CN110684701A - 植物乳杆菌s58及其在制备用于缓解肥胖的产品中的应用 - Google Patents

植物乳杆菌s58及其在制备用于缓解肥胖的产品中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN110684701A
CN110684701A CN201911131324.8A CN201911131324A CN110684701A CN 110684701 A CN110684701 A CN 110684701A CN 201911131324 A CN201911131324 A CN 201911131324A CN 110684701 A CN110684701 A CN 110684701A
Authority
CN
China
Prior art keywords
lactobacillus plantarum
obesity
group
cctcc
mice
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201911131324.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110684701B (zh
Inventor
索化夷
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Southwest University
Original Assignee
Southwest University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Southwest University filed Critical Southwest University
Priority to CN201911131324.8A priority Critical patent/CN110684701B/zh
Publication of CN110684701A publication Critical patent/CN110684701A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110684701B publication Critical patent/CN110684701B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205Bacterial isolates
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225Lactobacillus
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74Bacteria
    • A61K35/741Probiotics
    • A61K35/744Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04Anorexiants; Antiobesity agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了保藏编号为CCTCC NO:M 2019595的植物乳杆菌S58(Lactobacillus plantarumS58)及其在制备缓解肥胖的保健品、食品和药品等产品中的应用,不仅扩大了植物乳杆菌S58的应用范围,提高了其利用价值,而且给治疗肥胖带来了新的希望。

Description

植物乳杆菌S58及其在制备用于缓解肥胖的产品中的应用
技术领域
本发明涉及一种植物乳杆菌及其在制备保健食品、保健品和药品中的应用。
背景技术
当前肥胖的发生呈逐年上升趋势,世界卫生组织定义肥胖不是简单的体重过而是一种疾病。每年有超过260万超重或肥胖的病人遭受与肥胖相关的生理性疾病,如高血脂症,心血管疾病,糖尿病,骨质疏松等。随着社会的发展,生活水平的提高,人们的生活方式及膳食结构发生改变。高热量食物的摄入和运动量的减少,导致了肥胖发生率逐年上升。肥胖的发病机制尚不明确,肥胖的发生可能与遗传、内分泌失常、代谢异常及营养不平衡等因素相关。目前治疗肥胖的主要措施有调整饮食结构和类型、行为疗法;对于严重肥胖患者来说,还有服用减肥药物、肥胖外科手术等手段,但这些手段会降低病人的生活质量,例如长期出现腹泻,营养代谢紊乱等副作用。因此寻求安全、有效的预防肥胖发生的天然物质是研究的热点。
乳酸菌是可以产生乳酸的革兰氏阳性菌。酸奶,泡菜及人和动物的胃肠道、阴道中通常存在乳酸菌。由于其能促进肠道中有益菌的生长而被定义为有益菌。在乳酸菌中,乳杆菌具有很多生物学效应,它们可以干扰肠道菌群,非特异性激活人和动物宿主免疫系统,并且具有抗炎作用。乳酸菌可以通过一些机制来改善肥胖、炎症和相关的代谢并发症,包括黏附、定植在肠道表面,分泌抑菌物质,与致病菌形成竞争;上调黏附蛋白的表达,调节肠道菌群,与肠粘膜共同形成天然的保护屏障。
某些特定益生菌能有效地改善高脂饮食所引起的脂代谢紊乱、炎症、肠道微生态紊乱等现象,进而缓解肥胖的形成,将具有抑制脂肪沉积的益生菌开发为功能性制剂具有广阔的前景,值得深入研究。
发明内容
本发明的目的在于提供一种从泡菜中分离得到的植物乳杆菌,及其在用于制备用于缓解肥胖的产品中的应用。
本发明的再一目的是提供含有上述植物乳杆菌的抗肥胖剂、药物组合物、食品、保健品以及食品添加剂。
经研究,本发明提供如下技术方案:
本发明公开了一种植物乳杆菌S58(Lactobacillus plantarumS58),其保藏编号为CCTCC NO:M 2019595。
本发明公开了植物乳杆菌S58在制备预防或治疗肥胖症或肥胖所引起的代谢性疾病的药物中的应用。
本发明公开了一种植物乳杆菌S58在制备预防或缓解肥胖的食品中的应用。
本发明公开了一种植物乳杆菌S58在制备预防或缓解肥胖的保健品中的应用。
本发明进一步公开了一种用于预防或治疗肥胖症或肥胖所引起的代谢性疾病的药物组合物,所述药物组合物中含有保藏编号为CCTCC NO:M 2019595的药学有效剂量的植物乳杆菌S58。
本发明进一步公开了一种用于缓解肥胖的食品,所述食品中含有保藏编号为CCTCC NO:M 2019595的植物乳杆菌S58。
本发明进一步公开了一种用于缓解肥胖的食品添加剂,所述食品添加剂中含有保藏编号为CCTCC NO:M 2019595的植物乳杆菌S58。
本发明进一步公开了一种缓解肥胖的的保健品,所述保健品中含有保藏编号为CCTCC NO:M 2019595的植物乳杆菌S58。
本发明进一步公开了一种抗肥胖剂,所述抗肥胖剂中含有保藏编号为CCTCC NO:M2019595的植物乳杆菌S58。
高脂膳食诱导肥胖模型小鼠结果显示:植物乳杆菌S58能够显著减轻小鼠的体重,降低肝指数、脾指数、附睾脂肪指数;能够显著减小附睾脂肪组织脂肪泡直径,显著改善由高脂膳食诱导的肝组织脂肪变性,使血管周围的脂肪泡变小变少;能够显著降低血清中TC、TG、LDL-C的含量,显著升高HDL-C的含量,使血脂接近正常水平;能够显著降低血清中ALT、AST、AKP的含量,使肝功能得到改善;能够显著降低血清中LEP含量并显著升高ADP、GLP-1、PYY含量;能够显著降低血清中LPS含量,说明植物乳杆菌S58可以改变肠道菌群结构,从而改善肠屏障功能,减少肠上皮细胞分泌LPS;能够显著降低血清中促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量,从而缓解炎症;能够显著降低肝脏中PPAR-γ、C/EBP-α、SREBP-1c、FAS、SCD1、LPL基因的表达,提高HLS基因的表达,减少了肝脏内脂肪合成与积累并增加了脂肪分解和氧化;能够显著增加结肠内紧密连接蛋白Occludin、Claudin-7的表达,改善肠道屏障功能,从而缓解机体炎症。综上,植物乳杆菌S58能够改善肥胖的发生与发展,起到对肥胖的缓解作用。因此,植物乳杆菌S58可用于制备缓解肥胖的保健食品和药品。
本发明的有益效果在于:本发明提供了保藏编号为CCTCC NO:M 2019595的植物乳杆菌S58(Lactobacillus plantarumS58)在制备缓解肥胖的保健食品和药品中的应用,不仅扩大了植物乳杆菌S58的应用范围,提高了其利用价值,而且给治疗肥胖带来了新的希望。
保藏信息
中国典型培养物保藏中心;地址:中国武汉武汉大学;保藏日期:2019年8月1日;保藏编号:CCTCC NO:M 2019595;分类命名:植物乳杆菌S58(Lactobacillus plantarumS58)。
附图说明
图1为分离菌株菌落形态(a)及革兰氏染结果(b)
图2为植物乳杆菌S58的API 50CH反应结果
图3为体重变化趋势(a)及体重增量(b)。
图4为小鼠肝指数(a)、脾指数(b)及附睾脂肪指数(c)
图5为小鼠附睾脂肪组织病理学观察。
图6为小鼠肝脏组织病理学观察。
图7为植物乳杆菌S58DUI小鼠血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C含量的影响。
图8植物乳杆菌S58对肥胖小鼠血清ALT、AST、AKP的影响
图9为植物乳杆菌S58对肥胖小鼠血清LEP、ADP的影响
图10为植物乳杆菌S58对肥胖小鼠血清GLP-1、PYY的影响
图11为植物乳杆菌S58对肥胖小鼠血清LPS的影响
图12为植物乳杆菌S58对肥胖小鼠血清IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ的影响
图13为植物乳杆菌S58对肥胖小鼠肝组织中PPAR-γ、C/EBP-α、SREBP-1c、FAS、SCD1、LPL、HLS、CPT1 mRNA表达的影响
图14为植物乳杆菌S58对肥胖小鼠结肠组织中ZO-1、Occludin、Claudin-5、Claudin-7mRNA表达的影响
上述图中,标有相同小写英文字母(a、b、c)的组之间不存在显著差异(p>0.05);标有不同小写英文字母(a、b、c)的组之间存在显著差异(p<0.05)。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将结合附图对本发明的优选实施例进行详细的描述。
一、植物乳杆菌S58的分离与鉴定
1 实验材料
重庆市农家自然发酵泡菜。
2 实验方法
2.1 乳酸菌的分离纯化
将取回的泡菜水进行10倍梯度稀释,依次稀释至10-7。选择4个适宜稀释度(稀释度为10-4、10-5、10-6、10-7)分别取100μL涂布在MRS固体平板上,37℃培养48h后,选取形态各异的单菌落采用平板划线法分离菌株。重复上述步骤直至得到纯化菌株,通过革兰氏染色进行形态学观察。
2.2 PCR扩增16S rDNA序列
采用细菌基因组DNA提取试剂盒提取纯化菌株的DNA。采用25μL反应体系进行PCR扩增:模板DNA 1μL、上游引物(10μM)1μL、下游引物(10μM)1μL、2×Taq PCR MasterMix12.5μL,用无菌超纯水补足至25μL。PCR扩增条件:94℃预变性5min;94℃变性1.5min,55℃退火1min,72℃延伸1.5min,共30个循环;72℃末端延伸10min。最后委托华大基因科技有限公司对检测合格的PCR扩增产物进行双向测序,测序结果通过NCBI中的BLAST程序进行同源性比对分析。
2.3 API试剂盒鉴定
分离菌株在37℃培养18h,于3000r/min、15min的条件下离心收集菌体,用无菌生理盐水洗涤菌体后重悬为菌悬液。参考API试剂盒说明书进行操作。
3 结果与分析
3.1 分离菌株的菌落形态和细胞形态
菌株纯化后在MRS培养基中形成单菌落,菌落形态几乎一致,大多数呈圆形,白色,表面光滑湿润。革兰氏染色后在显微镜下观察到紫色细胞形态,判定为革兰氏阳性菌(G+)。菌株的菌落形态和革兰氏染色结果见图1。
3.2 菌株16S rDNA序列分析
16S rDNA同源性分析结果显示,与Gene Bank数据库中已知植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)的同源性达100%。植物乳杆菌S58的16S rDNA基因扩增产物的双向序列如SEQ ID No.1所示。
3.3 菌株生化特性鉴定结果
乳酸杆菌种水平的表型鉴定主要依据碳水化合物发酵试验。API50CH试剂盒是通过菌株对49种不同碳水化合物的利用情况来进行鉴定。
图2示出了实验菌株的API 50CH反应结果。表1示出了该菌株对49种碳水化合物发酵试验结果。由图2和表1可知,在供试的49种碳源中,该菌株可以利用其中26种碳水化合物。经API lab plus系统最终鉴定,实验菌株为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),其ID值为99.90%,T值为0.65,达到鉴定要求(ID值≥99.0%且T值≥0.5)。
表1 Lactobacillus plantarumS58对49种碳水化合物发酵试验结果
Figure BDA0002278369600000051
注:“+”代表反应阳性;“-”代表反应阴性。
二、植物乳杆菌S58对小鼠肥胖的缓解作用
1 实验材料
实验菌株为植物乳杆菌S58(Lactobacillus plantarumS58),保藏编号为CCTCCNo:M2019595。
实验动物为8周龄雄性C57BL/6J小鼠,购自重庆恩斯维尔生物科技有限公司。饲养于室温25±2℃、相对湿度50±5%、12h光照/12h黑暗的标准化实验室中,适应性喂养一周后开始实验。
2 实验方法
2.1 实验动物分组及处理
将小鼠随机分成正常组(NC)、模型组(HFD)、植物乳杆菌S58(HFD+LP.S58)三组,每组10只。实验周期12周,NC组摄入基础饲料,HFD组和HFD+LP.S58组摄入高脂饲料,各组动物均自由饮水。NC组与HFD组每天灌胃10ml/kg·BW生理盐水,HFD+LP.S58每天灌胃1010CFU/kg·BW植物乳杆菌S58菌液。实验期间每7天称量一次体重,调整灌胃量。12周末,收集各组小鼠粪便,所有小鼠禁食不禁水18h,摘眼球取血,于4℃、3000r/min离心10min收集血清,-80℃保存备用;取血后脱颈椎处死,解剖取出肝组织、结肠组织、附睾脂肪组织,迅速称量肝组织、附睾脂肪组织重量;剪取适量大小肝组织、附睾脂肪组织,立即放入10%福尔马林溶液中固定48h;然后将所有组织置于液氮中冷冻,最终放入-80℃保存。
2.2 组织切片观察
固定好的组织经脱水、透明、浸蜡、包埋、切片后进行HE染色,最后在光学显微镜下观察组织形态变化。
2.4 血清指标的测定
按照试剂盒说明书对小鼠血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C、AST、ALT、AKP、ADP、LEP、GLP-1、PYY、LPS、IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ含量进行测定。
2.5 qPCR测定肝组织、结肠组织中mRNA的表达
按照Trizol(Invitrogen,美国加利福尼亚州卡尔斯巴德)说明书提取结肠总RNA,取RNA样品1μL,加入1μL(oligo)primer dT,10μL无菌超纯水,混合物于65℃反应5min;反应完成后,在反应体系中加入1μL Ribolock RNase Inhibitor、2μL 100mM dNTP mix、4μL5×Reaction buffer和1μL Revert AidM-mu/v RT,混合均匀后,在42℃、60min和70℃、5min条件下合成cDNA,用超微量分光光度计测定总DNA的纯度和浓度,然后将每个样本的DNA浓度调整到同一水平(1μg/μL);接着以表2所述引物序列对目标基因进行反转录和扩增。反应条件为:95℃变性15min,60℃退火1h,95℃延伸15min,总共40个循环;最后以DAPDH作为持家基因,通过2-ΔΔCT计算目的基因的相对表达量。
表2 实验中用到的引物序列
Figure BDA0002278369600000061
Figure BDA0002278369600000071
3 实验结果与分析
3.1 植物乳杆菌S58对肥胖小鼠体重的影响
造模过程中体重变化直观的反映了小鼠肥胖状况,高脂膳食小鼠体重每周平稳增长如图3(a)所示。12周末HFD组小鼠体重高于NC组体重20%,提示肥胖模型造模成功。HFD+LP.S58组小鼠体重增长得到很好的抑制。
12周末体重增加量更直观地显示了各组小鼠体重的变化,如图3(b)。高脂膳食造模后,HFD组(10.82±2.19g)体重增量比NC组(4.13±1.16)增加了61.85%。LP.S58干预治疗后,HFD+LP.S58(7.15±1.23)组体重增量比HFD组(10.82±2.19g)下降了33.92%。
3.2 植物乳杆菌S58对肥胖小鼠肝指数、脾指数、附睾脂肪指数的影响
脏器指数可以反应动物的生理状态。长期的高脂膳食会导致机体出现应激反应,肝脏脂质堆积导致导致肝肿大。另外,还会使脾脏胸腺等免疫器官发生变化。如图4(a)、4(b)所示,与HFD组(5.27±0.23)相比,HFD+LP.S58组(4.07±0.25)的肝指数下降了22.96%,而脾指数HFD+LP.S58组(0.29±0.07)则比HFD组(0.84±0.13)下降了65.48%。
衡量动物肥胖程度,不能单单依靠于体重的变化,还要依据于其体内脂肪的含量。附睾脂肪指数是小鼠附睾脂肪重量与体重的比值,更直观的反应了动物的脂肪积累程度。长期高脂膳食诱导小鼠形成肥胖,会使小鼠脂肪重量增加。如图4(c)所示,HFD组(4.80±1.38)附睾脂肪指数显著高于NC组(2.36±0.57),而经过LP.S58干预后,HFD+LP.S58组(2.81±0.97)附睾脂肪指数则比HFD组低41.46%。
3.3 植物乳杆菌S58对肥胖小鼠脂肪组织形态的影响
脂肪组织脂肪泡直径的大小能直观的反应小鼠的肥胖程度,由图5可知,HFD相较于NC组来说,脂肪泡直径增大,而HFD+LP.S58组相比于HFD组来说则减小。
3.4 植物乳杆菌S58对肥胖小鼠肝脏组织形态的影响
研究发现肥胖和脂肪肝的发生密切关联,肥胖机体常常会引起肝功能损伤。在正常肝组织内,肝细胞脂质的合成与排泄是保持动态平衡的,一般没有脂质堆积,不会有脂滴形成,然而当脂质在胞浆内,就会形成大小不等的脂滴,破坏肝细胞正常结构,影响肝脏功能。如图6所示,NC组小鼠肝细胞无脂肪变性等异常改变,肝组织结构清晰、完整,肝小叶结构正常,细胞界限清楚,细胞核位于中央。而HFD组肝组织小泡性脂肪变性,肝组织的脂肪含量增多,有大量脂肪空泡,细胞内容物流出,细胞肿胀,细胞壁完整性破坏。经过植物乳杆菌S58干预后,肝组织脂肪变性程度较HFD组显著减轻,肝细胞脂肪空泡更小更少,形态与NC组相似。
3.5 植物乳杆菌S58对肥胖小鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C的影响
当机体长期摄入高脂膳食,机体脂肪分解会加速,抑制脂质合成,产生过多的脂肪酸,使血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)水平增加。同时机体肥胖时,肝脏脂肪酶加速清除HDL-C(高密度脂蛋白胆固醇),使HDL-C含量降低,LDL-C(低密度脂蛋白胆固醇)含量升高。如图7所示,小鼠饲喂高脂膳食后血清TC、TG、LDL-C均显著升高,HDL-C显著降低,LP.S58能显著降低血清中TC、TG、LDL-C含量,显著升高HDL-C水平。
3.6 植物乳杆菌S58对肥胖小鼠血清ALT、AST、AKP的影响
肝脏是人体最大的解毒器官和脂代谢中心,谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(AKP)是肝脏功能诊断的重要指标,能够反映肝脏异常的程度。ALT和AST主要分布于肝细胞中,肝细胞坏死时ALT与AST便会释放于血液循环中,使血清酶上升,其上升的水平和肝组织异常的程度呈正相关。由图8可知,NC组中ALT、AST、AKP含量最低,而HFD组中ALT、AST、AKP含量最高,LP.S58作用后,ALT、AST、AKP含量相比于HFD组来说显著下降。
3.7 植物乳杆菌S58对肥胖小鼠血清LEP、ADP的影响
瘦素(LEP)是由白色脂肪组织分泌的蛋白质激素,其可以进入血液循环以调节饱腹感,能量消耗,炎症和免疫反应,研究已发现肥胖患者的血清LEP水平会增加,脂联素(ADP)是脂肪细胞分泌的一种内源性生物活性多肽或蛋白质,脂联素是一种胰岛素增敏激素,能改善小鼠的胰岛素抗性和动脉硬化症。如图9所示,与NC组相比,HFD组LEP含量显著上升,而ADP含量显著下降。而经过LP.S58干预后,LEP含量下降,ADP含量上升。
3.8 植物乳杆菌S58对肥胖小鼠血清GLP-1、PYY的影响
胰高血糖素样肽1(GLP-1)具有多种生物学效应,包括促进胰岛素分泌、控制食欲和抑制胃排空等作用;PYY与食物摄入、肠道蠕动和胰岛素分泌有关,作为一种肠道激素,PYY也有助于减轻肥胖。由图10可知,高脂膳食会使GLP-1、PYY含量显著下降,而补充益生菌后,GLP-1、PYY含量显著上升,且与NC组相当。
3.9 植物乳杆菌S58对肥胖小鼠血清LPS的影响
致病性肠道菌群刺激肠道上皮细胞的内毒素(LPS)产生和释放,同时,肠道菌群的紊乱造成了肠粘膜屏障受损,肠道通透性增加,从而使LPS轻松通过肠道粘膜层进入血液,随后LPS可以与细胞因子受体结合,从而引发促炎细胞因子的释放。通过消耗益生菌可以改变肠道菌群结构,从而改善肠屏障功能,减少肠上皮细胞分泌LPS,导致血液中促炎细胞因子的产生减少。如图11所示,NC组LPS含量最低,而HFD组LPS含量最高,益生菌能使LPS水平显著下降。
3.10 植物乳杆菌S58对肥胖小鼠血清IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ的影响
IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ是肥胖发生与发展中几种至关重要的促炎因子。IL-1β主要由单核巨噬细胞产生,可以引起肠道炎症和局部并发症。IL-6是一种由单核细胞、巨噬细胞、T细胞等多种细胞产生的多效性细胞因子,具有趋化白细胞,调节T细胞分化等多种功能。TNF-α可以通过NF-κB通路进一步激活其他促炎因子如IL-1β、IL-6等的表达,致使免疫应答紊乱。IFN-γ的主要生物学活性是免疫调节。由图12可知,相比较于NC组,HFD组IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ含量显著升高。LP.S58能减轻高脂膳食对小鼠造成的影响,使IL-6、IL-1β、TNF-α含量显著下降,但LP.S58对IFN-γ却无明显作用。
3.11 植物乳杆菌S58对肥胖小鼠肝组织中mRNA表达的影响
过氧化物媒体增殖物激活受体(PPAR)是调节目标基因表达的核内受体转录因子超家族成员,PPAR分为α,β,γ三种类型,其中PPAR-γ主要表达于脂肪组织中,与脂肪细胞的过度分化,脂肪细胞生成等分子机制相关,PPAR-γ不仅能调控脂代谢相关基因的表达,也是脂肪细胞基因表达和胰岛素细胞信号传导的主要调节者。C/EBP-α是脂肪细胞分化过程中起重要作用的转录因子,直接调节脂肪细胞分化。此外,C/EBP-α和PPAR-γ之间还具有协同作用,PPAR-γ的激活能引发C/EBP-α基因的表达,而C/EBP-α对PPAR-γ具有正反馈作用。SREBP-1c是脂质代谢相关蛋白的重要转录因子,包括脂肪酸合成酶(FAS)和硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1),另外,SREBP-1c还受PPAR-γ调控。CPT1是脂肪酸氧化过程中重要的一种限速酶,CPT1的水平变化与高脂血症疾病的发生有着密切的关系。LPL是一种蛋白水解酶,是脂代谢途径中的关键酶,其主要功能是催化血浆中的乳糜微粒和极低密度脂蛋白中TG分解为游离脂肪酸,并促进蛋白、磷脂和载脂蛋白的转运,从而促使HDL水平升高,因此,又称为TG水解酶。在肝组织中,HLS基因的高表达表明菌和糖可以减少脂肪酸摄入并且增强脂解作用,并因此缓解肥胖。
图13表示LP.S58对肝脏中PPAR-γ、C/EBP-α、SREBP-1c、FAS、SCD1、LPL、HLS、CPT1表达的影响,由图可知,与NC组相比,HFD组小鼠肝组织PPAR-γ、C/EBP-α、SREBP-1c、FAS、SCD1、LPL的表达量均显著增加,HLS、CPT1的表达显著降低,而LP.S58处理组则可以显著降低PPAR-γ、C/EBP-α、SREBP-1c、FAS、SCD1、LPL的表达,提高HLS的表达,且对CPT1的表达没有影响。
3.12 植物乳杆菌S58对肥胖小鼠结肠组织中mRNA表达的影响
肠道紧密连接蛋白主体是跨膜蛋白(claudin、occludin)和膜周蛋白(ZO)的复合体,其中ZO-1、Claudin和Occludin共同作用确保肠上皮紧密连接的功能正常。
图14示出了LP.S58对结肠中紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-5、Claudin-7表达的影响,由图可知,与NC组相比,HFD组中ZO-1、Occludin、Claudin-7的表达量均显著下降,经过LP.S58干预后,Occludin、Claudin-7的表达量有所上升,但ZO-1与HFD组相比没有显著变化;NC、HFD、HFD+LP.S58三组Claudin-5基因的表达量没有显著变化。
最后说明的是,以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制,尽管通过参照本发明的优选实施例已经对本发明进行了描述,但本领域的普通技术人员应当理解,可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变,而不偏离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围。
序列表
<110> 西南大学
<120> 植物乳杆菌S58及其在制备用于缓解肥胖的产品中的应用
<130> 3
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1928
<212> DNA
<213> 植物乳杆菌S58(Lactobacillus plantarumS58)
<400> 1
gggatgcgca tgctatacat gcagtcgaac gaactctggt attgattggt gcttgcatca 60
tgatttacat ttgagtgagt ggcgaactgg tgagtaacac gtgggaaacc tgcccagaag 120
cgggggataa cacctggaaa cagatgctaa taccgcataa caacttggac cgcatggtcc 180
gagtttgaaa gatggcttcg gctatcactt ttggatggtc ccgcggcgta ttagctagat 240
ggtggggtaa cggctcacca tggcaatgat acgtagccga cctgagaggg taatcggcca 300
cattgggact gagacacggc ccaaactcct acgggaggca gcagtaggga atcttccaca 360
atggacgaaa gtctgatgga gcaacgccgc gtgagtgaag aagggtttcg gctcgtaaaa 420
ctctgttgtt aaagaagaac atatctgaga gtaactgttc aggtattgac ggtatttaac 480
cagaaagcca cggctaacta cgtgccagca gccgcggtaa tacgtaggtg gcaagcgttg 540
tccggattta ttgggcgtaa agcgagcgca ggcggttttt taagtctgat gtgaaagcct 600
tcggctcaac cgaagaagtg catcggaaac tgggaaactt gagtgcagaa gaggacagtg 660
gaactccatg tgtagcggtg aaatgcgtag atatatggaa gaacaccagt ggcgaaggcg 720
gctgtctggt ctgtaactga cgctgaggct cgaaagtatg ggtagcaaac aggattagat 780
accctggtag tccataccgt aaacgatgaa tgctaagtgt tggagggttt ccgcccttca 840
gtgctgcagc taacgcatta agcattccgc ctggggagta cggccgcaag gctgaaactc 900
aaaggaattg acgggggccc gcacaagcgg tggagcatgt ggtttaattc gaaggaatct 960
gtcacttagg cggctggttc ctaaaaggtt accccaccga ctttgggtgt tacaaactct 1020
catggtgtga cgggcggtgt gtacaaggcc cgggaacgta ttcaccgcgg catgctgatc 1080
cgcgattact agcgattccg acttcatgta ggcgagttgc agcctacaat ccgaactgag 1140
aatggcttta agagattagc ttactctcgc gagttcgcaa ctcgttgtac catccattgt 1200
agcacgtgtg tagcccaggt cataaggggc atgatgattt gacgtcatcc ccaccttcct 1260
ccggtttgtc accggcagtc tcaccagagt gcccaactta atgctggcaa ctgataataa 1320
gggttgcgct cgttgcggga cttaacccaa catctcacga cacgagctga cgacaaccat 1380
gcaccacctg tatccatgtc cccgaaggga acgtctaatc tcttagattt gcatagtatg 1440
tcaagacctg gtaaggttct tcgcgtagct tcgaattaaa ccacatgctc caccgcttgt 1500
gcgggccccc gtcaattcct ttgagtttca gccttgcggc cgtactcccc aggcggaatg 1560
cttaatgcgt tagctgcagc actgaagggc ggaaaccctc caacacttag cattcatcgt 1620
ttacggtatg gactaccagg gtatctaatc ctgtttgcta cccatacttt cgagcctcag 1680
cgtcagttac agaccagaca gccgccttcg ccactggtgt tcttccatat atctacgcat 1740
ttcaccgcta cacatggagt tccactgtcc tcttctgcac tcaagtttcc cagtttccga 1800
tgcacttctt cggttgagcc gaaggctttc acatcagact taaaaaaccg cctgcgctcg 1860
ctttacgccc aataaatccg gacaacgctt gccacctacg tattaccgcg gctgctggca 1920
cgtagtta 1928

Claims (9)

1.一种植物乳杆菌S58(Lactobacillus plantarumS58),其保藏编号为CCTCC NO:M2019595。
2.权利要求1所述的植物乳杆菌S58在制备预防或治疗肥胖症或肥胖所引起的代谢性疾病的药物中的应用。
3.权利要求1所述的植物乳杆菌S58在制备预防或缓解肥胖的食品中的应用。
4.权利要求1所述的植物乳杆菌S58在制备预防或缓解肥胖的保健品中的应用。
5.一种用于预防或治疗肥胖症或肥胖所引起的代谢性疾病的药物组合物,其特征在于:所述药物组合物中含有保藏编号为CCTCC NO:M 2019595的药学有效剂量的植物乳杆菌S58。
6.一种用于预防或缓解肥胖的食品,其特征在于:所述食品中含有保藏编号为CCTCCNO:M 2019595的植物乳杆菌S58。
7.一种用于预防或缓解肥胖的食品添加剂,其特征在于:所述食品添加剂中含有保藏编号为CCTCC NO:M 2019595的植物乳杆菌S58。
8.一种用于预防或缓解肥胖的的保健品,其特征在于:所述保健品中含有保藏编号为CCTCC NO:M 2019595的植物乳杆菌S58。
9.一种抗肥胖剂,其特征在于:所述抗肥胖剂中含有保藏编号为CCTCC NO:M 2019595的植物乳杆菌S58。
CN201911131324.8A 2019-11-19 2019-11-19 植物乳杆菌s58及其在制备用于缓解肥胖的产品中的应用 Active CN110684701B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911131324.8A CN110684701B (zh) 2019-11-19 2019-11-19 植物乳杆菌s58及其在制备用于缓解肥胖的产品中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911131324.8A CN110684701B (zh) 2019-11-19 2019-11-19 植物乳杆菌s58及其在制备用于缓解肥胖的产品中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110684701A true CN110684701A (zh) 2020-01-14
CN110684701B CN110684701B (zh) 2021-02-12

Family

ID=69117030

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201911131324.8A Active CN110684701B (zh) 2019-11-19 2019-11-19 植物乳杆菌s58及其在制备用于缓解肥胖的产品中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110684701B (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111793577A (zh) * 2020-07-02 2020-10-20 重庆第二师范学院 一种具有减肥降脂功能的植物乳杆菌及其应用
CN111909869A (zh) * 2020-07-23 2020-11-10 大连工业大学 植物乳杆菌y44及其在制备缓解肥胖或抗高血脂症药物或保健品中的应用
CN113444669A (zh) * 2021-07-27 2021-09-28 中国海洋大学 一株植物乳杆菌Lactobacillus plantarum F3-2及其应用
CN114164149A (zh) * 2021-11-29 2022-03-11 南昌大学 一株缓解肥胖和铅毒性的植物乳杆菌p101及其应用
CN114621896A (zh) * 2022-03-23 2022-06-14 广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) 一株具有降糖降脂功能的植物乳杆菌84-3及其应用

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20180264054A1 (en) * 2017-03-20 2018-09-20 Tci Co., Ltd Lactobacillus plantarum tci378 and its uses in losing fat and improving gastrointestinal functions
CN108570436A (zh) * 2017-12-14 2018-09-25 浙江大学 植物乳杆菌zjuf t17及其应用
KR20190090407A (ko) * 2017-12-26 2019-08-02 주식회사 종근당바이오 항비만 효과를 갖는 락토바실러스 플란타룸 k10 균주 및 이의 용도
KR20190090408A (ko) * 2017-12-26 2019-08-02 주식회사 종근당바이오 항비만 효과를 갖는 락토바실러스 플란타룸 k50 균주 및 이의 용도
CN110283749A (zh) * 2019-07-02 2019-09-27 北京科拓恒通生物技术股份有限公司 一株分离的植物乳杆菌p-01及其应用
CN111035662A (zh) * 2019-11-19 2020-04-21 西南大学 植物乳杆菌s58在制备用于缓解辛辣食品对消化系统损伤的产品中的应用

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20180264054A1 (en) * 2017-03-20 2018-09-20 Tci Co., Ltd Lactobacillus plantarum tci378 and its uses in losing fat and improving gastrointestinal functions
CN108570436A (zh) * 2017-12-14 2018-09-25 浙江大学 植物乳杆菌zjuf t17及其应用
KR20190090407A (ko) * 2017-12-26 2019-08-02 주식회사 종근당바이오 항비만 효과를 갖는 락토바실러스 플란타룸 k10 균주 및 이의 용도
KR20190090408A (ko) * 2017-12-26 2019-08-02 주식회사 종근당바이오 항비만 효과를 갖는 락토바실러스 플란타룸 k50 균주 및 이의 용도
CN110283749A (zh) * 2019-07-02 2019-09-27 北京科拓恒通生物技术股份有限公司 一株分离的植物乳杆菌p-01及其应用
CN111035662A (zh) * 2019-11-19 2020-04-21 西南大学 植物乳杆菌s58在制备用于缓解辛辣食品对消化系统损伤的产品中的应用

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
J-E PARK等: ""Lactobacillus plantarum LG42 isolated from gajami sik-hae decreases body and fat pad weights in diet-induced obese mice"", 《J APPL MICROBIOL》 *
SEULKI KIM等: ""Physiological Characteristics and Anti-obesity Effect of Lactobacillus plantarum K10"", 《KREAN JOURNAL FOR FOOD SCIENCE OF ANIMAL RESOURCES》 *
TIAN TANG等: ""A synbiotic consisting of Lactobacillus plantarum S58 and hull-less barley β-glucan ameliorates lipid accumulation in mice fed with a high-fat diet by activating AMPK signaling and modulating the gut microbiota"", 《CARBOHYDRATE POLYMERS》 *
林诗伟等: ""植物乳杆菌GKM3益生菌对高脂饮食肥胖大鼠之影响"", 《食品与营养科学》 *
王俊国等: ""植物乳杆菌LIP-1对高血脂症大鼠血脂的调节作用"", 《中国食品学报》 *
辛金鸽等: ""植物乳杆菌F的筛选及对大鼠体脂的影响"", 《中国农业大学学报》 *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111793577A (zh) * 2020-07-02 2020-10-20 重庆第二师范学院 一种具有减肥降脂功能的植物乳杆菌及其应用
CN111793577B (zh) * 2020-07-02 2022-02-11 重庆第二师范学院 一种具有减肥降脂功能的植物乳杆菌及其应用
CN111909869A (zh) * 2020-07-23 2020-11-10 大连工业大学 植物乳杆菌y44及其在制备缓解肥胖或抗高血脂症药物或保健品中的应用
CN113444669A (zh) * 2021-07-27 2021-09-28 中国海洋大学 一株植物乳杆菌Lactobacillus plantarum F3-2及其应用
CN114164149A (zh) * 2021-11-29 2022-03-11 南昌大学 一株缓解肥胖和铅毒性的植物乳杆菌p101及其应用
CN114164149B (zh) * 2021-11-29 2023-10-03 南昌大学 一株缓解肥胖和铅毒性的植物乳杆菌p101及其应用
CN114621896A (zh) * 2022-03-23 2022-06-14 广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) 一株具有降糖降脂功能的植物乳杆菌84-3及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN110684701B (zh) 2021-02-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110684701B (zh) 植物乳杆菌s58及其在制备用于缓解肥胖的产品中的应用
CN113151056B (zh) 益生菌组合物、其制备方法和用途
US7901926B2 (en) Lactobacillus isolates having anti-inflammatory activities and uses of the same
Huang et al. The hypocholesterolaemic effects of Lactobacillus acidophilus American Type Culture Collection 4356 in rats are mediated by the down-regulation of Niemann-Pick C1-Like 1
CN111254090B (zh) 一株具有减肥功能的罗伊氏乳杆菌及其应用
CN114317353B (zh) 一种植物乳杆菌zjufyj7及其应用
CN114181864B (zh) 一种鼠李糖乳杆菌hf01及其应用
CN109662976B (zh) 一种鼠李糖乳杆菌在制备预防溃疡性结肠炎的药品中的应用
CN109593678B (zh) 长双歧杆菌yh295及其在制备降低腹型肥胖风险产品中的应用
WO2018218694A1 (zh) 具有头孢抗性且高表达Sir2蛋白的长双歧杆菌及其应用
CN111686133A (zh) 杜氏杆菌在预防和改善肥胖及其相关疾病中的应用
CN111035662B (zh) 植物乳杆菌s58在制备用于缓解辛辣食品对消化系统损伤的产品中的应用
CN114480193A (zh) 凝结芽孢杆菌在制备改善高血糖高血脂引起的机体功能下降的食品或药物方面的应用
CN114107088B (zh) 一种罗伊氏乳杆菌lrsy523及其应用
CN114344344B (zh) 罗伊氏乳杆菌在缓解高脂饮食诱导小鼠肥胖功能中的应用及含有罗伊氏乳杆菌的复合物
CN113717883B (zh) 促进机体健康长寿的植物乳杆菌flpl05及其应用
CN113337440B (zh) 一株唾液乳杆菌mg-587及其应用
CN113005060A (zh) 青春双歧杆菌ccfm1173在制备功能性菌剂、食品和或药物中的应用
CN108048353B (zh) 一株高表达亚油酸异构酶lai的罗伊乳杆菌hi120及其应用
CN114437968B (zh) 一株具有缓解肥胖功能的嗜酸乳杆菌nx2-6及应用
CN116064313A (zh) 植物乳杆菌ccfm1281在缓解运动性疲劳中的应用
CN116555075A (zh) 一株植物乳植杆菌jf1及其在制备抗衰老食品药品中的应用
CN113207960B (zh) 改善肥胖的乳双歧杆菌MN-Gup发酵乳及制备方法
CN114410532A (zh) 一株降低血浆氧化三甲胺和盲肠三甲胺水平的长双歧杆菌及其应用
CN116606761B (zh) 一种能够缓解类风湿性关节炎的动物双歧杆菌乳亚种BLa19及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant