CN110804644A - 一种用于检测食品中多种微生物的方法及装置 - Google Patents

一种用于检测食品中多种微生物的方法及装置 Download PDF

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Abstract

本发明涉及微生物检测技术领域，公开了一种用于检测食品中多种微生物的方法，该方法包括以下步骤:向混合皿中加入稀释液，将待测食品样品稀释，样品和稀释液的比例为1：10；将培养皿消毒灭菌，之后向不同的培养皿中分别加入培养不同种类目标微生物的培养基；向加入了微生物培养基的培养皿中分别加入显色化合物；将稀释后的样品稀释液通过分液容器进行无菌分液，使样品稀释液等量分入不同的培养皿中；对培养皿加温，使培养皿处于35‑37℃进行培养，培养时间24‑36h；培养结束，观察培养皿中的显色反应，以确定培养皿中是否存在目标微生物；取出培养皿，放置到显微镜下观察，计算目标微生物的含量。本发明方法操作简单，有利于基层工作人员进行操作。

Description

一种用于检测食品中多种微生物的方法及装置
技术领域
本发明涉及微生物检测技术领域，具体为一种用于检测食品中多种微生物的方法及装置。
背景技术
随着人们生活水平的不断提高，食品安全问题受到越来越多的重视，食品中微生物是否超标保证食品安全的重要指标。传统的食品微生物检测是采用实验室培养法，即采用在培养基上培养菌落，然后通过观察菌落数量，来检测微生物的含量是否超标。实验室培养法的检测对实验人员的操作水平和仪器设备有很高的要求，在一些基层工作单位由于工作人员操作水平不高，同时仪器设备不达标，因此在进行食品中微生物检验时，容易在实验中混入杂菌，从而导致检测结果不准确。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于检测食品中多种微生物的方法及装置，用以解决上述一些基层工作单位在由于条件限制而导致检测结果不准确的情况。
为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：
一种用于检测食品中多种微生物的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤:将混合皿消毒，并将待测食品取样放入混合皿中；向混合皿中加入稀释液，将待测食品样品稀释，样品和稀释液的比例为1：10，得到样品稀释液；将培养皿消毒灭菌，之后向不同的培养皿中分别加入培养不同种类目标微生物的培养基；向加入了微生物培养基的培养皿中分别加入显色化合物；将稀释后的样品稀释液通过分液容器进行无菌分液，使样品稀释液等量分入不同的培养皿中；对培养皿加温，使培养皿处于35-37℃进行培养，培养时间24-36h；培养结束，贯穿每个培养皿中的显色反应，以确定培养皿中是否存在目标微生物；取出培养皿，放置到显微镜下观察，计算目标微生物的含量。
在上述用于检测食品中多种微生物的方法中，通过混合皿将样品进行稀释，然后在向消毒灭菌后的培养皿中通过无菌分液方法加入等量样品稀释液，可以有效避免在操作过程中有杂菌混入，导致检测结果出现偏差；通过在培养皿中加入的目标微生物培养基以及显色化合物，可以使培养皿中培养出目标微生物，同时抑制非目标微生物生长，以排出实验干扰，同时，显色化合物可以直观的显示出培养皿中是否存在目标微生物，使实验结果更显眼、更利于观察。
作为本检测方法的一种优选方案，所述稀释液采用平衡盐溶液，平衡盐溶液可以适于多种微生物的生长，配方简单、成本低廉。
作为本检测方法的一种优选方案，所述培养基为目标微生物提供营养物质，同时可以抑制其他微生物生长，可以有效避免在培养基中出现非目标微生物干扰检测实验结果。
作为本检测方法的一种优选方案，所述显色化合物由溴百里酚蓝和二甲苯酚蓝混合制成。
另外，本发明还提供了一种用于检测食品中多种微生物的装置，包括壳体，所述壳体上方活动连接有盖板，所述壳体前表面下方设置有废水槽出口，所述废水槽出口内放置有废水槽；所述废水槽出口上方设置有培养皿出口，所述培养皿出口内部设置有支撑板，所述支撑板上放置有培养皿支架，所述培养皿支架内放置有培养皿；所述壳体左右侧壁均设置有滑槽，左右两侧的所述滑槽内部均安装有滑动板，所述滑动板左右两侧和所述滑槽的边缘处通过橡胶伸缩套密封连接，两个所述滑动板之间固定安装有分层隔板；所述壳体内部上侧固定安装有混合皿，所述混合皿下方通过导管和分液容器相连通，相邻的所述分液容器之间通过连通管相连通，所述分液容器的出液管贯穿所述分层隔板后位于所述培养皿上方，所述分层隔板内设置有夹紧装置，用于控制所述出液管的开合；所述壳体内部后侧固定安装有紫外消毒灯，所述壳体侧壁安装有通风扇，所述通风扇内侧固定安装有加热丝，所述通风扇外侧设置有空气滤芯，所述培养皿支架上侧的侧壁上固定安装有单片机和温度传感器。
在上述用于检测食品中多种微生物的装置中，通过混合皿通过导管以及分液容器将样品稀释液放入培养皿中，全程皆在封闭空间操作，无需额外人工操作，可以有效避免外界杂菌混入；相邻的分液容器通过连通管相连接，可以使所有的分液容器内液面登高，从而保证了每个分液容器内部的样品稀释液为等量，从而保证了每种微生物含量的检测结果准确性；通过设置的加热丝、通风扇、单片机以及温度传感器，可以在培养微生物时提供恒定温度的环境，同时保证充足的氧气供微生物生长，通过空气滤芯的设置，可以有效滤除外界空气中的微生物，提高实验精确度。
作为本检测装置的改进，所述分层隔板内部为空腔结构，其内部设置有芯板，所述芯板的长度长于所述分层隔板的长度，所述芯板左右两端贯穿两个所述滑动板后均固定连接有按压块，所述芯板和所述分层隔板上开有通孔，所述出液管放置于所述通孔内，通过推动芯板左右移动，可以用芯板夹紧或松开输液管，从而方便的控制出液管的开启与关闭。
作为本检测装置的进一步改进，所述芯板右端设置有限位槽一，所述芯板左端设置有限位槽二，右侧的所述滑动板内部设置限位卡一，左侧的所述滑动板内部设置有限位卡二，通过将芯板向左推，使限位卡一卡入限位槽一中，可以使出液管保持闭合状态；通过将芯板向右推，可以使限位卡二卡入限位槽二中，从而使出液管保持开启状态。
作为本检测装置的更进一步改进，所述限位卡一和所述限位卡二均由卡壳、弹簧以及金属球构成，所述弹簧位于所述卡壳底部，所述金属球位于所述卡壳开口处，下方压紧所述弹簧，当芯板左右移动时，金属球受力滚动，从而可以从限位槽中脱离，另一侧的金属球滚至限位槽处时，会在弹簧的作用下，弹入限位槽中卡合限位。
作为本检测装置的一种优选方案，所述壳体的前表面由防紫外线玻璃制成，可以有效防止在消毒时紫外消毒灯对操作人员造成伤害，同时还可以利于操作人员观察内部操作。
作为本检测装置的一种优选方案，所述混合皿上方设置有进液口，所述混合皿下方安装有出液口，所述出液口内设置有球阀，所述球阀通过贯穿壳体的手柄控制。
综上所述，本发明的检测方法能有效避免检测过程中有杂菌对检测结果造成影响，同时还可以使是否存在目标微生物的观测更显眼、直观，对基层工作人员的操作要求较低，有利于基层工作人员采用；本发明的检测装置能有效避免杂菌对检测结果的影响，同时可以保证微生物生长所需氧气，使用简单方便，可以有效弥补基层仪器设备不达标的不足，方便基层工作人员使用。
附图说明
图1为本发明的检测装置的主视剖面图。
图2为本发明的检测装置左视剖面图。
图3为本发明的检测装置的A处放大图。
图4为本发明的检测装置控制逻辑图。
图5为本发明的检测装置的分层隔板处放大图。
图中：1壳体、1-1盖板、1-2培养皿出口、1-3废水槽出口、1-4滑槽、1-5支撑板、1-6培养皿支架、2混合皿、2-1进液口、2-2出液口、3球阀、3-1手柄、4导管、5分液容器、6分层隔板、6-1芯板、6-2通孔、6-3限位槽一、6-4按压块、6-5限位槽二、7滑动板、7-1限位卡二、7-2限位卡一、8培养皿、9废水槽、10紫外消毒灯、11单片机、12温度传感器、13加热丝、14通风扇、15空气滤芯。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。
在本发明的描述中，需要理解的是，术语“上方”、“下方”、“左侧”、“右侧”、“内部”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。
一种用于检测食品中多种微生物的方法，包括以下步骤:
S1、将混合皿2消毒，保证混合皿2中没有微生物，避免对实验结果造成干扰，并将待测食品取样放入混合皿2中。
S2、向混合皿2中加入平衡盐溶液，以将待测食品样品稀释，样品和平衡盐溶液的比例为1：10，得到样品稀释液，用以后续检测使用。
S3、将培养皿8消毒灭菌，之后向不同的培养皿8中分别加入培养大肠杆菌的煌绿乳糖胆盐肉汤、培养沙门氏菌的RV肉汤、培养酵母菌的麦芽汁液体等，以分别在培养皿8中培养目标微生物，同时抑制其他非目标微生物的生长。
S4、向加入了不同种微生物培养基的培养皿8中分别加入溴百里酚蓝和二甲苯酚蓝混合制成的显色剂，其中溴百里酚蓝为1wt％，二甲苯酚蓝为0.01wt％，培养皿中有目标微生物，经培养后显色化合物会显亮黄色。
S5、将稀释后的样品稀释液通过分液容器5进行无菌分液，使样品稀释液等量分入不同的培养皿8中。
S6、对培养皿8加温，使培养皿8处于35-37℃之间进行培养，培养时间24h，为了保证微生物的繁殖也可以延长培养时间至36h。
S7、培养结束，观察每个培养皿8中的显色反应，以确定培养皿中是否存在目标微生物，如果培养皿8中显亮黄色，则说明含有目标微生物。
S8、取出培养皿8，将其放置到显微镜下观察，计算每个培养皿8中的目标微生物的含量。
参照图1-5，一种用于检测食品中多种微生物的装置，包括壳体1，在壳体1上方活动连接有盖板1-1，在壳体1前表面下方设置有废水槽出口1-3，废水槽出口1-3内放置有废水槽9；在废水槽出口1-3上方设置有培养皿出口1-2，培养皿出口1-2的内部设置有支撑板1-5，在支撑板1-5上放置有培养皿支架1-6，培养皿支架1-6内放置有多个培养皿8。
在壳体1左右侧壁均设置有滑槽1-4，左右两侧的滑槽1-4内部均安装有滑动板7，每个滑动板7的左右两侧和其所在的滑槽1-4的边缘处通过橡胶伸缩套密封连接，从而保证了壳体1内部的密闭性。在两个滑动板7之间固定安装有分层隔板6，分层隔板6的内部设置有芯板6-1，芯板6-1的长度长于分层隔板6的长度，可以使芯板6-1在分层隔板6内左右移动，芯板6-1左右两端贯穿两个滑动板7后均固定连接有按压块6-4；其中，在芯板6-1的右端设置有限位槽一6-3，芯板6-1的左端设置有限位槽二6-5，在右侧的滑动板7内部设置限位卡一7-2，当向左推动芯板6-1时，芯板6-1向左移动，直至限位卡一7-2卡入限位槽一6-3中时停止；在左侧的滑动板7内部设置有限位卡二7-1，当向右推动芯板6-1时，芯板6-1向右移动，直至限位卡二7-1卡入限位槽二6-5中时停止。由于芯板6-1和分层隔板6上开有通孔6-2，出液管放置于通孔6-2内，所以在限位卡一7-2卡入限位槽一6-3中时，芯板6-1和分层隔板6的通孔6-2错位，此时出液管会在芯板6-1的挤压下闭合。在限位卡二7-1卡入限位槽二6-5中时，芯板6-1和分层隔板6的通孔6-2同心，此时出液管不受芯板6-1挤压，处于开启状态。
在壳体1内部上侧固定安装有混合皿2，混合皿2上方设置有进液口2-1，混合皿2下方安装有出液口2-2，出液口2-2内设置有球阀3，球阀3通过位于壳体1外侧的手柄3-1进行控制。混合皿2的出液口2-2通过导管4和分液容器5相连通，相邻的分液容器5之间通过连通管相连通，分液容器5的出液管贯穿分层隔板6后位于培养皿8上方，分层隔板6内设置有夹紧装置，用于控制出液管的开合。
在壳体1内部后侧固定安装有紫外消毒灯10，用于给壳体1内部的混合皿2、导管4、分液容器5以及培养皿8消毒；在壳体1侧壁安装有通风扇14，用以给壳体1内通风，保证在微生物培养时所需的氧气，在通风扇14内侧固定安装有加热丝13，用以提高壳体1内部的温度，保证微生物培养的环境温度稳定，从而利于微生物培养；在通风扇14外侧设置有空气滤芯15，用以过滤外界空气中的微生物，避免外界微生物对壳体1内部的微生物造成影响；在培养皿支架1-6上侧的侧壁上固定安装有单片机11和温度传感器12，温度传感器12用以测量培养皿8处的温度，并通过单片机11控制加热丝13进行加热，达到指定温度时，则通过单片机11控制加热丝13停止加热，从而保证壳体1内部的温度恒定。
在一种较佳的实施例中，限位卡一7-2和限位卡二7-1均由卡壳、弹簧以及金属球构成，弹簧位于卡壳底部，金属球位于卡壳开口处，下方压紧弹簧，当芯板6-1左右移动时，金属球会受力滚动，从而可以从限位槽中脱离，另一侧的金属球滚至限位槽处时，会在弹簧的作用下，弹入限位槽中卡合限位。
在一种较佳的实施例中，单片机11采用STC89C51单片机，温度传感器12采用WZP-100型号产品。
在使用时，首先将样品放入混合皿2中，然后向混合皿2加入平衡盐溶液进行稀释。在将培养皿8取出并分别放入煌绿乳糖胆盐肉汤、RV肉汤、麦芽汁液体等培养基，然后将培养皿8放入培养皿支架1-6中，将培养皿支架1-6从培养皿出口1-2中推入支撑板1-5中，此时培养皿支架1-6的右端密封在培养皿出口1-2处。之后将球阀3打开，此时样品稀释液通过球阀3流出，并经导管4分别流入不同的分液容器5中，由于分液容器5之间都通过连通管相连，因此稀释液在流入分液容器5时，分液容器5内的液面会始终保持水平，因此也就保证了每个分液容器5内的样品稀释液等量。之后通过按压块6-4向右推动芯板6-1，使分液容器5的出液管开启，此时，每个分液容器5内的样品稀释液会流入其下方的培养皿中。之后即可通电，通过控制面板控制通风扇14、加热丝13、温度传感器12以及单片机11工作，通过单片机11可以预定培养时间，温度传感器12时刻监控培养皿8处的温度，并通过给单片机11发射信号，通过单片机11控制加热丝13运行与停止，从而保持壳体1内的温度恒定。培养结束后，通过观察每个培养皿8内的显色反应，即可知道内部是否含有目标微生物，如需测定微生物含量，将其取出，放置显微镜下观察计数即可。
使用结束后，向混合皿2中加入酒精消毒，并使酒精经过导管4静茹分液容器5中，再将滑动板7向后移动，使分液容器5离开培养皿8上方，停止于支撑板1-5后部的开口处，然后通过芯板6-1打开分液容器5的出液管。此时，酒精会通过出液管流出，并通过支撑板1-5后部的开口，进入下方的废水槽9中，从而完成装置的消毒。将废水槽9取出倾倒，然后再放回。通过控制面板启动紫外消毒灯10对混合皿2、导管4、分液容器5、培养皿8以及废水槽9进行消毒，以便于下次检测使用。
进一步说明，上述固定连接和固定安装，除非另有明确的规定和限定，否则应做广义理解，例如，可以是焊接，也可以是胶合，或者一体成型设置等本领域技术人员熟知的惯用手段。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种用于检测食品中多种微生物的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤:
将混合皿消毒，并将待测食品取样放入混合皿中；
向混合皿中加入稀释液，将待测食品样品稀释，样品和稀释液的比例为1：10，得到样品稀释液；
将培养皿消毒灭菌，之后向不同的培养皿中分别加入培养不同种类目标微生物的培养基；
向加入了微生物培养基的培养皿中分别加入显色化合物；
将稀释后的样品稀释液通过分液容器进行无菌分液，使样品稀释液等量分入不同的培养皿中；
对培养皿加温，使培养皿处于35-37℃进行培养，培养时间24-36h；
培养结束，观察每个培养皿中的显色反应，以确定培养皿中是否存在目标微生物；
取出培养皿，放置到显微镜下观察，计算目标微生物的含量。
2.根据权利要求1所述的用于检测食品中多种微生物的方法，其特征在于：所述稀释液采用平衡盐溶液。
3.根据权利要求1所述的用于检测食品中多种微生物的方法，其特征在于：所述培养基为目标微生物提供营养物质，同时可以抑制其他微生物生长。
4.根据权利要求1所述的用于检测食品中多种微生物的方法，其特征在于：所述显色化合物由溴百里酚蓝和二甲苯酚蓝混合制成。
5.一种用于检测食品中多种微生物的装置，其特征在于：包括壳体，所述壳体上方活动连接有盖板，所述壳体前表面下方设置有废水槽出口，所述废水槽出口内放置有废水槽；所述废水槽出口上方设置有培养皿出口，所述培养皿出口内部设置有支撑板，所述支撑板上放置有培养皿支架，所述培养皿支架内放置有培养皿；所述壳体左右侧壁均设置有滑槽，左右两侧的所述滑槽内部均安装有滑动板，所述滑动板左右两侧和所述滑槽的边缘处通过橡胶伸缩套密封连接，两个所述滑动板之间固定安装有分层隔板；所述壳体内部上侧固定安装有混合皿，所述混合皿下方通过导管和分液容器相连通，相邻的所述分液容器之间通过连通管相连通，所述分液容器的出液管贯穿所述分层隔板后位于所述培养皿上方，所述分层隔板内设置有夹紧装置，用于控制所述出液管的开合；所述壳体内部后侧固定安装有紫外消毒灯，所述壳体侧壁安装有通风扇，所述通风扇内侧固定安装有加热丝，所述通风扇外侧设置有空气滤芯，所述培养皿支架上侧的侧壁上固定安装有单片机和温度传感器。
6.根据权利要求5所述的用于检测食品中多种微生物的装置，其特征在于：所述分层隔板内部为空腔结构，其内部设置有芯板，所述芯板的长度长于所述分层隔板的长度，所述芯板左右两端贯穿两个所述滑动板后均固定连接有按压块，所述芯板和所述分层隔板上开有通孔，所述出液管放置于所述通孔内。
7.根据权利要求6所述的用于检测食品中多种微生物的装置，其特征在于：所述芯板右端设置有限位槽一，所述芯板左端设置有限位槽二，右侧的所述滑动板内部设置限位卡一，左侧的所述滑动板内部设置有限位卡二。
8.根据权利要求7所述的用于检测食品中多种微生物的装置，其特征在于：所述限位卡一和所述限位卡二均由卡壳、弹簧以及金属球构成，所述弹簧位于所述卡壳底部，所述金属球位于所述卡壳开口处，下方压紧所述弹簧。
9.根据权利要求5所述的用于检测食品中多种微生物的装置，其特征在于：所述壳体的前表面由防紫外线玻璃制成。
10.根据权利要求5所述的用于检测食品中多种微生物的装置，其特征在于：所述混合皿上方设置有进液口，所述混合皿下方安装有出液口，所述出液口内设置有球阀，所述球阀通过贯穿壳体的手柄控制。
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