CN105232464A - 一种盐酸环丙沙星脂质体制剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种盐酸环丙沙星脂质体制剂制备方法,(1)称取1份的盐酸环丙沙星加入磷酸盐缓冲液,搅拌制成盐酸环丙沙星溶液;(2)空白脂质体制备:称取大豆卵磷脂10~50份和胆固醇5~40份混合,加氯仿,搅拌使溶解,减压除去溶剂,制备空白磷脂膜;(3)薄膜用少量氯仿溶解,取(1)制备好的盐酸环丙沙星溶液及磷酸盐缓冲液加入到上述酯溶液中,于45~60℃用浴式超声仪超声10~30min,形成稳定的溶液,将所得脂质体溶液通过微孔滤膜两遍,进行整粒,即得。本发明通过超声仪生产的脂质体粒径小、粒度分布更窄,有良好的制剂性质和靶向性,可提高疗效,具有长效作用、减低药物毒性及提高药物稳定性等优点。
Description
技术领域
本发明涉及一种盐酸环丙沙星的新制剂,特别是涉及一种盐酸环丙沙星脂质体制剂及其制备方法。
背景技术
脂质体是一种定向药物载体,属于靶向给药系统的一种新剂型。它可以将药物粉末或溶液包埋在直径为纳米级的微粒中,这种微粒具有类细胞结构,进入人或动物体内主要被网状内皮系统吞噬而激活机体的自身免疫功能,并改变被包封药物的体内分布,使药物主要在肺、脾、肝和骨髓等组织器官中积蓄,从而提高药物的治疗指数,减少药物的治疗剂量和降低药物的毒性。脂质体是内含一含水空间的连续双层脂类分子;主要成份是天然磷脂和类固醇,因而是生物可适合的、生物可降解的,无毒且无免疫原性。现在已有多种类型的脂质体,它们都含有水和脂的间隔,因此水溶性以及脂溶性分子和离子容易包入脂质体颗粒中;这一独特的性质使脂质体成为多种药物通用的载体。
盐酸环丙沙星为合成的第三代喹诺酮类抗菌药物,具广谱抗菌作用,尤其对需氧革兰阴性杆菌的抗菌活性高,对下列细菌在体外具良好抗菌作用:肠杆菌科的大部分细菌,包括枸椽酸杆菌属、阴沟、产气肠杆菌、大肠埃希菌、克雷伯菌属、变形杆菌属、沙门菌属、志贺菌属、弧菌属、耶尔森菌等,常对多重耐药菌也具有抗菌活性,对青霉素耐药的淋病奈瑟菌、产酶流感嗜血杆菌和莫拉菌属均具有高度抗菌活性,对铜绿假单胞菌等假单胞菌属的大多数菌株具抗菌作用。本品对甲氧西林敏感葡萄球菌具抗菌活性,对肺炎链球菌、溶血性链球菌和粪肠球菌仅具中等抗菌活性,对沙眼衣原体、支原体、军团菌亦具良好作用,对结核杆菌和非典型分枝杆菌也有抗菌活性。对厌氧菌的抗菌活性差。环丙沙星为杀菌剂,通过作用于细菌DNA螺旋酶的A亚单位,抑制DNA的合成和复制而导致细菌死亡。
临床常用剂型有口服剂型及注射液;但该药常规剂型消除半衰期较短,用药频繁,且在体内分布广泛。
发明内容
本发明的目的是提供一种盐酸环丙沙星脂质体制剂及其制备方法,以大幅度提高盐酸环丙沙星药物的药效,如用以治疗鸡的气囊炎等呼吸系统疾病,减低药物毒性和提高药物稳定性能。
本发明的目的是以下述技术方案实现的:
一种盐酸环丙沙星脂质体制剂,由以下重量份的原料制备而成:盐酸环丙沙星1份、大豆卵磷脂10-50份、胆固醇5-40份;进一步,由以下重量份的原料制备而成:盐酸环丙沙星1份、大豆卵磷脂30份、胆固醇25份。
如上所述的盐酸环丙沙星脂质体制剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)称取盐酸环丙沙星,加入浓度为100~200mmol/L的磷酸盐缓冲液,每毫克盐酸环丙沙星加入磷酸盐缓冲液20~25mL;搅拌制成盐酸环丙沙星溶液,置于65~70℃水浴中,保温,待用;
(2)空白脂质体制备:将取大豆卵磷脂和胆固醇混合,加氯仿,置于65~70℃水浴中,搅拌使溶解,减压除去溶剂,得到空白磷脂膜,每毫克大豆卵磷脂和胆固醇加入氯仿2~4mL;
(3)步骤(2)得到的磷脂膜用氯仿溶解,加入步骤(1)制备好的盐酸环丙沙星溶液,再加入体积为氯仿的0.8~1.2倍、浓度为100~200mmol/L磷酸盐缓冲液;于45~60℃用浴式超声仪超声10~30min,形成脂质体溶液,将所得脂质体溶液通过微孔滤膜,进行整粒,即得。
进一步,包括以下步骤:
(1)称取盐酸环丙沙星,加入浓度为100mmol/L的磷酸盐缓冲液,每毫克盐酸环丙沙星加入磷酸盐缓冲液22.5mL;搅拌制成盐酸环丙沙星溶液,置于70℃水浴中,保温,待用;
(2)空白脂质体制备:将取大豆卵磷脂和胆固醇混合,加氯仿,置于70℃水浴中,搅拌使溶解,减压除去溶剂,得到空白磷脂膜,每毫克大豆卵磷脂和胆固醇加入氯仿3mL;
(3)步骤(2)得到的磷脂膜用氯仿溶解,加入步骤(1)制备好的盐酸环丙沙星溶液,再加入与氯仿同体积、浓度为100mmol/L磷酸盐缓冲液;于50℃用浴式超声仪超声20min,形成脂质体溶液,将所得脂质体溶液通过微孔滤膜,进行整粒,即得。
所述微孔滤膜粒径为0.8μm。
本发明通过主动载药制备得到盐酸环丙沙星脂质体,其在鸡肺泡中的药物浓度比其他组织中高8-16倍,其乳粒小于10nm,而且包封率高达75%、粒径均匀,具有良好的制剂性质和靶向性,药物在血液循环中保留时间长,提高了制剂产品质量和疗效,减少了毒副作用,提高了生物利用度;并且制备方法简单,易操作适合工业化大生产;本发明的优点具体为:
1、良好的制剂性质:制备脂质体所用到的脂材毒性小,生物相溶性好,没有免疫反应。
2、提高疗效:盐酸环丙沙星纳米脂质体乳液,经十批三万只鸡使用证明,对鸡的气囊炎疗效较好。
3、具有良好的靶向性。
4、长效作用:药物包裹于脂质体内,可降低在组织中扩散而缓慢向血液中释放药物,从而延长药物作用时间。
5、减低药物毒性:脂质体能选择性地分布于某些组织和器官,增加药物对淋巴系统的定向性,提高药物在靶部位的治疗浓度。尤其对抗癌药物,能使之选择性地杀伤癌细胞或抑制癌细胞,对正常组织、细胞的毒性明显降低或无损害作用。对脂质体表面性质进行改变,如粒径大小、表面电荷、组织特异性抗体等,可提高药物对靶区的选择性,从而也降低了毒性,减少了不良反应。
具体实施方式
实施例1
一种盐酸环丙沙星脂质体制剂,由以下重量份的原料制备而成:盐酸环丙沙星1份、大豆卵磷脂10-50份、胆固醇5-40份。
如上所述的盐酸环丙沙星脂质体制剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)称取盐酸环丙沙星,加入浓度为100~200mmol/L的磷酸盐缓冲液,每毫克盐酸环丙沙星加入磷酸盐缓冲液20~25mL;搅拌制成盐酸环丙沙星溶液,置于65~70℃水浴中,保温,待用;
(2)空白脂质体制备:将取大豆卵磷脂和胆固醇混合,加氯仿,置于65~70℃水浴中,搅拌使溶解,减压除去溶剂,得到空白磷脂膜,每毫克大豆卵磷脂和胆固醇加入氯仿2~4mL;
(3)步骤(2)得到的磷脂膜用少量氯仿溶解,加入步骤(1)制备好的盐酸环丙沙星溶液,再加入体积为氯仿的0.8~1.2倍、浓度为100~200mmol/L磷酸盐缓冲液;于45~60℃用浴式超声仪超声10~30min,形成脂质体溶液,将所得脂质体溶液通过微孔滤膜,进行整粒,即得。
实施例2
一种盐酸环丙沙星脂质体制剂,由以下重量份的原料制备而成:盐酸环丙沙星1份、大豆卵磷脂10份、胆固醇5份。
如上所述的盐酸环丙沙星脂质体制剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)称取1mg的盐酸环丙沙星加入0.2mol/L的磷酸盐缓冲液水20ml,搅拌制成盐酸环丙沙星溶液,置于65℃水浴中,保温,待用;
(2)空白脂质体制备:称取大豆卵磷脂10mg和胆固醇5mg混合,加氯仿50ml,置于65℃水浴中,搅拌使溶解,减压除去溶剂,得到空白磷脂膜;
(3)薄膜用5mL氯仿溶解,加入(1)制备好的盐酸环丙沙星溶液及5mL的0.2mol/L磷酸盐缓冲液,于60℃用浴式超声仪超声10min,形成稳定的溶液,将所得脂质体溶液通过0.8μm微孔滤膜两遍,进行整粒,即得。
实施例3
一种盐酸环丙沙星脂质体制剂,由以下重量份的原料制备而成:盐酸环丙沙星1份、大豆卵磷脂11份、胆固醇5份。
如上所述的盐酸环丙沙星脂质体制剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)称取5mg的盐酸环丙沙星加入0.2mol/L的磷酸盐缓冲液水120ml,搅拌制成盐酸环丙沙星溶液,置于65℃水浴中,保温,待用;
(2)空白脂质体制备:称取大豆卵磷脂55mg和胆固醇25mg混合,加氯仿200ml,置于65℃水浴中,搅拌使溶解,减压除去溶剂,得到空白磷脂膜;
(3)薄膜用5mL氯仿溶解,加入(1)制备好的盐酸环丙沙星溶液及6mL的0.2mol/L磷酸盐缓冲液,于60℃用浴式超声仪超声10min,形成稳定的溶液,将所得脂质体溶液通过0.8μm微孔滤膜两遍,进行整粒,即得。
实施例4
一种盐酸环丙沙星脂质体制剂,由以下重量份的原料制备而成:盐酸环丙沙星1份、大豆卵磷脂22.5份、胆固醇10份。
如上所述的盐酸环丙沙星脂质体制剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)称取4mg的盐酸环丙沙星加入0.2mol/L的磷酸盐缓冲液水100ml,搅拌制成盐酸环丙沙星溶液,置于70℃水浴中,保温,待用;
(2)空白脂质体制备:称取大豆卵磷脂90mg和胆固醇40mg混合,加氯仿260ml,置于68℃水浴中,搅拌使溶解,减压除去溶剂,得到空白磷脂膜;
(3)薄膜用6mL氯仿溶解,加入(1)制备好的盐酸环丙沙星溶液及6mL的0.2mol/L磷酸盐缓冲液,于45℃用浴式超声仪超声30min,形成稳定的溶液,将所得脂质体溶液通过0.8μm微孔滤膜两遍,进行整粒,即得。
实施例5
一种盐酸环丙沙星脂质体制剂,由以下重量份的原料制备而成:盐酸环丙沙星1份、大豆卵磷脂19份、胆固醇10份。
如上所述的盐酸环丙沙星脂质体制剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)称取9mg的盐酸环丙沙星加入0.15mol/L的磷酸盐缓冲液水220ml,搅拌制成盐酸环丙沙星溶液,置于70℃水浴中,保温,待用;
(2)空白脂质体制备:称取大豆卵磷脂170mg和胆固醇90mg混合,加氯仿520ml,置于70℃水浴中,搅拌使溶解,减压除去溶剂,得到空白磷脂膜;
(3)薄膜用5mL氯仿溶解,加入(1)制备好的盐酸环丙沙星溶液及4mL的0.15mol/L磷酸盐缓冲液,于50℃用浴式超声仪超声20min,形成稳定的溶液,将所得脂质体溶液通过0.8μm微孔滤膜两遍,进行整粒,即得。
实施例6
一种盐酸环丙沙星脂质体制剂,由以下重量份的原料制备而成:盐酸环丙沙星1份、大豆卵磷脂50份、胆固醇30份。
如上所述的盐酸环丙沙星脂质体制剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)称取1mg的盐酸环丙沙星加入0.2mol/L的磷酸盐缓冲液水25ml,搅拌制成盐酸环丙沙星溶液,置于66℃水浴中,保温,待用;
(2)空白脂质体制备:称取大豆卵磷脂50mg和胆固醇30mg混合,加氯仿240mL,置于67℃水浴中,搅拌使溶解,减压除去溶剂,得到空白磷脂膜;
(3)薄膜用7mL氯仿溶解,加入(1)制备好的盐酸环丙沙星溶液及8mL的0.2mol/L磷酸盐缓冲液,于50℃用浴式超声仪超声20min,形成稳定的溶液,将所得脂质体溶液通过0.8μm微孔滤膜两遍,进行整粒,即得。
实施例7
一种盐酸环丙沙星脂质体制剂,由以下重量份的原料制备而成:盐酸环丙沙星1份、大豆卵磷脂40份、胆固醇15份。
如上所述的盐酸环丙沙星脂质体制剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)称取1mg的盐酸环丙沙星加入0.1mol/L的磷酸盐缓冲液水20ml,搅拌制成盐酸环丙沙星溶液,置于65℃水浴中,保温,待用;
(2)空白脂质体制备:称取大豆卵磷脂40mg和胆固醇15mg混合,加氯仿220mL,置于65℃水浴中,搅拌使溶解,减压除去溶剂,得到空白磷脂膜;
(3)薄膜用5mL氯仿溶解,加入(1)制备好的盐酸环丙沙星溶液及6mL的0.1mol/L磷酸盐缓冲液,于45℃用浴式超声仪超声25min,形成稳定的溶液,将所得脂质体溶液通过0.8μm微孔滤膜两遍,进行整粒,即得。
实施例8
一种盐酸环丙沙星脂质体制剂,由以下重量份的原料制备而成:盐酸环丙沙星1份、大豆卵磷脂50份、胆固醇40份。
如上所述的盐酸环丙沙星脂质体制剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)称取1mg的盐酸环丙沙星加入0.15mol/L的磷酸盐缓冲液水22ml,搅拌制成盐酸环丙沙星溶液,置于69℃水浴中,保温,待用;
(2)空白脂质体制备:称取大豆卵磷脂50mg和胆固醇40mg混合,加氯仿270mL,置于65℃水浴中,搅拌使溶解,减压除去溶剂,得到空白磷脂膜;
(3)薄膜用5mL氯仿溶解,加入(1)制备好的盐酸环丙沙星溶液及5mL的0.15mol/L磷酸盐缓冲液,于50℃用浴式超声仪超声15min,形成稳定的溶液,将所得脂质体溶液通过0.8μm微孔滤膜两遍,进行整粒,即得。
实施例9
一种盐酸环丙沙星脂质体制剂,由以下重量份的原料制备而成:盐酸环丙沙星1份、大豆卵磷脂30份、胆固醇20份。
如上所述的盐酸环丙沙星脂质体制剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)称取1mg的盐酸环丙沙星加入0.2mol/L的磷酸盐缓冲液水20ml,搅拌制成盐酸环丙沙星溶液,置于65℃水浴中,保温,待用;
(2)空白脂质体制备:称取大豆卵磷脂30mg和胆固醇20mg混合,加氯仿100mL,置于68℃水浴中,搅拌使溶解,减压除去溶剂,得到空白磷脂膜;
(3)薄膜用5mL氯仿溶解,加入(1)制备好的盐酸环丙沙星溶液及4mL的0.2mol/L磷酸盐缓冲液,于45℃用浴式超声仪超声30min,形成稳定的溶液,将所得脂质体溶液通过0.8μm微孔滤膜两遍,进行整粒,即得。
实施例10
一种盐酸环丙沙星脂质体制剂,由以下重量份的原料制备而成:盐酸环丙沙星1份、大豆卵磷脂25份、胆固醇10份。
如上所述的盐酸环丙沙星脂质体制剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)称取1mg的盐酸环丙沙星加入0.15mol/L的磷酸盐缓冲液水21ml,搅拌制成盐酸环丙沙星溶液,置于65℃水浴中,保温,待用;
(2)空白脂质体制备:称取大豆卵磷脂25mg和胆固醇10mg混合,加氯仿100mL,置于65℃水浴中,搅拌使溶解,减压除去溶剂,得到空白磷脂膜;
(3)薄膜用5mL氯仿溶解,加入(1)制备好的盐酸环丙沙星溶液及4mL的0.15mol/L磷酸盐缓冲液,于45℃用浴式超声仪超声30min,形成稳定的溶液,将所得脂质体溶液通过0.8μm微孔滤膜两遍,进行整粒,即得。
实施例11
一种盐酸环丙沙星脂质体制剂,由以下重量份的原料制备而成:盐酸环丙沙星1份、大豆卵磷脂20份、胆固醇8份。
如上所述的盐酸环丙沙星脂质体制剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)称取1mg的盐酸环丙沙星加入0.15mol/L的磷酸盐缓冲液水21ml,搅拌制成盐酸环丙沙星溶液,置于65℃水浴中,保温,待用;
(2)空白脂质体制备:称取大豆卵磷脂20mg和胆固醇8mg混合,加氯仿112mL,置于65℃水浴中,搅拌使溶解,减压除去溶剂,得到空白磷脂膜;
(3)薄膜用5mL氯仿溶解,加入(1)制备好的盐酸环丙沙星溶液及4mL的0.15mol/L磷酸盐缓冲液,于45℃用浴式超声仪超声30min,形成稳定的溶液,将所得脂质体溶液通过0.8μm微孔滤膜两遍,进行整粒,即得。
实施例12
一种盐酸环丙沙星脂质体制剂,由以下重量份的原料制备而成:盐酸环丙沙星1份、大豆卵磷脂35份、胆固醇15份。
如上所述的盐酸环丙沙星脂质体制剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)称取1mg盐酸环丙沙星,加入浓度为100mmol/L的磷酸盐缓冲液,每毫克盐酸环丙沙星加入磷酸盐缓冲液22.5mL;搅拌制成盐酸环丙沙星溶液,置于70℃水浴中,保温,待用;
(2)空白脂质体制备:取35mg大豆卵磷脂和15mg胆固醇混合,加氯仿,置于70℃水浴中,搅拌使溶解,减压除去溶剂,得到空白磷脂膜,每毫克大豆卵磷脂和胆固醇加入氯仿3mL;
(3)步骤(2)得到的磷脂膜用氯仿溶解,加入步骤(1)制备好的盐酸环丙沙星溶液,再加入与氯仿同体积、浓度为100mmol/L磷酸盐缓冲液;于50℃用浴式超声仪超声20min,形成脂质体溶液,将所得脂质体溶液通过0.8μm微孔滤膜,进行整粒,即得。
试验例
血药分析实验
随机抽取感染鸡毒支原体的病鸡30只,分为三组,体重在1-2kg。分别给鸡口服实施例4制剂、实施例5制剂和对照组制剂(市售盐酸环丙沙星预混剂),给药剂量为40mg有效成分量/kg体重,不同时间抽取血样,以微生物效价法测定血浆抗菌活性,以标准品(盐酸环丙沙星)为参照,计算出用药后不同时间的血药浓度(ug/ml)。结果如下表所示:
盐酸环丙沙星对鸡毒支原体的最低抑菌浓度(MIC)值为0.025~0.5(ug/ml)。由此可以看出,本发明所制备的盐酸环丙沙星脂质体制剂缓释效果明显,体内持续时间长,可以减少给药次数。
Claims (5)
1.一种盐酸环丙沙星脂质体制剂,其特征在于由以下重量份的原料制备而成:盐酸环丙沙星1份、大豆卵磷脂10-50份、胆固醇5-40份。
2.一种盐酸环丙沙星脂质体制剂,其特征在于由以下重量份的原料制备而成:盐酸环丙沙星1份、大豆卵磷脂30份、胆固醇25份。
3.如权利要求1-2任一项所述的盐酸环丙沙星脂质体制剂的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)称取盐酸环丙沙星,加入浓度为100~200mmol/L的磷酸盐缓冲液,每毫克盐酸环丙沙星加入磷酸盐缓冲液20~25mL;搅拌制成盐酸环丙沙星溶液,置于65~70℃水浴中,保温,待用;
(2)空白脂质体制备:将取大豆卵磷脂和胆固醇混合,加氯仿,置于65~70℃水浴中,搅拌使溶解,减压除去溶剂,得到空白磷脂膜,每毫克大豆卵磷脂和胆固醇加入氯仿2~4mL;
(3)步骤(2)得到的磷脂膜用氯仿溶解,加入步骤(1)制备好的盐酸环丙沙星溶液,再加入体积为氯仿的0.8~1.2倍、浓度为100~200mmol/L磷酸盐缓冲液;于45~60℃用浴式超声仪超声10~30min,形成脂质体溶液,将所得脂质体溶液通过微孔滤膜,进行整粒,即得。
4.如权利要求3所述的盐酸环丙沙星脂质体制剂的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)称取盐酸环丙沙星,加入浓度为100mmol/L的磷酸盐缓冲液,每毫克盐酸环丙沙星加入磷酸盐缓冲液22.5mL;搅拌制成盐酸环丙沙星溶液,置于70℃水浴中,保温,待用;
(2)空白脂质体制备:将取大豆卵磷脂和胆固醇混合,加氯仿,置于70℃水浴中,搅拌使溶解,减压除去溶剂,得到空白磷脂膜,每毫克大豆卵磷脂和胆固醇加入氯仿3mL;
(3)步骤(2)得到的磷脂膜用氯仿溶解,加入步骤(1)制备好的盐酸环丙沙星溶液,再加入与氯仿同体积、浓度为100mmol/L磷酸盐缓冲液;于50℃用浴式超声仪超声20min,形成脂质体溶液,将所得脂质体溶液通过微孔滤膜,进行整粒,即得。
5.如权利要求3-4任一项所述的盐酸环丙沙星脂质体制剂的制备方法,其特征在于所述微孔滤膜粒径为0.8μm。
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