CN110711150A - 一种多肽脂质体的制备方法及其应用 - Google Patents

一种多肽脂质体的制备方法及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种多肽脂质体的制备方法及其应用，包括：分别称取重量比为6.5～7:1.6～2:0.5～1的氢化卵磷脂、胆固醇和椰油基‑磺基甜菜碱，以及重量组份为0.5～1.5份的维生素E，溶于氯仿溶液中，再在室温下将氯仿溶液蒸发完全，得到空白脂质体薄膜，干燥；将干燥的空白脂质体薄膜溶于去离子水，得到水溶液，过滤，得到空白脂质体溶液；将多肽物质缓慢加入空白脂质体溶液中，室温轻微搅拌，孵育20～40min，过滤，得到脂质体过滤液；往脂质体过滤液中加入重量组份为0.5～4份的海藻糖，冷冻干燥，即得多肽脂质体。所述制备方法采用脂质体对多肽物质进行包封，制得的多肽脂质体稳定性好，保湿效果佳。

Description

一种多肽脂质体的制备方法及其应用
技术领域
本发明涉及脂质体制备技术领域，具体涉及一种多肽脂质体的制备方法及其应用。
背景技术
随着年龄的增长，在各种因素作用下(例如，地心引力的不断下拉、面部皮肤的频繁和持续的位置压力(如在睡眠期间)或面部表情肌肉收缩引起的重复面部运动等)，面部皮肤开始老化，变得松弛、变薄、失去光泽、含水量降低以及失去弹性等。面部皮肤老化与胶原蛋白三螺旋结构的改变、弹性蛋白多肽的降解以及皮肤脂质基质的排列紊乱等直接相关。因此，当面部表情肌肉松弛后，面部皮肤不能很快复原，久之则皱纹增多并加深。
其中，面部皮肤由表皮层和真皮层组成，面部皮肤的深层是皮下组织。表皮层由表皮细胞组成，无血管，表皮细胞主要是由角质形成细胞，表皮层又可区分为角质层、透明层、颗粒层、棘细胞层和脂质基底层。但由于表皮层本身无血管，营养仅靠从真皮层渗透而来，显然营养来源受到一定限制。加之表皮层受外界刺激损害多，更需要保护和营养。然而，目前多数的护肤品在渗入表皮层之前，不可避免地需要与外部环境接触，性能不稳定，护肤效果不理想。
发明内容
本发明提供一种多肽脂质体的制备方法，所述制备方法采用氢化卵磷脂和胆固醇等脂质体对多肽物质进行包封，制得的多肽脂质体稳定性好，保湿效果佳。
本发明还提供了一种所述制备方法制得的多肽脂质体在护肤品中的应用。
为了解决上述问题，本发明公开了一种多肽脂质体的制备方法，具体包括如下步骤：
S1分别称取重量比为6.5～7:1.6～2:0.5～1的氢化卵磷脂、胆固醇和椰油基-磺基甜菜碱，以及重量组份为0.5～1.5份的维生素E，溶于氯仿溶液中，再在室温下将氯仿溶液蒸发完全，得到空白脂质体薄膜，干燥；
S2将步骤S1中干燥的空白脂质体薄膜溶于去离子水，得到水溶液，过滤，得到空白脂质体溶液；
S3将多肽物质缓慢加入步骤S2的空白脂质体溶液中，室温轻微搅拌，孵育20～40min，过滤，得到脂质体过滤液；
S4往步骤S3的脂质体过滤液中加入重量组份为0.5～4份的海藻糖，冷冻干燥，即得多肽脂质体。
本发明所述多肽脂质体是以多肽物质为美容活性物质，以氢化卵磷脂和胆固醇等脂质体作为多肽物质的载体、以维生素E为抗氧化剂，以海藻糖作为赋形剂制备而成，其中，还采用了刺激性小、增稠性好的椰油基-磺基甜菜碱，制备得到的所述多肽脂质体包含了如三肽-1、棕榈酰三肽-5、棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4和六肽-9等多种多肽物质，多肽物质经脂质体包封后，其透皮吸收率得到提高，其抗皱和保湿效果显著，作用时间延长。
其中，为了能更好地发挥出多肽物质的保湿等活性作用，本发明采用脂质体(如氢化卵磷脂和胆固醇等)对多肽物质进行包封，能够将多肽物质与外部环境隔离，保护多肽物，从而提高多肽物质的稳定性。
而且，本发明所述制备方法制得的多肽脂质体具有普通护肤品不可比拟的效果，可以直接为表皮细胞提供营养和补充细胞间质，使被脂质体包封的多肽物质在与皮肤接触的过程中浓度不断被提高，让多肽物质更加充分的作用于表皮细胞，增加肌肤的水分和弹性等，并维持表皮肌肤不受刺激和损伤。将所述多肽脂质体应用在化妆品、护肤品中，能增加化妆品、护肤品的保湿和抗皱性能。
此外，本发明将多种多肽物质加入氢化卵磷脂和胆固醇等脂质体物质中制成多肽脂质体，将经多肽脂质体包封后的多肽物质应用于护肤品中，还能促使多肽物质快速渗入皮肤深层，经皮肤深层吸收后可以很好的发挥其抗皱纹和保湿的作用，能刺激皮肤真皮层中胶原蛋白以及纤维蛋白和透明质酸的合成，并减少水分的蒸发，从而达到保湿、抗皱、增加皮肤弹性的效果。
优选地，所述步骤S1中，溶于所述氯仿溶液之后，还包括采用30％的输入功率对所述氯仿溶液进行8～10min超声处理的步骤。
优选地，所述步骤S1中，氢化卵磷脂、胆固醇、椰油基-磺基甜菜碱和维生素E与氯仿的固液比为6.8g:1.8g:0.8g:1g:200ml；
将所述空白脂质体薄膜置于真空干燥箱中干燥3～5h。
优选地，所述步骤S2中，去离子水与步骤S1中氯仿的体积比为2:1；
溶于去离子水之后，还包括采用20％的输入功率对步骤S1中干燥的空白脂质体薄膜进行8～10min超声处理的步骤。
优选地，所述步骤S2、S3中，采用聚碳酸酯膜进行过滤。
进一步优选地，所述步骤S2、S3中，过滤时，将滤液挤压依次通过0.6μm、 0.45μm和0.22μm的聚碳酸酯膜。
优选地，所述步骤S3中，所述多肽物质为三肽-1、棕榈酰三肽-5、棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4、六肽-9中的一种或多种。
其中，三肽-1，具有较强的抗氧化性，对胶原蛋白、弹性蛋白、透明质酸等的生成有促进作用，有抗衰抗皱活肤功能。此外，三肽-1对粘连蛋白生成有促进作用，可作为组织重塑的激活剂，促进伤疤外部大量胶原蛋白集聚物的降解，具有伤口修复功能。使肌肤变得紧致、淡化皱纹。
棕榈酰三肽-5是应用最广泛的美容短肽，又称为“胶原肽”。棕榈酰三肽-5作为一种信号类胜肽，能通过增加基质细胞活动来促进胶原蛋白的合成和胞外基质弹性蛋白的生成，提升面部弹性、减少和淡化皱纹，同时它还能增强细胞活性，提升肌肤含水量，使肌肤变得年轻。
棕榈酰四肽-7又称为棕榈酰四肽-3，是免疫球蛋白G(Immunoglobulin G，IgG)中的活性片段，能显著降低细胞炎症过程中的炎症因子白介素6(简称IL-6)的水平，尤其是在紫外线(Ultraviolet radiation，UV)受损细胞中这种降低作用更为明显。得益于其显著的炎症相关因子抑制作用，棕榈酰四肽-7还能显著消除皮肤炎症，减轻炎症对皮肤皱纹的加深，恢复肌肤活力状态。
棕榈酰五肽-4是类似I型胶原蛋白前体序列片段的短肽，它能刺激细胞外基质(Extracellular matrix，ECM)中成纤维细胞的生长，从而刺激皮肤真皮层中胶原蛋白以及纤维蛋白和透明质酸的合成，并形成纤维连接蛋白(Fn) 和糖胺聚糖(Gag)。临床测试表明，棕榈酰五肽-4能改善深度的皱纹和密集度高的皱纹。
六肽-9又称“可丽肽”，是一种非常稳定的胶原蛋白肽。这种肽的结构在人体的两种关键寂寞胶原蛋白的结构中同时存在。六肽-9能促进多种胶原蛋白和粘连蛋白的合成，促进表皮细胞的分化和成熟，加快皮肤再生，从而能加快伤口恢复和组织更新重建，进一步减少和淡化皱纹。
进一步优选地，所述步骤S3中，所述多肽物质分别占多肽脂质体的重量组份为0.2～1.5份三肽-1、0.1～2份棕榈酰三肽-5、0.1～1份棕榈酰四肽 -7、0.2～2份棕榈酰五肽-4和0.2～1份六肽-9。
发明人意外发现，本发明中所述三肽-1、棕榈酰三肽-5、棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4和六肽-9能够产生协同作用，充分发挥各种多肽物质的功效，加速胶原蛋白的产生，帮助皮肤快速恢复弹性，增强肌肤光泽，显著减少和淡化皱纹；而且，所述三肽-1、棕榈酰三肽-5、棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽 -4和六肽-9协同作用，能使所得的多肽脂质体的稳定性更好、其保湿和抗皱效果更佳。
本发明中，所述多肽物质的结构如下：
三肽-1：Gly-His-Lys-OH；棕榈酰三肽-5：Pal(棕榈酸)-Lys-Val-Lys-OH；棕榈酰四肽-7：Pal(棕榈酸)-Gly-Gln-Pro-Arg-OH；棕榈酰五肽-4：Pal(棕榈酸)-Lys-Thr-Thr-Lys-Ser-OH；六肽-9：H-Gly-Pro-Gln-Gly-Pro-Gln-OH。
优选地，所述步骤S4中，海藻糖与多肽物质的质量比为0.5～2:1；
加入海藻糖后，先在-30～-50℃下预冻1～3h，再在抽真空条件下冷冻干燥20～48h，并于2～7℃下保存，即得多肽脂质体；所述多肽脂质体的粒径为100～210nm。
其中，本发明所述多肽脂质体的粒径进一步优选为150nm。
本发明还公开了一种所述制备方法制得的多肽脂质体在护肤品中的应用。
将所述制备方法制得的多肽脂质体应用到化妆品、护肤品中，多肽脂质体的透皮吸收率得到提高，抗皱和保湿效果显著，作用时间延长。
与现有技术相比，本发明包括以下优点：
1、本发明所述多肽脂质体是以多肽物质为美容活性物质，以氢化卵磷脂和胆固醇等脂质体作为多肽物质的载体、以维生素E为抗氧化剂，以海藻糖作为赋形剂制备而成，其中，还采用了刺激性小、增稠性好的椰油基-磺基甜菜碱，制备得到的所述多肽脂质体包含了如三肽-1、棕榈酰三肽-5、棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4和六肽-9等多种多肽物质，多肽物质经脂质体包封后，其透皮吸收率得到提高，其抗皱和保湿效果显著，作用时间延长。
2、本发明采用脂质体(如氢化卵磷脂和胆固醇等)对多肽物质进行包封，能够将多肽物质与外部环境隔离，保护多肽物，从而提高多肽物质的稳定性。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
采用本发明实施例1～3所述制备方法制得的多肽脂质体的各组份及含量如表1所示(其中，去离子水与氯仿的体积比为2:1)：
表1
Figure RE-GDA0002310023030000051
Figure RE-GDA0002310023030000061
实施例1
本发明实施例公开了一种多肽脂质体的制备方法，具体包括如下步骤 (各组成及含量参见表1)：
S1取氢化卵磷脂、胆固醇、椰油基-磺基甜菜碱和维生素E，溶于氯仿溶液中，在输入功率为30％下超声处理8～10min，随后在室温下将氯仿溶液蒸发完全，得到空白脂质体薄膜并将其置于真空干燥箱中干燥3h；
S2取去离子水溶解步骤S1中干燥的空白脂质体薄膜，得到水溶液，并将水溶液在输入功率为20％下超声处理8～10min，将水溶液挤压依次通过 0.6μm、0.45μm和0.22μm的聚碳酸酯膜进行过滤，得到空白脂质体溶液；
S3依次将三肽-1、棕榈酰三肽-5、棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4和六肽 -9缓慢加至步骤S2的空白脂质体溶液中，室温轻微搅拌，孵育20min，再挤压依次通过0.6μm、0.45μm和0.22μm的聚碳酸酯膜，得到包含三肽-1、棕榈酰三肽-5、棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4和六肽-9的脂质体过滤液；
S4往步骤S3的脂质体过滤液中加入海藻糖作为赋形剂，在-30℃下预冻 1h，再在抽真空条件下冷冻干燥20h，并于2℃下保存，即得多肽脂质体。
实施例2
本发明实施例公开的一种多肽脂质体的制备方法(各组成及含量参见表 1)，与实施例1的制备步骤基本相同，其区别在于：
步骤S1中，所述空白脂质体薄膜的真空干燥时间为4h；步骤S3中，孵育时间为30min；步骤S4中，加入海藻糖后，先在-40℃下预冻2h，再在抽真空条件下冷冻干燥24h，并于4℃下保存，即得多肽脂质体。
实施例3
本发明实施例公开的一种多肽脂质体的制备方法(各组成及含量参见表 1)，与实施例1的制备步骤基本相同，其区别在于：
步骤S1中，所述空白脂质体薄膜的真空干燥时间为5h；步骤S3中，孵育时间为40min；步骤S4中，加入海藻糖后，先在-50℃下预冻3h，再在抽真空条件下冷冻干燥48h，并于7℃下保存，即得多肽脂质体。
实施例4～6
一种包含三肽-1、棕榈酰三肽-5、棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4和六肽 -9的多肽脂质体的保湿乳，所述保湿乳的配方如表2所示：
表2
Figure RE-GDA0002310023030000071
按表2的配方：分别将A相和B相加热到80℃，在开动均质搅拌下，将A相加入到B相中，乳化均匀后，降低温度后加入C相，降温至40℃加入D相，搅拌均匀后出料，即得保湿乳。
其中，实施例4的保湿乳采用实施例1的多肽脂质体制备而成；实施例 5的保湿乳采用实施例2的多肽脂质体制备而成；实施例6的保湿乳采用实施例3的多肽脂质体制备而成。
对比例1
对比例1的多肽脂质体的原料、重量组份含量及制备方法与实施例2基本一致，其区别在于：氢化卵磷脂含量为7.6份、胆固醇含量为0.6份、椰油基-磺基甜菜碱含量为1.2份。
对比例2
对比例2的多肽脂质体的原料、重量组份及制备方法与实施例2基本一致，其区别在于：氢化卵磷脂含量为5份、胆固醇含量为3份、椰油基-磺基甜菜碱含量为1.4份。
对比例3
对比例3的多肽脂质体的原料、重量组份及制备方法与实施例2基本一致，其区别在于：将实施例2中0.8份的棕榈酰三肽-5替换为0.8份的棕榈酰二肽-7。
对比例4
对比例4的多肽脂质体的原料、重量组份及制备方法与实施例2基本一致，其区别在于：所述多肽物质由0.8份的三肽-1、0.8份的棕榈酰三肽-5、 0.8份的棕榈酰五肽-4和0.3份的六肽-9组成(即不含棕榈酰四肽-7)。
对比例5～8
对比例5～8的保湿乳的配方及制备方法与实施例4基本一致，其区别在于：对比例5的保湿乳采用对比例1的多肽脂质体制备而成；对比例6的保湿乳采用对比例2的多肽脂质体制备而成；对比例7的保湿乳采用对比例 3的多肽脂质体制备而成；对比例8的保湿乳采用对比例4的多肽脂质体制备而成。
试验例一
本发明所述制备方法制得的多肽脂质体的稳定性试验
1、试验材料：
实施例1～3，以及对比例1～4制备得到的包含三肽-1、棕榈酰三肽-5、棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4和六肽-9的多肽脂质体。
2、试验方法：
取定量的多肽脂质体溶于去离子水，将多肽脂质体水溶液于温度4，15，30，40℃下、相对湿度70％条件下密闭放置。于放置后0、7、15、30、45、 60天，采用分光光度法对多肽脂质体水溶液的物理稳定性参数进行测定。
所述分光光度法的测试步骤为：轻微震荡上述的多肽脂质体水溶液，精密吸取多肽脂质体水溶液1mL，置离心管中2000rpm/min离心5min，取离心前的多肽脂质体水溶液及离心后的多肽脂质体水溶液的上层液体各 0.3mL，分别用去离子水稀释至5.0mL，以去离子水为空白，于波长500nm 处测定其吸光度(多肽脂质体水溶液离心前后测得的吸光度值分别为A0， A)，计算稳定性参数值：KE＝(A0-A)/A0×100％。KE值越小，说明多肽脂质体水溶液越稳定。其中，实施例1、2、3制得的多肽脂质体，其测试结果分别如表3、4、5所示；同时考察了对比例1-4制得的多肽脂质体在30℃的稳定效果，其测试结果如表6：
表3
Figure RE-GDA0002310023030000091
Figure RE-GDA0002310023030000101
表4
0天 7天 15天 30天 45天 60天
4℃ 0.201 0.203 0.203 0.204 0.206 0.208
15℃ 0.200 0.201 0.202 0.203 0.205 0.209
30℃ 0.205 0.204 0.205 0.206 0.207 0.210
40℃ 0.204 0.205 0.205 0.207 0.208 0.210
表5
0天 7天 15天 30天 45天 60天
4℃ 0.225 0.229 0.232 0.234 0.235 0.236
15℃ 0.227 0.230 0.233 0.236 0.237 0.238
30℃ 0.228 0.231 0.236 0.240 0.241 0.242
40℃ 0.230 0.235 0.239 0.243 0.245 0.247
表6
0天 7天 15天 30天 45天 60天
对比例1 0.230 0.240 0.256 0.262 0.266 0.270
对比例2 0.226 0.233 0.239 0.245 0.249 0.252
对比例3 0.227 0.231 0.235 0.238 0.240 0.242
对比例4 0.225 0.228 0.230 0.232 0.235 0.238
结果表明，经温度4，15，30，40℃、相对湿度75％条件下，分别放置 0、7、15、30、45、60天，本发明实施例2所述制备方法制得的多肽脂质体的吸光度随着放置时间的增长有些许增长，但基本可以忽略。而实施例1和实施例3所述制备方法制得的多肽脂质体的吸光度随着放置时间的增长变化幅度大于实施例2，这表明本发明实施例2制备得到的包含三肽-1、棕榈酰三肽-5、棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4和六肽-9的多肽脂质体稳定性最佳。同时对比例1-4所述制备方法制得的多肽脂质体的吸光度随着放置时间的增长，增长幅度远超过实施例1-3，这表明本发明实施例1-3述制备方法制得的多肽脂质体的稳定性较好，尤其是实施例2所属制备方法制得的多肽脂质体稳定性最好。
试验例二
包含多肽脂质体的保湿乳的稳定性试验
1、试验材料：
本发明实施例4～6，以及对比例5～8制得的包含多肽脂质体的保湿乳。
2、试验方法：
取定量包含多肽脂质体的保湿乳分别加至24个无菌的试管中，密封后放置在温度4，15，30，40℃、相对湿度70％条件下。于放置后0、7、15、 30、45、60天，观察并记录保湿乳的颜色、气味以及有无分层变化。其中，实施例4、5、6制得的保湿乳的测试结果分别如表7、8、9所示；同时考察了对比例5-8制得的多肽脂质体在30℃的稳定效果，其测试结果如表10：
表7
表8
Figure RE-GDA0002310023030000131
表9
Figure RE-GDA0002310023030000132
Figure RE-GDA0002310023030000141
表10
Figure RE-GDA0002310023030000142
结果表明，经温度4，15，30，40℃、相对湿度75％条件下，分别放置 0、7、15、30、45、60天，本发明实施例5制备得到的包含多肽脂质体的保湿乳的颜色和气味基本无变化，且均没有出现分层。而实施例4、实施例6 制备得到的包含多肽脂质体的保湿乳在45天之前颜色和气味基本无变化， 45天以后颜色和气味会有略微的变化，并伴随有分层。而对比例5-8所述制备方法制得的包含多肽脂质体的保湿乳随着放置时间的增长，均出现分层现象且香味不正常，这表明本发明实施例4-6述制备方法制得的包含多肽脂质体的保湿乳的稳定性较好，尤其是实施例5所属制备方法制得的包含多肽脂质体的保湿乳的稳定性最佳。
试验例三
实施例4～6制得的包含多肽脂质体的保湿乳的使用效果验证：
(1)选取受试者270名，年龄分布为20到55岁，随机分为三组。在每天早晚洁面后，受试者分别使用由实施例4、5、6制得的包含多肽脂质体的保湿乳。使用4周后，受试者均填写使用后评价表，主要指标为保湿、抗皱、光滑有弹性、有无过敏、香味。回收评价表，并对数据进行统计和分析，其中，实施例4、5、6制得的保湿乳的结果分别如表11、12、13所示：
表11
Figure RE-GDA0002310023030000161
表12
Figure RE-GDA0002310023030000162
表13
Figure RE-GDA0002310023030000171
结果表明，由实例4、5、6制得的包含多肽脂质体的保湿乳均具有较好的保湿抗皱能力，同时能改善皮肤，使皮肤光滑有弹性，且没有发现受试者出现任何过敏现象。但对比实施例4、6，实施例5制得的包含多肽脂质体的保湿乳效果最佳。此外，多数受试者均认为三种保湿乳香气自然。
(2)抗皱抗衰老试验：上述(1)实验中的三组270名受试者在使用由实施例4、5、6制得的包含多肽脂质体的保湿乳的0天和28天后，在各组随机抽20名受试者，采用德国Courage+Khazaka公司(德国CK公司)制造的皮肤弹性Cotometer MPA580主机测量这60名受试者的皮肤弹性和恢复能力。采样区域为受试者脸部皱纹严重部位，即眉心正中间、额头区域、鼻尖与瞳孔交线处左右脸颊区域。
首先检测受试者清洁后30min采样区域的空白值(R2、R5、R7，其中 R2＝Ua/Uf，R5＝Ur/Ue，R7＝Ur/Uf；其中Uf为皮肤最大拉伸量；Ua为从取消负压到下一次连续测试皮肤表面再加负压时皮肤的恢复值；Ue为恒定负压加到皮肤上后，0.1秒时皮肤的拉伸量，定位弹性部分拉伸量；Ur为取消负压后，皮肤就会迅速恢复原状态，同样分为弹性部分值Ur，即取消负压0.1秒后，皮肤的恢复值和粘弹性部分值，或称塑性部分值。
然后测试采集区域的皮肤的R2、R5、R7。同一个受试者的测试由同一个测量人员完成。通过测试各受试者分别使用实施例4、5、6制得的包含多肽脂质体的保湿乳前后皮肤的R2、R5、R7值的变化来评估产品的皮肤抗皱抗衰老功效，最后取各组受试者的R2、R5、R7的平均变化值作为最终结果，如表14所示：
表14
Figure RE-GDA0002310023030000181
注：R2、R5、R7越接近1，表明皮肤弹性越好，抗皱能力越强。
结果表明，对比实施例4、6，由实施例5制得的包含多肽脂质体的保湿乳均具有较好的抗皱能力。但对比实施例4、6，实施例5制得的包含多肽脂质体的保湿乳抗皱抗衰效果最佳。
需要说明的是，对于方法实施例，为了简单描述，故将其都表述为一系列的动作组合，但是本领域技术人员应该知悉，本发明实施例并不受所描述的动作顺序的限制，因为依据本发明实施例，某些步骤可以采用其他顺序或者同时进行。其次，本领域技术人员也应该知悉，说明书中所描述的实施例均属于优选实施例，所涉及的动作并不一定是本发明实施例所必须的。
本说明书中的各个实施例均采用递进的方式描述，每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处，各个实施例之间相同相似的部分互相参见即可。
尽管已描述了本发明实施例的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例做出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明实施例范围的所有变更和修改。
最后，还需要说明的是，在本文中，术语“包括”意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法中还存在另外的相同要素。
以上对本发明所提供的技术方案进行了详细介绍，本文中应用了具体个例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想；同时，对于本领域的一般技术人员，依据本发明的思想，在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处，综上所述，本说明书内容不应理解为对本发明的限制。

Claims (10)

1.一种多肽脂质体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1分别称取重量比为6.5～7:1.6～2:0.5～1的氢化卵磷脂、胆固醇和椰油基-磺基甜菜碱，以及重量组份为0.5～1.5份的维生素E，溶于氯仿溶液中，再在室温下将氯仿溶液蒸发完全，得到空白脂质体薄膜，干燥；
S2将步骤S1中干燥的空白脂质体薄膜溶于去离子水，得到水溶液，过滤，得到空白脂质体溶液；
S3将多肽物质缓慢加入步骤S2的空白脂质体溶液中，室温轻微搅拌，孵育20～40min，过滤，得到脂质体过滤液；
S4往步骤S3的脂质体过滤液中加入重量组份为0.5～4份的海藻糖，冷冻干燥，即得多肽脂质体。
2.根据权利要求1所述多肽脂质体的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，溶于所述氯仿溶液之后，还包括采用30％的输入功率对所述氯仿溶液进行8～10min超声处理的步骤。
3.根据权利要求1所述多肽脂质体的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，氢化卵磷脂、胆固醇、椰油基-磺基甜菜碱和维生素E与氯仿的固液比为6.8g:1.8g:0.8g:1g:200ml；
将所述空白脂质体薄膜置于真空干燥箱中干燥3～5h。
4.根据权利要求1所述多肽脂质体的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中，去离子水与步骤S1中氯仿的体积比为2:1；
溶于去离子水之后，还包括采用20％的输入功率对步骤S1中干燥的空白脂质体薄膜进行8～10min超声处理的步骤。
5.根据权利要求1所述多肽脂质体的制备方法，其特征在于，所述步骤S2、S3中，采用聚碳酸酯膜进行过滤。
6.根据权利要求5所述多肽脂质体的制备方法，其特征在于，所述步骤S2、S3中，过滤时，将滤液挤压依次通过0.6μm、0.45μm和0.22μm的聚碳酸酯膜。
7.根据权利要求1所述多肽脂质体的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中，所述多肽物质为三肽-1、棕榈酰三肽-5、棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4、六肽-9中的一种或多种。
8.根据权利要求7所述多肽脂质体的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中，所述多肽物质分别占多肽脂质体的重量组份为0.2～1.5份三肽-1、0.1～2份棕榈酰三肽-5、0.1～1份棕榈酰四肽-7、0.2～2份棕榈酰五肽-4和0.2～1份六肽-9。
9.根据权利要求1所述多肽脂质体的制备方法，其特征在于，所述步骤S4中，海藻糖与多肽物质的质量比为0.5～2:1；
加入海藻糖后，先在-30～-50℃下预冻1～3h，再在抽真空条件下冷冻干燥20～48h，并于2～7℃下保存，即得多肽脂质体；所述多肽脂质体的粒径为100～210nm。
10.一种由权利要求1～9任一项所述的制备方法制得的多肽脂质体在护肤品中的应用。
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