CN110659689B - 基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法 - Google Patents

基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110659689B
CN110659689B CN201910912416.3A CN201910912416A CN110659689B CN 110659689 B CN110659689 B CN 110659689B CN 201910912416 A CN201910912416 A CN 201910912416A CN 110659689 B CN110659689 B CN 110659689B
Authority
CN
China
Prior art keywords
marmorus
marmoratus
population
fish
sample
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201910912416.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110659689A (zh
Inventor
徐胜勇
蔡珊珊
高天翔
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhejiang Ocean University ZJOU
Original Assignee
Zhejiang Ocean University ZJOU
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhejiang Ocean University ZJOU filed Critical Zhejiang Ocean University ZJOU
Priority to CN201910912416.3A priority Critical patent/CN110659689B/zh
Publication of CN110659689A publication Critical patent/CN110659689A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110659689B publication Critical patent/CN110659689B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G06—COMPUTING; CALCULATING OR COUNTING
    • G06F—ELECTRIC DIGITAL DATA PROCESSING
    • G06F18/00—Pattern recognition
    • G06F18/20—Analysing
    • G06F18/23—Clustering techniques
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; CARE OF BIRDS, FISHES, INSECTS; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K61/00—Culture of aquatic animals
    • A01K61/10—Culture of aquatic animals of fish
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
    • Y02A40/81—Aquaculture, e.g. of fish

Abstract

本发明提供基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法，属于种质鉴定领域，包括：提供上述褐菖鲉的种群样品；提供上述褐菖鲉样品的活体保存方法；以及，对上述褐菖鲉的种群样品进行形态指标测定和分析以获取种群信息；上述褐菖鲉样品的活体保存方法包括使鱼体接触包埋有至少一种抗氧化的活性多糖的玻璃质基质溶液。本发明提供的鉴定方法客观性和鉴别准确率高，测量值误差小，测量难度和运输困难程度低，损耗和成本低；该方法能延长活体鱼的活体有效期限，在运输温度偏高或偏低的环境下仍能保持较高活力，缓冲外部机械压力和损伤，鱼体结构保护性强，活体鱼死亡率低，测量期间鱼体体表黏液去除迅速且不继续释放黏液，降低系统误差。

Description

基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法
技术领域
本发明属于种质鉴定领域，具体涉及基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法。
背景技术
褐菖鲉隶属于鲉形目、鲉科、菖鲉属，俗称石狗公、虎头鱼等，是一种近海卵胎生海洋鱼类，主要分布于西北太平洋海域日本至菲律宾近海，为岩礁性、底栖型鱼类。其肉质鲜美，营养价值高，是一种重要的近海经济鱼类，也是人工养殖和增殖放流的潜在优良品种。目前对褐菖鲉的研究主要集中在生理生化、生物学和遗传学研究，对其群体研究的相关报道较少，本发明基于褐菖鲉的形态指标进行统计分析，通过比较各群体间形态变异，对褐菖鲉种群进行鉴定，以期为褐菖鲉资源管理与保护提供理论依据，同时为褐菖鲉的遗传学研究提供基础资料。
目前的鱼类种质鉴定方法主要有两大类，形态学方法、生化与分子遗传学方法，各有其优缺点。分子遗传学方法能从根本上去揭示其遗传物质特征，进行物种鉴定和亲缘关系分析。但操作技术较复杂，对仪器设备要求高，整个过程较耗时。比如应用RAPD技术分析，容易出现非特异性扩增；AFLP技术在鱼类种质检测中多用于mtDNA多态性研究，而mtDNA具有一定的遗传局限性；而微卫星技术需要大量筛选分子标记。相对而言，形态学方法更为直观、简便易行。对操作人员要求低，推广起来比较容易，在野外工作中更方便实践。
发明内容
本发明的目的在于提供一种客观性和鉴定准确率高，测量值误差小，测量难度和运输困难程度低，损耗和成本低的基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法，且该方法能延长活体鱼的活体有效期限，在运输温度偏高或偏低的环境下仍能保持较高活力，缓冲外部机械压力和损伤，鱼体结构保护性强，活体鱼死亡率低，测量期间鱼体体表黏液去除迅速且不继续释放黏液，降低系统误差。
本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：
基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法，包括：提供上述褐菖鲉的种群样品；提供上述褐菖鲉样品的活体保存方法；以及，对上述褐菖鲉的种群样品进行形态指标测定和分析以获取种群信息；上述褐菖鲉样品的活体保存方法包括使鱼体接触包埋有至少一种抗氧化的活性多糖的玻璃质基质溶液。该方法样品保存方便且受外界环境影响小，系统误差小，客观性和鉴定准确率强，克服了传统形态学方法判别率低的局限。该方法中的活体保存方法能更好地稳定活体样品的活性，延长其活体有效期限，降低运输成本，样品的清理方法能去除鱼体表面的黏性物质，使得黏性物质被彻底清除而减少了干扰因素，检测值误差变小，增加鉴定准确率。
对本发明而言，褐菖鲉的种群样品包括地理种群，上述种群还包括野生群体和人工养殖群体。地理环境对种群的生长发育及遗传变异具有一定影响，人工养殖群体和野生群体也具有环境影响导致的差异，如头长、体长、胸/腹/背/尾鳍条数等生理特征不足以形成划分种群结构的特征，因此提供了新的群体鉴定方法。
对本发明而言，褐菖鲉的种群样品采集时，选择完全性成熟的个体，体长范围为115-220mm。样品均为近海捕捞获得的1年龄以上的雌雄个体，对雌雄个体进行独立样本t检验，结果显示褐菖鲉雌雄个体的差异不显著，故统一采用雌雄个体各半进行测量和数据分析。
对本发明而言，褐菖鲉样品的活体保存方法包括：将活体鱼置于温度为4-10℃的环境中暂养1-2h，然后使鱼体直接接触包埋抗氧化的活性多糖的玻璃质基质溶液30-60min，然后将活体鱼置于正常环境下保存及运输。活体鱼经过低温降温后，体内抗应激活性因子如超氧化物歧化酶、谷胱甘肽等含量增加，增强了活体鱼的抗应激能力，再通过活性多糖的玻璃质基质溶液减缓鱼体的氧化作用，能提供对活体鱼的生物活性和结构保护，延长其活体有效期限，达到保鲜保活的目的，避免在运输中死亡，降低损耗和成本，还能避免冰冻冷藏运输使鱼体发生收缩而影响测量准确度，减小了测量误差，增加了分析结果准确性。
对本发明而言，活性多糖选自羊栖菜多糖、螺旋藻多糖、盐藻多糖中的至少一种，上述活性多糖的平均重均分子量为60-200kDa，活性多糖在玻璃质基质溶液中的浓度为2-5％。活性多糖能提供活体鱼的活性保护，增强其抗氧化性，并维持其活力，对活体鱼起到了稳定活性的保护作用。
对本发明而言，玻璃质基质选自糖醇、环糊精、瓜尔胶、聚烯吡酮中的至少一种，上述基质形成的溶液浓度为40-50％。玻璃质基质附着于活体鱼表面利用其亲和性能保护鱼体结构，对鱼体具有结构稳定和保护作用。
对本发明而言，玻璃质基质溶液中还包括重量占比分别为0.15-0.5％的山梨酸、0.1-1％的没食子酸、0.05-0.1％的羟基乙叉二膦酸和0.05-0.15％的酞酸二甲酯。鱼体在玻璃质基质溶液中活动，使得溶液中物质与鱼体表面充分接触并附着在表面形成抗氧化保护膜，羟基乙叉二膦酸和酞酸二甲酯能与鱼体表面黏液形成螯合作用，再吸附玻璃质基质形成稳定的混合膜，使得混合膜结构具有层次性分布的特点，能阻止微生物向内扩散，还能缓冲外部机械压力和损伤，对鱼体结构保护性增强，另一方面两者能与黏液形成传质向内渗透，使得鱼体血清中谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT)活性维持在较高的水平，增强鱼体应对温度变化的能力，使得鱼体在运输温度偏高或偏低的环境下仍能保持较高活力，降低运输困难程度，减少活体鱼死亡率，降低了损耗和成本。
对本发明而言，对褐菖鲉的种群样品进行测定前，提供麻醉处理使鱼体舒展；上述麻醉处理步骤为：将鱼体置于含氧量不小于10mg/L、含有清洗剂的水体中，然后置于0-5℃的冰浴中处理20-60min，将鱼取出，用水冲洗2-3次即可进行后续测量。优选的，含有清洗剂的水体中含氧量为10-20mg/L。
对本发明而言，清洗剂中包括以下原料及其重量份：竹醋液5-10份、酒精0.5-3份、羟基磷灰石粉0.5-1份。清洗剂不会对鱼体产生不利影响，也能去除鱼体表面的黏性物质，避免了体表黏液干扰测定结果的问题，增加样品测定结果准确度，降低系统误差，提高鉴定准确率。
对本发明而言，褐菖鲉的种群样品测量的形态指标包括25个参数；上述参数中包括11个计数性状特征值和14个量度特征值。
对本发明而言，计数性状特征值包括背鳍鳍棘数、背鳍软条数、胸鳍鳍条数、腹鳍鳍棘数、腹鳍软条数、臀鳍鳍棘数、臀鳍软条数、尾鳍鳍条数、脊椎骨数、上鳃耙数和下鳃耙数。
对本发明而言，量度特征值包括体高/体长(A)、尾柄长/尾柄高(B)、头长/体长(C)、吻长/头长(D)、上颌长/头长(E)、眼径/头长(F)、眼间距/头长(G)、眼后头长/头长(H)、吻至背鳍起点/体长(I)、腹鳍起点至臀鳍起点/体长(J)、背鳍基长/体长(K)、臀鳍基长/体长(L)、腹鳍长/体长(M)、胸鳍长/体长(N)。
对本发明而言，形态指标的分析方法采用判别分析、聚类分析中的至少一种。判别分析和聚类分析能够直观的表现各群体间差异，其中聚类方法为组间联接，构建聚类关系树，判别分析结果正确率较高，皆能直观地表现出群体间的形态学差异。
本发明的有益效果为：
1)本发明利用活体鱼进行形态测定，能避免冰冻冷藏运输使鱼体发生收缩而影响测量准确度，活体保存方法能稳定活体样品的活性，增强抗氧化和抗应激能力，延长其活体有效期限，避免在运输中死亡，降低损耗和成本，测量值误差降低，增加分析结果准确性；
2)本发明中利用低温降温措施配合含活性多糖的玻璃质基质在活体样品表面形成保护，能阻止微生物向内扩散，能缓冲外部机械压力和损伤，对鱼体结构保护性增强，还能使得鱼体血清中谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT)活性维持在较高的水平，使得鱼体在运输温度偏高或偏低的环境下仍能保持较高活力，降低运输困难程度，减少活体鱼死亡率；
3)本发明中利用清洗剂配合冰浴降低黏液的疏水作用，使得黏液内部松散更易脱落，所用时间缩短了10-30％，同时还抑制了鱼体中黏液细胞活性，进而使得鱼体测量期间体表不释放黏液，降低测量难度，避免了体表黏液干扰测定结果的问题，增加样品测定结果准确度，降低系统误差，提高鉴定准确率。
本发明采用了上述技术方案提供基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法，弥补了现有技术的不足，设计合理，操作方便。
附图说明
图1为暂养期间试验鱼血清中谷丙转氨酶活性的变化示意图；
图2为暂养期间试验鱼血清中谷草转氨酶活性的变化示意图；
图3为基于前两个判别函数值的散点图；
图4为褐菖鲉群体聚类关系树。
具体实施方式
以下结合具体实施方式和附图对本发明的技术方案作进一步详细描述：
实施例1：
基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法，包括：提供上述褐菖鲉的种群样品；提供上述褐菖鲉样品的活体保存方法；以及，对上述褐菖鲉的种群样品进行形态指标测定和分析以获取种群信息；上述褐菖鲉样品的活体保存方法包括使鱼体接触包埋有至少一种抗氧化的活性多糖的玻璃质基质溶液。该方法样品保存方便且受外界环境影响小，系统误差小，客观性和鉴定准确率强，克服了传统形态学方法判别率低的局限。该方法中的活体保存方法能更好地稳定活体样品的活性，延长其活体有效期限，降低运输成本，样品的清理方法能去除鱼体表面的黏性物质，使得黏性物质被彻底清除而减少了干扰因素，检测值误差变小，增加鉴定准确率。
上述褐菖鲉的种群样品包括地理种群，上述种群还包括野生群体和人工养殖群体。本实施例中样品来自中国的惠州、海口和日本的伯方岛、横须贺，采样数量分别为34尾、28尾、36尾、30尾，雌雄各半。地理环境对种群的生长发育及遗传变异具有一定影响，人工养殖群体和野生群体也具有环境影响导致的差异，如头长、体长、胸/腹/背/尾鳍条数等生理特征不足以形成划分种群结构的特征，因此提供了新的群体鉴定方法。
上述褐菖鲉的种群样品采集时，选择完全性成熟的个体，体长范围为115-220mm。样品均为近海捕捞获得的1年龄以上的雌雄个体，对雌雄个体进行独立样本t检验，结果显示褐菖鲉雌雄个体的差异不显著，故统一采用雌雄个体各半进行测量和数据分析。
上述褐菖鲉样品的活体保存方法包括：将活体鱼置于温度为4℃的环境中暂养1h，然后使鱼体直接接触包埋抗氧化的活性多糖的玻璃质基质溶液45min，然后将活体鱼置于正常环境下保存及运输。活体鱼经过低温降温后，体内抗应激活性因子如超氧化物歧化酶、谷胱甘肽等含量增加，增强了活体鱼的抗应激能力，再通过活性多糖的玻璃质基质溶液减缓鱼体的氧化作用，能提供对活体鱼的生物活性和结构保护，延长其活体有效期限，达到保鲜保活的目的，避免在运输中死亡，降低损耗和成本，还能避免冰冻冷藏运输使鱼体发生收缩而影响测量准确度，减小了测量误差，增加了分析结果准确性。
上述活性多糖为羊栖菜多糖和螺旋藻多糖等比例混合物，上述活性多糖的平均重均分子量为100kDa，活性多糖在玻璃质基质溶液中的浓度为2.5％。活性多糖能提供活体鱼的活性保护，增强其抗氧化性，并维持其活力，对活体鱼起到了稳定活性的保护作用。
上述玻璃质基质为环糊精和聚烯吡酮的混合物，其重量比为2:1，上述基质形成的溶液浓度为40％。玻璃质基质附着于活体鱼表面利用其亲和性能保护鱼体结构，对鱼体具有结构稳定和保护作用。
上述玻璃质基质溶液中还包括重量占比分别为0.15％的山梨酸、0.5％的没食子酸、0.05％的羟基乙叉二膦酸和0.05％的酞酸二甲酯。鱼体在玻璃质基质溶液中活动，使得溶液中物质与鱼体表面充分接触并附着在表面形成抗氧化保护膜，羟基乙叉二膦酸和酞酸二甲酯能与鱼体表面黏液形成螯合作用，再吸附玻璃质基质形成稳定的混合膜，使得混合膜结构具有层次性分布的特点，能阻止微生物向内扩散，还能缓冲外部机械压力和损伤，对鱼体结构保护性增强，另一方面两者能与黏液形成传质向内渗透，使得鱼体血清中谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT)活性维持在较高的水平，增强鱼体应对温度变化的能力，使得鱼体在运输温度偏高或偏低的环境下仍能保持较高活力，降低运输困难程度，减少活体鱼死亡率，降低了损耗和成本。
上述对褐菖鲉的种群样品进行测定前，提供麻醉处理使鱼体舒展；上述麻醉处理步骤为：将鱼体置于含氧量不小于10mg/L、含有清洗剂的水体中，然后置于0℃的冰浴中处理60min，将鱼取出，用水冲洗2次即可进行后续测量。优选的，含有清洗剂的水体中含氧量为15mg/L。
上述清洗剂中包括以下原料及其重量份：竹醋液7份、酒精2.5份、羟基磷灰石粉0.5份。清洗剂不会对鱼体产生不利影响，也能去除鱼体表面的黏性物质，避免了体表黏液干扰测定结果的问题，增加样品测定结果准确度，降低系统误差，提高鉴定准确率。
上述褐菖鲉的种群样品测量的形态指标包括25个参数；上述参数中包括11个计数性状特征值和14个量度特征值。
上述计数性状特征值包括背鳍鳍棘数、背鳍软条数、胸鳍鳍条数、腹鳍鳍棘数、腹鳍软条数、臀鳍鳍棘数、臀鳍软条数、尾鳍鳍条数、脊椎骨数、上鳃耙数和下鳃耙数。
上述量度特征值包括体高/体长(A)、尾柄长/尾柄高(B)、头长/体长(C)、吻长/头长(D)、上颌长/头长(E)、眼径/头长(F)、眼间距/头长(G)、眼后头长/头长(H)、吻至背鳍起点/体长(I)、腹鳍起点至臀鳍起点/体长(J)、背鳍基长/体长(K)、臀鳍基长/体长(L)、腹鳍长/体长(M)、胸鳍长/体长(N)。
上述形态指标的分析方法采用判别分析。判别分析能够直观的表现各群体间差异，判别分析结果正确率较高，能直观地表现出群体间的形态学差异。
实施例2：
基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法，包括以下步骤：
(1)在中国的惠州、海口和日本的伯方岛、横须贺近海采集褐菖鲉性成熟个体，采样数量分别为34尾、28尾、36尾、30尾，雌雄各半，体长范围为115-220mm；
(2)将采集的样品活体鱼置于温度为4-10℃的环境中暂养1-2h，然后将鱼体放入浓度为45％的玻璃质基质溶液中45min，取出，然后将活体鱼置于正常环境下保存及运输，上述玻璃质基质为环糊精和瓜尔胶等比例混合物，上述玻璃质基质溶液中含有浓度为3.5％的活性多糖，活性多糖为螺旋藻多糖，其平均重均分子量为80kDa，上述上述玻璃质基质溶液中还包括重量占比分别为0.35％的山梨酸、1％的没食子酸、0.08％的羟基乙叉二膦酸和0.12％的酞酸二甲酯；
(3)选择运至实验室的活体鱼中活力好、无损伤的鱼作为试验样品，将鱼体置于含氧量为17mg/L、含有清洗剂的水体中，然后置于0℃的冰浴中处理50min，将鱼取出，用水冲洗3次，即完成麻醉处理，可进行后续测量，上述清洗剂中包括以下原料及其重量份：竹醋液8份、酒精3份、羟基磷灰石粉1份；
(4)对样品的计数性状直接计数，上述计数性状的11个特征值包括背鳍鳍棘数、背鳍软条数、胸鳍鳍条数、腹鳍鳍棘数、腹鳍软条数、臀鳍鳍棘数、臀鳍软条数、尾鳍鳍条数、脊椎骨数、上鳃耙数和下鳃耙数；
(5)对样品进行测量，测量值包括体长、体高、尾柄长、尾柄高、头长、吻长、上颌长、眼径、眼间距、眼后头长、吻至背鳍起点、腹鳍起点至臀鳍起点、背鳍基长、臀鳍基长、腹鳍长、胸鳍长，并计算出14个量度特征值，上述量度特征值包括体高/体长(A)、尾柄长/尾柄高(B)、头长/体长(C)、吻长/头长(D)、上颌长/头长(E)、眼径/头长(F)、眼间距/头长(G)、眼后头长/头长(H)、吻至背鳍起点/体长(I)、腹鳍起点至臀鳍起点/体长(J)、背鳍基长/体长(K)、臀鳍基长/体长(L)、腹鳍长/体长(M)、胸鳍长/体长(N)；
(6)对上述14个量度特征指标和11个计数性状特征指标平均值进行聚类分析，聚类分析使用平方Euclidean距离系数，构建聚类关系树。
实施例3：
本实施例与实施例1的不同之处仅在于：含有清洗剂的水体中还分散有0.04mM的脱落酸和0.11mM的月桂氮酮，清洗剂破坏酸碱平衡以降低黏液的黏度，使得黏液阻止被破坏并脱落，脱落酸和月桂氮酮渗入黏液内部后，能破坏黏液中糖蛋白所含寡糖肽与多肽链之间的共价结构，降低黏液的疏水作用，使得黏液内部松散更易脱落，所用时间缩短了10-30％，黏液被彻底清除而减少了干扰因素，使得检测值误差变小，增加鉴定准确率，另一方面两者能与鱼体的黏液细胞中的黏蛋白结合，并产生刺激作用，抑制黏液细胞活性，进而使得鱼体测量期间体表不释放黏液，降低测量难度，提升测量结果的准确度。
实施例4：
本实施例与实施例1的不同之处仅在于：褐菖鲉样品的活体保存步骤中所用玻璃质基质溶液中未添加羟基乙叉二膦酸和酞酸二甲酯。
试验例1：
不同保存及清洗方法对样品的影响
(1)按照实施例1-4中的方法分别对样品鱼进行活体保存，在相同条件下进行运输，并对经运输后的活体鱼机械损伤造成的死亡率进行统计，再按照实施例1-4中的方法分别对样品鱼进行清洗，清洗完成后，对鱼体表面的黏液和滑腻程度进行感官测试，同时将清洗后的活体鱼在无菌水中暂养4h，观察鱼体体表黏液分泌的情况，进行统计和分析，结果如下表1所示。
表1不同保存及清洗方法对样品的影响结果
Figure GDA0004143201120000081
由上表可知，实施例4的死亡率最高，其他3组的死亡率之间差异不显著，说明实施例4中的活体保存方法较其他组而言对鱼体的保护性不强；实施例3较其他组的清洗时间最短，但清洗后鱼体感官之间无显著差异，都能较好的去除体表黏液，但在4h暂养后，实施例3的鱼体表面有少量黏液分泌，而其他组的黏液较实施例3更多，且手感较实施例3更黏腻，容易在测量中造成误差，实施例3中的清洗方法能缩短体表黏液的去除时间，还能抑制鱼体表黏液的释放，降低测量难度，提升测量结果的准确度。
(2)不同保存方法对样品运输过程的影响
分别取同种群的36尾、雌雄各半的鱼体分为两组，按照实施例1和4的方法进行保存，然后分别将每组鱼随机分为3个小组，分别在25℃、30℃、15℃条件下进行暂养，其他条件相同，暂养5天，利用试剂盒对鱼体内血清中谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT)活性进行测定，并观察鱼体的活泼程度，统计及分析结果如附图1、2所示。
图1为暂养期间试验鱼血清中谷丙转氨酶活性的变化示意图，图2为暂养期间试验鱼血清中谷草转氨酶活性的变化示意图。由图可知，实施例1和实施例4在25℃条件下暂养时，鱼体血清中谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT)活性之间差异不大，变化起伏较小；实施例1在30℃和15℃条件下暂养时，两种酶活性皆保持在较高的水平上，且变化较平稳；实施例4在30℃和15℃条件下暂养时，两种酶活性在前2天能保持高活性，然后呈明显的下降趋势，且最终活性较实施例1低；谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT)活性高，能增强鱼体对温度胁迫的抵抗能力，实施例1和4之间的差异，说明实施例1中方法更能增强鱼体应对温度变化的能力，使得鱼体在运输温度偏高或偏低的环境下仍能保持较高活力，降低运输困难程度，减少活体鱼死亡率，降低了损耗和成本。
试验例2：
不同分析方法对褐菖鲉种群鉴定的影响
分别根据实施例1和实施例2中的判别分析和聚类分析对鱼体的形态指标进行鉴定，结果如附表、附图所示。试验样品信息如下表2所示，褐菖鲉群体计数性状特征值如下表3所示。
表2褐菖鲉观测样品的数量和规格信息
数量/尾 体长均值/mm 体长范围/mm 体重均值/g 体重范围/g
惠州 32 148.3 123-187 126.5 90-215
海口 28 156.2 124-216 123.9 86-212
伯方岛 34 162.5 110-215 158.3 103-228
横须贺 28 158.1 114-196 145.6 94-221
表3褐菖鲉群体计数性状特征值
惠州 海口 伯方岛 横须贺
背鳍鳍棘数 12 12 12 12
背鳍软条数 14 14 14 14
胸鳍鳍条数 18 18 18 18
腹鳍鳍棘数 1 1 1 1
腹鳍软条数 5 5 5 5
臀鳍鳍棘数 3 3 3 3
臀鳍软条数 6 6 6 6
尾鳍鳍条数均值 14.9 14.8 15.0 15.1
脊椎骨数 25 25 25 25
上鳃耙数均值 5.2 5.3 5.1 5.2
下鳃耙数均值 11.5 11.4 11.7 11.8
(1)判别分析：运用判别分析方法对褐菖鲉14个量度特征值进行分析，得到11个变量构建的判别方程式，判别方程式如下：
海口：Y＝487A+49B+1586C+539D+198E+898F+527G+1149H+239J-32M-488N-992，
惠州：Y＝507A+54B+1561C+586D+194E+886F+528G+1146H+368J-174M-547N-998，
伯方岛：Y＝577A+55B+1461C+651D+134E+750F+419G+1099H+247J-85M-347N-942，
横须贺：Y＝502A+55B+1509C+620D+169E+795F+438G+1114H+272J-101M-357N-962，
依据判别方程式进行判别分组，分析结果如下表4所示。
表4褐菖鲉群体判别分析结果
Figure GDA0004143201120000111
由上表可知，判别分析正确率在92.9-97.1％之间，综合判别正确率为95.1％。
图3为基于前两个判别函数值的散点图，结果显示日本横须贺群体和伯方岛群体多分布于横轴的负半轴，中国两群体多分布于横轴的正半轴，说明褐菖鲉的中、日群体间在形态上存在较大差异，但这种差异尚未达到亚种水平，仍属于种群间差异。
(2)聚类分析：图4为褐菖鲉群体聚类关系树，由图可知，日本的横须贺群体和伯方岛群体聚为一支，中国的惠州群体和海口群体聚为一支。
上述实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术，故在此不再详细赘述。
以上实施方式仅用于说明本发明，而并非对本发明的限制，本领域的普通技术人员，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，还可以做出各种变化和变型。因此，所有等同的技术方案也属于本发明的范畴，本发明的专利保护范围应由权利要求限定。

Claims (9)

1.基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法，包括：提供所述褐菖鲉的种群样品；提供所述褐菖鲉样品的活体保存方法；以及，对所述褐菖鲉的种群样品进行形态指标测定和分析以获取种群信息；
所述褐菖鲉样品的活体保存方法包括使鱼体接触包埋有至少一种抗氧化的活性多糖的玻璃质基质溶液，所述活性多糖选自羊栖菜多糖、螺旋藻多糖、盐藻多糖中的至少一种，所述活性多糖的平均重均分子量为60-200kDa；所述活性多糖在玻璃质基质溶液中的浓度为2-5%。
2.根据权利要求1所述的基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法，其特征在于：所述褐菖鲉的种群样品包括地理种群，所述种群还包括野生群体和人工养殖群体；所述种群样品为完全性成熟的个体。
3.根据权利要求1所述的基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法，其特征在于：所述活体保存方法为：将活体鱼置于温度为4-10℃的环境中暂养1-2h，然后使鱼体直接接触包埋抗氧化的活性多糖的玻璃质基质溶液30-60min，然后将活体鱼置于正常环境下保存及运输。
4.根据权利要求1或3所述的基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法，其特征在于：所述玻璃质基质选自糖醇、环糊精、瓜尔胶、聚烯吡酮中的至少一种；所述基质形成的溶液浓度为40-50%。
5.根据权利要求1所述的基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法，其特征在于：所述玻璃质基质溶液中还包括重量占比分别为0.15-0.5%的山梨酸、0.1-1%的没食子酸、0.05-0.1%的羟基乙叉二膦酸和0.05-0.15%的酞酸二甲酯。
6.根据权利要求1所述的基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法，其特征在于：所述对褐菖鲉的种群样品进行测定前，提供麻醉处理使鱼体舒展；所述麻醉处理步骤为：将鱼体置于含氧量不小于10mg/L、含有清洗剂的水体中，然后置于0-5℃的冰浴中处理20-60min，将鱼取出冲洗干净，即可进行后续测量。
7.根据权利要求6所述的基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法，其特征在于：所述清洗剂中包括以下原料及其重量份：竹醋液5-10份、酒精0.5-3份、羟基磷灰石粉0.5-1份。
8.根据权利要求1所述的基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法，其特征在于：所述褐菖鲉的种群样品测量的形态指标包括25个参数；所述参数中包括11个计数性状特征值和14个量度特征值。
9.根据权利要求1所述的基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法，其特征在于：所述形态指标的分析方法采用判别分析、聚类分析中的至少一种。
CN201910912416.3A 2019-09-25 2019-09-25 基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法 Active CN110659689B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910912416.3A CN110659689B (zh) 2019-09-25 2019-09-25 基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910912416.3A CN110659689B (zh) 2019-09-25 2019-09-25 基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110659689A CN110659689A (zh) 2020-01-07
CN110659689B true CN110659689B (zh) 2023-05-02

Family

ID=69039103

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910912416.3A Active CN110659689B (zh) 2019-09-25 2019-09-25 基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110659689B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113627552B (zh) * 2021-08-17 2023-10-20 中国海洋大学 一种基于影像图判识鱼类群落中关键种的计算方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20030070334A (ko) * 2002-02-25 2003-08-30 김성호 항염증과 방부성분과 제독성분을 지닌 약초를 이용한활어의 보존 및 양식수 제조방법
CN110172520A (zh) * 2019-06-25 2019-08-27 中国海洋大学 一种平鲉鱼类性别特异分子标记引物、鉴别方法及其应用

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1274229C (zh) * 2004-01-16 2006-09-13 中国农业大学 鲢鱼鱼糜低温变性保护剂
JP4875913B2 (ja) * 2006-03-29 2012-02-15 公益財団法人函館地域産業振興財団 活魚介類の保存又は輸送方法
CN101444192B (zh) * 2008-10-21 2011-02-16 浙江海洋学院 褐菖鲉工厂化苗种培育方法
CN105567476A (zh) * 2016-03-09 2016-05-11 李双秀 一种鱼类清洗液及其制备方法、应用
CN107212073A (zh) * 2017-06-15 2017-09-29 中山火炬职业技术学院 一种应用于水产品的植物源生物保鲜保活液及其制备方法
CN109380498A (zh) * 2017-08-03 2019-02-26 泰州市裕华制冷设备制造有限公司 一种水产品活体快速玻璃化保鲜专用冷冻液

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20030070334A (ko) * 2002-02-25 2003-08-30 김성호 항염증과 방부성분과 제독성분을 지닌 약초를 이용한활어의 보존 및 양식수 제조방법
CN110172520A (zh) * 2019-06-25 2019-08-27 中国海洋大学 一种平鲉鱼类性别特异分子标记引物、鉴别方法及其应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Suechika Suzuki et al .Ultrastructural organization of the transverse tubules and the sarcoplasmic reticulum in a fish sound-producing muscle.《Microscopy》.2003,第52卷(第3期),337-347. *
杜佳垠.褐菖鲉生态学特点与增养殖进展.《北京水产》.2006,(第6期),54-58. *

Also Published As

Publication number Publication date
CN110659689A (zh) 2020-01-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Fish The comparative activity of some digestive enzymes in the alimentary canal of tilapia and perch
CN101911918B (zh) 牙鲆抗病优良品系选育方法
CN110659689B (zh) 基于形态学的褐菖鲉群体鉴定方法
Zupo Influence of diet on sex differentiation of Hippolyte inermis Leach (Decapoda: Natantia) in the field
Hudson et al. Research Article Effect of Semen Diluents, Dilution Rates and Storage Periods on Live and Abnormal Spermatozoa of Pearl Guinea Fowls
Marrero et al. Comparison of three chemical tests to assess seed viability: the seed dispersal system of the Macaronesian endemic plant Rubia fruticosa (Rubiaceae) as an example
Bekele et al. Prevalence and antimicrobial susceptibility of pathogenic bacteria in Nile tilapia, Oreochromis niloticus L
Peters et al. Genotype and sex effect on gastrointestinal nutrient content, microflora and carcass traits in Nigerian native chickens
Chelyadina et al. Сomparative characteristics of indices to assess the quality of mussel production by an example of cultivated Mytilus galloprovincialis (Сrimea, the Вlack Sea)
Berber et al. Reproductive efficiency of the narrow-clawed crayfish, Astacus leptodactylus, in several populations in Turkey.
Burilo et al. Effect of semen extenders, dilution rates and storage periods on spermatozoa quality of Horasi chicken ecotype
KR100243027B1 (ko) 미꾸리 역교배체의 생산 방법
CN114231592B (zh) 一种在酸化水体中对中华绒螯蟹幼蟹存活力的判断方法
CN116391654B (zh) 一种雌雄同体扇贝规模化杂交育种方法
CN115486411B (zh) 一种抗疱疹病毒雌核生殖银鲫新品系的创制方法
CN113678760B (zh) 一种人工繁殖、选育具有抗病性状的黄颡鱼杂交育种方法
Adam et al. A Study on Some Bacterial Diseases Infected Freshwater Fish Oreochromis niloticus on Jebal Aulia Reservoir
CN110432194B (zh) 华贵栉孔扇贝与海湾扇贝的杂交制种方法
Das et al. Morphometric features, seminal profile and diluters effect on post-thaw semen quality of Munshiganj cattle in Bangladesh
RU2266015C2 (ru) Способ комплексной оценки токсичности кормовых и пищевых продуктов
Mafruchati et al. Fibroblast test cells of embryo of Super Java Chicken as an indicator to test toxicity and malignancy
Rostika et al. The Histological Description of Intestine of the Epinephelus Lanceolatus Fuscogutattus Administered with Simplicia Papaya
Horie et al. Performance of the progeny of natural tetraploid loaches in long-term communal rearing experiments under a laboratory condition
CN116076469A (zh) 一种蜜蜂样本采集与保存的方法及其在蜜蜂资源形态鉴定中的应用
CN117502336A (zh) 一种南美白对虾抗氨氮性状育种材料的筛选方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant