CN110721200A - 一种阿胶与新阿胶组合物在制备预防或治疗与血小板降低相关疾病的药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种阿胶与新阿胶组合物在制备预防或治疗与血小板降低相关疾病的药物中的应用,本发明采用2dpf(day post fertilization)血小板转基因斑马鱼作为实验动物模型,研究阿胶与新阿胶组合物对血小板的影响。在本实验条件下,本申请中阿胶与新阿胶组合物对氯霉素、长春瑞滨诱导的斑马鱼血小板减少具有逆转作用,可以提高血小板的数目。经实验结果表明,阿胶与新阿胶组合物可用于制备临床预防或治疗与血小板降低相关疾病的药物;特别是可用于制备临床由于体内血小板降低而引起的相关疾病包括放化疗造成的血小板低下疾病的药物。
Description
技术领域
本申请涉及阿胶组合物的新用途,具体涉及一种阿胶与新阿胶组合物在制备预防或治疗与血小板降低相关疾病的药物中的应用。
背景技术
肿瘤患者血小板低多由于抗肿瘤治疗所致。接受化疗的患者常有血小板降低,这是因为化疗药物化疗作用于血小板生成和凋亡的不同环节,使血小板减少。接受放疗的患者,电离辐射影响所有的骨髓成分,所以也会常见血小板降低的情况。而接受过多次放化疗后,骨髓储备功能差,更容易出现血小板降低,甚至重度的血小板降低。血小板低于正常值时伤口出血风险升高,而降低到一定范围之下又会增加自发性出血的风险。血小板降低既易并发出血,又限制化疗药物的应用剂量,更有严重情况会被迫推迟用药时间或中断治疗。
阿胶来源于马科动物驴Equus asinus L.的干燥皮或鲜皮经煎煮、浓缩制成的固体胶。具有补血滋阴、润燥、止血的功效。现代药理研究表明,阿胶具有补血、止血、增强免疫、抗辐射、抑制肿瘤、抗疲劳、预防骨质疏松、促进骨愈合等作用,但尚未见有阿胶减肥、降脂方面的药理活性研究报道。
新阿胶来源于猪科动物家猪Sus domesticus.的干燥皮或鲜皮经煎煮、浓缩制成的固体胶。具有滋阴,补血,止血的效果,常用于血虚体弱、月经不调、吐血、衄血、血小板、白血球减少等。
现有技术中记载道阿胶有升高血小板的作用,例如在专利文件CN110237206A中公开了一种用于恶性肿瘤化疗后血小板减少的口服中药组方;现有技术中也记载道新阿胶有升高血小板的作用,参照论文(新阿胶的研究[J].齐鲁药事,1976(01):13-16.)。但是在实际使用过程中会发现阿胶以及新阿胶的使用效果发挥有限,现有技术中并没有公开阿胶与新阿胶组合物在制备预防或治疗与血小板降低相关疾病的药物中的应用。
发明内容
为了解决上述问题,本申请提出了一种阿胶与新阿胶组合物在制备预防或治疗与血小板降低相关疾病的药物中的应用。
优选地,所述与血小板降低相关疾病为由于体内血小板降低而引起的相关疾病。
优选地,所述由于体内血小板降低而引起的相关疾病包括放化疗造成的血小板低下疾病。
优选地,放化疗造成的血小板低下疾病包括使用氯霉素或长春瑞滨造成的血小板低下疾病。
优选地,包括有效剂量的阿胶与新阿胶。
优选地,所述阿胶与所述新阿胶的重量比为1:10~10:1。
优选地,所述阿胶与所述新阿胶的重量比为1:1。
本发明的实验方法采用2dpf(day post fertilization)血小板转基因斑马鱼作为实验动物模型,研究阿胶与新阿胶组合物对血小板的影响。在本实验条件下,本申请中阿胶与新阿胶组合物对氯霉素、长春瑞滨诱导的斑马鱼血小板减少具有逆转作用,可以提高血小板的数目。经实验结果表明,阿胶与新阿胶组合物可用于制备临床预防或治疗与血小板降低相关疾病的药物;特别是可用于制备临床由于体内血小板降低而引起的相关疾病包括放化疗造成的血小板低下疾病的药物。
附图说明
此处所说明的附图用来提供对本申请的进一步理解,构成本申请的一部分,本申请的示意性实施例及其说明用于解释本申请,并不构成对本申请的不当限定。在附图中:
图1为实施例2的荧光显微图像,其中图A为对照组1的荧光显微图片、图B为对照组2的荧光显微图片、图C为实施例1的荧光显微图片、图D为实施例2的荧光显微图片、图E为实施例3的荧光显微图片、图F为对比例1的荧光显微图片;
图2为实施例3的荧光显微图像,其中图A为对照组1的荧光显微图片、图B为对照组2的荧光显微图片、图C为实施例1的荧光显微图片、图D为实施例2的荧光显微图片、图E为实施例3的荧光显微图片、图F为对比例1的荧光显微图片。
具体实施方式
实施例通过以下实验对阿胶与新阿胶组合物升高血小板的作用进行探究。
以下各实施例中所用到的实验仪器包括:SZX16型荧光显微镜及DP2-BSW图像采集系统(日本Olympus公司);X51型倒置显微镜(日本Olympus公司);Forma 3111型水套式CO2培养箱(美国Forma公司);斑马鱼养殖饲养设备(北京爱生科技公司)。
所用到的实验药品包括:阿胶与新阿胶均由福牌阿胶公司提供,氯霉素和长春瑞滨购自sigma公司。阿胶与新阿胶组合物先磨成粉末,然后用无菌水溶解;氯霉素和长春瑞滨用无菌水溶解。
所用到的实验动物包括:血小板和免疫细胞转基因斑马鱼为山东省科学院生物研究所斑马鱼药物筛选平台提供。
实施例1:阿胶与新阿胶组合物的耐受性实验
本实施例中的实验方法包括:斑马鱼受精卵发育至24hpf时,挑选发育正常的斑马鱼受精卵,移入6孔板中,每孔25条,设定若干实验组和对照组(胚胎培养用水),每个实验组设两个重复孔,随后于光照培养箱中恒温(28℃)孵育,连续给药3天,每24h换液一次,并记录各个时间点的存活率和孵化率。具体实施条件以及表征结果如下表1。
表1各个实施例中具体实施条件以及实验结果
通过上表1中的实验数据可知,阿胶与新阿胶组合物的水溶液处理斑马鱼幼鱼,2dpf时,各组存活率均在96%以上,未见有个体孵化出壳。3dpf时,阿胶组合物的作用浓度为100mg/L时,存活率下降至68%,而孵化率也为68%;阿胶组合物的作用浓度为200mg/L时,存活率下降至14%,而孵化率为30%;阿胶组合物的作用浓度为400和800mg/L时,分别有12%和8%的个体孵化出来,但这两组个体全部死亡,其余组存活率和孵化率均在92%以上。4dpf时,阿胶组合物的作用浓度为100mg/L时,存活率下降至66%,阿胶组合物的作用浓度为200mg/L全部死亡,而其余组存活率均在92%以上;孵化率无变化。综合以上结果,可以判断在制备与血小板降低相关疾病的药物中,阿胶与新阿胶的使用浓度可以参考使用的最高浓度为200mg/L。
从上表中实验数据可得到,阿胶与新阿胶的质量比范围为1:10~10:1,当阿胶与新阿胶的质量比为1:1时,处理斑马鱼幼鱼后孵化率和成活率最高。且将实施例5与对比例1以及对比例2相对比可知,利用新阿胶与阿胶组合物处理斑马鱼幼鱼后孵化率和成活率要优于仅使用新阿胶或仅使用阿胶处理斑马鱼幼鱼后孵化率和成活率。
实施例2:本实施例对阿胶与新阿胶组合物对氯霉素诱导的斑马鱼的血小板减少的逆转作用进行探究,具体实施条件以及表征结果如下表2:
实验方法包括:
(1)选择2dpf的血小板带有绿色荧光的转基因斑马鱼胚胎进行实验。
(2)施药:将孵化的转基因斑马鱼类胚胎放置在氯霉素(150μg/ml)和不同浓度的阿胶与新阿胶组合物溶液中进行处理24小时。每个实验组均包括12条仔鱼,各组设置3个平行孔。
(3)观察:阿胶与新阿胶组合物处理24小时后,观察斑马鱼幼鱼在荧光显微镜下绿色荧光细胞的数量,拍照、并进行统计学分析。
表2各个实施例中具体实施条件以及实验结果
通过上表2中的实验结果以及图1可知,试验对照组斑马鱼生存正常,150μg/ml的氯霉素的培养液中斑马鱼发育正常,血小板数目出现明显的减少。
阿胶与新阿胶组合物在10μg/ml对氯霉素造成的血小板减少没有明显的逆转作用,在达到50μg/ml以上是出现明显的促进血小板增殖的现象。在10-100μg/ml的浓度范围内随着浓度的增加斑马鱼血小板数目也随着增加,呈现良好递增关系。尤其当阿胶与新阿胶组合物的浓度为100μg/ml时,对氯霉素造成的血小板减少的逆转作用最佳。
阿胶与新阿胶质量比范围控制在1:10~10:1,尤其当阿胶与新阿胶质量比为1:1时,对氯霉素造成的血小板减少的逆转作用最佳。
将实施例3与对比例1和对比例2相比可知,使用阿胶与新阿胶组合物对氯霉素造成的免疫细胞数目下降的逆转作用要远远优于仅使用阿胶或仅使用新阿胶对氯霉素造成的血小板减少的逆转作用。
实施例3:阿胶与新阿胶组合物对长春瑞滨造成斑马鱼血小板降低的恢复作用,具体实施条件以及表征结果如下表3:
实验方法包括:
(1)选择2dpf的血小板带有绿色荧光的转基因斑马鱼胚胎进行实验。
(2)施药:将孵化的转基因斑马鱼类胚胎放置在长春瑞滨(100μg/ml)和不同浓度的阿胶与新阿胶组合物溶液中进行处理24小时。实每组实验中均包括12条仔鱼,各组设置3个平行孔。
(3)观察:阿胶与新阿胶组合物处理24小时后,观察斑马鱼幼鱼在荧光显微镜下绿色荧光细胞的数量,拍照、并进行统计学分析。
表3各个实施例中具体实施条件以及实验结果
通过上表3中的实验数据以及图2可知,试验对照组斑马鱼生存正常,100μg/mL的长春瑞滨给药组斑马鱼血小板数目明显减少。
阿胶与新阿胶组合物在10μg/ml浓度时对长春瑞滨造成血小板数目减少没有逆转作用,在达到50μg/ml以上是出现明显的促进血小板增殖的现象。在10-100μg/mL的浓度范围内随着浓度的增加斑马鱼血小板数目也随着增加,呈现递增关系,尤其当阿胶与新阿胶组合物的浓度为100μg/ml时,对长春瑞滨造成的血小板数目减少的逆转作用最佳。
阿胶与新阿胶质量比范围控制在1:10~10:1,尤其当阿胶与新阿胶质量比为1:1时,对长春瑞滨造成的血小板数目减少的逆转作用最佳。
将实施例3与对比例1和对比例2相比可知,使用阿胶与新阿胶组合物对长春瑞滨造成的血小板数目减少的逆转作用要远远优于仅使用阿胶或仅使用新阿胶对长春瑞滨造成的血小板数目减少的逆转作用。
综上表明,阿胶与新阿胶组合物可用于制备临床预防或治疗与血小板降低相关疾病的药物;特别是可用于制备临床由于体内血小板降低而引起的相关疾病包括放化疗造成的血小板低下疾病的药物。
本说明书中的各个实施例均采用递进的方式描述,各个实施例之间相同相似的部分互相参见即可,每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处。尤其,对于系统实施例而言,由于其基本相似于方法实施例,所以描述的比较简单,相关之处参见方法实施例的部分说明即可。
以上所述仅为本申请的实施例而已,并不用于限制本申请。对于本领域技术人员来说,本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原理之内所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本申请的权利要求范围之内。
Claims (7)
1.一种阿胶与新阿胶组合物在制备预防或治疗与血小板降低相关疾病的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述与血小板降低相关疾病为由于体内血小板降低而引起的相关疾病。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述由于体内血小板降低而引起的相关疾病包括放化疗造成的血小板低下疾病。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:放化疗造成的血小板低下疾病包括使用氯霉素或长春瑞滨造成的血小板低下疾病。
5.根据权利要求1-4任一所述的应用,其特征在于:包括有效剂量的阿胶与新阿胶。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于:所述阿胶与所述新阿胶的重量比为1:10~10:1。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于:所述阿胶与所述新阿胶的重量比为1:1。
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