CN110711276B - 一种稳定吸附剂吸附性能的保存液 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种稳定吸附剂吸附性能的保存液,所述吸附剂包括微球和接枝在微球表面的配基,所述保存液包括与接枝在微球表面一致的游离配基、稳定剂和基础液,所述稳定剂为右旋糖酐及其衍生物中的一种或多种,所述基础液为缓冲液或生理盐水。该保存液能够使多种吸附剂在高压蒸汽灭菌过程和加速老化过程中的吸附性能下降率明显降低,具有稳定吸附性能的作用。
Description
技术领域
本发明属于吸附剂领域,具体涉及一种稳定吸附剂吸附性能的保存液。
背景技术
血液吸附是指:将患者血液引流出体外,经过吸附剂的吸附作用清除各种致病因子,达到血液净化的一种治疗方法。血液吸附作为一种新兴的治疗手段,其技术核心在于吸附剂的吸附性能,
吸附柱通常由吸附剂、保存液和柱体材料组成,其中,吸附剂是核心材料,吸附剂一般由载体和配基组成,配基作为吸附剂的活性分子起到吸附作用,柱体材料主要用于形成无菌的密封环境,可保证吸附柱内部环境无菌,保存液主要用于在规定的有效期内保持吸附剂的有效性。
在实际生产过程中,由于吸附柱与人体血液直接接触,需要保证吸附柱无菌,因此对吸附柱进行灭菌操作是必不可少的步骤。然而,在采用高压蒸汽灭菌时,吸附剂的吸附性能有明显的降低,致使吸附柱的实际吸附效率降低;同时,吸附柱在有效期内的吸附性能一般是呈缓慢下降的趋势,因此,保存液在这两个过程中对吸附剂吸附效率的稳定作用能够保持产品的有效性。
发明内容
针对现有技术中的问题,本发明提供了一种稳定吸附剂吸附性能的保存液,该保存液能够在高压蒸汽灭菌过程和加速老化过程中稳定吸附剂的吸附性能,降低吸附性能的下降率。
一种用于稳定吸附剂吸附性能的保存液,所述吸附剂包括微球和接枝在微球表面的配基,所述保存液包括与接枝在微球表面一致的游离配基、稳定剂和基础液,所述稳定剂为右旋糖酐及其衍生物中的一种或多种,所述基础液为缓冲液或生理盐水,所述配基为聚阴离子化合物、酸性多糖或多肽抗生素中的一种。
优选的,所述保存液中配基、稳定剂和基础液的质量体积比为0.01~2.0g:0.02~2.5g:100mL。
更加优选的,所述保存液中配基、稳定剂和基础液的质量体积比为0.1~1.0g:0.02~2.5g:100mL。
优选的,所述稳定剂为右旋糖酐40和右旋糖酐70中的一种或两种。
优选的,所述缓冲液为柠檬酸钠缓冲液或磷酸盐缓冲液,所述基础液的pH值为5.0~7.5。
与现有技术相比,本发明的有益效果为:
1、在保存液中加入与吸附剂中一致的游离配基,能够有效抑制吸附剂上的配基分子在高压蒸汽灭菌过程和加速老化过程中的脱落或水解等,从而保证了载体上偶联的配基分子量和配基的活性,具有稳定吸附剂吸附性能的效果。
2、采用右旋糖酐及其衍生物中的一种或多种作为保存液中的组分,能够使吸附剂在高压蒸汽灭菌过程和加速老化过程中的吸附性能下降率明显降低,具有稳定吸附性能的效果。
具体实施方式
下面将结合本发明中的实施例,对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例,以下实施例是为了更好地说明阐述本发明的内容。
下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。本申请中的微球采用市售,如琼脂糖微球,壳聚糖微球等,市售产品均可。
实施例1
一种用于稳定吸附剂吸附性能的保存液,由聚丙烯酸、右旋糖酐40和磷酸盐缓冲液组成,其中,聚丙烯酸、右旋糖酐40和磷酸盐缓冲液的质量体积比为0.5g:0.8g:100mL,磷酸盐缓冲液的pH值为6.5。
吸附剂为配基是聚丙烯酸的低密度脂蛋白吸附剂,将同一批吸附剂用上述填充液浸泡、分装、密封后,采用高压蒸汽灭菌,加严的灭菌条件为121℃、1h。取灭菌前后的吸附剂,水洗抽干后,测定其吸附性能。将未开封的灭菌吸附剂置于温度为60±2℃,湿度为75±5%的条件下放置,进行加速老化试验,第65天时取样,与实时老化24个月的有效期等效,将吸附剂水洗抽干后,测定其吸附性能。
吸附剂的吸附性能检测方法具体为:称取经抽干的吸附剂0.50g于10ml离心管或三角瓶中,加入血浆2.5ml,置于恒温37℃摇床上、120rpm震荡2h,3000r/min离心5min,吸取上清液待测;用低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒和全自动生化分析仪测定吸附前、后血浆中的低密度脂蛋白(LDL-C)含量;吸附剂对低密度脂蛋白的吸附量通过以下方程计算:
AC=(Cb-Ca)×V/M
式中:AC——adsorbing capacity,吸附量;Cb——吸附前血浆中低密度脂蛋白胆固醇含量,单位为毫摩尔每升(mmol/L)或毫克每分升(mg/dl);Ca——吸附2h后血浆中低密度脂蛋白胆固醇含量,单位为毫摩尔每升(mmol/L)或毫克每分升(mg/dl);V——吸附用血浆体积,单位为ml;M——吸附剂重量,单位为g。
实施例2
一种用于稳定吸附剂吸附性能的保存液,由多黏菌素B、右旋糖酐40和磷酸盐缓冲液组成,其中,多黏菌素B、右旋糖酐40和磷酸盐缓冲液的质量体积比为0.5g:0.8g:100mL,磷酸盐缓冲液的pH值为6.5。
选择的吸附剂为配基是多黏菌素B的内毒素吸附剂,将同一批吸附剂用上述填充液浸泡、分装、密封后,采用高压蒸汽灭菌,加严的灭菌条件为121℃、1h。取灭菌前后的吸附剂,水洗抽干后,取0.50g于10ml离心管或三角瓶中,加入含10EU/ml内毒素的血浆5ml,,置于恒温37℃摇床上、120rpm震荡2h,3000r/min离心5min,吸取上清液用显色基质鲎试剂法检测其内毒素浓度,计算其吸附性能,计算方式同实施例1一致。将未开封的灭菌吸附剂置于温度为60±2℃,湿度为75±5%的条件下放置,进行加速老化试验,第65天时取样,与实时老化24个月的有效期等效,将吸附剂水洗抽干后,按上述相同操作测定其吸附性能。
实施例3
一种用于稳定吸附剂吸附性能的保存液,由硫酸葡聚糖、右旋糖酐40和磷酸盐缓冲液组成,其中,硫酸葡聚糖、右旋糖酐40和磷酸盐缓冲液的质量体积比为0.5g:0.8g:100mL,磷酸盐缓冲液的pH值为6.5。
选择的吸附剂为配基是硫酸葡聚糖的低密度脂蛋白吸附剂,采用与实施例1一致的高压灭菌方法和老化方法,并测定相应处理后吸附剂的吸附性能。
实施例4
一种用于稳定吸附剂吸附性能的保存液,由聚丙烯酸、右旋糖酐70和磷酸盐缓冲液组成,其中,聚丙烯酸、右旋糖酐70和磷酸盐缓冲液的质量体积比为0.5g:0.8g:100mL,磷酸盐缓冲液的pH值为6.5。
选择的吸附剂为配基是聚丙烯酸的低密度脂蛋白吸附剂,采用与实施例1一致的高压灭菌方法和老化方法,并测定相应处理后吸附剂的吸附性能。
实施例5
一种用于稳定吸附剂吸附性能的保存液,由聚丙烯酸、右旋糖酐40、右旋糖酐70和磷酸盐缓冲液组成,其中,聚丙烯酸、右旋糖酐40、右旋糖酐70和磷酸盐缓冲液的质量体积比为0.5g:0.4g:0.4g:100mL,磷酸盐缓冲液的pH值为6.5。
选择的吸附剂为配基是聚丙烯酸的低密度脂蛋白吸附剂,采用与实施例1一致的高压灭菌方法和老化方法,并测定相应处理后吸附剂的吸附性能。
实施例6
一种用于稳定吸附剂吸附性能的保存液,由聚丙烯酸、右旋糖酐20和磷酸盐缓冲液组成,其中,聚丙烯酸、右旋糖酐20和磷酸盐缓冲液的质量体积比为0.5g:0.8g:100mL,磷酸盐缓冲液的pH值为6.5。
选择的吸附剂为配基是聚丙烯酸的低密度脂蛋白吸附剂,采用与实施例1一致的高压灭菌方法和老化方法,并测定相应处理后吸附剂的吸附性能。
实施例7
一种用于稳定吸附剂吸附性能的保存液,由聚丙烯酸、右旋糖酐铁和磷酸盐缓冲液组成,其中,聚丙烯酸、右旋糖酐20和磷酸盐缓冲液的质量体积比为2g:0.8g:100mL,磷酸盐缓冲液的pH值为6.5。
选择的吸附剂为配基是聚丙烯酸的低密度脂蛋白吸附剂,采用与实施例1一致的高压灭菌方法和老化方法,并测定相应处理后吸附剂的吸附性能。
实施例8
一种用于稳定吸附剂吸附性能的保存液,由聚丙烯酸、右旋糖酐40和柠檬酸钠缓冲液组成,其中,聚丙烯酸和磷酸盐缓冲液的质量体积比为0.01g:0.8g:100mL,磷酸盐缓冲液的pH值为6.5。
选择的吸附剂为配基是聚丙烯酸的低密度脂蛋白吸附剂,采用与实施例1一致的高压灭菌方法和老化方法,并测定相应处理后吸附剂的吸附性能。
实施例9
一种用于稳定吸附剂吸附性能的保存液,由聚丙烯酸、右旋糖酐40和柠檬酸钠缓冲液组成,其中,聚丙烯酸、右旋糖酐40和磷酸盐缓冲液的质量体积比为1g:0.02g:100mL,磷酸盐缓冲液的pH值为6.5。
选择的吸附剂为配基是聚丙烯酸的低密度脂蛋白吸附剂,采用与实施例1一致的高压灭菌方法和老化方法,并测定相应处理后吸附剂的吸附性能。
实施例10
一种用于稳定吸附剂吸附性能的保存液,由聚丙烯酸、右旋糖酐40和生理盐水组成,其中,聚丙烯酸、右旋糖酐40和磷酸盐缓冲液的质量体积比为0.1g:2.5g:100mL,生理盐水的pH值为6.5。
选择的吸附剂为配基是聚丙烯酸的低密度脂蛋白吸附剂,采用与实施例1一致的高压灭菌方法和老化方法,并测定相应处理后吸附剂的吸附性能。
对比例1
一种吸附剂保存液,由聚丙烯酸和磷酸盐缓冲液组成,其中,聚丙烯酸和磷酸盐缓冲液的质量体积比为0.5g:100mL,磷酸盐缓冲液的pH值为6.5。
选择的吸附剂为配基是聚丙烯酸的低密度脂蛋白吸附剂,采用与实施例1一致的高压灭菌方法和老化方法,并测定相应处理后吸附剂的吸附性能。
对比例2
一种吸附剂保存液,由右旋糖酐40和磷酸盐缓冲液组成,其中,右旋糖酐40和磷酸盐缓冲液的质量体积比为0.8g:100mL,磷酸盐缓冲液的pH值为6.5。
选择的吸附剂为配基是聚丙烯酸的低密度脂蛋白吸附剂,采用与实施例1一致的高压灭菌方法和老化方法,并测定相应处理后吸附剂的吸附性能。
对比例3
一种吸附剂保存液,为磷酸盐缓冲液,其pH值为6.5。
选择的吸附剂为配基是聚丙烯酸的低密度脂蛋白吸附剂,采用与实施例1一致的高压灭菌方法和老化方法,并测定相应处理后吸附剂的吸附性能。
对比例4
一种吸附剂保存液,由多黏菌素B和磷酸盐缓冲液组成,其中,多黏菌素B和磷酸盐缓冲液的质量体积比为0.5g:100mL,磷酸盐缓冲液的pH值为6.5。
选择的吸附剂为配基是多黏菌素B的内毒素吸附剂,采用与实施例3一致的高压灭菌方法和老化方法,并测定相应处理后吸附剂的吸附性能。
对比例5
一种吸附剂保存液,由右旋糖酐40和磷酸盐缓冲液组成,其中,右旋糖酐40和磷酸盐缓冲液的质量体积比为0.8g:100mL,磷酸盐缓冲液的pH值为6.5。
选择的吸附剂为配基是多黏菌素B的内毒素吸附剂,采用与实施例3一致的高压灭菌方法和老化方法,并测定相应处理后吸附剂的吸附性能。
对比例6
一种吸附剂保存液,为磷酸盐缓冲液,其pH值为6.5。
选择的吸附剂为配基是多黏菌素B的内毒素吸附剂,采用与实施例3一致的高压灭菌方法和老化方法,并测定相应处理后吸附剂的吸附性能。
对比例7一种用于稳定吸附剂吸附性能的保存液,由硫酸葡聚糖和磷酸盐缓冲液组成,其中,硫酸葡聚糖和磷酸盐缓冲液的质量体积比为0.5g:100mL,磷酸盐缓冲液的pH值为6.5。
选择的吸附剂为配基是硫酸葡聚糖的低密度脂蛋白吸附剂,采用与实施例1一致的高压灭菌方法和老化方法,并测定相应处理后吸附剂的吸附性能。
对比例8
一种用于稳定吸附剂吸附性能的保存液,由右旋糖酐40和磷酸盐缓冲液组成,其中,右旋糖酐40和磷酸盐缓冲液的质量体积比为0.8g:100mL,磷酸盐缓冲液的pH值为6.5。
选择的吸附剂为配基是硫酸葡聚糖的低密度脂蛋白吸附剂,采用与实施例1一致的高压灭菌方法和老化方法,并测定相应处理后吸附剂的吸附性能。
对比例9
一种吸附剂保存液,为磷酸盐缓冲液,其pH值为6.5。
选择的吸附剂为配基是硫酸葡聚糖的低密度脂蛋白吸附剂,采用与实施例1一致的高压灭菌方法和老化方法,并测定相应处理后吸附剂的吸附性能。
实验结果分析:
将实施例2和对比例4~6中的吸附剂进行灭菌前后的吸附性能对比,结果见表1;将实施例2和对比例4~6中的吸附剂进行加速老化前后的吸附性能对比,结果见表2;空白对照1为灭菌前的配基是多黏菌素B的内毒素吸附剂;每组实验重复3次,取平均值。
表1不同保存液的内毒素吸附剂灭菌前后的吸附性能对比
由表1可以看出,实施例2的保存液效果最好,吸附剂在灭菌前后的吸附性能基本没有变化,对比例4中的吸附剂灭菌前后的吸附性能变化率为4.6%,对比例5中的吸附剂灭菌前后的吸附性能变化率为4.9%,而对比例6中的吸附剂灭菌前后的吸附性能变化率达13.9%,说明该保存液中的配基和稳定剂都能够在灭菌条件下对该内毒素吸附剂起到保护作用,但是效果要差于二者的配合使用。
表2不同保存液的内毒素吸附剂加速老化前后的吸附性能对比
表2的结果与表1的结果基本一致,说明实施例2中的保存液在加速老化过程中同样能够稳定内毒素吸附剂的吸附性能。
将实施例1、实施例3分别和对比例1~3、对比例7~9中的吸附剂进行灭菌前后的吸附性能对比,结果见表3;将实施例1、实施例3分别和对比例1~3、对比例7~9中的吸附剂进行加速老化前后的吸附性能对比,结果见表4;其中,空白对照2为灭菌前的配基是聚丙烯酸的低密度脂蛋白吸附剂,空白对照3为灭菌前的配基是硫酸葡聚糖的低密度脂蛋白吸附剂;每组实验重复3次,取平均值。
表3不同填充液的低密度脂蛋白吸附剂灭菌前后的吸附性能对比
由表3可以看出,实施例1中的吸附剂灭菌前后的吸附性能基本没有变化,对比例1中的吸附剂灭菌前后的吸附性能变化率为5.7%,对比例2中的吸附剂灭菌前后的吸附性能变化率为4.6%,而对比例1中的吸附剂灭菌前后的吸附性能变化率达19.9%,说明该保存液能够在灭菌条件下对配基是聚丙烯酸的低密度脂蛋白吸附剂起到保护作用。实施例3中的吸附剂灭菌前后的吸附性能基本没有变化,对比例7中的吸附剂灭菌前后的吸附性能变化率为2.4%,对比例8中的吸附剂灭菌前后的吸附性能变化率为1.0%,而对比例9中的吸附剂灭菌前后的吸附性能变化率达20.6%,说明该保存液能够在灭菌条件下对配基是硫酸葡聚糖的低密度脂蛋白吸附剂起到保护作用。
表4的结果与表3的结果基本一致,说明本发明所提供的保存液能够在加速老化过程中稳定配基是聚丙烯酸或硫酸葡聚糖的低密度脂蛋白吸附剂的吸附性能;而对比例2与实施例1、对比例1的对比可以看出,在加速老化过程中,实施例1中的保存液的效果明显更好;而对比例8与实施例3、对比例7的差距并不明显,推测原因在于硫酸葡聚糖是右旋糖酐的衍生物,在保存过程中对硫酸葡聚糖的水解等有抑制作用。
表4不同保存液的低密度脂蛋白吸附剂加速老化前后的吸附性能对比
将实施例1和实施例3~10中的吸附剂进行灭菌前后的吸附性能对比,结果见表5;每组实验重复3次,取平均值。
表5不同配比保存液的低密度脂蛋白吸附剂灭菌前后的吸附性能对比
由表5可以看出,稳定剂为右旋糖酐40和右旋糖酐70中的一种或两种时最佳;稳定剂的加入量与缓冲液基础液的质量体积比为0.02~2.5g:100mL时效果较好;而配基的加入量与缓冲液的质量体积比为0.1~1.0g:100mL时效果较好,以0.5g:100mL时效果最好。
通过以上结果分析,可以证明保存液中的配基和稳定剂都可以单独缓解高压蒸汽灭菌过程和加速老化过程中吸附性能下降的问题。配基能够实现的原因推测为:抑制吸附剂上的配基分子在高压蒸汽灭菌过程和加速老化过程中的脱落或水解等,从而保证了载体上偶联的配基分子量和配基的活性,具有稳定吸附剂吸附性能的效果。稳定剂能够实现的原因推测为:右旋糖酐作为保存液中的组分时使保存液具有一定粘性,所以在吸附剂表面形成一层保护膜,减少了吸附剂配基分子由于高温高压或长时间保存而脱落或解聚等情况,从而起到稳定吸附性能的作用。而且,通过对实验结果的分析可发现,仅包含稳定剂的保存液在高温灭菌过程中对吸附剂的稳定效果较好,在老化过程中的效果比较差。同时包含稳定剂和配基的保存液的效果相比仅包含稳定剂或配基的保存液有了很大的提高。另外通过实施例3和对比例7~8的结果可知,稳定剂和配基同时使用时,其效果不仅是二者单独作用简单的叠加,还具有协同作用,极大的改进了保存液的效果,使得保存液在两个过程中均能起到很好的稳定作用。推测其具体的原因为:单独的配基在保存液中长期保存会发生水解等作用,而加入稳定剂后能够起到稳定保存液中配基的作用,进而起到稳定吸附剂上配基的作用。
综上所述,本发明提供的保存液具有稳定吸附剂吸附性能的效果,可降低吸附剂在灭菌前后和加速老化过程中的吸附性能变化率,而且适用于多种吸附剂。
本领域相关的技术人员可以借助实施例更好地理解和掌握本发明。但是,本发明的保护和权利要求范围不限于所提供的案例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动条件下所获得的所有其它实施例,都属于本发明保护的范围。
Claims (7)
1.一种用于稳定吸附剂吸附性能的保存液,所述吸附剂包括微球和接枝在微球表面的配基,其特征在于,所述保存液包括与接枝在微球表面一致的游离配基、稳定剂和基础液,所述稳定剂为右旋糖酐及其衍生物中的一种或多种,所述基础液为生理盐水或缓冲液。
2.根据权利要求1所述的一种用于稳定吸附剂吸附性能的保存液,其特征在于,所述保存液中配基、稳定剂和基础液的质量体积比为0.01~2.0g:0.02~2.5g:100mL。
3.根据权利要求2所述的一种用于稳定吸附剂吸附性能的保存液,其特征在于,所述保存液中配基、稳定剂和基础液的质量体积比为0.1~1.0g:0.02~2.5g:100mL。
4.根据权利要求1所述的一种用于稳定吸附剂吸附性能的保存液,其特征在于,所述配基为聚阴离子化合物、酸性多糖或多肽抗生素中的一种。
5.根据权利要求1所述的一种用于稳定吸附剂吸附性能的保存液,其特征在于,所述稳定剂为右旋糖酐40和右旋糖酐70中的一种或两种。
6.根据权利要求1所述的一种用于稳定吸附剂吸附性能的保存液,其特征在于,所述缓冲液为柠檬酸钠缓冲液或磷酸盐缓冲液。
7.根据权利要求1所述的一种用于稳定吸附剂吸附性能的保存液,其特征在于,所述基础液的pH为5.0~7.5。
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