CN110746518A - 高纯度灵芝多糖的制备方法 - Google Patents
高纯度灵芝多糖的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110746518A CN110746518A CN201911266056.0A CN201911266056A CN110746518A CN 110746518 A CN110746518 A CN 110746518A CN 201911266056 A CN201911266056 A CN 201911266056A CN 110746518 A CN110746518 A CN 110746518A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- ganoderma lucidum
- ganoderma
- pulp
- ethanol solution
- lucidum polysaccharide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开了一种高纯度灵芝多糖的制备方法，包括以下步骤：步骤一、向灵芝中加入乙醇溶液中加热，过滤除去滤液，得到预处理灵芝；步骤二、向预处理灵芝中加入水打浆，得到一次浆液，将一次浆液速冻结冰，再将速冻的一次浆液解冻并打浆，得到二次浆液，然后向二次浆液中加入麦饭石、醋酸、碳酸二甲酯并搅拌，再将二次浆液速冻结冰，最后将速冻的二次浆液解冻，得到三次浆液；步骤三、将三次浆液放入加热罐内，封闭加热罐，过滤除去滤渣，得到粗灵芝多糖；步骤四、将粗灵芝多糖滴加至乙醇溶液中，过滤得到沉淀，并干燥，即得灵芝多糖。本发明不仅有效减少灵芝多糖中色素的含量，而且提高灵芝多糖的得率，同时，有效缩短灵芝多糖的制备时间。
Description
技术领域
本发明涉及灵芝多糖制备技术领域。更具体地说，本发明涉及一种高纯度灵芝多糖的制备方法。
背景技术
灵芝是是多孔菌科真菌灵芝的子实体，为一种名贵中药材，具有补气安神、止咳平喘、延年益寿的功效，可双向调节人体机能的作用，在整体上双向调节人体机能的平衡，全面的使人的免疫系统得到快速的提升。灵芝的活性成份为灵芝多糖、灵芝酸及腺嘌呤核苷等，目前，灵芝多糖多呈黄褐色，含有较多的色素，而色素会影响到灵芝多糖的生物活性，现在一般使用活性炭对灵芝多糖进行脱色处理，这种处理方法脱色效果达不到要求。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。
本发明还有一个目的是提供一种高纯度灵芝多糖的制备方法，其不仅有效减少灵芝多糖中色素的含量，而且提高灵芝多糖的得率，同时，有效缩短灵芝多糖的制备时间。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种高纯度灵芝多糖的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、将灵芝粉碎，并向灵芝中加入质量分数为90％的乙醇溶液，置于38～40℃条件下加热，过滤除去滤液，得到预处理灵芝；
步骤二、向预处理灵芝中加入其总质量2倍量的8～10℃的水混合打浆，静置20min，得到一次浆液，将一次浆液速冻结冰，静置10min，再将速冻的一次浆液解冻并打浆，得到二次浆液，然后向二次浆液中加入其总质量0.1倍量的粒径为0.5～1mm的麦饭石，并置于1000r/min的条件下搅拌20min，过筛除去麦饭石，加入二次浆液总质量0.04倍量的醋酸、0.01倍量的碳酸二甲酯并置于1000r/min的条件下搅拌30min，再将二次浆液速冻结冰，静置20min，最后将速冻的二次浆液解冻，得到三次浆液；
步骤三、将三次浆液放入加热罐内，并向加热罐内加入三次浆液总质量3倍量的水混合，封闭加热罐，置于150r/min、40～42℃条件下保温20min，过滤除去滤渣，得到粗灵芝多糖；
步骤四、在400r/min条件下，将粗灵芝多糖滴加至其总质量3倍量的质量分数为80％的乙醇溶液中，过滤得到沉淀，并干燥，即得灵芝多糖。
优选的是，在步骤一中，灵芝与质量分数为90％的乙醇溶液的用量比为1:8。
优选的是，在步骤一中，将灵芝粉碎至粒径为1～2cm。
优选的是，在步骤一中，向灵芝中加入质量分数为90％的乙醇溶液，置于38～40℃条件下加热，过滤，得到预处理灵芝，具体过程为：将灵芝粉碎，向灵芝中加入质量分数为90％的乙醇溶液，并置于38～40℃条件下加热20min，然后在38～40℃条件下加入灵芝总质量0.1倍量的柠檬酸和0.1倍量的食用油，继续加热10min，再分5次等量加入灵芝总质量0.013倍量的膦酸甘油酯，滴加完毕后，继续加热40min，同时每间隔10min向体系内鼓入氮气，过滤，即得到预处理灵芝。
优选的是，在步骤一中，将灵芝粉碎后，先向灵芝中加入灵芝总质量4倍量的质量分数为10％的氯化钠水溶液中浸泡30min，取出灵芝，再向灵芝中加入质量分数为90％的乙醇。
优选的是，在步骤二中，在向预处理灵芝中加入8～10℃的水之前，将预处理灵芝先用乙醇冲洗3次，然后使用0℃的水洗涤至清洗液的pH为中性。
优选的是，在步骤四中，将粗灵芝多糖滴加至质量分数为85％的乙醇之前使用氧化铝进行柱层析，处理的具体过程为：将粗灵芝多糖总质量50倍量的氧化铝置于118～120℃的烘箱中13h，然后装柱，得到氧化铝柱，将粗灵芝多糖加入氧化铝树脂柱内，依次使用质量分数为98％的乙醇溶液、质量分数为80％的乙醇溶液、体积比1:1的水和质量分数为90％的乙醇溶液的混合溶液、及水进行洗脱，并收集体积比1:1的水和质量分数为90％的乙醇溶液的混合溶液、及水，其中，使用质量分数为98％的乙醇溶液、质量分数为80％的乙醇溶液、体积比1:1的水和质量分数为90％的乙醇溶液的混合溶液、及水的量与氧化铝柱的体积比依次为1:0.5:2:1:1。
本发明至少包括以下有益效果：
第一、本发明高纯度灵芝多糖的制备方法，不仅有效减少灵芝多糖中色素的含量，而且提高灵芝多糖的得率，同时，有效缩短了灵芝多糖的制备时间。
第二、在制备预处理灵芝时，使用柠檬酸、食用油、磷酸甘油酯进行脱脂，不仅能够使灵芝在低温条件下(38～40℃)条件下脱脂，而且脱脂较为完全，有效提高灵芝多糖的得率，低温条件下有利于减少色素的形成，降低灵芝多糖中色素的含量；根据相似相容原理在体系中加入柠檬酸、食用油、磷酸甘油酯便于灵芝中脂类物质的排出，同时加入柠檬酸不仅为食用油、磷酸甘油酯提供酸性环境(酸性环境更有利于脂类排出)，而且柠檬酸与食用油、磷酸甘油酯的协同作用使脂类在低温条件下即可快速排出，相比于现有技术单纯使用乙醇溶液进行处理，本发明有效缩短了脱脂时间。
第三、通过本发明的方法制备三次浆液，有利于提高细胞的破碎率，进而提高灵芝多糖的得率，同时在低温条件下提取粗灵芝多糖，可有效减少水溶性色素的生成，有效避免了水溶性色素包裹灵芝多糖，进而有效减少灵芝多糖中色素的含量；速冻结冰处理可以促进细胞涨破进而提高细胞破碎率，以便于灵芝多糖的释放，提高灵芝多糖的得率，同时，通过提高细胞涨破，而实现灵芝多糖在低温进行提取，有效避免了高温回流时色素的生成，降低灵芝多糖中的色素含量；添加麦饭石、醋酸、碳酸二甲酯一方面麦饭石可以提高细胞的破碎率，另一方面通过添加麦饭石、醋酸、碳酸二甲酯可以促进灵芝中纤维素的破碎，有利于纤维素与灵芝多糖的分离，提高灵芝多糖的得率和纯度，同时，纤维素的破碎还可以减少纤维素对色素的包覆，从而降低灵芝多糖中色素的含量。
第四、在乙醇溶液中沉淀之前先使用氧化铝柱进行处理，使用氧化铝柱处理一方面可以有效减少粗灵芝多糖中色素的含量，进而降低灵芝多糖中的色素含量，另一方面可以减少粗灵芝多糖中杂质(杂质会影响到乙醇溶液中沉淀的生成)的含量，进而有效提高灵芝多糖的得率。
第五、在向预处理灵芝中加入8～10℃的水之前，将预处理灵芝先用乙醇冲洗掉易溶于乙醇的食用油、以及磷酸甘油酯，避免这些物质影响灵芝多糖的得率，使用0℃的水洗涤一方面避免柠檬酸残留，另一方面0℃的水可以减少灵芝多糖在水中的溶解，避免灵芝多糖的浪费，提高灵芝多糖的得率；灵芝粉碎后，将灵芝浸泡在质量分数为10％的氯化钠水溶液中，可以减少灵芝中水的含量，便于使用乙醇进行脱脂处理。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
<实施例1>
高纯度灵芝多糖的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、将灵芝粉碎，并向灵芝中加入质量分数为90％的乙醇溶液，置于38～40℃条件下加热，过滤除去滤液，得到预处理灵芝；
步骤二、向预处理灵芝中加入其总质量2倍量的8～10℃的水混合打浆，静置20min，得到一次浆液，将一次浆液速冻结冰，静置10min，再将速冻的一次浆液解冻并打浆，得到二次浆液，然后向二次浆液中加入其总质量0.1倍量的粒径为0.5～1mm的麦饭石，并置于1000r/min的条件下搅拌20min，过筛除去麦饭石，加入二次浆液总质量0.04倍量的醋酸、0.01倍量的碳酸二甲酯并置于1000r/min的条件下搅拌30min，再将二次浆液速冻结冰，静置20min，最后将速冻的二次浆液解冻，得到三次浆液；
步骤三、将三次浆液放入加热罐内，并向加热罐内加入三次浆液总质量3倍量的水混合，封闭加热罐，置于150r/min、40～42℃条件下保温20min，过滤除去滤渣，得到粗灵芝多糖；
步骤四、在400r/min条件下，将粗灵芝多糖滴加至其总质量3倍量的质量分数为80％的乙醇溶液中，过滤得到沉淀，并干燥，即得灵芝多糖。
<实施例2>
高纯度灵芝多糖的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、将灵芝粉碎，并向灵芝中加入质量分数为90％的乙醇溶液，置于38～40℃条件下加热，过滤除去滤液，得到预处理灵芝；
步骤二、向预处理灵芝中加入其总质量2倍量的8～10℃的水混合打浆，静置20min，得到一次浆液，将一次浆液速冻结冰，静置10min，再将速冻的一次浆液解冻并打浆，得到二次浆液，然后向二次浆液中加入其总质量0.1倍量的粒径为0.5～1mm的麦饭石，并置于1000r/min的条件下搅拌20min，过筛除去麦饭石，加入二次浆液总质量0.04倍量的醋酸、0.01倍量的碳酸二甲酯并置于1000r/min的条件下搅拌30min，再将二次浆液速冻结冰，静置20min，最后将速冻的二次浆液解冻，得到三次浆液；
步骤三、将三次浆液放入加热罐内，并向加热罐内加入三次浆液总质量3倍量的水混合，封闭加热罐，置于150r/min、40～42℃条件下保温20min，过滤除去滤渣，得到粗灵芝多糖；
步骤四、在400r/min条件下，将粗灵芝多糖滴加至其总质量3倍量的质量分数为80％的乙醇溶液中，过滤得到沉淀，并干燥，即得灵芝多糖。
在步骤一中，灵芝与质量分数为90％的乙醇溶液的用量比为1:8。
在步骤一中，将灵芝粉碎至粒径为1～2cm。
在步骤一中，向灵芝中加入质量分数为90％的乙醇溶液，置于38～40℃条件下加热，过滤，得到预处理灵芝，具体过程为：将灵芝粉碎，向灵芝中加入质量分数为90％的乙醇溶液，并置于38～40℃条件下加热20min，然后在38～40℃条件下加入灵芝总质量0.1倍量的柠檬酸和0.1倍量的食用油，继续加热10min，再分5次等量加入灵芝总质量0.013倍量的膦酸甘油酯，滴加完毕后，继续加热40min，同时每间隔10min向体系内鼓入氮气，过滤，即得到预处理灵芝。
在步骤一中，将灵芝粉碎后，先向灵芝中加入灵芝总质量4倍量的质量分数为10％的氯化钠水溶液中浸泡30min，取出灵芝，再向灵芝中加入质量分数为90％的乙醇。
在步骤二中，在向预处理灵芝中加入8～10℃的水之前，将预处理灵芝先用乙醇冲洗3次，然后使用0℃的水洗涤至清洗液的pH为中性。
<实施例3>
高纯度灵芝多糖的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、将灵芝粉碎，并向灵芝中加入质量分数为90％的乙醇溶液，置于38～40℃条件下加热，过滤除去滤液，得到预处理灵芝；
步骤二、向预处理灵芝中加入其总质量2倍量的8～10℃的水混合打浆，静置20min，得到一次浆液，将一次浆液速冻结冰，静置10min，再将速冻的一次浆液解冻并打浆，得到二次浆液，然后向二次浆液中加入其总质量0.1倍量的粒径为0.5～1mm的麦饭石，并置于1000r/min的条件下搅拌20min，过筛除去麦饭石，加入二次浆液总质量0.04倍量的醋酸、0.01倍量的碳酸二甲酯并置于1000r/min的条件下搅拌30min，再将二次浆液速冻结冰，静置20min，最后将速冻的二次浆液解冻，得到三次浆液；
步骤三、将三次浆液放入加热罐内，并向加热罐内加入三次浆液总质量3倍量的水混合，封闭加热罐，置于150r/min、40～42℃条件下保温20min，过滤除去滤渣，得到粗灵芝多糖；
步骤四、在400r/min条件下，将粗灵芝多糖滴加至其总质量3倍量的质量分数为80％的乙醇溶液中，过滤得到沉淀，并干燥，即得灵芝多糖。
在步骤一中，灵芝与质量分数为90％的乙醇溶液的用量比为1:8。
在步骤一中，将灵芝粉碎至粒径为1～2cm。该粒径在满足灵芝脱脂的同时可以减少灵芝多糖溶解在乙醇溶液中。
在步骤一中，向灵芝中加入质量分数为90％的乙醇溶液，置于38～40℃条件下加热，过滤，得到预处理灵芝，具体过程为：将灵芝粉碎，向灵芝中加入质量分数为90％的乙醇溶液，并置于38～40℃条件下加热20min，然后在38～40℃条件下加入灵芝总质量0.1倍量的柠檬酸和0.1倍量的食用油，继续加热(38～40℃)10min，再分5次等量加入灵芝总质量0.013倍量的膦酸甘油酯，滴加完毕后，继续加热(38～40℃)40min，同时每间隔10min向体系内鼓入氮气，过滤，即得到预处理灵芝。
在步骤一中，将灵芝粉碎后，先向灵芝中加入灵芝总质量4倍量的质量分数为10％的氯化钠水溶液中浸泡30min，取出灵芝，再向灵芝中加入质量分数为90％的乙醇。
在步骤二中，在向预处理灵芝中加入8～10℃的水之前，将预处理灵芝先用乙醇冲洗3次，然后使用0℃的水洗涤至清洗液的pH为中性。
在步骤四中，将粗灵芝多糖滴加至质量分数为85％的乙醇之前使用氧化铝进行柱层析，处理的具体过程为：将粗灵芝多糖总质量50倍量的氧化铝置于118～120℃的烘箱中13h，然后装柱，得到氧化铝柱，将粗灵芝多糖加入氧化铝树脂柱内，依次使用质量分数为98％的乙醇溶液、质量分数为80％的乙醇溶液、体积比1:1的水和质量分数为90％的乙醇溶液的混合溶液、及水进行洗脱，并收集体积比1:1的水和质量分数为90％的乙醇溶液的混合溶液、及水，其中，使用质量分数为98％的乙醇溶液、质量分数为80％的乙醇溶液、体积比1:1的水和质量分数为90％的乙醇溶液的混合溶液、及水的量与氧化铝柱的体积比依次为1:0.5:2:1:1。
其中，粗灵芝多糖在使用氧化铝柱处理前先采用Sevage法去除蛋白质。
<对比例1>
步骤一、向灵芝中加入质量分数为90％的乙醇溶液，加热回流2.5h，过滤除去滤液得到预处理灵芝；
步骤二、向预处理灵芝多糖中加入水，加热回流2.5h，过滤，得到粗灵芝多糖；
步骤三、将粗灵芝多糖滴加至质量分数为80％的乙醇溶液中，过滤除去滤液，得到灵芝多糖。
<对比例2>
在实施例3的基础上制备灵芝多糖，其中，不同的是步骤一中预处理灵芝的制备方法，具体为：向灵芝中加入质量分数为90％的乙醇溶液，置于38～40℃条件下加热70min，过滤，即得预处理灵芝。
<对比例3>
在实施例3的基础上制备灵芝多糖，其中，不同的是步骤一中预处理灵芝的制备方法，具体为：将灵芝粉碎，向灵芝中加入质量分数为90％的乙醇溶液，回流(78℃)20min，然后在78℃条件下加入灵芝总质量0.1倍量的柠檬酸和0.1倍量的食用油，继续回流10min，再分5次等量加入灵芝总质量0.013倍量的膦酸甘油酯，滴加完毕后，继续回流40min，同时每间隔10min向体系内鼓入氮气，过滤，即得到预处理灵芝。
<对比例4>
在实施例3的基础上制备灵芝多糖，其中，不同的是步骤一中预处理灵芝的制备方法，具体为：将灵芝粉碎，向灵芝中加入质量分数为90％的乙醇溶液，并置于38～40℃条件下加热20min，然后在38～40℃条件下加入灵芝总质量0.1倍量的食用油，继续加热(38～40℃)10min，再分5次等量加入灵芝总质量0.013倍量的膦酸甘油酯，滴加完毕后，继续加热(38～40℃)40min，同时每间隔10min向体系内鼓入氮气，过滤，即得到预处理灵芝。
<对比例5>
在实施例3的基础上制备灵芝多糖，其中，不同的是步骤一中预处理灵芝的制备方法，具体为：将灵芝粉碎，向灵芝中加入质量分数为90％的乙醇溶液，并置于38～40℃条件下加热20min，然后在38～40℃条件下加入灵芝总质量0.1倍量的柠檬酸，继续加热40min，同时每间隔10min向体系内鼓入氮气，过滤，即得到预处理灵芝。
<对比例6>
在实施例3的基础上制备灵芝多糖，其中，不同的是三次浆液的制备方法，具体为：向预处理灵芝中加入其总质量2倍量的8～10℃的水混合打浆，静置20min，得到一次浆液，将一次浆液继续打浆，得到二次浆液，然后向二次浆液中加入其总质量0.1倍量的粒径为0.5～1mm的麦饭石，并置于1000r/min的条件下搅拌20min，过筛除去麦饭石，加入二次浆液总质量0.04倍量的醋酸、0.01倍量的碳酸二甲酯并置于1000r/min的条件下搅拌30min，得到三次浆液。
<对比例7>
在实施例3的基础上制备灵芝多糖，其中，不同的是三次浆液的制备方法，具体为：向预处理灵芝中加入其总质量2倍量的8～10℃的水混合打浆，静置20min，得到一次浆液，将一次浆液速冻结冰，静置10min，再将速冻的一次浆液解冻并打浆，得到二次浆液，将二次浆液速冻结冰，静置20min，最后将速冻的二次浆液解冻，得到三次浆液。
<对比例8>
在实施例3的基础上制备灵芝多糖，其中，不同的是粗灵芝多糖的制备方法，具体为：向预处理灵芝放入加热罐内，并加入与预处理灵芝5倍量的水，置于150r/min、40～42℃条件下保温50min，过滤，得到粗灵芝多糖(即未进行步骤二的操作)。
<对比例9>
在实施例3的基础上制备灵芝多糖，其中，不同的是粗灵芝多糖的制备方法，具体为：将三次浆液放入加热罐内，并向加热罐内加入三次浆液总质量3倍量的水混合，封闭加热罐，置于150r/min、88～90℃条件下保温20min，过滤除去滤渣，即得到粗灵芝多糖。
<对比例10>
在实施例3的基础上制备灵芝多糖，其中，不同的是粗灵芝多糖的制备方法，具体为：向预处理灵芝多糖中加入预处理灵芝5倍量的水，加热回流2.5h，过滤，得到粗灵芝多糖(具体为进行步骤二的操作)。
<试验表征>
1、灵芝多糖的颜色及灵芝多糖含量
观察由实施例1～3、对比例1、对比例3、对比例9、对比例10所制备的灵芝多糖的颜色，并用色度进行表示，结果如表1所示；
采用苯酚-硫酸法分别测定由实施例1～3、对比例1、对比例3、对比例9、对比例10所制备的灵芝多糖中多糖的含量，结果如表1所示；
表1、灵芝多糖的颜色及灵芝多糖含量
注：色度由1→10表示颜色由米白色→黄褐色，数字越大颜色越深；
对比分析实施例3的色素含量与灵芝多糖的含量均优于实施例1、实施例2、对比例1、对比例3、对比例9、对比例10的测试数据，表明本发明的灵芝多糖的制备方法能够提高灵芝多糖的质量。
2、灵芝多糖的得率
计算由实施例1～3、对比例1～2、对比例4～10的所制备灵芝多糖的灵芝多糖得率，结果如表2所示；
表2、灵芝多糖的得率
对比分析实施例3的灵芝多糖的得率均优于实施例1～2、对比例1～2、对比例4～10的测试数据，表明本发明的制备方法能够有效提高灵芝多糖的得率。
3、细胞破壁率
在400倍的显微镜下观察实施例3、对比例6、对比例7中三次浆液中细胞破壁情况，并计算相应的细胞破碎率，结果如表3所示；
表3、细胞破壁率
| 组别 | 细胞破碎率 |
| 实施例3 | 98％ |
| 对比例1 | 75％ |
| 对比例6 | 86％ |
| 对比例7 | 89％ |
由表3可知，实施例3中细胞破碎率明显高于对比例1、对比例6、对比例7，表明本发明灵芝多糖的制备方法能够提高灵芝多糖的得率。
4、灵芝多糖对吞噬细胞的影响
4.1取实施例3、对比例1、对比例9所制备的灵芝多糖进行试验，将每组灵芝多糖分别配置成20mg/mL的灵芝多糖水溶液；
4.2取40只体重为100～150g的小白鼠，并随机平均分成4组，其中一组中的小鼠每天使用0.5mL生理盐水连续灌胃7天，剩余3组中的小白鼠分别使用0.5mL实施例1、对比例1、对比例9的灵芝多糖溶液连续灌胃7天，于第8天将小鼠断尾，并取血进行白细胞吞噬实验，所得数据用SPSS10.0软件分析，结果如表4所示；
表4、灵芝多糖对吞噬细胞的影响
由表4可知，实施例3的吞噬率和吞噬指数明显优于对比例1和对比例9，表明小白鼠食用本发明的灵芝多糖后，白细胞的吞噬细菌的能力有所提高。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。
Claims (7)
1.高纯度灵芝多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一、将灵芝粉碎，并向灵芝中加入质量分数为90％的乙醇溶液，置于38～40℃条件下加热，过滤除去滤液，得到预处理灵芝；
步骤二、向预处理灵芝中加入其总质量2倍量的8～10℃的水混合打浆，静置20min，得到一次浆液，将一次浆液速冻结冰，静置10min，再将速冻的一次浆液解冻并打浆，得到二次浆液，然后向二次浆液中加入其总质量0.1倍量的粒径为0.5～1mm的麦饭石，并置于1000r/min的条件下搅拌20min，过筛除去麦饭石，加入二次浆液总质量0.04倍量的醋酸、0.01倍量的碳酸二甲酯并置于1000r/min的条件下搅拌30min，再将二次浆液速冻结冰，静置20min，最后将速冻的二次浆液解冻，得到三次浆液；
步骤三、将三次浆液放入加热罐内，并向加热罐内加入三次浆液总质量3倍量的水混合，封闭加热罐，置于150r/min、40～42℃条件下保温20min，过滤除去滤渣，得到粗灵芝多糖；
步骤四、在400r/min条件下，将粗灵芝多糖滴加至其总质量3倍量的质量分数为80％的乙醇溶液中，过滤得到沉淀，并干燥，即得灵芝多糖。
2.如权利要求1所述的高纯度灵芝多糖的制备方法，其特征在于，在步骤一中，灵芝与质量分数为90％的乙醇溶液的用量比为1:8。
3.如权利要求2所述的高纯度灵芝多糖的制备方法，其特征在于，在步骤一中，将灵芝粉碎至粒径为1～2cm。
4.如权利要求3所述的高纯度灵芝多糖的制备方法，其特征在于，在步骤一中，向灵芝中加入质量分数为90％的乙醇溶液，置于38～40℃条件下加热，过滤，得到预处理灵芝，具体过程为：将灵芝粉碎，向灵芝中加入质量分数为90％的乙醇溶液，并置于38～40℃条件下加热20min，然后在38～40℃条件下加入灵芝总质量0.1倍量的柠檬酸和0.1倍量的食用油，继续加热10min，再分5次等量加入灵芝总质量0.013倍量的膦酸甘油酯，滴加完毕后，继续加热40min，同时每间隔10min向体系内鼓入氮气，过滤，即得到预处理灵芝。
5.如权利要求4所述的高纯度灵芝多糖的制备方法，其特征在于，在步骤一中，将灵芝粉碎后，先向灵芝中加入灵芝总质量4倍量的质量分数为10％的氯化钠水溶液中浸泡30min，取出灵芝，再向灵芝中加入质量分数为90％的乙醇。
6.如权利要求4所述的高纯度灵芝多糖的制备方法，其特征在于，在步骤二中，在向预处理灵芝中加入8～10℃的水之前，将预处理灵芝先用乙醇冲洗3次，然后使用0℃的水洗涤至清洗液的pH为中性。
7.如权利要求1所述的高纯度灵芝多糖的制备方法，其特征在于，在步骤四中，将粗灵芝多糖滴加至质量分数为85％的乙醇之前使用氧化铝进行柱层析，处理的具体过程为：将粗灵芝多糖总质量50倍量的氧化铝置于118～120℃的烘箱中13h，然后装柱，得到氧化铝柱，将粗灵芝多糖加入氧化铝树脂柱内，依次使用质量分数为98％的乙醇溶液、质量分数为80％的乙醇溶液、体积比1:1的水和质量分数为90％的乙醇溶液的混合溶液、及水进行洗脱，并收集体积比1:1的水和质量分数为90％的乙醇溶液的混合溶液、及水，其中，使用质量分数为98％的乙醇溶液、质量分数为80％的乙醇溶液、体积比1:1的水和质量分数为90％的乙醇溶液的混合溶液、及水的量与氧化铝柱的体积比依次为1:0.5:2:1:1。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201911266056.0A CN110746518A (zh) | 2019-12-11 | 2019-12-11 | 高纯度灵芝多糖的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201911266056.0A CN110746518A (zh) | 2019-12-11 | 2019-12-11 | 高纯度灵芝多糖的制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110746518A true CN110746518A (zh) | 2020-02-04 |
Family
ID=69285893
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201911266056.0A Pending CN110746518A (zh) | 2019-12-11 | 2019-12-11 | 高纯度灵芝多糖的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110746518A (zh) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105418781A (zh) * | 2015-11-23 | 2016-03-23 | 宁国千方中药发展有限公司 | 一种灵芝多糖的超声波抽提方法 |
| CN108409879A (zh) * | 2018-02-09 | 2018-08-17 | 海盐县凌特生物科技有限公司 | 灵芝活性多糖的提取方法 |
| CN108424472A (zh) * | 2018-05-02 | 2018-08-21 | 金华市飞凌生物科技有限公司 | 灵芝活性多糖 |
| CN109021126A (zh) * | 2018-06-28 | 2018-12-18 | 广西秀美壮乡能源环保有限公司 | 一种从灵芝中提取灵芝多糖的方法 |
-
2019
- 2019-12-11 CN CN201911266056.0A patent/CN110746518A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105418781A (zh) * | 2015-11-23 | 2016-03-23 | 宁国千方中药发展有限公司 | 一种灵芝多糖的超声波抽提方法 |
| CN108409879A (zh) * | 2018-02-09 | 2018-08-17 | 海盐县凌特生物科技有限公司 | 灵芝活性多糖的提取方法 |
| CN108424472A (zh) * | 2018-05-02 | 2018-08-21 | 金华市飞凌生物科技有限公司 | 灵芝活性多糖 |
| CN109021126A (zh) * | 2018-06-28 | 2018-12-18 | 广西秀美壮乡能源环保有限公司 | 一种从灵芝中提取灵芝多糖的方法 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| 侯新东主编: "《生物化学与分子生物学实验教程》", 31 December 2016, 中国地质大学出版社 * |
| 段金廒等: "《中药资源化学（供中药资源与开发、中药学类及相关专业用）》", 30 September 2013, 中国中医药出版社 * |
| 王波: ""灵芝多糖提取、分离纯化、表征及体外抗氧化活性探究"", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库医药卫生科技辑》 * |
| 郭力等主编: "《中药化学（供药学、制药技术、制药工程、中药学及相关专业使用）》", 31 August 2018, 中国医药科技出版社 * |
| 陈国良等: "《灵芝治百病》", 30 September 2014, 上海科学技术文献出版社 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105837700A (zh) | 一种灵芝子实体和灵芝孢子综合提取利用生产方法 | |
| CN113150867A (zh) | 一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法 | |
| CN105639617A (zh) | 一种茯苓的综合开发和应用的方法及其新用途 | |
| CN110746518A (zh) | 高纯度灵芝多糖的制备方法 | |
| CN107455753A (zh) | 一种海参肽口服液及其制备工艺 | |
| CN112370516A (zh) | 一种具有活性成分的破壁灵芝孢子粉制品及其制备方法 | |
| CN108610433A (zh) | 可有效抑制肝肿瘤细胞Hca-F的笼目海带提取物及制备方法 | |
| CN111620961A (zh) | 一种从灵芝孢子粉中提取灵芝多糖的方法 | |
| CN116925163A (zh) | 一种低频超声获取玫瑰苷的方法 | |
| CN113694152B (zh) | 一种高稳定性酶解法获取薏苡仁提取液的方法 | |
| CN101664187B (zh) | 鹿精营养组合物 | |
| CN108936675A (zh) | 一种具有治疗痛风作用的保健食品及其制备方法 | |
| CN110013508A (zh) | 一种提高抗癌免疫力的中药药酒 | |
| CN103445160A (zh) | 一种果胶酶酶解制备人参浆的方法以及人参浆 | |
| CN108969580B (zh) | 蓝布正总鞣质的制备方法及应用 | |
| CN112079938A (zh) | 一种青稞多糖的提取方法、青稞多糖提取物及其应用 | |
| CN110934897A (zh) | 一种治疗脑血管疾病后遗症的药物的制备方法 | |
| CN110537652A (zh) | 一种蛹虫草银杏叶保健饮料及其制备方法 | |
| CN114573725B (zh) | 一种酸枣仁多糖提取物的提取方法 | |
| CN114949077A (zh) | 一种具有抗氧化功效的北冬虫夏草多糖膏及其制备方法 | |
| AU2021100051A4 (en) | Antitumor formula and extraction method thereof | |
| CN114377039B (zh) | 一种灵芝多组分的提取分离方法及其在人工种植灵芝提取物制备中的应用 | |
| CN105943625B (zh) | 一种从莲子渣中提取α-淀粉酶抑制剂的方法 | |
| CN109793811B (zh) | 一种具有抑制前列腺增生、保肝、提高免疫三重功效的灵芝制剂 | |
| CN108410626B (zh) | 一种养生型绿茶黄酒的酿造工艺 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20200204 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |