CN110642908B - 一种唾液酸水合晶体的制备方法及其产品和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种唾液酸水合晶体的制备方法及其产品和应用。所述制备方法为：将唾液酸原料调节至酸性环境，温度调节至20℃以下，并在搅拌下进行结晶，析出所述唾液酸水合晶体。该制备方法流程简单，易操作；避免了产物大量附着于容器内壁的弊端，适合大规模的工业化生产；获得的晶体稳定性好，不易失去结晶水；同时，能够实现结晶的均一性，含水量符合水合晶体的比例，晶体颗粒的粒径为微米级别，避免了后续对晶体进行粉碎时导致的晶体中结晶水不稳定问题；另外，在保证上述有益的效果的前提下，制备得到的水合晶体纯度依然高达98％以上。

Description

一种唾液酸水合晶体的制备方法及其产品和应用
技术领域
本发明属于生物化学工程技术领域，具体涉及一种晶体的制备方法及其产品和应用，尤其涉及一种唾液酸水合晶体的制备方法及其产品和应用。
背景技术
唾液酸(sialic acid，SA)是自然界中普遍存在的一类单糖或聚糖，主要存在于脊椎动物体内，通常以聚合物、复合物形式结合在细胞表面，对于大脑发育、免疫调节、抗菌抗病毒、抗氧化和美白、肠道菌群定植等具有重要作用。SA在人体内由肝脏合成，在细胞核内形成活化的CMP-SA形式，在高尔基体内形成糖复合物，再分泌到胞外形成寡糖、糖蛋白、黏蛋白、神经节苷脂等，结合在细胞表面，或游离，或分泌到乳汁中，发挥不同的功能和作用。燕窝、牛奶、鸡蛋等食品中含有比较丰富的SA，其中SA占燕窝干重的5-11％。某些微生物也可以产生唾液酸，例如大肠埃希氏菌K1、K92、K235等，因此可以利用发酵的方法获得SA。人体、燕窝和大肠埃希氏菌中的SA，均为SA的一个类别N-乙酰神经氨酸(N-acetylneuraminicacid，NeuAc)或其同聚物(poly Sialic acid，PSA)。
NeuAc是正常人体可合成的唯一的唾液酸，分子中具有吡喃糖结构，分子式C11H19NO9，全名是5-氨基-3,5-二脱氧-D-甘油-D-半乳壬酮糖。NeuAc分子量为309.3，分子中含有一个羧基，是一种酸性氨基糖，极易溶于水，而不易溶于乙醇等有机溶剂，在水溶液中呈现酸性，2％的水溶液pH约为1.8-2.3。NeuAc水合物含2个结晶水，分子式为C11H19NO9·2H2O，分子量为345.3，水合物是一些药物合成前体。
目前对于唾液酸的应用，主要是以唾液酸的单体(SA)为主，但是SA水合物市场需求也很大。关于SA水合物的制备，有一些现有技术的报道。例如CN109180749A公开了一种利用过饱和结晶法制备高纯度N-乙酰神经氨酸水合物的方法，是通过N-乙酰神经氨酸的过饱和水溶液低温静置结晶的方式制备获得N-乙酰神经氨酸水合物。本发明N-乙酰神经氨酸水合物经烘干检测，其纯度至少为99％，可以满足其在食品、保健、医药等领域的要求。
但目前现有技术采用的方法多为静置结晶获得水合晶体，由于产物大量附着于容器内壁，不适合大规模的工业化生产；而在搅拌状态下的结晶，虽然部分避免了附壁问题，但是过程控制不能实现结晶的均一性，并且容易失去结晶水。因此需要更好的方法来进行水合晶体的制备。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种晶体的制备方法及其产品和应用，尤其提供一种唾液酸水合晶体的制备方法及其产品和应用。
为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
一方面，本发明提供一种唾液酸水合晶体的制备方法，所述制备方法为：将唾液酸原料调节至酸性环境，温度调节至20℃以下，并在搅拌下进行结晶，析出所述唾液酸水合晶体。
本发明所涉及的制备唾液酸水合晶体的方法采用在搅拌状态下同时对酸度和温度进行调节的方式进行结晶，避免了产物大量附着于容器内壁的弊端，适合大规模的工业化生产；获得的晶体稳定性好，不易失去结晶水；同时，能够实现结晶的均一性，含水量符合水合晶体的比例，晶体颗粒的粒径为微米级别，避免了后续对晶体进行粉碎时导致的晶体中结晶水不稳定问题；另外，在保证上述有益的效果的前提下，制备得到的水合晶体纯度依然高达98％以上。
本领域技术人员公知，静态结晶的方式不可避免地会使大量结晶产物粘附在结晶罐内壁上，且结晶块大，硬度高，结晶颗粒的粒度一般在0.1cm以上，这使得需要耗费大量的时间从容器壁转移出产物，并对产物进行粉碎操作，而粉碎操作可能会严重影响晶体结晶水的稳定性。而本发明在非静态条件(搅拌状态)下进行结晶，使得产物不粘附于容器壁；为了克服在搅拌条件下结晶不均一且容易失去结晶水的问题，本发明通过将唾液酸原料调节至酸性环境，温度调节至20℃以下，实现结晶的稳定性，且析出的晶体颗粒细小，无需再进行粉碎。
优选地，所述酸性环境是指pH值为0.2-3.5，例如pH＝0.2、pH＝0.4、pH＝0.5、pH＝0.7、pH＝0.8、pH＝1.0、pH＝1.2、pH＝1.5、pH＝1.8、pH＝2.0、pH＝2.2、pH＝2.5、pH＝2.8、pH＝3.0、pH＝3.2或pH＝3.5等，其他区间内的点值便不在此一一赘述。
本发明所涉及制备环境的pH值优选控制在0.2-3.5的范围内，若pH值高于此范围，则唾液酸可能不能正常结晶；pH值小于此范围，则可能导致爆发结晶，晶体不稳定，杂质增多。
优选地，所述酸性环境的调节速率为：每1min pH的变化值不超过0.1，例如每1minpH的变化值为0.01、0.02、0.04、0.05、0.07、0.08、0.09或0.1等。
所述每1min pH的变化值不超过0.1是指每1min pH的升高值或降低值不超过0.1。此调节速率是影响本发明结晶效果的关键工艺，只有在此条件下，制备得到的晶体更加稳定，更加不易失去结晶水，晶粒更加均一，晶体的纯度也更高。
优选地，所述温度调节是指将温度调节至0-10℃，例如0℃、1℃、2℃、3℃、4℃、5℃、6℃、7℃、8℃、9℃或10℃等。
本发明所涉及制备环境的温度优选控制在0-10℃的范围内，若温度值高于此范围，则唾液酸可能不能正常结晶；温度值小于此范围，则可能导致爆发结晶，晶体不稳定，杂质增多。
优选地，所述温度调节的速率为：温度每变化1℃，时长为10-15min，例如温度每变化1℃消耗的时长为10min、11min、12min、13min、14min或15min等。
所述温度每变化1℃，时长为10-15min是指温度每升高或降低1℃，时长为10-15min。此调节速率是影响本发明结晶效果的关键工艺，只有在此条件下，制备得到的晶体更加稳定，更加不易失去结晶水，晶粒更加均一，晶体的纯度也更高。
优选地，所述搅拌的速度为1-100rpm，例如1rpm、2rpm、5rpm、10rpm、15rpm、20rpm、25rpm、30rpm、35rpm、40rpm、50rpm、60rpm、70rpm或100rpm等，优选1-30rpm。
所述搅拌速率是影响本发明结晶效果的关键工艺，若搅拌速率超过此数值范围，会使结晶体系稳定性变差，影响到晶体的生长和结构，从而影响到水合晶体的稳定性。
优选地，所述结晶的时间为12-48h，例如12h、15h、18h、20h、24h、27h、30h、32h、35h、38h、40h、42h、44h、45h、46h、47h或48h等。
优选地，所述制备方法还包括对唾液酸原料进行预处理，所述预处理操作为：将唾液酸原料配制成含唾液酸50-600g/L(例如50g/L、60g/L、80g/L、100g/L、150g/L、200g/L、250g/L、300g/L、350g/L、400g/L、500g/L或600g/L等)的水溶液并过滤。过滤是为除去不溶性杂质。
优选地，在将唾液酸原料配制成水溶液之前还可以对原料进行除菌体、除盐、水解、脱色或除蛋白等一系列预处理操作。
优选地，所述唾液酸原料包括N-乙酰神经氨酸原料。
优选地，所述N-乙酰神经氨酸原料包括通过发酵、燕窝提取、动物乳提取、化学合成或生物酶催化获得的N-乙酰神经氨酸原料。所述通过发酵获得的N-乙酰神经氨酸原料例如富含唾液酸的大肠埃希氏菌发酵液。
优选地，所述析出唾液酸水合晶体后对其进行后处理，所述后处理操作为：将唾液酸水合晶体过滤、洗涤、烘干。
优选地，所述洗涤包括使用乙醇、甲醇或异丙醇进行洗涤。
优选地，所述烘干的温度为不大于120℃，例如30℃、40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90℃、100℃、110℃或120℃等。若温度超过120℃，则唾液酸会部分分解或加速变色。
作为本发明的优选技术方案，所述制备方法包括如下步骤：
(1)将唾液酸原料配制成含唾液酸50-600g/L的水溶液并过滤；
(2)将步骤(1)得到的滤液pH值调节至0.2-3.5，每1min pH的变化值不超过0.1，温度调节至0-10℃，温度每变化1℃，时长为10-15min；并以1-100rpm的速率进行搅拌，结晶12-48h，析出唾液酸水合晶体；
(3)将步骤(2)得到的唾液酸水合晶体进行过滤、用无水乙醇洗涤、并在不大于120℃下烘干。
此处需要说明的是，本领域技术人员公知，当pH值高于5.5时或温度高于30℃，不会对结晶有太大影响，因此，为了时间和成本的考虑，步骤(1)中如果溶液pH高于5.5，则先快速调节pH至接近5.5；如果该溶液的温度高于30℃，则先快速降温至接近30℃，再进行步骤(2)。
另一方面，本发明提供一种如上所述的制备方法制备得到的唾液酸水合晶体。该唾液酸水合晶体纯度高、稳定性好、均一性好、且不粘附于容器内壁。
再一方面，本发明提供一种如上所述的唾液酸水合晶体在食品、保健品或药品中的应用。
相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
本发明所涉及的制备方法流程简单，易操作；避免了产物大量附着于容器内壁的弊端，适合大规模的工业化生产；获得的晶体稳定性好，不易失去结晶水；同时，能够实现结晶的均一性，含水量符合水合晶体的比例，晶体颗粒的粒径为微米级别，避免了后续对晶体进行粉碎时导致的晶体中结晶水不稳定问题；另外，在保证上述有益的效果的前提下，制备得到的水合晶体纯度依然高达98％以上。
附图说明
图1是实施例1制备得到的唾液酸水合晶体图；
图2是对比例1制备得到的唾液酸水合晶体图。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
下述实施例中所涉及的原料富含唾液酸的大肠埃希氏菌发酵液是通过现有技术已经公开的发酵方法得到的，例如专利201810458924.4“聚唾液酸发酵培养基、聚唾液酸的生产方法和聚唾液酸制品”中公开的方法。其中除菌体、除盐、水解、脱色、除蛋白也按照本领域技术人员公知的常规操作进行，例如专利201811364040.9“一种从含有聚唾液酸的物料中分离提纯制备N-乙酰神经氨酸的方法”中公开的操作方法。
下述实施例中所涉及的对产品中唾液酸含量的测定方法为：Q/WZG 0001 S-2019附录B，或GB/T30636-2014。
下述实施例中所涉及的对产品中水分含量的测定方法为：GB 5009.3。
实施例1
本实施例提供一种唾液酸水合晶体，其制备方法为：
(1)将富含唾液酸的大肠埃希氏菌发酵液，经除菌体、除盐、水解、脱色、除蛋白，配制成含唾液酸455g/L的水溶液并过滤；
(2)将步骤(1)得到的滤液置于夹套玻璃罐内，搅拌均匀后，降低搅拌速率至30rpm，缓慢通入冷却水循环降温，控制每15min降低1℃，至物料温度3℃；用盐酸调节pH，每降低0.1个pH单位的时间为3min，至pH＝1.8，继续在搅拌下结晶24h，析出大量细小的颗粒状悬浮晶体，如图1所示：晶体的均一性好且粒径小。
(3)将步骤(2)得到的唾液酸水合晶体进行过滤、用无水乙醇洗涤、并在60℃下真空烘干。
对烘干后的产品测定其唾液酸含量为88.1％，折算水合物含量为98.4％；测定水分含量为11.4％。
将产品经60℃持续加热240h，测定唾液酸含量为88.2％，折算水合物含量为98.5％，测定水分含量11.2％。
将产品在30℃下干燥密封保存2年，测定唾液酸含量为88.0％，折算水合物含量98.2％，测定水分含量11.5％。
以上结果证明本发明所涉及的制备方法制备得到的晶体稳定性很好，无明显失水现象；唾液酸水合物的纯度高，在98％以上。
对比例1
本对比例提供一种唾液酸水合晶体，其制备方法为：
(1)将富含唾液酸的大肠埃希氏菌发酵液，经除菌体、除盐、水解、脱色、除蛋白，配制成含唾液酸455g/L的水溶液并过滤；
(2)将步骤(1)得到的滤液置于夹套玻璃罐内，搅拌均匀后，通入冷却水循环降温，至物料温度3℃；用盐酸调节pH，至pH＝1.8，停止搅拌，静置结晶24h，在玻璃罐表面有大量的晶体附着，晶体结合紧密，如图2所示：目测颗粒大小可达0.1cm至0.5cm不等。
(3)将步骤(2)得到的唾液酸水合晶体进行过滤、用无水乙醇洗涤、并在60℃下真空烘干。
对烘干后的产品测定其唾液酸含量为88.3％，折算水合物含量为98.6％；测定水分含量为11.0％。
将产品经60℃持续加热240h，测定唾液酸含量为88.8％，折算水合物含量为99.1％，测定水分含量10.8％。
将产品在30℃下干燥密封保存2年，测定唾液酸含量为88.4％，折算水合物含量98.7％，测定水分含量11.2％。
以上结果证明对比例1所涉及的制备方法制备得到的晶体稳定性很好，纯度也很高，但晶体大量附着于容器内壁表面，且晶体结合紧密，颗粒尺寸较大，不适用于大规模工业生产。
实施例2
本实施例提供一种唾液酸水合晶体，其制备方法为：
(1)将富含唾液酸的大肠埃希氏菌发酵液，经除菌体、除盐、水解、脱色、除蛋白，配制成含唾液酸455g/L的水溶液并过滤；
(2)将步骤(1)得到的滤液置于夹套玻璃罐内，搅拌均匀后，降低搅拌速率至30rpm，通入冷却水循环降温，每15min降低5℃，至物料温度3℃；用盐酸调节pH，每降低0.1个pH单位的时间为3min，至pH＝1.8，继续在搅拌下结晶24h，析出大量细小的颗粒状悬浮晶体，晶体的均一性好且粒径小。
(3)将步骤(2)得到的唾液酸水合晶体进行过滤、用无水乙醇洗涤、并在60℃下真空烘干。
对烘干后的产品测定其唾液酸含量为87.8％，折算水合物含量为98.0％；测定水分含量为11.6％。
将产品经60℃持续加热240h，测定唾液酸含量为90.7％，折算水合物含量为101.3％，测定水分含量8.9％(存在较多的非水合晶体，所以折算后的水合物含量大于100％)。
将产品在30℃下干燥密封保存2年，测定唾液酸含量为93.5％，折算水合物含量104.4％，测定水分含量(存在较多的非水合晶体，所以折算后的水合物含量大于100％)5.5％。
以上结果证明实施例2所涉及的制备方法制备得到的晶体稳定性相对于实施例1有所变差，纯度也不及实施例1高，且晶体中存在少量非水合物唾液酸，但晶体不会附着于容器内壁表面。
实施例3
本实施例提供一种唾液酸水合晶体，其制备方法为：
(1)将富含唾液酸的大肠埃希氏菌发酵液，经除菌体、除盐、水解、脱色、除蛋白，配制成含唾液酸455g/L的水溶液并过滤；
(2)将步骤(1)得到的滤液置于夹套玻璃罐内，搅拌均匀后，降低搅拌速率至30rpm，缓慢通入冷却水循环降温，控制每15min降低1℃，至物料温度3℃；用盐酸调节pH，每降低0.1个pH单位的时间为0.5min，至pH＝1.8，继续在搅拌下结晶24h，析出大量细小的颗粒状悬浮晶体，晶体的均一性好且粒径小。
(3)将步骤(2)得到的唾液酸水合晶体进行过滤、用无水乙醇洗涤、并在60℃下真空烘干。
对烘干后的产品测定其唾液酸含量为88.0％，折算水合物含量为98.2％；测定水分含量为11.5％。
将产品经60℃持续加热240h，测定唾液酸含量为89.3％，折算水合物含量为99.7％，测定水分含量10.3％。
将产品在30℃下干燥密封保存2年，测定唾液酸含量为91.7％，折算水合物含量102.4％，测定水分含量7.6％。
以上结果证明实施例3所涉及的制备方法制备得到的晶体稳定性相对于实施例1有所变差，纯度也不及实施例1高，且晶体中存在少量非水合物唾液酸，但晶体不会附着于容器内壁表面。
实施例4
本实施例提供一种唾液酸水合晶体，其制备方法为：
(1)将富含唾液酸的大肠埃希氏菌发酵液，经除菌体、除盐、水解、脱色、除蛋白，配制成含唾液酸455g/L的水溶液并过滤；
(2)将步骤(1)得到的滤液置于夹套玻璃罐内，搅拌均匀后，降低搅拌速率至30rpm，通入冷却水循环降温，每15min降低5℃，至物料温度3℃；用盐酸调节pH，每降低0.1个pH单位的时间为0.5min，至pH＝1.8，继续在搅拌下结晶24h，析出大量细小的颗粒状悬浮晶体，晶体的均一性好且粒径小。
(3)将步骤(2)得到的唾液酸水合晶体进行过滤、用无水乙醇洗涤、并在60℃下真空烘干。
对烘干后的产品测定其唾液酸含量为95.4％，；测定水分含量为4.5％。
将产品经60℃持续加热240h，测定唾液酸含量为96.3％，测定水分含量3.3％。以上结果证明实施例4所涉及的制备方法制备得到的晶体稳定性差，纯度不高，且晶体中存在大量的非水合物唾液酸，但晶体同样不会附着于容器内壁表面。
实施例5
本实施例提供一种唾液酸水合晶体，其制备方法与实施例1的区别仅在于搅拌速率维持在100rpm，其他条件保持一致。
对烘干后的产品测定其唾液酸含量为87.9％，折算水合物含量为98.1％；测定水分含量为11.5％。
将产品经60℃持续加热240h，测定唾液酸含量为89.0％，折算水合物含量为99.4％，测定水分含量10.6％。
将产品在30℃下干燥密封保存2年，测定唾液酸含量为90.3％，折算水合物含量100.8％，测定水分含量9.2％。
以上结果证明：搅拌速率达到100rpm制备得到的晶体稳定性较好，唾液酸水合物的纯度高，在98％以上。虽无明显失水现象，但可能含有少量的非水合物；且长期保存试验，仍有少量失水，说明晶体的稳定性相对于实施例1较差。
实施例6
本实施例提供一种唾液酸水合晶体，其制备方法与实施例1的区别仅在于搅拌速率维持在150rpm，其他条件保持一致。
对烘干后的产品测定其唾液酸含量为89.6％，折算水合物含量为100.0％；测定水分含量为9.8％。
将产品经60℃持续加热240h，测定唾液酸含量为92.3％，折算水合物含量为103.0％，测定水分含量7.2％(存在较多的非水合物晶体，所以含量折算超过100％)。
以上结果证明：搅拌速率达到150rpm制备得到的晶体稳定性不好，加热试验失水较多，说明晶体的稳定性较实施例1差。
实施例7
本实施例提供一种唾液酸水合晶体，其制备方法与实施例1的区别仅在于用盐酸调节pH，每降低0.1个pH单位的时间为3min，至pH＝3.5，其他条件保持一致。
对烘干后的产品测定其唾液酸含量为89.1％，折算水合物含量为99.5％；测定水分含量为10.5％。
将产品经60℃持续加热240h，测定唾液酸含量为89.1％，折算水合物含量为99.5％，测定水分含量10.4％。
将产品在30℃下干燥密封保存2年，测定唾液酸含量为88.9％，折算水合物含量99.2％，测定水分含量10.8％。
以上结果证明：制备得到的晶体稳定性很好，无明显失水现象；唾液酸水合物的纯度高，在98％以上。但是该实施例所得到晶体的量比实施例1下降很多，结晶体系的溶液中残留较多的唾液酸。
实施例8
本实施例提供一种唾液酸水合晶体，其制备方法与实施例1的区别仅在于用盐酸调节pH，每降低0.1个pH单位的时间为3min，至pH＝4.5，其他条件保持一致。仅少量晶体析出，无实际研究价值。
实施例9
本实施例提供一种唾液酸水合晶体，其制备方法为：
(1)取1kg发酵来源的唾液酸制品(含量95％)，该制品为按照“201811364040.9一种从含有聚唾液酸的物料中分离提纯制备N-乙酰神经氨酸的方法”中的方法，因过程控制不严格产生的不合格品。用80℃热水溶解，趁热过滤，配制成含唾液酸356g/L的水溶液；
(2)将步骤(1)得到的滤液置于夹套玻璃罐内，搅拌并降温至32℃，降低搅拌速率至30rpm，缓慢通入冷却水循环降温，控制每10min降低1℃，至物料温度4℃；物料本身pH值为1.29；继续在搅拌下结晶36h，析出大量细小的颗粒状悬浮晶体，晶体的均一性好且粒径小。
(3)将步骤(2)得到的唾液酸水合晶体进行过滤、用无水乙醇洗涤、并在60℃下烘干。
对烘干后的产品测定其唾液酸含量为89.1％，折算水合物含量为99.5％；测定水分含量为10.5％。
将产品经60℃持续加热240h，测定唾液酸含量为89.3％，折算水合物含量为99.7％，测定水分含量10.1％。
以上结果证明本发明所涉及的制备方法制备得到的晶体稳定性很好，无明显失水现象；唾液酸水合物的纯度高，在98％以上。
对比例2
本对比例提供一种唾液酸水合晶体，其制备方法为：
(1)取1kg发酵来源的唾液酸制品(含量95％)，该制品为按照“201811364040.9一种从含有聚唾液酸的物料中分离提纯制备N-乙酰神经氨酸的方法”中的方法，因过程控制不严格产生的不合格品。用80℃热水溶解，趁热过滤，配制成含唾液酸356g/L的水溶液；
(2)将步骤(1)得到的滤液置于夹套玻璃罐内，搅拌并降温至32℃，通入冷却水循环降温，至物料温度4℃；停止搅拌，物料本身pH值为1.29；静置结晶36h，在玻璃罐表面有大量的晶体附着，晶体结合紧密，目测颗粒大小可达0.1cm至0.5cm不等。
(3)将步骤(2)得到的唾液酸水合晶体进行过滤、用无水乙醇洗涤、并在60℃下烘干。
对烘干后的产品测定其唾液酸含量为88.8％，折算水合物含量为99.1％；测定水分含量为10.8％。
将产品经60℃持续加热240h，测定唾液酸含量为89.2％，折算水合物含量为99.6％，测定水分含量10.3％。
以上结果证明对比例2所涉及的制备方法制备得到的晶体稳定性很好，纯度也很高，但晶体大量附着于容器内壁表面，且晶体结合紧密，颗粒尺寸较大，不适用于大规模工业生产。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的一种唾液酸水合晶体的制备方法及其产品和应用，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。

Claims (10)

1.一种唾液酸水合晶体的制备方法，其特征在于，所述制备方法为：将唾液酸原料以每1min pH的变化值不超过0.1的调节速率调节至pH值为0.2-3.5，温度以每变化1℃，时长为10-15min的调节速率调节至0-10℃，并在1-100rpm速度的搅拌下进行结晶，析出所述唾液酸水合晶体。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述搅拌的速度为1-30rpm。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述结晶的时间为12-48h。
4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括对唾液酸原料进行预处理，所述预处理操作为：将唾液酸原料配制成含唾液酸50-600g/L的水溶液并过滤。
5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述唾液酸原料为N-乙酰神经氨酸原料。
6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述N-乙酰神经氨酸原料为通过发酵、燕窝提取、动物乳提取、化学合成或生物酶催化获得的N-乙酰神经氨酸原料。
7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，析出唾液酸水合晶体后对其进行后处理，所述后处理操作为：将唾液酸水合晶体过滤、洗涤、烘干。
8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述洗涤为使用乙醇、甲醇或异丙醇进行洗涤。
9.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述烘干的温度为不大于120℃。
10.一种唾液酸水合晶体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
(1)将唾液酸原料配制成含唾液酸50-600g/L的水溶液并过滤；
(2)将步骤(1)得到的滤液pH值调节至0.2-3.5，每1min pH的变化值不超过0.1，温度调节至0-10℃，温度每变化1℃，时长为10-15min；并以1-100rpm的速率进行搅拌，结晶12-48h，析出唾液酸水合晶体；
(3)将步骤(2)得到的唾液酸水合晶体进行过滤、用无水乙醇洗涤并在不大于120℃下烘干。
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