CN110693915A - 一种阿胶与新阿胶组合物在制备预防或治疗与白细胞降低相关疾病的药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种阿胶与新阿胶组合物在制备预防或治疗与白细胞降低相关疾病的药物中的应用，通过大量实验发现阿胶与新阿胶组合物对氯霉素或长春瑞滨诱导的斑马鱼白细胞减少具有逆转作用，且阿胶与新阿胶组合物在一定的配比以及作用浓度下，对于白细胞减少的逆转作用要远远大于仅使用阿胶或仅适用新阿胶的作用。本申请中通过实验探究得到阿胶与新阿胶组合物可用于制备临床预防或治疗与白细胞降低相关疾病的药物，特别是可用于制备临床由于体内白细胞降低而引起的相关疾病包括放化疗造成的白细胞低下疾病的药物。
Description
技术领域
本申请涉及阿胶组合物的新用途，具体涉及一种阿胶与新阿胶组合物在制备预防或治疗与白细胞降低相关疾病的药物中的应用。
背景技术
肿瘤患者白细胞低大多是由于抗肿瘤治疗所致。接受化疗的患者常有白细胞降低的情况，这是因为化疗药物的化疗作用于白细胞生成和凋亡的不同环节，使白细胞减少。接受放疗的患者，电离辐射影响所有的骨髓成分，所以也会常见白细胞减低。而接受过多次放化疗后，骨髓储备功能差，更容易出现白细胞降低，甚至重度的白细胞降低。白细胞低于正常值时伤口出血风险升高，而降低到一定范围之下又会增加自发性出血的风险。白细胞降低既易并发出血，又限制化疗药物的应用剂量，更有严重情况会被迫推迟用药时间或中断治疗。
阿胶来源于马科动物驴Equus asinus L.的干燥皮或鲜皮经煎煮、浓缩制成的固体胶。具有补血滋阴、润燥、止血的功效。现代药理研究表明，阿胶具有补血、止血、增强免疫、抗辐射、抑制肿瘤、抗疲劳、预防骨质疏松、促进骨愈合等作用。
新阿胶来源于猪科动物家猪Sus domesticus.的干燥皮或鲜皮经煎煮、浓缩制成的固体胶，广泛应用于原发性血小板减少症、白血球减少、子宫功能性出血、肺结核咯血、衄血、再生障碍性贫血、月经量减少、月经不调、产前产后血虚及血虚引起的头晕、乏力、心悸等症。
现有技术中记载道阿胶有升高白细胞的作用，参照论文(颜磊,徐向平,黄胜,颜冬兰,秦雪梅,田俊生.驴胶补血颗粒升高白细胞作用及机制研究进展[J].中草药,2019,50(03):761-766.)，现有技术中也记载道新阿胶有升高白细胞的作用，参照论文(刘发生.利用斑马鱼模型研究新阿胶对化疗引起免疫与造血损伤的保护作用[D].山西医科大学,2018.)。但是在实际使用过程中会发现阿胶以及新阿胶的使用效果发挥有限，现有技术中并没有公开阿胶与新阿胶组合物在制备预防或治疗与白细胞降低相关疾病的药物中的应用。
发明内容
为了解决上述问题，本申请提出了一种阿胶与新阿胶组合物在制备预防或治疗与白细胞降低相关疾病的药物中的应用。
优选地，所述与白细胞降低相关疾病为由于体内白细胞降低而引起的相关疾病。
优选地，由于体内白细胞降低而引起的相关疾病包括放化疗造成的白细胞低下疾病。
优选地，放化疗造成的白细胞低下疾病包括使用氯霉素及长春瑞滨造成的白细胞低下疾病。
优选地，包括有效剂量的阿胶与新阿胶。
优选地，所述阿胶与所述新阿胶的重量比为1:10～10:1。
优选地，所述阿胶与所述新阿胶的重量比为1:1。
本发明通过大量实验发现，阿胶与新阿胶组合物对氯霉素或长春瑞滨诱导的斑马鱼白细胞减少具有逆转作用，且经过对比实验得到阿胶与新阿胶组合物在一定的配比以及作用浓度下，对于白细胞减少的逆转作用要远远大于仅使用阿胶或仅适用新阿胶的作用。本申请中通过实验探究得到阿胶与新阿胶组合物可用于制备临床预防或治疗与白细胞降低相关疾病的药物，特别是可用于制备临床由于体内白细胞降低而引起的相关疾病包括放化疗造成的白细胞低下疾病的药物。
附图说明
此处所说明的附图用来提供对本申请的进一步理解，构成本申请的一部分，本申请的示意性实施例及其说明用于解释本申请，并不构成对本申请的不当限定。在附图中：
图1为实施例2的荧光显微图像，其中图A为对照组1的荧光显微图片、图B为对照组2的荧光显微图片、图C为实施例1的荧光显微图片、图D为实施例2的荧光显微图片、图E为实施例3的荧光显微图片、图F为对比例1的荧光显微图片；
图2为实施例3的荧光显微图像，其中图A为对照组1的荧光显微图片、图B为对照组2的荧光显微图片、图C为实施例1的荧光显微图片、图D为实施例2的荧光显微图片、图E为实施例3的荧光显微图片、图F为对比例1的荧光显微图片。
具体实施方式
本申请具体实施方式中所用到的实验仪器包括：SZX16型荧光显微镜及DP2-BSW图像采集系统(日本Olympus公司)；X51型倒置显微镜(日本Olympus公司)；Forma 3111型水套式CO2培养箱(美国Forma公司)；斑马鱼养殖饲养设备(北京爱生科技公司)。
本申请中所用到的实验药品包括：阿胶与新阿胶组合物均由福牌阿胶公司提供，氯霉素和长春瑞滨购自sigma公司。
本申请中所用到的实验动物：白细胞和免疫细胞转基因斑马鱼为山东省科学院生物研究所斑马鱼药物筛选平台提供。
实施例1：阿胶与新阿胶组合物耐受性实验：
实验方法为：先将阿胶与新阿胶的组合物先磨成粉末，然后用无菌水溶解分别配制成不同的实验组浓度。当斑马鱼受精卵发育至24hpf时，挑选发育正常的斑马鱼受精卵，移入6孔板中，每孔加入受精卵25条，设定8组实验组浓度(μg/ml)：6.25、12.5、25、50、100、200、400、800和空白对照组(胚胎培养用水)，每个浓度组设两个重复孔，随后于光照培养箱中恒温(28℃)孵育，连续给药3天，每24h换液一次，并记录各个时间点的存活率和孵化率。
具体的实施条件如下：
表1各个实施例中具体实施条件以及实验结果
从上表1的实验结果可知，利用实施例1-12中的阿胶与新阿胶组合物的水溶液处理斑马鱼幼鱼，2dpf时，各组存活率均在96％以上，未见有个体孵化出壳。3dpf时，阿胶组合物的作用浓度为100mg/L时，存活率下降至68％，而孵化率也为68％；阿胶组合物的作用浓度为200mg/L时，存活率下降至14％，而孵化率为30％；阿胶组合物的作用浓度为400和800mg/L时，分别有12％和8％的个体孵化出来，但这两组个体全部死亡，其余组存活率和孵化率均在92％以上。4dpf时，阿胶组合物的作用浓度为100mg/L时，存活率下降至66％，阿胶组合物的作用浓度为200mg/L全部死亡，而其余组存活率均在92％以上；孵化率无变化。综合以上结果，可以判断在制备与白细胞降低相关疾病的药物中，阿胶与新阿胶的使用浓度可以参考使用的最高浓度为200mg/L。
从上表中实验数据可得到，阿胶与新阿胶的质量比范围为1:10～10:1，当阿胶与新阿胶的质量比为1:1时，处理斑马鱼幼鱼后孵化率和成活率最高。且将实施例5与对比例1以及对比例2相对比可知，利用新阿胶与阿胶组合物处理斑马鱼幼鱼后孵化率和成活率要优于仅使用新阿胶或仅使用阿胶处理斑马鱼幼鱼后孵化率和成活率。
实施例2：本实施例通过实验验证阿胶与新阿胶组合物对氯霉素诱导的斑马鱼的白细胞减少的逆转作用。
实验方法包括：
S1：选择2dpf的免疫细胞带有绿色荧光的转基因斑马鱼胚胎进行实验。
S2：施药：将孵化的转基因斑马鱼类胚胎放置在氯霉素和不同浓度的阿胶与新阿胶组合物溶液中进行处理24小时。每组实验中有12条仔鱼，各组设置3个平行孔。
S3：观察：阿胶与新阿胶组合物处理24小时后，观察斑马鱼幼鱼在荧光显微镜下绿色荧光细胞的数量，拍照、并进行统计学分析。
具体的实施条件如下：
表2各个实施例中具体实施条件以及实验结果
本实施例中将斑马鱼放置于阿胶与阿胶组合物的溶液中斑马鱼生存正常，150μg/ml的氯霉素给药组的培养液斑马鱼也正常，但是中性粒细胞出现明显的减少。
从表2中的实验结果可知，阿胶与新阿胶组合物在10μg/ml浓度下对氯霉素造成的免疫细胞数目下降不具有明显的逆转作用，达到50μg/ml以上是出现明显的促进中性粒细胞增殖的现象。在10-100μg/ml的浓度范围内随着浓度的增加斑马鱼中性粒细胞数目也随着增加，呈现良好递增关系，尤其当阿胶与新阿胶组合物的浓度为100μg/ml时，对氯霉素造成的免疫细胞数目下降的逆转作用最佳。
阿胶与新阿胶质量比范围控制在1:10～10:1，尤其当阿胶与新阿胶质量比为1:1时，对氯霉素造成的免疫细胞数目下降的逆转作用最佳。
将实施例3与对比例1和对比例2相比可知，使用阿胶与新阿胶组合物对氯霉素造成的免疫细胞数目下降的逆转作用要远远优于仅使用阿胶或仅使用新阿胶对氯霉素造成的免疫细胞数目下降的逆转作用。
实施例3：本实施例对阿胶与新阿胶组合物对长春瑞滨造成斑马鱼白细胞降低的恢复作用进行验证实验。
实验方法包括：
S1：选择2dpf的血小板带有绿色荧光的转基因斑马鱼胚胎进行实验。
S2：施药：将孵化的转基因斑马鱼类胚胎放置在长春瑞滨和不同浓度的阿胶与新阿胶组合物溶液中进行处理24小时。每组实验中进行实验的有12条仔鱼，各组设置3个平行孔。
S3：观察：阿胶与新阿胶组合物处理24小时后，观察斑马鱼幼鱼在荧光显微镜下绿色荧光细胞的数量，拍照、并进行统计。
具体的实施条件如下：
表3各个实施例中具体实施条件以及实验结果
本实施例中将斑马鱼放置于阿胶与阿胶组合物的溶液中斑马鱼生存正常，100μg/ml的长春瑞滨处理，斑马鱼免疫细胞(中性粒细胞和巨噬细胞)明显减少。
从上表3中可知，阿胶与新阿胶组合物在10μg/ml对长春瑞滨造成的免疫细胞数目减少没有明显的逆转作用，在达到50μg/ml以上是出现明显的促进中性粒细胞增殖的现象。在10-100μg/ml的浓度范围内随着浓度的增加斑马鱼中性粒细胞数目也随着增加，呈现良好递增关系，尤其当阿胶与新阿胶组合物的浓度为100μg/ml时，对长春瑞滨造成的免疫细胞数目下降的逆转作用最佳。
阿胶与新阿胶质量比范围控制在1:10～10:1，尤其当阿胶与新阿胶质量比为1:1时，对长春瑞滨造成的免疫细胞数目下降的逆转作用最佳。
将实施例3与对比例1和对比例2相比可知，使用阿胶与新阿胶组合物对长春瑞滨造成的免疫细胞数目下降的逆转作用要远远优于仅使用阿胶或仅使用新阿胶对长春瑞滨造成的免疫细胞数目下降的逆转作用。
综上表明，阿胶与新阿胶组合物可用于制备临床预防或治疗与白细胞降低相关疾病的药物；特别是可用于制备临床由于体内白细胞降低而引起的相关疾病包括放化疗造成的白细胞低下疾病的药物。
本说明书中的各个实施例均采用递进的方式描述，各个实施例之间相同相似的部分互相参见即可，每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处。尤其，对于系统实施例而言，由于其基本相似于方法实施例，所以描述的比较简单，相关之处参见方法实施例的部分说明即可。
以上所述仅为本申请的实施例而已，并不用于限制本申请。对于本领域技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原理之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的权利要求范围之内。
Claims (7)
1.一种阿胶与新阿胶组合物在制备预防或治疗与白细胞降低相关疾病的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述与白细胞降低相关疾病为由于体内白细胞降低而引起的相关疾病。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：由于体内白细胞降低而引起的相关疾病包括放化疗造成的白细胞低下的疾病。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：放化疗造成的白细胞低下的疾病包括使用氯霉素或长春瑞滨造成的白细胞低下的疾病。
5.根据权利要求1-4任一所述的应用，其特征在于：包括有效剂量的阿胶与新阿胶。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述阿胶与所述新阿胶的重量比为1:10～10:1。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述阿胶与所述新阿胶的重量比为1:1。
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| CN113583941A (zh) * | 2021-06-23 | 2021-11-02 | 北京中医药大学 | 一种补气养血活性评价模型的建立方法 |
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| US20160008416A1 (en) * | 2013-07-26 | 2016-01-14 | Huihong Qiao | Formulations for preventing and treating decreasing platelet cell counts |
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