CN110812478A - 免疫疗法与mdm2抑制剂的组合 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及包含有效量免疫检查点分子调节剂和有效量MDM2抑制剂的联合疗法,其中MDM2抑制剂由下式表示:
Description
技术领域
本发明涉及联合免疫疗法与MDM2抑制剂来治疗病况和疾病,其中治疗抑制 MDM2和MDM2相关蛋白会提供益处。
背景技术
MDM2抑制剂干扰MDM2癌蛋白与肿瘤抑制因子p53蛋白的结合,从而作为药物 性p53激活剂。新证据表明,p53功能障碍也会加剧炎症并支持肿瘤免疫逃避,因 此,p53功能障碍作为肿瘤发生的免疫驱动因子(Guo G,Cancer Research,2017;77 (9):2292)。
MDM2和p53是自调节反馈回路的一部分(Wu等,Genes Dev.7:1126(1993))。 MDM2在转录上是由p53激活,MDM2进而通过至少三种机制来抑制p53活性(Wu 等,Genes Dev.7:1126(1993))。第一,MDM2蛋白直接结合到p53反式激活结构域, 并且因此抑制p53介导的反式激活。第二,MDM2蛋白含有核输出信号序列,并且在 结合到p53时,诱导p53的核输出,从而阻止p53与所靶向的DNA结合。第三, MDM2蛋白是一种E3泛素连接酶并且在结合到p53时,能够促进p53降解。
APG-115是一种新型,生物可利用的,高效的MDM2抑制剂。
APG-115目前正在患有晚期实体瘤或淋巴瘤的患者中进行临床试验(NCT02935907)。鉴于APG-115的效力,进一步增强该候选药物在癌症治疗中的功效 将是有利的。
发明内容
本申请发明人现已发现,MDM2抑制剂或其药学上可接受的盐和免疫检查点分子的调节剂(例如,共刺激分子的激活剂或免疫检查点分子的抑制剂)共同给药可协同 治疗癌症。特别地,如本发明公开的实施例1-3中所证明,令人惊讶的,添加MDM2 抑制剂(例如APG-115)能够增强免疫疗法(例如抗PD-1疗法)的功效,使得应答 率增加,完全消退(CR)反应者更多,肿瘤生长延迟,以及将耐药性(resistance)肿 瘤转化为应答性肿瘤。
因此,本发明提供在受试者中治疗癌症的方法,该方法通过向有需要的受试者施用:a)有效量的免疫检查点分子调节剂;b)有效量的MDM2抑制剂,其中所述 MDM2抑制剂由下式(式(I))表示:
或其药学上可接受的盐,其中的每个变量如本申请中所定义。
在要求保护的发明中可治疗的癌症包括:肾上腺皮质癌,晚期癌症,肛门癌,再 生障碍性贫血,胆管癌,膀胱癌,骨癌,骨转移,成人脑/中枢神经系统肿瘤,儿童脑/ 中枢神经系统肿瘤,乳腺癌,男性乳腺癌,儿童癌症,原发癌未知癌症,Castleman 病,宫颈癌,绒毛膜癌,结肠/直肠癌,子宫内膜癌,食道癌,尤因(Ewing)家族肿 瘤,眼癌,胆囊癌,胃肠道类癌,胃肠道间质瘤(GIST),妊娠滋养细胞疾病,头颈 癌,肝细胞瘤,霍奇金病,卡波西肉瘤,肾癌,喉癌和下咽癌,白血病-成人急性淋巴 细胞(ALL),白血病-急性髓细胞(AML),白血病-慢性淋巴细胞(CLL),白血 病-慢性粒细胞(CML),白血病-慢性粒单核细胞(CMML),白血病,肝癌,肺 癌-非小细胞,肺癌-小细胞,肺类癌,皮肤淋巴瘤,恶性间皮瘤,Merkel细胞癌,多发性骨髓瘤,骨髓增生异常综合征,鼻腔和鼻窦癌,鼻咽癌,神经母细胞瘤,非霍奇 金淋巴瘤,儿童非霍奇金淋巴瘤,口腔和口咽癌,骨肉瘤,卵巢癌,胰腺癌,阴茎 癌,垂体瘤,前列腺癌,视网膜母细胞瘤,横纹肌肉瘤,唾液腺癌,肉瘤-成人软组 织癌,皮肤癌-基底和鳞状细胞,皮肤癌-黑色素瘤,小肠癌,胃癌,睾丸癌,胸腺 癌,甲状腺癌,子宫肉瘤,尿路上皮癌,阴道癌,外阴癌,华氏(Waldenstrom)巨球 蛋白血症和肾母细胞瘤(Wilms Tumor)。
在某些实施方式中,癌症选自胰腺癌,腺样囊性癌,肺癌,胃肠道间质瘤和乳腺癌。在某些实施方式中,癌症是局部晚期或转移性实体瘤或淋巴瘤。在某些实施方式 中,受试者是经历过治疗的并且显示疾病进展。
本发明还提供了药物组合物,其包含a)有效量的免疫检查点分子调节剂;b)有 效量的MDM2抑制剂,其中MDM2抑制剂由下式表示:
或其药学上可接受的盐,其中的每个变量如本申请中所定义。
本发明还提供了a)有效量的免疫检查点分子调节剂;b)有效量的本发明所公开的式(I)MDM2抑制剂或其药学上可接受的盐,用于制备治疗癌症的药物的用途。
在另一个实施方案中,本发明提供下述的组合:a)有效量的免疫检查点分子调节剂;b)有效量的本发明所公开的式(I)MDM2抑制剂或其药学上可接受的盐,用于 治疗癌症。
本申请还包括以下实施方式:
1.治疗癌症的方法,包括对需要治疗的受试者施用:
a)有效量的免疫检查点分子调节剂;和
b)有效量的MDM2抑制剂,其中,所述MDM2抑制剂由下式表示:
或其药学上可接受的盐,其中
B是C4-7碳环;
R1是H、取代或未取代的C1-4烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取 代的杂环烷基、ORa或NRaRb;
n是0、1或2;
R2、R3、R4、R5、R7、R8、R9,和R10独立地选自由H、F、Cl、CH3和CF3组成的组;
Ra是氢或取代或未取代的C1-4烷基;
Rb是氢或取代或未取代的C1-4烷基;
Rc和Rd是环B的一个碳原子上的取代基,其中
Rc是H、C1-3烷基、C1-3亚烷基-ORa、ORa、或卤代;
Rd是H、C1-3烷基、C1-3亚烷基-ORa、ORa、或卤代;或
Rc和Rd与它们所连接的碳一起形成4至6元螺环取代基,所述取代基任选 地含有氧原子;并且
Re是-C(=O)ORa、-C(=O)NRaRb、或-C(=O)NHSO2CH3。
2.如实施方式1所述方法,其中
B是
Rc和Rd是F和F、H和H、OH和CH3、OH和H、CH3和CH3、CH3和OH、H 和OH、CH2CH3和CH2CH3、或CH2OH和CH2OH。
4.如实施方式1-3中任一项所述方法,其中R2是H;R3是卤代;R4和R5均是H。
5.如实施方式1-4中任一项所述方法,其中R7是氟代;R8、R9、和R10中的每一 个是H;且Re是-C(=O)OH、-C(=O)NH2或-C(=O)NHSO2CH3。
6.如实施方式1所述方法,其中所述MDM2抑制剂选自:
7.如实施方式1所述方法,其中所述MDM2抑制剂是
或其药学上可接受的盐。
8.如实施方式1-7中任一项所述方法,其中所述免疫检查点分子调节剂是抗体、抗体Fab片段、双价(divalent)抗体、抗体药物偶联物、scFv、融合蛋白、二价 抗体或四价抗体。
9.如实施方式1-8中任一项所述方法,其中所述免疫检查点分子调节剂是单克隆抗体或其抗原结合片段。
10.如实施方式1-9中任一项所述方法,其中所述免疫检查点分子是一种抑制性免疫检查点分子,且所述免疫检查点分子调节剂是所述抑制性免疫检查点分子抑 制剂。
11.如实施方式1-9中任一项所述方法,其中所述免疫检查点分子是共刺激检查点分子,且所述免疫检查点分子调节剂是所述共刺激检查点分子激活剂。
12.如实施方式1-9中任一项所述方法,其中所述免疫检查点分子是PD-1、PD- L1、PD-L2、CTLA-4、TIM-3、LAG3、CD160、2B4、TGFβ、VISTA、 BTLA、TIGIT或LAIR1。
13.如实施方式1-9中任一项所述方法,其中所述免疫检查点分子是OX40、CD2、CD27、ICAM-1、NKG2C、SLAMF7、NKp80、B7-H3、LFA-1、1COS、4- 1BB、GITR、CD30、CD40、BAFFR、HVEM、CD7、LIGHT或CD83。
14.如实施方式1-9中任一项所述方法,其中所述免疫检查点分子是PD-1。
15.如实施方式1-9中任一项所述方法,其中所述免疫检查点分子是PD-L1。
16.如实施方式1-9中任一项所述方法,其中所述免疫检查点分子是CTLA-4。
17.如实施方式1-9中任一项所述方法,其中所述免疫检查点分子调节剂恢复抗肿瘤T细胞活性。
18.如实施方式1-9中任一项所述方法,其中所述免疫检查点分子调节剂阻断T细胞抑制细胞活性。
19.如实施方式1-9中任一项所述方法,其中所述免疫检查点分子调节剂是共刺激检 查点分子激活剂,且所述共刺激检查点分子激活剂改变完全T细胞激活所需的 共刺激信号。
20.如实施方式1-9中任一项所述方法,其中所述免疫检查点分子调节剂是帕博利珠单抗、伊匹单抗、纳武单抗、阿特珠单抗、阿维单抗或德瓦鲁单抗。
21.如实施方式1-9中任一项所述方法,其中所述免疫检查点分子调节剂是AGEN-1884、BMS-986016、CS-1002、LAG525、MBG453、MEDI-570、OREG- 103/BY40、lirilumab或tremelimumab。
22.如实施方式1-9中任一项所述方法,其中所述免疫检查点分子调节剂是帕博利珠单抗、纳武单抗、AMP-224、AMP-514、BGB-A317、cemiplimab、JS001、CS1001、PDR-001、PF-06801591、IBI-308、pidilizumab、SHR-1210或TSR- 042。
23.如实施方式1-9中任一项所述方法,其中所述免疫检查点分子调节剂是阿特珠单抗、阿维单抗、德瓦鲁单抗、AMP-224、JS003、LY3300054、MDX-1105、 SHR-1316、KN035或CK-301。
24.如实施方式1-23中任一项所述方法,其中所述MDM2抑制剂的有效剂量是从 约1mg至约300mg。
25.如实施方式1-23中任一项所述方法,其中所述MDM2抑制剂的有效剂量是从 约5mg至约200mg。
26.如实施方式1-25中任一项所述方法,其中所述免疫检查点分子调节剂和所述MDM2抑制剂同步给药。
27.如实施方式1-25中任一项所述方法,其中所述免疫检查点分子调节剂和所述MDM2抑制剂按顺序给药。
28.如实施方式1-27中任一项所述方法,其中所述癌症选自下组:肾上腺皮质癌、晚期癌症、肛门癌、再生障碍性贫血、胆管癌、膀胱癌、骨癌、骨转移、成人 脑/中枢神经系统肿瘤、儿童脑/中枢神经系统肿瘤、乳腺癌、男性乳腺癌、儿童 癌症、原发癌未知癌症、Castleman病、宫颈癌、结肠/直肠癌、子宫内膜癌、 食道癌、Ewing家族肿瘤、眼癌、胆囊癌、胃肠道类癌、胃肠道间质瘤 (GIST)、妊娠滋养细胞疾病、头颈癌、霍奇金病、卡波西肉瘤、肾癌、喉癌 和下咽癌、白血病-成人急性淋巴细胞(ALL)、白血病-急性髓细胞 (AML)、白血病-慢性淋巴细胞(CLL)、白血病-慢性髓细胞(CML)、白 血病-慢性粒单核细胞(CMML)、儿童白血病、肝癌、肺癌-非小细胞、肺癌- 小细胞、肺类癌、皮肤淋巴瘤、恶性间皮瘤、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综 合征、鼻腔和鼻窦癌、鼻咽癌、神经母细胞瘤、非霍奇金淋巴瘤、儿童非霍奇 金淋巴瘤、口腔和口咽癌、骨肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、阴茎癌、垂体瘤、前列 腺癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌肉瘤、唾液腺癌、肉瘤-成人软组织癌、皮肤癌 -基底和鳞状细胞、皮肤癌-黑色素瘤、小肠癌、胃癌、睾丸癌、胸腺癌、甲状 腺癌、子宫肉瘤、阴道癌、外阴癌、华氏巨球蛋白血症、Merkel细胞癌、尿路 上皮癌、微卫星标记高度不稳定或错配修复缺陷的实体瘤、肉瘤、结肠癌、绒 毛膜癌、急性髓性白血病、淋巴瘤、白血病和肾母细胞瘤。
29.如实施方式1-27中任一项所述方法,其中所述癌症选自下组:黑色素瘤,霍奇金淋巴瘤、肺癌、肾癌、膀胱癌、头颈癌、Merkel细胞癌、尿路上皮癌、微卫 星标记高度不稳定或错配修复缺陷的实体瘤、肉瘤、结肠癌、前列腺癌、绒毛 膜癌、乳腺癌、视网膜母细胞瘤、胃癌、急性髓性白血病、淋巴瘤、多发性骨 髓瘤或白血病。
30.如实施方式1-27中任一项所述方法,其中所述癌症是肝细胞瘤或结直肠癌。
31.如实施方式1-27中任一项所述方法,其中所述癌症具有野生型或突变型p53活性。
32.药物组合物,包括
a)有效量的免疫检查点分子调节剂;和
b)有效量的MDM2抑制剂,其中,MDM2抑制剂由下式表示:
或其药学上可接受的盐,其中
B是C4-7碳环;
R1是H、取代或未取代的C1-4烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取 代的杂环烷基、ORa或NRaRb;
n是0、1或2;
R2、R3、R4、R5、R7、R8、R9和R10独立地选自由H、F、Cl、CH3和CF3组成的组;
Ra是氢或取代或未取代的C1-4烷基;
Rb是氢或取代或未取代的C1-4烷基;
Rc和Rd是环B的一个碳原子上的取代基,其中
Rc是H、C1-3烷基、C1-3亚烷基-ORa、ORa、或卤代;
Rd是H、C1-3烷基、C1-3亚烷基-ORa、ORa、或卤代;或
Rc和Rd与它们所连接的碳一起形成4至6元螺环取代基,所述取代基任选 地含有氧原子;并且
Re是-C(=O)ORa、-C(=O)NRaRb或-C(=O)NHSO2CH3。
33.如实施方式32所述的药物组合物,其中
Rc和Rd是F和F、H和H、OH和CH3、OH和H、CH3和CH3、CH3和OH、H 和OH、CH2CH3和CH2CH3或CH2OH和CH2OH。
34.如实施方式32或33所述的药物组合物,其中是H、CH3或CH2CH3。
35.如实施方式32-34中任一项所述的药物组合物,其中R2是H;R3是卤代;R4和R5均是H。
36.如实施方式32-35中任一项所述的药物组合物,其中R7是氟代;R8、R9和R10中的每一个是H;且Re是-C(=O)OH、-C(=O)NH2或-C(=O)NHSO2CH3。
37.如实施方式32所述药物组合物,其中所述MDM2抑制剂选自:
38.如实施方式32所述的药物组合物,其中所述MDM2抑制剂是
或其药学上可接受的盐。
39.如实施方式32-38中任一项所述的药物组合物,其中所述免疫检查点分子调节剂是抗体,抗体Fab片段,双价抗体,抗体药物偶联物,scFv,融合蛋白,二 价抗体或四价抗体。
40.如实施方式32-39中任一项所述的药物组合物,其中所述免疫检查点分子调节剂是单克隆抗体或其抗原结合片段。
41.如实施方式32-40中任一项所述的药物组合物,其中所述免疫检查点分子是PD-1、PD-L1、PD-L2、CTLA-4、TIM-3、LAG3、CD160、2B4、TGFβ、 VISTA、BTLA、TIGIT或LAIR1。
42.如实施方式32-40中任一项所述的药物组合物,其中所述免疫检查点分子是OX40、CD2、CD27、ICAM-1、NKG2C、SLAMF7、NKp80、B7-H3、LFA- 1、1COS、4-1BB、GITR、CD30、CD40、BAFFR、HVEM、CD7、LIGHT或 CD83。
43.如实施方式32-40中任一项所述的药物组合物,其中所述免疫检查点分子是PD-1。
42.如实施方式32-40中任一项所述的药物组合物,其中所述免疫检查点分子是PD-L1。
45.如实施方式32-40中任一项所述的药物组合物,其中所述免疫检查点分子是CTLA-4。
46.如实施方式32-40中任一项所述的药物组合物,其中所述免疫检查点分子调节剂恢复抗肿瘤T细胞活性。
47.如实施方式32-40中任一项所述的药物组合物,其中所述免疫检查点分子调节剂阻断T细胞抑制细胞活性。
48.如实施方式32-40中任一项所述的药物组合物,其中所述免疫检查点分子调节剂是共刺激检查点分子激活剂,且所述共刺激检查点分子激活剂改变完全T细 胞激活所需的共刺激信号。
49.如实施方式32-40中任一项所述的药物组合物,其中所述免疫检查点分子调节剂是帕博利珠单抗,伊匹单抗,纳武单抗,阿特珠单抗,阿维单抗或德瓦鲁单 抗。
50.如实施方式32-40中任一项所述的药物组合物,其中所述免疫检查点分子调节剂是LAG525、BMS-986016、MBG453、MEDI-570、OREG-103/BY40、 lirilumab或tremelimumab。
51.如实施方式32-40中任一项所述的药物组合物,其中所述免疫检查点分子调节剂是JS001、SHR-1210、BGB-A317、IBI-308或REGN2810。
52.如实施方式32-40中任一项所述的药物组合物,其中所述免疫检查点分子调节剂是JS003、SHR-1316、KN035或BMS-936559。
53.如实施方式1所述的方法,其中所述MDM2抑制剂或其药学上可接受的盐每隔一天口服施用。
54.如实施方式53所述的方法,其中所述MDM2抑制剂每隔一天以约30mg至约250mg的量口服施用。
55.如实施方式53所述的方法,其中所述MDM2抑制剂每隔一天以约50mg至约250mg的量口服施用。
56.如实施方式53所述的方法,其中所述MDM2抑制剂每隔一天以约50mg, 100mg,150mg或200mg的量口服施用。
57.如实施方式53-56中任一项所述的方法,其中所述MDM2抑制剂是
或其药学上可接受的盐。
58.如实施方式57所述的方法,其中所述免疫检查点分子是PD-1。
59.如实施方式57所述的方法,其中PD-1在21天或28天治疗周期的第1天通过 静脉内输注以200mg的量施用。
60.如实施方式1所述的方法,其中所述方法包括至少一个21天或28天的治疗周期,其中所述MDM2抑制剂或其药学上可接受的盐在所述21天或28天治疗周 期的前两个连续周中每隔一天在有此需要的患者中口服施用,并且在所述治疗 周期的第三周不施用;或者该方法包括至少一个28天的治疗周期,其中 MDM2抑制剂或其药学上可接受的盐在所述28天治疗周期的前三个连续周中 每隔一天在有此需要的患者中口服施用,且在所述治疗周期的第四周不施用。
61.如实施方式60所述的方法,其中所述MDM2抑制剂或其药学上可接受的盐在 所述21天治疗周期的第1、3、5、7、9、11和13天在患者中口服施用,或其 中所述MDM2抑制剂或其药学上可接受的盐在所述28天治疗周期的第1、3、 5、7、9、11、13、15、17、19和21天口在患者中口服施用。
62.如实施方式60所述的方法,其中所述MDM2抑制剂或其药学上可接受的盐在 所述21天治疗周期的第14-21天不施用,或其中所述MDM2抑制剂或其药学 上可接受的盐在所述28天治疗周期的第22-28天不施用。
63.如实施方式60-62中任一项的所述方法,其中所述MDM2抑制剂在21天治疗 周期的第1、3、5、7、9、11和13天以约50mg至约200mg的量在患者中口服 施用;或其中所述MDM2抑制剂在28天治疗周期的的第1、3、5、7、9、 11、13、15、17、19和21天以约50mg至约200mg的量在患者中口服施用。
64.如实施方式63所述的方法,其中所述MDM2抑制剂在21天治疗周期的第1、 3、5、7、9、11和13天以约50mg的量在患者中口服施用;或其中所述MDM2抑制剂在28天治疗周期的的第1、3、5、7、9、11、13、15、17、19和 21天以约50mg的量在患者中口服施用。
65.如实施方式63所述的方法,其中所述MDM2抑制剂在21天治疗周期的第1、 3、5、7、9、11和13天以约100mg的量在患者中口服施用;或其中所述 MDM2抑制剂在28天治疗周期的的第1、3、5、7、9、11、13、15、17、19和 21天以约100mg的量在患者中口服施用。
66.如实施方式63所述的方法,其中所述MDM2抑制剂在21天治疗周期的第1、 3、5、7、9、11和13天以约150mg的量在患者中口服施用;或其中所述 MDM2抑制剂在28天治疗周期的的第1、3、5、7、9、11、13、15、17、19和 21天以约150mg的量在患者中口服施用。
67.如实施方式63所述的方法,其中所述MDM2抑制剂在21天治疗周期的第1、 3、5、7、9、11和13天以约200mg的量在患者中口服施用;或其中所述 MDM2抑制剂在28天治疗周期的的第1、3、5、7、9、11、13、15、17、19和 21天以约200mg的量在患者中口服施用。
68.如实施方式60-67中任一项所述的方法,其中所述MDM2抑制剂是
或其药学上可接受的盐。
69.如实施方式60-68中任一项所述的方法,其中所述免疫检查点分子是PD-1。
70.如实施方式69所述的方法,其中所述PD-1调节剂在21天治疗周期或28天治 疗周期中的第1天通过静脉内输注以200mg的量施用。
71.如实施方式60-70中任一项所述的方法,其中所述方法包括至少一个、两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个或十个21天治疗周期或28天治 疗周期。
72.如实施方式60-71中任一项所述的方法,其中所述患者患有不可切除或转移性黑色素瘤。
73.如实施方式60-72中任一项所述的方法,其中所述患者是PD-1疗法的难治的或复发的。
74.如实施方式60-72中任一项所述的方法,其中所述PD-1疗法的难治的或复发的患者患有不可切除或转移性黑色素瘤。
75.如实施方式60-72中任一项所述的方法,其中所述患者对抗PD-1疗法具有耐药性。
76.如实施方式60-72中任一项所述的方法,其中所述患者患有晚期实体瘤。
77.一种药物组合物,其包含具有以下结构的MDM2抑制剂
或其药学上可接受的盐,其中所述药物组合物是固体剂型。
78.如实施方式77所述的药物组合物,其中所述固体剂型是胶囊。
79.如实施方式78所述的药物组合物,其中所述固体剂型是干填充胶囊。
80.如实施方式79所述的药物组合物,其中所述固体剂型是干填充的1号明胶胶囊。
81.如实施方式78-80中任一项所述的药物组合物,其中所述胶囊包含约30mg至约250mg或约100mg至约200mg的APG-115。
82.如实施方式81所述的药物组合物,其中所述胶囊包含约50mg、100mg、150mg 或200mg的APG-115。
83.如实施方式78-83中任一项所述的药物组合物,其中所述胶囊还包含硅化微晶纤维素。
84.在接受抗PD-1/PD-L1疗法用于治疗癌症的患者中治疗超进展的方法,其中该方 法包括向有此需要的患者施用治疗有效量的MDM2抑制剂,其中所述MDM2 抑制剂是
或其药学上可接受的盐。
85.如实施方式84所述的方法,其中所述癌症是黑色素瘤。
86.如实施方式84所述的方法,其中所述癌症是不可切除的或转移性黑色素瘤。
87.如实施方式84所述的方法,其中所述癌症是晚期实体瘤或晚期软组织癌。
88.如实施方式87的方法,其中实体瘤是肺癌、肾癌、结直肠癌、头颈癌、乳腺
癌、脑癌、子宫颈癌或子宫内膜癌。
89.治疗癌症的方法,包括向有需要的受试者施用治疗有效量的MDM2抑制剂,其中所述方法包括至少一个28天的治疗周期,其中所述MDM2抑制剂在所述治 疗周期的前3个连续周中每隔一天口服施用且在所述治疗周期的第四周不施 用,其中所述治疗有效量为约100mg至约200mg的MDM2抑制剂。
90.如实施方式89所述的方法,其中所述MDM2抑制剂是具有以下结构的APG- 115:
或其药学上可接受的盐。
91.如实施方式90所述的方法,其中所述治疗有效量是约100mg的APG-115。
92.如实施方式90所述的方法,其中所述治疗有效量为约150mg的APG-115。
93.如实施方式90所述的方法,其中所述治疗有效量为约200mg的APG-115。
94.如实施方式90所述的方法,其中所述癌症是转移性实体瘤。
95.如实施方式90所述的方法,其中所述癌症是淋巴瘤。
96.如实施方式90所述的方法,其中所述癌症是晚期软组织肉瘤。
97.如实施方式90所述的方法,其中所述癌症是腺样囊性癌。
98.实施方式89-97中任一项所述的方法,其中所述癌症是局部晚期或转移性实体瘤或淋巴瘤。
99.如实施方式98所述的方法,其中所述受试者经历过治疗并且显示疾病进展。
100.如实施方式89-99中任一项的方法,其中所述癌症选自胰腺癌、腺样囊性癌、肺癌、胃肠道间质瘤和乳腺癌。
101.如实施方式89-100中任一项所述的方法,其中所述癌症是晚期实体瘤或晚期软 组织癌。
102.如实施方式101所述的方法,其中晚期实体瘤是肺癌、肾癌、结直肠癌、头颈癌、乳腺癌、脑癌、宫颈癌、卵巢癌、前列腺癌、食道鳞状细胞癌、胰腺癌、 子宫内膜癌、腺样囊性癌。
103.如实施方式101所述的方法,其中所述晚期软组织癌是肉瘤(例如脂肪肉瘤,横纹肌肉瘤、软骨肉瘤、骨肉瘤、滑膜肉瘤和肾上腺皮质癌)。
104.如实施方式89所述的方法,其中所述癌症选自下组:肾上腺皮质癌、晚期癌症、肛门癌、再生障碍性贫血、胆管癌、膀胱癌、骨癌、骨转移、成人脑/中枢 神经系统肿瘤、儿童脑/中枢神经系统肿瘤、乳腺癌、男性乳腺癌、儿童癌症、 原发癌未知癌症、Castleman病、宫颈癌、结肠/直肠癌、子宫内膜癌、食道 癌、Ewing家族肿瘤、眼癌、胆囊癌、胃肠道类癌、胃肠道间质瘤(GIST)、 妊娠滋养细胞疾病、头颈癌、霍奇金病、卡波西肉瘤、肾癌、喉癌和下咽癌、 白血病-成人急性淋巴细胞(ALL)、白血病-急性髓细胞(AML)、白血病-慢 性淋巴细胞(CLL)、白血病-慢性粒细胞(CML)、白血病-慢性粒单核细胞 (CMML)、儿童白血病、肝癌、肺癌-非小细胞、肺癌-小细胞、肺类癌、皮 肤淋巴瘤、恶性间皮瘤、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征、鼻腔和鼻窦 癌、鼻咽癌、神经母细胞瘤、非霍奇金淋巴瘤、儿童非霍奇金淋巴瘤、口腔和 口咽癌、骨肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、阴茎癌、垂体瘤、前列腺癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌肉瘤、唾液腺癌、肉瘤-成人软组织癌、皮肤癌-基底和鳞状细 胞、皮肤癌-黑色素瘤、小肠癌、胃癌、睾丸癌、胸腺癌、甲状腺癌、子宫肉 瘤、阴道癌、外阴癌、华氏巨球蛋白血症和肾母细胞瘤。
附图的简要说明
图1显示APG-115增强小鼠CD4+T细胞的活化。
图2显示APG-115增加受刺激的小鼠T细胞中细胞因子的产生。
图3A显示MH-22A细胞经所述剂量的APG-115处理72小时后,以下蛋白的表达水平:MDM2、p53、总STAT3(t-STAT3)、磷酸化的STAT3(p-STAT3)、PD-L1及β- actin(内参)。图3B显示了不同剂量的APG-115下PD-L1表达水平。
图4显示了在来源于MH-22A小鼠肝细胞瘤细胞的同源肿瘤模型中,通过与APG-115联合,抗PD-1疗法抗肿瘤活性增强。
图5显示了在确认试验中用所述药剂处理的个体动物的肿瘤生长曲线。
图6显示了在APG-115联合抗PD-1抗体治疗后,荷有MH-22A鼠肝癌同源肿瘤模型的实验动物的体重变化(%)。
图7显示了经前期治疗的CR小鼠和未经治疗(Naive)小鼠在再挑战(re-challenge) 后的肿瘤生长曲线。
图8显示了在再挑战实验中小鼠的体重变化(%)。
图9显示了APG-115和epacadostat在血浆和肿瘤组织中的暴露。
图10显示了在为TIL分析设计的体内实验中的肿瘤生长曲线。
图11显示在TIL实验中实验动物的体重变化(%)。
图12显示在APG-115与抗PD-1抗体联合治疗后,同源肿瘤中肿瘤浸润性CD45+,CD3+和细胞毒性CD8+T细胞群显著增加,M2巨噬细胞显著减少。
图13显示MDSC和Treg细胞百分比没有显著变化
图14显示APG-115和抗PD-1抗体在治疗MH-22A同源肝癌中的协同作用需要CD8+ T细胞。
图15显示了T细胞耗竭研究中实验动物的体重变化(%)。
图16显示APG-115与抗PD-1疗法在治疗Trp53突变的MC38同源小鼠肿瘤中协同作用。肿瘤生长曲线表示为在不同时间点(n=10)的肿瘤体积的平均值±SEM。每周 两次(biw)腹膜内(i.p.)施用10mg/kg的抗PD-1抗体,持续17天。APG-115每两 天(q2d)口服施用(p.o.)一次,持续17天。
图17显示了APG-115联合抗PD-1抗体的治疗下,荷MC38鼠结肠癌同源模型的实验动物的体重变化(%)。
图18显示了APG-115与抗PD-1疗法联合用药的增强的抗肿瘤活性。
图19显示了将血小板(PLT)计数变化趋势作为治疗相关不良事件(AE)之一。
图20显示了将中性粒细胞绝对计数(ANC)变化趋势作为治疗相关不良事件之一。
图21显示了各种癌症患者的治疗持续时间和响应。
图22显示了在临床试验的第1天(a)或者第21天(b)APG-115的血浆浓度-时间曲线。
图23(a)和图23(b)显示了血清中MIC-1含量的升高,且该升高在实体瘤患者所测试的 剂量范围内为暴露依赖性的。
图24显示了部分缓解(PR)受试者的靶病变。
图25显示了I期临床试验的第1天(a)或者第21天(b)APG-115的平均浓度-时间 曲线。
图26(a)和图26(b)显示了血清中MIC-1含量的升高,且该增加在实体瘤患者所测试的 剂量范围内为暴露依赖性。
图27(a)和图27(b)分别显示了APG-115在晚期实体瘤患者中的I期研究的设计和APG-115在中国晚期软组织癌患者中的I期研究的设计。
具体实施方式
本发明描述了用于治疗癌症的使用MDM2抑制剂和免疫检查点分子调节剂(也称为“免疫检查点调节剂”)的组合疗法。免疫检查点调节剂可以靶向调节抗肿瘤免疫 应答的检查点分子。
迄今为止批准的免疫检查点调节剂(例如活化剂或抑制剂)疗法已在多种肿瘤类型中证明具有临床反应,并且不断评估其更广泛的用途。然而,尽管在多种癌症中观 察到针对免疫细胞的单个检查点的显著反应,但仅在一小部分患者中观察到响应的持 久性(durability)。目前的努力集中在靶向多个检查点,利用基于多种免疫疗法针对 T细胞通路的分叉的联合疗法,以提供临床状况中持久的抗肿瘤反应。联合治疗的临 床试验正在进行中,长期的患者结果尚未确定。见上文引用的Sharma等人发表的研 究。
T细胞介导的免疫应答需要涉及抗原特异性细胞的克隆筛选,活化增殖,转运至抗原位点和引发免疫应答等一系列事件。参见Mockler et al.,2014,Frontiers in Oncol4:1;Pearce et al.,2013,Science 342(6155):1242454,其中每一篇会通过引用并 入本文中。在接受T细胞受体和共刺激信号后,T细胞通过生长,扩增和分化发展成 细胞毒性、调节性或辅助性T细胞。根据其活化阶段,T细胞显示出不同的代谢模 式。见Mockler et al.,2014,Front.ONCOL.4:107,其全部内容通过引用并入本发 明。初始T细胞(T细胞)代谢静止,只采用基础水平的营养摄取,并依赖氧化磷 酸化作为ATP生成的主要来源。相反,活化的T细胞(效应T细胞)采用合成代谢模 式来保证细胞生长,增殖,分化和效应功能所需的增加的能量供应。效应T细胞优先 使用糖酵解而非氧化磷酸化来产生ATP,因此会消耗大量葡萄糖。与初始T细胞和效 应T细胞相反,记忆T细胞的寿命长度提出了不同的代谢需求。向记忆T细胞转变的 特征在于代谢静止,以增加对脂肪酸氧化的依赖以促进氧化磷酸化。总之,T细胞发 育的每个阶段都需要通过产生能量和生成生物合成前体的代谢支持。因此,T细胞进 行适当的激活和分化以维持体内平衡是至关重要的。
肿瘤中的T细胞,即所谓的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)是患实体瘤患者的总体存 活的关键因素。肿瘤微环境对T细胞功能不利,例如由于表达耗竭氨基酸色氨酸和精 氨酸的酶以及存在具有抑制活性的先天细胞或调节性T细胞。此外,癌细胞的特征在 于代谢改变,糖酵解,其中葡萄糖代谢成乳酸并分泌到微环境中而非在线粒体中进一 步代谢。这种代谢改变受活化的癌基因和/或低氧的调控。乳酸对免疫细胞的功能产生 负面影响,损害T细胞功能、细胞因子产生和细胞因子能力。参见Droge et al., 1987,Cell Immunol 108(2):405-16;和Fischer et al.,2007,Blood 109(9):3812- 9。
在肿瘤微环境内的独特的生物能量学挑战可分布在极端缺氧区域到有氧糖酵解区 域,使得微环境营养缺乏。参见上面引用的Mockler et al.。这些情况中的每一种都可以对T细胞功能产生深远的影响,从而影响抗肿瘤免疫应答。肿瘤微环境中的低氧相 关变化可导致T细胞增殖减少,线粒体氧消耗下降,从而影响分化,导致永久性低水 平的炎症。此外,营养缺乏会限制可用的底物,诸如对效应T细胞存活和增殖至关重 要的葡萄糖。
T细胞活化的关键部分涉及细胞代谢的显著改变,包括葡萄糖代谢的明显增加。尽管糖酵解和通过戊糖分流的NADPH是ATP产生的快速来源,但它不足以产生增殖 所必需的全部补充分子(full complement of molecules)。然而,线粒体氧消耗增加及 ROS的产生对于T细胞活化和分化是必需的。此外,在细胞外空间释放的线粒体ATP 启动嘌呤信号机制,其调节免疫-APC突触中的T细胞活化。由于原发性线粒体功能障 碍与免疫功能障碍和感染发生率增加有关,正常的线粒体功能在免疫反应调控中起核 心作用。参见Ledderoseet al.,2014,J Biol Chem 289:25936;和Sena et al,2013, Immunity 38:225。
癌症的标志之一是免疫系统逃逸,因此癌症免疫疗法必须采取不同的方法,通过在一开始增强效应T细胞的有益抗肿瘤反应,导致记忆性T细胞产生,并通过减弱调 节性T细胞的响应。活化的肿瘤特异性效应T细胞数的增加可能是提高抗肿瘤免疫力 的最有效方法。
MDM2抑制剂先前已被描述为抗癌治疗剂(参见,如美国专利号9,745,314,其全 部内容通过引用并入本发明),其在人体中作为单一疗法或与标准照护化疗剂组合疗 法获得评估,用于治疗抑制MDM2和MDM2相关蛋白活性获得益处的疾病和病症。
本文提供的结果证明MDM2抑制剂能增强小鼠CD4+T细胞活化(参见实施例 1.1),且该治疗未诱导APG-115处理的T细胞的细胞凋亡。此外,观察到在刺激的小 鼠T细胞中,用MDM2抑制剂处理后炎性细胞因子(包括IFN-γ,IL-2,TNF-α,IL- 10和IL-4)上调(参见实施例1.2)。这些细胞因子与免疫介导的成功的癌症根除密 切相关。此外,MDM2抑制剂的治疗上调了肿瘤细胞中的PD-L1表达(参见实施例 1.3)。这些数据表明MDM2抑制剂确实在体外促进免疫应答。
本申请中提供的体内药效研究(参见实施例2.1)证明,在源自MH-22A小鼠肝 细胞瘤细胞的p53野生型同源模型中,抗PD-1疗法基本上抑制肿瘤生长并在大部分携 带肿瘤的动物中观察到完全消退(CR)或部分消退(PR)。MDM2抑制剂的添加能 够扩大CR比例,加速治疗效果,并且可以将其余无应答患者转换为对PD-1阻断有反 应的肿瘤。重要的是,联合治疗的协同效应也可在p53突变MC38鼠结肠同系小鼠模 型中观察到(参见实施例3.1),表明MDM2-p53的免疫调节功能可能不需要完整的 p53。MDM2抑制剂产生的协同效应与epacadostat(临床评估中的IDO1抑制剂)相当 甚至更高。再挑战研究(参见实施例2.2)证实,与通过抗PD-1阻断治愈的CR小鼠 一样,之前用抗PD-1抗体和MDM2抑制剂的联合疗法治疗的CR小鼠有效抵抗了MH-22A肿瘤细胞的重新移植,提示了免疫记忆的成功生成。更为重要的是,肿瘤浸 润淋巴细胞(TIL)分析(参见实施例2.3)显示与抗PD-1单一疗法相比较,联合疗 法后CD45+细胞,CD3+T细胞和细胞毒性CD8+T细胞数量显著增加,并且树突细胞 减少。以上数据表明,联合用药通过增加T细胞数量,特别是细胞毒性CD8+T细胞 和减少肿瘤微环境中的树突细胞,达到优异的效果。
此外,药代动力学(PK)分析(参见实施例2.5)证明了恰当地实现MDM2抑制 剂的全身暴露和肿瘤分布。最后,在动物模型中,荷瘤小鼠对联合用药具有良好的耐 受性。
基于本发明提供的结果,MDM2抑制剂和免疫检查点调节剂疗法预期可有效的协同治疗癌症。例如,MDM2抑制剂与免疫检查点分子调节剂的联用有可能将这些药物 在增强T细胞介导的抗肿瘤反应中的活性协同起来,从而提高患者结果的整体持久 性。因此,本发明提供了通过向受试者施用有效量的MDM2抑制剂和有效量的免疫检 查点分子调节剂在有需要的受试者中治疗癌症的方法。
I.定义
根据本发明公开且如本发明所采用,除非另有明确说明,则以下术语具有以下含义。
如本发明所用,“免疫检查点”或“免疫检查点分子”是免疫系统中调节信号的 分子。免疫检查点分子可以是共刺激检查点分子,即上调信号,或抑制检查点分子, 即下调信号。如本文所用的“共刺激检查点分子”是免疫系统中上调信号分子或共刺 激的分子。如本文所用,“抑制性检查点分子”是免疫系统中下调信号分子或共抑制 的分子。
如本发明所用,“免疫检查点分子的调节剂”是能够改变受试者中免疫检查点活性的试剂。在某些实施方案中,免疫检查点分子的调节剂改变一种或多种免疫检查点 分子的功能,包括:PD-1、PD-L1、PD-L2、CTLA-4、TIM-3、LAG3、CD160、 2B4、TGFβ、VISTA、BTLA、TIGIT、LAIR1、OX40、CD2、CD27、ICAM-1、 NKG2C、SLAMF7、NKp80、CD160、B7-H3、LFA-1、1COS、4-1BB、GITR、 CD30、CD40、BAFFR、HVEM、CD7、LIGHT、和CD83。免疫检查点的调节剂可 以是免疫检查点的激活剂(例如激动剂)或抑制剂(例如拮抗剂)。在一些实施方案 中,免疫检查点分子的调节剂是免疫检查点结合蛋白(例如,抗体、抗体Fab片段、 双价抗体(divalentantibody)、抗体药物偶联物、scFv、融合蛋白、二价抗体或四价 抗体)。在一些实施方案中,免疫检查点分子的调节剂是单克隆抗体或其抗原结合片 段。在其他实施方案中,免疫检查点分子的调节剂是小分子。在一个具体实施方案 中,免疫检查点分子的调节剂是抗PD-1抗体。在一个具体实施方案中,免疫检查点分 子的调节剂是抗-CTLA-4抗体。
如本发明所用的术语“MDM2相关蛋白质”指的是与MDM2具有至少25%序列同 源性并且与p53或p53相关蛋白质相互作用并抑制p53或p53相关蛋白质的蛋白质。 MDM2相关蛋白质的实例包括但不限于MDMX。
如本发明所用的术语“功能性p53”指的是在正常水平、高水平或低水平表达的野生型p53和p53的突变变体或等位基因变体,这些变体保留野生型p53的活性的至少 约5%,例如野生型活性的至少约10%、约20%、约30%、约40%、约50%、或更 多。
如本发明所用的术语“p53相关蛋白质”指的是与p53具有至少25%序列同源性,具有肿瘤抑制因子活性,并且通过与MDM2或MDM2相关蛋白质的相互作用而受到 抑制的蛋白质。p53相关蛋白质的实例包括但不限于p63和p73。
“完全消退”是指肿瘤在治疗后变得不可检测(TV=0mm3)。
“部分消退”是指肿瘤体积较治疗前减小(例减小10%、20%、30%、40%、 50%、60%、70%、80%、90%)。
如本发明所用的术语“药学上可接受的”成分是一种适合用于人类和/或动物的成分,没有不适当的不良副作用(如毒性、刺激性和过敏反应),且有相应合理的收益/风 险比。
如本发明所用术语“治疗”或“处理”优选地指获得有益或期望的临床结果的行为,有益或期望的临床结果包括但不限于减轻或改善一种或多种疾病或病状的体征或 症状(例如,消退,部分或完全),减少疾病的程度,疾病状态的稳定(即,不恶 化,实现稳定的疾病),疾病状态的改善或缓解,进展率减少或进展时间的延长,以 及缓解(无论是部分还是全部)。癌症的“治疗”还意味着与无用药的预期存活相 比,生存延长。治疗无需治愈。在某些实施方案中,治疗包括由具有资质的个体(例 如治疗医师)所判断的疼痛减轻程度或生活质量(QOL)增加中的一种或多种,例 如,使用公认的疼痛和QOL评估工具。在某些实施方案中,治疗不包括疼痛减轻或生 活质量(QOL)增加中的一种或多种,由具有资质的个体(例如,治疗医师)判断, 例如,使用公认的疼痛和QOL评估工具。
在某些实施方式中,治疗包括接近标准化值(例如,在健康患者或个体中获得的值)的症状或体征,例如,与标准化值相差小于50%,在某些实施方案中,与标准化 值相差小于约25%,在其他实施方案中,与标准化值的差异小于10%,并且在其他实 施方案中,症状的存在与使用常规统计学测试确定的标准化值没有显著差异。如本文 所用,治疗可包括减轻肿瘤负荷,抑制肿瘤生长,包括诱导在治疗前有进展性疾病的 受试者病情稳定,增长至进展的时间或增加存活时间。增长可以相对于适当的对照或 预期结果来确定。如本文所用,与适当的对照相比,治疗可包括增加受试者的存活, 伴有或不伴有肿瘤负荷的降低。治疗无需治愈。
如本发明所用术语“共同施用”或“组合疗法”或“联合疗法”等,应理解为施 用两个或多个活性药物,使用单独的配方或单一的药物配方,或按任意顺序连续施 用,使在某个时间段里两个(或所有)活性药物同时发挥其生物活性。本发明认为,一 种活性药剂(例如MDM2抑制剂)可以提高第二种药剂的活性,例如,可以使靶细胞(如 癌细胞)对第二种药剂的活性敏感。共同施用不要求同时,以相同频率或通过相同的施 用途径施用。如本发明所采用的“共同施用”或“组合疗法”或“联合疗法”等包括 施用MDM2抑制剂和一种或多种免疫检查点分子的调节剂。本发明提供了免疫检查点 调节剂的实例。
术语“施用”或“给药”等包括将药物组合物或药剂递送到受试者的系统或或受 试者特定区域的任何方法。在某些实施方案中,口服递送药剂。在某些实施方案中, 肠胃外施用药剂。在某些实施方案中,通过注射或输注递送药剂。在某些实施方案 中,所述药剂局部递送,包括经粘膜。在某些实施方案中,通过吸入递送药剂。在本 发明的某些实施方案中,通过肠胃外递送施用药剂,包括静脉内、肌肉内、皮下、髓 内注射、以及鞘内、直接心室内、腹膜内、鼻内或眼内注射。在一个实施方案中,本 发明提供的组合物可以通过直接注射到肿瘤来施用。在一些实施方案中,本发明的制 剂可以通过静脉内注射或静脉内输注施用。在某些实施方案中,本发明的制剂可以通 过连续输注给药。在某些实施方案中,给药不是口服。在某些实施方案中,给药是全 身性的。在某些实施方案中,给药是局部的。在一些实施方案中,可以组合一种或多 种施用途径,例如静脉内给药和瘤内给药,或静脉内给药和经口给药(peroral),或 静脉内给药和口服,静脉内给药和局部给药,或静脉内给药和透皮或经粘膜给药。给 予药物可以由许多工作者协调。给予药剂包括,如将待施用的药剂开处方给受试者, 并/或提供指导(直接或通过其他人)以服用特定药物,通过自我递送(如通过口服递 送,皮下递送,经中央管线的静脉内递送);或由经过培训的专业人员递送(例如静脉内输送,肌肉内输送,肿瘤内输送,连续输注等)。
如本发明所用术语“存活”,是指已经针对疾病或病症(例如癌症)治疗的受试 者的生命的延续。生存时间可以从任意点开始定义,例如进入临床试验的时间,或自 早期治疗方案完成或失败的时间、自诊断时间等。
如本发明所用术语“分散体”,是指其中任何性质的胶体尺寸(例如固体、液体 或气体)的颗粒分散在不同组成或状态的连续相的体系。在静脉内药物递送中,连续 相基本上是水,分散的颗粒可以是固体(悬浮液)或不混溶的液体(乳液)。
通过本发明的方法治疗的“受试者”可以指人或非人动物,优选哺乳动物,更优 选人。在某些实施方案中,在使用本发明的方法开始治疗之前,受试者具有可检测的 肿瘤。在某些实施方案中,受试者在使用本发明的方法开始治疗时具有可检测的肿 瘤。
如本发明所用术语“安全和治疗有效量”或“安全有效量”是指足以产生所需治 疗反应而没有过度不良副作用(例如毒性,刺激或过敏反应)的组分的量,当以本公 开的方式使用时,与合理的收益/风险比相称。
术语“治疗有效量”或“有效量”是指一种化合物的量,当施用给患者治疗疾病 时,这种化合物的量足以使这种疾病得到治疗。当用于预防疾病时,该量足以避免或 延迟疾病的发作。“治疗有效量”或“有效量”将根据化合物、疾病及其严重程度和 待治疗患者的年龄、体重等而变化。治疗有效量或有效量不需要是治愈性的。治疗有 效量或有效量不需要预防疾病或病症的发生。相反,治疗有效量或有效量是将至少延 迟或减少疾病或疾病的发生、严重程度或进展的量。疾病进展可以通过一个或多个肿 瘤负担、进展时间、存活时间或其他本领域临床测量进行监测。
术语“治疗效果”是指动物,特别是哺乳动物,尤其是人类,因一种药理活性药 剂而引起的局部或全身作用。因此,该术语是指用于诊断、治愈、缓解、治疗或预防 疾病或增强动物或人类所需的身体或精神发育和状况的任何药剂。短语“治疗有效 量”意指这种药剂在合理的效益/风险比下产生一些期望的局部或系统效应,适用于任 何治疗。在某些实施方案中,一种化合物的治疗有效量将取决于其治疗指数、溶解性 等。
“预防”意指降低获得疾病或病症的风险。预防不要求疾病或病症在受试者中不会发生或复发。
术语“病症”和“疾病”在本申请中的用法是包括性的(inclusively),表示任何自身体任何部位、器官或系统(或其任何组合)的正常结构和功能的偏离。具体疾病表 现为特征性症状和体征,包括生物的、化学的和物理的变化,并且通常与多种其他因 素相关,包括但不限于人口统计、环境、职业、遗传和病史的因素。可以通过各种方 法定量某些特征性体征、症状和相关因素,以产生重要的诊断信息。
在本发明所存在的一系列列举数值的所有情况中,应理解为,任何所述数值可以是数值范围的上限或下限。应进一步理解为,本发明包括所有这些数值范围,即具有 数值上限和数值下限的组合的范围,其中每个上限和下限的数值可以是本发明所述的 任何数值。本发明提供的范围应理解为包括该范围内的所有值。例如,1-10应理解为 包括所有值1、2、3、4、5、6、7、8、9和10,以及适当的分数值。表示为“高达” 某个值(例如,高达5)的范围被理解为所有值,包括范围的上限,例如0、1、2、 3、4和5,以及适合的分数值。长达一周或一周内被理解为包括0.5、1、2、3、4、 5、6或7天。类似地,由“至少”界定的范围被理解为包括所提供的低值(lower value)和所有较高的数值。
所有百分比配方均为w/w,除非另有说明。
如本发明所用,“约”应理解为包括在特定领域中,平均值的三个标准偏差内或 公差标准范围内。在某些实施方案中,约应理解为不大于0.5的变化。
这里使用的冠词“一”和“一个”指的是冠词的一个或多于一个(即至少一个) 语法对象。举例来说,“一个元素”表示一个元素或多于一个元素。
术语“包括”在本发明中用于表示短语“包括但不限于”,并且可与其互换使 用。
术语“或”一词在本申请中的用法是包括性的,用于表示术语“和/或”,并与其互换使用,除非上下文另有明确规定。
术语“例如”一词在本发明中用于表示短语“例如但不限于”,并且可与其互换使用。
II.MDM2抑制剂
本发明中公开的MDM2抑制剂抑制p53,或p53相关蛋白与MDM2或MDM2相 关蛋白之间的相互作用。通过抑制MDM2或MDM2相关蛋白对p53或p53相关蛋白 的负面影响,本发明MDM2抑制剂使细胞对细胞凋亡和/或细胞周期阻滞的诱导因子 敏感。在一个实施方案中,本发明的MDM2抑制剂诱导细胞凋亡和/或细胞周期停 滞。
本发明公开的化合物可以作为MDM2抑制剂是有效的。在一些实施方案中,本发 明的化合物由式(I)表示:
或其药学上可接受的盐,其中
B是C4-7碳环;
R1是H、取代或未取代的C1-4烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代 的杂环烷基、ORa或NRaRb;
n是0、1或2;
R2,R3,R4,R5,R7,R8,R9,以及R10独立地选自由H、F、Cl、CH3以及 CF3组成的组;
Ra是氢或取代或未取代的C1-4烷基;
Rb是氢或取代或未取代的C1-4烷基;
Rc和Rd是环B的一个碳原子上的取代基,其中
Rc是H,C1-3烷基,C1-3亚烷基-ORa,ORa,或卤代;
Rd是H,C1-3烷基,C1-3亚烷基-ORa,ORa,或卤代;或
Rc和Rd与它们所连接的碳一起形成4元至6元螺环取代基,所述取代基任 选地含有氧原子;并且
Re是-C(=O)ORa,-C(=O)NRaRb或-C(=O)NHSO2CH3。
结构式(I)的化合物抑制MDM2-p53相互作用并且可用于治疗多种疾病和病况。具体来说,结构式(I)的化合物用于治疗其中抑制MDM2和MDM2相关蛋白质会提供益 处的疾病或病况(例如癌症和增殖性疾病)的方法中。所述方法包括向有需要的受试 者施用治疗有效量的结构式(I)的化合物。
如本发明所用的术语“烷基”指的是直链和支链饱和C1-10烃基,包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2-甲基丁基、3-甲 基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,2-二甲 基丁基、2,3-二甲基丁基、3,3-二甲基丁基、以及2-乙基丁基。术语Cm-n意指烷基具有 “m”个至“n”个碳原子。术语“亚烷基”指的是具有取代基的烷基。例如甲基的烷基或例 如-CH2-基团的亚烷基可以被独立选择的例如卤代、三氟甲基、三氟甲氧基、羟基、烷 氧基、硝基、氰基、烷氨基、或氨基中的一个或多个,并且通常一个至三个取代。
如本发明所用的术语“卤代”被定义为氟代、氯代、溴代、以及碘代。
术语“羟基”被定义为-OH。
术语“烷氧基”被定义为-OR,其中R是烷基。
术语“氨基”被定义为-NH2,并且术语“烷氨基”被定义为-NR2,其中至少一个R是 烷基并且第二个R是烷基或氢。
术语“氨甲酰基”被定义为-C(=O)NR2。
术语“羧基”被定义为-C(=O)OH或其盐。
术语“硝基”被定义为-NO2。
术语“氰基”被定义为-CN。
术语“三氟甲基”被定义为-CF3。
术语“三氟甲氧基”被定义为-OCF3。
本发明所用的术语“芳基”指的是单环或多环芳族基团,优选地单环或双环芳族基团。芳基的实例包括但不限于苯基、萘基、芴基、薁基、蒽基、菲基、芘基、联苯、 以及三联苯。芳基还指的是双环碳环和三环碳环,其中一个环是芳族的并且其它环是 饱和的、部分不饱和的、或芳族的,例如二氢萘基、茚基、茚满基、或四氢萘基(萘满 基)。除非另外指示,否则芳基可以是未取代的或被一个或多个,并且特别是一个至四 个独立地选自例如以下各项的基团取代:卤代、烷基、烯基、-OCF3、-NO2、-CN、- NC、-OH、烷氧基、氨基、烷氨基、-CO2H、-CO2烷基、-OCO烷基、芳基以及杂芳 基。
如本发明所用的术语“杂环”指的是杂芳基环系和杂环烷基环系。
如本发明所用的术语“杂芳基”指的是含有一个或两个芳环并且在芳环中含有至少 一个氮、氧或硫原子的单环系或双环系。杂芳基的每一个环可以含有一个或两个O原子、一个或两个S原子、和/或一个至四个N原子,前提条件是每一个环中杂原子的总 数是四个或更少并且每一个环含有至少一个碳原子。在某些实施方案中,杂芳基具有 5个至20个、5个至15个、或5个至10个环原子。单环杂芳基的实例包括但不限于 呋喃基、咪唑基、异噻唑基、异噁唑基、噁二唑基、噁唑基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪 基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、四唑基、三嗪基、以及 三唑基。双环杂芳基的实例包括但不限于苯并呋喃基、苯并咪唑基、苯并异噁唑基、 苯并吡喃基、苯并噻二唑基、苯并噻唑基、苯并噻吩基、苯并三唑基、苯并噁唑基、 呋喃并吡啶基、咪唑并吡啶基、咪唑并噻唑基、吲哚嗪基、吲哚基、吲唑基、异苯并 呋喃基、异苯并噻吩基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、萘啶基、噁唑并吡啶基、 酞嗪基、蝶啶基、嘌呤基、吡啶并吡啶基、吡咯并吡啶基、喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、噻二唑并嘧啶基、以及噻吩并吡啶基。除非另外指示,否则杂芳基可以是未取 代的或被一个或多个,并且特别是一个至四个选自例如以下各项的取代基取代:卤 代、烷基、烯基、-OCF3、-NO2、-CN、-NC、-OH、烷氧基、氨基、烷氨基、- CO2H、-CO2烷基、-OCO烷基、芳基以及杂芳基。
如本发明所用的术语“环烷基”意指含有三个至八个碳原子的单环或双环、饱和或部分不饱和的环系,包括环丙基、环丁基、环戊基、环已基、环庚基、以及环辛基, 所述环系任选地被独立选择的例如卤代、三氟甲基、三氟甲氧基、羟基、烷氧基、硝 基、氰基、烷氨基、或氨基中的一个或多个,并且通常一个至三个取代。
如本发明所用的术语“杂环烷基”意指总共含有4个至12个原子的单环或双环、饱和或部分不饱和的环系,其中所述原子中的一个至五个独立地选自氮、氧、以及硫并 且其余原子是碳。杂环烷基的非限制性实例是氮杂环丁基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪 基、二氢吡咯基、吗啉基、硫代吗啉基、二氢吡啶基、氧杂环庚基、二氧杂环庚基、 硫杂环庚基、二氮杂环庚基,它们各自任选地在环的原子上被独立选择的卤代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基、氨基、氨甲酰基、硝基、羧基、C2-7烯基、C2-7炔基等中的 一个或多个,并且通常一个至三个取代。
在其它实施方案中,B是
在各种实施方案中,n是0或1并且R1是H或CH3。
在各种实施方案中,是H,CH3或CH2CH3。
在一些实施方案中,R2是H。在其它实施方案中,R3是卤代,并且优选地是氯 代。在再另外的实施方案中,R4是H,R5是H,或R4和R5这两者均是H。
在一些实施方案中,R7是卤代,并且更优选地是氟代。
在一些实施方案中,R8,R9以及R10中的每一个是H。
在一些实施方案中,Ra和Rb单独地是H、CH3或CH2CH3。
在一些实施方案中,Rc和Rd单独地是H、卤代、OH、CH3、CH2CH3或 CH2OH。在一些实施方案中,Rc和Rd是F和F、H和H、OH和CH3、OH和H、CH3和CH3、CH3和OH、H和OH、CH2CH3和CH2CH3、以及CH2OH和CH2OH。
在一些实施方案中,Re是-C(=O)OH,-C(=O)NH2或-C(=O)NHSO2CH3。
在一些实施方案中,MDM2抑制剂选自:
在一些实施方案中,MDM2抑制剂是
或其药学上可接受的盐。
在另一些实施方案中,MDM2抑制剂是
或其药学上可接受的盐。这个化合物在本申请中也称为APG-115
在美国专利9,745,314中进一步公开了可用于本申请的更多MDM2抑制剂和 MDM2抑制剂合成方法,该专利通过引用并入本发明中。
本发明的化合物可以盐的形式存在。本发明的化合物的药学上可接受的盐在本发明的方法中常常是优选的。如本发明所用的术语“药学上可接受的盐”指的是结构式(I) 的化合物的盐形式或两性离子形式。式(I)的化合物的盐可以在化合物的最终分离和纯 化期间制得或单独地通过使化合物与具有合适的阳离子的酸反应来制得,所述阳离子 诸如但不限于碱金属离子和碱土金属离子,例如Na+、K+、Ca2+和Mg2+;以及有机阳 离子,诸如但不限于铵离子和取代的铵离子,例如NH4 +、NHMe3 +、NH2Me2 +、 NHMe3 +以及NMe4 +。单价的和二价的药学上可接受的阳离子的实例论述于例如 Berge,J.Pharm.Sci.,66:1-19(1997)中。
结构式(I)的化合物的药学上可接受的盐可以是与药学上可接受的酸形成的酸加成 盐。可以用于形成药学上可接受的盐的酸的实例包括无机酸,如硝酸、硼酸、盐酸、 氢溴酸、硫酸、和磷酸;以及有机酸,如草酸、马来酸、琥珀酸以及柠檬酸。本发明 的化合物的盐的非限制性实例包括但不限于盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、 硫酸氢盐、2-羟基乙磺酸盐、磷酸盐、磷酸氢盐、乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、天冬 氨酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、二葡糖酸盐、甘油 磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、甲酸盐、琥珀酸盐、富马酸盐、马来酸盐、抗 坏血酸盐、羟乙基磺酸盐、水杨酸盐、甲磺酸盐、均三甲苯磺酸盐、萘磺酸盐、烟酸 盐、2-萘磺酸盐、草酸盐、扑酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸 盐、特戊酸盐、丙酸盐、三氯乙酸盐、三氟乙酸盐、磷酸盐、谷氨酸盐、碳酸氢盐、 对甲苯磺酸盐、十一烷酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、葡萄糖酸盐、甲磺酸 盐、乙二磺酸盐、苯磺酸盐以及对甲苯磺酸盐。此外,本发明的化合物中存在的可供 使用的氨基可以被以下各项季铵化:甲基、乙基、丙基以及丁基氯化物、溴化物以及 碘化物;硫酸二甲酯、硫酸二乙酯、硫酸二丁酯以及硫酸二戊酯;癸基、十二烷基、 十四烷基以及硬脂基氯化物、溴化物以及碘化物;以及苯甲基溴和苯乙基溴。根据上 文,本发明出现的任何对本发明的化合物的提及均意图包括结构式(I)的化合物以及其 药学上可接受的盐。
本公开的具有一个或多个手性中心的化合物可以以各种立体异构形式存在。所述立体异构体是仅在空间排列上不同的化合物。所述立体异构体包括所有非对映异构, 对映异构和差向异构形式以及外消旋体及其混合物。
术语“几何异构体”是指具有至少两个取代基的环状化合物,其中两个取代基均位于环的同一侧(顺式),或其中取代基各自位于环的相对侧(反式)。当公开的化 合物是通过结构命名或描述而没有表明立体化学时,这应当理解为,所述名称或结构 包括一种或多种可能的立体异构体、或几何异构体、或包含的立体异构体或几何异构 体的混合物。
当所述几何异构体通过名称或结构描述时,这应当理解为,所述命名或描绘的异构体比另一种异构体含量更多,即所述或所描述的几何异构体的几何异构体纯度大于50%,例如,按重量计至少有60%、70%、80%、90%、99%或99.9%纯度。通过将 混合物中所述或所描述的几何异构体的重量除以混合物中所有几何异构体的总重量来 确定几何异构体的纯度。
外消旋混合物是指包含50%对映异构体和50%相对应的对映异构体。当具有一个手性中心的化合物被命名或描述而没有指明手性中心的立体化学时,这应当理解为, 该名称或结构包括该化合物的两种可能的对映体形式(例如,两种对映异构体光学纯 的、对映体富集的或外消旋的)。当具有两个或更多个手性中心的化合物被命名或描 述,而没有指明手性中心的立体化学时,这应当理解为,所述名称或结构包括所有可 能的非对映异构形式(例如,非对映异构体纯的,非对映异构体富集的和化合物的一 个或多个非对映异构体(例如,外消旋混合物))。
所述对映体和非对映体混合物可通过众所周知的方法拆分成其组分的对映体或立 体异构体,所述方法例如手性相气相色谱法、手性相高效液相色谱法、使化合物结晶 为手性盐络合物,或使化合物在手性溶剂中结晶。对映异构体和非对映异构体也可以 通过众所周知的不对称合成方法,从非对映异构或对映异构纯的中间体、试剂和催化 剂中获得。
当本发明所述化合物通过名称或结构描述并指明为单一对映异构体时,除非另有说明,该化合物的光学纯度至少为60%、70%、80%、90%、99%或99.9%(也称为 “对映体纯的”)。光学纯度是所命名或描述的对映体的混合物中的重量除以两种对 映体的混合物中的总重量。
当所公开化合物的立体化学通过结构来命名或描述时,并且所命名或所描述的结构包含多于一种立体异构体(例如,在非对映异构体对中)时,这应当理解为包括所 包含的立体异构体之一或所包含的立体异构体的任何混合物。也应当进一步理解为, 所述命名或所描述立体异构体的立体异构体纯度以重量计算为至少60%、70%、 80%、90%、99%或99.9%。在这种情况下,立体异构体纯度通过将混合物中所述名 称或结构所包含的立体异构体的总重量除以混合物中所有立体异构体的总重量来确 定。
III.免疫疗法
肿瘤细胞利用一系列复杂、重叠的机制来阻止免疫系统区分自我和非自我的能力,是肿瘤免疫逃避的基本机制。机制包括破坏抗原呈递、破坏控制T细胞激活或抑 制的调节通路(免疫检查点调节)、招募促进免疫抑制的细胞(Tregs,MDSC)或释放影 响免疫活动的因子(IDO,PGE2)。参考Harris et al.,2013,J Immunotherapy Cancer 1:12;Chen etal.,2013,Immunity 39:1;Pardoll,et al.,2012,Nature Reviews:Cancer 12:252; andSharma et al.,2015,Cell 161:205,其全部内容通过引用并入本发明。近年来,免疫 肿瘤学的治疗方式出现了爆炸式增长,方法包括:T细胞检查点抑制剂、T细胞激活 剂、以及经临床批准或正在积极研究的潜在疫苗。其中一些,包括抗CTLA-4、抗PD- 1和抗PD-L1免疫检查点疗法,已经显示出不同的成功,并已被批准用于临床。虽然 检查点抑制剂在治疗各种癌症的临床发展中是最先进的,但它们只是可以用来改善抗 肿瘤反应的潜在目标和途径的一小部分。这一点可以从处在临床前和临床开发的不同 阶段的影响检查点或抑制通路的潜在分子的,以及改善免疫反应的共刺激分子的不断 出现的新列表中得到证明。正在被评估用于癌症治疗的新免疫检查点的示例包括 LAG-3(Triebel et al.,1990,J.Exp.Med.171:1393-1405)、TIM-3(Sakuishi et al.,2010,J. Exp.Med.207:2187-2194)和VISTA(Wang et al.,2011,J.Exp.Med.208:577-592)。可 以改善免疫反应的共同刺激分子的示例包括ICOS(Fan et al.,2014,J.Exp.Med.211: 715-725)、OX40(Curti et al.,2013,Cancer Res.73:7189-7198)和4-1BB(Melero et al., 1997,Nat.Med.3:682-685)。
在一些实施方案中,本发明的免疫检查点分子是一种共刺激免疫检查点(即刺激免 疫反应的分子),免疫检查点调节剂是刺激免疫检查点的激活剂(激动剂)。在一些实施方案中,本发明的免疫检查点分子是抑制免疫检查点分子(即抑制免疫反应的分子), 免疫检查点调节剂是抑制免疫检查点的抑制剂(拮抗剂)。在一些实施方案中,免疫检 查点调节剂是一种免疫检查点结合蛋白(如抗体、抗体Fab片段、双价(divalent)抗 体、抗体药物偶联物、scFv、融合蛋白、二价抗体或四价抗体)。在一些实施方案中, 免疫检查点调节剂能够结合到或调节多个免疫检查点的活动。下列是刺激和抑制免疫 检查点以及调节这些免疫检查点的分子的示例,其可如下用于本发明的方法中:
i.共刺激免疫检查点分子
CD27支持初始T细胞的抗原特异性扩增,对T细胞记忆的生成至关重要(参考Hendriks et al.(2000)Nat.Immunol.171(5):433-40)。CD27也是B细胞的记忆标记物 (参考Agematsu et al.(2000)Histol.Histopathol.15(2):573-6。CD27的活性取决于受 其配体CD70在淋巴细胞和树突状细胞上的短暂的可获得性(availability)(参考Borst et al.(2005)Curr.Opin.Immunol.17(3):275-81)。针对CD27特异性的多个免疫检查 点调节剂已经被开发出来,并可以像本文所披露的那样使用。在一些实施方案中,免 疫检查点调节剂是调节CD27的活性或表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点 调节剂是与CD27结合的药剂(例如,抗CD27抗体)。在一些实施方案中,检查点调节 剂是CD27激动剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是CD27拮抗剂。在一些实施 方案中,免疫检查点调节剂是CD27结合蛋白(例如,抗体)。在一些实施方案中,免疫 检查点调节剂是varlilumab(CelldexTherapeutics)。其他CD27-结合蛋白(例如,抗体) 是本领域已知的,并公开于例如美国专利号9,248,183,9,102,737,9,169,325,9,023,999, 8,481,029;美国专利申请公开号2016/0185870,2015/0337047,2015/0299330, 2014/0112942,2013/0336976,2013/0243795,2013/0183316,2012/0213771,2012/0093805, 2011/0274685,2010/0173324;以及PCT公开号WO 2015/016718,WO 2014/140374, WO 2013/138586,WO 2012/004367,WO2011/130434,WO 2010/001908和WO 2008/051424,其各自通过引用并入本发明。
CD28。分化簇28(CD28)是T细胞上表达的一种蛋白,它提供T细胞激活和存 活所需的共同刺激信号。通过CD28和T细胞受体(TCR)刺激T细胞可以为产生各种白 细胞介素(尤其是IL-6)提供强有力的信号。与在树突细胞上表达的两个配体CD80和 CD86结合,可以促进T细胞扩增(参考Prasad et al.(1994)Proc.Nat’1.Acad.Sci.USA 91(7):2834-8)。针对CD28特异性的多个免疫检查点调节剂已经被开发出来,并可以 像本文所披露的那样使用。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是调节CD28的活 性或表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是与CD28结合的药剂(例 如,抗CD28抗体)。在一些实施方案中,检查点调节剂是CD28激动剂。在一些实施 方案中,检查点调节剂是CD28拮抗剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是 CD28结合蛋白(例如,抗体)。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂选自:TAB08 (TheraMab LLC)、lulizumab(也被称为BMS-931699、百时美施贵宝)和FR104(OSE免 疫治疗)。另外CD28结合蛋白(如抗体)是本领域已知的,并公开于例如美国专利号 9,119,840,8,709,414,9,085,629,8,034,585,7,939,638,8,389,016,7,585,960,8,454,959, 8,168,759,8,785,604,7,723,482;美国专利申请公开号2016/0017039,2015/0299321, 2015/0150968,2015/0071916,2015/0376278,2013/0078257,2013/0230540,2013/0078236, 2013/0109846,2013/0266577,2012/0201814,2012/0082683,2012/0219553,2011/0189735, 2011/0097339,2010/0266605,2010/0168400,2009/0246204,2008/0038273;PCT公开号 WO 2015198147,WO 2016/05421,WO 2014/1209168,WO 2011/101791,WO 2010/007376,WO 2010/009391,WO 2004/004768,WO 2002/030459,WO 2002/051871和 WO 2002/047721,其各自通过引用并入本发明。
CD40。分化簇40(CD40,又称TNFRSF5)存在于包括抗原呈递细胞在内的多种 免疫系统细胞上。CD40L,又称CD154,是CD40的配体,在活化的CD4+T细胞表面 短暂表达。CD40信号被称为树突细胞成熟的“许可”,从而触发T细胞的激活和分 化(参考O′Sullivan et al.(2003)Crit.Rev.Immunol.23(1):83-107。针对CD40特异性 的多个免疫检查点调节剂已经被开发出来,并可以像本发明所披露的那样使用。在一 些实施方案中,免疫检查点调节剂是调节CD40的活性或表达的药剂。在一些实施方 案中,免疫检查点调节剂是与CD40结合的药剂(例如,抗CD40抗体)。在一些实施方 案中,检查点调节剂是CD40激动剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是CD40拮 抗剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是CD40结合蛋白,选自dacetuzumab (Genentech/Seattle Genetics)、CP-870893(Pfizer)、bleselumab(Astellas Pharma)、 lucatumab(lucatumab)、CFZ533(Novartis;参考Cordoba et al.(2015)Am.J.Transplant. 15(11):2825-36)、RG7876(Genentech Inc.)、FFP104(PanGenetics,B.V.)、APX005 (Apexigen)、BI 655064(Boehringer Ingelheim)、Chi Lob7/4(Cancer Research UK;参考 Johnson et al.(2015)Clin.Cancer Res.21(6):1321-8)、ADC-1013(BioInvent International)、SEA-CD40(Seattle Genetics)、XmAb 5485(Xencor)、PG120 (PanGenetics B.V.)、teneliximab(Bristol-Myers Squibb;参考Thompson et al.(2011)Am. J.Transplant.11(5):947-57)、和AKH3(Biogen;参考International Publication No.WO 2016/028810)。其他CD40结合蛋白(如抗体)是本领域已知的,并公开于例如美国专利 号9,234,044,9,266,956,9,109,011,9,090,696,9,023,360,9,023,361,9,221,913,8,945,564, 8,926,979,8,828,396,8,637,032,8,277,810,8,088,383,7,820,170,7,790,166,7,445,780, 7,361,345,8,961,991,8,669,352,8,957,193,8,778,345,8,591,900,8,551,485,8,492,531, 8,362,210,8,388,971;美国专利申请公开号2016/0045597,2016/0152713,2016/0075792, 2015/0299329,2015/00574372015/0315282,2015/0307616,2014/0099317,2014/0179907, 2014/0349395,2014/0234344,2014/0348836,2014/0193405,2014/0120103,2014/0105907, 2014/0248266,2014/0093497,2014/0010812,2013/0024956,2013/0023047,2013/0315900, 2012/0087927,2012/0263732,2012/0301488,2011/0027276,2011/0104182,2010/0234578, 2009/0304687,2009/0181015,2009/0130715,2009/0311254,2008/0199471,2008/0085531,2016/0152721,2015/0110783,2015/0086991,2015/0086559,2014/0341898,2014/0205602, 2014/0004131,2013/0011405,2012/0121585,2011/0033456,2011/0002934,2010/0172912, 2009/0081242,2009/0130095,2008/0254026,2008/0075727,2009/0304706,2009/0202531, 2009/0117111,2009/0041773,2008/0274118,2008/0057070,2007/0098717,2007/0218060, 2007/0098718,2007/0110754;PCT公开号WO 201 6/069919,WO 2016/023960,WO 2016/023875,WO 2016/028810,WO 2015/134988,WO 2015/091853,WO 2015/091655, WO 2014/065403,WO 2014/070934,WO 2014/065402,WO 2014/207064,WO 2013/034904,WO 2012/125569,WO 2012/149356,WO 2012/111762,WO 2012/145673, WO 2011/123489,WO 2010/123012,WO 2010/104761,WO 2009/094391,WO 2008/091954,WO 2007/129895,WO 2006/128103,WO 2005/063289,WO 2005/063981, WO 2003/040170,WO 2002/011763,WO 2000/075348,WO 2013/164789,WO 2012/075111,WO 2012/065950,WO 2009/062054,WO 2007/124299,WO 2007/053661, WO 2007/053767,WO 2005/044294,WO2005/044304,WO 2005/044306,WO 2005/044855,WO 2005/044854,WO 2005/044305,WO 2003/045978,WO 2003/029296, WO 2002/028481,WO 2002/028480,WO 2002/028904,WO 2002/028905,WO 2002/088186和WO 2001/024823,其各自通过引用并入本发明。
CD122。CD122是白细胞介素2受体β亚基,已知能增加CD8+效应T细胞的增 殖。见Boyman et al.(2012)Nat.Rev.Immunol.12(3):180-190。针对CD122特异性的 多个免疫检查点调节剂已经被开发出来,并可以如本发明所披露的那样使用。在一些 实施方案中,免疫检查点调节剂是调节CD122的活性或表达的药剂。在一些实施方案 中,免疫检查点调节剂是与CD122结合的药剂(例如,抗CD122抗体)。在一些实施方 案中,检查点调节剂是CD122激动剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是CD122 拮抗剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是人源化的MiK-β-1(Roche;参见例 如Morris et al.(2006)Proc Nat’1.Acad.Sci.USA 103(2):401-6)。其他CD122结合蛋白 (例如,抗体)是本领域已知的,并公开于美国专利号9,028,830中,其各自通过引用并 入本发明。
OX40。OX40受体(也被称为CD134)促进效应细胞和记忆T细胞的增殖。OX40 还抑制T调节细胞的分化和活性,并调节细胞因子的产生(参考Croft et al.(2009)Immunol.Rev.229(1):173-91)。针对OX40特异性的多种免疫检查点调节剂已经被开 发出来,并可以如本发明所披露的那样使用。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂 是调节OX40的活性或表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是与OX40 结合的药剂(例如,抗OX40抗体)。在一些实施方案中,检查点调节剂是OX40激动 剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是OX40拮抗剂。在一些实施方案中,免疫检 查点调节剂是OX40结合蛋白(例如抗体),选自MEDI6469(AgonOx/Medimmune)、 pogalizumab(也称为MOXR0916和RG7888,基因泰克公司),tavolixizumab(也叫 MEDI0562;Medimmune),GSK3174998(葛兰素史克)。其他OX40结合蛋白(如抗体)是 本领域已知的,并公开于例如美国专利号9,163,085,9,040,048,9,006,396,8,748,585, 8,614,295,8,551,477,8,283,450,7,550,140;美国专利申请公开号2016/0068604, 2016/0031974,2015/0315281,2015/0132288,2014/0308276,2014/0377284,2014/0044703, 2014/0294824,2013/0330344,2013/0280275,2013/0243772,2013/0183315,2012/0269825, 2012/0244076,2011/0008368,2011/0123552,2010/0254978,2010/0196359,2006/0281072;PCT公开号WO 2014/148895,WO2013/068563,WO 2013/038191,WO 2013/028231,WO 2010/096418,WO 2007/062245和WO2003/106498,其各自通过引用 并入本发明。
GITR。糖皮质激素诱导的TNFR家族相关基因(GITR)是肿瘤坏死因子受体 (TNFR)超家族中的一员,在Treg、CD4+和CD8+T细胞上持续地或有条件地表达。在 TCR连接(ligation)和激活后,GITR在效应T细胞上迅速上调。人的GITR配体 (GITRL)在次级淋巴器官和一些非淋巴组织的APCs上持续表达。GITR:GITRL相互 作用的下游效应诱导Treg活性的减弱,增强CD4+T细胞的活性,从而逆转Treg介导 的免疫抑制,增加免疫刺激。针对GITR特异性的多个免疫检查点调节剂已经开发出 来,并可以如本发明所公开的那样使用。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是调 节GITR的活性或表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是与GITR结合 的药剂(例如,抗GITR抗体)。在一些实施方案中,检查点调节剂是GITR激动剂。在 一些实施方案中,检查点调节剂是GITR拮抗剂。在一些实施方案中,免疫检查点调 节剂是GITR结合蛋白(例如抗体),选自TRX518(Leap Therapeutics)、MK-4166 (Merck&Co.)、MEDI-1873(MedImmune)、INCAGN 1876(Agenus/Incyte)和FPA154(Five Prime Therapeutics)。其他GITR结合蛋白(如抗体)是本领域已知的,并公开于例如美国专利号9,309,321,9,255,152,9,255,151,9,228,016,9,028,823,8,709,424, 8,388,967;美国专利申请公开号2016/0145342,2015/0353637,2015/0064204, 2014/0348841,2014/0065152,2014/0072566,2014/0072565,2013/0183321,2013/0108641,2012/0189639;PCT公开号WO 2016/054638,WO 2016/057841,WO 2016/057846,WO 2015/187835,WO 2015/184099,WO 2015/031667,WO 2011/028683和WO 2004/107618,其各自通过引用并入本发明。
ICOS。可诱导T细胞共刺激因子(ICOS,又称CD278)在激活的T细胞上表达。 它的配体是ICOSL,主要表达于B细胞和树突状细胞上。ICOS在T细胞效应功能中 起着重要作用。在T细胞激活时,ICOS表达上调(参考Fan et al.(2014)J.Exp.Med. 211(4):715-25)。针对ICOS特异性的多个免疫检查点调节剂已经开发出来,并可以如 本发明所披露的那样使用。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是调节ICOS活性 或表达的试剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂可以与ICOS(例如,抗ICOS抗 体)结合。在一些实施方案中,检查点调节剂是ICOS激动剂。在一些实施方案中,检 查点调节剂是ICOS拮抗剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是ICOS结合蛋白 (例如,抗体),选自MEDI-570(也被称为JMab-136,Medimmune)、GSK3359609(葛兰 素史克/1NSERM)和JTX-2011(Jounce Therapeutics)。其他ICOS结合蛋白(如抗体)是本 领域已知的,并公开于例如美国专利号9,376,493,7,998,478,7,465,445,7,465,444;美 国专利申请公开号2015/0239978,2012/0039874,2008/0199466,2008/0279851;PCT公 开号WO 2001/087981,其各自通过引用并入本文。
4-1BB。4-1BB(也称为CD137)是肿瘤坏死因子(TNF)受体超家族的成员。4-1BB(CD137)是一种II型跨膜糖蛋白,在启动的CD4+和CD8+T细胞、激活的NK细胞、 DCs和嗜中性粒细胞上诱导表达,与活化的巨噬细胞、B细胞和DCs上存在的4-1BB 配体(4-1BBL)结合时起T细胞协同刺激分子的作用。连接4-1BB受体导致NF-κB,c- Jun和p38信号通路激活,并且已证明通过抗凋亡基因的BcL-x(L)以及Bfl-1表达上 调促进CD8+T细胞的生存。在这种情况下,4-1BB有助于可以促进甚至挽救次优的免 疫反应。针对4-1BB特异性的多个免疫检查点调节剂已经被开发出来,并可以如本发 明所披露的那样使用。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是调节4-1BB的活性或 表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂可以与4-1BB(例如,抗4-1BB抗 体)结合。在一些实施方案中,检查点调节剂是4-1BB激动剂。在一些实施方案中,检 查点调节剂是4-1BB拮抗剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是4-1BB结合蛋 白,为urelumab(也称为BMS-663513;百时美施贵宝(Bristol-MyersSquibb)或 utomilumab(Pfizer)。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是4-1b结合蛋白(如抗 体)。4-1BB-结合蛋白(如抗体)是本领域已知的,并公开于例如美国专利号9,382,328, 8,716,452,8,475,790,8,137,667,7,829,088,7,659,384;美国专利申请公开号2016/0083474,2016/0152722,2014/0193422,2014/0178368,2013/0149301,2012/0237498, 2012/0141494,2012/0076722,2011/0177104,2011/0189189,2010/0183621,2009/0068192, 2009/0041763,2008/0305113,2008/0008716;PCT公开号WO 2016/029073,WO 2015/188047,WO 2015/179236,WO 2015/119923,WO 2012/032433,WO 2012/145183,WO 2011/031063,WO 2010/132389,WO 2010/042433,WO 2006/126835,WO 2005/035584,WO2004/010947;和Martinez-Forero et al.(2013)J.Immunol.190(12): 6694-706,及Dubrot et al.(2010)Cancer Immunol.Immunother.59(8):1223-33,其各自通 过引用并入本文。
CD2。CD2(分化簇2)是存在于T细胞和NK细胞表面一种细胞粘附分子。它也被 称为T细胞表面抗原T11/Leu-5、LFA-2、LFA-3受体、红细胞受体和玫瑰受体。它与 其它粘附分子相互作用,如人类的淋巴细胞功能相关抗原-3(LFA-3/CD58),或啮齿类 的CD48,其在其他细胞的表面上表达。除了其粘附性,CD2还在T细胞和NK细胞 上起协同刺激分子的作用。CD2是T细胞和NK细胞的一种特异性标志物,因此可用 于免疫组化,以确定组织切片中这种细胞的存在。绝大多数T细胞淋巴瘤和白血病也 表达CD2,这使利用抗原的存在来区分这些情况和B细胞肿瘤成为可能。在一些实施 方案中,免疫检查点调节剂是调节CD2的活性或表达的药剂。在一些实施方案中,免 疫检查点调节剂是与CD2结合的药剂(例如,抗CD2抗体)。在一些实施方案中,检查 点调节剂是CD2激动剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是CD2拮抗剂。
ICAM-1。ICAM-1(细胞间粘附分子1)也被称为CD54(分化簇54),在人类中是 ICAM1基因编码的蛋白质。该基因编码细胞表面糖蛋白,通常在内皮细胞和免疫系统 细胞上表达。它与CD11a/CD18或CD11b/CD18型的整合蛋白结合,也被鼻病毒作 为受体利用。ICAM-1是一种内皮和白细胞相关的跨膜蛋白,长期以来以其在稳定细 胞-细胞相互作用和促进白细胞内皮细胞迁移方面的重要作用而闻名。最近,ICAM-1 被认为是人类鼻病毒进入细胞的位点。ICAM-1连接通过涉及多种激酶(包括激酶 p561yn)的级联信号传导产生促炎作用,如炎症白细胞招募。ICAM-1与蛛网膜下腔出 血(SAH)有关。在许多研究中,SAH患者的ICAM-1水平明显高于对照组。虽然 ICAM-1尚未被证明与脑血管痉挛直接相关,脑血管痉挛是影响70%SAH患者的继发 症状,但抗ICAM-1的治疗可降低血管痉挛的严重程度。在一些实施方案中,免疫检 查点调节剂是调节ICAM-1的活性或表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点调 节剂是与ICAM-1结合的药剂(例如,抗ICAM-1抗体)。在一些实施方案中,检查点调节剂是ICAM-1激动剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是ICAM-1拮抗剂。
NKG2-C。NKG2-C型II型整合膜蛋白在人类中是由KLRC2基因编码的蛋白。自 然杀伤细胞(NK)是淋巴细胞,其可以介导某些肿瘤细胞和病毒感染细胞的裂解,而不 需要事先激活。它们还可以调节特定的体液免疫和细胞介导的免疫。NK细胞优先表 达几种钙依赖(c型)凝集素,这与NK细胞功能的调控有关。这组被命名为KLRC (NKG2)的主要在自然杀伤(NK)细胞中表达,并编码特征为II型膜取向(细胞外C端)和 存在C型凝集素结构域的跨膜蛋白家族。KLRC(NKG2)基因家族位于NK复合体内, 包含在NK细胞上优先表达的几个C型凝集素基因的区域。已经描述了KLRC2的可 变剪接变体,但尚未确定它们的全长性质。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是 调节NKG2C活动和/或表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是与 NKG2C(例如,抗NKG2C抗体)结合的药剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是 NKG2C激动剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是NKG2C拮抗剂。
SLAM7。SLAM家族成员7在人类中是SL4MF7基因编码的蛋白质。表面抗原 CD319(SLAMF7)是多发性骨髓瘤中正常浆细胞和恶性浆细胞的有效标志物。与 CD138(传统的浆细胞标记物)相比,CD319/SLAMF7更加稳定,并且允许从延迟的甚 至低温保存的样品中对恶性浆细胞进行可靠的分离。在一些实施方案中,免疫检查点 调节剂是调节SLAMF7的活性或表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂 是与SLAMF7结合的药剂(例如,抗SLAM抗体)。在一些实施方案中,检查点调节剂 是SLAMF7激动剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是SLAMF7拮抗剂。在一些实 施方案中,免疫检查点调节剂是选自elotuzumab(百时美施贵宝和艾伯维)的SLAMF7 结合蛋白(如抗体)。
NKp80。NKp80也被称为杀伤细胞凝集素样受体F亚家族的1号成员。在所有 CD3-和6/10CD3+的大颗粒淋巴细胞扩增中也检测到NKp80表面表达,所述大颗粒淋 巴细胞扩增来源于患有颗粒状淋巴细胞的淋巴组织增生性疾病的患者。在多克隆的 NK细胞中,mAb介导的NKp80交联诱导了胞溶活性和Ca2+的流动(mobilization)。 不同NK细胞克隆对抗NKp80多抗的的胞溶反应大小存在明显的异质性。这种异质性 与不同NK克隆表达的NKp46分子的表面密度有关。mAb介导的NKp80掩蔽导致部 分抑制NK介导的适当的同种异体植物血凝素诱导的T细胞母细胞(T cell blasts)的 裂解,而它对包括T细胞白血病细胞在内的不同肿瘤靶细胞的裂解没有影响。在一些 实施方案中,免疫检查点调节剂是调节NKp80的活性或表达的药剂。在一些实施方案 中,免疫检查点调节剂是与NKp80结合的药剂(例如,抗NKp80抗体)。在一些实施 方案中,检查点调节剂是NKp80激动剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是NKp80 拮抗剂。
CD30。CD30又称TNFRSF8,是肿瘤坏死因子受体家族的细胞膜蛋白和肿瘤标志 物。活化的T细胞和B细胞表达该受体,但静息的不表达。TRAF2和TRAF5可以与 该受体相互作用,并介导导致NF-κB活化的信号转导。它是细胞凋亡的正调控因子, 也被证明可以限制自身反应性的CD8效应T细胞的增殖潜能,保护机体免受自身免疫 的侵害。已经报道了编码不同同种型的该基因的两种可变剪接的转录物变体。CD30与 间变性大细胞淋巴瘤有关。它在胚胎癌中表达但在精原细胞瘤中不表达,因此是区分 这些生殖细胞肿瘤的有用标记物。CD30和CD15也在经典的霍奇金淋巴瘤Reed- Sternberg细胞上表达。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是调节CD30的活性或 表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是与CD30结合的药剂(例如,抗 CD30抗体)。在一些实施方案中,检查点调节剂是CD30激动剂。在一些实施方案 中,检查点调节剂是CD30拮抗剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是选自本 妥昔单抗(brentuximab vedotin)(Adcetris,Seattle Genetics)的CD30结合蛋白(例 如抗体)。
BAFFR。BAFF受体(B细胞活化因子受体,BAFF-R),又称肿瘤坏死因子受体超 家族成员13C(TNFRSF13C)和BLyS受体3(BR3),是识别BAFF的TNF受体超家族 的膜蛋白。B细胞活化因子(BAFF)在体外增强B细胞存活,并且是外周B细胞群的调 节因子。该基因编码的蛋白质是BAFF的受体,并且是含有单个胞外富含苯丙氨酸的 结构域的III型跨膜蛋白。据认为该受体是BAFF介导的成熟B细胞存活所需的主要受 体。小鼠中BAFF的过表达导致成熟的B细胞增生和系统性红斑狼疮(SLE)的症 状。此外,一些SLE患者血清中BAFF水平升高。因此,已经提出异常高水平的BAFF可通过增强自身反应性B细胞的存活而促成自身免疫疾病的发病机理。在一些 实施方案中,免疫检查点调节剂是调节BAFFR的活性和/或表达的药剂。在一些实施 方案中,免疫检查点调节剂是结合BAFF的药剂(例如,抗BAFFR抗体)。在一些实施方案中,检查点调节剂是BAFFR激动剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是 BAFFR拮抗剂。
HVEM。疱疹病毒侵入介体(HVEM),也称肿瘤坏死因子受体超家族成员14(TNFRSF14),是TNF受体超家族的人细胞表面受体。由该基因编码的蛋白质是TNF 受体超家族的成员。该受体被鉴定为单纯疱疹病毒(HSV)进入的细胞介体。HSV病 毒包膜糖蛋白D(gD)与该受体蛋白的结合已被证明是病毒进入机制的一部分。发现 该受体的细胞质区域与几个TRAF家族成员结合,这可能介导激活免疫应答的信号转 导途径。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是调节HVEM的活性和/或表达的药 剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是结合HVEM的药剂(例如,抗HVEM 抗体)。在一些实施方案中,检查点调节剂是HVEM激动剂。在一些实施方案中,检 查点调节剂是HVEM拮抗剂。
CD7。CD7(分化簇7)在人类中是由CD7基因编码的蛋白质。该基因编码跨膜 蛋白,它是免疫球蛋白超家族的成员。该蛋白质存在于胸腺细胞和成熟T细胞上。它 在早期淋巴发育过程中在T细胞相互作用以及T细胞/B细胞相互作用中起重要作用。 在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是调节CD7的活性和/或表达的药剂。在一些 实施方案中,免疫检查点调节剂是结合CD7的药剂(例如,抗CD7抗体)。在一些 实施方案中,检查点调节剂是CD7激动剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是CD7 拮抗剂。
LIGHT。LIGHT也称为肿瘤坏死因子超家族成员14(TNFSF14),是TNF超家 族的分泌蛋白。它被疱疹病毒侵入介体(HVEM)以及诱骗受体3识别。LIGHT代表 “与淋巴毒素同源,表现出诱导型表达并与HSV糖蛋白D竞争结合疱疹病毒进入介 体,T淋巴细胞上表达的受体”。在分化簇术语中,它被分类为CD258。由该基因编 码的蛋白质是肿瘤坏死因子(TNF)配体家族的成员。该蛋白质是TNFRSF14的配 体,TNFRSF14是肿瘤坏死因子受体超家族的成员,并且也称为疱疹病毒进入介体配 体(HVEML)。该蛋白质可以作为激活淋巴样细胞的共刺激因子,并且可以阻止疱疹 病毒的感染。已显示该蛋白质刺激T细胞的增殖,并引发各种肿瘤细胞的凋亡。据报 道,该蛋白质还可预防原代肝细胞中肿瘤坏死因子α介导的细胞凋亡。已经报道了编 码不同同种型的两种可变剪接的转录物变体。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂 是调节LIGHT的活性和/或表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是结合LIGHT(例如,抗LIGHT抗体)的药剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是 LIGHT激动剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是LIGHT拮抗剂。
CD83。CD83(分化簇83)是由CD83基因编码的人蛋白质。CD83是一种整合(integral)膜蛋白,属于免疫球蛋白超家族。在免疫学中,这种抗原自从最初描述其 对这些非常有效的抗原呈递细胞的表达选择性以来已被广泛用于检测活化/成熟树突细 胞(DC)。DC不是唯一表达CD83的细胞,CD83也可以在多种白细胞上瞬时存 在。由该基因编码的蛋白质是单通I型膜蛋白和受体的免疫球蛋白超家族的成员。该 被编码的蛋白质可能参与抗原呈递的调节。该蛋白质的可溶形式可与树突细胞结合并 抑制其成熟。已经发现了该基因的编码不同同种型的三种转录变体。在一些实施方案 中,免疫检查点调节剂是调节CD83的活性和/或表达的药剂。在一些实施方案中,免 疫检查点调节剂是结合CD83的药剂(例如,抗CD83抗体)。在一些实施方案中, 检查点调节剂是CD83激动剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是CD83拮抗剂。
ii.抑制性免疫检查点分子
ADORA2A。腺苷A2A受体(A2A4)是G蛋白偶联受体(GPCR)家族的成员, 其具有七个跨膜α螺旋,并且被认为是癌症治疗中的重要检查点。A2A受体可负向调 节过度反应性免疫细胞(参考Ohta et al.(2001)Nature 414(6866):916-20)。已经开发了 对ADORA2A特异的多种免疫检查点调节剂,并且可以如发明所披露的那样使用。在 一些实施方案中,免疫检查点调节剂是调节ADORA2A的活性和/或表达的药剂。在一 些实施方案中,免疫检查点调节剂是结合ADORA2A的药剂(例如,抗ADORA2A抗 体)。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是ADORA2A结合蛋白(例如,抗 体)。在一些实施方案中,检查点调节剂是ADORA2A激动剂。在一些实施方案中, 检查点调节剂是ADORA2A拮抗剂。ADORA2A结合蛋白(例如抗体)是本领域已知 的,并且公开于例如美国专利申请公开号2014/0322236中,其通过引用并入本文。
B7-H3。B7-H3(也称为CD276)属于B7超家族,这是一组共刺激或下调T细胞 反应的分子。B7-H3有效且一致地下调人T细胞应答(参考Leitner et al.(2009)Eur.J.Immunol.39(7):1754-64)。已经开发了对B7-H3特异的多种免疫检查点调节剂,并且 可以如本发明所披露的那样使用。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是调节B7- H3的活性和/或表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是结合B7-H3的 药剂(例如,抗B7-H3抗体)。在一些实施方案中,检查点调节剂是B7-H3激动剂。 在一些实施方案中,检查点调节剂是B7-H3拮抗剂。在一些实施方案中,免疫检查点 调节剂选自DS-5573(DaiichiSankyo,Inc.)、enoblituzumab(MacroGenics,Inc.)和 8H9(Sloan Kettering Institutefor Cancer Research;Ahmed et al.(2015)J.Biol.Chem. 290(50):30018-29)。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是B7-H3结合蛋白(例 如,抗体)。B7-H3结合蛋白(例如抗体)是本领域已知的,并公开于美国专利号 9,371,395,9,150,656,9,062,110,8,802,091,8,501,471,8,414,892;和美国专利申请公开号 2015/0352224,2015/0297748,2015/0259434,2015/0274838,2014/032875,2014/0161814,2013/0287798,2013/0078234,2013/0149236,2012/02947960,2010/0143245, 2002/0102264;PCT公开号WO 2016/106004,WO2016/033225,WO 2015/181267, WO 2014/057687,WO 2012/147713,WO 2011/109400,WO2008/116219,WO 2003/075846,WO 2002/032375和Shi等人(2016)Mol.Med.Rep.14(1):943-8,其各自 通过引用并入本发明。
B7-H4。B7-H4(也称为O8E,OV064和含有V-set结构域的T细胞活化抑制剂(VTCN1))属于B7超家族。通过阻滞细胞周期,T细胞的B7-H4连接对细胞生 长,细胞因子分泌和细胞毒性的发展具有显着的抑制作用。向小鼠施用B7-H4Ig会损 害抗原特异性T细胞应答,而通过特异性单克隆抗体阻断内源性B7-H4促进T细胞应 答(参考Sica et al.(2003)Immunity 18(6):849-61)。已经开发了对B7-H4特异的多种免 疫检查点调节剂,并且可以如本发明所披露的那样使用。在一些实施方案中,免疫检 查点调节剂是调节B7-H4的活性和/或表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点调 节剂是结合B7-H4的药剂(例如,抗B7-H4抗体)。在一些实施方案中,免疫检查点 调节剂是B7-H4结合蛋白(例如,抗体)。在一些实施方案中,检查点调节剂是B7- H4激动剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是B7-H4拮抗剂。B7-H4结合蛋白(例 如抗体)是本领域已知的,并公开于美国专利No.9,296,822,8,609,816,8,759,490, 8,323,645和美国专利申请公开号20160159910,2016/0017040,2016/0168249, 2015/0315275,2014/0134180,2014/0322129,2014/0356364,2014/0328751,2014/0294861, 2014/0308259,2013/0058864,2011/0085970,2009/0074660,2009/0208489和PCT公开 号WO 2016/040724,WO 2016/070001,WO 2014/159835,WO 2014/100483,WO 2014/100439,WO 2013/067492,WO 2013/025779,WO 2009/073533,WO2007/067991和WO 2006/104677,其各自通过引用并入到本发明中。
BTLA。B和T淋巴细胞衰减因子(BTLA)也被称为CD272,其配体为HVEM(疱 疹病毒进入介体)。人CD8+T细胞从初始T细胞分化成效应细胞表型过程中,BTLA 的表面表达逐渐下调,而肿瘤特异性的人CD8+ T细胞表达高水平的BTLA(参考 Derre et al.(2010)J.Clin.Invest.120(1):157-67)。针对BTLA特异性的多个免疫检查 点调节剂已经开发出来,并可按本发明所披露的那样公开使用。在一些实施方案中, 免疫检查点调节剂是调节BTLA的活动和/或表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检 查点调节剂是与BTLA结合的药剂(例如,抗BTLA抗体)。在一些实施方案中,免疫 检查点调节剂是BTLA结合蛋白(例如,抗体)。在一些实施方案中,检查点调节剂是 BTLA激动剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是BTLA拮抗剂。BTLA结合蛋白 (例如抗体)是本领域已知的,并公开于例如美国专利号9,346,882,8,580,259, 8,563,694,8,247,537和美国专利申请公开号2014/0017255,2012/0288500,2012/0183565,2010/0172900和PCT公开号WO 2011/014438和WO 2008/076560,其各自通过引用并入本文。
CTLA-4。细胞毒性T淋巴细胞抗原-4(CTLA-4)是免疫调节CD28-B7免疫球蛋 白超家族的成员,并作用于初始和静息T淋巴细胞,通过B7依赖性和B7非依赖性途 径促进免疫抑制(参考Kim et al.(2016)J.Immunol.Res.,Article ID 4683607,14pp.)。 CTLA-4也称为CD152。CTLA-4调节T细胞活化的阈值。参考Gajewski et al.(2001)J. Immunol.166(6):3900-7。CTLA-4特异的多种免疫检查点调节剂已经被开发了,并且 可以如本发明所披露的那样使用。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是调节 CTLA-4的活性和/或表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是结合 CTLA-4(例如,抗-CTLA-4抗体)的药剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是 CTLA-4激动剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是CTLA-4拮抗剂。在一些实施方 案中,免疫检查点调节剂选自伊匹单抗(ipilimumab)(Yervoy;Medarex/Bristol- Myers Squibb)、tremelimumab(以前称ticilimumab;Pfizer/AstraZeneca)、JMW- 3B3(阿伯丁大学)和AGEN1884(Agenus)。其他的CTLA-4结合蛋白(例如抗 体)是本领域已知的,并公开于例如美国专利号8,697,845;美国专利申请公开号 2014/0105914,2013/0267688,2012/0107320,2009/0123477;和PCT公开号 WO 2014/207064,WO2012/120125,WO 2016/015675,WO 2010/097597,WO 2006/066568和WO 2001/054732,其各自通过引用并入本发明中。
IDO。吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)是一种具有免疫抑制特性的色氨酸分解代谢 酶。另一个重要的分子是TDO,色氨酸2,3-双加氧酶。已知IDO抑制T细胞和NK细 胞,产生并激活Tregs和骨髓来源的抑制细胞,并促进肿瘤血管生成。Prendergast et al.,2014,CancerImmunol Immunother.63(7):721-35。1DO特异的多种免疫检查点调 节剂已经开发出来了,并且可以如本发明所披露的那样使用。在一些实施方案中,免 疫检查点调节剂是调节IDO的活性和/或表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点 调节剂是结合IDO的药剂(例如,IDO结合蛋白,例如抗IDO抗体)。在一些实施方 案中,检查点调节剂是IDO激动剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是IDO拮抗 剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂选自Norharmane、迷迭香酸、COX-2抑制 剂、α-甲基-色氨酸和Epacadostat。在一个实施方案中,调节剂是Epacadostat。
KIR。杀伤免疫球蛋白样受体(KIR)由多种MHCI结合分子组成,它们负调控 自然杀伤(NK)细胞功能以保护细胞免受NK介导的细胞裂解。KIR通常在NK细胞 上表达,但也在肿瘤特异性CTL上检测到。已经开发了对KIR特异的多种免疫检查点 调节剂,并且可以如本发明所披露的那样使用。在一些实施方案中,免疫检查点调节 剂是调节KIR的活性和/或表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是结合 KIR的药剂(例如,抗KIR抗体)。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是KIR结 合蛋白(例如,抗体)。在一些实施方案中,检查点调节剂是KIR激动剂。在一些实 施方案中,检查点调节剂是KIR拮抗剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是 lirilumab(也称为BMS-986015;Bristol-Myers Squibb)。另外的KIR结合蛋白(例如 抗体)是本领域已知的,并公开于美国专利8,981,065,9,018,366,9,067,997,8,709,411, 8,637,258,8,614,307,8,551,483,8,388,970,8,119,775和美国专利号8,981,065中。美国 专利申请公开号2015/0344576,2015/0376275,2016/0046712,2015/0191547, 2015/0290316,2015/0283234,2015/0197569,2014/0193430,2013/0143269, 2013/0287770,2012/0208237,2011/0293627,2009/0081240,2010/018972和PCT公开 号WO 2016/069589,WO 2015/069785,WO 2014/066532,WO 2014/055648, WO 2012/160448,WO 2012/071411,WO 2010/065939,WO 2008/084106, WO 2006/072625,WO 2006/072626,和WO 2006/003179,其各自通过引用并入本发 明。
LAG-3。淋巴细胞活化基因3(LAG-3,也称为CD223)是CD4相关的跨膜蛋 白,其竞争性结合MHC II并且作为T细胞活化的共抑制性检查点(参考Goldberg and Drake(2011)Curr.Top.Microbiol.Immunol.344:269-78)。针对LAG-3特异的多种免疫 检查点调节剂已经开发出来了,并且可以如本文所公开的那样使用。在一些实施方案 中,免疫检查点调节剂是调节LAG-3的活性和/或表达的药剂。在一些实施方案中, 免疫检查点调节剂是结合LAG-3(例如,抗PD-1抗体)的药剂。在一些实施方案 中,检查点调节剂是LAG-3激动剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是LAG-3拮 抗剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是选自如下的LAG-3结合蛋白(例如, 抗体):Relatlimab(Bristol-Myers Squibb/小野制药)、Eftilagimod(也称为IMP321, Immutep)、LAG525(也称为IMP701,Immutep/Novartis)、BI-754111(Boehringer Ingelheim)、TSR033(AnaptysBio/Tesaro,Inc.)、IMP-761(Immutep/Prima Biomed)、 IBI110(信达生物制药)、GSK-2831781(也称为IMP731,Immutep/GlaxoSmithKline)、 MK-4280(Merck&Co.,Inc.)和REGN3767(Regeneron/Sanofi)。另外的LAG-3结合蛋 白(例如抗体)是本领域已知的,并公开于例如美国专利号10,266,591、9,908,936、 10,358,495、10,188,730;美国专利申请公开号2019/233513、2019/169294;PCT公开 号WO2019/141092、WO2017/220555、WO2019/129137、WO2018/069500、 WO2014/008218、WO2017/037203,其各自通过引用并入本发明。
PD-1。程序性细胞死亡蛋白1(PD-1,也称为CD279和PDCD1)是一种负调节 免疫系统的抑制性受体。与主要影响初始T细胞的CTLA-4相比,PD-1在免疫细胞上 更广泛地表达并调节外周组织和肿瘤微环境中的成熟T细胞活性。PD-1通过干扰T细 胞受体信号传导来抑制T细胞应答。PD-1具有两个配体,PD-L1和PD-L2。PD-1特异 的多种免疫检查点调节剂已经开发出来了,并且可以如本发明所披露的那样使用。在 一些实施方案中,免疫检查点调节剂是调节PD-1的活性和/或表达的药剂。在一些实 施方案中,免疫检查点调节剂是结合PD-1的药剂(例如,抗PD-1抗体)。在一些实 施方案中,检查点调节剂是PD-1激动剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是PD-1 拮抗剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是PD-1结合蛋白(例如,抗体),选 自帕博利珠单抗(Keytruda;以前称lambrolizumab;Merck&Co.,Inc.)、纳武单抗 (Opdivo;Bristol-Myers Squibb)、pidilizumab(CT-011,CureTech),JS-001(上海 俊士生物科技有限公司)、SHR-1210(Incyte/Jiangsu Hengrui Medicine Co.,Ltd。)、MEDI0680(也称为AMP-514;Amplimmune Inc./Medimmune)、PDR001 (Novartis)、BGB-A317(BeiGene Ltd.)、TSR-042(也称为ANB011;AnaptysBio/ Tesaro,Inc.)、REGN2810(也称为cemiplimab,Regeneron Pharmaceuticals, Inc./Sanofi-Aventis)和PF-06801591(辉瑞)。另外的PD-1结合蛋白(例如抗体)是 本领域已知的,并公开于例如美国专利号9,181,342,8,927,697,7,488,802, 7,029,674;美国专利申请公开号2015/0152180,2011/0171215,2011/0171220和PCT公 开号WO 2004/056875,WO 2015/036394,WO 2010/029435,WO 2010/029434,WO 2014/194302,其各自通过引用并入本发明。
PD-L1/PD-L2。PD配体1(PD-L1,也称为B7-H1)和PD配体2(PD-L2,也称 为PDCD1LG2,CD273和B7-DC)与PD-1受体结合。两种配体都属于B7家族,作为 B7-1和B7-2蛋白质与CD28和CTLA-4相互作用。PD-L1可以在许多细胞类型上表 达,包括上皮细胞,内皮细胞和免疫细胞。PD-L1的连接降低IFNγ,TNFα和IL-2的 产生并刺激IL10的产生,IL10是与T细胞反应性和增殖降低以及抗原特异性T细胞 无反应性相关的抗炎细胞因子。PD-L2主要在抗原呈递细胞(APC)上表达。PDL2连 接也导致T细胞抑制,但PD-L1-PD-1相互作用通过G1/G2期细胞周期停滞抑制增 殖,已显示PD-L2-PD-1参与通过在低抗原浓度阻断B7:CD28信号和在高抗原浓度 下减少细胞因子的产生从而抑制TCR介导的信号传导。PD-L1和PD-L2特异的多种免 疫检查点调节剂已经开发出来了,并且可以如本发明所披露的那样使用。
在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是调节PD-L1的活性和/或表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是结合PD-L1的药剂(例如,抗PD-L1抗体)。 在一些实施方案中,检查点调节剂是PD-L1激动剂。在一些实施方案中,检查点调节 剂是PD-L1拮抗剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是PD-L1结合蛋白(例 如,抗体或Fc-融合蛋白)选自德瓦鲁单抗(durvalumab)(也称为MEDI-4736; AstraZeneca/Celgene Corp./Medimmune)、阿特珠单抗(atezolizumab)(Tecentriq;也 称为MPDL3280A和RG7446;Genetech Inc.)、阿维单抗(avelumab)(也称为 MSB0010718C;Merck Serono/AstraZeneca);MDX-1105(BMS-936559,Medarex/ Bristol-Meyers Squibb)、AMP-224(Amplimmune,GlaxoSmithKline)、LY3300054 (Eli Lilly and Co.)、JS003(ShanghaiJunshi Bioscience Co.,Ltd。)、SHR-1316 (江苏恒瑞医药有限公司),KN035(Alphamab和3D药品)、或CK-301 (Checkpoint Therapeutics)。其它的PD-L1结合蛋白是本领域已知的并且公开于美国 专利申请公开号2016/0084839,2015/0355184,2016/0175397和PCT公开号WO 2014/100079,WO 2016/030350,WO 2013181634中,其每一篇通过引用结合到本发明中。
在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是调节PD-L2的活性和/或表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是与PD-L2结合(例如,抗PD-L2抗体)的药剂。 在一些实施方案中,检查点调节剂是PD-L2激动剂。在一些实施方案中,检查点调节 剂是PD-L2拮抗剂。PD-L2结合蛋白(例如抗体)是本领域已知的,并公开于美国专 利号9,255,147,8,188,238。美国专利申请公开号2016/0122431,2013/0243752, 2010/0278816,2016/0137731,2015/0197571,2013/0291136,2011/0271358和PCT公开号 WO 2014/022758和WO2010/036959,其各自通过引用并入本发明中。
TIM-3。T细胞免疫球蛋白粘蛋白3(TIM-3,也称为甲型肝炎病毒细胞受体(HAVCR2))是A型I型糖蛋白受体,其与S型凝集素半乳糖凝集素-9(Gal-9)结 合。TIM-3是淋巴细胞,肝脏,小肠,胸腺,肾脏,脾脏,肺脏,肌肉,网织红细胞 和脑组织中广泛表达的配体。最初鉴定TIM-3在分泌IFN-γ的Th1和Tc1细胞上选择 性表达(Monney et al.(2002)Nature 415:536-41)。Gal-9与TIM-3受体的结合触发下游 信号传导以负调节T细胞存活和功能。TIM-3特异的多种免疫检查点调节剂已经开发 了,并且可以如本发明所披露的那样使用。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是 调节TIM-3的活性和/或表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是结合 TIM-3的药剂(例如,抗TIM-3抗体)。在一些实施方案中,检查点调节剂是TIM-3 激动剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是TIM-3拮抗剂。在一些实施方案中,免 疫检查点调节剂是选自TSR-022(AnaptysBio/Tesaro,Inc.)和MGB453(Novartis) 的抗TIM-3抗体。另外的TIM-3结合蛋白(例如抗体)是本领域已知的,并公开于美 国专利号9,103,832,8,552,156,8,647,623,8,841,418美国专利申请公开号2016/0200815,2015/0284468,2014/0134639,2014/0044728,2012/0189617,2015/0086574, 2013/0022623和PCT公开号WO 2016/068802,WO 2016/068803,WO 2016/071448,WO 2011/155607和WO 2013/006490,其各自通过引用并入本发明中。
VISTA。T细胞活化的V结构域Ig抑制剂(VISTA,也称为血小板受体Gi24)是 负调节T细胞应答的Ig超家族配体。参考Wang et al.,2011,J.Exp.Med.208:577-92。 在APC上表达的VISTA直接抑制CD4+和CD8+ T细胞增殖和细胞因子产生(Wang et al.(2010)J ExpMed.208(3):577-92)。VISTA特异的多种免疫检查点调节剂已经开发 了,并且可以如本发明所披露的那样使用。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是 调节VISTA的活性和/或表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是结合 VISTA的药剂(例如,抗VISTA抗体)。在一些实施方案中,检查点调节剂是 VISTA激动剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是VISTA拮抗剂。在一些实施方案 中,免疫检查点调节剂是选自TSR-022(AnaptysBio/Tesaro,Inc。)和MGB453 (Novartis)的VISTA结合蛋白(例如,抗体)。VISTA结合蛋白(例如抗体)是本 领域已知的,并公开于例如美国专利申请公开号2016/0096891和PCT公开号WO2014/190356,WO 2014/197849,WO 2014/190356和WO 2016/094837,其各自通过引 用并入本发明中。
CD160。CD160是一种27kDa糖蛋白,其最初用单克隆抗体BY55鉴定。它的表 达与外周血NK细胞和CD8T淋巴细胞与胞溶作用密切相关。CD160的cDNA序列预 测具有181个氨基酸的富含半胱氨酸的糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白,具有与KIR2DL4分 子弱同源的单个Ig样结构域。CD160在细胞表面表达为紧密二硫键连接的多聚体。 RNA印迹分析显示CD160mRNA为1.5和1.6kb,其表达高度限制于循环的NK和T 细胞,脾和小肠。在NK细胞内,CD160由CD56dimCD16+细胞表达,而在循环T细 胞中,其表达主要限于携带TCRgd的细胞和TCRab+CD8brightCD95+CD56+CD28- CD27-细胞。在组织中,CD160在所有肠上皮内淋巴细胞上表达。CD160显示出与经 典和非经典MHC I类分子结合的广泛特异性。CD160是HVEM的配体,并且被认为 是潜在免疫检查点抑制剂,与抗PD-1抗体一起具有抗癌活性。CD160也被提议作为人类病理性眼和肿瘤新血管生成(其对现有的抗血管生成药物没有反应或变为耐药性) 的情况下的潜在新靶标,其。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是调节CD160的 活性和/或表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是结合CD160的药剂 (例如,抗CD160抗体)。在一些实施方案中,检查点调节剂是CD160抑制剂。在 一些实施方案中,检查点调节剂是CD160激活剂。
2B4。自然杀伤细胞受体2B4也称为CD244(分化簇244),其是由CD244基因 编码的人蛋白质。该基因编码细胞表面受体表达在自然杀伤细胞(NK细胞)(和一些T 细胞)中,介导非主要组织相容性复合体(MHC)限制性杀伤。NK细胞和靶细胞通过 这个受体的相互作用被认为可以调节NK细胞的胞溶活性。已发现该基因编码不同同 种型的可变剪接转录物变体。CD244也可以在非淋巴细胞上表达,例如嗜酸性粒细 胞,肥大细胞和树突细胞。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是调节2B4的活性 和/或表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是结合2B4的药剂(例如, 抗2B4抗体)。在一些实施方案中,检查点调节剂是2B4激动剂。在一些实施方案 中,检查点调节剂是2B4拮抗剂。
TGFβ。转化生长因子β(TGF-β)是一种多功能细胞因子,属于转化生长因子 超家族,包括四种不同的同种型(TGF-β1至4,HGNC符号TGFB1,TGFB2, TGFB3,TGFB4)和由所有白细胞系产生的很多其他信号蛋白。
在正常细胞,TGF-β通过其信号通路起作用,使细胞周期停止在G1阶段使细胞停止增殖从而诱细胞导分化或促进细胞凋亡。在许多癌细胞中,部分TGF-β信号传导途 径发生突变,TGF-β不再控制细胞,这些癌细胞就增殖,周围的基质细胞(成纤维细 胞)也增殖。两种细胞都增加了TGF-β的产生。这种TGF-β作用于周围的基质细胞, 免疫细胞,内皮细胞和平滑肌细胞。它引起免疫抑制和血管生成,使癌症更具侵袭 性。TGF-β还将通常以炎症(免疫)反应攻击癌症的效应T细胞转化为调节(抑制)T 细胞,从而抑制炎症反应。通过表达粘附分子和分泌细胞因子的不同细胞类型之间的 反馈作用来保持正常组织完整性。癌症中这些反馈机制的破坏会损害组织。当TGF-β 信号传导不能控制癌细胞中的NF-κB活性时,这至少有两种潜在的影响:首先,它使 恶性肿瘤在活化的免疫细胞存在下持续存在,其次,癌细胞比免疫细胞更长久因为它 可以在凋亡和抗炎介质的情况下存活。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是调节 TGF-β的活性和/或表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是结合TGF-β 的药剂(例如,抗TGF-β抗体)。在一些实施方案中,检查点调节剂是TGF-β激动 剂。在一些实施方案中,检查点调节剂是TGF-β拮抗剂。
TIGIT。具有Ig和ITIM结构域(TIGIT)的T细胞免疫受体是存在于一些T细胞 和自然杀伤细胞(NK)上的免疫受体。它也被识别为WUCAM和Vstm3。TIGIT可以 高亲和力结合树突细胞(DC),巨噬细胞等上的CD155(PVR),也可以低亲和力结 合CD112(PVRL2)。
已经显示TIGIT和PD-1在来自患有黑色素瘤的个体的肿瘤抗原特异性(TA特异性)CD8+T细胞和CD8+肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)上过表达。Chauvin et al.,J ClinInvest.125(5):2046-2058。阻断TIGIT和PD-1可以导致TA特异性CD8+T细胞和 TIL CD8+T细胞的细胞增殖,细胞因子产生,和去颗粒作用。TIGIT和PD-1途径的共 同阻断在临床前小鼠模型中引发肿瘤排斥。Johnston et al.,Cancer Cell.26(6):923- 937。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是调节TIGIT的活性和/或表达的药剂。 在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是结合TIGIT的药剂(例如,抗TIGIT抗 体)。在一些实施方案中,检查点调节剂是TIGIT激动剂。在一些实施方案中,检查 点调节剂是TIGIT拮抗剂。
LAIR1。白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR1)在人类中是由LAIR1基因编 码的蛋白质。LAIR1也被指定为CD305(分化簇305)。由该基因编码的蛋白质是在 外周单核细胞(包括NK细胞,T细胞和B细胞)上发现的抑制性受体。抑制性受体 调节免疫应答以防止被识别为自身的细胞裂解。该基因是免疫球蛋白超家族和白细胞 相关抑制受体家族的成员。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是调节LAIR1的活 性和/或表达的药剂。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂是结合LAIR1的药剂(例 如,抗LAIR1抗体)。在一些实施方案中,检查点调节剂是LAIR1激动剂。在一些实 施方案中,检查点调节剂是LAIR1拮抗剂。
在一些实施方案中,免疫检查点分子是PD-1、PD-L1、PD-L2、CTLA-4、TIM- 3、LAG3、CD160、2B4、TGFβ、VISTA、BTLA、TIGIT或LAIR1。在一些实施方案 中,免疫检查点分子是OX40、CD2、CD27、ICAM-1、NKG2C、SLAMF7、NKp80、 B7-H3、LFA-1、1COS、4-1BB、GITR、CD30、CD40、BAFFR、HVEM、CD7、 LIGHT或CD83。在一个具体实施方案中,免疫检查点分子是PD-1。在一个具体实施 方案中,免疫检查点分子是PD-L1。在一个具体实施方案中,免疫检查点分子是 CTLA-4。
IV.组合物
本发明披露了一种包含MDM2抑制剂(例如APG-115)的药物组合物,用于治疗癌症。本发明的药物组合物包含一种或多种在此公开的MDM2抑制剂,或其药学上可接 受的盐,和药学上可接受的载体或稀释剂。本发明的药物组合物中任选地包括一种或 多种在本申请中公开的免疫检查点分子调节剂。
“药学上可接受的载体”和“药学上可接受的稀释剂”是指有助于将活性剂配制和/或施用于受试者和/或被受试者吸收,并且可以包括在本发明的组合物中而没有对受试者造成显著不良毒性反应的物质。药学上可接受的载体和/或稀释剂的非限制性实例 可包括水、NaCl、标准(normal)盐水溶液、乳酸林格氏液(Ringer’s)、标准蔗糖、标 准葡萄糖、粘合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂、包衣、甜味剂、调味剂、盐溶液(例 如林格式溶液)、醇类、油类、明胶类、碳水化合物如乳糖、直链淀粉或淀粉、羟甲 基纤维素、脂肪酸酯、聚乙烯吡咯烷和颜料等。这些制剂可被灭菌,并可根据需要与 辅助剂混合,例如润滑剂、防腐剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、影响渗透压的盐、缓 冲剂、着色剂和/或芳香物质等,它们不会与本文提供的化合物发生有害反应或与本文 提供的化合物的活性相互干扰。本领域普通技术人员将认识到其他药物赋形剂适合与 所公开的化合物一起使用。
本发明的药物组合物选可选地包含一种或多种药学上可接受的载体和/或稀释剂, 例如乳糖、淀粉、纤维素和右旋糖。还可以包括其他赋形剂,例如调味剂、甜味剂和 防腐剂(例如羟基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯和丁酯。更完整的合适的辅料列表可以在“Handbook of Pharmaceutical Excipients(5th Ed.,Pharmaceutical Press(2005))”中找到。本领域技术人员将知道如何制备适合于各种给药途径的制剂。用于选择和制备 合适制剂的常规方法和成分可以在下列资料中获得,例如“Remington′s PharmaceuticalSciences(2003-20th edition)”和1999年出版的“The United States Pharmacopeia:TheNational Formulary(USP 24NF19)”。载体,稀释剂和/或赋形剂在与药物组合物 的其他成分相容并且对其接收者无害的意义上是“可接受的”。
在一些实施方案中,用于组合疗法的药物组合物包含称为APG-115的以下结构的MDM2抑制剂或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中,药物组合物是固体剂型。在一些实施方案中,固体剂型是胶囊。在一些实施方案中,固体剂型是干填充胶囊。在一些实施方案中,固体剂型是干 填充的1号明胶胶囊。在一些实施方案中,胶囊包含约10-500mg的MDM2抑制剂, 例如APG-115。在一些实施方案中,药物组合物或胶囊包含硅化微晶纤维素。
在一些实施方案中,药物组合物或胶囊包含MDM2,例如APG-115,其量为约 10mg,15mg,20mg,25mg,30mg,35mg,40mg,45mg,50mg,55mg,60mg, 65mg,70mg,75mg,80mg,85mg,90mg,95mg,100mg,105mg,110mg, 120mg,130mg,140mg,150mg,160mg,170mg,180mg,190mg,210mg, 220mg,230mg,240mg,250mg,260mg,270mg,280mg,290mg,或300mg。
V.治疗方法
本申请提供了一种在受试者中治疗癌症的方法,包括向受试者施用有效量的本发明的MDM2抑制剂和有效量的至少一种免疫检查点分子调节剂,以治疗癌症。
本文还提供了在有需要的受试者中治疗癌症的方法,包括向受试者施用有效量的本发明的MDM2抑制剂,从而治疗癌症。在某些实施方案中,癌症选自胰腺癌,腺样 囊性癌,肺癌,胃肠道间质瘤和乳腺癌。在某些实施方案中,癌症是局部晚期或转移 性实体瘤或淋巴瘤。在某些实施方案中,受试者是经历过治疗的并且显示疾病进展。
本文还提供了治疗癌症的方法,其包括向有需要的受试者施用治疗有效量的MDM2抑制剂,例如APG-115,其中该方法包括至少一个28天的治疗周期,其中 MDM2抑制剂在治疗周期的第一个连续3周内每隔一天口服给药,并且在治疗周期的 第四周期间不给药,其中治疗有效量为约100mg至约200mg的MDM2抑制剂。
在某些实施方案中,治疗有效量是约100mg的APG-115。
在其他实施方案中,治疗有效量是约150mg的APG-115
在另一个实施方案中,治疗有效量是约200mg的APG-115。
在某些实施方案中,癌症是转移性实体瘤,淋巴瘤,晚期软组织肉瘤或腺样囊性癌。
MDM2抑制剂组合物和施用
本文所述的公开内容适用于MDM2抑制剂(例如,APG-115)作为单一药剂治疗 或作为联合治疗中的联合药剂。在本发明的方法中,MDM2抑制剂(例如,APG- 115)可以以药物组合物的形式施药,例如本发明所述的药物组合物和制剂。在一些实 施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)与至少一种免疫检查点调节剂组合施 用,制备成用于静脉内施用、通过吸入施用、局部施用或口服施用。
在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)以每天至少一个剂量施 用。在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)以每天至少两个剂量施 用。在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)以每天至少三个剂量施 用。在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)以每天一个剂量施用。在 某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)以每天两个剂量施用。在某些实 施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)以每天三个剂量施用。此外,已经提供 MDM2抑制剂(例如APG-115)合适的治疗方案,例如,在美国专利号9,745,314中 所述,其全部内容通过引用明确地并入本发明中。
本领域技术人员通过常规实验是能够确定用于治疗癌症的MDM2抑制剂(例如,APG-115)的有效的无毒剂量。例如,MDM2抑制剂(例如,APG-115)在治疗有效 量可以根据如疾病阶段(例如,I期相对于IV期)、年龄、性别、医学并发症(例 如,免疫抑制的病症或疾病)和受试者的体重、以及MDM2抑制剂(例如,APG- 115)在受试者中引发所需反应的能力等因素变化。可以调整剂量方案以提供最佳治疗 反应。例如,可以每天施用几个分开的剂量或通过连续输注施用,或者剂量根据紧急 性治疗情况按比例减少。在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)以单 独递送时的治疗有效的量施用,如MDM2抑制剂(例如,APG-115)被施用和/或充当 治疗性抗癌症药物,并非主要作为改善其他化学疗法或其他癌症治疗的副作用的药 剂。
在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)以有效改善或增强对肿瘤 的免疫应答的量施用,例如通过增强一种或多种免疫检查点调节剂的治疗效果。下面 提供的剂量可用于MDM2抑制剂(例如APG-115)的任何给药方式,包括局部给药、 吸入给药和静脉内给药(例如连续输注)。
在某些实施方案中,有向受试者施用剂量约0.5mg/kg至约10000mg/kg、约5 mg/kg至约5000mg/kg,约10mg/kg至约3000mg/kg的MDM2抑制剂(例如,APG- 115)。在一个实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)以约10mg/kg至约 1400mg/kg的范围施用。在一个实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)以约10mg/kg至约650mg/kg的范围施用。在一个实施方案中,MDM2抑制剂(例如, APG-115)以约10mg/kg至约200mg/kg的范围施用。在各种实施方案中,MDM2抑 制剂(例如,APG-115)以约1mg/kg、2mg/kg、5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、20 mg/kg、25mg/kg、30mg/kg、35mg/kg、40mg/kg、45mg/kg、50mg/kg、55mg/kg、 60mg/kg、65mg/kg、70mg/kg、75mg/kg、80mg/kg、85mg/kg、90mg/kg、95 mg/kg、100mg/kg、105mg/kg、110mg/kg、120mg/kg、130mg/kg、140mg/kg、150 mg/kg、160mg/kg、170mg/kg、180mg/kg、190mg/kg、210mg/kg、220mg/kg、230 mg/kg、240mg/kg、250mg/kg、260mg/kg、270mg/kg、280mg/kg、290mg/kg或300 mg/kg的剂量施用。
应当理解的是,具有这些值中任何一个作为上限或下限的范围都可以成为本发明的一部分。例如,约50mg/kg至约200mg/kg,或约650mg/kg至约1400mg/kg。在 一个实施方案中,施用的剂量至少约1mg/kg、至少约2mg/kg、至少约5mg/kg、至 少约10mg/kg、至少约12.5mg/kg、至少约20mg/kg、至少约25mg/kg、至少约30 mg/kg、至少约35mg/kg、至少约40mg/kg、至少约45mg/kg、至少约50mg/kg、至 少约55mg/kg、至少约60mg/kg、至少约65mg/kg、至少约70mg/kg、至少约75 mg/kg、至少约80mg/kg、至少约85mg/kg、至少约90mg/kg、至少约95mg/kg、至 少约100mg/kg、至少约104mg/kg、至少约125mg/kg、至少约150mg/kg、至少约 175mg/kg、至少约200mg/kg、至少约250mg/kg、至少约300mg/kg、或至少约400 mg/kg。
在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)以约10mg/kg/天(24h) 至约150mg/kg/天(24h)的剂量施用。在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如, APG-115)以选自下列的剂量施用:约1mg/kg/天(24h)、约2mg/kg/天(24h)、 约5mg/kg/天(24h)、约10mg/kg/天(24h)、约15mg/kg/天(24h)、约20 mg/kg/天(24h)、约25mg/kg/天(24h)、约30mg/kg/天(24h)、约35mg/kg/天 (24h)、约40mg/kg/天(24h)、约45mg/kg/天(24h)、约50mg/kg/天(24h)、约55mg/kg/天(24h)、约60mg/kg/天(24h)、约65mg/kg/天(24h)、70 mg/kg/天(24h)、约75mg/kg/天(24h)、约80mg/kg/天(24h)、约85mg/kg/天 (24h)、约90mg/kg/天(24h)、约95mg/kg/天(24h)、约100mg/kg/天(24 h)、约105mg/kg/天(24h)、约110mg/kg/天(24h)、约120mg/kg/天(24h)、 约130mg/kg/天(24h)、约mg/kg/天(24h)、约150mg/kg/天(24h)、约160mg/kg/天(24h)、约170mg/kg/天(24h)、约180mg/kg/天(24h)、约190mg/kg/ 天(24h)、约200mg/kg/天(24h)、约210mg/kg/天(24h)、约220mg/kg/天 (24h)、约230mg/kg/天(24h)、约240mg/kg/天(24h)、约250mg/kg/天(24 h)、约260mg/kg/天(24h)、约270mg/kg/天(24h)、约280mg/kg/天(24h)、 约290mg/kg/天(24h)、约300mg/kg/天(24h)。
在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)以约10mg/天(24h)至 约150mg/天(24h)的剂量施用。在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG- 115)以下列剂量使用:约1mg/天(24h)、约2mg/天(24h)、约5mg/天(24 h)、约10mg/天(24h)、约15mg/天(24h)、约20mg/天(24h)、约25mg/天 (24h)、约30mg/天(24h)、约35mg/天(24h)、约40mg/天(24h)、约45 mg/天(24h)、约50mg/天(24h)、约55mg/天(24h)、约60mg/天(24h)、 约65mg/天(24h)、70mg/天(24h)、约75mg/天(24h)、约80mg/天(24 h)、约85mg/天(24h)、约90mg/天(24h)、约95mg/天(24h)、约100mg/天 (24h)、约105mg/天(24h)、约110mg/天(24h)、约120mg/天(24h)、约 130mg/天(24h)、约140mg/天(24h)、约150mg/天(24h)、约160mg/天(24 h)、约170mg/天(24h)、约180mg/天(24h)、约190mg/天(24h)、约200 mg/天(24h)、约210mg/天(24h)、约220mg/天(24h)、约230mg/天(24 h)、约240mg/天(24h)、约250mg/天(24h)、约260mg/天(24h)、约270 mg/天(24h)、约280mg/天(24h)、约290mg/天(24h)、约300mg/天(24h)。
在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)以约10mg/kg/周的剂量施 用。在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)以约25mg/kg/周的剂量施 用。在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)以约50mg/kg/周的剂量施 用。在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)以约75mg/kg/周的剂量施 用。在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)以约100mg/kg/周的剂量 施用。在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)以约125mg/kg/周的剂 量施用。在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)以约150mg/kg/周的 剂量施用。在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)以选自下列剂量施 用:约5mg/kg/周、约10mg/kg/周、约25mg/kg/周、约50mg/kg/周、约75mg/kg/ 周、约100mg/kg/周、约125mg/kg/周、约150mg/kg/周、约175mg/kg/周、约200 mg/kg/周、约225mg/kg/周、约250mg/kg/周、约300mg/kg/周、约350mg/kg/周、约 400mg/kg/周、约450mg/kg/周、约500mg/kg/周、约550mg/kg/周、约600mg/kg/ 周、约650mg/kg/周、和约700mg/kg/周。
在一些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)以不同于(例如低于)为 治疗具体肿瘤疾病在标准照护治疗下用于治疗肿瘤疾病的MDM2抑制剂的标准剂量的 剂量施用。在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)的施用剂量比在具 体的肿瘤疾病中MDM2抑制剂(例如,APG-115)分子的标准剂量低5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%或90%。在某些实施方案中,MDM2抑 制剂(例如,APG-115)分子的给药剂量是针对具体癌症的MDM2抑制剂(例如, APG-115)分子的标准剂量的95%、90%、85%、80%、75%、70%、65%、60%、 55%、50%、45%、40%、35%、30%、25%、20%、15%、10%或5%。
在一些实施方案中,每隔一天(QOD)口服施用MDM2抑制剂(例如APG- 115)或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中,MDM2抑制剂(例如APG-115) 或其药学上可接受的盐以约30mg到约250mg的量每隔一天口服施用。在一些实施方 案中,MDM2抑制剂(例如APG-115)或其药学上可接受的盐以约50mg到约200mg 的量每隔一天口服施用。在一些实施方案中,MDM2抑制剂(例如APG-115)或其药 学上可接受的盐,每隔一天以约50mg、100mg、150mg或200mg的量口服施用。
值得注意的是,当MDM2抑制剂(例如,APG-115)在小鼠中应用的剂量范围为 如本文提供的实施例中所披露的10mg/kg至50mg/kg时,对于60kg的人相应的临床 相关剂量分别为48.8mg/天和244mg/天。这里使用转换因子12.3是将小鼠剂量转换为 人体等同剂量(HED)。将动物剂量(mg/kg)乘以km+转换为HED mg/m2。见 “Guidance for IndustryEstimating the Maximum Safe Starting Dose in Initial Clinical Trials forTherapeutics in Adult Healthy Volunteers”,美国卫生和公众服务部,食品和 药物管理局,药物评价和研究中心(CDER),2005年7月,药理学和毒理学。
免疫检查点分子调节剂
提供治疗癌症的方法,通过将MDM2抑制剂组合物与至少一种免疫检查点调节剂组合给予受试者。在某些实施方案中,免疫检查点调节剂刺激受试者的免疫应答。例 如,在一些实施方案中,免疫检查点调节剂刺激或增加刺激性免疫检查点的表达或活 性(例如CD28、CD122、ICOS、OX40、CD2、CD27、ICAM-1、NKG2C、 SLAMF7、NKp80、B7-H3、LFA-1,1COS、4-1BB、GITR、CD30、CD40、BAFFR、 HVEM、CD7、LIGHT或CD83)。在一些实施方案中,免疫检查点调节剂抑制或降 低抑制性免疫检查点的表达或活性(例如A2A4、B7-H3、B7-H4、IDO、KIR、PD-1、PD-L1、PD-L2、CTLA-4、TIM-3、LAG3、CD160,2B4、TGFβ、VISTA、 BTLA、TIGIT或LAIR1)。
在某些实施方案中,免疫检查点调节剂靶向OX40、CD2、CD27、ICAM-1、 NKG2C、SLAMF7、NKp80、B7-H3、LFA-1、1COS、4-1BB、GITR、CD30、 CD40、BAFFR、HVEM、CD7、LIGHT和CD83等免疫检查点分子。在某些实施方案 中,免疫检查点调节剂靶向PD-1、PD-L1、PD-L2、CTLA-4、TIM-3、LAG3、 CD160、2B4、TGFβ、VISTA、BTLA、TIGIT和LAIR1等免疫检查点分子。在具体 实施方案中,免疫检查点调节剂靶向PD-1免疫检查点分子。在具体实施方案中,免疫检查点调节剂靶向PD-L1免疫检查点分子。在具体实施方案中,免疫检查点调节剂靶 向CTLA-4免疫检查点分子。
在某些实施方案中,免疫检查点调节剂是帕博利珠单抗、伊匹单抗、纳武单抗、 阿特珠单抗、阿维单抗或德瓦鲁单抗。在某些实施方案中,免疫检查点调节剂是 AGEN-1884、BMS-986016、CS-1002、LAG525、MBG453、MEDI-570、OREG-103/ BY40、lirilumab或tremelimumab。在某些实施方案中,免疫检查点调节剂是帕博利珠 单抗、纳武单抗、AMP-224、AMP-514、BGB-A317、cemiplimab、JS001、CS1001、 PDR-001、PF-06801591、IBI-308、pidilizumab、SHR-1210或TSR-042。在某些实施方 案中,免疫检查点调节剂是阿特珠单抗、阿维单抗、德瓦鲁单抗、AMP-224、JS003、 LY3300054、MDX-1105、SHR-1316、KN035或CK-301。
在某些实施方案中,免疫检查点分子调节剂恢复抗肿瘤的T细胞的活性。在某些实施方案中,免疫检查点分子调节剂阻断T细胞抑制细胞的活性。在某些实施方案 中,免疫检查点分子调节剂是共刺激检查点分子的激活剂,并且共刺激检查点分子的 激活剂改变T细胞活化所需的共刺激信号。
在某些实施方案中,向受试者施用超过一种(例如2、3、4、5或更多种)免疫检 查点调节剂。当施用一种以上免疫检查点调节剂时,调节剂可各自靶向刺激性免疫检 查点分子,或各自靶标靶向抑制性免疫检查点分子。在某些实施方案中,免疫检查点 调节剂包括至少一种靶向刺激性免疫检查点的调节剂和至少一种靶向抑制性免疫检查 点分子的免疫检查点调节剂。
在某些实施方案中,免疫检查点调节剂是结合蛋白,例如抗体。如本文所用,术 语“结合蛋白”是指可以特异性结合靶分子(例如,免疫检查点分子)的蛋白质或多 肽。在一些实施方案中,结合蛋白是抗体或其抗原结合部分,并且靶分子是免疫检查 点分子。在一些实施方案中,结合蛋白是特异性结合靶分子(例如免疫检查点分子) 的蛋白质或多肽。在一些实施方案中,结合蛋白是配体。在一些实施方案中,结合蛋 白是融合蛋白。在一些实施方案中,结合蛋白是受体。可用于本发明方法的结合蛋白 的示例包括但不限于人源化抗体、抗体Fab片段、双价抗体、抗体药物偶联物、 scFv、融合蛋白、二价抗体、和四价抗体。
如本文所用,术语“抗体”是指包含四条多肽链(两条重链(H)和两条轻链 (L))的任何免疫球蛋白(Ig)分子,或其任何功能片段、突变体、变体或衍生物。 这种突变体,变体或衍生物抗体形式是本领域已知的。在全长抗体中,每条重链包含 重链可变区(本文缩写为HCVR或VH)和重链恒定区,重链恒定区包含三个结构域 CH1、CH2和CH3,每个轻链包含轻链可变区(本文缩写为LCVR或VL)和轻链恒 定区组成。轻链恒定区包含一个结构域CL。VH和VL区域可以进一步细分为高变 区,称为互补决定区(CDR),其被更保守的区域,称为框架区(FR),隔开。每个VH和VL是由三个CDR和四个FR组成,按以下顺序从氨基末端到羧基末端排列如 下:FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。免疫球蛋白分子可以是任何类型 (例如IgG、IgE、IgM、IgD、IgA和IgY),类别(例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、 IgA1和IgA2)或亚类。在一些实施方案中,抗体是全长抗体。在一些实施方案中,抗 体是鼠抗体。在一些实施方案中,抗体是人抗体。在一些实施方案中,抗体是人源化 抗体。在一些实施方案中,抗体是单克隆抗体。在其他实施方案中,抗体是嵌合抗 体。嵌合和人源化抗体可以通过本领域技术人员熟知的方法制备,包括CDR移植方法 (参见,如美国专利号:5,843,708;6,180,370;5,693,762;5,585,089;和5,530,101)、链 改组策略(chain shuffling strategies)(参见,如美国专利号:5,565,332;Rader et al., (1998)PROC.NAT′L.ACAD.SCI.USA 95:8910-8915)、分子建模策略(美国专利 号5,639,641)等。
如本文所用,术语抗体的“抗原结合部分”或“抗原结合片段”(或简称“抗体 部分”)是指抗体的一个或多个片段,其保留具有特异性结合抗原能力。已经发现抗 体的抗原结合能力可以通过全长抗体的片段来执行。此类抗体实施方案还可以是双特 异性,两个特异性(dual specific)或多特异性形式;特异性结合两种或多种不同的抗 原。包含在抗体的术语“抗原结合部分”或“抗原结合片段”内的结合片段的示例包 括(i)Fab片段,由VL、VH、CL和CH1结构域组成的单价片段;(ii)F(ab’)2片 段,包含两个Fab片段的二价片段,所述Fab片段在铰链区通过二硫键连接;(iii) 由VH和CH1结构域组成的Fd片段;(iv)由抗体单臂的VL和VH结构域组成的Fv 片段;(v)dAb片段(Ward et al.(1989)NATURE 341:544-546;和WO 90/05144 A1,其内容通过引用并入本文),其包含单个可变域;和(vi)分离的互补决定区 (CDR)。此外,尽管Fv片段的两个结构域VL和VH由不同的基因编码,但它们可 以通过合成接头使用重组方法连接,使得它们能够作为单个蛋白质链制备,其中VL 和VH区配对形成单价分子(称为单链Fv(scFv);参见,例如,Bird et al.(1988), SCIENCE 242:423-426;和Huston et al.(1988)PROC.NAT′L.ACAD.SCI.USA 85: 5879-5883)。此类单链抗体也意在包括在抗体的术语“抗原结合部分”或“抗原结合 片段”内,还包括其他形式的单链抗体,例如双抗体(diabodies)。抗原结合部分也 可以纳入单结构域抗体、大抗体(maxibodies)、微抗体(minibodies)、纳米抗体 (nanobodies)、胞内抗体(intrabodies)、双抗体(diabodies)、三抗体(triabodies)、四抗 体(tetrabodies)、v-NAR和bis-scFv(参见,例如,Hollinger and Hudson,Nature Biotechnology 23:1126-1136,2005)。
在一些实施方案中,免疫检查点分子调节剂是单克隆抗体或其抗原结合片段。如本文所用,“单克隆抗体”是指参与单一抗原决定簇或表位的高度特异性识别和结合 的同源抗体群,这与通常包括针对不同抗原决定簇的不同抗体的多克隆抗体形成对 比。术语“单克隆抗体”包括完整和全长单克隆抗体以及抗体片段(例如,Fab、 Fab′、F(ab’)2、Fv),单链(scFv)突变体,包含抗体部分的融合蛋白以及包含抗原识 别位点的任何其他修饰的免疫球蛋白分子。此外,“单克隆抗体”是指以任何数量的 方式制备的此类抗体,包括但不限于杂交瘤,噬菌体选择,重组表达和转基因动物 等。
如本文所用,术语“CDR”是指抗体可变序列内的互补决定区。在重链和轻链的 每个可变区中都存在三个CDR,这些可变区其各被称为CDR1、CDR2和CDR3。如 本文所用的术语“CDR组”是指在能够结合抗原的单个可变区中出现的一组三个 CDR。根据不同的系统,这些CDR的确切边界已经被不同地定义。Kabat描述的系统 (Kabat et al.,SEQUENCES OFPROTEINS OF IMMUNOLOGICAL INTEREST (National Institutes of Health,Bethesda,Md.(1987)和(1991))不仅提供了一种适 用于抗体任何可变区域的明确的残基编号系统,而且提供了确定的三个CDR的精确残 基边界。这些CDR可称为Kabat CDRs。Chothia及其同事发现,Kabat CDRs中的某些 亚部分采用几乎相同的肽骨架构象,尽管在氨基酸序列水平上具有很大的多样性 (Chothia et al.,(1987)J.MOL.BIOL.196:901-917,和Chothia etal.(1989)NATURE 342:877-883)。这些子部分被命名为L1,L2和L3或H1,H2和H3,其中“L”和“H”分别表示轻链和重链区域。这些区域可称为Chothia CDRs,其具有与Kabat CDRs重叠的边界。其他定义与Kabat CDRs重叠的CDR的边界可以在下列文献中查 到Padlan et al.(1995)FASEB J.9:133-139,和MacCallum et al.(1996)J.MOL.BIOL. 262(5):732-45。其他CDR边界定义可能不严格遵循上述系统之一,但仍然会与 Kabat CDRs重叠,尽管根据特定残基或残基组甚至整个CDRs不显著影响抗原结合的 预测或实验结果,它们可能会缩短或延长合。本文使用的方法可以利用根据任何这些 系统定义的CDRs,但优选的实施方案使用Kabat或Chothia定义的CDRs。
如本文所用,术语“人源化抗体”是指非人(例如鼠)抗体,其是含有来自非人 免疫球蛋白的最小序列的嵌合免疫球蛋白,免疫球蛋白链或其片段(例如Fv、Fab、 Fab′、F(ab’)2或其他抗原的抗原结合子序列)。在大多数情况下,人源化抗体及其抗 体片段是人免疫球蛋白(受体抗体或抗体片段),其中受体的互补决定区(CDR)的 残基被来自非人物种(例如小鼠、大鼠或兔)的CDR(供体抗体)的残基取代,具有 所需特异性,亲和力和能力(capacity)。在一些情况下,人免疫球蛋白的Fv框架区 (FR)残基被相应的非人残基取代。此外,人源化抗体/抗体片段可包含既不在受体抗 体中也不在导入的CDR或框架序列中存在的残基。这些修饰可以进一步改进和优化抗 体或抗体片段性能。通常,人源化抗体或其抗体片段将包含基本上全部至少一个,通 常是两个可变结构域,其中所有或基本上所有CDR区对应于非人免疫球蛋白的那些并 且全部或大部分的FR区的是人免疫球蛋白序列的那些。人源化抗体或抗体片段还可 以包含免疫球蛋白恒定区(Fc)的至少一部分,通常是人免疫球蛋白的恒定区。有关 详细信息,请参阅Jones et al.(1986)NATURE 321:522-525;Reichmann et al.(1988) NATURE 332:323-329;和Presta(1992)CURR.OP.STRUCT.BIOL.2:593-596,其各 自通过引用整体并入本文。
本文所用的术语“免疫偶联物”或“抗体药物偶联物”是指抗体或其抗原结合片 段与另一种药剂的连接,例如化学治疗剂、毒素、免疫治疗剂、成像探针等等。连接 可以是共价键,或非共价相互作用,例如通过静电力相互连接。可以使用本领域已知 的各种接头以形成免疫偶联物。另外,免疫偶联物可以以融合蛋白的形式提供,所述 融合蛋白可以由编码免疫偶联物的多核苷酸表达而来。
如本文所用,“融合蛋白”是指通过连接两个或更多个基因或基因片段而产生的蛋白质,所述基因或基因片段是最初编码分开的蛋白质(包括肽和多肽)。融合基因 的翻译能产生具有每种原始蛋白质功能特性的单一蛋白质。
“二价抗体”是指包含两个抗原结合位点的抗体或其抗原结合片段。两个抗原结合位点可以结合相同的抗原,或者它们可以各自结合不同的抗原,在这种情况下,抗 体或抗原结合片段的表征为“双特异性”。“四价抗体”是指包含四个抗原结合位点 的抗体或其抗原结合片段。在某些实施方案中,四价抗体是双特异性的。在某些实施 方案中,四价抗体是多特异性的,即结合超过两种不同的抗原。
Fab(片段抗原结合)抗体片段是包含抗体的单价抗原结合结构域免疫反应性多肽,抗体的单价抗原结合结构域由重链可变区(VH)和重链恒定区1(CH1)部分的多 肽和轻链可变(VL)和轻链恒定(CL)部分的多肽组成,其中CL和CH1部分结合在一 起,优选通过Cys残基之间的二硫键结合。
在一个具体实施方案中,免疫检查点调节剂是融合蛋白,例如,调节免疫检查点调节剂活性的融合蛋白。在一个实施方案中,免疫检查点调节剂是治疗性核酸分子, 例如调节免疫检查点蛋白质或mRNA的表达的核酸。核酸治疗剂是本领域熟知的。核 酸治疗剂包括单链和双链(即,具有至少15个核苷酸长度的互补区域的核酸治疗剂) 核酸,其与细胞中的靶序列互补。在某些实施方案中,核酸治疗剂靶向编码免疫检查 点蛋白的核酸序列。
反义核酸治疗剂是单链核酸治疗剂,通常长度为约16至30个核苷酸,并且与靶 细胞中的靶核酸序列互补,无论是在培养物中还是在生物体中。
在另一方面,所述试剂是单链反义RNA分子。反义RNA分子与靶mRNA内的序 列互补。反义RNA可通过与mRNA碱基配对并物理阻碍翻译机制以化学计量方式抑 制翻译,参见Dias,N.et al.,(2002)Mol Cancer Ther 1:347-355.反义RNA分子可具有 与靶mRNA互补的约15-30个核苷酸。涉及反义核酸,化学修饰和治疗用途的专利包 括,例如:美国专利号5,898,031,涉及化学修饰的含RNA治疗化合物;美国专利号6,107,094涉及使用这些化合物作为治疗剂的方法;美国专利号7,432,250涉及通过给 予单链化学修饰的RNA样化合物治疗患者的方法;美国专利号7,432,249涉及含有单 链化学修饰的RNA样化合物的药物组合物;美国专利号7,629,321涉及使用具有多个 RNA核苷和至少一个化学修饰的单链寡核苷酸切割靶mRNA的方法。本段中列出的 每项专利的全部内容在此通过引入并入本发明。
用于本发明方法的核酸治疗剂还包括双链核酸治疗剂。“RNAi剂”、“双链 RNAi剂”、双链RNA(dsRNA)分子,也称为“dsRNA剂”、“dsRNA”、 “siRNA”、“iRNA剂”,如本发明中可互换使用的,是指对于具有双链结构的核糖 核酸分子的复合物,所述双链结构包含两个如下定义的反平行和基本上互补的核酸 链。如本文所用,RNAi剂还可以包括dsiRNA(参见,例如,美国专利公开号 20070104688,通过引用并入本文)。通常,每条链的大多数核苷酸是核糖核苷酸,但 如本文所述,每条链或两条链还可包括一个或多个非核糖核苷酸,例如脱氧核糖核苷 酸和/或修饰的核苷酸。另外,如本说明书所用中,“RNAi剂”可包括具有化学修饰的核糖核苷酸;RNAi剂可包括多个核苷酸的实质性修饰。此类修饰可包括本文公开的 或本领域已知的所有类型的修饰。出于本说明书和权利要求的目的,用于siRNA型分 子的任何此类修饰都包括在“RNAi剂”中。用于本发明方法的RNAi剂包括具有化学 修饰的试剂,例如在WO 2012/037254和WO 2009/073809中公开的,其各自的全部内 容通过引用并入本文。
可以适当的剂量施用免疫检查点调节剂以治疗肿瘤疾病,例如,通过使用标准剂量。本领域技术人员通过常规实验能够确定免疫检查点调节剂用于治疗癌症目的、有 效的无毒剂量。标准剂量的免疫检查点调节剂是本领域技术人员已知的,并且可以从 免疫检查点调节剂的制造商提供的产品说明中获得。免疫检查点调节剂的标准剂量的 示例提供于下表A中。在其他实施方案中,免疫检查点调节剂以不同(例如低于)为 治疗具体肿瘤疾病在治疗标准下用于治疗肿瘤疾病的免疫检查点调节剂的标准剂量的 剂量施用。
表A.免疫检查点调节剂的示例性标准剂量
在某些实施方案中,免疫检查点调节剂用于具体肿瘤治疗的施用剂量比免疫检查点调节剂的标准剂量低5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%或 90%。在某些实施方案中,免疫检查点调节剂对于具体肿瘤疾病的治疗,给药剂量为 免疫检查点调节剂的标准剂量95%、90%、85%、80%、75%、70%、65%、60%、 55%、50%、45%、40%、35%、30%、25%、20%、15%、10%或5%。在一个实 施方案中,当施用免疫检查点调节剂的组合用于具体的肿瘤疾病时,至少一种免疫检 查点调节剂以低于免疫检查点调节剂的标准剂量的剂量施用。在一个实施方案中,当 施用免疫检查点调节剂的组合时,至少两种免疫检查点调节剂以低于具体肿瘤疾病的 免疫检查点调节剂的标准剂量的剂量施用。在一个实施方案中,当施用免疫检查点调 节剂的组合时,至少三种免疫检查点调节剂以低于具体肿瘤疾病的免疫检查点调节剂 的标准剂量的剂量施用。在一个实施方案中,当施用免疫检查点调节剂的组合时,所 有免疫检查点调节剂以低于具体肿瘤疾病的免疫检查点调节剂的标准剂量的剂量施 用。在某些实施方案中,免疫检查点调节剂以低于免疫检查点调节剂的标准剂量的剂 量施用,并且MDM2抑制剂(例如,APG-115)以低于MDM2抑制剂标准剂量的剂量施用。
共同施用MDM2抑制剂和免疫检查点分子调节剂
如本文所用,术语“同时施用”或“共同施用”是指在施用免疫检查点调节剂之 前,同时或基本同时,随后或间歇地施用MDM2抑制剂(例如,APG-115)。在某些 实施方案中,在施用免疫检查点调节剂之前施用MDM2抑制剂(例如,APG-115)。 在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)在免疫检查点调节剂之前和同 时施用。在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)在免疫检查点调节剂 之前但不同时施用,即在免疫检查点调节剂开始治疗或施用之前停止施用MDM2抑制 剂(例如,APG-115)。在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)与免 疫检查点调节剂同时施用。在某些实施方案中,在施用免疫检查点调节剂后施用 MDM2抑制剂(例如,APG-115)。在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)与免疫检查点调节剂同时施用和施用后施用。在某些实施方案中,MDM2抑制 剂(例如,APG-115)在施用免疫检查点调节剂后施用但不与免疫检查点调节剂同时 施用,即在开始施用MDM2抑制剂(例如,APG-115)之前停止施用免疫检查点调节 剂。
MDM2抑制剂(例如,APG-115)和/或其药物组合物和免疫检查点调节剂可以相 加地,或更优选地,协同地起作用。在一个实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG- 115)和免疫检查点调节剂协同作用。在一些实施方案中,在癌症的治疗中起到协同效 应。例如,在一个实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)和免疫检查点调节 剂的组合改善了针对免疫检查点调节剂靶向的癌症的免疫应答的持久性,即延长持续 时间。在其他实施方案中,协同效应是调节与免疫检查点调节剂相关的毒性。在一个 实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)和免疫检查点调节剂相加地起作用。
本发明的组合疗法可用于治疗癌症。在一些实施方案中,MDM2抑制剂(例如, APG-115)和免疫检查点调节剂的组合疗法抑制肿瘤细胞生长。因此,本发明进一步 提供抑制受试者中肿瘤细胞生长的方法,包括向受试者施用MDM2抑制剂(例如, APG-115)和至少一种免疫检查点调节剂,从而抑制肿瘤细胞生长。在某些实施方案 中,与对照组(人群对照)相比,治疗组能够延长存活期或延长至肿瘤进展时间。在 某些实施方案中,受试者是人。在优选的实施方案中,在施用第一剂量的MDM2抑制 剂(例如,APG-115)或第一剂量的免疫检查点调节剂之前,将受试者鉴定为患有肿 瘤。在某些实施方案中,受试者在第一次施用MDM2抑制剂(例如,APG-115)时或 在首次施用免疫检查点调节剂时具有肿瘤。
免疫检查点调节剂在相对于MDM2抑制剂(例如APG-115)施用的时间施用,使 得所需的治疗效果(治疗性效果或协同效应)能够实现。例如,在某些实施方案中, 在施用MDM2抑制剂(例如,APG-115)之后足够长的时间可能是需要的,以有效地 增强免疫检查点调节剂相对于单独的免疫检查点调节剂的功效的功效,或者提高效果 的持久性。在某些实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)的施用开始至少在 施用第一剂免疫检查点调节剂至少2小时、4小时、6小时、8小时、至少12小时、至 少18小时、至少24小时、至少36小时、至少48小时、至少3天、至少4天、至少5 天、至少6天、至少1周、至少2周、至少3周、至少4周、至少5周、至少6周、 至少7周或至少8周前。在本发明方法的具体实施方案中,至少一种免疫检查点调节 剂的施用可以如下开始:开始施用MDM2抑制剂(例如,APG-115)后至少24小 时,开始施用MDM2抑制剂(例如,APG-115)后一周或多周,开始施用MDM2抑 制剂(例如,APG-115)后两周或更多周,开始施用MDM2抑制剂(例如,APG- 115)后三周或多周,开始施用MDM2抑制剂(例如,APG-115)后四周或多周,开 始施用MDM2抑制剂(例如,APG-115)后五周或多周,开始施用MDM2抑制剂 (例如,APG-115)后六周或多周,开始施用MDM2抑制剂(例如,APG-115)后七 周或多周,开始施用MDM2抑制剂(例如,APG-115)后八周或多周。在某些实施方 案中,在开始施用MDM2抑制剂(例如,APG-115)后至少24小时开始施用至少一 种免疫检查点调节剂。在一个实施方案中,在开始施用MDM2抑制剂(例如,APG- 115)后24小时至四周,开始施用至少一种免疫检查点调节剂。在一个实施方案中, 在施用MDM2抑制剂(例如,APG-115)后24小时至1周、1至2周、1至3周或2 至4周开始施用至少一种免疫检查点调节剂。
在一个实施方案中,在开始施用MDM2抑制剂(例如,APG-115)后约1周开始 施用至少一种免疫检查点调节剂。在一个实施方案中,在开始施用MDM2抑制剂(例 如,APG-115)后约2周开始施用至少一种免疫检查点调节剂。在一个实施方案中, 在开始施用MDM2抑制剂(例如,APG-115)后约3周开始施用至少一种免疫检查点 调节剂。在一个实施方案中,在开始施用MDM2抑制剂(例如,APG-115)后约4周 开始施用至少一种免疫检查点调节剂。在一个实施方案中,在开始施用MDM2抑制剂 (例如,APG-115)后约5周开始施用至少一种免疫检查点调节剂。在某些实施方案 中,在开始施用MDM2抑制剂(例如,APG-115)后约6周开始施用至少一种免疫检 查点调节剂。在一个实施方案中,在开始施用MDM2抑制剂(例如,APG-115)后约 7周开始施用至少一种免疫检查点调节剂。在一个实施方案中,在开始施用MDM2抑 制剂(例如,APG-115)后约8周开始施用至少一种免疫检查点调节剂。
在某些实施方案中,在施用免疫检查点调节剂之前施用负荷剂量的MDM2抑制剂(例如,APG-115)。在某些实施方案中,在施用免疫检查点调节剂之前施用MDM2 抑制剂(例如,APG-115)以获得MDM2抑制剂(例如,APG-115)的稳态水平。当 组合疗法包括静脉内MDM2抑制剂(例如,APG-115)制剂,受试者静脉内施用 MDM 2抑制剂(例如,APG-115)使得治疗或预防癌症。在一个实施方案中,向受试 者静脉内施用MDM2抑制剂(例如,APG-115),使得对免疫检查点调节剂的反应得 到改善,例如相对于单独用免疫检查点调节剂的治疗。
在一个实施方案中,在用免疫检查点调节剂开始治疗之前停止施用MDM2抑制剂(例如,APG-115),即用免疫检查点调节剂治疗与用MDM2抑制剂(例如,APG- 115)治疗相互分开。在一个实施方案中,在用免疫检查点调节剂开始治疗后继续或恢 复MDM2抑制剂(例如,APG-115)的施用,使得同时施用MDM2抑制剂(例如, APG-115)和免疫检查点调节剂,如至少一个周期。
在一些实施方案中,治疗癌症的组合疗法包括至少一个21天的治疗周期,其中MDM2抑制剂或其药学上可接受的盐在21天周期的前连续两周内每隔一天在有需要 的患者中口服施用,在治疗周期的第三周不施用。
在一些实施方案中,MDM2抑制剂,如APG-115,或药学上可接受的盐,在21 天治疗周期的第1、3、5、7、9、11和13日在患者中口服施用。
在一些实施方案中,MDM2抑制剂,如APG-115,或药学上可接受的盐,在21 天治疗周期的第14-21天不施用。
在一些实施方案中,MDM2抑制剂,如APG-115,或药学上可接受的盐,在21 天治疗周期的第1、3、5、7、9、11和13天在患者中以约50mg至约200mg的量口服 施用。
在一些实施方案中,MDM2抑制剂,如APG-115,或药学上可接受的盐,在21 天治疗周期的第1、3、5、7、9、11和13天在患者中以约50mg的量口服施用。
在一些实施方案中,MDM2抑制剂,如APG-115,或药学上可接受的盐,在21 天治疗周期的第1、3、5、7、9、11和13天在患者中以约100mg的量口服施用。
在一些实施方案中,MDM2抑制剂,如APG-115,或药学上可接受的盐,在21 天治疗周期的第1、3、5、7、9、11和13天在患者中以约150mg的量口服施用。
在一些实施方案中,MDM2抑制剂,如APG-115,或药学上可接受的盐,在21 天治疗周期的第1、3、5、7、9、11和13天在患者中以约200mg的量口服施用。
在一些实施方案中,PD-1调节剂在21天治疗周期的第1天以200mg的量通过静 脉输注施用。
在一些实施方案中,组合疗法包括至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或 12个21天治疗周期。在一些实施方案中,联合疗法持续至疾病进展或不可接受的毒 性。
在某些实施方案中,将组合疗法的至少1、2、3、4或5个周期施用于受试者。在 每个周期结束时评估受试者的反应标准。还在每个周期中监测受试者的不良事件(例 如,凝血、贫血、肝和肾功能等),以确保治疗方案被充分耐受。
应当注意,可以与MDM2抑制剂(例如,APG-115)组合施用一种以上的免疫检 查点调节剂,例如2、3、4、5或更多种免疫检查点调节剂。例如,在一个实施方案 中,两种免疫检查点调节剂可以与MDM2抑制剂(例如APG-115)组合施用。在一个 实施方案中,三种免疫检查点调节剂可以与MDM2抑制剂(例如,APG-115)组合施 用。在一个实施方案中,四种免疫检查点调节剂可以与MDM2抑制剂(例如,APG- 115)组合施用。在一个实施方案中,五种免疫检查点调节剂可以与MDM2抑制剂 (例如,APG-115)组合施用。在某些实施方案中,两种或更多种免疫检查点调节剂 靶向相同的免疫检查点分子。在某些实施方案中,两种或更多种免疫检查点调节剂各 自靶向不同的免疫检查点分子。
通常,包括MDM2抑制剂(例如,APG-115)和本发明所述的免疫检查点调节剂 的组合疗法或者MDM2抑制剂作为单一疗法可用于治疗癌症。在各种实施方案中,肿 瘤疾病选自白血病、淋巴瘤、黑色素瘤、癌和肉瘤。在一个具体实施方案中,联合疗 法用于治疗实体瘤。在本发明的各种实施方案中,联合疗法用于治疗或预防癌症,这 些癌症选自肾上腺皮质癌、晚期癌症、肛门癌、再生障碍性贫血、胆管癌、膀胱癌、 骨癌、骨转移、成人脑/中枢神经系统肿瘤、儿童脑/中枢神经系统肿瘤、乳腺癌、男性 乳腺癌、儿童癌症、原发癌未知癌症、Castleman病、宫颈癌、结肠/直肠癌、子宫内 膜癌、食道癌、尤因家族肿瘤、眼癌、胆囊癌、胃肠道类癌、胃肠道间质瘤 (GIST)、妊娠滋养细胞疾病、头颈癌、霍奇金病、卡波西肉瘤、肾癌、喉癌和下咽 癌、白血病-急性淋巴细胞癌(ALL)成人、白血病-急性髓细胞样(AML)、白血病-慢性淋巴细胞(CLL)、白血病-慢性粒细胞白血病(CML)、白血病-慢性粒单 核细胞白血病(CMML)、儿童白血病、肝癌、肺癌-非小细胞、肺癌-小细胞、肺 类癌、皮肤淋巴瘤、恶性间皮瘤、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征、鼻腔和鼻窦 癌、鼻咽癌、神经母细胞瘤、非霍奇金淋巴瘤、儿童非霍奇金淋巴瘤、口腔和口咽 癌、骨肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、阴茎癌、垂体瘤、前列腺癌、视网膜母细胞瘤、横纹 肌肉瘤、唾液腺癌、肉瘤-成人软组织癌、皮肤癌-基底和鳞状细胞、皮肤癌-黑色素 瘤、小肠癌、胃癌、睾丸癌、胸腺癌、甲状腺癌、子宫肉瘤、阴道癌、外阴癌、华氏 巨球蛋白血症和肾母细胞瘤。在一个实施方案中,组合疗法用于治疗选自以下的癌 症:黑色素瘤、霍奇金淋巴瘤、肺癌、肾癌、膀胱癌、头颈癌、Merkel细胞癌、尿路 上皮癌、微卫星标记高度不稳定或错配修复缺陷的实体瘤(Solid tumors that aremicrosatellite instability-high or mismatch repair-deficient)、肉瘤、结肠癌、前列腺 癌、绒毛膜癌、乳腺癌、视网膜母细胞瘤、胃癌、急性髓性白血病、淋巴瘤、多发性 骨髓瘤或白血病。在某些实施方案中,组合疗法或单一疗法可用于治疗肝细胞瘤。在 一个实施方案中,组合疗法或单一疗法可用于治疗结直肠癌。在一个实施方案中,组 合疗法或单一疗法可用于治疗适用于抗PD-1/L1疗法的具有高PD-L1表达的肿瘤和具 有高肿瘤基因突变负荷(TMB)的肿瘤。在一个实施方案中,组合疗法或单一疗法可 用于治疗选自目前批准用于抗PD-1/L1疗法的癌症。在某些实施方案中,组合疗法或 单一疗法可用于治疗从胰腺癌、腺样囊性癌、肺癌、胃肠基质肿瘤和乳腺癌中选择的 癌症。在某些实施方案中,癌症是局部晚期或转移性固体肿瘤或淋巴瘤。在某些实施 例中,受试者是经过治疗的,并显示疾病进展。此处使用的″经过治疗″是指受试者已 接受抗癌治疗。疾病进展可以表征为对先前治疗的反应能力降低的特征,例如,肿瘤 大小增加,肿瘤细胞数量增加,或肿瘤生长。
然而,使用本发明的组合疗法或单一疗法的治疗不限于前述类型的癌症。适合用组合疗法治疗的癌症的示例包括但不限于,例如神经胶质瘤、胶质母细胞瘤、霍奇金 病、非霍奇金淋巴瘤、多发性骨髓瘤、神经母细胞瘤、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、横纹 肌肉瘤、原发性血小板增多症、原发性巨球蛋白血症、小细胞肺肿瘤、原发性脑肿 瘤、胃癌、结肠癌、恶性胰腺胰岛素瘤(malignant pancreatic insulanoma)、恶性类 癌、尿道膀胱癌(urinarybladder cancer)、癌前皮肤病变(premalignant skin lesions)、皮肤癌、睾丸癌、淋巴瘤、甲状腺癌、神经母细胞瘤、食道癌癌症、泌尿 生殖道癌、恶性高钙血症、宫颈癌、子宫内膜癌、肾上腺皮质癌和前列腺癌。在一个 实施方案中,MDM2抑制剂(例如,APG-115)可以与免疫检查点调节剂组合使用以 治疗或预防各种类型的皮肤癌(例如,鳞状细胞癌或基底细胞癌)、胰腺癌、乳腺 癌、前列腺癌、肝癌或骨癌。在一个实施方案中,包括MDM2抑制剂(例如,APG- 115)的组合疗法用于治疗皮肤肿瘤病症,包括但不限于鳞状细胞癌(包括SCCIS(原位)和更具侵袭性的鳞状细胞癌)、基底细胞癌(包括浅表性、结节性和浸润性基底 细胞癌)、黑色素瘤或光化性角化病。
在一些实施方案中,联合疗法用于治疗患有不可切除或转移性黑色素瘤的患者。在一些实施方案中,联合疗法用于对PD-1疗法难治或复发的患者。在一些实施方案 中,联合疗法用于治疗患有不可切除或转移性黑色素瘤的患者,该患者对于PD-1疗法 是难治性或复发的。在一些实施方案中,联合疗法用于治疗对抗PD-1治疗有耐药性的 患者。
在一些实施方案中,本公开提供了在接受抗PD-1/PD-L1疗法用于治疗癌症的患者中治疗超进展的方法,其中该方法包括给有需要的患者施用治疗有效量的MDM2抑制 剂,其中MDM2抑制剂,如APG-115,或药学上可接受的盐,其中癌症是黑色素瘤, 不可切除或转移黑色素瘤,晚期实体肿瘤(包括肺癌、肾癌、结直肠癌、头颈部癌、 乳腺癌、脑癌、宫颈癌、子宫内膜癌和其他癌症)。
在某些实施方案中,包括MDM2抑制剂(例如,APG-115)的组合疗法可能对癌 细胞具有的作用可部分地取决于癌细胞表现出的代谢和氧化通量的各种状态。MDM2 抑制剂(例如,APG-115)可用于中断和/或干扰致癌细胞对糖酵解的依赖性和增加的 乳酸利用的转化。由于它涉及癌症状态,这种对肿瘤微环境的糖酵解和氧化通量的干 扰可以以减少癌细胞发展的方式影响细胞凋亡和血管生成。在某些实施方案中, MDM2抑制剂(例如,APG-115)与糖酵解和氧化通量因子的相互作用可以增强 MDM2抑制剂(例如,APG-115)在癌症中发挥其恢复性细胞凋亡作用的能力。
在一个实施方案中,如本发明所述施用MDM2抑制剂(例如,APG-115)和免疫 检查点调节剂导致以下一种或多种:减小肿瘤大小、重量或体积、增加至进展时间、 抑制肿瘤生长、和/或延长患有肿瘤疾病的受试者的存活时间。在某些实施方案中,相 对于单独施用MDM2抑制剂(例如,APG-115)或单独施用免疫检查点调节剂的相应 对照受试者,MDM2抑制剂(例如,APG-115)和免疫检查点调节剂的施用减少肿瘤 大小、重量或体积、增加至进展时间、抑制肿瘤生长和/或延长受试者的存活时间至少 1%、2%、3%、4%、5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、 90%、100%、200%、300%、400%或500%。在某些实施方案中,相对于单独施用 MDM2抑制剂(例如,APG-115)或单独施用免疫检查点调节剂的罹患肿瘤疾病的对 照受试者的相应对照群体施用MDM2抑制剂(例如,APG-115)和免疫检查点调节剂 减少肿瘤大小、重量或体积、增加至进展时间、抑制肿瘤生长和/或延长受试者群体的 存活时间至少1%、2%、3%、4%、5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、 70%、80%、90%、100%、200%、300%、400%或500%。在其他实施方案中,在 治疗前给予MDM2抑制剂(例如,APG-115)和免疫检查点调节剂在患有进展性肿瘤 疾病的受试者中稳定肿瘤疾病。
现在将对本发明的优选实施方案进行详细说明。虽然将结合优选实施方案描述本发明,但应当理解的是,并不是要将本发明限制于所述优选实施方案。相反,旨在覆 盖可如本发明权利要求所限定的本发明精神和范围内的替代,修改和等同物。
实施例
虽然我们已经描述了本发明的许多实施方案,但显而易见地是,本发明基本实施例可以被改变,以提供利用所披露的化合物和方法的其他实施方案。因此应该理解, 本发明披露的范围将由所附的权利要求来限定,而不是由示例方式表示的具体实施例 来定义。
本申请中引用的所有参考文献(包括参考文献、授权专利、公开的专利申请和待审查的专利申请)的内容,通过参考,在此明确地全部引入在本文中。除非另有规 定,本发明中所使用的所有技术和科学术语均符合本领域普通技术人员所熟知的含 义。
缩略语和专业术语
化学试剂和材料
HPMC购自Sigma-Aldrich(St.Louis,MO);磷酸盐缓冲液(PBS)购自Genom Biotech(中国杭州)。HP-β-CD购自Seebio Biotech(中国上海);DMA购自Sigma- Aldrich(St.Louis,MO)。TIL分析研究所用试剂信息(包括生产商、货号和分销商)总 结在表1中。
表1.TIL研究分析用试剂
细胞培养
小鼠肝细胞瘤细胞MH-22A和小鼠结肠癌细胞MC38在体外作为悬浮培养物培养于:添加了10%胎牛血清,100U/mL青链霉素和100μg/mL链霉素和L-谷氨酰胺(2 mM)的DMEM培养基或RPMI1640培养基,置于含5%CO2的气氛中。肿瘤细胞常规 一周两次传代,将处于对数生长期的细胞收集并计数用于肿瘤接种。
配方
表2中详细列出受试物的配方,配方在适当储存条件下三天内用尽。
表2.给药材料配制
临使用前反复颠倒药瓶使其为均匀的配方。
观察和数据采集
动物接种肿瘤细胞后,每天监测动物的健康及死亡情况,例行检查包括观察肿瘤生长和药物治疗对动物日常行为表现的影响,如行为活动、目测摄食摄水量、体重增 加/减少(每周测量两次体重),眼睛/被毛及其它不正常情况。基于各组动物数量记录 死亡和观察到的临床体征。给药以及肿瘤和体重测量的所有过程均在超净工作台中进 行。
每周两次用游标卡尺二维测量肿瘤体积。肿瘤体积按以下公式以mm3表示:
肿瘤体积(mm3)=0.5a×b2,其中a和b分别表示肿瘤的长径和短径。
相对肿瘤体积(RTV)采用下公式计算:
RTV=Vt/V1,其中V1和Vt分别是是是第一天药物处理(第1天)时的平均肿瘤 体积和某时间点(第T天)时的平均肿瘤体积。
协同分数通过以下公式(Clarke R,Breast Cancer Research&Treatment,1997,46(2- 3):255-278)计算:
协同分数=((A/C)×(B/C))/(AB/C);
A是A药物处理的响应;B是B药物处理的响应;C是溶媒对照的响应;AB是A 和B联合用药。
肿瘤参数用标准NCI步骤计算。肿瘤生长抑制百分比T/C(%)用治疗处理的肿 瘤(T)的平均RTV除以对照的肿瘤(C)的平均RTV×100%计算。T/C百分比值是抗 肿瘤有效性的指示:T/C<42%的值NCI认定是显著抗肿瘤活性。T/C值<10%认定为 高度显著的抗肿瘤活性,并且如果满足毒性和某些其他要求(称为DN-2水平活 性),则NCI将其作为临床试验的合理性证明。体重下降最低值(组内平均值)大于 20%,或药物致死大于20%表示过度毒性剂量。
流式细胞术
应用活/死可固定染料(Invitrogen)排除死细胞。应用eBioscience的FOXP3试剂盒对FOXP3进行染色。洗涤细胞并在MACS缓冲液或Brilliant染色缓冲液中加入指示 抗体,冰上染色30分钟。然后在Life Technology Attune NxT流式细胞仪上分析样 品。
药代动力学(PK)分析
定量LC/MS/MS分析在Exion HPLC系统(AB Sciex,Ontario,Canada)上进行,该系统偶联API 5500质谱仪(AB Sciex,Ontario,Canada),配备API电喷雾离子化(ESI) 源。Phenomenex Titank phenyl-Hexyl柱(50mm×2.1mm,5μm)用于实现HPLC分 离。进样量2μL且流速保持恒定在0.5mL/min。色谱使用流动相A和B进行,A:水 /乙腈/甲酸(95∶5∶0.1,按体积);B:水/乙腈/甲酸(5∶95∶0.1,按体积);质谱 仪运行采用ESI正离子模式对APG-115进行监测,负离子模式对Epacadostat进行监 测;采用多反应监测模式(MRM)进行离子检测;对APG-115以及内标(IS)甲苯 磺丁脲在正模式监测跃迁(transition):m/z 642.0→246.1以及271.1→172.0;对 Epacadostat以及内标(IS)甲苯磺丁脲在负模式监测跃迁:m/z435.9→338.8以及 269.2→169.2。的化合物参数,去簇电压(DP),碰撞电压(CE)对于APG-115以及 IS在正模式为51,61V以及80,18V,对于Epacadostat以及IS为-61,-15V以及-90,-23.5V。
数据分析
绘制肿瘤生长曲线,其中X轴显示观察时间,Y轴显示相应肿瘤体积(几何平均值)。进行单向ANOVA以比较组间肿瘤体积,如果得到显著性F统计值(药物处理 方差相对于误差方差的比值),采用Games-Howell测试进行组间比较。用SPSS(统 计学产品与服务解决方案)18.0(IBM,Armonk,NY,U.S.)进行所有数据分析。Prism第 6版(GraphPad SoftwareInc.,San Diego,CA)用于图形绘制。Life technology的Attune NxT流式细胞仪用于分析肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)。PK数据采集和分析采用Analyst Software 1.6.3工作站(ABsciex,安大略,加拿大)。
合规
所有涉及动物管理和使用的实验方案及任何修改或流程在吉玛生物(GenePharma) 机构动物管理及使用委员会(IACUC)进行评估核准后实行。研究中实验动物的使用及 福利将遵照国际实验动物评估和认可委员会(AAALAC)的规则执行。
实施例1.体外APG-115的免疫调节作用
1.1 APG-115增强CD4+T细胞活化
MDM2抑制剂APG-115根据美国专利号9745314及Aguilar et al.J.Med.Chem.2017(60)2819-2839文章中所示的一步或多步法制成。
效应T细胞在抗肿瘤免疫过程中发挥重要作用。为了研究APG-115是否可以影响 T细胞的功能,从小鼠脾脏中分选出CD4+T细胞并将其暴露于APG-115或溶剂对照 DMSO中。在250nM APG-115处理条件下T细胞中未检测到半胱天冬酶-3(casepase- 3)的切割,提示APG-115未引起T细胞凋亡。值得注意的是,250nM APG-115处理 条件下,APG-115引起CD25highCD62Llow细胞群迅速增多,且激发的CD4+T细胞大小 增加,指示着T细胞的活化(图1).
具体地,利用磁珠从小鼠脾脏中阳选得到CD4+T细胞,在存在APG-115(250nM) 或DMSO的情形下,用结合在板上的5μg/mL抗-CD3和2μg/mL抗-CD28刺激处理 24h(第1天)或48h(第2天)。CD25-表达和CD62L-表达的群体比例(上图)及前向 散射(FSC)(下图)用流式细胞仪检测。
1.2 APG-115诱导刺激的小鼠T细胞产生细胞因子
研究了APG-115对于刺激的小鼠脾细胞中细胞因子的产生的影响。从小鼠中新鲜分离脾细胞,并在APG-115(250nM)或DMSO存在下,用结合在板上的5μg/mL抗- CD3和2μg/mL抗-CD28刺激处理24小时。处理完成后,收集细胞培养上清,并用 MSD V-PLEX(可检测10种细胞因子)试剂盒测量细胞因子。其他细胞因子的表达水 平,即IL-1β,IL-5,KC/GRO,IL-12p70低于检测范围。
用250nM APG-115处理导致刺激的小鼠T细胞中的炎症细胞因子上调,上调细 胞因子包括IFN-γ、IL-2、TNF-α、IL-10和IL-4(图2)。这个结果指示APG-115对 T细胞的一般活化增强效应。这些细胞因子可有助于免疫介导的癌症清除过程。
1.3 APG-115上调肿瘤细胞PD-L1的表达水平
转录因子p53参与了PD-L1表达的调控(Cortez MA,2015),而PD-L1表达情况可 作为抗PD-1/PD-L1治疗效果的指标。除对T细胞影响之外,研究了在体外对APG- 115如何影响MH-22A肿瘤细胞PD-L1的表达。
施用指示剂量的APG-115处理MH-22A细胞72小时。应用蛋白印迹法检测 MDM2、p53、总STAT3(t-STAT3)、磷酸化STAT3(p-STAT3)、PD-L1和β-actin (内参)蛋白表达水平。采用流式细胞术对PD-L1表达情况进行验证,结果用荧光强度 展示。
研究结果表明,在APG-115处理后TP53和p-STAT3蛋白表达量呈剂量依赖性上 调(图3A和3B)。流式结果进一步显示,用APG-115处理肿瘤细胞后细胞表面PD- L1表达也呈现剂量依赖性上升。这些数据预示着APG-115处理后肿瘤细胞中的PD-L1 表达上调可能增强了肿瘤细胞对抗PD-1疗法的敏感性。
实施例2.APG-115在Trp53野生型MH-22A同源模型中增强PD-1阻断的抗肿瘤活性
2.1在MH-22模型中的体内药效研究
将0.2mL含MH-22A肿瘤细胞(5×106)的PBS皮下接种于每只小鼠的右后背 (rightflank region)用于诱发肿瘤生长。平均肿瘤体积达到约~65mm3时开始给药处 理。根据表3实验设计中所示的方案将受试物给至荷瘤鼠。开始给药的当天定义为第 1天(d1)。
表3.MH-22A模型中药效研究方案
备注:给药体积:10μL/g
在第16天的末次给药后4小时,从第1组、第2组、第3组和第5组中的每组中 5只小鼠收集血液和肿瘤样品。在第29天的末次给药后4小时,从第4组、第6组、 第7组和第8组每组中5只小鼠收集血液样品。采集约100μL血液至EDTA-2K管中 并收集50μL血浆用于PK分析。所有样品均储存在-80℃直至分析。
在这项研究中,epacadostat(一种IDO1抑制剂)因已在临床前研究中证明是强效免疫调节剂而纳入作为对照。不过,必须理解的是,它的作用机制与APG-115完全不 同。
如图4和表4所示,用epacadostat或APG-115单药治疗没有显示抗肿瘤活性。单 独使用10mg/kg抗PD-1抗体治疗显示显著的抗肿瘤活性,在第15天T/C值为13% (与溶媒组相比p<0.05)。用10mg/kg或50mg/kg APG-115和抗PD-1抗体联合治疗 表现出更强的抗肿瘤活性,第15天时T/C值分别为5%(与溶媒组相比P<0.01;与 APG-115单药相比P<0.001)和12%(与溶媒组相比P<0.05;与APG-115单药相比 P<0.01)。用抗PD-1抗体和100mg/kgepacadostat联合治疗也产生显著的抗肿瘤作用 活性,T/C值为8%(与溶媒组相比p<0.01)。
由于肿瘤体积过大,给药后第15天,溶媒对照组、APG-115 10mg/kg和50mg/kg 及epacadostat单药组中的小鼠被安乐死。在给药后第29天,抗PD-1组中一只携带过 大肿瘤的动物也被安乐死,因此该组平均肿瘤体积急剧减少。
在图4中,肿瘤生长曲线以不同时间点小鼠(n=10)的平均肿瘤体积(平均值±SEM)显示。每周两次腹腔施用10mg/kg的抗PD-1抗体,共持续3周。每天通过腹 腔给药(p.o.)施用APG-115,共施用14或21天。因为平均肿瘤体积达到人道终点, 溶媒对照组、epacadostat和两组APG-115单药治疗组小鼠在给药后第15天被处以安乐 死。在给药后第29天终止一只对抗PD-1抗体没有反应且携带过大肿瘤的动物,因此 抗PD-1抗体组小鼠平均肿瘤体积急剧减少。
图5展示了抗PD-1抗体单药组和联合组中单只动物的肿瘤生长曲线。与之前实验中描述一致的是,抗PD-1抗体单药组10只中出现1只动物没有响应并显示进行性疾 病(用箭头表示)。然而,在联合治疗组中,APG-115和epacadostat能够使耐药的肿 瘤致敏,从而使所有处理动物都表现出肿瘤生长抑制。
如图4所示,在第15天,抗PD-1抗体单药组中10只动物中有1只动物(10%响 应率)显示PR疗效;其与APG-115 10mg/kg联合用药组中1只动物显示CR和5只 动物显示PR疗效(60%响应率);在与50mg/kgAPG-115联合用药组1只动物显示 CR和1只动物显示PR疗效(20%响应率);在与epacadostat联合用药组3只动物显 示PR疗效(30%响应率)。在给药后第22天,抗PD-1抗体单药组中5只动物显示 CR和3只动物显示PR疗效(80%响应率);在与APG-115 10mg/kg联合用药组中7 只动物显示CR和2只动物显示PR疗效(90%响应率);在与50mg/kg APG-115联 合用药组中2只动物显示CR和5只动物显示PR疗效(70%响应率);在与epacadostat联合用药组5只动物显示CR和1只动物显示PR疗效(60%响应率)。在 实验终点(第39天)时,抗PD-1抗体单药组中8只动物(80%响应率)显示CR疗 效;在与10mg/kg APG-115联合用药组9只动物显示CR疗效(90%响应率);在与 50mg/kg APG-115联合用药组8只动物显示CR疗效(80%响应率);另外在与 epacadostat联用组中有7只动物显示CR和2只显示PR疗效(90%响应率)。所有处 理组中均未观察到体重下降(图6)。
总体而言,不管是与抗PD-1抗体单药组相比,还是与抗PD-1抗体和epacadostat联合用药组相比,APG-115与抗PD-1抗体联合用药可获得更早出现CR且更多的CR 响应者。此外,与epacadostat类似,APG-115能够使耐药的肿瘤恢复敏感。
表4.APG-115联合抗PD-1抗体在C3H小鼠MH-22A鼠肝细胞瘤同源模型中的 疗效
2.2 MH-22A模型中的再挑战研究
为了进一步确认治疗动物免疫记忆的发展情况,在末次给药3周后,从抗PD-1抗体单药组、抗PD-1抗体与10mg/kg或50mg/kg APG-115联用组、抗PD-1抗体与 epacadostat联用组中各随机选出5只治愈的小鼠(CR)通过皮下接种MH-22A再挑 战,另用5只未经治疗的小鼠同时接种MH-22A作为对照(表5)。再挑战研究中的 小鼠在左上背部皮下接种0.2mL含MH-22A肿瘤细胞(5×106/小鼠)的PBS用于诱 发肿瘤生长。细胞重新接种后未给与治疗。
表5.再挑战研究方案设计
如图7所示,未经治疗鼠中同源肿瘤的再生长显示出快速生长的动力学,而治愈的小鼠在细胞接种后形成可触及的肿瘤,但随后这些小肿瘤快速完全消退。到第11天 时这些肿瘤已测量不到。这些数据证实,用抗PD-1抗体单药、或与APG-115或epacadostat联用治疗后的CR应答者产生了能够根除再植入的肿瘤细胞的抗肿瘤免 疫。另外,各组治疗小鼠未观察到体重下降。
2.3 MH-22A模型中肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)分析
在小鼠右侧背部皮下接种0.2mL含MH-22A肿瘤细胞(5×106)的PBS用于诱发 肿瘤生长。当平均肿瘤体积达到60mm3时开始治疗。根据表6实验设计中所示的方案 将受试物给至荷瘤鼠。开始给药的日期定义为d1。
表6.肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)分析研究方案
在给药后第7天对小鼠实施安乐死,并将肿瘤机械解离并用胶原酶IV (Sigma)、透明质酸(Sigma)和DNase(Sigma)消化。制备单细胞悬液并对指示 的标记物染色以作流式细胞术分析。末次给药后24小时收集肿瘤样本。
荷有MH-22A鼠肝细胞瘤的小鼠按照所示不同方案用各种药物治疗。对照组包含抗体同型对照。
如图10和表7所示,10mg/kg APG-115和5mg/kg抗PD-1抗体的联合治疗发挥 协同抗肿瘤活性,这也与前文所述一致,T/C值为29%(与阴性对照比p<0.01;协同 分数=1.8)。相反,与epacadostat联用治疗在短期治疗后未能表现出该协同效应。所 有治疗下均未观察到小鼠体重下降(表11)。
表7.MH-22A同源肿瘤模型中APG-115与抗PD-1抗体联用药效(第7天)
流式细胞术分析肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)
在第7天,当平均肿瘤体积达到约300-500mm3时,收集同源肿瘤并处理进行肿 瘤浸润淋巴细胞(TIL)分析。
在p53wt MH-22A同源肿瘤中,与对照相比,使用抗PD-1单独治疗仅略微增加了CD45+细胞、CD3+T细胞和细胞毒性CD8+T细胞的频率(P>0.05,图12A),而联合治 疗则对增加这些细胞的浸润的产生更显著的作用(p<0.01)。相对于对照,增加了大约 1.5到2倍。与对照相比,抗PD-1抗体或联合治疗显著增加M1巨噬细胞的频率 (P<0.01);然而,这两种治疗方法之间没有显著差异(P>0.05)。最引人注目的是,与对 照组(P<0.01)和抗PD-1单药组(P<0.05)两者相比,联合治疗降低了M2巨噬细胞的频 率。
在p53mut MC38肿瘤中,与对照相比,使用抗PD-1单独治疗仅略微增加了 CD3+T细胞、细胞毒性CD8+T细胞和M1巨噬细胞的频率(frequency)(P>0.05),但 联合治疗显著增加了CD45+细胞(P<0.001),CD3+ T细胞(P<0.01)和M1巨噬细胞 (P=0.01)的频率(图12B),但没有增加CD8+T细胞的频率(P>0.05)。重要的是,与抗 PD-1单剂相比,联合治疗显著增加了CD45+细胞和M1巨噬细胞的频率(P<0.05)。相 比之下,与对照组(P+0.001)和抗PD-1单剂组(P=0.05)两者相比,联合治疗显著降低了 M2巨噬细胞的频率。在p53wt MH-22A和p53mut MC38同源肿瘤中,CD4+T细胞、 NK细胞、MDSC和调节T(Treg)细胞的表型分析在使用APG-115、抗PD-1抗体或组 合治疗后无显著变化(图13)。
2.4 MH-22A模型中T细胞耗竭(depletion)研究
肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)分析结果显示,在APG-115和抗PD-1抗体联用治疗后, 肿瘤浸润型细胞毒性CD8+T细胞有统计学意义地显著增加。这个结果提示APG-115和 抗PD-1抗体的联用治疗可能引发了强效的效应T细胞应答。为了进一步阐明其作用 机制,使用CD4或CD8的靶向抗体耗竭免疫细胞。
每只小鼠在右侧背部皮下接种0.2mL含MH-22A肿瘤细胞(5×106)的PBS用 于诱发肿瘤生长。当平均肿瘤体积达到60mm3时开始施用CD4抗体和CD8抗体处 理。次日开始APG-115和抗PD-1抗体联用治疗。根据表8实验设计中所示的方案将 受试物给至荷瘤鼠。开始给药的日期定义为d1。
表8.MH-22A模型中T细胞耗竭实验设计
在本研究中,APG-115和抗PD-1抗体联用显示出有效的抗肿瘤活性,这与前文所述的结果一致,在给药后第11天时T/C值为38%(与溶媒对照组相比p<0.05),在给 药后第15天时,平均肿瘤体积为1347mm3(图14和表9)。然而,这种联合治疗诱 导的治疗功效在CD8+T细胞耗竭后几乎完全消失。有趣的是,CD4+T细胞耗竭导致 使用APG-115和抗PD-1抗体的联用处理在第11天的T/C值为39%,给药后第15天 的平均肿瘤体积(TV)为709mm3。结果表明,CD4+T细胞可能不是两药联用发挥疗 效所必需的。所有治疗下均未观察到小鼠体重明显下降(图15)。
总之,这些结果表明,细胞毒性CD8+T杀伤性T细胞是APG-115和抗PD-1抗体 联用发挥增强抗肿瘤活性所必需的,而CD4+T细胞不是。
表9.CD8+T细胞耗竭阻碍APG-115和抗PD-1抗体联合治疗的药效
2.5药代动力学(PK)分析
在实施例2.1的药效研究中,溶媒对照组、APG-115 10mg/kg和50mg/kg、以及epacadostat单药组在给药后第15天如上文所述实施安乐死。为了评估本研究中APG- 115和epacadostat的PK特征,在第15天末次给药后收集血浆和组织样品。
如图9所示,每天一次经口服给小鼠施用10mg/kg和50mg/kg APG-115 15天 后,APG-115血浆浓度分别为157.4和1228.0ng/mL。而10mg/kg和50mg/kg APG- 115与抗PD-1抗体联用组中APG-115的血浆浓度分别为120.1和2152.4ng/mL。相应 地,以10mg/kg和50mg/kg给药的APG-115单药组的肿瘤组织中的APG-115分别为 152.2和1469.0ng/g。此外,在每日口服施用100mg/kg的epacadostat单药组或其与抗 PD-1抗体联用组中,血浆中的epacadostat浓度为5894.0和8619.0ng/mL。相应地,以 100mg/kg单独给药epacadostat,肿瘤内epacadostat浓度为9256.0ng/g。总之,这些结 果证实APG-115和epacadostat在给药后适当的全身暴露与组织分布。且全身暴露和组 织分布的增加大致与剂量呈比例。此外,结果显示抗PD-1抗体与APG-115或 epacadostat之间没有明显的药代动力学相互作用,消除了药物-药物相互作用的担忧。
实施例3.APG-115在Trp53突变体MC38同源模型中增强PD-1阻断的抗肿瘤活性
3.1在MC38模型的体内药效研究
在小鼠右侧背部皮下接种0.1mL含MC38肿瘤细胞(5×105)的PBS用于诱发肿 瘤生长。当平均肿瘤大小达到~63mm3时开始治疗。根据表10实验设计中所示的方案 将受试物给至荷瘤鼠。开始给药的日期定义为d1。
表10.MC38模型中药效研究方案
在C57BL/6背景的Trp53突变体MC38同源小鼠肿瘤模型中进一步评估了APG- 115和抗PD-1抗体的联合用药的疗效。
如图16和表11所示,APG-115单药治疗表现出微弱的抗肿瘤活性。5mg/kg抗 PD-1抗体单药治疗表现出抗肿瘤活性,在给药后第17天时T/C值为48%(与溶媒对 照组相比P<0.01)。而抗PD-1抗体和10mg/kg或50mg/kg APG-115的联合治疗表现 出更强的抗肿瘤活性,在给药后第17天时对应T/C值分别为29%(与溶媒对照组相 比P<0.001)和31%(与溶媒对照组相比P<0.001;与APG-115单药组相比P <0.01)。所有治疗下未观察到小鼠体重下降(图17)。
表11.APG-115联合抗PD-1抗体在C57BL/6小鼠的Trp53突变体MC38同源小鼠结 肠癌中药效
本文提供的数据证明,PD-1阻断与MDM2抑制剂(例如APG-115)组合,在野 生型及突变型Trp53肿瘤中均能增强抗肿瘤活性。除了在肿瘤靶向活性中发挥作用 外,MDM2抑制剂还可以作为免疫调节剂,与肿瘤免疫疗法协同作用。因此,不论 p53是否突变,该结果都支持对人类癌症中协同作用的进一步临床探究。
实施例4:组合效应
在体外和体内广泛研究了APG-115与抗PD-1疗法的联合治疗组合效应。体外研 究显示,APG-115疗法增强了鼠CD4+ T细胞的活化,并导致同源小鼠肿瘤模型中炎性 细胞因子(包括IFN-γ,IL-2,TNF-α,IL-10和IL-4)的表达上调,在APG-115治疗 后也检测到肿瘤细胞表面PD-L1的表达增加。体内功效研究表明,在来自MH22A鼠 肝细胞瘤细胞的同源模型中,抗PD-1疗法基本上能够抑制肿瘤生长并导致大部分荷瘤 动物的肿瘤完全缓解(CR)或部分缓解(PR)。APG-115的联合用药能够扩大CR的 比例,加速治疗效果,并且重要的是,将剩余的无应答者转化为应答者(图18)。
顺序再挑战研究证实,用联合疗法治疗的CR小鼠有效地排斥了MH22A肿瘤细胞 的重新移植,暗示其免疫记忆的成功开发。
此外,肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)分析显示,与抗PD-1单一疗法相比,联合疗法 后CD45+细胞,CD3+ T细胞和CD8+ T细胞数量显着增加。
药代动力学(PK)分析显示APG-115的全身暴露和肿瘤暴露的是与剂量成比例 的。
机制上,除了APG-115直接活化T细胞的作用之外,T细胞中细胞因子的释放和 肿瘤细胞中PD-L1表达的上调,肿瘤浸润细胞毒性CD8+ T细胞的大量增加和肿瘤微 环境中免疫抑制性树突细胞的减少都可能在联合治疗增强抗肿瘤活性中起关键作用。
总的来说,临床前数据已经证明APG-115可以作为野生型P53和突变型P53肿瘤 的免疫调节剂,为抗PD-1/PD-L1单药治疗相伴的肿瘤超进展、或者对抗PD-1/PD-L1 单药治疗复发或难治的癌症患者提供了一种新的方法。
实施例5:APG-115用于治疗晚期实体瘤患者
在中国,APG-115用于治疗晚期软组织肉瘤(STS)、腺样囊性癌(ACC)或其 他实体瘤患者(CTR20170975)。在剂量爬坡中,患者在28天周期的前21天接受隔 日一次口服APG-115(100-200mg)直至疾病进展。研究目标包括每8周评估的安全 性(主要终点目标)、药代动力学(PK)、药效学(PD)和抗肿瘤活性。
结果:13名患者(8名STSs,2名ACCs和2名骨肉瘤)用APG-115(100mg, 150mg,200mg)分3组治疗,先前全身抗癌疗法的中位数为2(范围0-4)。患者在 接受了中位数为2个周期的APG-115(范围0-3)治疗后,在第1周期中,200mg剂量 观察到一名患者的剂量限制性毒性(DLT),包括血小板减少症和发热性中性粒细胞 减少症。最常见的不良事件(AE)(报告于≥10%的患者)包括:贫血、血小板减 少、呕吐、高胆固醇血症和白细胞减少症。7个患者(54%)发生了严重不良事件 (SAE)。最常见的3级或4级治疗相关不良事件(TRAE)是贫血(38.5%)、血小 板减少症(38.5%)、白细胞减少症(30.8%)和中性粒细胞减少症(23.1%)。在 150mg剂量,在1名有MDM2扩增和TP53野生型的脂肪肉瘤患者中观察到部分缓解。最佳疗效是5名患者病情稳定(SD)。药代动力学分析表明,在100至200mg 的剂量水平下单次或多次口服给药后,Cmax和AUC0-t约与剂量成比例的增加,中值 Tmax为4至6小时。初步的药效学结果显示,,血清MIC-1水平从APG-115剂量≥ 100mg开始从个体基线升高,表明潜在的机制性药效(PD)关联(p53激活)。正如 作用机制所预期的一样,MIC-1升高在实体瘤患者测试剂量范围内是暴露依赖性的。
结论:APG-115在MDM2扩增型脂肪肉瘤中具有活性。不良事件(AE)情况与 MDM2靶向药物类别中的其他药物一致。
实施例6:临床研究
开放标签的多中心两部分Ib/II期研究包括两个部分。第1部分是APG-115剂量 爬坡,与帕博利珠单抗标签剂量组合。第2部分是有关APG-115以推荐的II期剂量 (RP2D)与帕博利珠单抗联合用于PD1/PD-L1难治性/复发性黑色素瘤患者的II期设 计。在第1部分中,将采用标准的“3+3”设计,通过评估APG-115与帕博利珠单抗 联合使用的剂量限制性毒性(DLT)来确定APG-115的最大耐受剂量(MTD)。将测 试APG-115的四种剂量水平:50,100,150和200mg。APG-115将每隔一天 (QOD)口服给药连续2周(即在第1,3,5,7,9,11和13天给药),停药1 周,每周期3周。帕博利珠单抗(PD-1阻断剂)按照FDA批准的标签剂量给药, 即:每3周第1天200mg静脉内输注作为一周期。APG-115的剂量和时间表可根据毒 性进行修改。在第2部分中,APG-115以RP2D与帕博利珠单抗组合,以该组合治疗 约43名患者直至疾病进展、不可接受毒性或达到其他中断标准。安全性、耐受性和 确定MTD和RP2D是第1部分的主要目标。总体反应率是第2部分的主要目标, PK,PD,其他抗肿瘤评估等是次要目标。在第2部分中,将使用Simon的两阶段设 计(Simon R(1989)。Controlled Clinical Trials10:1-10)。零假设是真实反应率为 10%或更低,将针对单侧替代方案进行检验。
纳入标准:在签署知情同意书的当天,年龄≥18岁的男性或非怀孕、非哺乳期女性患者。
第1部分:
1.经组织学证实的,不可切除或转移性黑色素瘤或晚期实体瘤患者,且标准治疗已失败;
2.ECOG PS 0-2;
3.没有中枢神经系统(CNS)转移;
第2部分:
1.经组织学证实的,不可切除或转移性黑色素瘤,PD1抗体治疗后难以治愈或复发,不符合其他标准治疗方案;
2.ECOG PS 0-2;
3.依据irRECIST和RECIST 1.1的可测量疾病,位于之前放射区域的病变,或受 其他局部区域治疗(例如病灶内注射)的区域应被视为不可测量的;
预期寿命≥3个月;
由于先前的放疗、化疗剂或生物疗法(包括PD1/PDL1抗体)导致的治疗相关毒 性(脱发除外)的持续,在给药时必须≤1级。
合适的骨髓和器官功能如下所示:没有连续支持治疗(如输血,凝血因子和/或血小板输注,红/白细胞生长因子给药或白蛋白输注)的以下实验数值被实验室评估为合 格。
QTc间期(3次平均值),男性≤450ms,女性≤470ms。
通过超声心动图(ECHO)或多门采集(MUGA)扫描评估,左心室射血分数 (LVEF)≥机构正常下限(LLN)。
排除标准:任何在先的全身性MDM2-p53抑制剂治疗。在第一次给药之前21天 内(亚硝基脲或丝裂霉素C为42天)接受过化疗治疗的。
在开始研究治疗之前的最后6个月中,通过病灶内治疗(例如talimogenelaherparepvec)进行不可切除或转移性黑色素瘤的局部区域治疗。
在第一次给药前21天内接受过激素和生物学(<1半衰期),小分子靶向治疗或 其他抗癌治疗的。在进入研究后14天内进行放射或手术。在第一次给药前28天内进 行过胸部放射的。
具有已知活跃中枢神经系统(CNS)转移和/或癌性脑膜炎。或者由于CNS的肿 瘤累及,根据临床评估具有神经不稳定性。
需求皮质类固醇治疗,除甲地孕酮外,局部使用类固醇,即:外用皮质类固醇, 吸入皮质类固醇治疗反应性呼吸道疾病,眼科,关节内和鼻内类固醇。
在第一剂治疗前28天内与研究药剂或装置同时治疗。
实施例7:APG-115在晚期实体瘤患者中的I期研究
APG-115是一种有效且口服活性的MDM2蛋白的小分子抑制剂。APG-115与 MDM2蛋白结合,在保留野生型p53的肿瘤细胞中诱导细胞凋亡来恢复p53肿瘤抑制 功能。此外,在同源肿瘤模型中证明了APG-115联合PD-1阻断后,增强的抗肿瘤活 性。
该I期研究(APG-115-US-001)旨在评估在美国晚期实体瘤患者口服APG-115的 安全性、毒性、药代动力学(PK)、药效学(PD)和抗肿瘤活性(NCT02935907)。
对于APG-115的药代动力学研究,使用D5-APG-115作为内标(IS),使用LC- MS/MS方法测定K2EDTA人血浆中的APG-115。使用人血浆中的蛋白质沉淀提取 APG-115和IS。使用XBridge,C18(50×2.1mm,3.5微米)柱子实现反相HPLC分 离。MS/MS检测设定为在TIS正模式下,APG-115的质量跃迁为,m/z 642.3→ 246.3,和D5-APG-115(IS)为m/z 647.4→246.1。
对于APG-115的安全性研究,安全性评估包括生命体征,心电图(ECG)参数, 东部肿瘤协作组(ECOG)表现状态数据,临床实验室测试和不良事件数据。在每个 治疗周期中都会进行安全性评估。
对于APG-115的疗效研究,根据实体肿瘤反应评估标准的当前版本:修订的RECIST指南1.1版(Eisenhauer,2009),每两个周期(即8周)评估实体瘤患者的 反应:
APG-115是第二代可以阻断MDM2-p53相互作用的MDM2抑制剂,从而稳定p53 蛋白并使其恢复其对细胞周期和细胞凋亡的转录调节功能。
该研究的主要目的是确定APG-115的安全性和耐受性,确定剂量限制毒性 (DLT),最大耐受剂量(MTD)/推荐的II期剂量(RP2D)。该研究的次要目的是 确定APG-115的药代动力学(PK)、药效学(PD)和抗肿瘤作用。
进行单剂量爬坡研究。采用标准“3+3”设计,通过评估APG-115的剂量限制性 毒性(DLT)来确定APG-115的最大耐受剂量(MTD)。测试了APG-115的五种剂量 水平:10,20,50,100,200和300mg。APG-115将每隔一天(QOD)口服给药连 续3周(即在第1,3,5,7,9,11,13,15,17,19和21天给药),停药1周, 每周期4周。每个剂量水平招募3名患者,如果没有患者显示DLT,则该3名患者进 入下一剂量水平。试验设计方案如下:
I期剂量爬坡研究-加速剂量爬坡,然后标准“3+3”设计(图27(a))。
患者入组的纳入标准:
1.年龄≥18岁;
2.(ECOG)活动状态≤1;
3.合适的血液、骨髓、肾和肝功能;
4.确认为局部晚期或转移性实体瘤或淋巴瘤,在使用已知可提供临床益处的现有疗法治疗后有疾病进展;
患者入组的排除标准:
1.正在接受过同步抗癌治疗,或在第一剂研究药物前14天内进行的任何研究性治疗;
2.排除使用治疗剂量的抗凝剂,以及抗血小板剂;
3.由于中枢神经系统(CNS)的肿瘤累及,根据临床评估的神经系统不稳定性;
4.不受控制的并发疾病;
患者的基线特征见表12(a)和12(b)
表12.基线的患者人口统计和特征
表12(a)
表12(b)
安全性研究结果如表12(c)和12(d)所示。截止到2019年4月19日,共有 29名患者接受了不同剂量(10-300mg)的APG-115治疗。APG-115耐受性良好,并 且具有可控的不良事件。最常见的TRAEs(>10%):疲劳、恶心、呕吐、食欲减 退、腹泻、中性粒细胞计数减少、血小板计数减少、白细胞计数减少。血小板计数减 少,疲劳和恶心被确定为DLT。
表12(c)
与治疗有关的不良事件(所有等级)
表12(d)
在第1周期期间观察到4个DLT,包括在300mg的一例G3血小板(PTL)下降,在 300mg的一例G3恶心,在分别在100mg和300mg的两例G3疲劳(参见表12 (e))。
图19显示在C2D1后,2名患者在300mg,2名患者在200mg和1名患者在 100mg血小板(PLT)计数降低(小于100×10^3/uL)。图20显示在C2D21后,3 名患者的中性粒细胞绝对计数减少(小于1.00×10^3/uL)。APG-115单一疗法的 MTD/RP2D确定为100mg。
与治疗有关的不良事件(至少G3级)
表12(e)
初步的抗肿瘤活性如图21所示。
药代动力学(PK)分析显示AUC和Cmax大体在20-300mg的剂量范围内按剂量 比例增加(参见图22(a)和图22(b))。血清中MIC-1(TP53活化的PD标记物) 在实体瘤患者测试的剂量范围内的增加为暴露依赖性(图23(a)和图23(b))。 APG-115与帕博利珠单抗的联合疗法在晚期实体瘤患者中的进一步评估正在进行中。
实施例8:APG-115在中国晚期软组织癌患者中的I期研究
APG-115是一种新型且口服活性的MDM2蛋白的小分子抑制剂。APG-115与 MDM2蛋白结合,在保留野生型p53的肿瘤细胞中诱导细胞凋亡而来恢复p53肿瘤抑 制功能。
这项I期研究(CTR20170975)旨在评估晚期软组织肉瘤和其他实体瘤的中国患 者口服APG-115的安全性、剂量限制毒性(DLT)、最大耐受剂量(MTD)/推荐的2 期剂量(RP2D)、药代动力学(PK)、药效学(PD)和抗肿瘤活性。
该研究的主要目标是确定APG-115的安全性和耐受性,确定DLT,MTD/RP2D。 该研究的次要目的是确定APG-115的PK、PD、抗肿瘤作用。
进行单剂量爬坡研究,采用标准“3+3”设计,通过评估APG-115的剂量限制性 毒性(DLT)来确定APG-115的最大耐受剂量(MTD)。测试了APG-115的3种剂 量水平:100,150和200mg。APG-115将每隔一天(QOD)口服给药连续3周(即 在第1,3,5,7,9,11,13,15,17,19和21天给药),停药1周,每周期4周。 每个剂量水平招募3名患者,如果没有患者显示DLT,则该3名患者进入下一剂量水 平。试验设计方案如下:
I期剂量爬坡实验,标准“3+3”设计(图27(b)):
根据美国APG-115的I期研究的初步安全性结果,本研究以初始剂量200mg进 行。由于在200mg观察到2个DLT时,从100mg开始重新调整剂量爬坡,100mg(n =3)和150mg(n=8)剂量水平时没有观察到DLT。由于在第2周期中/之后在 150mg剂量的迟发性血液学毒性,在100mg剂量水平进行安全扩增(safety expansion)。
本研究的纳入标准:
1.年龄≥18岁;
2.确认的晚期实体瘤,研究者认为没有合适的标准治疗方法;
3.ECOG:0-1:
4.合适的肾、肝和血液功能;
本研究的排除标准:
1.任何先前的全身性MDM2-p53抑制剂治疗;
2.在接受首次APG-115给药之前28天或5个半衰期内接受过标准或研究性抗癌 治疗;
3.有已知中枢神经系统转移;
4.会限制对研究要求依从性的不受控制的并发或精神疾病/社会情况。
患者的基线特征见表13(a)和13(b)
表13(a)
表13(b)
原发癌,n(%) | APG-115(N=14) |
肉瘤 | 12(85.7%) |
脂肪肉瘤 | 8(57.1%) |
横纹肌肉瘤 | 1(7.1%) |
滑膜肉瘤 | 1(7.1%) |
软骨肉瘤 | 1(7.1%) |
骨瘤 | 1(7.1%) |
肾上腺皮质癌 | 2(14.3%) |
表13(c)
安全性研究结果如表13(d)和13(e)所示。截至2019年4月23日,14例晚 期实体瘤患者(8例LPS)接受了APG-115治疗,剂量范围为100-200mg,每隔一 天,21天给药7天休息的28天周期。
表13(d)
表13(e)
在200mg剂量患者中观察到两个DLT,包括血小板减少症和发热性中性粒细胞减少症。1个治疗周期后在100mg和150mg剂量时未观察到DLT,然而在150mg的周期 2中或之后观察到迟发性骨髓抑制,安全性扩展在100mg进行。APG-115在所有测试 剂量水平均具有良好的耐受性,最大耐受剂量为150mg,由于迟发性血小板减少症,2 期推荐剂量为100mg。最常见的3级或4级不良事件是血液学毒性,特别是血小板减 少症,基于骨髓中p53的激活其是可预测的。
初步的抗肿瘤活性
在14名患者中,13名患者获得了基线后肿瘤测量,而一名受试者刚刚开始第2周期治疗。
SD(疾病稳定):
1.分化良好的脂肪肉瘤患者(剂量水平:200mg;TP53-WT和MDM2Amp):第 1周期后SD,由于G4级血小板减少症而退出;
2.滑膜肉瘤患者(剂量水平:100mg;TP53-WT):第2周期后SD;
3.肾上腺皮质癌患者(剂量水平:150mg;TP53-WT):第2周期后SD,由于血 小板减少症而退出,退出2个月后维持SD;
4.分化良好的脂肪肉瘤患者(剂量水平:150mg;TP53-WT):第2周期后SD;
5.肾上腺皮质癌患者(剂量水平:150mg;TP53-WT):第2周期后SD,第4周 期后确认SD。
1例确认PR(部分缓解):(剂量水平:150mg)在150mg剂量的1名患有脂肪 肉瘤(lipomatoid liposarcoma)的患者中观察到部分缓解响应,并且缓解持续时间在治 疗中断4个月后反维持。
1.脂肪肉瘤患者(TP53-WT和MDM2 Amp)在先前治疗后复发疾病进展:手术切 除和化疗(AD:阿霉素+达卡巴嗪,5个周期);
2.影像学:靶病变位于肝门之间,门静脉间隙在2个周期的APG-115后减少,在C4D15退出(由于G4血小板减少症)。退出后1个月疾病进展(PD),退出4个月 后通过RECIST标准神奇地确认PR(最佳相应),靶病变减少~64%;
3.该患者在研究期间拒绝服用任何其他抗肿瘤药剂,且由于持续性血小板减少症,患者目前正在接受观察。这种反应是否是由于APG-115的遗留效应或免疫效应仍 在研究中;
4.不良事件:G4血小板减少症和G3呕吐。直到4月23日,G4血小板减少症已 降至G1级。
初步的抗肿瘤活性显示在图26中。PK分析显示AUC和Cmax在100-200mg的剂 量范围内通常按剂量比例增加(参见图25(a)和图25(b))。APG-115在100- 200mg范围内显示近似线性的药代动力学。
血清MIC-1(TP53活化的PD标记物)在实体瘤患者测试的剂量范围内的增加是 暴露依赖性的(图26(a)和图26(b))。
实施例9.APG-115与帕博利珠单抗组合在不可切除或转移性黑色素瘤或晚期实体肿瘤 患者中的Ib/II期研究
研究设计
Ib/II研究由两部分组成:剂量爬坡研究和Simon两阶段II期研究。
在剂量爬坡研究中,APG-115与帕博利珠单抗联用,用于治疗转移性实体瘤患 者。对APG-115的四种剂量水平进行测试:50、100、150和200mg。APG-115在21 天周期中连续2周每隔一天(QOD)口服一次。帕博利珠单抗在21天周期的第1天以200mg静脉输注(IV)施用。剂量爬坡研究的主要目标是确定安全性、耐受性、和确 定MTD和RP2D其他抗肿瘤评估(根据RECIST v1.1每6周评估一次)是次要目标。
在Simon两阶段II期研究中,在PD1/PD-L1难治/复发黑色素瘤患者中,APG-115 以RP2D与帕博利珠单抗联用。研究的主要目的是确定总体反应率;次要目标与剂量爬 坡研究的目标相同。
结果
在剂量爬坡研究中,共有14名患者用帕博利珠单抗结合APG-115(50mg、100mg、150mg、200mg)分4组进行治疗。未观察到DLT,并且未达到MTD。11名患者经历 至少1项TEAE,10例患者经历至少1项TRAE。最常见的TRAE(≥10%)有恶心 (42.9%)、中性粒细胞减少(21.4%)、呕吐(14.3%)、食欲下降(14.3%)、腹泻(14.3%)、血 小板计数减少(14.3%)、白细胞计数减少(14.3%)和疲劳(14.3%)。4名患者经历至少1项 3级或更高的TRAE,中性粒细胞计数减少(21.4%)是最常见的(≥10%)。3例患者中发 生5项SAE,但只有1例3级发热中性粒细胞减少症与治疗有关。100mg组中一名患 有晚期NSCLC的患者收到“确认的CR”(仍在进行中),该患者在此前6线治疗失败 (包括3个月的nivolumab治疗);5名患者在两个治疗周期后获得“SD”,其中2例收 到“确认的SD”(仍在进行中)。PK分析表明,在剂量水平从50至100mg,暴露约剂 量成比例增加。初步PD结果显示,APG-115治疗后血清MIC-1水平升高,表明患者 中潜在的p53活化。
结论
当与帕博利珠单抗联用,APG-115具有可管理的胃肠道和血液毒性,特别是在高剂量水平。未到达MTD。APG-115在与帕博利珠单抗联合时,在几种肿瘤类型中显示出 有希望的抗肿瘤效果。
虽然申请人已经描述了本发明的许多实施方案,但显而易见的是,可以改变这些基本实施例以提供利用本发明化合物和方法的其它实施方案。因此应当意识到,本发 明的范围由所附权利要求限定,而不是由通过实施例表示的特定实施方案来限定。
Claims (10)
1.治疗癌症的方法,包括对需要治疗的受试者施用:
a)有效量的免疫检查点分子调节剂;和
b)有效量的MDM2抑制剂,其中,所述MDM2抑制剂由下式表示:
或其药学上可接受的盐,其中
B是C4-7碳环;
R1是H、取代或未取代的C1-4烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、ORa或NRaRb;
n是0、1或2;
R2、R3、R4、R5、R7、R8、R9,和R10独立地选自由H、F、Cl、CH3和CF3组成的组;
Ra是氢或取代或未取代的C1-4烷基;
Rb是氢或取代或未取代的C1-4烷基;
Rc和Rd是环B的一个碳原子上的取代基,其中
Rc是H、C1-3烷基、C1-3亚烷基-ORa、ORa、或卤代;
Rd是H、C1-3烷基、C1-3亚烷基-ORa、ORa、或卤代;或
Rc和Rd与它们所连接的碳一起形成4至6元螺环取代基,所述取代基任选地含有氧原子;并且
Re是-C(=O)ORa、-C(=O)NRaRb、或-C(=O)NHSO2CH3。
4.如权利要求1-3中任一项所述方法,其中R2是H;R3是卤代;R4和R5均是H。
5.如权利要求1-4中任一项所述方法,其中R7是氟代;R8、R9、和R10中的每一个是H;且Re是-C(=O)OH、-C(=O)NH2或-C(=O)NHSO2CH3。
8.如权利要求1-7中任一项所述方法,其中所述免疫检查点分子调节剂是抗体、抗体Fab片段、双价(divalent)抗体、抗体药物偶联物、scFv、融合蛋白、二价抗体或四价抗体。
9.如权利要求1-8中任一项所述方法,其中所述免疫检查点分子调节剂是单克隆抗体或其抗原结合片段。
10.如权利要求1-9中任一项所述方法,其中所述免疫检查点分子是一种抑制性免疫检查点分子,且所述免疫检查点分子调节剂是所述抑制性免疫检查点分子抑制剂。
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