
实施例2(化合物19～24的制备)
步骤1：中间体Ⅰ制备(第四中间体)
将氨基硫脲与氯乙酰氯反应，获取如式8所示结构的中间体Ⅰ(第四中间体)：
氨基硫脲1g(10.97mmol)置于20mL乙腈中，冰浴至0℃左右，缓慢滴加氯乙酰氯0.96mL(12.07mmol)，滴加结束后于室温反应2h。减压抽滤，滤出物用50mL乙醇重结晶，析出大量白色粉末，减压抽滤得白色粉末即中间体Ⅰ，产率为75.76％。
步骤2：中间体19a～24a制备(第五中间体)
中间体Ⅰ1g(5.99mmol)溶于20mL乙腈，加入碳酸钾1.66g(11.9mmol)和二乙胺0.48g(6.59mmol)，80℃下回流4小时。将反应液倒入分液漏斗，先加50mL氯仿分层，除去水相，后用去离子水100mL洗涤有机相2次并用无水硫酸钠干燥。旋转蒸发干有机相，得白色粉末即中间体19a，产率78.84％。
按照本实施例步骤2相同的方法，仅将二乙胺按照式9所示化合物中的R进行替换(参见表2)，得到相应的式9所示的第五中间体，编号依次为19a～24a。
步骤3：中间体19b～24b制备(第六中间体)
中间体19a 1g(4.78mmol)置于20mL水中，加入氢氧化钠1.91g(47.8mmol)，100℃下加热搅拌反应6h。反应结束后冷却至室温，用稀盐酸中和pH至5～6，析出大量白色粉末。过滤并真空干燥得到中间体1b，产率：82.58％。
按照本实施例步骤3相同的方法，仅将19a换成20a～24a，得到相应的式11所示产物，编号依次为19b～24b。
步骤4：化合物19～24制备(具有式3结构)
按照实施例1步骤4相同的方法，仅将化合物1b替换为化合物19b～24b，得到相应的式3所示产物，编号依次为19～24。
实施例3(化合物25～42的制备)
步骤1：中间体25a的合成(第七中间体)
1-(2-甲基苯基)哌嗪1g(5.67mmol)溶于10mL二氯甲烷，加入溴丙炔0.54mL(6.24mmol)室温下反应2小时，旋干溶剂，得到中间体25a，产率68.74％。
按照本实施例步骤1相同的方法，仅将式13所示化合物中的R按照表1所示进行替换，得到相应的式14所示产物，编号依次为25a～42a。
步骤2：中间体Ⅱ制备(第三中间体)
同实施例1步骤3。
步骤3：中间体Ⅲ的合成(第八中间体)
中间体Ⅱ1g(1.88mmol)溶于10mL丙酮中，叠氮化钠0.16g(2.44mmol)溶于10mL水中，合并，80℃下反应8小时。旋干丙酮，加入30mL氯仿萃取，用去离子水100mL洗涤有机相2次并用无水硫酸钠干燥。旋转蒸发干有机相，得到中间体Ⅲ的纯品。产率95.63％。
步骤4：化合物25～42制备(具有式4结构)
中间体25a 1g(4.67mmol)溶于20mL叔丁醇/水(体积比为1:1)，加入中间体Ⅲ2.07g(5.14mmol)和碘化亚铜0.18g(0.93mmol)，室温下反应8小时，即得目标产物。将反应液倒入分液漏斗中，加入30mL氯仿萃取，用去离子水100mL洗涤有机相2次并用无水硫酸钠干燥。所得有机相旋转蒸干得混合物经二氯甲烷复溶，加入100～200目硅胶1g充分混合，待溶剂挥发完后，将上述粗产物-硅胶粉混合物用柱层析过柱提纯(200～300目硅胶粉为固定相，石油醚：乙酸乙酯＝1：2为流动相)，得到化合物25的纯品。产率53.64％。
按照本实施例步骤4相同的方法，仅将25a换成26a～42a，得到相应的式4所示产物，编号依次为25～42。
实施例4(化合物43～48的制备)
步骤1：中间体43a的合成(第九中间体)
二乙胺1g(13.67mmol)溶于10mL四氢呋喃，加入溴丙炔1.30mL(15.04mmol)室温下反应2小时，旋干溶剂，得到中间体43a，产率72.26％。
按照本实施例步骤1相同的方法，仅将仲胺按照式14所示化合物中的R(表2)所示进行替换，得到相应的式14所示产物，编号依次为43a～48a。
步骤2：化合物43～48的合成(具有式5结构)
按照实施例3步骤4的方法制备，不同之处在于将25a替换为43a～48a，得到相应的式5所示产物，编号依次为43～48。
性能表征
1、最小抑菌浓度实验
采用肉汤法测定本发明所得的系列化合物的最小抑菌浓度(MIC)，实验对照药物选用沃尼妙林，沃尼妙林为截短侧耳素类抗生素，是该类抗生素中目前应用广泛的兽用抗生素。使用接种器将菌液接种在含不同浓度药物的96孔板中，接种菌量为106CFU/mL。37℃孵育24小时后观察结果，以不长菌的孔中的化合物浓度作为该化合物的最小抑菌浓度(MIC)。
实验中所用的菌株为金黄色葡萄球菌ATCC29213和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌ATCC43300、临床金黄色葡萄球菌AD3。
精密称取12.8mg所合成的目标化合物1～48，置于10mL的容量瓶中，用5％二甲基亚砜、5％吐温80和90％超纯水混合溶液溶解并定容至10mL，配成1280μg/mL的储备液。另分别精密称取12.8mg截短侧耳素、泰妙菌素、沃尼妙林和瑞他莫林，置于10mL容量瓶中，用上述混合溶液稀释并定容至10mL，配成1280μg/mL的对照储备液。
将储备液以倍比稀释法稀释在96孔板中，每个孔中含药液100μL，使96孔板中受试化合物的终浓度分别为32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.0312和0.0156μg/mL。
表3为化合物1～48及的泰妙菌素、沃尼妙林和瑞他莫林体外抑菌数据。其中，S.aureus 29213代表金黄色葡萄球菌、MRSA43300代表耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、临床金黄色葡萄球菌AD3(于华南农业大学兽医学院药理实验室分离鉴定)。
表3体外最小抑菌浓度数据
Figure BDA0002304177010000201
Figure BDA0002304177010000211
Figure BDA0002304177010000221
由表3数据可知，本发明的截短侧耳素衍生物具有较强的抗菌活性。
全部目标化合物1～48对金黄色葡萄球菌均表现出较好的抗菌活性，化合物4、8、9、10对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌抗菌活性接近目前临床上广泛使用的沃尼妙林。
2、体外杀菌曲线实验
根据表3中最小抑菌浓度数据，选取效果最好即最小抑菌浓度数值比较小的化合物1、4、8、10、25、32、37、39做体外杀菌曲线实验。取化合物1、4、8、10、25、32、37、39和泰妙菌素储备液，用MH肉汤配制成浓度分别为10×MIC、20×MIC、40×MIC、80×MIC、160×MIC和320×MIC的工作液。在各浓度工作液中加入上述配置好的菌液，使终浓度分别为1×MIC、2×MIC、4×MIC、8×MIC、16×MIC和32×MIC，以不含药物的菌液作为对照。置于37℃恒温震荡培养箱中培养。分别在培养的第0、3、6、9和24h取样。每次取样100μL，用无菌生理盐水进行10倍倍比稀释至适当浓度，取25μL每个梯度的稀释液悬滴于六等份的MH琼脂平板上晃开。待菌液晾干后，将平板置于37℃培养18～24h，进行细菌计数，检测限为40CFU/mL。以细菌对数值为纵坐标，以时间点为横坐标，建立不同浓度化合物和泰妙菌素对MRSA的杀菌曲线。结果见图1和图2。
图1和图2显示，化合物1、35、32、37和39在4×MIC时产生了抑菌效果，但未能达到对MRSA的完全清除，属时间依赖型抑菌药；化合物4、8和10在4×MIC时即可达到对MRSA的完全清除，属时间依赖型杀菌药。
3、小鼠大腿感染模型
试验动物：采用SPF级6周龄雌性ICR小鼠。购买后适应和观察一周，自由饮水和采食，饲喂不含抗生素的SPF全价日粮，未出现不良反应，待体重达到18～22g之间，禁饲不禁水12h后进行试验。
小鼠中性粒细胞减少症模型的建立：小鼠连续3d腹腔注射剂量为150mg/kg的环磷酰胺，第4d腹腔注射剂量为100mg/kg的环磷酰胺。通过血常规检测仪测定小鼠血液中中性粒细胞是否小于100个/mm3，若中性粒细胞小于100个/mm3，小鼠达到免疫抑制，则可进行下一步试验。
菌液配制：将单个MRSA菌落接种于含4mLBHI肉汤试管中，放入37℃恒温培养箱静置12h后，放入37℃、210rpm恒温摇床培养箱中培养0.5h，使细菌生长到对数期后用无菌生理盐水稀释菌液，将菌量调整为107CFU/mL备用。
将免疫抑制小鼠按泰妙菌素组、化合物4组、化合物10组和空白对照组随机分为4组，每组3只小鼠。取0.1mL制备好的107CFU/mL菌液，注射入小鼠的大腿肌肉内，2h后尾静脉注射20mg/kg泰妙菌素、化合物4、化合物10和等剂量溶剂。在给药后的24h窒息处死小鼠，立即分离小鼠大腿肌肉，并置于事先预冷的3mL无菌生理盐水中，用消毒后的组织匀浆机匀浆。取0.1mL匀浆液于无菌生理盐水中以10倍倍比稀释，最后取出25μL适当梯度的稀释液置于MH琼脂培养皿上涂板计数。根据菌落计数结果计算每克肌肉的菌量，采用SPSS 19软件进行统计分析，t检验，P<0.05为差异有统计学意义。图3为化合物4和10的小鼠大腿感染模型结果。
由图3可知，小鼠大腿感染模型结果表明化合物4和10对MRSA有良好的抗菌效果且优于泰妙菌素，化合物4比10更为有效减少小鼠大腿肌肉内细菌数量。
4、小鼠体内感染模型
试验动物：采用SPF级6周龄ICR小鼠，雌雄各半。购买后适应和观察一周，自由饮水和采食，饲喂不含抗生素的全价日粮，未出现不良反应，待体重达到18～22g之间，禁饲不禁水12h后进行试验。
小鼠中性粒细胞减少症模型的建立：连续4d腹腔注射剂量为150mg/kg的环磷酰胺，第5d腹腔注射剂量为100mg/kg的环磷酰胺。用于进行下一步试验。
菌液配制：选取1个MRSA单菌落接种于20mLMH肉汤培养基中，37℃静置培养12h，37℃振荡30min，然后用生理盐水稀释至106CFU/mL备用。
达到免疫抑制状态小鼠雌雄各半，随机分为4组，每组4只，分笼饲养。分别设置菌量为107CFU/mL组、106CFU/mL组、105CFU/mL组和对照组。感染途径为腹腔注射，剂量为0.5mL。对照组给予无菌的同等剂量生理盐水。各组试验小鼠自由采食和饮水，连续观察7d，每天观察小鼠死亡数。
取禁食12h的免疫抑制小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，每组10只，分笼饲养。分为阳性对照组(仅给予MRSA感染)、阴性对照组(仅注射0.5mL生理盐水)、药物对照组(MRSA感染后给予泰妙菌素治疗)和试验组(MRSA感染后给予化合物4治疗)。腹腔注射0.5mL106CFU/mL菌液，1h后泰妙菌素组和试验组分别尾静脉注射30mg/kg泰妙菌素和化合物4，阳性对照组和阴性对照组尾静脉注射等剂量的5％DMSO、5％吐温80和90％生理盐水。小鼠自由采食和饮水，连续观察7d，得到对小鼠生存曲线。结果如图4所示。
图4结果表明，在致死菌量的MRSA感染下，静脉注射30mg/kg剂量的化合物4治疗组的小鼠存活率为50％，高于同剂量泰妙菌素治疗组。
由以上实施例可知，本发明提供了一种具有三氮唑侧链的截短侧耳素衍生物及其制备方法和应用，本发明的截短侧耳素衍生物具有良好的抗菌活性，特别适合作为新型抗菌药物用于动物或人全身系统感染。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (8)

1.一种具有三氮唑侧链的截短侧耳素衍生物，其特征在于，为具有式2～式5任意一项所示结构的化合物或其药用盐；
Figure FDA0002304177000000011
其中，R1、R2和R3独立地为氢原子、羟基、氨基、巯基、羟甲基、胺甲基、硝基、卤素、三卤代甲基、甲基、天然氨基酸酰氨基和碳原子数为1～6的烷氧基中的一种；
R4为仲胺基。
2.根据权利要求1所述的截短侧耳素衍生物，其特征在于，所述式2～式5中，R1为甲基，R2为氢原子，R3为氢原子；
或R1为氢原子，R2为甲基，R3为氢原子；
或R1为氢原子，R2为氢原子，R3为甲基；
或R1为氟原子，R2为氢原子，R3为氢原子；
或R1为氢原子，R2为氟原子，R3为氢原子；
或R1为氢原子，R2为氢原子，R3为氟原子；
或R1为氯原子，R2为氢原子，R3为氢原子；
或R1为氢原子，R2为氯原子，R3为氢原子；
或R1为氢原子，R2为氢原子，R3为氯原子；
或R1为甲氧基，R2为氢原子，R3为氢原子；
或R1为氢原子，R2为甲氧基，R3为氢原子；
或R1为氢原子，R2为氢原子，R3为甲氧基；
或R1为硝基，R2为氢原子，R3为氢原子；
或R1为氢原子，R2为硝基，R3为氢原子；
或R1为氢原子，R2为氢原子，R3为硝基；
或R1为三氟甲基，R2为氢原子，R3为氢原子；
或R1为氢原子，R2为三氟甲基，R3为氢原子；
或R1为氢原子，R2为氢原子，R3为三氟甲基；
或R1为羟基，R2为氢原子，R3为氢原子；
或R1为氢原子，R2为羟基，R3为氢原子；
或R1为氢原子，R2为氢原子，R3为羟基；
所述R4为二乙胺基、二环己胺基、吗啉基、4-羟基哌啶基、3-羟甲基哌啶基或4-哌啶乙醇基。
3.根据权利要求1或2所述的截短侧耳素衍生物，其特征在于，式2～式5任意一项所示结构的化合物的药用盐为式2～式5任意一项所示结构的化合物，与盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、醋酸、富马酸、马来酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、谷氨酸或天冬氨酸形成的盐。
4.权利要求1～3任一项所述截短侧耳素衍生物的制备方法，其特征在于，(1)当所述截短侧耳素衍生物为具有式2所示结构的化合物时，包括以下步骤：将氨基硫脲与具有式6所示结构的苯甲酰氯衍生物混合，进行酰基化反应，得到具有式7所示结构的第一中间体；
将所述第一中间体在加热和碱性条件下发生自身缩合反应，得到具有式
Figure FDA0002304177000000022
将截短侧耳素与对甲苯磺酰氯混合，进行取代反应，得到具有式12所示结构的第三中间体；
Figure FDA0002304177000000031
将所述第二中间体与第三中间体混合，进行取代反应，得到具有式2所示结构的截短侧耳素衍生物；
(2)当所述截短侧耳素衍生物为具有式3所示结构的化合物时，包括以下步骤：将氨基硫脲与氯乙酰氯发生酰基化反应，得到具有式8所示结构的第四中间体；
将所述第四中间体与仲胺混合，进行取代反应，得到具有式9所示结构的第五中间体；
Figure FDA0002304177000000033
将所述第五中间体在加热和碱性条件下发生自身缩合反应，得到具有式11所示结构的第六中间体；
Figure FDA0002304177000000034
将所述第六中间体与所述第三中间体混合，进行取代反应，得到具有式3所示结构的截短侧耳素衍生物；
(3)当所述截短侧耳素衍生物为具有式4所示结构的化合物时，包括以下步骤：将溴丙炔与具有式13所示结构的苯基哌嗪衍生物混合，进行取代反应，得到具有式14所示结构的第七中间体；
Figure FDA0002304177000000035
将所述第三中间体与叠氮化钠混合，进行取代反应，得到具有式16所示结构的第八中间体；
Figure FDA0002304177000000036
将所述第八中间体与第七中间体混合，进行Click反应，得到具有式4所示结构的截短侧耳素衍生物；
(4)当所述截短侧耳素衍生物为具有式5所示结构的化合物时，包括以下步骤：将溴丙炔与仲胺混合，进行取代反应，得到具有式15所示结构的第九中间体；
将所述第九中间体与所述第八中间体混合，进行Click反应，得到具有式5所示结构的截短侧耳素衍生物。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，
制备第一中间体时，所述酰基化反应在有机溶剂和催化剂存在条件下进行，所述有机溶剂包括乙腈，所述催化剂包括吡啶，所述氨基硫脲、具有式6所示结构的苯甲酰氯衍生物和催化剂的摩尔比为1：(1.1～1.5)：(0.1～0.5),所述有机溶剂与氨基硫脲的用量比为(15～30)mL：1g；所述酰基化反应的温度为室温，时间为2～4h；
制备第二中间体时，加热的温度为90～100℃，时间为6～8h；所述碱性条件由碱性水溶液提供，所述碱性水溶液为氢氧化钠水溶液、氢氧化钾水溶液、氢氧化铯水溶液或碳酸钠水溶液，所述碱性水溶液的浓度为50～70wt％；所述第一中间体与碱性水溶液中碱的摩尔比为1:(10～15)；
制备第三中间体时，所述取代反应在溶剂存在条件下进行，所述溶剂包括吡啶，所述对甲苯磺酰氯和截短侧耳素的摩尔比为(2～4)：1，所述溶剂和截短侧耳素的用量比为(20～40)mL：5.4g；所述取代反应的温度为0～5℃，时间为3～5h；
制备具有式2所示结构的截短侧耳素衍生物时，所述取代反应在极性非质子性溶剂、碱性试剂以及水存在条件下进行，所述极性非质子性溶剂为二氯甲烷、乙酸乙酯、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺或吡啶，所述碱性试剂为氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铯或碳酸钠，所述第三中间体、碱性试剂与第二中间体的摩尔比为1：(1.1～1.2)：(10～15)，所述极性非质子性溶剂与第三中间体的用量比为(20～40)mL：1g；所述取代反应的温度为0～70℃，时间为1～36h；
制备第四中间体时，所述酰基化反应在溶剂存在条件下进行，所述溶剂包括乙腈，所述氨基硫脲和氯乙酰氯的摩尔比为1:(1.1～1.5)；所述有机溶剂与氨基硫脲的用量比为(20～30)mL：1g；所述酰基化反应的温度为室温，时间为2～3h；
制备第五中间体时，所述取代反应在溶剂和缚酸剂存在条件下进行，所述溶剂包括乙腈，所述缚酸剂包括碳酸钾，所述第四中间体、仲胺和缚酸剂的摩尔比为1:(1.1～1.2):(1.8～4)，所述溶剂与第四中间体的用量比为(20～30)mL：1g；所述取代反应的温度为70～80℃，时间为4～5h；
制备第六中间体时，加热的温度为90～100℃，时间为6～8h；所述碱性条件由碱性水溶液提供，所述碱性水溶液为氢氧化钠水溶液、氢氧化钾水溶液、氢氧化铯水溶液或碳酸钠水溶液，所述碱性水溶液的浓度为50～70wt％；所述第五中间体与碱性水溶液中碱的摩尔比为1:(10～15)；
制备具有式3所示结构的截短侧耳素衍生物时，所述取代反应在极性非质子性溶剂、碱性试剂以及水存在条件下进行，所述极性非质子性溶剂为二氯甲烷、乙酸乙酯、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺或吡啶，所述碱性试剂为氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铯或碳酸钠，所述第三中间体、碱性试剂与第六中间体的摩尔比为1：(1.1～1.2)：(10～15)，所述极性非质子性溶剂与第三中间体的用量比为(20～40)mL：1g；所述取代反应的温度为0～70℃，时间为1～36h；
制备第七中间体时，所述取代反应在溶剂存在条件下进行，所述溶剂包括二氯甲烷，所述溴丙炔与具有式13所示结构的苯基哌嗪衍生物的摩尔比为(1.1～2)：1，所述溶剂与具有式13所示结构的苯基哌嗪衍生物的用量比为(10～20)mL：1g；所述取代反应的温度为20～25℃，时间为2～24h；
制备第八中间体时，所述取代反应在非质子性溶剂和水存在条件下进行，所述非质子性溶剂为二氯甲烷、乙酸乙酯、N,N-二甲基甲酰胺、丙酮或吡啶；所述非质子性溶剂、水和第三中间体的用量比为(10～20)mL：(10～20)mL：1g，所述叠氮化钠与第三中间体的摩尔比为(1～3):1；所述取代反应的温度为0～80℃，时间为1～12h；
制备具有式4所示结构的截短侧耳素衍生物时，所述Click反应在溶剂和催化剂存在条件下进行，所述溶剂为叔丁醇/水溶剂，所述叔丁醇和水的体积比为1：(1～1.5)；所述催化剂包括碘化亚铜；所述第七中间体、第八中间体和催化剂的摩尔比为1:(1.1～1.5):(0.1～0.5)，所述溶剂与第七中间体的用量比为(15～25)mL：1g；所述Click反应的温度为0～80℃，时间为1～36h；
制备第九中间体时，所述取代反应在溶剂存在条件下进行，所述溶剂包括四氢呋喃，所述溴丙炔和仲胺的摩尔比为(1.1～1.2)：1，所述溶剂与仲胺的用量比为(10～20)mL：1g；所述取代反应的温度为25～30℃，时间为2～4h；
制备具有式5所示结构的截短侧耳素衍生物时，所述Click反应在溶剂和催化剂存在条件下进行，所述溶剂为叔丁醇/水溶剂，所述叔丁醇和水的体积比为1：(1～1.5)；所述催化剂包括碘化亚铜；所述第九中间体、第八中间体和催化剂的摩尔比为1:(1.1～1.5):(0.1～0.5)，所述溶剂与第九中间体的用量比为(15～25)mL：1g；所述Click反应的温度为0～80℃，时间为1～36h。
6.权利要求1～3任一项所述截短侧耳素衍生物在制备治疗感染性疾病的药物中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述药物包括截短侧耳素衍生物和药学上可接受的辅料。
8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述感染性疾病为人或动物经支原体或金黄色葡萄球菌感染引起的感染性疾病。
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Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113149929A (zh) * 2021-04-22 2021-07-23 华南农业大学 一种具有1，3，4-恶二唑侧链的截短侧耳素衍生物及制备与应用
WO2021219813A1 (en) * 2020-05-01 2021-11-04 Syddansk Universitet Antibacterial and antifungal pleuromutilin conjugates
CN114456160A (zh) * 2022-03-30 2022-05-10 西安康远晟生物医药科技有限公司 一种具有抗耐药菌活性的含噁二唑-吡啶季铵盐侧链截短侧耳素衍生物及其制备方法与应用
CN114539241A (zh) * 2022-02-28 2022-05-27 陕西科技大学 一种含噻唑-吡啶甲基芳杂环季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物及其制备方法与应用
CN114634498A (zh) * 2022-03-29 2022-06-17 陕西科技大学 一种含噻唑-吡啶苄基季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物及其制备方法与应用
CN114671865A (zh) * 2022-03-29 2022-06-28 陕西科技大学 一种含噻唑-吡啶烷基季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物及其制备方法与应用

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4428953A (en) * 1979-01-12 1984-01-31 Sandoz, Ltd. Pleuromutilin derivatives, their production and use
WO2000037074A1 (en) * 1998-12-18 2000-06-29 Smithkline Beecham Plc Mutilin 14-ester derivatives having antibacterial activity
CN1182116C (zh) * 1999-07-30 2004-12-29 生物化学有限公司 姆替林衍生物及其在制备作为抗菌剂的药物中的用途
WO2014205414A1 (en) * 2013-06-21 2014-12-24 The Regents Of The University Of California Expanded therapeutic potential in nitroheteroaryl antimicrobials
CN110372615A (zh) * 2019-07-08 2019-10-25 华南农业大学 一种具有2-氨基苯硫醇和1,2,3-三氮唑侧链的截短侧耳素衍生物及制备与应用
CN110467603A (zh) * 2019-07-08 2019-11-19 华南农业大学 一种具有哌嗪及1,2,3-三氮唑仲胺侧链的截短侧耳素衍生物及制备与应用

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4428953A (en) * 1979-01-12 1984-01-31 Sandoz, Ltd. Pleuromutilin derivatives, their production and use
WO2000037074A1 (en) * 1998-12-18 2000-06-29 Smithkline Beecham Plc Mutilin 14-ester derivatives having antibacterial activity
CN1182116C (zh) * 1999-07-30 2004-12-29 生物化学有限公司 姆替林衍生物及其在制备作为抗菌剂的药物中的用途
WO2014205414A1 (en) * 2013-06-21 2014-12-24 The Regents Of The University Of California Expanded therapeutic potential in nitroheteroaryl antimicrobials
CN110372615A (zh) * 2019-07-08 2019-10-25 华南农业大学 一种具有2-氨基苯硫醇和1,2,3-三氮唑侧链的截短侧耳素衍生物及制备与应用
CN110467603A (zh) * 2019-07-08 2019-11-19 华南农业大学 一种具有哌嗪及1,2,3-三氮唑仲胺侧链的截短侧耳素衍生物及制备与应用

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
FARIDOON等: "3-Mercapto-1,2,4-triazoles and N-acylated thiosemicarbazides as metallo-β-lactamase inhibitors", 《BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS》 *
IDA DREIER等: "A click chemistry approach to pleuromutilin derivatives. Part 3:Extended footprinting analysis and excellent MRSA inhibition for a derivative with an adenine phenyl side chain", 《BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS》 *
LINE LOLK等: "A Click Chemistry Approach to Pleuromutilin Conjugates with Nucleosides or Acyclic Nucleoside Derivatives and Their Binding to the Bacterial Ribosome", 《JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY》 *
YUKIKO MIYAMOTO等: "Expanded therapeutic potential in activity space of next-generation 5-nitroimidazole antimicrobials with broad structural diversity", 《PNAS》 *
YUN-GE LI等: "Antibacterial Activity and Structure Activity Relationship of a Series ofNewly Synthesized Pleuromutilin Derivatives", 《CHEMISTRY & BIODIVERSITY》 *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2021219813A1 (en) * 2020-05-01 2021-11-04 Syddansk Universitet Antibacterial and antifungal pleuromutilin conjugates
CN113149929A (zh) * 2021-04-22 2021-07-23 华南农业大学 一种具有1，3，4-恶二唑侧链的截短侧耳素衍生物及制备与应用
CN114539241A (zh) * 2022-02-28 2022-05-27 陕西科技大学 一种含噻唑-吡啶甲基芳杂环季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物及其制备方法与应用
CN114634498A (zh) * 2022-03-29 2022-06-17 陕西科技大学 一种含噻唑-吡啶苄基季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物及其制备方法与应用
CN114671865A (zh) * 2022-03-29 2022-06-28 陕西科技大学 一种含噻唑-吡啶烷基季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物及其制备方法与应用
CN114456160A (zh) * 2022-03-30 2022-05-10 西安康远晟生物医药科技有限公司 一种具有抗耐药菌活性的含噁二唑-吡啶季铵盐侧链截短侧耳素衍生物及其制备方法与应用
CN114456160B (zh) * 2022-03-30 2024-02-23 西安康远晟生物医药科技有限公司 一种具有抗耐药菌活性的含噁二唑-吡啶季铵盐侧链截短侧耳素衍生物及其制备方法与应用

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